專利名稱：白楊素長鏈衍生物及其制備方法與用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及白楊素長鏈衍生物及其制備方法與用途。

背景技術(shù)：
動脈粥樣硬化(atherosclerosis，AS)是指由脂肪代謝紊亂、神經(jīng)血管功能失調(diào)引起的大、中動脈內(nèi)膜出現(xiàn)含膽固醇、類脂肪等的黃色物質(zhì)，從而導(dǎo)致血管腔阻塞，心肌缺血、缺氧而引起的心臟病。動脈粥樣硬化是冠心病的病理基礎(chǔ)，約99％的冠心病病例的病因都與動脈粥樣硬化有關(guān)。動脈粥樣硬化還與與高血壓、糖尿病及脂蛋白異常等有關(guān)的動脈慢性炎癥性疾病具有密切的相關(guān)性。因此有效地預(yù)防、診斷和治療動脈粥樣硬化性疾病，對防治冠心病以及腦血管疾病都有十分重大的意義。
據(jù)研究發(fā)現(xiàn)，氧化修飾低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein，ox-LDL)是動脈粥樣硬化形成和發(fā)展的關(guān)鍵因素。LDL可被氧自由基、內(nèi)皮細胞等氧化修飾氧化成ox-LDL。ox-LDL可對血管內(nèi)皮細胞產(chǎn)生毒性作用，降低其抗凝纖溶活性，損傷脈壁正常的舒張功能，并誘導(dǎo)細胞表型改變；可損傷內(nèi)皮細胞，促進平滑肌細胞增殖，亦可被巨噬細胞等攝取，在細胞內(nèi)過量聚集形成泡沫細胞，在動脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展中起重要作用。
血凝素樣氧化修飾低密度脂蛋白受體-1(lectin like oxidized low density lipoproteinreceptor-1，Lox-1)作為ox-LDL的受體，具有高度的配體特異性，能介導(dǎo)內(nèi)皮細胞攝取代謝ox-LDL，以及ox-LDL對內(nèi)皮細胞的損傷效應(yīng)，觸發(fā)一系列細胞內(nèi)信號通路，參與高血壓、血栓癥和動脈粥樣硬化等的形成。適當阻斷Lox-1與ox-LDL的結(jié)合，將會從源頭上阻止ox-LDL對內(nèi)皮細胞的損傷，消除損壞血管功能的觸發(fā)因素，從而保護了血管功能，防止疾病的發(fā)生。所以，特異性受體Lox-1是一個重要的藥物作用靶點。
白楊素(chrysin)是紫葳科植物木蝴蝶中提取的一種具有廣泛藥理作用的黃酮類化合物，它在蜂膠中含量較高，是蜂膠的主要有效成分。白楊素的化學(xué)名為5，7-二羥基黃酮。研究表明，白楊素具有抗氧化，抗病毒，抗高血壓，降血糖和抑制芳香酶活性的作用，還具有腫瘤預(yù)防和治療作用。白楊素的抗氧作用可有效清除體內(nèi)的氧自由基，阻止細胞的退化、衰老，也可阻止癌癥的發(fā)生。它可以改善血液循環(huán)，可以降低膽固醇，阻止LDL被氧化為ox-LDL，降低心腦血管疾病的發(fā)病率，也可改善心腦血管疾病的癥狀。并且其具有活性好，低毒，分子量不高，脂溶性好等一系列作為藥物的優(yōu)點，所以將白楊素進行改造使其能與lox-1發(fā)生作用，可能可以得到治療動脈粥樣硬化藥物的先導(dǎo)化合物。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一類新白楊素長鏈衍生物以及它們的制備方法與用途。
本發(fā)明的技術(shù)方案如下 一類白楊素長鏈衍生物，其特征是它有如下通式
式中n＝5、6、7、8、9、11、13、15或17。
上述的白楊素長鏈衍生物的制備方法，它由下列步驟組成 步驟1.在40ml丙酮溶液中加入1.5g白楊素和1.5g碳酸鉀，緩慢滴加1.5ml溴乙酸乙酯，于50-60℃下反應(yīng)6h，冷卻，抽濾，將濾液旋干，柱層析純化得到黃色固體1.02g； 步驟2.在30ml DMSO溶液中加入0.5g第一步得到的產(chǎn)物，滴加5％碳酸鈉溶液10ml，在80-90℃下反應(yīng)10h，冷卻，在反應(yīng)體系中加入200ml 10％的稀鹽酸，靜止過夜，抽濾，干燥，得到淡黃色固體； 步驟3.在DMF中加入步驟2得到的產(chǎn)物與長鏈醇或長鏈胺，并加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC·HCl)作為催化劑，按步驟2得到的產(chǎn)物比長鏈醇或長鏈胺比1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽的物質(zhì)的量之比為1∶1∶1.2的原料比反應(yīng)，在80-90℃下回流12h，在反應(yīng)體系中加入水和乙酸乙酯，萃取，收集油層，旋干，柱層析純化得到本發(fā)明的白楊素長鏈衍生物。
上述步驟1或3中選用的柱層析的洗脫液為乙酸乙酯∶石油醚＝1∶1-1∶10的溶液。
本發(fā)明的白楊素長鏈衍生物，與Lox-1有很強的特異性結(jié)合能力，通過與Lox-1的結(jié)合從而阻斷Lox-1與ox-LDL的結(jié)合，在源頭上阻止ox-LDL對內(nèi)皮細胞的損傷，從根本上消除動脈粥樣硬化的發(fā)生條件。因此本發(fā)明的白楊素長鏈衍生物可以應(yīng)用于制備抗動脈粥樣硬化藥物。

具體實施例方式 實施例一2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸乙酯的制備
在40ml丙酮溶液中加入1.5g白楊素和1.5g碳酸鉀，緩慢滴加1.5ml溴乙酸乙酯。于50-60℃下反應(yīng)6h，冷卻，抽濾。將濾液旋干，用乙酸乙酯∶石油醚＝1∶3進行柱層析純化得到黃色固體即為產(chǎn)物，產(chǎn)率87％。Mp145-148℃.1H-NMR(300MHz，DMSO-d6，δppm)1.21(t，J＝7.0Hz，3H)；4.20(p，J＝2.2Hz，2H)；4.96(s，2H)；6.44(d，J＝2.2Hz，1H)；6.86(d，J＝2.2Hz，1H)；7.05(s，1H)；7.62(m，3H)；8.10(d，J＝6.4Hz，2H)；12.81(s，1H).MS(ESI)340.1([M+H]+).Anal.calc.for C19H16O6C，67.05；H，4.74％；foundC，66.77；H，4.91％. 實施例二2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸的制備
在30ml DMSO溶液中加入0.5g實施例一得到的產(chǎn)物，滴加5％碳酸鈉溶液10ml，在80-90℃下反應(yīng)10h，冷卻。在反應(yīng)體系中加入200ml 10％的稀鹽酸，靜止過夜，抽濾，干燥，得到黃色固體即為產(chǎn)物，產(chǎn)率82％。Mp279-282℃.1H-NMR(300MHz，DMSO-d6，δppm)4.96(s，2H)；6.41(d，J＝2.2Hz，1H)；6.83(d，J＝2.1Hz，1H)；7.05(s，1H)；7.62(t，J＝7.2Hz，3H)；8.10(m，2H)；12.81(s，1H).MS(ESI)312.1([M+H]+).Anal.calc.forC17H12O6C，65.39；H，3.87％；foundC，65.14；H，4.02％. 實驗例三2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正己酯的制備
將100mg實施例二得到的產(chǎn)物與200mg正己醇加入到30ml DMF中，加入200mgEDC·HCl為催化劑，在80-90℃下回流反應(yīng)12h。在反應(yīng)體系中加入水和乙酸乙酯，萃取。收集油層，旋干，乙酸乙酯∶石油醚＝1∶6進行柱層析純化得到淡黃色固體即為最終產(chǎn)物，己烷基-2-(5-羥基-2-苯基-4-氫-苯并吡喃-7-氧基)安息香酸，產(chǎn)率40％。Mp56-57℃.1H-NMR(300MHz，DMSO-d6，δppm)0.79(t，J＝6.9Hz，3H)；1.23(m，6H)；1.56(m，2H)；4.13(t，J＝6.4Hz，2H)；4.98(s，2H)；6.43(d，J＝2.2Hz，1H)；6.85(d，J＝2.2Hz，1H)；7.06(s，1H)；7.61(m，3H)；8.10(d，J＝6.3Hz，2H)；12.81(s，1H).MS(ESI)396.2([M+H]+).Anal.calc.for C23H24O6C，69.68；H，6.10％；foundC，69.45；H，6.17％. 實施例四2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正庚酯的制備
制備方法同實施例三，以正庚醇代替正己醇，得到淡黃色固體即為最終產(chǎn)物，產(chǎn)率51％。Mp56-58℃.1H-NMR(300MHz，DMSO-d6，δppm)0.80(t，J＝6.6Hz，3H)；1.17(m，8H)；1.57(m，2H)；4.14(t，J＝6.4Hz，2H)；4.98(s，2H)；6.44(d，J＝2.4Hz，1H)；6.85(d，J＝2.4Hz，1H)；7.07(s，1H)；7.62(m，3H)；8.10(d，J＝8.2Hz，2H)；12.82(s，1H).MS(ESI)410.2([M+H]+).Anal.calc.for C24H26O6C，70.23；H，6.38％；foundC，70.53；H，6.12％. 實施例五2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正辛酯的制備
制備方法同實施例三，以正辛醇代替正己醇，得到淡黃色固體80mg即為最終產(chǎn)物，產(chǎn)率44％。Mp58-60℃.1H-NMR(300MHz，DMSO-d6，δppm)0.81(t，J＝6.7Hz，3H)；1.22(m，10H)；1.56(m，2H)；4.13(t，J＝6.2Hz，2H)；4.98(s，2H)；6.43(d，J＝2.2Hz，1H)；6.85(d，J＝2.2Hz，1H)；7.07(s，1H)；7.62(m，3H)；8.10(d，J＝8.2Hz，2H)；12.81(s，1H).MS(ESI)424.2([M+H]+).Anal.calc.for C25H28O6C，70.74；H，6.65％；foundC，70.95；H，6.52％. 實施例六2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正壬酯的制備
制備方法同實施例三，以正壬醇代替正己醇，得到淡黃色固體即為最終產(chǎn)物，產(chǎn)率45％。Mp61-63℃.1H-NMR(300MHz，DMSO-d6，δppm)0.82(t，J＝6.7Hz，3H)；1.23(m，12H)；1.56(m，2H)；4.13(t，J＝6.4Hz，2H)；4.98(s，2H)；6.44(d，J＝2.2Hz，1H)；6.85(d，J＝2.2Hz，1H)；7.06(s，1H)；7.61(m，3H)；8.10(d，J＝8.2Hz，2H)；12.82(s，1H).MS(ESI)438.2([M+H]+).Anal.calc. for C26H30O6C，71.21；H，6.90％；foundC，71.49；H，6.76％. 實施例七2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正癸酯的制備
制備方法同實施例三，以正癸醇代替正己醇，得到淡黃色固體即為最終產(chǎn)物，產(chǎn)率50％。Mp64-66℃.1H-NMR(300MHz，DMSO-d6，δppm)0.82(t，J＝6.8Hz，3H)；1.23(m，14H)；1.56(m，2H)；4.13(t，J＝6.4Hz，2H)；4.98(s，2H)；6.43(d，J＝2.4Hz，1H)；6.85(d，J＝2.4Hz，1H)；7.07(s，1H)；7.61(m，3H)；8.10(d，J＝6.6Hz，2H)；12.81(s，1H).MS(ESI)452.2([M+H]+).Anal.calc.for C27H32O6C，71.66；H，7.13％；foundC，71.91；H，7.07％. 實施例八2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正十二醇酯的制備
制備方法同實施例三，以正十二醇代替正己醇，得到淡黃色固體即為最終產(chǎn)物，產(chǎn)率43％。Mp67-69℃.1H-NMR(300MHz，DMSO-d6，δppm)0.84(t，J＝7.2Hz，3H)；1.24(m，18H)；1.56(m，2H)；4.13(t，J＝6.3Hz，2H)；4.98(s，2H)；6.44(d，J＝2.2Hz，1H)；6.85(d，J＝2.2Hz，1H)；7.07(s，1H)；7.61(t，3H)；8.10(d，J＝8.2Hz，2H)；12.82(s，1H).MS(ESI)480.2([M+H]+).Anal.calc.for C29H36O6C，72.48；H，7.55％；foundC，72.66；H，7.39％. 實施例九2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正十四醇酯的制備
制備方法同實施例三，以正十四醇代替正己醇，得到淡黃色固體即為最終產(chǎn)物，產(chǎn)率43％。Mp70-72℃.1H-NMR(300MHz，DMSO-d6，δppm)0.85(t，J＝6.8Hz，3H)；1.24(m，22H)；1.56(m，2H)；4.14(t，J＝6.4Hz，2H)；4.98(s，2H)；6.44(d，J＝2.2Hz，1H)；6.85(d，J＝2.4Hz，1H)；7.06(s，1H)；7.62(m，3H)；8.10(d，J＝8.2Hz，2H)；12.81(s，1H).MS(ESI)508.3([M+H]+).Anal.calc.for C31H40O6C，73.20；H，7.93％；foundC，73.51；H，7.82％. 實施例十2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正十六醇酯的制備
制備方法同實施例三，以十六醇代替正己醇，得到淡黃色固體即為最終產(chǎn)物，產(chǎn)率50％。Mp71-72℃.1H-NMR(300MHz，DMSO-d6，δppm)0.85(t，J＝6.4Hz，3H)；1.25(m，26H)；1.57(m，2H)；4.14(t，J＝6.3Hz，2H)；4.99(s，2H)；6.45(d，J＝2.2Hz，1H)；6.86(d，J＝2.2Hz，1H)；7.09(s，1H)；7.63(m，3H)；8.11(d，J＝8.2Hz，2H)；12.82(s，1H).MS(ESI)536.3([M+H]+).Anal.calc.for C33H44O6C，73.85；H，8.26％；foundC，74.09；H，8.19％. 實施例十一2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正十八醇酯的制備
制備方法同實施例三，以正十八醇代替正己醇，得到淡黃色固體即為最終產(chǎn)物，產(chǎn)率45％。Mp73-75℃.1H-NMR(300MHz，DMSO-d6，δppm)0.85(t，J＝7.0Hz，3H)；1.22(m，30H)；1.57(m，2H)；4.13(t，J＝6.5Hz，2H)；4.97(s，2H)；6.43(d，J＝2.2Hz，1H)；6.84(d，J＝2.2Hz，1H)；7.05(s，1H)；7.60(m，3H)；8.10(d，J＝6.4Hz，2H)；12.80(s，1H).MS(ESI)564.4([M+H]+).Anal.calc.for C35H48O6C，74.44；H，8.57％；foundC，74.70；H，8.38％. 實施例十二2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酰正己胺的制備
制備方法同實施例三，以正己胺代替正己醇，得到淡黃色固體即為最終產(chǎn)物，產(chǎn)率38％。Mp120-122℃.1H-NMR(300MHz，DMSO-d6，δppm)0.80(t，J＝6.8Hz，3H)；1.11(m，6H)；1.41(m，2H)；3.12(d，J＝6.4Hz，2H)；4.63(s，2H)；6.45(d，J＝2.2Hz，1H)；6.81(d，J＝2.2Hz，1H)；7.06(s，1H)；7.62(m，3H)；8.11(m，3H)；12.81(s，1H).MS(ESI)395.2([M+H]+).Anal.calc.for C23H25NO5C，69.86；H，6.37；N，3.54％；foundC，70.12；H，6.48；N，3.37％. 實施例十三2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酰正庚胺的制備
制備方法同實施例三，以正庚胺代替正己醇，得到淡黃色固體即為最終產(chǎn)物，產(chǎn)率40％。Mp121-123℃.1H-NMR(300MHz，DMSO-d6，δppm)0.80(t，J＝6.6Hz，3H)；1.08(m，8H)；1.42(m，2H)；3.12(d，J＝6.2Hz，2H)；4.63(s，2H)；6.45(d，J＝2.2Hz，1H)；6.81(d，J＝2.2Hz，1H)；7.05(s，1H)；7.62(m，3H)；8.11(m，3H)；12.81(s，1H).MS(ESI)409.2([M+H]+).Anal.calc.for C24H27NO5C，70.40；H，6.65；N，3.42％；foundC，70.73；H，6.82；N，3.24％. 實施例十四2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酰正辛胺的制備
制備方法同實施例三，以正辛胺代替正己醇，得到淡黃色固體即為最終產(chǎn)物，產(chǎn)率42％。Mp124-126℃.1H-NMR(300MHz，DMSO-d6，δppm)0.82(t，J＝6.8Hz，3H)；1.17(m，10H)；1.41(m，2H)；3.14(d，J＝6.6Hz，2H)；4.64(s，2H)；6.45(d，J＝2.2Hz，1H)；6.81(d，J＝2.2Hz，1H)；7.07(s，1H)；7.62(m，3H)；8.11(m，3H)；12.81(s，1H).MS(ESI)423.2([M+H]+).Anal.calc.for C25H29NO5C，70.90；H，6.90；N，3.31％；foundC，71.11；H，6.99；N，3.22％. 實施例十五2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酰正壬胺的制備
制備方法同實施例三，以正壬胺代替正己醇，得到淡黃色固體即為最終產(chǎn)物，產(chǎn)率38％。Mp128-130℃.1H-NMR(300MHz，DMSO-d6，δppm)0.83(t，J＝6.6Hz，3H)；1.17(m，12H)；1.42(m，2H)；3.12(d，J＝6.0Hz，2H)；4.63(s，2H)；6.44(d，J＝2.2Hz，1H)；6.81(d，J＝2.2Hz，1H)；7.06(s，1H)；7.62(m，3H)；8.11(m，3H)；12.81(s，1H).MS(ESI)437.2([M+H]+).Anal.calc.for C26H31NO5C，71.37；H，7.14；N，3.20％；foundC，71.74；H，7.03；N，3.02％. 實施例十六2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酰正癸胺的制備
制備方法同實施例三，以正癸胺代替正己醇，得到淡黃色固體即為最終產(chǎn)物，產(chǎn)率33％。Mp129-131℃.1H-NMR(300MHz，DMSO-d6，δppm)0.85(t，J＝6.2Hz，3H)；1.19(m，14H)；1.41(m，2H)；3.13(d，J＝6.4Hz，2H)；4.63(s，2H)；6.45(d，J＝2.2Hz，1H)；6.81(d，J＝2.2Hz，1H)；7.07(s，1H)；7.62(m，3H)；8.11(m，3H)；12.80(s，1H).MS(ESI)451.2([M+H]+).Anal.calc.for C27H33NO5C，71.82；H，7.37；N，3.10％；foundC，72.15；H，7.02；N，2.99％. 實施例十七2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酰正十二胺的制備
制備方法同實施例三，以十二胺代替正己醇，得到淡黃色固體即為最終產(chǎn)物，產(chǎn)率46％。Mp135-137℃.1H-NMR(300MHz，DMSO-d6，δppm)0.84(t，J＝6.2Hz，3H)；1.19(m，18H)；1.41(m，2H)；3.12(d，J＝6.2Hz，2H)；4.63(s，2H)；6.45(d，J＝1.8Hz，1H)；6.81(d，J＝1.8Hz，1H)；7.07(s，1H)；7.62(m，3H)；8.11(m，3H)；12.81(s，1H).MS(ESI)479.3([M+H]+).Anal.calc.for C29H37NO5C，72.62；H，7.78；N，2.92％；foundC，72.98；H，7.52；N，2.74％. 實施例十八2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酰正十四胺的制備
制備方法同實施例三，以正十四胺代替正己醇，得到淡黃色固體即為最終產(chǎn)物，產(chǎn)率43％。Mp135-137℃.1H-NMR(300MHz，DMSO-d6，δppm)0.83(t，J＝6.6Hz，3H)；1.17(m，22H)；1.42(m，2H)；3.13(d，J＝6.2Hz，2H)；4.63(s，2H)；6.45(d，J＝2.2Hz，1H)；6.81(d，J＝2.2Hz，1H)；7.07(s，1H)；7.62(m，3H)；8.11(m，3H)；12.80(s，1H).MS(ESI)507.3([M+H]+).Anal.calc.for C31H41NO5C，73.34；H，8.14；N，2.76％；foundC，73.53；H，8.39；N，2.88％. 實施例十九2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酰正十六胺的制備
制備方法同實施例三，以十六胺代替正己醇，得到淡黃色固體即為最終產(chǎn)物，產(chǎn)率45％。Mp137-139℃.1H-NMR(300MHz，DMSO-d6，δppm)0.82(t，J＝6.8Hz，3H)；1.22(m，26H)；1.41(m，2H)；3.12(d，J＝6.0Hz，2H)；4.63(s，2H)；6.45(d，J＝2.2Hz，1H)；6.81(d，J＝2.2Hz，1H)；7.06(s，1H)；7.62(m，3H)；8.11(m，3H)；12.81(s，1H).MS(ESI)535.3([M+H]+).Anal.calc.for C33H45NO5C，73.99；H，8.47；N，2.61％；foundC，74.42；H，8.63；N，2.44％. 實施例二十2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酰正十八胺的制備
制備方法同實施例三，以十八胺代替正己醇，得到淡黃色固體即為最終產(chǎn)物，產(chǎn)率40％。Mp138-140℃.1H-NMR(300MHz，DMSO-d6，δppm)0.85(t，J＝6.4Hz，3H)；1.22(m，30H)；1.42(m，2H)；3.13(d，J＝6.2Hz，2H)；4.63(s，2H)；6.44(d，J＝2.0Hz，1H)；6.81(d，J＝2.0Hz，1H)；7.05(s，1H)；7.61(m，3H)；8.10(m，3H)；12.80(s，1H).MS(ESI)563.3([M+H]+).Anal.calc.for C35H49NO5C，74.57；H，8.76；N，2.48％；foundC，74.93；H，9.02；N，2.23％. 實施例二十一2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正己酯的體外舒張血管的活性研究 用四腔器官浴槽系統(tǒng)測定2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正己酯的舒張血管活性。
(1)Krebs液(每升)的配制NaCl 6.96g，KCl 0.40g，CaCl20.28g，KH2PO40.062g，MgSO40.144g，NaHCO32.10g，C6H12O62.10g，加三蒸水定容至1000ml。充5％CO2-95％O2混合氣體，調(diào)節(jié)PH值為7.4并使液體恒溫至37℃。
(2)取SD大鼠，腹腔注射肝素抗凝，麻醉后脫臼處死立即取胸主動脈，制備成3-4mm長的血管環(huán)。置于預(yù)先用5％CO2-95％O2的混合氣體飽和的37℃Krebs液生理浴槽內(nèi)。調(diào)節(jié)血管環(huán)基礎(chǔ)張力為2g，每15min換液一次，平衡90min。
(3)加藥將0.6ml濃度為3M/L的KCl溶液加到容積為30mL的水浴槽內(nèi)(KCl終濃度為60mM/L)預(yù)刺激血管環(huán)，待張力平衡后，逐步增加藥物濃度，制作累積濃度舒張曲線。觀察不同濃度2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正己酯(10-6M/L、3×10-6M/L、10-5M/L、3×10-5M/L、10-4M/L)對KCl預(yù)收縮血管環(huán)的舒張反應(yīng)。在血管去內(nèi)皮實驗中，取其中一段標本用細鋼絲插入管腔，滾動破壞血管內(nèi)皮，以標本是否對10-6mol/L的乙酰膽堿產(chǎn)生舒張反應(yīng)作為檢驗血管內(nèi)皮是否存在的標準。本實驗分為去內(nèi)皮組[加入不同濃度的2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正己酯，保留內(nèi)皮組[加入不同濃度的2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正己酯，每組8只大鼠。舒張率用舒張程度占預(yù)收縮程度的百分率表示。
測得的結(jié)果見下表不同濃度2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正己酯對血管環(huán)舒張百分比的影響(mean±SD)
去內(nèi)皮組DMSO與加藥相比，p＜0.05；保留內(nèi)皮組DMSO與加藥相比，p＜0.05。
實施例二十二2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正庚酯體外舒張血管的活性研究 實驗步驟同實施例二十一，用2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正庚酯代替2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正己酯，測得的結(jié)果見下表不同濃度2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正庚酯對血管環(huán)舒張百分比的影響(mean±SD)
去內(nèi)皮組DMSO與加藥相比，p＜0.05；保留內(nèi)皮組DMSO與加藥相比，p＜0.05。
實施例二十三2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正辛酯體外舒張血管的活性研究 實驗步驟同實施例二十一，用2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正辛酯代替2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正己酯，測得的結(jié)果見下表不同濃度2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正辛酯對血管環(huán)舒張百分比的影響(mean±SD)
去內(nèi)皮組DMSO與加藥相比，p＜0.05；保留內(nèi)皮組DMSO與加藥相比，p＜0.05。
實施例二十四2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正壬酯體外舒張血管的活性研究 實驗步驟同實施例二十一，用2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正壬酯代替2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正己酯，測得的結(jié)果見下表不同濃度2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正壬酯對血管環(huán)舒張百分比的影響(mean±SD)
去內(nèi)皮組DMSO與加藥相比，p＜0.05；保留內(nèi)皮組DMSO與加藥相比，p＜0.05。
實施例二十五2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正癸酯體外舒張血管的活性研究 實驗步驟同實施例二十一，用2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正癸酯代替2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正己酯，測得的結(jié)果見下表不同濃度2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正癸酯對血管環(huán)舒張百分比的影響(mean±SD)
去內(nèi)皮組DMSO與加藥相比，p＜0.05；保留內(nèi)皮組DMSO與加藥相比，p＜0.05。
實施例二十六2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正十二醇酯體外舒張血管的活性研究 實驗步驟同實施例二十一，用2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正十二醇酯代替2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正己酯，測得的結(jié)果見下表不同濃度2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正十二醇酯對血管環(huán)舒張百分比的影響(mean±SD)
去內(nèi)皮組DMSO與加藥相比，p＜0.05；保留內(nèi)皮組DMSO與加藥相比，p＜0.05。
實施例二十七2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正十四醇酯體外舒張血管的活性研究 實驗步驟同實施例二十一，用2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正十四醇酯代替2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正己酯，測得的結(jié)果見下表不同濃度2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正十四醇酯對血管環(huán)舒張百分比的影響(mean±SD)
去內(nèi)皮組DMSO與加藥相比，p＜0.05；保留內(nèi)皮組DMSO與加藥相比，p＜0.05。
實施例二十八2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正十六醇酯體外舒張血管的活性研究 實驗步驟同實施例二十一，用2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正十六醇酯代替2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正己酯，測得的結(jié)果見下表不同濃度2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正十六醇酯對血管環(huán)舒張百分比的影響(mean±SD)
去內(nèi)皮組DMSO與加藥相比，p＜0.05；保留內(nèi)皮組DMSO與加藥相比，p＜0.05。
實施例二十九2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正十八醇酯體外舒張血管的活性研究 實驗步驟同實施例二十一，用2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正十八醇酯代替2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正己酯，測得的結(jié)果見下表不同濃度2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正十八醇酯對血管環(huán)舒張百分比的影響(mean±SD)
去內(nèi)皮組DMSO與加藥相比，p＜0.05；保留內(nèi)皮組DMSO與加藥相比，p＜0.05。
實施例三十2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酰正己胺體外舒張血管的活性研究 實驗步驟同實施例二十一，用2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酰正己胺代替2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正己酯，測得的結(jié)果見下表不同濃度2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酰正己胺對血管環(huán)舒張百分比的影響(mean±SD)
去內(nèi)皮組DMSO與加藥相比，p＜0.05；保留內(nèi)皮組DMSO與加藥相比，p＜0.05。
實施例三十一2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酰正庚胺體外舒張血管的活性研究 實驗步驟同實施例二十一，用2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酰正庚胺代替2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正己酯，測得的結(jié)果見下表不同濃度2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酰正庚胺對血管環(huán)舒張百分比的影響(mean±SD)
去內(nèi)皮組DMSO與加藥相比，p＜0.05；保留內(nèi)皮組DMSO與加藥相比，p＜0.05。
實施例三十二2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酰正辛胺體外舒張血管的活性研究 實驗步驟同實施例二十一，用2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酰正辛胺代替2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正己酯，測得的結(jié)果見下表不同濃度2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酰正辛胺對血管環(huán)舒張百分比的影響(mean±SD)
去內(nèi)皮組DMSO與加藥相比，p＜0.05；保留內(nèi)皮組DMSO與加藥相比，p＜0.05。
實施例三十三2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酰正壬胺體外舒張血管的活性研究 實驗步驟同實施例二十一，用2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酰正辛胺代替2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正己酯，測得的結(jié)果見下表不同濃度2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酰正辛胺對血管環(huán)舒張百分比的影響(mean±SD)
去內(nèi)皮組DMSO與加藥相比，p＜0.05；保留內(nèi)皮組DMSO與加藥相比，p＜0.05。
實施例三十四2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酰正癸胺體外舒張血管的活性研究 實驗步驟同實施例二十一，用2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酰正辛胺代替2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正己酯，測得的結(jié)果見下表不同濃度2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酰正辛胺對血管環(huán)舒張百分比的影響(mean±SD)
去內(nèi)皮組DMSO與加藥相比，p＜0.05；保留內(nèi)皮組DMSO與加藥相比，p＜0.05。
實施例三十五2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酰正十二胺體外舒張血管的活性研究 實驗步驟同實施例二十一，用2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酰正辛胺代替2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正己酯，測得的結(jié)果見下表不同濃度2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酰正辛胺對血管環(huán)舒張百分比的影響(mean±SD)
去內(nèi)皮組DMSO與加藥相比，p＜0.05；保留內(nèi)皮組DMSO與加藥相比，p＜0.05。
實施例三十六2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酰正十四胺體外舒張血管的活性研究 實驗步驟同實施例二十一，用2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酰正十四胺代替2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正己酯，測得的結(jié)果見下表不同濃度2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酰正十四胺安息香酸對血管環(huán)舒張百分比的影響(mean±SD)
去內(nèi)皮組DMSO與加藥相比，p＜0.05；保留內(nèi)皮組DMSO與加藥相比，p＜0.05。
實施例三十七2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酰正十六胺體外舒張血管的活性研究 實驗步驟同實施例二十一，2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酰正十六胺代替2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正己酯，測得的結(jié)果見下表 不同濃度2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酰正十六胺對血管環(huán)舒張百分比的影響(mean±SD)
去內(nèi)皮組DMSO與加藥相比，p＜0.05；保留內(nèi)皮組DMSO與加藥相比，p＜0.05。
實施例三十八2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酰正十八胺體外舒張血管的活性研究 實驗步驟同實施例二十一，用2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酰正十八胺代替2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酸正己酯，測得的結(jié)果見下表不同濃度2-(5-羥基-2-苯基-4H-苯并吡喃酮-7-氧基)乙酰正十八胺對血管環(huán)舒張百分比的影響(mean±SD)
去內(nèi)皮組DMSO與加藥相比，p＜0.05；保留內(nèi)皮組DMSO與加藥相比，p＜0.05。
權(quán)利要求
1.一類白楊素長鏈衍生物，其特征是它有如下通式
式中n＝5、6、7、8、9、11、13、15或17。
2.一種權(quán)利要求1所述的白楊素長鏈衍生物的制備方法，其特征是它由下列步驟組成
步驟1.在40ml丙酮溶液中加入1.5g白楊素和1.5g碳酸鉀，緩慢滴加1.5ml溴乙酸乙酯，于50-60℃下反應(yīng)6h，冷卻，抽濾，將濾液旋干，柱層析純化得到黃色固體1.02g；
步驟在30ml DMSO溶液中加入0.5g第一步得到的產(chǎn)物，滴加5％碳酸鈉溶液10ml，在80-90(2下反應(yīng)10h，冷卻，在反應(yīng)體系中加入200ml 10％的稀鹽酸，靜止過夜，抽濾，干燥，得到淡黃色固體；
步驟3.在DMF中加入步驟2得到的產(chǎn)物與長鏈醇或長鏈胺，并加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽作為催化劑，按步驟2得到的產(chǎn)物比長鏈醇或長鏈胺比1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽的物質(zhì)的量之比為1∶1∶1.2的原料比反應(yīng)，在80-90℃下回流反應(yīng)12h，在反應(yīng)體系中加入水和乙酸乙酯，萃取，收集油層，旋干，柱層析純化得到本發(fā)明的白楊素長鏈衍生物。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的白楊素長鏈衍生物的制備方法，其特征是所述步驟1或3中選用的柱層析的洗脫液為乙酸乙酯∶石油醚＝1∶1-1∶10的溶液。
4.權(quán)利要求1所述的白楊素長鏈衍生物在制備抗動脈粥樣硬化藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
一類白楊素長鏈衍生物，其特征是它有如下通式，式中n＝5、6、7、8、9、11、13、15、17。本發(fā)明的白楊素長鏈衍生物，與Lox-1有很強的特異性結(jié)合能力，通過與Lox-1的結(jié)合從而阻斷Lox-1與ox-LDL的結(jié)合，在源頭上阻止ox-LDL對內(nèi)皮細胞的損傷，從根本上消除動脈粥樣硬化的發(fā)生條件。因此本發(fā)明的白楊素長鏈衍生物可以應(yīng)用于制備抗動脈粥樣硬化藥物。本發(fā)明公開了其制法。
文檔編號A61P9/10GK101774994SQ20101011124
公開日2010年7月14日 申請日期2010年1月22日 優(yōu)先權(quán)日2009年8月21日
發(fā)明者朱海亮, 王開銳, 呂鵬程 申請人:南京大學(xué)中國醫(yī)藥城研發(fā)中心