專(zhuān)利名稱：一種單磷酸阿糖腺苷微球給藥系統(tǒng)及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及一種微球給藥系統(tǒng)的制備方法，具體涉及一種單磷酸阿糖腺苷微球給藥系統(tǒng)及制備方法。
背景技術(shù)：
本發(fā)明涉及一種微球給藥系統(tǒng)的制備方法，具體涉及一種阿糖腺苷及其磷酸鹽(單磷酸阿糖腺苷)殼聚糖微球給藥系統(tǒng)及制備方法。
背景技術(shù)：
阿糖腺苷具有廣譜 抗病毒活性。對(duì)皰疹病毒及帶狀皰疹病毒作用最強(qiáng)，對(duì)水痘帶狀皰疹病毒、牛痘病毒、乙肝病毒次之，對(duì)腺病毒、偽狂犬病毒和一些RNA腫瘤病毒有效。對(duì)大多數(shù)RNA病毒無(wú)效。經(jīng)細(xì)胞酶磷酸化生成三磷酸阿糖腺苷，可與三磷酸脫氧腺苷競(jìng)爭(zhēng)性抑制病毒的DNA多聚酶，并結(jié)合進(jìn)病毒的DNA鏈，三磷酸阿糖腺苷也抑制核糖核苷酸還原酶，從而抑制病毒DNA的合成。當(dāng)前阿糖腺苷主要為凍干粉針和注射液，其半衰期短，需要多次給藥給病人帶來(lái)極大痛苦，病人順從性低。因此有必要研究一種給藥次數(shù)少，能夠維持長(zhǎng)時(shí)間藥效的阿糖腺苷給藥系統(tǒng)。殼聚糖又名甲殼胺，它主要用來(lái)源于甲殼質(zhì)的脫乙酰反應(yīng)。甲殼質(zhì)是一種天然有機(jī)高分子多糖，蘊(yùn)藏量十分豐富，再加之其具有良好的生物學(xué)性質(zhì)，如可降解性、低毒、抗菌性的特點(diǎn)而應(yīng)用于醫(yī)藥領(lǐng)域，特別是載體材料。因此殼聚糖都有著廣泛的應(yīng)用空間。尤其在醫(yī)藥領(lǐng)域，殼聚糖因其成膜性、可吸收性和殺菌性，可被用于制備人造皮膚、人造血管、手術(shù)縫合線、用作止血?jiǎng)┖蛡谟蟿⒖鼓[瘤劑、免疫促進(jìn)劑和抗膽固醇劑，又可作為人工腎的吸附解毒劑，脫內(nèi)毒素超濾膜。殼聚糖作為藥用輔料，其粘性、可壓性、流動(dòng)性和崩解性均非常優(yōu)秀，也可廣泛用于緩釋劑及胃漂浮片上。殼聚糖作為藥物載體可以控制藥物釋放，延長(zhǎng)藥物療效、降低藥物毒副作用，提高疏水性藥物對(duì)細(xì)胞膜的通透性和藥物的穩(wěn)定性及改變給藥途徑，還可大大加強(qiáng)制劑的靶向給藥能力。殼聚糖作為藥物制劑的優(yōu)點(diǎn)是，良好的生物降解性能和生物相容性，無(wú)免疫原性，在體內(nèi)可被溶菌酶等酶解離成低聚殼聚糖，生成天然無(wú)毒的代謝物，且能被生物體完全吸收。因此，殼聚糖作為藥物載體材料有明顯的優(yōu)越性。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供了一種單磷酸阿糖腺苷殼聚糖微球給藥系統(tǒng)，獲得完整圓球形的微球，以實(shí)現(xiàn)緩釋給藥的目的。殼聚糖作為膜材生物相容性好，安全、無(wú)毒等特點(diǎn)有利于單磷酸阿糖腺苷殼聚糖微球給藥系統(tǒng)的臨床應(yīng)用。本發(fā)明另一目的在于提供上述單磷酸阿糖腺苷殼聚糖微球的制備方法。本發(fā)明還有一個(gè)目的在于提供上述單磷酸阿糖腺苷殼聚糖微球的臨床應(yīng)用。本發(fā)明上述目的通過(guò)以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn):
一種單磷酸阿糖腺苷殼聚糖微球，以殼聚糖為膜材、聚乙二醇為致孔劑、戊二醛為交聯(lián)劑，采用反相乳化-交聯(lián)法制備載藥微球。具體步驟包括:(I)取殼聚糖溶于醋酸水溶液中，靜置，去除氣泡；(2)將聚乙二醇和單磷酸阿糖腺苷加入到上述溶液中，混合均勻作為水相；(3)將水相緩慢滴入含有3% -10% (v/v)表面活性劑和質(zhì)量濃度0.1% _1%分散劑的油相，快速攪拌，乳化完全，形成W/0體系；(4)向W/0體系中，緩慢滴入交聯(lián)劑，快速攪拌，交聯(lián)固化形成珠狀顆粒；

(5)收集沉淀，抽濾，有機(jī)溶劑脫水洗滌，干燥。步驟(5)所述的有機(jī)溶劑為異丙醇、乙醇、石油醚一種或幾種，以洗去表面油相為宜，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，有機(jī)溶劑優(yōu)選異丙醇和石油醚的任意比混合物。所述油相為液體石蠟、環(huán)己烷、正庚烷、真空泵油、植物油或其與石油醚的混合物；表面活性劑為磷脂、ΟΡ-1o、司盤(pán)80或司盤(pán)80與吐溫80混合物；分散劑為硬脂酸鎂。本發(fā)明制備的單磷酸阿糖腺苷殼聚糖微球的包封率范圍為10% -80%，獲得微球粒徑為1-50微米，微球之間無(wú)明顯粘連現(xiàn)象，分散性良好。本發(fā)明使用反相乳化-交聯(lián)法制備單磷酸阿糖腺苷殼聚糖微球，其特點(diǎn)是在乳化中所形成的W/0乳滴，可以保證形成完整球形并且均勻分散的微球，化學(xué)交聯(lián)法相對(duì)于離子聚合法形成的微球更為穩(wěn)定，更能獲得具有良好緩釋效果的微球。本發(fā)明殼聚糖醋酸水溶液中加入聚乙二醇(致孔劑)作為水相，本法制備的微球在維持牢固的球狀結(jié)構(gòu)同時(shí)又能在微球上形成足夠的親水通道，保證藥物穩(wěn)定釋放。本發(fā)明在油相中加入分散劑，在于可以獲得均勻分散的乳滴，在交聯(lián)后形成均勻分散的珠狀顆粒，從而獲得均勻分散的微球。


圖1:單磷酸阿糖腺苷殼聚糖微球電鏡圖。圖2:單磷酸阿糖腺苷殼聚糖微球在0.lmol/L HCl和pH = 7.4磷酸鹽緩沖液的累積釋放曲線。圖3:單磷酸阿糖腺苷殼聚糖微球在pH = 7.4磷酸鹽緩沖液中的Higuchi釋放模型的擬合曲線。擬合方程為QVo= 7.35+10.79t0.5，R2 = 0.9569。
具體實(shí)施例方式以下結(jié)合實(shí)施例來(lái)進(jìn)一步解釋本發(fā)明，但實(shí)施例并不對(duì)本發(fā)明做任何形式的限定。實(shí)施例1稱取0.4g殼聚糖(脫乙酰度96% )溶于20mL2%的醋酸水溶液中，靜置，去除氣泡。量取0.1g聚乙二醇400和0.1g單磷酸阿糖腺苷加入到上述溶液中組成水相。取IOOmL液體石蠟，加入5mL吐溫80和0.5g的硬脂酸鎂作為油相。將水相緩慢倒入油相，IOOOrpm機(jī)械攪拌，乳化完全后加入2mL戊二醛，繼續(xù)攪拌交聯(lián)固化4h，收集沉淀，異丙醇和石油醚洗滌后，干燥。
在電鏡下可見(jiàn)微球呈圓整球形，結(jié)果見(jiàn)圖1。用0.25mol/L的鹽酸破壞微球，HPLC法測(cè)得微球中單磷酸阿糖腺苷含量，根據(jù)下式計(jì)算包封率:包封率=微球中藥物的含量/制備中加入藥物量由上式計(jì)算得實(shí)施例1的單磷酸阿糖腺苷殼聚糖微球的包封率為61 %。按2010版《中國(guó)藥典》第二部溶出度測(cè)定方法測(cè)定單磷酸阿糖腺苷殼聚糖微球的釋放曲線。具體操作如下:取適量上述微球，37°C條件下，釋放介質(zhì)IOOOmL中，分別在0.lmol/L HCl、pH7.4的磷酸鹽緩沖液中，定時(shí)取IOmL釋放介質(zhì)并檢測(cè)單磷酸阿糖腺苷濃度，同時(shí)補(bǔ)加釋放介質(zhì)，繪制時(shí)間-累積釋放度曲線，結(jié)果見(jiàn)圖2、圖3。實(shí)施例2稱取0.6g殼聚糖(脫乙酰度96%)溶于20mL2%的醋酸水溶液中，靜置，去除氣泡。量取0.2g聚乙二醇400和0.06g單磷酸阿糖腺苷加入到上述溶液中組成水相。取60mL液體石蠟，加入2mL吐溫80和0.2g的硬脂酸鎂作為油相。將水相緩慢倒入油相，1200rpm機(jī)械攪拌，乳化完全后加入ImL戊二醛，繼續(xù)攪拌交聯(lián)固化6h，收集沉淀，異丙醇和石油醚洗滌后，干燥。經(jīng)計(jì)算微球包封率為76 %。`實(shí)施例3稱取0.1g殼聚糖(脫乙酰度96% )溶于20mL2%的醋酸水溶液中，靜置，去除氣泡。量取0.02g聚乙二醇4000和0.1g單磷酸阿糖腺苷加入到上述溶液中組成水相。取40mL液體石蠟，加入ImL吐溫80和0.1g的硬脂酸鎂作為油相。將水相緩慢倒入油相，1200rpm機(jī)械攪拌，乳化完全后加入0.2mL戊二醛，繼續(xù)攪拌交聯(lián)固化2h，收集沉淀，異丙醇和石油醚洗滌后，干燥。 經(jīng)計(jì)算微球包封率為37 %。實(shí)施例4稱取0.5g殼聚糖(脫乙酰度96% )溶于20mL2%的醋酸水溶液中，靜置，去除氣泡。量取0.1g聚乙二醇600和0.1g單磷酸阿糖腺苷加入到上述溶液中組成水相。取150mL液體石蠟，加入5mL吐溫80和0.5g的硬脂酸鎂作為油相。將水相緩慢倒入油相，800rpm機(jī)械攪拌，乳化完全后加入2mL戊二醛，繼續(xù)攪拌交聯(lián)固化8h，收集沉淀，異丙醇和石油醚洗滌后，干燥。經(jīng)計(jì)算微球包封率為67 %。實(shí)施例5稱取0.4g殼聚糖(脫乙酰度96%)溶于20mL2%的醋酸水溶液中，靜置，去除氣泡。量取0.08g聚乙二醇6000和0.08g單磷酸阿糖腺苷加入到上述溶液中組成水相。取80mL液體石蠟，加入2mL吐溫80和0.2g的硬脂酸鎂作為油相。將水相緩慢倒入油相，IOOOrpm機(jī)械攪拌,乳化完全后加入0.5mL戍二醒,繼續(xù)攪拌交聯(lián)固化IOh,收集沉淀,異丙醇和石油醚洗滌后，干燥。經(jīng)計(jì)算微球包封率為71 %。
權(quán)利要求
1.一種單磷酸阿糖腺苷的殼聚糖微球，其特征在于:以殼聚糖為膜材對(duì)藥物進(jìn)行包埋，獲得單磷酸阿糖腺苷的殼聚糖微球。
2.按照權(quán)利要求1所述的單磷酸阿糖腺苷的殼聚糖微球，其特征在于藥物包封率范圍為10% -80%，獲得微球粒徑為1-50微米，微球呈完整圓球形。
3.制備如權(quán)利要求1所述的單磷酸阿糖腺苷的殼聚糖微球的方法，其特征在于: 包括如下步驟: (1)取殼聚糖溶于醋酸水溶液中，靜置，去除氣泡； (2)將聚乙二醇和單磷酸阿糖腺苷加入到上述溶液中，混合均勻作為水相； (3)將水相緩慢滴入含有3%-10% v/v表面活性劑和質(zhì)量濃度0.1% -1 %分散劑的油相，快速攪拌，乳化完全，形成W/O體系； (4)向W/0體系中，緩慢滴入交聯(lián)劑，快速攪拌，交聯(lián)固化形成珠狀顆粒； (5)收集沉淀，抽濾，有機(jī)溶劑脫水洗滌，干燥。
4.按照權(quán)利要求3所述的單磷酸阿糖腺苷的殼聚糖微球的制備方法，其特征在于所述殼聚糖脫乙酰度是66-98%，優(yōu)選脫乙酰度為98% ;殼聚糖醋酸水溶液質(zhì)量濃度范圍為0.1%-2% ;單磷酸阿糖腺苷和殼聚糖的重量比為1: 1-20。
5.按照權(quán)利要求3所述的制備單磷酸阿糖腺苷的殼聚糖微球的方法，其特征在于所述聚乙二醇(PEG)作為致孔劑加入在膜材溶液中，質(zhì)量濃度范圍為0.選自PEG-400、PEG-600、PEG-800、PEG4000、PEG6000 一種或幾種任意比例混合物。
6.按照權(quán)利要求3所述的制備單磷酸阿糖腺苷的殼聚糖微球的方法，其特征在于所述水相與油相體積比為1: 1-40，攪拌至乳化完全，轉(zhuǎn)速為800-1600rpm。
7.按照權(quán)利要求3所述的制備單磷酸阿糖腺苷的殼聚糖微球的方法，其特征在于所述油相為液體石蠟、環(huán)己烷、正庚烷、真空泵油或其與石油醚的混合物；表面活性劑為磷脂、0P-10、司盤(pán)80或司盤(pán)80與吐溫80混合物；分散劑為硬脂酸鎂。
8.按照權(quán)利要求3所述的制備單磷酸阿糖腺苷的殼聚糖微球的方法，其特征在于所述交聯(lián)劑為戊二醛水溶液，用量范圍為0.5% -5% v/v，交聯(lián)固化的時(shí)間為0.5-12h。
9.按照權(quán)利要求3所述的制備單磷酸阿糖腺苷的殼聚糖微球的方法，其特征在于所述的步驟(5)中的有機(jī)溶劑為異丙醇、乙醇、石油醚一種或幾種。
10.按照權(quán)利要求1或2所述單磷酸阿糖腺苷的殼聚糖微球，其特征在于載藥殼聚糖微球作為給藥系統(tǒng)應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種阿糖腺苷的殼聚糖微球給藥系統(tǒng)及制備方法。其特征在于獲得一種完整球狀、粒徑均勻、包埋率高及分散性良好的具有緩釋性能的藥物微球給藥系統(tǒng)。具體技術(shù)方案為以殼聚糖為膜材、聚乙二醇為致孔劑、戊二醛為交聯(lián)劑，采用反相乳化-交聯(lián)法制備載藥微球。制備方法為將藥物溶解于的殼聚糖酸性水溶液中，加入聚乙二醇攪拌均勻作為水相；將上述水相緩慢加入到含有表面活性劑和分散劑的油相中，攪拌乳化至均勻，加入交聯(lián)劑進(jìn)行交聯(lián)固化；將所得產(chǎn)物洗滌、干燥。本發(fā)明提供了具有緩釋性能的阿糖腺苷殼聚糖微球的給藥系統(tǒng)。
文檔編號(hào)A61P31/20GK103142491SQ20131004830
公開(kāi)日2013年6月12日 申請(qǐng)日期2013年2月6日 優(yōu)先權(quán)日2013年2月6日
發(fā)明者王學(xué)文, 李玲梅, 張志生, 孫曄, 杜麗麗, 陳超, 黃杰明 申請(qǐng)人:廣東先強(qiáng)藥業(yè)股份有限公司