包裹液態(tài)氟碳的嵌段聚合物超聲微泡造影劑及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)一種包裹液態(tài)氟碳的嵌段聚合物超聲微泡造影劑及其制備方法，為包裹液態(tài)氟碳的mPEG-PLLA、PLGA-PEG–PLGA或mPEG-PCL嵌段聚合物的超聲微泡造影劑，其由下述方法制得：制取mPEG-PLLA、PLGA-PEG–PLGA或mPEG-PCL嵌段聚合物溶液，在加入液態(tài)氟碳全氟戊烷、全氟己烷或全氟丙烷后采用電動(dòng)內(nèi)切勻漿、超聲乳化或機(jī)械振蕩方法制得超聲微泡造影劑。本發(fā)明所述的包裹液態(tài)氟碳的嵌段聚合物超聲微泡造影劑在制備超聲影像診斷造影劑中的應(yīng)用。本發(fā)明所用的高分子材料安全無(wú)毒，價(jià)格明顯低于合成磷脂，微泡制備工藝簡(jiǎn)便，是一種新型的超聲微泡造影劑，具有較好的潛在的臨床應(yīng)用前景。
【專利說(shuō)明】包裹液態(tài)氟碳的嵌段聚合物超聲微泡造影劑及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種嵌段聚合物包裹可發(fā)生液氣相變的氟碳化合物的超聲微泡造影齊U，屬于超聲影像診斷領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]超聲微泡造影劑已經(jīng)廣泛應(yīng)用于臨床疾病的診斷，明顯提高了超聲診斷符合率，是超聲醫(yī)學(xué)發(fā)展史上的一個(gè)“里程碑”。目前臨床使用的超聲造影劑多為脂質(zhì)或白蛋白包裹惰性氣體，穩(wěn)定性較差，容易自發(fā)破裂。
[0003]高分子材料具有生物相容性好，可生物降解等優(yōu)點(diǎn)，采用高分子材料制備超聲微泡造影劑粒徑分布較均勻，穩(wěn)定性高，抗壓性能好，已經(jīng)成為目前超聲造影劑研究的熱點(diǎn)。但部分高分子材料，如聚乳酸羥基乙酸制備的造影劑外殼較硬，低機(jī)械指數(shù)的二次諧波成像超聲造影難以顯影，需要較高的聲學(xué)輸出才能引起微泡的非線性振動(dòng)或破裂，產(chǎn)生增強(qiáng)的對(duì)比成像，但同時(shí)背景組織回聲信號(hào)亦明顯增強(qiáng)，導(dǎo)致信噪比明顯降低，造影效果差。本發(fā)明研究表明，對(duì)高分子材料進(jìn)行聚乙二醇接枝處理形成的嵌段聚合物如單甲氧基聚乙二醇-左旋聚乳酸mPEG-PLLA明顯提高材料的柔順性，在水溶液中可形成親水段PEG朝外，疏水段PLLA朝內(nèi)的膠束結(jié)構(gòu)。
[0004]長(zhǎng)氟碳鏈的全氟碳化合物在低溫時(shí)呈液態(tài)，即液態(tài)氟碳，當(dāng)外界壓力降低或溫度升高到其沸點(diǎn)時(shí)，液態(tài)氟碳發(fā)生氣化，轉(zhuǎn)變成氣體。全氟戊烷在常壓下沸點(diǎn)為29°C，注射到人體內(nèi)呈氣態(tài)，是一種較適合制備液氣相變型超聲造影劑的氟碳材料。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的是 提供一種包裹液態(tài)氟碳的嵌段聚合物超聲微泡造影劑及其制備方法。
[0006]本發(fā)明在制備包裹液態(tài)氟碳的mPEG-PLLA嵌段聚合物超聲微泡造影劑中發(fā)現(xiàn):改變mPEG與PLLA分子量比例，或?qū)⑼鈿げ牧细臑榫垡叶?聚己內(nèi)酯mPEG-PCL、聚乙二醇-聚乳酸羥基乙酸mPEG-PLGA，或降低轉(zhuǎn)速(14500rpm)內(nèi)切勻漿進(jìn)行乳化，或?qū)⑷榛椒ǜ臑槌暼榛?，或?qū)⒁簯B(tài)氟碳改為六氟化硫制備的微泡密度降低，導(dǎo)致造影增強(qiáng)強(qiáng)度均明顯降低。mPEG-PLLA水溶液的濃度、mPEG-PLLA與全氟戊烷的比例等都會(huì)明顯影響微泡的產(chǎn)量及粒徑分布。
[0007]本發(fā)明首先采用透析法制備了 mPEG-PLLA膠束水溶液，在低溫條件下將液態(tài)全氟戊烷與mPEG-PLLA水溶液混合，采用高速內(nèi)切勻漿方法進(jìn)行乳化，成功制備了以嵌段聚合物為外殼，包裹全氟戊烷的微泡造影劑。推測(cè)可能系液態(tài)全氟戊烷與mPEG-PLLA水溶液混合后，高速勻漿下形成“水包油”的乳劑，同時(shí)高速勻漿產(chǎn)生的熱量使全氟戊烷發(fā)生氣化，進(jìn)而形成粒徑適宜的微泡造影劑，粒徑分布較均勻，穩(wěn)定性明顯優(yōu)于脂質(zhì)微泡造影劑，更適合進(jìn)行超聲靶向診斷與治療研究。
[0008]本發(fā)明采用單乳化法制備的超聲微泡造影劑體內(nèi)外在MI為0.09低機(jī)械指數(shù)的二次諧波成像造影模式下具有明顯增強(qiáng)效果，克服了部分高分子材料制備的微泡造影劑外殼硬，難以顯影的缺點(diǎn)。
[0009]本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的，所述的包裹液態(tài)氟碳的嵌段聚合物超聲微泡造影齊U，為包裹液態(tài)氟碳的mPEG-PLLA、PLGA-PEG - PLGA或mPEG-PCL嵌段聚合物的超聲微泡造影劑，其由下述方法制得:制取mPEG-PLLA、PLGA-PEG - PLGA或mPEG-PCL嵌段聚合物溶液，在加入液態(tài)氟碳全氟戊烷、全氟己烷或全氟丙烷后采用電動(dòng)內(nèi)切勻漿、超聲乳化或機(jī)械振蕩方法制得超聲微泡造影劑。
[0010]所述包裹全氟戊烷的嵌段聚合物超聲微泡造影劑，其嵌段聚合物中:mPEG分子量為1000-10000、PLLA分子量為2500-25000、PCL分子量為2500-25000，嵌段聚合物溶液濃度為0.1-10 wt% ;嵌段聚合物與全氟戊烷的比例lOmg/1-ΙΟΟμ I。
[0011]所述優(yōu)選采用的電動(dòng)內(nèi)切勻漿法制備的包裹全氟戊烷的mPEG-PLLA嵌段聚合物超聲微泡造影劑，其勻漿轉(zhuǎn)速為14500-35000rpm，勻漿時(shí)間0.5_4min。
[0012]所述優(yōu)選的包裹全氟戊烷的mPEG-PLLA嵌段聚合物超聲微泡造影劑由下述方法制得:稱·取分子量為5000/5000的mPEG-PLLA溶于四氫呋喃，裝入透析袋，用生理鹽水透析過(guò)夜，其間換透析液后形成mPEG-PLLA生理鹽水溶液；取mPEG-PLLA生理鹽水溶液，冰浴預(yù)冷，加入液態(tài)全氟戊烷，冰浴條件下電動(dòng)內(nèi)切勻漿得包裹全氟戊烷的嵌段聚合物超聲微泡造影劑。
[0013]所述優(yōu)選的包裹全氟戊烷的mPEG-PLLA嵌段聚合物超聲微泡造影劑更進(jìn)一步來(lái)說(shuō)由下述方法制得:稱取0.2g分子量為5000/5000的mPEG-PLLA溶于2ml四氫呋喃，裝入透析袋，用生理鹽水透析過(guò)夜，其間換透析液2次形成mPEG-PLLA生理鹽水溶液；取Iml lwt%mPEG-PLLA生理鹽水溶液，冰浴預(yù)冷，加入40 μ I液態(tài)全氟戊烷，冰浴條件下，35000rpm電動(dòng)內(nèi)切勻漿2min，得包裹全氟戊烷的嵌段聚合物超聲微泡造影劑；所述微泡造影劑呈乳白色混懸液，用生理鹽水將所述微泡造影劑稀釋后，倒置顯微鏡下觀察，微泡呈圓形，分散良好，表面光滑透亮，平均粒徑為3.7±0.9 μ m，采用細(xì)胞計(jì)數(shù)板測(cè)量微泡密度為2.3X108/ml，4°C放置24h微泡數(shù)量降低的幅度顯著低于脂質(zhì)超聲微泡造影劑。
[0014]本發(fā)明所述的包裹液態(tài)氟碳的嵌段聚合物超聲微泡造影劑的制備方法，包括如下步驟:制取mPEG-PLLA、PLGA-PEG - PLGA或mPEG-PCL嵌段聚合物溶液，在加入液態(tài)氟碳全氟戊烷、全氟己烷或全氟丙烷后采用電動(dòng)內(nèi)切勻漿、超聲乳化或機(jī)械振蕩方法制得超聲微泡造影劑。
[0015]在所述的mPEG-PLLA、PLGA-PEG - PLGA或mPEG-PCL嵌段聚合物中mPEG分子量為1000-10000,PLLA分子量為2500-25000、PCL分子量為2500-25000，嵌段聚合物溶液濃度為
0.1-10 wt% ;嵌段聚合物與全氟戊烷的比例lOmg/1-ΙΟΟμ I。
[0016]本發(fā)明優(yōu)選采用的電動(dòng)內(nèi)切勻漿法制備的包裹全氟戊烷的mPEG-PLLA嵌段聚合物超聲微泡造影劑，其勻漿轉(zhuǎn)速為14500-35000rpm，勻漿時(shí)間0.5_4min ;優(yōu)選方法為:稱取分子量為5000/5000的mPEG-PLLA溶于四氫呋喃中，裝入透析袋，用生理鹽水透析過(guò)夜形成mPEG-PLLA生理鹽水溶液；取上述的mPEG-PLLA生理鹽水溶液，冰浴預(yù)冷，加入液態(tài)全氟戊烷，冰浴條件下，電動(dòng)內(nèi)切勻漿后得包裹全氟戊烷的嵌段聚合物超聲微泡造影劑。
[0017]本發(fā)明所述的包裹液態(tài)氟碳的嵌段聚合物超聲微泡造影劑在制備超聲影像診斷造影劑中的應(yīng)用。[0018]所述的應(yīng)用中在靜脈注入超聲造影劑后，超聲造影劑的微泡數(shù)量為4X 107/kg，進(jìn)行超聲造影觀察回聲變化，TCA軟件分析，繪制時(shí)間-強(qiáng)度變化曲線，最后能獲得在3秒后肝動(dòng)脈系統(tǒng)開(kāi)始增強(qiáng)，緊接著肝實(shí)質(zhì)明顯增強(qiáng)，18秒時(shí)回聲強(qiáng)度達(dá)峰值6.92X IO-5AU,持續(xù)65秒后消退的結(jié)果或者在注入超聲造影劑后，進(jìn)行超聲造影觀察回聲變化，TCA軟件分析，繪制時(shí)間-強(qiáng)度變化曲線，最后能獲得在幾秒后腎臟實(shí)質(zhì)回聲開(kāi)始增強(qiáng)，到峰值，持續(xù)一段時(shí)間后消退的結(jié)果。
[0019]本發(fā)明的包裹全氟戊烷的嵌段聚合物超聲微泡造影劑具有如下優(yōu)點(diǎn):首先，采用PEG接枝的高分子材料作為微泡外殼，柔順性好，包裹的液態(tài)氟碳?xì)饣蛎浐髮⑼鈿伪?，使二次諧波成像造影模式下的低機(jī)械指數(shù)超聲能穿過(guò)微泡外殼，微泡內(nèi)部的氣體產(chǎn)生明顯背向散射，達(dá)到良好的超聲造影效果；其次，以嵌段聚合物為外殼，可通過(guò)對(duì)聚合物進(jìn)行修飾，使其攜帶蛋白質(zhì)等藥物，是一種新型的載藥微泡造影劑；再次，采用PEG接枝的聚合物為外殼，彈性好，提高機(jī)械指數(shù)進(jìn)行超聲爆破可使造影劑破裂，可達(dá)到微泡靶向破裂釋放藥物的效果；最后，本發(fā)明所用的mPEG-PLLA、PLGA-PEG - PLGA或mPEG-PCL嵌段聚合物等高分子材料安全無(wú)毒，價(jià)格明顯低于合成磷脂，微泡制備工藝簡(jiǎn)便，是一種新型的超聲微泡造影劑，具有潛在的臨床應(yīng)用前景。
【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0020]圖1為本發(fā)明超聲微泡造影劑光學(xué)顯微鏡觀察圖(X400)。
[0021]圖2為聚合物微泡造影劑與脂質(zhì)微泡造影劑穩(wěn)定性比較圖。
[0022]圖3為取0.1ml本發(fā)明的微泡造影劑，加入20ml生理鹽水稀釋，裝入水囊，采用Toshiba Aplio500彩色多普勒超聲診斷儀進(jìn)行超 聲造影,在二次諧波成像超聲造影模式下(MI=0.09)觀察，見(jiàn)水囊內(nèi)回聲明顯增強(qiáng)，呈密集細(xì)點(diǎn)狀回聲圖。
[0023]圖4為提高機(jī)械指數(shù)(MI=L 5)進(jìn)行超聲爆破，水囊內(nèi)微泡瞬間破裂，回聲降低呈無(wú)回聲圖。
[0024]圖5為本發(fā)明的超聲微泡造影劑大鼠肝臟造影及時(shí)間-強(qiáng)度曲線圖。
[0025]圖6為本發(fā)明的超聲微泡造影劑新西蘭大白兔腎臟造影及時(shí)間-強(qiáng)度曲線圖。
【具體實(shí)施方式】
[0026]下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。
[0027]實(shí)施例1
1、造影劑的制備
稱取0.2g mPEG-PLLA (分子量為5000/5000，為濟(jì)南岱罡生物工程有限公司產(chǎn)品)溶于2ml四氫呋喃，裝入透析袋，對(duì)生理鹽水透析過(guò)夜，其間換透析液2次；取Iml I wt %mPEG-PLLA生理鹽水溶液，冰浴預(yù)冷，加入40 μ I全氟戊烷，冰浴條件下，35000rpm電動(dòng)內(nèi)切勻漿2min，得包裹全氟戊烷的嵌段聚合物超聲微泡造影劑，呈乳白色混懸液體。上述的mPEG是單甲氧基聚乙二醇，PLLA是左旋聚乳酸。
[0028]2、造影劑的表征
用生理鹽水將微泡造影劑稀釋后，倒置顯微鏡下觀察，微泡呈圓形，分散良好，表面光滑透亮，大小較均勻(見(jiàn)圖1)，平均粒徑(3.7±0.9) μ m，采用細(xì)胞計(jì)數(shù)板測(cè)量微泡密度為2.3 XlOVml ο
[0029]3、穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)
將聚合物微泡造影劑與脂質(zhì)微泡造影劑放置4°C冰箱，于0、l、2、3、12、24h取樣顯微鏡下觀察，結(jié)果脂質(zhì)微泡造影劑數(shù)量降低幅度明顯高于聚合物微泡造影劑，表明聚合物微泡造影劑穩(wěn)定性明顯高于脂質(zhì)微泡造影劑(圖2)。
[0030]4、體外造影及爆破實(shí)驗(yàn)
取0.1ml步驟I制得的微泡造影劑，加入20ml生理鹽水稀釋，裝入水囊，采用Toshiba Aplio500彩色多普勒超聲診斷儀進(jìn)行超聲造影,在二次諧波成像超聲造影模式下(MI=0.09)觀察，見(jiàn)水囊內(nèi)回聲明顯增強(qiáng)，呈密集細(xì)點(diǎn)狀回聲(見(jiàn)圖3);啟動(dòng)爆破模式(MI=L 5)將微泡擊破，水囊內(nèi)回聲瞬間降低，呈無(wú)回聲(圖4)。取20ml生理鹽水裝入水囊，進(jìn)行對(duì)照，超聲造影觀察呈無(wú)回聲。
[0031]5、大鼠肝臟造影
取雌性SD大鼠，體質(zhì)量180?220g，上腹部脫毛后，乙醚吸入麻醉，采用尾靜脈團(tuán)注法，注入上述制備的超聲微泡造影劑4X 107/kg，超聲造影觀察大鼠肝臟回聲變化，TCA軟件分析，繪制時(shí)間-強(qiáng)度變化曲線。結(jié)果，3秒后大鼠肝動(dòng)脈系統(tǒng)開(kāi)始增強(qiáng)，緊接著肝實(shí)質(zhì)明顯增強(qiáng)，18秒時(shí)回聲強(qiáng)度達(dá)峰值，Power為6.92 X 10_5AU，持續(xù)約65秒后消退(圖5)。
[0032]6、新西蘭大白兔腎臟造影· 雄性新西蘭大白兔，體質(zhì)量2.0?2.2 kg，固定于實(shí)驗(yàn)臺(tái)，耳緣靜脈置入留置針，右側(cè)腰背部脫毛后，采用靜脈團(tuán)注方法，注入超聲微泡造影劑3 X 107/kg，超聲造影觀察腎臟回聲變化，TCA軟件分析，繪制時(shí)間-強(qiáng)度變化曲線。結(jié)果，4秒后腎臟實(shí)質(zhì)回聲開(kāi)始增強(qiáng)，峰值為4.6X 10_4AU，持續(xù)約75秒后消退(圖6)。
[0033]實(shí)施例2
采用與實(shí)施例1不同的超聲乳化法制備mPEG-PLLA造影劑
稱取0.2g mPEG-PLLA (分子量為5000/5000，為濟(jì)南岱罡生物工程有限公司產(chǎn)品)溶于2ml四氫呋喃，裝入透析袋，對(duì)生理鹽水透析過(guò)夜，其間換透析液2次；取Iml I wt %mPEG-PLLA生理鹽水溶液，冰浴預(yù)冷，加入40 μ I液態(tài)全氟戊烷，冰浴條件下，200W超聲乳化Imin,結(jié)果形成大量大粒徑微泡與包裹生理鹽水的微囊混合液,微泡粒徑約6?50 μ m,微囊粒徑約3?7 μ m。
[0034]實(shí)施例3
嵌段聚合物mPEG-PCL造影劑的制備
稱取0.2g mPEG-PCL (分子量為5000/5000，為濟(jì)南岱罡生物工程有限公司產(chǎn)品，PCL為聚己內(nèi)酯)溶于2ml四氫呋喃，裝入透析袋，對(duì)生理鹽水透析過(guò)夜，其間換透析液2次；取Iml I wt% mPEG-PCL生理鹽水溶液，冰浴預(yù)冷，加入40 μ I液態(tài)全氟戊烷，冰浴條件下，200W超聲乳化Imin，得聚合物微泡造影劑，微泡平均粒徑偏大(4.5± 1.2) μ m，密度較低為1.2 XlOVml ο
[0035]實(shí)施例4
聚合物PLGA-PEG-PLGA造影劑的制備
稱取0.1g PLGA-PEG-PLGA (聚乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)分子量5000dal，PEG分子量3000dal)溶于IOml生理鹽水，取0.5ml聚合物水溶液，加入20 μ I液態(tài)全氟戊烷，機(jī)械振蕩4000次/分40秒，結(jié)果形成大量大粒徑微泡與包裹生理鹽水的微囊混合液，微泡粒徑約5?50 μ m,微囊粒徑約2?8 μ m。
[0036]總結(jié)
本發(fā)明通過(guò)上述的四個(gè)實(shí)施例可以看出，I)同樣的嵌段mPEG-PLLA聚合物在不同制備方法下其形成的微泡造影劑粒徑、均勻度、穩(wěn)定性均不同，實(shí)施例1采用的“冰浴條件下，35000rpm電動(dòng)內(nèi)切勻漿”，微泡呈圓形，分散良好，表面光滑透亮，大小較均勻(見(jiàn)圖1 )，平均粒徑(3.7±0.9) μ m，效果較好；2)本發(fā)明的嵌段聚合物mPEG-PCL、聚合物PLGA-PEG-PLGA在上述的制備方法下也能制得相應(yīng)的超聲微泡造影劑，但從結(jié)果來(lái)看，本發(fā)明實(shí)施例1的嵌段mPEG-PLLA聚合物在“其生理鹽水溶液，在冰浴預(yù)冷，加入全氟戊烷，冰浴條件下，電動(dòng)內(nèi)切勻漿，得到的包裹全氟戊烷的嵌段聚合物超聲微泡造影劑”，其微泡呈圓形，分散良好，表面光滑透亮，大小較均勻(見(jiàn)圖1)，平均粒徑(3.7±0.9) μ m，效果最好；3)本發(fā)明采用液態(tài)的全氟化合物，試驗(yàn)顯示效果最好。
[0037]具體地說(shuō)，I)本發(fā)明采用的嵌段聚合物可以是兩嵌段或三嵌段聚合物，mPEG/PLLA、PLGA/PEG、mPEG/PCL 等，其中以 mPEG-PLLA 效果做好。mPEG-PLLA 分子量比例范圍可以是mPEGlOOO-lOOOO、PLLA2500-25000,其均能形成超聲微泡造影劑，但是以mPGE5000-PLLA5000的分子量配比效果最好。
[0038]2)本發(fā)明的制備方法可以采用電動(dòng)內(nèi)切勻漿、超聲乳化、機(jī)械振蕩等方法，其中以電動(dòng)內(nèi)切勻漿效果最好，微泡粒徑大小適宜，分布較均勻，勻漿轉(zhuǎn)速14500-35000rpm，其中以35000rpm效果最好,勻衆(zhòng)時(shí)間0.5_4min,其中2min效果最好。
[0039]3)本發(fā)明上述的m PEG-PLLA的濃度0.1-10 wt%，其中以lwt%效果最好(wt%指重量百分比濃度)。
[0040]4)本發(fā)明采用含氟化合物作為微泡內(nèi)的氣體，可以選用全氟戊烷、全氟丙烷、全氟己烷、六氟化硫等，但以全氟戊烷效果最好，因?yàn)槠湓诘蜏貢r(shí)呈液態(tài)，即液態(tài)氟碳，當(dāng)外界壓力降低或溫度升高到其沸點(diǎn)時(shí)，液態(tài)氟碳發(fā)生氣化，且較均勻地轉(zhuǎn)變成氣體。
[0041]5)本發(fā)明的mPEG-PLLA與全氟戊烷的比例lOmg/l-lOO μ 1，其中以40 μ I效果最好。
【權(quán)利要求】
1.一種包裹液態(tài)氟碳的嵌段聚合物超聲微泡造影劑，為包裹液態(tài)氟碳的mPEG-PLLA、PLGA-PEG - PLGA或mPEG-PCL嵌段聚合物的超聲微泡造影劑，其由下述方法制得:制取mPEG-PLLA、PLGA-PEG - PLGA或mPEG-PCL嵌段聚合物溶液，在加入液態(tài)氟碳全氟戊烷、全氟己烷或全氟丙烷后采用電動(dòng)內(nèi)切勻漿、超聲乳化或機(jī)械振蕩方法制得超聲微泡造影劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的包裹液態(tài)氟碳的嵌段聚合物超聲微泡造影劑，其特征在于所述包裹全氟戊烷的嵌段聚合物超聲微泡造影劑，其嵌段聚合物中:mPEG分子量為1000-10000,PLLA分子量為2500-25000、PCL分子量為2500-25000，嵌段聚合物溶液濃度為0.1-10 wt% ;嵌段聚合物與全氟戊烷的比例lOmg/1-ΙΟΟμ I。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的包裹液態(tài)氟碳的嵌段聚合物超聲微泡造影劑，其特征在于所述采用電動(dòng)內(nèi)切勻漿法制備的包裹全氟戊烷的mPEG-PLLA嵌段聚合物超聲微泡造影齊U，其勻漿轉(zhuǎn)速為14500-35000rpm，勻漿時(shí)間0.5_4min。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的包裹液態(tài)氟碳的嵌段聚合物超聲微泡造影劑，其特征在于所述包裹全氟戊烷的mPEG-PLLA嵌段聚合物超聲微泡造影劑由下述方法制得:稱取分子量為5000/5000的mPEG-PLLA溶于四氫呋喃，裝入透析袋，用生理鹽水透析過(guò)夜，其間換透析液后形成mPEG-PLLA生理鹽水溶液；取mPEG-PLLA生理鹽水溶液，冰浴預(yù)冷，加入液態(tài)全氟戊烷，冰浴條件下電動(dòng)內(nèi)切勻漿得包裹全氟戊烷的嵌段聚合物超聲微泡造影劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的包裹液態(tài)氟碳的嵌段聚合物超聲微泡造影劑，其特征在于所述包裹全氟戊烷的mPEG-PLLA嵌段聚合物超聲微泡造影劑由下述方法制得:稱取0.2g分子量為5000/5000的mPEG-PLLA溶于2ml四氫呋喃，裝入透析袋，用生理鹽水透析過(guò)夜，其間換透析液2次形成mPEG-PLLA生理鹽水溶液；取Iml lwt% mPEG-PLLA生理鹽水溶液，冰浴預(yù)冷，加入40 μ I液態(tài)全氟戊烷，冰浴條件下，35000rpm電動(dòng)內(nèi)切勻漿2min，得包裹全氟戊烷的嵌段聚合物超聲微泡造影劑；所述微泡造影劑呈乳白色混懸液，用生理鹽水將所述微泡造影劑稀釋后，倒置顯微鏡下觀察，微泡呈圓形，分散良好，表面光滑透亮，平均粒徑為3.7±0.9 μ m，采用細(xì)胞計(jì)數(shù) 板測(cè)量微泡密度為2.3X 108/ml，4°C放置24h微泡數(shù)量降低的幅度顯著低于脂質(zhì)超聲微泡造影劑。
6.一種包裹液態(tài)氟碳的嵌段聚合物超聲微泡造影劑的制備方法，包括如下步驟:制取mPEG-PLLA、PLGA-PEG - PLGA或mPEG-PCL嵌段聚合物溶液，在加入液態(tài)氟碳全氟戊烷、全氟己烷或全氟丙烷后采用電動(dòng)內(nèi)切勻漿、超聲乳化或機(jī)械振蕩方法制得超聲微泡造影劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的包裹液態(tài)氟碳的嵌段聚合物超聲微泡造影劑的制備方法，其特征在于mPEG-PLLA、PLGA-PEG - PLGA或mPEG-PCL嵌段聚合物中mPEG分子量為1000-10000,PLLA分子量為2500-25000、PCL分子量為2500-25000，嵌段聚合物溶液濃度為0.1-10 wt% ;嵌段聚合物與全氟戊烷的比例lOmg/1-ΙΟΟμ I。
8.根據(jù)權(quán)利要求6或7所述的包裹液態(tài)氟碳的嵌段聚合物超聲微泡造影劑的制備方法，其特征在于采用電動(dòng)內(nèi)切勻漿法制備的包裹全氟戊烷的mPEG-PLLA嵌段聚合物超聲微泡造影劑，其勻漿轉(zhuǎn)速為14500-35000rpm，勻漿時(shí)間0.5_4min ;優(yōu)選方法為:稱取分子量為5000/5000的mPEG-PLLA溶于四氫呋喃中，裝入透析袋，用生理鹽水透析過(guò)夜形成mPEG-PLLA生理鹽水溶液；取上述的mPEG-PLLA生理鹽水溶液，冰浴預(yù)冷，加入液態(tài)全氟戊烷，冰浴條件下，電動(dòng)內(nèi)切勻漿后得包裹全氟戊烷的嵌段聚合物超聲微泡造影劑。
9.權(quán)利要求1-5任一所述的包裹液態(tài)氟碳的嵌段聚合物超聲微泡造影劑在制備超聲影像診斷造影劑中的應(yīng)用。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于靜脈注入超聲造影劑，超聲造影劑的微泡數(shù)量為4X107/kg，進(jìn)行超聲造影觀察回聲變化，TCA軟件分析，繪制時(shí)間-強(qiáng)度變化曲線，最后能獲得在3秒后肝動(dòng)脈系統(tǒng)開(kāi)始增強(qiáng)，緊接著肝實(shí)質(zhì)明顯增強(qiáng)，18秒時(shí)回聲強(qiáng)度達(dá)峰值6.92X 10_5AU，持續(xù)65秒后消退的結(jié)果或者注入超聲造影劑，進(jìn)行超聲造影觀察回聲變化，TCA軟件分析，繪制時(shí)間-強(qiáng)度變化曲線，最后能獲得在幾秒后腎臟實(shí)質(zhì)回聲開(kāi)始增強(qiáng)，到峰值，持續(xù)一段時(shí) 間后消退的結(jié)果。
【文檔編號(hào)】A61K49/22GK103432601SQ201310375354
【公開(kāi)日】2013年12月11日 申請(qǐng)日期:2013年8月26日 優(yōu)先權(quán)日:2013年8月26日
【發(fā)明者】陳志奎, 林禮務(wù), 薛恩生, 何以敉, 陳琬萍, 黃丹鳳 申請(qǐng)人:福建醫(yī)科大學(xué)附屬協(xié)和醫(yī)院