本申請涉及一種青蒿素類化合物的新制藥用途，特別是在制備治療神經(jīng)病理性疼痛和/或其并發(fā)癥藥物中的制藥用途。

背景技術(shù)：

神經(jīng)病理性疼痛是一種由神經(jīng)系統(tǒng)的原發(fā)損害或功能障礙引發(fā)的疼痛。流行病學研究顯示，神經(jīng)病理性疼痛的人群患病率高達8％，中國約有9000萬患者急需安全有效的針對性治療。因病因復雜，神經(jīng)病理性疼痛難以在疾病早期得到重視，待就醫(yī)時，約有50％的患者已并發(fā)諸如重性抑郁、焦慮等嚴重的精神類癥狀。導致痛敏癥狀延綿反復，嚴重影響患者生活質(zhì)量，給患者及社會帶來巨大的經(jīng)濟負擔與壓力。

鑒于以上病理特點，神經(jīng)病理性疼痛急需高效鎮(zhèn)痛，長效鎮(zhèn)痛，兼顧疼痛誘發(fā)的精神癥狀，毒性低，耐藥性低的針對性藥物。雖同屬于慢性疼痛，神經(jīng)病理性疼痛與炎癥性疼痛存在本質(zhì)上的差別?，F(xiàn)有技術(shù)中治療神經(jīng)病理性疼痛的臨床一線藥物有普瑞巴林(pregabalin,pgb)、三環(huán)類抗抑郁藥、阿片類鎮(zhèn)痛藥物。然而現(xiàn)有的藥物普遍存在各種問題，藥效不能令人滿意。

普瑞巴林(pregabalin,pgb)為食品與藥品監(jiān)督管理局批準并大量應用于臨床的一線藥品。臨床研究顯示，即便高劑量使用(600mg)也僅對部分患者(約38％)有短暫的鎮(zhèn)痛效果。并且，高劑量的使用大大增加了患者頭暈、嗜睡、共濟失調(diào)、意識模糊、乏力、思維異常、視物模糊、運動失調(diào)、口干、水腫、體重增加及、注意困難等副反應癥的出現(xiàn)，并對抑郁等并發(fā)性精神類癥狀無顯著效果。三環(huán)類抗抑郁藥副反應強烈，具有嚴重的心臟毒性，導致臨床停藥率高達15-20％。阿片類鎮(zhèn)痛藥物則具有耐藥性及成癮的風險，不適合長期使用。

由此可見，穩(wěn)定有效地緩解痛敏癥狀及并發(fā)精神系統(tǒng)癥狀、降低毒副作用將是神經(jīng)病理性疼痛新藥的研發(fā)目標。

中國中醫(yī)科學研究院中藥研究所自七十年代開始，在屠呦呦研究員的帶領(lǐng)下，進行了對青蒿素類藥物的深入研究?，F(xiàn)已證明青蒿素類藥物具有毒性低、安全性高的特點，已被廣泛應用于炎癥性疾病中，包括瘧疾、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等。除了上述廣泛應用的治療或制藥用途以外，青蒿素及其類似物還用于以下與本申請相關(guān)的制藥用途。

cn1561994a(公開日2009年01月12日)公開了青蒿素類藥物在治療類風濕性關(guān)節(jié)炎中具有一定效果。然而，神經(jīng)病理性疼痛不同于一般的炎癥性疼痛。在諸如類風濕性關(guān)節(jié)炎等炎癥性疼痛中，其中樞敏化過程是依賴于外周損傷性刺激，即依賴于外周炎癥的存在及傷害感受神經(jīng)元的異常激活的，其痛覺癥狀會伴隨外周損傷或炎癥的治愈而自然消失。因此，對于炎癥性疼痛，外周炎癥的緩解在疼痛感的治療中具有顯著的療效；而神經(jīng)病理性疼痛在外周損傷或炎癥消失后，痛覺癥狀仍持續(xù)而強烈。其內(nèi)在機理為，初期外周炎癥或損傷引發(fā)脊髓背角神經(jīng)元、上行傳入神經(jīng)元及多個腦核團內(nèi)神經(jīng)元異常放電，造成外周及中樞敏化，在炎癥或外周損傷愈合后，中樞敏化過程依然持續(xù)。神經(jīng)病理性疼痛中，中樞敏化過程雖起源于外周但不依賴于外周損傷，因此在神經(jīng)病理性疼痛中，僅針對外周損傷或炎癥治療并無顯著的療效。由于病理機理不同，本領(lǐng)域技術(shù)人員難以基于青蒿素類藥物對風濕性關(guān)節(jié)炎的效果聯(lián)想到神經(jīng)病理性疼痛。

cn102884428a(公開日2013年01月16日)記載了青蒿琥酯與抑郁的相關(guān)性，然而該表述是由于其中文譯文錯誤地將artn基因的英文縮寫翻譯為青蒿琥酯而產(chǎn)生的，事實上該文件并不包含任何關(guān)于青蒿琥酯與抑郁的研究性內(nèi)容。目前，尚未有任何報道指出青蒿素類藥物對神經(jīng)病理性痛誘發(fā)抑郁具有治療效果。

cn103948585a(公開日2014年07月30日)公開了青蒿素類藥物在神經(jīng)退行性疾病中的潛在應用價值。雖然神經(jīng)退行性疾病和神經(jīng)病理性疼痛均為涉及神經(jīng)的疾病。但首先，神經(jīng)推行性疾病與神經(jīng)病理性疼痛的病理機制完全不同，因而本領(lǐng)域技術(shù)人員難以基于青蒿素類藥物對神經(jīng)退行性疾病的效果聯(lián)想到神經(jīng)病理性疼痛。其次，該文件中所有實施例均僅限于細胞水平，本領(lǐng)域技術(shù)人員無法由細胞水平的實驗效果推斷出其在整體動物中的藥效，尤其是對于神經(jīng)病理性疼痛及其并發(fā)精神癥狀，這種病理機理涉及整個神經(jīng)系統(tǒng)的病癥。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本申請要解決的技術(shù)問題為提供一種具有治療神經(jīng)病理性疼痛和/或其并發(fā)癥狀性能的化合物、其產(chǎn)品、及其在治療和制藥中的用途。

本申請技術(shù)方案的第一方面為提供一種用于治療神經(jīng)病理性疼痛和/或其并發(fā)癥狀的青蒿素類化合物。

所述青蒿素類化合物為：

a)：青蒿素，

b)：以青蒿素為結(jié)構(gòu)母核，在體內(nèi)以雙氫青蒿素為活性形式的青蒿素衍生物，

或c)：a)或b)藥學上可接受的鹽。

進一步地，所述青蒿素類化合物包括但不限于青蒿素、雙氫青蒿素、去氧青蒿素、青蒿素甲酯、青蒿素乙酯、蒿甲醚、蒿乙醚和/或青蒿琥酯。

進一步地，所述藥學上可接受的鹽包括但不限于與鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、對甲苯磺酸、碳酸、甲酸、乙酸、草酸、琥珀酸、酒石酸、扁桃酸、富馬酸、乳酸、檸檬酸、谷氨酸、天冬氨酸反應而獲得的鹽。

所述青蒿素類化合物是商業(yè)上可獲得的，并且也可使用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的常規(guī)方法進行制備。

本申請技術(shù)方案的第二方面為提供一種用于治療神經(jīng)病理性疼痛和/或其并發(fā)癥狀的含青蒿素類化合物的組合物。

進一步地，所述組合物包括藥物組合物。

進一步地，所述藥物組合物包含一種或多種可接受的載體、助劑、和/或輔料。

進一步地，所述組合物進一步包含已知的治療神經(jīng)病理性疼痛和/或其并發(fā)精神癥狀的其他活性成分。

本申請技術(shù)方案的第三方面為提供一種用于治療神經(jīng)病理性疼痛和/或其并發(fā)癥狀的青蒿素類化合物的生產(chǎn)原料。

進一步地，所述青蒿素類化合物的生產(chǎn)原料包括青蒿素類化合物的原料藥、中藥藥材、生物合成載體。優(yōu)選所述青蒿素類化合物的生產(chǎn)原料為中藥青蒿。

本申請技術(shù)方案的第四方面為前述青蒿素類化合物、含青蒿素類化合物的組合物和/或青蒿素類化合物的生產(chǎn)原料在制備治療、預防和/或緩解神經(jīng)病理性疼痛和/或其并發(fā)癥狀的藥物中的用途。

進一步地，所述藥物包括常規(guī)的多種劑型，包括但不限于口服劑、栓劑、注射劑、涂敷劑。

進一步地，所述藥物包括常規(guī)的多種劑型，包括但不限于脂質(zhì)體制劑、納米顆粒制劑、固體分散劑、自乳化劑、經(jīng)皮給藥劑、β-環(huán)糊精包合物、磷脂復合物。

進一步地，所述藥物的給藥途徑包括靜脈內(nèi)、經(jīng)皮、皮內(nèi)、皮下、肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、口腔、直腸、鼻內(nèi)或其組合。

本申請技術(shù)方案的第五方面為前述青蒿素類化合物、含青蒿素類化合物的組合物和/或青蒿素類化合物的生產(chǎn)原料的在治療、預防和/或緩解神經(jīng)病理性疼痛和/或其并發(fā)癥狀中的用途。

本申請技術(shù)方案的第六方面為一種治療、預防和/或緩解神經(jīng)病理性疼痛和/或其并發(fā)癥狀中的方法，使用了前述青蒿素類化合物、含青蒿素類化合物的組合物和/或青蒿素類化合物的生產(chǎn)原料。

本申請所述神經(jīng)病理性疼痛為由神經(jīng)系統(tǒng)原發(fā)性損害和功能障礙所激發(fā)或引起的疼痛。其屬于一種慢性疼痛，臨床表現(xiàn)包括但不限于自發(fā)性疼痛、痛覺過敏、異常疼痛、感覺異常。

本申請所述神經(jīng)病理性疼痛并發(fā)癥狀包括精神癥狀，其包括但不限于抑郁、焦慮、認知功能障礙和/或上述癥狀的組合。

有益效果

本申請相較現(xiàn)有針對神經(jīng)病理性疼痛和/或其并發(fā)癥的一些藥物具有以下效果：

1)對神經(jīng)病理性疼痛具有確定、顯著的治療效果；

2)能夠同時抑制神經(jīng)病理性疼痛和抑制其并發(fā)癥；

2)對神經(jīng)病理性疼痛中的慢性疼痛療效持久，耐藥性低；

3)毒副作用低，用藥安全；

4)成本低廉，制備簡單。

附圖說明

圖1雙氫青蒿素早期(造模后第4天)給藥的鎮(zhèn)痛療效。

圖2a雙氫青蒿素早期(造模后第4天)給藥的抗抑郁療效。

圖2b雙氫青蒿素早期(造模后第4天)給藥的抗焦慮療效。

圖3雙氫青蒿素晚期(造模后第18天)給藥的鎮(zhèn)痛療效。

圖4a雙氫青蒿素晚期(造模后第18天)給藥的抗抑郁療效(強迫游泳)。

圖4b雙氫青蒿素晚期(造模后第18天)給藥的抗抑郁療效(懸尾檢測)。

圖4c雙氫青蒿素晚期(造模后第18天)給藥的抗焦慮療效(曠場檢測)。

圖5青蒿琥酯早期(造模后第4天)給藥的鎮(zhèn)痛療效。

圖6a青蒿琥酯早期(造模后第4天)給藥的抗抑郁療效。

圖6b青蒿琥酯早期(造模后第4天)給藥的抗焦慮療效。

圖7蒿甲醚早期(造模后第4天)給藥的鎮(zhèn)痛療效。

圖8a蒿甲醚早期(造模后第4天)給藥的抗抑郁療效。

圖8b蒿甲醚早期(造模后第4天)給藥的抗焦慮療效。

具體實施方式

以下實施例通過證實雙氫青蒿素、青蒿琥酯、蒿甲醚在降低小鼠snl模型中神經(jīng)病理性疼痛的機械痛敏、抑制焦慮和/或抑郁中均具有確切而顯著的治療效果，以證明青蒿素類化合物具有治療神經(jīng)病理性疼痛和/或其并發(fā)癥狀的效果，能夠用于治療所述疾病或制備相關(guān)藥物。

其中選擇小鼠snl模型的理由在于其為公認較好的神經(jīng)病理性疼痛模型，其痛覺癥狀穩(wěn)定，個體差異小，誘發(fā)抑郁、焦慮、認知功能障礙的癥狀也較穩(wěn)定。

實驗例1：實驗準備、模型構(gòu)建及檢測方法

1、實驗動物

清潔級8周成年雄性c57/bl6小鼠，體重24-26g,由北京市維通利華實驗動物技術(shù)有限公司提供，動物合格證編號syxk-2010-0034.

2、實驗分組

小鼠在適應環(huán)境4天后，稱量體重，并進行曠場檢測、強迫游泳檢測及懸尾檢測，剔除體重低于23克，曠場試驗中心場停留時間小于15秒，強迫游泳不動時間超過160秒，或懸尾檢測不動時間在50-100秒以外的個體，而后隨機分組，即假手術(shù)組，模型snl組、及用藥組，每次平行實驗中的每組大于12只。

3、小鼠神經(jīng)病理性疼痛模型的建立方法

本申請采用脊神經(jīng)結(jié)扎的方法(thespinalcordligation,snl)制備小鼠神經(jīng)病理性疼痛模型。

具體方法如下：模型組合用藥組以戊巴比妥鈉麻醉，解剖鏡下暴露第六腰椎橫突，將橫突剪去，分離第6、5、4脊神經(jīng)，以6號眼科線對第5脊神經(jīng)進行結(jié)扎，術(shù)后縫合。假手術(shù)組在以戊巴比妥鈉麻醉后，僅暴露第六腰椎橫突，將橫突剪去，分離第6、5、4脊神經(jīng)，直接術(shù)后縫合。觀察所有小鼠術(shù)后行動狀態(tài)，剔除運動行為受損個體。由于造模成功率一般在70％左右，在造模穩(wěn)定的第4天對小鼠模型進行鑒定。對所有動物進行機械痛閾檢測，在模型組及用藥組小鼠中剔除對vonfrey探針0.16g及以上有痛敏反應的個體，在假手術(shù)組中剔除對vonfrey探針0.16g及以下有痛敏反應的個體。

4、機械痛閾檢測

以vonfrey法進行機械痛閾值檢測。有感探針壓力越高表示痛閾越高。

5、強迫游泳檢測：抑郁行為

于實驗前一天進行游泳訓練，將小鼠放入深度高于16cm，溫度為20℃的深水區(qū)中，游泳12分鐘。實驗當天，將小鼠放入深度高于16cm,溫度為20℃的有限空間中，進行6分鐘強迫游泳實驗，并記錄后4分鐘內(nèi)，小鼠停止掙扎的總時長。該時長越長表示抑郁程度越重。

6、懸尾檢測：抑郁行為

將小鼠尾部尖端2cm處以膠帶固定，懸掛于檢測箱內(nèi)?？傆嫅覓鞎r間為6分鐘，記錄后4分鐘內(nèi)，小鼠停止掙扎的總時長。該時長越長表示抑郁程度越重。

7、曠場檢測：焦慮行為

準備底面四邊長50cm,高30cm的正方形純黑色曠場檢測箱，在底面標記距箱壁20cm的邊長30cm的正方形中心區(qū)域。將小鼠頭朝箱壁的方向，放入曠場檢測箱，記錄4分鐘內(nèi)，小鼠在中心區(qū)域停留的總時長。該時長越長表示焦慮程度越輕。

8、給藥方法

造模/假手術(shù)操作當日記為d0。用藥組按照40mg/kg(青蒿素類似物/小鼠體重)的比例灌胃，藥液體積為150μl；假手術(shù)組和模型snl組的給藥時間及途徑同用藥組，以等體積的溶劑載體替代藥液。

早期給藥為第4天起灌胃給藥，記為d4(1)。灌胃給藥于每天于下午5點進行，連續(xù)給藥14天，最后一天記為d17(14)。

晚期給藥為第18天起灌胃給藥，記為d18(1)。灌胃給藥于每天于下午5點進行，連續(xù)給藥5天，最后一天記為d22(5)。

實驗例2：雙氫青蒿素對神經(jīng)病理性疼痛中機械痛敏、抑郁及焦慮的治療效果

1、藥物制備、給藥方案

造模/假手術(shù)操作當日記為d0。用藥組按照40mg/kg(青蒿素類似物或陽性藥物普瑞巴林/小鼠體重)的比例灌胃，藥液體積為150μl；雙氫青蒿素或普瑞巴林預先懸溶于150μl的食用油中制成藥液；假手術(shù)組與模型snl組使用等體積食用油代替藥液，給藥時間及途徑同用藥組。

早期給藥實驗中，第4天起灌胃給藥，記為d4(1)。灌胃給藥于每天于下午5點進行，連續(xù)給藥14天，最后一天記為d17(14)。

晚期給藥實驗中，第18天起灌胃給藥，記為d18(1)。灌胃給藥于每天于下午5點進行，連續(xù)給藥5天，最后一天記為d22(5)。

2、觀察指標

早期給藥實驗中，在造模后d4、d7、d10、d13進行機械痛閾值檢測,檢測時間點分別在灌胃給藥后的第1.5小時、3小時及24小時。在造模后d9、d17天分別進行懸尾檢測和曠場檢測。

晚期給藥實驗中，在造模后d1-d17天中的隔天和d17-d22的每天進行機械痛閾值檢測,檢測時間點分別在灌胃給藥后的第1.5小時。在造模后d22天分別進行強迫游泳檢測、懸尾檢測和曠場檢測。

3、實驗結(jié)果

3.1雙氫青蒿素能夠提高機械痛閾值，降低痛敏

雙氫青蒿素對機械痛閾值影響的檢測結(jié)果如圖1和圖3顯示：

在早期給藥實驗中：模型snl組相對于假手術(shù)組機械痛閾值顯著降低，證明神經(jīng)病理性疼痛模型造模成功。在給藥1.5小時的檢測結(jié)果中，與模型snl組相比，在造模后d4、d7、d10、d13、d17(造模后d4為首次給藥日)，雙氫青蒿素均顯示出顯著的鎮(zhèn)痛效果(^&&&p<0.001)；在給藥3小時和24小時(次日給藥前)的檢測結(jié)果中，與模型snl組相比，在造模后d10、d13、d17天均顯示出顯著的鎮(zhèn)痛效果(^***p<0.001)。

在晚期給藥實驗中：模型snl組相對于假手術(shù)組機械痛閾值顯著降低，證明神經(jīng)病理性疼痛模型造模成功。與模型snl組相比，陽性藥普瑞巴林組在給藥期間d1-d22顯示出顯著的鎮(zhèn)痛效果(^&&&p<0.001)，其中d1-d3可恢復痛閾至與假手術(shù)組相當?shù)乃剑珡膁4起逐漸下降。雙氫青蒿素用藥組自d18開始給藥，與模型snl組相比，d19-d22可顯著恢復痛閾值(^***p<0.001)，至給藥第4天d22鎮(zhèn)痛效果已超過普瑞巴林組。

3.2雙氫青蒿素能夠緩解抑郁

在早期給藥實驗中：雙氫青蒿素對抑郁行為影響的懸尾實驗檢測結(jié)果如圖2a結(jié)果顯示：在造模/假手術(shù)處理之前的d0，模型snl組/假手術(shù)組/用藥組的停止掙扎時間相似。在造模后的d9及d17(造模后d4首次給藥)，模型snl組與假手術(shù)組小鼠相比(^&&&p<0.001)，停止掙扎時間顯著增加，顯示出抑郁樣癥狀，證明神經(jīng)病理性疼痛模型并發(fā)抑郁。雙氫青蒿素用藥組小鼠與模型snl組相比(^***p<0.001)，停止掙扎時間顯著降低，已達到和假手術(shù)組相同的水平，證明雙氫青蒿素具有對神經(jīng)病理性疼痛并發(fā)的抑郁的療效。

在晚期給藥實驗中：

強迫游泳檢測:在d22(給藥第4天)，模型snl組相對于假手術(shù)組，的停止掙扎時間明顯增加(^***p<0.001)，表明模型組顯示抑郁狀態(tài)；雙氫青蒿素用藥組相對于模型snl組，停止掙扎時間明顯縮短(^***p<0.001)，證明雙氫青蒿素具有對神經(jīng)病理性疼痛并發(fā)的抑郁的療效；然而普瑞巴林組相較模型snl組并未顯示出抗抑郁效果。

懸尾檢測:在d22(給藥第4天)，模型snl組相對于假手術(shù)組，的停止掙扎時間明顯增加(^***p<0.001)，表明模型組顯示抑郁狀態(tài)；雙氫青蒿素用藥組相對于模型snl組，停止掙扎時間明顯縮短(^***p<0.001)，證明雙氫青蒿素具有對神經(jīng)病理性疼痛并發(fā)的抑郁的療效；然而普瑞巴林組相較模型snl組并未顯示出抗抑郁效果。

3.3雙氫青蒿素能夠緩解焦慮

在早期給藥實驗中：雙氫青蒿素對焦慮行為影響的曠場實驗檢測結(jié)果如圖2b顯示：在造模/假手術(shù)處理之前的d0，模型組/假手術(shù)組/用藥組的中心區(qū)域停留時間相似。在造模后的d9及d17(造模后d4首次給藥)，模型snl組與假手術(shù)組小鼠相比(^&&&p<0.001)，中心區(qū)域停留時間顯著降低，顯示出焦慮樣癥狀,證明神經(jīng)病理性疼痛模型并發(fā)焦慮；用藥組小鼠與模型snl組相比(^***p<0.001)，中心區(qū)域停留時間顯著升高，證明雙氫青蒿素具有對神經(jīng)病理性疼痛并發(fā)的焦慮的療效。

在晚期給藥實驗中：雙氫青蒿素對焦慮行為影響的曠場實驗檢測結(jié)果如圖4c顯示：在d22(給藥第4天)，模型snl組相對于假手術(shù)組，中心區(qū)域停留時間明顯縮短(^***p<0.001)，表明模型組顯示焦慮狀態(tài)；雙氫青蒿素用藥組相對于模型snl組，中心區(qū)域停留時間明顯延長(^***p<0.001)，證明雙氫青蒿素具有對神經(jīng)病理性疼痛并發(fā)的焦慮的療效；然而普瑞巴林組相較模型snl組并未顯示出抗焦慮效果。

實驗例3：青蒿琥酯對神經(jīng)病理性疼痛中機械痛敏、抑郁及焦慮的治療效果

1、藥物制備

青蒿琥酯預先懸溶于150μl的5％醫(yī)用碳酸氫鈉注射液中制成藥液；假手術(shù)組與模型snl組使用5％醫(yī)用碳酸氫鈉注射液為溶劑載體。

2、觀察指標

在造模后d4、d7、d10、d13進行機械痛閾值檢測,檢測時間點分別在灌胃給藥后的第1.5小時、3小時及24小時。

在造模后d9、d17天分別進行懸尾檢測和曠場檢測。

3、實驗結(jié)果

3.1青蒿琥酯能夠提高機械痛閾值，降低痛敏

青蒿琥酯對機械痛閾值影響的檢測結(jié)果如圖5顯示：模型snl組相對于假手術(shù)組機械痛閾值顯著降低，證明神經(jīng)病理性疼痛模型造模成功。在給藥1.5小時的檢測結(jié)果中，與模型snl組相比，在造模后d4、d7、d10、d13、d17(造模后d4為首次給藥日)，青蒿琥酯均顯示出顯著的鎮(zhèn)痛效果(^&&&p<0.001)；在給藥3小時和24小時(次日給藥前)的檢測結(jié)果中，與模型snl組相比，在造模后d10、d13、d17天均顯示出顯著的鎮(zhèn)痛效果(^***p<0.001)。

3.2青蒿琥酯能夠緩解抑郁

青蒿琥酯對抑郁行為影響的懸尾實驗檢測結(jié)果如圖6a結(jié)果顯示：在造模/假手術(shù)處理之前的d0，模型snl組/假手術(shù)組/用藥組的停止掙扎時間相似。在造模后的d9及d17(造模后d4首次給藥)，模型snl組與假手術(shù)組小鼠相比(^&&&p<0.001)，停止掙扎時間顯著增加，顯示出抑郁樣癥狀，證明神經(jīng)病理性疼痛模型并發(fā)抑郁。用藥組小鼠與模型snl組相比(^***p<0.001)，停止掙扎時間顯著降低，證明青蒿琥酯具有對神經(jīng)病理性疼痛并發(fā)的抑郁的療效。

3.3青蒿琥酯能夠緩解焦慮

青蒿琥酯對焦慮行為影響的曠場實驗檢測結(jié)果如圖6b結(jié)果顯示：在造模/假手術(shù)處理之前的d0，模型組/假手術(shù)組/用藥組的中心區(qū)域停留時間相似。在造模后的d9及d17(造模后d4首次給藥)，模型snl組與假手術(shù)組小鼠相比(^&&&p<0.001)，中心區(qū)域停留時間顯著降低，顯示出焦慮樣癥狀,證明神經(jīng)病理性疼痛模型并發(fā)焦慮；用藥組小鼠與模型snl組相比(^***p<0.001)，中心區(qū)域停留時間顯著升高，證明青蒿琥酯具有對神經(jīng)病理性疼痛并發(fā)的焦慮的療效。

實驗例4：蒿甲醚對神經(jīng)病理性疼痛中機械痛敏、抑郁及焦慮的治療效果

1、藥物制備

蒿甲醚預先懸溶于150μl的食用油中制成藥液；假手術(shù)組與模型snl組使用食用油為溶劑載體。

2、觀察指標

在造模后d4、d7、d10、d13進行機械痛閾值檢測,檢測時間點分別在灌胃給藥后的第1.5小時、3小時及24小時。

在造模后d9、d17天分別進行懸尾檢測和曠場檢測。

3、實驗結(jié)果

3.1蒿甲醚能夠提高機械痛閾值，降低痛敏

蒿甲醚對機械痛閾值影響的檢測結(jié)果如圖7顯示：模型snl組相對于假手術(shù)組機械痛閾值顯著降低，證明神經(jīng)病理性疼痛模型造模成功。在給藥1.5小時的檢測結(jié)果中，與模型snl組相比，在造模后d4、d7、d10、d13、d17(造模后d4為首次給藥日)，蒿甲醚均顯示出顯著的鎮(zhèn)痛效果(^&&&p<0.001)；在給藥3小時和24小時(次日給藥前)的檢測結(jié)果中，與模型snl組相比，在造模后d10、d13、d17天均顯示出顯著的鎮(zhèn)痛效果(^***p<0.001)。

3.2蒿甲醚能夠緩解抑郁

蒿甲醚對抑郁行為影響的懸尾實驗檢測結(jié)果如圖8a結(jié)果顯示：在造模/假手術(shù)處理之前的第0天，模型snl組/假手術(shù)組/用藥組的停止掙扎時間相似。在造模后的d9及d17(造模后d4首次給藥)，模型snl組與假手術(shù)組小鼠相比(^&&&p<0.001)，停止掙扎時間顯著增加，顯示出抑郁樣癥狀，證明神經(jīng)病理性疼痛模型并發(fā)抑郁。用藥組小鼠與模型snl組相比(^***p<0.001)，停止掙扎時間顯著降低，證明蒿甲醚具有對神經(jīng)病理性疼痛并發(fā)的抑郁的療效。

3.3蒿甲醚能夠緩解焦慮

蒿甲醚對焦慮行為影響的曠場實驗檢測結(jié)果如圖8b結(jié)果顯示：在造模/假手術(shù)處理之前的d0，模型組/假手術(shù)組/用藥組的中心區(qū)域停留時間相似。在造模后的d9及d17(造模后d4首次給藥)，模型snl組與假手術(shù)組小鼠相比(^&&&p<0.001)，中心區(qū)域停留時間顯著降低，顯示出焦慮樣樣癥狀,證明神經(jīng)病理性疼痛模型并發(fā)焦慮；用藥組小鼠與模型snl組相比(^***p<0.001)，中心區(qū)域停留時間顯著升高，證明蒿甲醚具有對神經(jīng)病理性疼痛并發(fā)的焦慮的療效。