本發(fā)明屬于中藥應用的技術(shù)領(lǐng)域，涉及石斛多糖的醫(yī)藥新應用，具體涉及鐵皮石斛多糖在治療便秘中的應用。

背景技術(shù)：

便秘是一種臨床癥狀表現(xiàn)，主要是指糞便干結(jié)、排便困難或不盡感以及排便次數(shù)減少等。約有占世界總?cè)丝诘?%到28%的人患有便秘，且女性多于男性，老年多于青壯年。作為一種影響廣泛的疾病，對于便秘的預防、治療和臨床研究耗費了巨大的時間和金錢；此外，便秘還會給患者、醫(yī)療保健機構(gòu)和健康系統(tǒng)的維持帶來巨大的經(jīng)濟負擔。此外，長期便秘會給患者帶來巨大的痛苦，明顯降低患者的生活質(zhì)量。對于便秘發(fā)病機制尚不明確，中醫(yī)認為其病機主要有四種：腸胃積熱、氣機郁滯、氣血陰津虧虛、陰寒凝滯；西醫(yī)認為便秘的發(fā)生與胃腸道運動能力的不足或障礙，以及腸道神經(jīng)及神經(jīng)遞質(zhì)的異常密切相關(guān)。

目前針對便秘治療的方式有：調(diào)整飲食，增加粗纖維的攝入、增加運動以及心理治療等，嚴重者可采用藥物治療。常用的藥物分為以下幾種：透性瀉劑（如硫酸鎂）、激性瀉劑（如中藥大黃和西藥比沙可啶）、滑性瀉劑（如液體石蠟、甘油及開塞露）及積性瀉劑（如含纖維素和歐車前的制劑）。但以上治療方案都有服用后飽脹感，腹部腫痛，或治療效果不理想等缺陷。

鐵皮石斛為蘭科植物石斛屬鐵皮石斛（Dendrobium officinaie Kimuraet Migo.）的干燥莖。具有“生津養(yǎng)胃，滋陰清熱，潤肺益腎，明目強腰”之功效。鐵皮石斛的主要有效成分為石斛多糖和生物堿，此外還含有酚類、菲類、芪類、倍半萜類及香豆素等活性成分。鐵皮石斛多糖多采用水提醇沉的方法獲得，近年來酶法提取以及超聲波輔助提取也逐漸應用于多糖的制備，并獲得較高的產(chǎn)率。通過對鐵皮石斛多糖的化學成分分析可以得出，其主要由 D-甘露糖、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖(摩爾比為3.28:31.83:1.51:1.00) 組成的雜多糖。近年來，鐵皮石斛多糖的研究多集中于其抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)活性，現(xiàn)已證明鐵皮石斛多糖對于惡性腫瘤、神經(jīng)母瘤、肉瘤及離體肝癌肉瘤都有良好的抑制效果，以及其提高身體免疫力的生物活性。

鐵皮石斛已入選為國家規(guī)定的保健性食品，其日常應用多以養(yǎng)生為主，而現(xiàn)有技術(shù)均無公開鐵皮石斛多糖在治療便秘的應用。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供石斛多糖在治療便秘的新用途。

具體地，本發(fā)明提供了鐵皮石斛多糖在制備治療便秘的藥物、保健品或功能性食品中的用途。

在上述用途中，鐵皮石斛多糖在制備治療便秘的藥物、保健品或功能性食品中的用途包括：鐵皮石斛多糖在制備治療由于疾病、藥物或飲食不節(jié)因素所致的各種急性、慢性便秘的藥物、保健品或功能性食品中的用途。

在上述用途中，鐵皮石斛多糖中的多糖含量在50%以上。

在上述用途中，鐵皮石斛多糖對人的有效治療劑量為29~114mg/kg。

在上述用途中，治療便秘的藥物、保健品的劑型選自片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑、散劑或口服液體制劑。

在上述用途中，治療便秘的藥物或保健品的使用方法為口服。

本發(fā)明以地芬諾酯和失水作為誘因，以ICR小鼠為實驗動物進行便秘模型的制備。在此模型基礎(chǔ)上，灌胃給予鐵皮石斛多糖（UDO）對便秘進行治療，胃腸道蠕動力及排便情況，探討鐵皮石斛多糖對地芬諾酯和失水誘導的便秘模型小鼠的治療作用。為了進一步研究鐵皮石斛多糖對治療便秘的作用機理，對小鼠血清中胃泌素（Gas），胃動素（MTL），P物質(zhì)（SP），乙酰膽堿酯酶（AChE），以及生長抑素（SS）胃腸道常見激素進行了測定。結(jié)果表明，鐵皮石斛多糖能有效改善地芬諾酯和失水引起的便秘，通過促進胃腸道蠕動，調(diào)節(jié)P物質(zhì)，乙酰膽堿酯酶，胃動素，胃泌素以及生長抑素等激素水平、增加糞便含水量等途徑，達到比其它石斛多糖更優(yōu)的治療便秘的效果。

本發(fā)明研究結(jié)果顯示鐵皮石斛多糖是鐵皮石斛治療便秘的主要有效成分，石斛多糖具有潤腸通便，緩解便秘的功能，且具有效劑量低、給藥次數(shù)少及易于提取制備等優(yōu)點。預示著鐵皮石斛多糖可作為一種應用于臨床治療便秘的新穎藥物、保健品或功能性食品。

以下實驗結(jié)果說明了鐵皮石斛多糖的新藥效，表明了石斛多糖對便秘具有良好的治療效果。

附圖說明

圖1 地芬諾酯致便秘小鼠的胃腸道推進率。

圖2 地芬諾酯致便秘小鼠的排便狀況（A：首顆糞便排出時間；B：排便數(shù)量；C：排便濕重；D：糞便含水量）。

圖3 地芬諾酯致便秘小鼠血清中胃泌素、胃動素、P物質(zhì)及乙酰膽堿酯酶的含量（A：胃泌素；B：胃動素；C：P物質(zhì)；D：乙酰膽堿酯酶）。

圖4 地芬諾酯致便秘小鼠血清中生長抑制素的含量。

圖5 失水致便秘小鼠的胃腸道推進率。

圖6 失水致便秘小鼠的排便狀況（A：首顆糞便排出時間；B：排便數(shù)量；C：排便濕重；D：糞便含水量）。

圖7 失水致便秘小鼠血清中胃泌素、胃動素、P物質(zhì)及乙酰膽堿酯酶的含量。

圖8 失水致便秘小鼠血清中生長抑制素的含量。

以上各圖中符號表示為，##：模型組與正常組相比，具有顯著性差異；**：給藥組與模型組相比，具有顯著性差異；△△：給藥組與陽性組相比，具有顯著性差異。

具體實施方式

下面結(jié)合實施例對本發(fā)明的技術(shù)方案作進一步的說明，但這些實施例并不限制本發(fā)明的保護范圍。

實施例1：鐵皮石斛多糖對地芬諾酯致便秘小鼠的治療作用。

具體實驗方法如下。

1. 取SPF級ICR小鼠100只，雌雄各半，體重18~22g，灌胃地芬諾酯（50 mg/kg）30 min后，隨機分成模型組，陽性藥組，石斛多糖（提取自鐵皮石斛，含量在52%以上）低、中、高劑量組；另取20只正常ICR小鼠作為正常組；總共6組，每組20只（雌雄各半），并記錄各組小鼠初始體重。

2. 藥物的前期準備：生理鹽水、溴吡斯的明、鐵皮石斛多糖均加入5%印度墨汁進行染色。

3. 造模結(jié)束后，正常組與模型組灌胃給予生理鹽水（0.1 ml/10g），陽性藥組灌胃給予溴吡斯的明（40mg/kg），多糖低、中、高劑量組分別灌胃給予鐵皮石斛多糖29、57、114 mg/kg。

4. 便秘小鼠胃腸道推進率的測定：從6個組中各取10只小鼠，雌雄各半，各組小鼠灌胃給藥后，禁食不禁水30min，立即眼球取血取上清備用；小鼠取血后脫臼處死，打開腹腔分離腸系膜，剪取上端自幽門下端至回盲部的腸管，置于托盤上，輕輕將小腸拉成直線，測量腸管長度為“小腸總長度”，從幽門至墨汁前沿為“墨汁推進長度”。墨汁推進率按照以下公式計算：墨汁推進率（胃腸推進率）＝（墨汁推進長度／小腸總長度）×100%。

5.便秘小鼠排狀況的評估:從6組中剩余10只小鼠，雌雄各半，各組小鼠灌胃給藥后，立即轉(zhuǎn)移至墊有濾紙的代謝籠中，禁食不禁水，觀察并記錄6 h內(nèi)每只小鼠的排出首粒黑便時間，排便顆粒數(shù)，糞便重量；觀察結(jié)束后，測定糞便干重(110 ℃干燥24 h后的重量)。糞便含水量按照以下公式計算: 糞便含水量＝((糞便濕重－糞便干重)／糞便濕重)×100%。

6.便秘小鼠血清中胃腸道激素的含量測定:取腸推進試驗中各組所得上清，對P物質(zhì)，乙酰膽堿酯酶，胃動素，胃泌素以及生長抑素的含量進行測定。

7.實驗數(shù)據(jù)處理：各組實驗數(shù)據(jù)均用均數(shù)±標準差(mean±SD)表示, 單因素方差分析。P<0.05表示顯示兩組差異有統(tǒng)計學意義。

實驗結(jié)果可見表1、表2、圖1－圖4，結(jié)果分析表明正常組與模型組比較地芬諾酯可以顯著抑制小鼠的胃腸道蠕動力，并延長排便時間，抑制排便（數(shù)量、重量）以及降低糞便的含水量（P< 0.05）；陽性藥溴吡斯的明和三個劑量的鐵皮石斛多糖均可以明顯改善地芬諾酯所致的便秘狀況，顯著提高便秘小鼠的胃腸道蠕動力，并縮短排便時間，增加排便，增加糞便含水量（P< 0.05）。此外，相比較于正常組，模型組中促胃腸道運動的P物質(zhì)，乙酰膽堿酯酶，胃動素，胃泌素的分泌顯著降低，抑制胃腸道運動的生長抑制素的分泌顯著增加（P< 0.05）；陽性藥溴吡斯的明和三種劑量的鐵皮石斛多糖顯著增加促胃腸道運動的P物質(zhì)，乙酰膽堿酯酶，胃動素，胃泌素的分泌，并明顯降低抑制胃腸道運動的生長抑制素的分泌（P< 0.05）。

表1 鐵皮石斛多糖對地芬諾酯致便秘小鼠的治療作用。

表2 血清中胃動素、胃泌素、P物質(zhì)、乙酰膽堿酯酶及生長抑制素的含量。

實施例2：鐵皮石斛多糖對失水致便秘小鼠的治療作用。

具體實驗方法如下。

1. 取SPF級ICR小鼠100只，雌雄各半，體重18~22g，禁水不禁食4天后，體重無差別的便秘小鼠被隨機分成模型組，陽性藥組，石斛多糖（提取自鐵皮石斛，含量在52%以上）低、中、高劑量組；另取20只正常ICR小鼠作為正常組；總共6組，每組20只（雌雄各半），并記錄各組小鼠初始體重。

2. 藥物的前期準備：生理鹽水、溴吡斯的明、鐵皮石斛多糖均加入5%印度墨汁進行染色。

3. 造模結(jié)束后，正常組與模型組灌胃給予生理鹽水（0.1 ml/10g），陽性藥組灌胃給予溴吡斯的明（40mg/kg），多糖低、中、高劑量組分別灌胃給予鐵皮石斛多糖29，57，114 mg/kg。

4.便秘小鼠胃腸道推進率的測定：從6組中各取10只小鼠，雌雄各半，各組小鼠灌胃給藥后，禁水禁食30min，立即眼球取血取上清備用；小鼠取血后脫臼處死，打開腹腔分離腸系膜，剪取上端自幽門下端至回盲部的腸管，置于托盤上，輕輕將小腸拉成直線，測量腸管長度為“小腸總長度”，從幽門至墨汁前沿為“墨汁推進長度”。墨汁推進率按照以下公式計算：墨汁推進率（胃腸推進率）＝（墨汁推進長度／小腸總長度）×100%。

5. 便秘小鼠排狀況的測定:從6組中剩余10只小鼠，雌雄各半，各組小鼠灌胃給藥后，立即轉(zhuǎn)移至墊有濾紙的代謝籠中，禁水禁食，觀察并記錄6 h內(nèi)每只小鼠的排出首粒黑便時間，排便顆粒數(shù)，糞便便重量；觀察結(jié)束后，測定糞便干重(110 ℃干燥24 h后的重量)。糞便含水量按照以下公式計算: 糞便含水量＝((糞便濕重－糞便干重)／糞便濕重)×100%。

6.便秘小鼠血清中胃腸道激素的含量測定:腸推進試驗中各組所得上清，對P物質(zhì)，乙酰膽堿酯酶，胃動素，胃泌素以及生長抑素的含量進行測定。

7.實驗數(shù)據(jù)處理：各組實驗數(shù)據(jù)均用均數(shù)±標準差(mean±SD)表示, 單因素方差分析。P< 0.05表示顯示兩組差異有統(tǒng)計學意義。

實驗結(jié)果見表3、表4，附圖5－圖8，結(jié)果分析顯示正常組與模型組比較表明地芬諾酯可以顯著抑制小鼠的胃腸道蠕動力，并延長排便時間，抑制排便（數(shù)量、重量）以及降低糞便的含水量（P< 0.05）；陽性藥溴吡斯的明和三種的鐵皮石斛多糖均可以明顯改善長期失水導致的便秘狀況，明顯提高便秘小鼠的胃腸道蠕動力，并縮短排便時間，增加排便，增加糞便含水量（P< 0.05）。此外，相比較于正常組，模型組中促胃腸道運動的P物質(zhì)，乙酰膽堿酯酶，胃動素，胃泌素的分泌顯著降低，抑制胃腸道運動的生長抑制素的分泌顯著增加（P< 0.05）；陽性藥溴吡斯的明和三種劑量的鐵皮石斛多糖顯著增加促胃腸道運動的P物質(zhì)，乙酰膽堿酯酶，胃動素，胃泌素的分泌，并明顯降低抑制胃腸道運動的生長抑制素的分泌（P< 0.05）。

表3鐵皮石斛多糖對失水致便秘小鼠的治療作用。

表4 血清中胃動素、胃泌素、P物質(zhì)、乙酰膽堿酯酶及生長抑制素的含量。

實施例3：將鐵皮石斛多糖制備成治療便秘的藥物、保健品。

取干燥的鐵皮石斛，按常規(guī)提取方法提取石斛多糖，將得到的石斛多糖加入相應的輔料制備成治療便秘的片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑、散劑或口服液體制劑。

實施例4：將鐵皮石斛多糖制備成治療便秘的功能性食品。

取干燥的鐵皮石斛，按常規(guī)提取方法提取石斛多糖，將得到的石斛多糖加入相應的食用材料制備成常規(guī)治療便秘的功能性食品如餅干、飲料等。

以上所述僅為本發(fā)明的較佳實施方式，本領(lǐng)域技術(shù)人員在本發(fā)明基礎(chǔ)上所做的任何非實質(zhì)性的均等變化與修飾，均應屬本發(fā)明所要求保護的范圍。