專利名稱：一種人參皂苷的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種人參皂苷的應(yīng)用，具體地說，是一種人參皂苷在制備治療糖皮質(zhì)激素性骨質(zhì)疏松癥藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
人參皂苷(ginsenoside，GS)是一種固醇類化合物，人參皂苷主要存在于人參屬藥材中。人參皂苷是人參的主要有效成分之一，它是人參根的主要生理活性物質(zhì)。人參皂苷是由三十個(gè)碳原子組成的三萜達(dá)瑪烷環(huán)類衍生物，具有類似糖皮質(zhì)激素留環(huán)樣的結(jié)構(gòu)。人參皂苷被視為是人參中的活性成分，因而成為研究的目標(biāo)。因?yàn)槿藚⒃碥沼绊懥硕嘀氐拇x通路，所以其效能也是復(fù)雜的，而且各種人參皂苷的效能是難以分離出來的。目前人參皂苷的制備方法是
(1)取人參根、根莖或者人參葉，加入溶劑，將溶液調(diào)至堿性后再進(jìn)行提取，得提取液； (2)提取液上大孔型堿性陰離子交換柱，先用堿水和純水沖洗，沖洗液棄去，再用含水乙醇洗脫，洗脫液濃縮，即得人參總皂苷。
人參皂苷是人參的主要有效成分，現(xiàn)已明確結(jié)果的GS單體約有40余種；其中研究最多且與腫瘤細(xì)胞凋亡最為相關(guān)的為RH2單體。眾多研究表明，它具有較高的抗腫瘤活性，對(duì)正常細(xì)胞無毒副作用，與其他化療藥物(如順鉬)聯(lián)合應(yīng)用有協(xié)同作用。糖皮質(zhì)激素性骨質(zhì)疏松是指長期的糖皮質(zhì)激素治療導(dǎo)致骨量丟失，增加了骨折的發(fā)生率，是繼發(fā)性骨質(zhì)疏松癥的最常見原因。骨量丟失程度隨著糖皮質(zhì)激素治療劑量和時(shí)間的變化而變化。在最初運(yùn)用糖皮質(zhì)激素治療的6個(gè)月里，骨量丟失最嚴(yán)重(5%-15%)，接著以每年2%的速率丟失，骨小梁比皮質(zhì)骨更受影響。最明顯的丟失通常發(fā)生在每日7.5mg 或者更高的劑量，并且治療時(shí)間至少3個(gè)月以上。骨折的發(fā)生率與激素劑量呈依賴性關(guān)系。 在停止激素治療后，脊柱骨折的發(fā)生率從第1年的2. 4%下降至第2年的1.8%，隨后與對(duì)照組的發(fā)生率相同。近期的研究數(shù)據(jù)表明，糖皮質(zhì)激素治療不僅導(dǎo)致骨量丟失，而且改變骨的質(zhì)量，其作用大于雌激素缺失的結(jié)果。Carbonare等發(fā)現(xiàn)，絕經(jīng)后婦女和男性病人使用糖皮質(zhì)激素后骨超微結(jié)構(gòu)發(fā)生定性改變，即骨小梁穿孔的增加與骨小梁連接性的丟失相關(guān)聯(lián)。 這些研究表明，糖皮質(zhì)激素可能會(huì)增加骨吸收。糖皮質(zhì)激素作用于骨組織的機(jī)制很復(fù)雜，至今尚不清楚。生物和組織學(xué)的證據(jù)，特別是骨超微結(jié)構(gòu)的研究觀察到小梁骨穿孔的增多，表明骨形成的大幅度減少，似乎是糖皮質(zhì)激素引起的骨質(zhì)疏松癥的潛在機(jī)制。中國專利文獻(xiàn)CN 101352482A，
公開日2009年1月28日，發(fā)明名稱為丹參人參制劑在防治老年性骨質(zhì)疏松癥的應(yīng)用，該發(fā)明公開了一種丹參人參制備的藥物制劑在防治老年性骨質(zhì)疏松癥的應(yīng)用，丹參人參制劑通過粉碎，浸泡，過濾，濾渣再分別加沸水浸泡，70% 浸泡后，加熱提取，得濾液。合并三次濾液，濃縮，干燥，按藥劑學(xué)工藝制成可供臨床應(yīng)用的制劑。該發(fā)明采用人參為原料，制備具有抗骨質(zhì)疏松功效的制劑，但是未能說明是人參中的何種成分可以起到治療骨質(zhì)疏松癥的效果，也未能準(zhǔn)確定義所能治療的骨質(zhì)疏松癥的具體病癥，不能確定該發(fā)明是否對(duì)所有骨質(zhì)疏松癥起到療效。因此，亟需要一種可以對(duì)糖皮質(zhì)激素性骨質(zhì)疏松起到療效的物質(zhì)及其應(yīng)用，但是關(guān)于這種物質(zhì)及其應(yīng)用，目前還未見報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中的不足，提供一種人參皂苷的應(yīng)用。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案是一種人參皂苷的應(yīng)用，所述的人參皂苷在制備治療骨質(zhì)疏松癥藥物中的應(yīng)用。所述的骨質(zhì)疏松癥為糖皮質(zhì)激素性骨質(zhì)疏松癥。本發(fā)明優(yōu)點(diǎn)在于
1、本發(fā)明提供了一種人參皂苷的新的用途，拓寬了人參皂苷的藥用范圍；
2、本發(fā)明的人參皂苷能對(duì)糖皮質(zhì)激素性骨質(zhì)疏松癥起到療效，在增強(qiáng)激素療效的同時(shí)可以有效地防治糖皮質(zhì)激素性骨質(zhì)疏松癥，減輕病人因?yàn)榧に刂委煻鸬墓琴|(zhì)疏松；
3、本發(fā)明填補(bǔ)了現(xiàn)有糖皮質(zhì)激素性骨質(zhì)疏松癥治療技術(shù)領(lǐng)域的空白，為糖皮質(zhì)激素性骨質(zhì)疏松癥患者提供更好的治療。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明提供的具體實(shí)施方式
作詳細(xì)說明。實(shí)施例1 1、實(shí)驗(yàn)材料
實(shí)驗(yàn)試劑人參皂苷(購于上海藥檢所)，DMSO溶液，地塞米松磷酸鈉注射液(Dex，由上海第一制藥廠提供)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物3月齡雌性Wister大鼠，50只，體重150g左右(由第二軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供)。2、實(shí)驗(yàn)方法 (1)動(dòng)物造模及分組
將小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)7天后，隨機(jī)分為5組正常對(duì)照組(NC) 10只，模型組(糖皮質(zhì)激素性骨質(zhì)疏松模型)(Dex)(小鼠在適應(yīng)性喂養(yǎng)前，用Dex 0. lmg/100g對(duì)其進(jìn)行皮下注射每日1次，持續(xù)8周)10只，人參皂苷治療組(GS+Dex)30只(高劑量組GS 100 mg/kg,中劑量組 50 mg/kg，低劑量組 25 mg/kg)。(2)實(shí)驗(yàn)步驟
實(shí)驗(yàn)共12周，前8周人參皂苷治療組高劑量組、中劑量組、低劑量組三組大鼠均予以 Dex 0. lmg/100g皮下注射每日1次；NC組和Dex組不給藥。所有動(dòng)物在同條件下飼養(yǎng)，自由攝食和飲水，每周稱體重1次，根據(jù)體質(zhì)量調(diào)節(jié)藥物劑量。3、觀察方法
(1)體質(zhì)量測量及生長情況觀察
實(shí)驗(yàn)期間密切觀察大鼠生活情況(包括攝食、飲水、活動(dòng)、皮膚色澤等)，實(shí)驗(yàn)前、實(shí)驗(yàn)開始后每周用天平測量大鼠體質(zhì)量，觀察其變化。(2)骨密度測定取大鼠第五腰椎(保留椎體和棘突)和右側(cè)股骨分別剔盡其附著軟組織，用浸透生理鹽水紗布包裹，檢測時(shí)去掉紗布，將標(biāo)本置于雙能X線骨密度測定儀上測定，計(jì)算機(jī)采用小動(dòng)物梯級(jí)標(biāo)準(zhǔn)分析軟件，并自動(dòng)記錄骨密度。(3)骨生物力學(xué)測定
①壓縮實(shí)驗(yàn)應(yīng)用大鼠第五腰椎，去除棘突，只保留椎體，實(shí)驗(yàn)試件經(jīng)切割打磨去除軟骨板，并使兩面平行，將標(biāo)本置于鋼制平臺(tái)上，保持椎體上下面水平，加載速度為2mm/min， 壓縮以過最大載荷為限，計(jì)算機(jī)得出載荷位移曲線。②三點(diǎn)彎曲實(shí)驗(yàn)取右股骨全長，兩端用牙托粉澆鑄固定后放在試驗(yàn)機(jī)上測試，跨距22mm，標(biāo)本橫截面短軸的方向與加載力方向一致，最大加載速度2mm/min，計(jì)算機(jī)得出載荷撓度曲線。(4)血清學(xué)指標(biāo)檢測
各組大鼠均于末次干預(yù)給藥后禁食12h，用10%水合氯醛lml/kg麻醉后，腹主動(dòng)脈采血，手機(jī)血液離心(300r/min，lOmin)。分離血清，_80°C冰箱凍存待測，分別采用全自動(dòng)生化分析儀測定血清鈣、磷，放射免疫法測定血清BGP、CT含量，及比色法測定血清TRACP酶活性等指標(biāo)。(5)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法
所有數(shù)據(jù)均以X士S表示，各組之間比較采用單因素方差分析，組間差異用SNK法，P < 0. 05作為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的檢測標(biāo)準(zhǔn)。采用SPSS13. O統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。4、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
(1)大鼠一般生長情況
在激素應(yīng)用過程中，模型組大鼠逐漸出現(xiàn)毛被稀疏缺乏光澤、懶動(dòng)、少食、體質(zhì)量增長緩慢等，而正常組和人參皂苷高劑量組大鼠活動(dòng)自由，皮毛光澤。實(shí)驗(yàn)過程中有4只大鼠因感染和灌胃死亡，被剔除。(2)血清學(xué)指標(biāo)測定結(jié)果
反映骨形成指標(biāo)BGP、CT及血清Ca水平，模型組顯著低于正常組，人參皂苷高劑量組顯著高于模型組(P<0. 05);反映骨吸收的TRACP酶活性及血清P水平，各組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P > 0. 05)，測定數(shù)據(jù)見表1和表2。表1人參皂苷對(duì)骨質(zhì)疏松大鼠骨代謝指標(biāo)的影響(X士S)
權(quán)利要求
1.一種人參皂苷的應(yīng)用，其特征在于，所述的人參皂苷在制備治療骨質(zhì)疏松癥藥物中的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的人參皂苷的應(yīng)用，其特征在于，所述的骨質(zhì)疏松癥為糖皮質(zhì)激素性骨質(zhì)疏松癥。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種人參皂苷的應(yīng)用，所述的人參皂苷在制備治療骨質(zhì)疏松癥藥物中的應(yīng)用，所述的骨質(zhì)疏松癥為糖皮質(zhì)激素性骨質(zhì)疏松癥。本發(fā)明優(yōu)點(diǎn)在于本發(fā)明提供了一種人參皂苷的新的用途，拓寬了人參皂苷的藥用范圍；本發(fā)明的人參皂苷能對(duì)糖皮質(zhì)激素性骨質(zhì)疏松癥起到療效，在增強(qiáng)激素療效的同時(shí)可以有效地防治糖皮質(zhì)激素性骨質(zhì)疏松癥，減輕病人因?yàn)榧に刂委煻鸬墓琴|(zhì)疏松；本發(fā)明填補(bǔ)了現(xiàn)有糖皮質(zhì)激素性骨質(zhì)疏松癥治療技術(shù)領(lǐng)域的空白，為糖皮質(zhì)激素性骨質(zhì)疏松癥患者提供更好的治療。
文檔編號(hào)A61P19/10GK102283877SQ20111021022
公開日2011年12月21日 申請(qǐng)日期2011年7月26日 優(yōu)先權(quán)日2011年7月26日
發(fā)明者凌昌全, 呂祥, 李勇, 杜娟, 程彬彬 申請(qǐng)人:上海市中醫(yī)醫(yī)院