專(zhuān)利名稱(chēng)：一種延齡草總甾體皂苷的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種延齡草總留體皂苷的制備方法，具體是一種利用超臨界(X)2萃取從延齡草中提取延齡草總留體皂苷的方法。
背景技術(shù)：
延齡草，又名頭頂一顆珠，是百合科植物tschonoskii Maxim的根莖， 味甘，性平；有小毒，是傳統(tǒng)的名貴中藥。主產(chǎn)于西藏、云南、四川、陜西、甘肅、湖北、河南等地，生于海拔1000-3200米陰濕處。具有鎮(zhèn)靜安神、祛風(fēng)活血、延年益壽的功效。主治頭暈?zāi)垦?、失眠、跌打損傷、外傷出血、神經(jīng)衰弱、高血壓、腦震蕩后遺癥等疾病等，是土家族四大名藥之一。肖本見(jiàn)等報(bào)道了延齡草具有抗炎活性和免疫調(diào)節(jié)作用，黃麗亞等研究表明延齡草有促進(jìn)學(xué)習(xí)記憶和提高抗氧化酶表達(dá)作用，Masateru Ono et al.研究了吉林延齡草中某些單體化合物消除氧自由基DPPH活性，發(fā)現(xiàn)它們均有很強(qiáng)的消除DPPH作用，鄒坤等研究了延齡草的2個(gè)單體化合物抗環(huán)氧化酶C0X-2的活性，發(fā)現(xiàn)它們顯著抑制由磷脂多糖(LPS) 刺激產(chǎn)生的C0X-2。延齡草含有多種留體皂苷，黃酮和萜類(lèi)成分。已有報(bào)道從延齡草屬植物中分離得到偏諾皂苷、延齡草皂苷、薯蕷皂苷、克里托皂苷、留醇苷5類(lèi)留體皂苷。至今未見(jiàn)提取分離延齡草留體皂苷的方法報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種延齡草總留體皂苷的制備方法，本發(fā)明方法萃取延齡草皂苷，方法簡(jiǎn)單、工藝條件容易控制、產(chǎn)率較高、質(zhì)量穩(wěn)定可控。為達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案
一種延齡草總留體皂苷的制備方法，其特征在于包括以下步驟將延齡草粉碎，加入萃取釜中，以藥用酒精為夾帶劑，采用超臨界CO2萃取，收集總留體皂苷萃取物，加熱水分散， 加入大孔樹(shù)脂柱吸附，乙醇溶液洗脫，收集洗脫液濃縮成浸膏，加入丙酮至沉淀不再產(chǎn)生， 過(guò)濾，沉淀經(jīng)低溫干燥即得產(chǎn)品。所述超臨界(X)2萃取條件為萃取溫度為22_55°C，萃取壓力為13_35MPa，CO2流量為20-32L/h，萃取時(shí)間為2-6h，分離釜I溫度為31_60°C，壓力為10_15MPa，分離釜II溫度為 20_50°C，壓力為 4_8MPa。所述大孔樹(shù)脂可選D101、AB-8或HPD100中的一種。所述大孔樹(shù)脂洗脫，依次以水、30%_40%乙醇、65%_80%乙醇洗脫，收集65%_80%乙醇洗脫部分。本發(fā)明具有如下有益效果
(1)采用超臨界(X)2萃取，較傳統(tǒng)溶劑法有較大提高，且提取時(shí)間短、無(wú)溶劑殘留，是一種環(huán)保的提取方法。(2)采用大孔樹(shù)脂富集分離，大孔樹(shù)脂可多次利用，降低了生產(chǎn)成本。下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1:
稱(chēng)取500g延齡草放入萃取釜中，使用CO2作超臨界流體，開(kāi)啟機(jī)器調(diào)節(jié)下列參數(shù)萃取溫度為55°C，萃取壓力為20MPa，分離釜I溫度為60°C，壓力為12MPa，分離釜II溫度為 45°C，壓力為4. 5MPa，達(dá)到上述參數(shù)后，以(X)2流量為21L/h，并夾帶藥用乙醇，萃取5h，收集延齡草留體皂苷萃取物，加熱水分散后加入DlOl大孔樹(shù)脂柱吸附，依次用水、30%乙醇、 65%乙醇洗脫，收集65%乙醇洗脫液，減壓回收試劑，濃縮成浸膏，邊攪拌邊加入丙酮至沉淀不再產(chǎn)生，過(guò)濾，沉淀經(jīng)低溫干燥得延齡草總留體皂苷，得率約為3%，其中留體皂苷含量為 84% ο實(shí)施例2:
稱(chēng)取500g延齡草放入萃取釜中，使用CO2作超臨界流體，開(kāi)啟機(jī)器調(diào)節(jié)下列參數(shù)萃取溫度為47°C，萃取壓力為35MPa，分離釜I溫度為52°C，壓力為15MPa，分離釜II溫度為 500C，壓力為4. OMPa,達(dá)到上述參數(shù)后，以(X)2流量為30L/h，并夾帶藥用乙醇，萃取3h，收集延齡草留體皂苷萃取物，加熱水分散后加入HPD100大孔樹(shù)脂柱吸附，依次用水、35%乙醇、 75%乙醇洗脫，收集65%乙醇洗脫液，減壓回收試劑，濃縮成浸膏，邊攪拌邊加入丙酮至沉淀不再產(chǎn)生，過(guò)濾，沉淀經(jīng)低溫干燥得延齡草總留體皂苷，得率約為4%，其中留體皂苷含量為 80%。實(shí)施例3:
稱(chēng)取Ikg延齡草放入萃取釜中，使用CO2作超臨界流體，開(kāi)啟機(jī)器調(diào)節(jié)下列參數(shù)萃取溫度為38°C，萃取壓力為19MPa，分離釜I溫度為49°C，壓力為12MPa，分離釜II溫度為 33°C，壓力為6. 3MPa，達(dá)到上述參數(shù)后，以(X)2流量為32L/h，并夾帶藥用乙醇，萃取2h，收集延齡草留體皂苷萃取物，加熱水分散后加入AB-8大孔樹(shù)脂柱吸附，依次用水、40%乙醇、 80%乙醇洗脫，收集65%乙醇洗脫液，減壓回收試劑，濃縮成浸膏，邊攪拌邊加入丙酮至沉淀不再產(chǎn)生，過(guò)濾，沉淀經(jīng)低溫干燥得延齡草總留體皂苷，得率約為4%，其中留體皂苷含量為 78%。實(shí)施例4:
稱(chēng)取Ikg延齡草放入萃取釜中，使用CO2作超臨界流體，開(kāi)啟機(jī)器調(diào)節(jié)下列參數(shù)萃取溫度為52°C，萃取壓力為14MPa，分離釜I溫度為58°C，壓力為13MPa，分離釜II溫度為 430C，壓力為8. OMPa,達(dá)到上述參數(shù)后，以(X)2流量為^L/h，并夾帶藥用乙醇，萃取4h，收集延齡草留體皂苷萃取物，加熱水分散后加入DlOl大孔樹(shù)脂柱吸附，依次用水、35%乙醇、 65%乙醇洗脫，收集65%乙醇洗脫液，減壓回收試劑，濃縮成浸膏，邊攪拌邊加入丙酮至沉淀不再產(chǎn)生，過(guò)濾，沉淀經(jīng)低溫干燥得延齡草總留體皂苷，得率約為3%，其中留體皂苷含量為 81%。實(shí)施例5:
稱(chēng)取2kg延齡草放入萃取釜中，使用(X)2作超臨界流體，開(kāi)啟機(jī)器調(diào)節(jié)下列參數(shù)萃取溫度為22°C，萃取壓力為^MPa,分離釜I溫度為35°C，壓力為lOMPa，分離釜II溫度為 270C，壓力為7. 6MPa,達(dá)到上述參數(shù)后，以(X)2流量為ML/h，并夾帶藥用乙醇，萃取6h，收集延齡草留體皂苷萃取物，加熱水分散后加入AB-8大孔樹(shù)脂柱吸附，依次用水、30%乙醇、 80%乙醇洗脫，收集65%乙醇洗脫液，減壓回收試劑，濃縮成浸膏，邊攪拌邊加入丙酮至沉淀不再產(chǎn)生，過(guò)濾，沉淀經(jīng)低溫干燥得延齡草總留體皂苷，得率約為4%，其中留體皂苷含量為 73%。實(shí)施例6:
稱(chēng)取2kg延齡草放入萃取釜中，使用C02作超臨界流體，開(kāi)啟機(jī)器調(diào)節(jié)下列參數(shù)萃取溫度為43°C，萃取壓力為33MPa，分離釜I溫度為50°C，壓力為14MPa，分離釜II溫度為 380C，壓力為5. OMPa,達(dá)到上述參數(shù)后，以C02流量為^L/h，并夾帶藥用乙醇，萃取4h，收集延齡草留體皂苷萃取物，加熱水分散后加入HPD-100大孔樹(shù)脂柱吸附，依次用水、30%乙醇、 70%乙醇洗脫，收集65%乙醇洗脫液，減壓回收試劑，濃縮成浸膏，邊攪拌邊加入丙酮至沉淀不再產(chǎn)生，過(guò)濾，沉淀經(jīng)低溫干燥得延齡草總留體皂苷，得率約為3%，其中留體皂苷含量為 76%。實(shí)施例7:
稱(chēng)取5kg延齡草放入萃取釜中，使用C02作超臨界流體，開(kāi)啟機(jī)器調(diào)節(jié)下列參數(shù)萃取溫度為39 °C，萃取壓力為22MPa，分離釜I溫度為31°C，壓力為llMPa，分離釜II溫度為 200C，壓力為6. 5MPa,達(dá)到上述參數(shù)后，以C02流量為20L/h，并夾帶藥用乙醇，萃取5h，收集延齡草留體皂苷萃取物，加熱水分散后加入DlOl大孔樹(shù)脂柱吸附，依次用水、40%乙醇、 75%乙醇洗脫，收集65%乙醇洗脫液，減壓回收試劑，濃縮成浸膏，邊攪拌邊加入丙酮至沉淀不再產(chǎn)生，過(guò)濾，沉淀經(jīng)低溫干燥得延齡草總留體皂苷，得率約為4%，其中留體皂苷含量為 74% ο
權(quán)利要求
1.一種延齡草總留體皂苷的制備方法，其特征在于包括以下步驟將延齡草粉碎，加入萃取釜中，以藥用酒精為夾帶劑，采用超臨界CO2萃取，收集總留體皂苷萃取物，加熱水分散，加入大孔樹(shù)脂柱吸附，乙醇溶液洗脫，收集洗脫液濃縮成浸膏，加入丙酮至沉淀不再產(chǎn)生，過(guò)濾，沉淀經(jīng)低溫干燥即得產(chǎn)品。
2.按照權(quán)利要求1所述的一種延齡草總留體皂苷的制備方法，其特征在于所述超臨界 CO2萃取條件為萃取溫度為22-55°C，萃取壓力為13-35MPa，CO2流量為20_32L/h，萃取時(shí)間為2-6h，分離釜I溫度為31-60°C，壓力為10-15MPa，分離釜II溫度為20-50°C，壓力為 4-8MPa。
3.按照權(quán)利要求1所述的一種延齡草總留體皂苷的制備方法，其特征在于所述大孔樹(shù)脂可選DlOl、AB-8或HPD100中的一種。
4.按照權(quán)利要求1所述的一種延齡草總留體皂苷的制備方法，其特征在于所述大孔樹(shù)脂洗脫，依次以水、30%-40%乙醇、65%-80%乙醇洗脫，收集65%-80%乙醇洗脫部分。
全文摘要
本發(fā)明提供一種延齡草總甾體皂苷的制備方法，方法是將延齡草粉碎，加入萃取釜中，采用超臨界CO2萃取，收集總甾體皂苷萃取物，加熱水分散，加入大孔樹(shù)脂柱吸附，乙醇溶液洗脫，收集洗脫液濃縮成浸膏，低溫干燥即得產(chǎn)品。本發(fā)明采用超臨界CO2萃取和大孔樹(shù)脂柱分離，是一種高效、環(huán)保的提取方法，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)A61K36/896GK102247513SQ20111018774
公開(kāi)日2011年11月23日 申請(qǐng)日期2011年7月6日 優(yōu)先權(quán)日2011年7月6日
發(fā)明者劉東鋒, 郭琴 申請(qǐng)人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司