專利名稱：一種降倍半萜類化合物及其制備方法與應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種降倍半萜類化合物及其制備方法與應(yīng)用。
背景技術(shù)：
調(diào)研文獻(xiàn)，發(fā)現(xiàn)目前從金針菇發(fā)酵液中分離得到的化合物，僅見于5個(gè)側(cè)柏烯型倍半職，該類化合物顯示了較好的抗菌活性，如抗真菌及抗細(xì)菌等(Ishikawa,N.K., Yamaji, K., Tahara, S., Fukushi, Y., & Takahashi, K.(2000).Highly oxidizedcuparene-typesesquiterpenes from a mycelia culture of Flammulina velutipes.Phytochemistry，54，777-782.)。據(jù)報(bào)道，該家族的Enokipodin D對(duì)枯草芽孢桿菌具有較好的抗菌活性(Ishikawa,N.K.，F(xiàn)ukushi，Y.，Yamaji，K.,Tahara,S.，& Takahashi Κ.(2001).Antimicrobial cuparene-type sesquiterpenes，enokipodins C and D,from a mycelialcultureof Flammulina velutipes.Journal ofNatural Products，64，932-934.)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種降倍半萜類化合物及其制備方法。本發(fā)明所提供的降倍半職類化合物是從食用菌金針燕Flammulina velutipes的
大米發(fā)酵物中提取得到的，其結(jié)構(gòu)式如式I所示:
權(quán)利要求
1.結(jié)構(gòu)式如式I所示化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑合物:
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑合物，其特征在于:所述下述化合物1-化合物6中的任意一種: 化合物1:式I中，Cl與C2之間、C2與C7之間以及C5與C6之間均形成碳碳單鍵，R1為雙鍵氧，R2為羥基，R3為羥基，R4為氫，R5為氫； 化合物2:式I中，Cl與C2之間、C2與C7之間以及C5與C6之間均形成碳碳單鍵，R1為雙鍵氧，R2為羥基，R3為雙鍵氧，R4為氫，R5為氫； 化合物3:式I中，Cl與C2之間、C2與C7之間以及C5與C6之間均形成碳碳單鍵，R1為雙鍵氧，R2為氫，R3為羥基，R4為氫，R5為氫； 化合物4:式I中，Cl與C2之間形成碳碳雙鍵、C2與C7之間以及C5與C6之間均形成碳碳單鍵，R1為雙鍵氧，R2不存在，R3為氫，R4為羥基，R5為氫； 化合物5:式I中，Cl與C2之間形成碳碳雙鍵、C2與C7之間以及C5與C6之間均形成碳碳單鍵，R1為氫，R2不存在，R3為氫，R4為羥基，R5雙鍵氧； 化合物6:式I中，Cl與C2之間以及C2與C7之間形成均形成碳碳單鍵、C5與C6之間形成碳碳雙鍵，R1雙鍵氧，R2不存在，R3為羥基，R4不存在，R5為氫。
3.制備權(quán)利要求2中所述化合物的方法，包括下述步驟: 1)將金針燕(Flammulinavelutipes)進(jìn)行固體發(fā)酵培養(yǎng),收集發(fā)酵培養(yǎng)物； 2)向所述發(fā)酵培養(yǎng)中加入有機(jī)溶劑進(jìn)行提取，將提取液濃縮干燥得到粗提物； 3)將所述粗提物經(jīng)硅膠柱層析分離，以氯仿-丙酮為洗脫劑進(jìn)行梯度洗脫，分別收集100%氯仿梯度的洗脫物和氯仿-丙酮體積比為30: I梯度的洗脫物；將收集的100%氯仿梯度的洗脫物經(jīng)反相硅膠柱層析，以甲醇-水為洗脫劑進(jìn)行梯度洗脫，分別收集甲醇-水體積比為60: 40梯度的洗脫產(chǎn)物以及甲醇-水體積比為70: 30梯度的洗脫產(chǎn)物；將甲醇-水體積比為60: 40梯度的洗脫產(chǎn)物經(jīng)制備HPLC分離純化，以甲醇-水為流動(dòng)相進(jìn)行洗脫，得到化合物3、5、6 ;將甲醇-水體積比為70: 30梯度的洗脫產(chǎn)物經(jīng)制備HPLC分離純化，以甲醇-水為流動(dòng)相進(jìn)行洗脫，得到化合物2、4;將氯仿-丙酮體積比為30: I梯度的洗脫物經(jīng)反相硅膠柱層析，以甲醇-水為洗脫劑進(jìn)行梯度洗脫，收集甲醇-水體積比為40: 60梯度的洗脫產(chǎn)物，將所述洗脫產(chǎn)物經(jīng)制備HPLC分離純化，以甲醇-水的混合溶劑進(jìn)行洗脫，得到化合物I。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于:步驟I)所述固體發(fā)酵中所用的培養(yǎng)基為稻米培養(yǎng)基；所述固體發(fā)酵培養(yǎng)的條件為:避光在22-28°C培養(yǎng)40天35-45天； 所述金針燕(Flammulina velutipes),其保藏編號(hào):CGMCC5.786。
5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的方法，其特征在于:步驟2)中所述有機(jī)溶劑為乙酸乙酯，所述提取至少進(jìn)行3次；每次提取的時(shí)間為4-10天。
6.權(quán)利要求1或2所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑合物在制備真核生物腫瘤細(xì)胞增殖抑制劑中的應(yīng)用或在制備預(yù)防和/或治療腫瘤藥物中的應(yīng)用。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于:所述真核生物為哺乳動(dòng)物；所述腫瘤細(xì)胞為癌細(xì)胞，所述癌細(xì)胞具體為宮頸癌細(xì)胞、口腔癌細(xì)胞、肝癌細(xì)胞、前列腺癌細(xì)胞、肺癌細(xì)胞、結(jié)直腸癌細(xì)胞、胃癌細(xì)胞或乳腺癌細(xì)胞。
8.權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于:所述腫瘤為癌；所述癌具體為宮頸癌、口腔癌、肝癌、前列腺癌、肺癌、結(jié)直腸癌、胃癌或乳腺癌。
9.一種藥物，它的有效成分為權(quán)利要求1或2中所述化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑合物；所述藥物為抑制真核生物腫瘤細(xì)胞增殖的藥物或預(yù)防和/或治療腫瘤的藥物。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的藥物，其特征在于:所述真核生物為哺乳動(dòng)物；所述腫瘤細(xì)胞為癌細(xì)胞；所述癌細(xì)胞具體為宮頸癌細(xì)胞、口腔癌細(xì)胞、肝癌細(xì)胞、前列腺癌細(xì)胞、肺癌細(xì)胞、結(jié)直腸癌細(xì)胞、胃癌細(xì)胞或乳腺癌細(xì)胞 所述腫瘤為癌；所述癌具體為宮頸癌、 口腔癌、肝癌、前列腺癌、肺癌、直腸癌、胃癌或乳腺癌。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種降倍半萜類化合物及其制備方法與應(yīng)用。發(fā)明所提供的化合物是從食用菌金針菇Flammulina velutipes的大米發(fā)酵物中提取得到的，其結(jié)構(gòu)式如式I所示，其中，R1和R5均選自雙鍵氧、羥基或氫；C1與C2之間或C2與C7之間為碳碳單鍵或雙鍵，且不同時(shí)為碳碳雙鍵；當(dāng)C1與C2之間以及C2與C7之間同時(shí)為碳碳單鍵時(shí)，R2為氫或羥基；當(dāng)C1與C2之間或C2與C7之間為碳碳雙鍵時(shí)，R2不存在；當(dāng)C1與C2之間形成碳碳單鍵時(shí)，R3為雙鍵氧、羥基或氫；當(dāng)C1與C2之間形成碳碳雙鍵時(shí)，R3為羥基或氫；C5與C6之間形成碳碳單鍵或碳碳雙鍵，當(dāng)C5與C6之間形成碳碳單鍵時(shí)，R4為氫或羥基，當(dāng)C5與C6之間形成碳碳雙鍵時(shí)，R4不存在。經(jīng)實(shí)驗(yàn)證實(shí)，該類化合物可作為細(xì)胞增殖抑制劑或抗腫瘤劑。(式I)
文檔編號(hào)A61K31/343GK103183655SQ201110443960
公開日2013年7月3日 申請(qǐng)日期2011年12月27日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月27日
發(fā)明者劉宏偉, 寶麗, 王雅琪 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院微生物研究所