專利名稱：γ咔啉化合物、制備方法和用途的制作方法
技術領域：
本 發(fā)明涉及醫(yī)藥技術領域，具體涉及一種Y咔啉化合物、制備方法和用途，用于制備組蛋白去乙?；敢种苿?，可以用于制備非細胞毒類抗腫瘤的藥物。
背景技術：
在真核生物體內(nèi)，DNA與組蛋白包裹在一起形成染色質(zhì)，進一步濃縮形成染色體。 組蛋白末端特定賴氨酸殘基的可逆乙酰化在調(diào)控基因表達中具有重要作用。這種可逆調(diào)節(jié)是由兩種作用功能相反的酶組蛋白乙酰基轉(zhuǎn)移酶(HAT)和組蛋白去乙?；?HDACs)所控制的。乙酰化特定賴氨酸殘基的ε氨基酸后，去除了其正電荷，因此減少了帶負電的DNA 和組蛋白之間的親合力。這加速了各種轉(zhuǎn)錄因子與DNA的靠近，激活腫瘤抑制基因。因此， 多數(shù)情況下組蛋白乙?；訌娹D(zhuǎn)運而組蛋白去乙?；种妻D(zhuǎn)運。根據(jù)與酵母的同源性關系，可將人源組蛋白去乙?；缚梢苑譃樗念?和II類為Zn2+依賴型，III類為NAD依賴型，而第IV類(只包括HDAC11)既具有HDAC I也具有 HDAC II的性質(zhì)。抑制組蛋白去乙?；傅幕钚?，使乙酰化的組蛋白水平升高，可以誘發(fā)一系列特定細胞的反應，例如細胞凋亡、分化和增值抑制等，表明組蛋白去乙酰化酶是潛在的癌癥治療靶標。組蛋白去乙?；敢种苿┮呀?jīng)被用來研究它們的治療腫瘤效果?，F(xiàn)如今，包括短鏈脂肪酸，環(huán)四肽和羥肟酸在內(nèi)的各系列抑制劑已經(jīng)進入臨床前或臨床研究。SAHA和 FK228 (Drugs of Today，2009，45，787)先后在2006年和2009年獲得美國FDA批準治療表皮 T淋巴細胞腫瘤，證實抑制組蛋白去乙酰化酶是治療癌癥的有效策略。除了癌癥治療以外， 組蛋白去乙?；敢种苿┻€可用于治療炎癥，神經(jīng)退行性疾病(Current Pharmaceutical Design，2009，15，3940)，心血管疾病(Pharmacol. Res. 2010，62，3)等。HDLP (Nature, 1999，401，188)和HDAC 8晶體結構揭示，Zn2+位于又窄又深的活性口袋底部，與羥肟酸的羰基和羥基發(fā)生螯合作用。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的組蛋白去乙?；敢种苿┧幮F特征包含以下部分金屬螯合區(qū)，鏈接區(qū)和表面識別區(qū)。該晶體結構的發(fā)現(xiàn)和藥效團特征的闡明為設計新的HDAC抑制劑及研究抑制劑的作用機制提供了基礎。盡管目前已經(jīng)有較多的HDAC抑制劑被合成并申請了專利(Expert Opinion on Therapeutic Patents, 2009，19，1727)，但從目前臨床的結果來看，其抗腫瘤療效還有待提高，藥效更好，副作用更小，藥代動力學特性更好的化合物仍有待發(fā)現(xiàn)，臨床上也需要更多可供選擇的組蛋白去乙?；敢种苿景l(fā)明由此而來。許多藥物結構中含有咔啉母環(huán)(CN101175754A, Biorg. Med. Chem. 2008,16, 4908)，但咔啉類化合物用于組蛋白去乙?；敢种苿┑难芯繄蟮老鄬^少。2010年 Butler, K. V等報道了將咔啉環(huán)用于表面識別區(qū)的結構基團進行組蛋白去乙?；敢种苿┑脑O計(J. Am. Chem. Soc. 2010，132，10842)，這類抑制劑對HDAC 6酶的半數(shù)抑制活性達到 15nM，對HDAC 6的選擇性與HDAC 1相比可以達到1000倍。在本專利中我們將咔啉環(huán)作為鏈接區(qū)進行組蛋白去乙?；敢种苿┑脑O計合成，設計了一系列結構新穎的化合物，并測試了其對腫瘤細胞的體外抑制活性和對組蛋白去乙?；傅拿敢种苹钚?。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種Y咔啉化合物，進一步說是一種Y咔啉骨架的組蛋白去乙酰化酶抑制劑。本發(fā)明的目的還提供一種合成上述化合物的中間體。本發(fā)明的目的還提供一種上述的Y咔啉化合物的制備方法。本發(fā)明的另外一個目的是提供一種上述Y咔啉化合物的用途，用于制備組蛋白去乙?；敢种苿?，由于具有較高的腫瘤抑制率，可望制備成為非細胞毒類抗腫瘤的藥物。本發(fā)明的Y咔啉化合物具有如下的結構式
權利要求
1.一種具有以下結構式的Y咔啉化合物及藥學上可以接受的鹽及包含該化合物的藥物組合物
2.一種合成如權利要求IY咔啉化合物的化合物中間體，其結構式如下述
3.—種藥物組合物，其中含有如權利1要求的化合物和藥學上可以接受的載體。
4.一種如權利要求1所述的化合物用于制備組蛋白去乙?；敢种苿┗蛘呖鼓[瘤、白血病的藥物。
5.如權利要求1或2所述的化合物的制備方法，其特征是通過如下步驟實現(xiàn)1)對溴苯胼鹽酸鹽和4-哌啶酮鹽酸鹽在乙醇的飽和氯化氫溶液中在80 100°C條件下發(fā)生Fischer反應3 5小時得到8位溴取代的四氫Y咔啉1_1 ；所述的對溴苯胼鹽酸鹽和4-哌啶酮鹽酸鹽的摩爾比為1 0.8 1.2;2)在水或有機溶劑中，堿存在下，在20 90°C下對化合物I-I的N原子進行保護反應 0. 5 4小時得到化合物1-2 ；保護基試劑首選為Boc酸酐；化合物1-1、堿和Boc酸酐的摩爾比為1 1 2. 2 0.9 1.2 ；所述的Boc表示叔丁氧羰基；3)在有機溶劑、縛酸劑和鈀催化劑存在下，化合物1-2與CH2CHCOOR4在90 120°C 發(fā)生Heck偶聯(lián)反應8 10小時，獲得化合物1-3 ；鈀催化劑為四三苯基膦鈀、醋酸鈀和三苯基膦的混合物、或氯化鈀和三苯基膦的混合物，所述的化合物1-2、CH2CHC00R4、縛酸劑和醋酸鈀、三苯基膦的摩爾比為1 2 10 1 3 0.05 0.15 0. 15 0. 45 ;1_2、 CH2CHCOOR4、縛酸劑和四三苯基膦鈀的摩爾比為1 2 10 1 3 0. 05 0. 15 ;R3的定義如同權利2所示；4)在堿和相轉(zhuǎn)移催化劑存在下，化合物1-3和過量的XL1X在40 60°C反應12 36h 得化合物1-4，堿為氫氧化鈉，氫氧化鉀的水溶液，濃度為2 12M ；所述的化合物IUL1X, 堿和相轉(zhuǎn)移催化劑的摩爾比為1 2 10 2 10 0. 1 1 ；所述的相轉(zhuǎn)移催化劑為季銨鹽和季磷鹽；5)在20 60°C，化合物1-4溶解在有機溶劑中，在酸性試劑存在下脫除Boc保護基反應0. 5 4小時得到化合物1-5，酸性試劑包括三氟乙酸，鹽酸，氯化亞砜或?qū)妆交撬幔换衔?-4和酸性試劑的摩爾比為1 2 10;6)在0 40°C，有機溶劑和堿存在下，化合物1-5與R1X反應2 24h得化合物1_6； X為鹵素，RSL1的定義如同權利要求1所述；IU1L1X的摩爾比1 1 2;或者化合物1-5與R1CHO在有機溶劑中和還原劑發(fā)生還原胺化反應6 36小時得化合物1-6 ；化合物1-5、R1CHO和還原劑的摩爾比為1 1 1.5 1 3 ；所述的還原劑為三乙酰氧基硼氫化鈉、氰基硼氫化鈉或硼氫化鈉；7)在40 100°C，在堿和有機溶劑存在下，化合物1-6與R2R3NH反應4 24h得到酯類中間體1-7 ；R2, R3的定義如同權利要求1所述；所述的化合物1-6、R2R3NH和堿的摩爾比為1 1 5 1 4 ；8)在20°C 100°C，酯類中間體1-7在堿性條件下發(fā)生水解反應2 8h得到相應的酸 1-8;所述的酯類中間體1-7和堿的摩爾比為1 1 5;9)在0°C惰性氣體保護下，在有機溶劑和縛酸劑存在下，1-8與氯甲酸乙酯反應0.2 0. 5h得到混酐；再加入四氫吡喃保護的羥胺室溫反應2 6h得到化合物1-9 ；1-8、縛酸劑、 氯甲酸乙酯、四氫吡喃摩爾比為1 1 3 1 3 1 5;或者在溫度20 40°C的有機溶劑中，化合物1-8與四氫吡喃保護的羥胺在縮合劑的存在下反應12 36h縮合得到化合物1-9，所述的縮合劑為N，N’ - 二環(huán)己基碳二亞胺、1-乙基-3-(3-二甲胺丙基)碳二亞胺鹽酸鹽、N-羥基苯并三氮唑；1-8、四氫吡喃保護的羥胺、 縮合劑的摩爾比為1 1 4 1 4;10)在0 60°C，有機溶劑和酸存在下，化合物1-9反應0.5 2小時脫除四氫吡喃保護基得到目標化合物1-10 ；酸性試劑為鹽酸、醋酸、硼酸或三氟化硼乙醚；1-9、酸的摩爾比 1 1 10 ；化合物1-1、1-2、1-3、1-4、1-5、1-6、1-8和1-9的結構式分別如 下
6.如權利要求5所述的方法，其特征是步驟2)、3)、6)、7)、8)、9)和10)步驟中所述的有機溶劑為四氫呋喃、二氯甲烷、乙腈、甲醇、乙醇、二甲基甲酰胺、甲苯和N-甲基吡咯烷酮。
7.如權利要求5所述的方法，其特征是步驟2)、3)、6)、7)和8)中所述的堿或縛酸劑為三乙胺、N，N-二異丙基乙胺、吡啶、碳酸鉀、碳酸氫鈉、氫氧化鈉或碳酸鈉。
8.如權利要求5所述的方法，其特征是步驟3)、9)是在惰性氣體保護下進行。
9 如權利要求5所述的方法，其特征是步驟4)中所述的季銨鹽為四丁基溴化銨、四丁基硫酸氫銨或芐基三乙基氯化銨。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種γ咔啉化合物、制備方法和用途，具體地說是一類以γ咔啉為骨架的組蛋白去乙?；敢种苿?、制備方法和用途。本發(fā)明的抑制劑是具有如下結構式的化合物不僅合成方法簡便、條件溫和，而且該化合物具有較高的腫瘤抑制率有望制備成為非細胞毒類抗腫瘤的藥物。
文檔編號A61P29/00GK102153549SQ201110030648
公開日2011年8月17日 申請日期2011年1月21日 優(yōu)先權日2010年12月14日
發(fā)明者劉力鋒, 劉華, 劉建文, 安娜, 應俊, 梁雷, 皮紅軍, 鄧衛(wèi)平, 金惠 申請人:華東理工大學