專利名稱：用于治療基質(zhì)金屬蛋白酶9(mmp9)介導(dǎo)的病癥的組合物和方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明總體上涉及金屬蛋白酶和金屬蛋白酶介導(dǎo)的病癥，更具體地涉及基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)、MMP_介導(dǎo)的病癥以及MMP抑制劑和MMP-介導(dǎo)的病癥的治療。特別優(yōu)選的方面涉及通過施用本文所公開的包含至少一種動電學(xué)產(chǎn)生的流體(包括富含氣體(例如富含氧)的動電學(xué)產(chǎn)生的流體)的治療組合物來調(diào)整(例如抑制)MMP (例如MMP9)。相關(guān)申請的交叉引用本申請要求均于2008年10月22日提交的美國臨時專利申請系列號61/107，480 和61/107，453、以及2008年10月M日提交的美國實用新型專利申請系列號12/258,210 的優(yōu)先權(quán)，這兩份申請文件以弓I用方式全文并入本文。
背景技術(shù)：
金屬蛋白酶是蛋白酶(酶)的超家族，被分為家族(families)和亞家族 (subfamilies)，如例如 N. M. Hooper FEBS Letters 3 :1_6，1994 所描述的。金屬蛋白酶的例子包括基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)，例如膠原酶(MMP1、MMP8、MMP13)，明膠酶(MMP2、MMP9)， 間質(zhì)溶解素(MMP3、MMP10、MMP II)，基質(zhì)溶解因子(MMP7)，金屬彈性蛋白酶(MMP12)，溶牙釉質(zhì)素(MMP19)，MT-MMP (MMP14、MMP15、MMP16、MMP17)；包括分泌酶和脫落酶(sheddase) (例如TNF轉(zhuǎn)換酶(ADAM10和TACE))的r印rolysin或蛇毒金屬蛋白酶(adamalysin)或 MDC家族；包括例如前膠原加工蛋白酶(PCP)的蝦紅素家族；以及例如蛋白聚糖酶，內(nèi)皮素轉(zhuǎn)換酶家族和血管緊張素轉(zhuǎn)換酶家族的其他金屬蛋白酶?？傊?，已知金屬蛋白酶裂解寬范圍的基質(zhì)物質(zhì)，例如，膠原蛋白，蛋白聚糖，纖連蛋白。金屬蛋白酶參與生物學(xué)重要的細胞介質(zhì)的加工或分泌，所述細胞介質(zhì)例如腫瘤壞死因子(TNF)；和后翻譯蛋白水解過程或生物學(xué)重要的膜蛋白的脫落，例如，低親和性IgE受體 CD23 (例如參見 N. M. Hooper 等，Biochem. J. 321 :265-279,1997)。不令人驚訝的是，因此，相信金屬蛋白酶在許多生理疾病過程中是重要的，所述生理疾病過程包括組織重塑(例如，胚胎發(fā)育，骨形成，月經(jīng)期間的子宮重塑，破壞血腦屏障等)。而且，抑制一種或多種金屬蛋白酶的活性可在下列疾病或病癥中有益，例如各種炎癥和變應(yīng)性疾病，例如，關(guān)節(jié)炎癥(尤其是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，骨關(guān)節(jié)炎和痛風(fēng))，胃腸道炎癥 (尤其是炎性腸病，潰瘍性結(jié)腸炎和胃炎)，皮膚炎癥(尤其是銀屑病，濕疹，皮炎)；腫瘤轉(zhuǎn)移或侵襲；與細胞外基質(zhì)不受控制的降解有關(guān)的疾病，例如，骨關(guān)節(jié)炎；骨再吸收疾病(例如，骨質(zhì)疏松癥和佩吉特病O^aget’ s disease)；與異常的血管生成有關(guān)的疾??；與糖尿病有關(guān)的增強的膠原蛋白重塑；牙周病(例如牙齦炎)，角膜潰瘍，皮膚潰瘍，術(shù)后病癥(例如結(jié)腸吻合術(shù))和皮膚傷口愈合；中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)的脫髓鞘疾病(例如，多發(fā)性硬化)； 阿爾茨海默?。辉谛难芗膊?例如，再狹窄和動脈粥樣硬化)中觀察到的細胞外基質(zhì)重塑；哮喘；鼻炎以及慢性阻塞性肺病(COPD)。MMP12也被稱為巨噬細胞彈性蛋白酶或金屬彈性蛋白酶，它開始在小鼠中克隆(Shapiro等，Journal of Biological Chemistry 267 :4664，1992)并也已由相同的研究組于1995年在男性中克隆。MMP12優(yōu)先在激活的巨噬細胞中表達并已表現(xiàn)出由吸煙者的肺泡巨噬細胞分泌(Shapiro 等，1993，Journal of Biological Chemistry, 268 :23824)以及在粥樣硬化病變的泡沫細胞中分泌(Matsumoto等，Am. J. Pathol. 153 :109，1998)。COPD的小鼠模型基于吸煙六個月的小鼠(每天兩支煙，一周六天)的激發(fā)。野生小鼠在這種處理后發(fā)展為肺氣腫。當(dāng)測試MMP12敲除的小鼠時，在該模型中沒有發(fā)生顯著的肺氣腫，這強烈地說明MMP12是COPD發(fā)病機制中的關(guān)鍵的酶。COPD中MMP (例如，MMP12)的作用在Anderson 禾口 Shinagawa,1999, Current Opinion in Anti-inflammatory and Immunomodulatory Investigational Drugs 1(1) :29-38中討論。最近發(fā)現(xiàn)吸煙增加在人頸動脈斑塊中巨噬細胞浸潤以及巨噬細胞來源的MMP-12的表達(Matetzky S, Fishbein M C等，Circulation 102 (18)，36-39Suppl. S, Oct. 31,2000)。MMP9-(明膠酶B，92kDa_IV型膠原蛋白酶；92kDa明膠酶)是于1989年首次純化然后克隆并測序的分泌蛋白(S. M. Wilhelm 等，J. Biol. Chem. 264(29) :17213-17221, 1989 ；于J. Biol. Chem. 265(36) =22570,1990中出版勘誤表)(關(guān)于該蛋白酶的詳細信息和參考文獻的綜述請參見 T. H. Vu & Z. Werb (1998)(見Matrix Metalloproteinases (基質(zhì)金屬蛋白酶)，1998，W. C. Parks & R. P. Mecham 編輯，115-148 頁，Academic Press. ISBN0-12-545090-7)。MMP9的表達一般限制于幾種細胞類型，包括滋養(yǎng)母細胞、破骨細胞，中性粒細胞和巨噬細胞(Vu & Werb，同上)。然而，表達可由幾種介質(zhì)在這些相同的細胞和其他細胞類型中誘導(dǎo)，包括細胞暴露于生長因子或細胞因子。這些相同的介質(zhì)通常參與炎癥反應(yīng)的啟動。 如同其他分泌的MMP，MMP9作為無活性酶原被釋放，該無活性酶原隨后裂解以形成酶促的活性酶。體內(nèi)對這種激活所需的蛋白酶還未知?；钚訫MP9相對于無活性酶的平衡進一步在體內(nèi)通過與TIMP-I (金屬蛋白酶-1的組織抑制劑，天然存在的蛋白質(zhì))的相互作用來調(diào)節(jié)。TIMP-I與MMP9的C端區(qū)域結(jié)合，導(dǎo)致MMP9的催化結(jié)構(gòu)域的抑制。MMP9原(ProMMP9) 的誘導(dǎo)表達、MMP9原裂解為活性MMP9以及TIMP-I的存在的平衡結(jié)合起來確定存在于局部部位處的催化活性MMP9的量。蛋白水解活性MMP9攻擊包括明膠、彈性蛋白和天然的IV和 V型膠原蛋白在內(nèi)的底物；其針對天然的I型膠原蛋白、蛋白聚糖或?qū)诱尺B蛋白沒有活性。越來越多的數(shù)據(jù)說明MMP9在各種生理學(xué)和病理學(xué)過程中的作用。生理學(xué)作用包括在胚胎植入的早期胚胎滋養(yǎng)母細胞通過子宮上皮的侵入；在骨生長和發(fā)育中的一些作用；和炎癥細胞從脈管系統(tǒng)移動至組織。使用酶免疫測定法測量，與其他人群相比，來自于未治療的哮喘患者的體液和AM 上清液中的 MMP9 釋放顯著提高(Am. J. Resp. Cell & Mol. Biol.，5 =583-591,1997) 此外， 在某些其他病理學(xué)條件下已觀察到MMP9的表達增加，從而說明MMP9參與許多疾病過程中， 例如C0PD、關(guān)節(jié)炎、腫瘤轉(zhuǎn)移、阿爾茨海默病、多發(fā)性硬化以及導(dǎo)致急性冠狀動脈病癥，諸如心肌梗塞的動脈粥樣硬化斑塊破裂(還參見W007087637A3，在此通過引用并入本文)。最近，已經(jīng)證實與健康對照受試者相比，MMP-9的水平在患有穩(wěn)定性哮喘的患者體內(nèi)顯著增加，甚至在患有急性哮喘的患者體內(nèi)更高。MMP-9在氣道炎性細胞的浸潤和氣道高反應(yīng)性的誘導(dǎo)方面發(fā)揮重要作用，這說明MMP-9可具有誘導(dǎo)和維持哮喘的重要作用 (Vignola 等，Sputum metalloproteinase-9/tissue inhibitor of metalloproteinase-1ratio correlates with airflow obstruction in asthma and chronic bronchitis (疲金屬蛋白酶-9/金屬蛋白酶-1的組織抑制劑的比率與哮喘和慢性支氣管炎中的氣道阻塞相關(guān))，Am J Respir Crit Care Med 158 1945-1950，1998 ;Hoshino 等，hhaled corticosteroids decrease subepithelial collagen deposition by modulation of the balance between matrix metalloproteinase-9 and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 expression in asthma(吸入的皮質(zhì)類固醇通過調(diào)節(jié)哮喘中基質(zhì)金屬蛋白酶-9和金屬蛋白酶-1的組織抑制劑的表達之間的平衡來減少上皮下膠原沉積)， J Allergy Clin Immunol 104 :356-363,1999 ；Simpson 等，Differential proteolytic enzyme activity in eosinophilic and neutrophilic asthma(在嗜酸性禾口嗜中性哮喘中不同的蛋白水解酶活性)，Am J Respir Crit Care Med 172 :559_565，2005 ;Lee 等，A murine model of toluene diisocyanate-induced asthma can be treated with matrix metalloproteinase inhibitor(甲苯二異氰酸酯誘發(fā)哮喘的鼠模型可以用基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑治療)，J Allergy Clin Immunol 108 :1021_1(^6，2001 ；和 Lee 等人，Matrix metalloproteinase inhibitor regulates inflammatory cell migration by reducing ICAM-I and VCAM-I expression in a murine model of toluene diisocyanate-induced aSthma(基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑通過減少甲苯二異氰酸酯誘發(fā)哮喘的鼠模型中ICAM-I和 VCAM-I 表達來調(diào)節(jié)炎性細胞遷移)，J Allergy Clin Immunol 2003 ；111 :1278-1284)。發(fā)明概述具體方面提供了用于治療MMP9介導(dǎo)的病癥或疾病的方法，該方法包括向需要所述方法的哺乳動物施用治療有效量的動電學(xué)改變的水性流體，所述水性流體包含電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)的離子水性溶液，所述電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)基本上具有小于大約100 納米的平均直徑，并且以足以治療MMP9介導(dǎo)的病癥或疾病的量穩(wěn)定地配置在所述離子水性流體中。在某些方面中，所述電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)以在所述流體與活細胞相接觸時足以提供對細胞膜電位和細胞膜電導(dǎo)率中的至少一種的調(diào)整的量穩(wěn)定地配置在所述離子水性流體中。在某些方法方面中，所述電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)是所述流體中主要的電荷穩(wěn)定的含氣體納米結(jié)構(gòu)物種。在具體的實施方案中，所述流體中作為所述電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)存在的溶解氧分子的百分比是選自由以下各項組成的組的百分比大于0.01%、大于 0. 1%、大于1%、大于5% ；大于10% ；大于15% ；大于20% ；大于25% ；大于30% ；大于 35% ；大于40% ；大于45% ；大于50% ；大于55% ；大于60% ；大于65% ；大于70% ；大于 75% ；大于80% ；大于85% ；大于90% ；和大于95%。在具體的方面中，全部的溶解氧基本上以所述電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)存在。在某些實施方案中，所述電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)基本上具有小于選自由以下各項組成的組的尺寸的平均直徑90nm ；80nm ；70nm ；60nm ； 50nm ； 40nm ； 30nm ； 20nm ； IOnm ；禾口小于 5nm。在具體的方法方面中，所述離子水溶液包括鹽水溶液。在某些方面中，所述動電學(xué)改變的水性流體是超氧合的。在具體的方法方面中，所述動電學(xué)改變的水性流體包括溶劑化電子的形式。在某些方面中，所述動電學(xué)改變的水性流體的改變包括所述流體暴露于流體動力誘導(dǎo)的局部動電學(xué)效應(yīng)。在某些實施方案中，暴露于所述局部動電學(xué)效應(yīng)包括暴露于電壓脈沖和電流脈沖中的至少一種。在具體的方面中，所述流體暴露于流體動力誘導(dǎo)的局部動電學(xué)效應(yīng)包括所述流體暴露于用以產(chǎn)生所述流體的裝置的誘導(dǎo)動電學(xué)效應(yīng)的結(jié)構(gòu)部件。在具體的方面中，MMP9介導(dǎo)的病癥或疾病包括阻塞性氣道疾病(obstructive airways disease)，包括但不限于哮喘和慢性阻塞性肺病。在具體的方面中，MMP9介導(dǎo)的病癥或疾病包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、動脈粥樣硬化、癌癥和多發(fā)性硬化癥中的至少一種。在某些實施方案中，MMP9介導(dǎo)的病癥或疾病包括以MMP9的持久或持續(xù)表達和/或活性為特征的外周或中樞神經(jīng)系統(tǒng)的至少一種疾病或紊亂，所述疾病或紊亂選自由以下各項組成的組哺乳動物中的阿爾茨海默病(Alzheimer' s disease)、卒中/腦缺血、頭部創(chuàng)傷、脊髓損傷、多發(fā)性硬化癥、肌萎縮性側(cè)索硬化癥、亨廷頓病(Huntington' s disease), 帕金森病(Parkinson' s disease)、偏頭痛、腦淀粉樣血管病、AIDS、年齡相關(guān)的認知損害 (age-related cognitive decline)、輕度認知損害禾口朊病毒病。在某些方面中，所述方法還包括聯(lián)合療法，其中將至少一種另外的治療劑施用于患者。在具體的實施方案中，所述至少一種另外的治療劑包括施用至少一種MMP的另外的抑制劑。在某些方面中，所述至少一種MMP選自由以下各項組成的組ΜΜΡ-1、ΜΜΡ-2、ΜΜΡ-7、 MMP-8、MMP-9、MMP-10、MMP-11、MMP-12、MMP-13、MMP-14、MMP-15、MMP-16、MMP-17、MMP-18、 MMP-19 禾Π ΜΜΡ-20ΜΜΡ-1、MMP—2、MMP—3、MMP—7、MMP—8、MMP—9、MMP-10、MMP-IU ΜΜΡ—12、 MMP-13、MMP-14、MMP-15、MMP-16、MMP-17、MMP-18、ΜΜΡ-19 和 MMP-20。在具體的方面中，所述至少一種另外的治療劑為TSLP和/或TSLPR拮抗劑，且在具體的實施方案中，所述TSLP 和/或TSLPR拮抗劑選自由下列各項組成的組對TSLP與TSLP受體特異的中和抗體、可溶性TSLP受體分子和TSLP受體融合蛋白，包括TSLPR-免疫球蛋白Fc分子或編碼超過一個受體鏈的組分的多肽。在某些方面中，所述至少一種另外的治療劑選自由以下各項組成的組標準的非甾體抗炎藥(NSAID' S)、吡羅昔康(piroxicam)、雙氯芬酸(diclofenac)；丙酸、萘普生 (naproxen)、氟苯布洛芬(flubiprofen)、非諾洛芬(fenoprofen)、酮洛芬(ketoprofen) 和布洛芬(ibuprofen)；芬那酯(fenamate)、甲芬那酸(mefenamic acid)、吲哚美辛 (indomethacin)、舒林酸(sulindac)、阿扎丙宗(apazone) ；口比唾琳麗(pyrazolone)、保泰松(phenylbutazone)；水楊酸鹽(salicylate)、阿司匹林；止痛劑或關(guān)節(jié)內(nèi)療法、皮質(zhì)類固醇；透明質(zhì)酸、海爾根(hyalgan)、欣維可(synvisc)；免疫抑制劑、環(huán)孢霉素、干擾素； TNF-α 抑制劑、Enbrel ；低劑量的甲氨蝶呤、lefunimide、羥氯喹(hydroxychloroquine)、 d-青霄胺(d-penicilamine)、金諾芬(auranofin)、腸胃夕卜金(parenteral gold)禾口口月艮金 (oral gold)。在具體的實施方案中，所述至少一種另外的治療劑選自由以下各項組成的CNS藥劑組抗抑郁劑、舍曲林(sertraline)、氟西汀(fluoxetine)、帕羅西汀(paroxetine)； 抗震顫麻痹藥(anti-Parkinsonian drug)；鹽酸司來吉蘭(d印renyl)、L-多巴、羅匹尼羅(requip)、普拉克索(miratex) ；MAOB抑制劑、司來吉蘭(selegine)、雷沙吉蘭 (rasagiline) ；COMP 抑制劑、托卡朋(tolcapone)、答是美(Tasmar) ；A-2 抑制劑、多巴胺再攝取抑制劑、NMDA拮抗劑、尼古丁激動劑、多巴胺激動劑、神經(jīng)型一氧化氮合酶抑制劑、抗阿爾茨海默病藥(anti-Alzheimer' s drug)；乙酰膽堿酯酶抑制劑、美曲膦酯 (metrifonate)、多奈哌齊(donepezil)、安理申(Aric^pt)、艾斯能(Exelon)、ENA713或利凡斯 的明(rivastigmine)；四氧氨基口丫唆(tetrahydroaminoacridine)、他克林 (Tacrine)、鹽酸他克林(Cognex)或 THA ；COX-1 或 C0X-2 抑制劑、塞來考昔(celecoxib)、 西樂葆(Celebrex)、羅非考昔(rofecoxib)、萬絡(luò)(Vioxx)；丙戊茶堿(propentofylline)、 抗卒中藥物、NR2B選擇性拮抗劑、甘氨酸位點拮抗劑、以及嗜中性粒細胞抑制因子(NIF)。在某些方面中，所述至少一種另外的治療劑選自由以下各項組成的組雌激素； 選擇性雌激素調(diào)節(jié)劑、雌激素、雷洛昔芬(raloxifene)、他莫昔芬(tamoxifene)、屈洛昔芬(droloxifene)、拉索昔芬(Iasofoxifene)；導(dǎo)致 Α. β . 1-40/1-42 減少的藥劑、淀粉樣蛋白聚集抑制劑(amyloid aggregation inhibitor)、分泌酶抑制劑；骨質(zhì)疏松癥藥齊[J (osteoporosis agent)、屈洛昔芬(droloxifene)、fosomax ；免疫抑制劑、FK-506、 雷帕霉素(rapamycin)；抗癌劑、內(nèi)皮抑素(endostatin)、血管抑素(angiostatin)； 細胞毒素藥(cytotoxic drug)、多柔比星(adriamycin)、道諾霉素(daunomycin)、 順鉬(cis-platinum)、依托泊苷(etoposide)、紫杉醇(taxol)、泰素帝(taxotere)； 生物堿(alkaloid)、長春新堿(vincristine)；抗代謝藥(antimetabolite)、甲氨蝶呤(methotrexate)；心血管藥劑、鈣通道阻斷藥(calcium channel blocker)；降血脂藥劑(lipid lowering agent)、抑制素(statin)；貝特類(fibrate)、β 阻滯藥 (beta-blocker), ACE抑制劑、血管緊張素_2受體拮抗劑以及血小板聚集抑制劑。在具體的方法方面中，調(diào)整細胞膜電位和細胞膜電導(dǎo)率中的至少一種包括改變細胞膜結(jié)構(gòu)或功能中的至少一種，所述改變細胞膜結(jié)構(gòu)或功能包括改變膜相關(guān)蛋白或構(gòu)成成分的構(gòu)象、配體結(jié)合活性和催化活性中的至少一種。在某些方面中，所述膜相關(guān)蛋白包括選自由以下各項組成的組的至少一種受體、跨膜受體、離子通道蛋白、細胞內(nèi)附著蛋白、細胞黏附蛋白、整聯(lián)蛋白(integrin)等。在某些實施方案中，所述跨膜受體包括G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)。在具體的方面中，所述G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)與G蛋白α亞基相互作用，例如，其中G蛋白α亞基包括選自由以下各項組成的組的至少一種6\、6、、6%和6012， 并且在某些實施方案中，所述至少一種G蛋白α亞基是Ga,。在具體的方法方面中，調(diào)整細胞膜電位和細胞膜電導(dǎo)率中的至少一種包括調(diào)整全細胞電導(dǎo)，例如，其中調(diào)整全細胞電導(dǎo)包括調(diào)整所述全細胞電導(dǎo)的線性和非線性電壓依賴性貢獻中的至少一種。在某些方法方面中，調(diào)整細胞膜電位和細胞膜電導(dǎo)率中的至少一種包括調(diào)整鈣依賴性細胞信息傳遞途徑或系統(tǒng)。在某些方法方面中，調(diào)整細胞膜電位和細胞膜電導(dǎo)率中的至少一種包括調(diào)整磷脂酶C活性。在某些方法方面中，調(diào)整細胞膜電位和細胞膜電導(dǎo)率中的至少一種包括調(diào)整腺苷酸環(huán)化酶(AC)活性。在某些方法方面中，調(diào)整細胞膜電位和細胞膜電導(dǎo)率中的至少一種包括調(diào)整與選自由以下各項組成的組的至少一種病癥或癥狀有關(guān)的細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)阻塞性氣道疾病、慢性阻塞性肺病、哮喘、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、 動脈粥樣硬化、癌癥、多發(fā)性硬化癥、阿爾茨海默病、卒中/腦缺血、頭部創(chuàng)傷、脊髓損傷、肌萎縮性側(cè)索硬化癥、亨廷頓病、帕金森病、偏頭痛、腦淀粉樣血管病、AIDS、年齡相關(guān)的認知損害；輕度認知損害和朊病毒病。具體的方法方面包括將所述動電學(xué)流體施用于細胞網(wǎng)絡(luò)或?qū)樱⑶疫€包括調(diào)整其中的細胞間連接。在某些實施方案中，所述細胞間連接包括選自由緊密連接、間隙連接、黏附區(qū)(zona adherin)和橋粒(desmasome)組成的組的至少一種。在具體的方面中，所述細胞網(wǎng)絡(luò)或?qū)影ㄟx自由肺上皮細胞、支氣管上皮細胞和腸上皮細胞組成的組的至少一種。在某些方法方面中，所述動電學(xué)改變的水性流體是氧合的，其中所述流體中的氧在大氣壓下以至少％)pm、至少Mppm、至少^ppm、至少30ppm、至少40ppm、至少50ppm或至少60ppm氧的量存在。在某些方法方面中，所述動電學(xué)改變的水性流體包括溶劑化電子、和動電學(xué)改性或荷電的氧物種中的至少一種，例如，其中所述溶劑化電子或者動電學(xué)改性或荷電的氧物種的形式以至少0. Olppm、至少0. lppm、至少0. 5ppm、至少lppm、至少3ppm、至少5ppm、至少 7ppm、至少lOppm、至少15ppm或至少20ppm的量存在。在某些方面中，所述動電學(xué)改變的水性流體包括由分子氧穩(wěn)定的溶劑化電子的形式。在某些方面中，所述動電學(xué)改變的流體調(diào)整細胞膜電位和細胞膜電導(dǎo)率中的至少一種的能力在封閉的氣密容器中持續(xù)至少2個月、至少3個月、至少4個月、至少5個月、至少6個月、至少12個月或更長時期。在某些方面中，在所述動電學(xué)改變的流體的電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)中存在的氧的量為在大氣壓下至少8ppm、至少15ppm、至少20ppm、至少25ppm、至少30ppm、至少40ppm、 至少50ppm或者至少60ppm氧。在具體的方面中，治療包括通過局部、吸入、鼻內(nèi)和靜脈內(nèi)中的至少一種方式施用。附圖簡述

圖1示出本發(fā)明的動電學(xué)產(chǎn)生的流體(例如，Rev-60和Solas)分別減少支氣管上皮細胞(BEC)中的DEP誘導(dǎo)的TSLP受體表達大約90%和50%，而生理鹽水(賂)僅有邊
際效應(yīng)。圖2示出本發(fā)明的動電學(xué)產(chǎn)生的流體(例如，Revera 60和Solas)分別抑制支氣管上皮細胞中的DEP誘導(dǎo)的細胞表面結(jié)合的MMP9水平大約80%和70%，而生理鹽水(NS) 僅有邊際效應(yīng)。圖3A-C證實一系列膜片鉗實驗的結(jié)果，所述實驗在兩個時間點(15分鐘(左圖板)和2小時(右圖板))和不同的電壓方案中評價動電學(xué)產(chǎn)生的流體(例如，RNS-60和 Solas)對上皮細胞膜極性和離子通道活性的作用。關(guān)于圖3A-C所涉及的實驗，圖4A-C示出在3種電壓方案中(A，從OmV階躍；B， 從-60mV階躍；C，從-120mV階躍)和2個時間點(15分鐘(空心圓)和2小時(實心圓))， RNS-60電流數(shù)據(jù)減去Solas電流數(shù)據(jù)所得到的圖。圖5A-D證實一系列膜片鉗實驗的結(jié)果，所述實驗利用不同的外部鹽溶液和在不同的電壓方案中(圖板A和C顯示從OmV的階躍；圖板B和D顯示從_120mV的階躍)評價動電學(xué)產(chǎn)生的流體(例如，Solas (圖板A和B)和RNS-60(圖板C和D))對上皮細胞膜極性和離子通道活性的作用。關(guān)于圖5A-D所涉及的實驗，圖6A-D示出對于Solas (圖板A和B)和Revera 60 (圖板C和D)，在2種電壓方案中(圖板A和C，從OmV階躍；圖板B和D，從_120mV階躍)從 20mM CaCl2 (菱形符號)和40mM CaCl2 (方形符號)電流數(shù)據(jù)中減去CsCl電流數(shù)據(jù)(顯示于圖5中)所得到的圖。圖7A和B證明了膜片鉗試驗的結(jié)果，所述試驗評價了稀釋動電學(xué)產(chǎn)生的流體(例如，RNS-60)對上皮細胞膜極性和離子通道活性的作用。發(fā)明詳述本發(fā)明提供了用于治療MMP9介導(dǎo)的病癥或疾病的方法，該方法包括施用動電學(xué)改變的水性流體，所述水性流體包含電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)的離子水性溶液，所述電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)基本上具有小于大約100納米的平均直徑，并且以足以治療MMP9介導(dǎo)的病癥或疾病的量穩(wěn)定地配置在所述離子水性流體中。所述電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)優(yōu)選地以足以提供對細胞膜電位和/或細胞膜電導(dǎo)率的調(diào)整的量穩(wěn)定地配置在所述流體中。包括調(diào)整或下調(diào)MMP9的表達和/或活性的某些方面具有用于治療本文所公開的MMP9介導(dǎo)的疾病或病癥(例如阻塞性氣道疾病、慢性阻塞性肺病、哮喘、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、動脈粥樣硬化、癌癥、多發(fā)性硬化癥、阿爾茨海默病、卒中/腦缺血、頭部創(chuàng)傷、脊髓損傷、肌萎縮性側(cè)索硬化癥、亨廷頓病、帕金森病、偏頭痛、腦淀粉樣血管病、AIDS、年齡相關(guān)的認知損害、輕度認知損害以及朊病毒病)的用途。用于制備本文使用的動電學(xué)產(chǎn)生的流體的方法之前已經(jīng)有所描述(例如參見 US-2008-0219088、PCT/US2007/082578)，該文獻以引用方式全文并入本文。具體的方面提供了用于治療MMP(例如，MMP9)介導(dǎo)的疾病或病癥的方法，該方法包括向需要所述方法的受試者施用治療有效量的包含本文所公開的至少一種動電學(xué)產(chǎn)生的流體(包括富含氣體(例如富含氧)的動電學(xué)產(chǎn)生的流體)的組合物。其他方面提供了用于治療阻塞性氣道疾病的方法，該方法包括施用包含本文所公開的至少一種動電學(xué)產(chǎn)生的流體(包括富含氣體(例如富含氧)的動電學(xué)產(chǎn)生的流體)的治療組合物。在具體的實施方案中，阻塞性氣道疾病包括哮喘和慢性阻塞性肺病中的至少一種。具體的方面包括治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、動脈粥樣硬化、癌癥和多發(fā)性硬化癥中的至少一種。其他方面提供了具有用于治療C0PD、關(guān)節(jié)炎、腫瘤轉(zhuǎn)移、阿爾茨海默病、多發(fā)性硬化癥、以及動脈粥樣硬化中的斑塊破裂從而導(dǎo)致急性冠狀動脈病癥(例如心肌梗塞)的實質(zhì)效用的新型方法和組合物。所述新型方法具有用于治療以MMP9的持久或持續(xù)表達和/ 或活化為特征的外周或中樞神經(jīng)系統(tǒng)的疾病或紊亂的效用，所述疾病或紊亂包括但不限于哺乳動物中的阿爾茨海默病、卒中/腦缺血、頭部創(chuàng)傷、脊髓損傷、多發(fā)性硬化癥、肌萎縮性側(cè)索硬化癥、亨廷頓病、帕金森病、偏頭痛、腦淀粉樣血管病、AIDS、年齡相關(guān)的認知損害、輕度認知損害以及朊病毒病，所述方法包括向所述哺乳動物施用治療有效量的本文所公開的 MMP9抑制劑。本發(fā)明的具體方面提供了具有用于治療認知損傷(例如癡呆、老年個體中的認知損害、阿爾茨海默病等)的實質(zhì)效用的新型方法和組合物。優(yōu)選的是，使用本文所述的 MMP-9的抑制劑。其他方面提供了治療MMP9介導(dǎo)的疾病或病癥的方法，該方法包括向需要所述方法的受試者施用治療有效量的包含本文所公開的至少一種動電學(xué)產(chǎn)生的流體(包括富含氣體(例如富含氧)的動電學(xué)產(chǎn)生的流體)的組合物，并聯(lián)合施用至少一種其他MMP的另外的抑制劑(例如 MMP-1、MMP-2、MMP-7、MMP-8、MMP-9、MMP-10、MMP-11、MMP-12、MMP-13、 MMP-14、MMP-15、MMP—16、MMP—17、MMP—18、MMP-19 禾Π ΜΜΡ-20ΜΜΡ—1、ΜΜΡ—2、ΜΜΡ—3、ΜΜΡ—7、 MMP-8、MMP-9、MMP-10、MMP—11、MMP—12、MMP—13、MMP—14、MMP—15、MMP—16、MMP—17、MMP—18、MMP-19和MMP-20等的抑制劑)。在具體的實施方案中，至少一種另外的基質(zhì)金屬蛋白酶 (MMP)抑制劑適用于抑制具有特征性的升高的表達或活性的至少一種MMP。在另外的實施方案中，至少一種基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)抑制劑適用于抑制具有特征性的升高的表達或活性的至少兩種MMP。在某些實施方案中，至少一種基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)抑制劑是MMP特異性的，或者對特定的MMP具有實質(zhì)上的特異性，或者抑制了有限數(shù)量的MMP(例如1種至 2種MMP、1種至3種MMP、或者大約1種至大約4種MMP)。在某些實施方案中，至少一種基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)抑制劑為抑制至少3種或者至少4種MMP (例如，具有特征性的升高的表達或活性)的廣譜MMP抑制劑。優(yōu)選的示例性實施方案具體的方面提供了用于治療MMP9介導(dǎo)的病癥或疾病的方法，該方法包括需要所述方法的哺乳動物施用治療有效量的動電學(xué)改變的水性流體，該水性流體包含電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)的離子水性溶液，所述電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)基本上具有小于大約100納米的平均直徑，并且以足以治療MMP9介導(dǎo)的病癥或疾病的量穩(wěn)定地配置在所述離子水性流體中。在某些方面中，所述電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)以在所述流體與活細胞相接觸時足以提供對細胞膜電位和細胞膜電導(dǎo)率中的至少一種的調(diào)整的量穩(wěn)定地配置在所述離子水性流體中。在某些方法方面中，所述電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)是所述流體中主要的電荷穩(wěn)定的含氣體納米結(jié)構(gòu)物種。在具體的實施方案中，所述流體中作為所述電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)存在的溶解氧分子的百分比是選自由以下各項組成的組的百分比大于0.01%、大于 0. 1%、大于1%、大于5% ；大于10% ；大于15% ；大于20% ；大于25% ；大于30% ；大于 35% ；大于40% ；大于45% ；大于50% ；大于55% ；大于60% ；大于65% ；大于70% ；大于 75% ；大于80% ；大于85% ；大于90% ；和大于95%。在具體的方面中，全部的溶解氧基本上以所述電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)存在。在某些實施方案中，所述電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)基本上具有小于選自由以下各項組成的組的尺寸的平均直徑90nm ；80nm ；70nm ；60nm ； 50nm ； 40nm ； 30nm ； 20nm ； IOnm ；禾口小于 5nm。在具體的方法方面中，所述離子水溶液包括鹽水溶液。在某些方面中，所述動電學(xué)改變的水性流體是超氧合的。在具體的方法方面中，所述動電學(xué)改變的水性流體包括溶劑化電子的形式。在某些方面中，所述動電學(xué)改變的水性流體的改變包括所述流體暴露于流體動力誘導(dǎo)的局部動電學(xué)效應(yīng)。在某些實施方案中，暴露于所述局部動電學(xué)效應(yīng)包括暴露于電壓脈沖和電流脈沖中的至少一種。在具體的方面中，所述流體暴露于流體動力誘導(dǎo)的局部動電學(xué)效應(yīng)包括所述流體暴露于用以產(chǎn)生所述流體的裝置的誘導(dǎo)動電學(xué)效應(yīng)的結(jié)構(gòu)部件。在具體的方面中，MMP9介導(dǎo)的病癥或疾病包括阻塞性氣道疾病，包括但不限于哮喘和慢性阻塞性肺病。在具體的方面中，MMP9介導(dǎo)的病癥或疾病包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、動脈粥樣硬化、癌癥和多發(fā)性硬化癥中的至少一種。在某些實施方案中，MMP9介導(dǎo)的病癥或疾病包括以MMP9的持久或持續(xù)表達和/或活性為特征的外周或中樞神經(jīng)系統(tǒng)的至少一種疾病或紊亂，所述疾病或紊亂選自由以下各項組成的組哺乳動物中的阿爾茨海默病、卒中/腦缺血、頭部創(chuàng)傷、脊髓損傷、多發(fā)性硬化癥、肌萎縮性側(cè)索硬化癥、亨廷頓病、帕金森病、偏頭痛、腦淀粉樣血管病、AIDS、年齡相關(guān)的認知損害、輕度認知損害和朊病毒病。
在某些方面中，所述方法還包括聯(lián)合療法，其中將至少一種另外的治療劑施用于患者。在具體的實施方案中，所述至少一種另外的治療劑包括施用至少一種MMP的另外的抑制劑。在某些方面中，所述至少一種MMP選自由以下各項組成的組ΜΜΡ-1、ΜΜΡ-2、ΜΜΡ-7、 MMP-8、MMP-9、MMP-10、MMP-11、MMP-12、MMP-13、MMP-14、MMP-15、MMP-16、MMP-17、MMP-18、 MMP-19 禾Π ΜΜΡ-20ΜΜΡ-1、MMP—2、MMP—3、MMP—7、MMP—8、MMP—9、MMP-10、MMP-IU ΜΜΡ—12、 MMP-13、MMP-14、MMP-15、MMP-16、MMP-17、MMP-18、ΜΜΡ-19 和 MMP-20。在具體的方面中，所述至少一種另外的治療劑為TSLP和/或TSLPR拮抗劑，且在具體的實施方案中，所述TSLP 和/或TSLPR拮抗劑選自由下列各項組成的組對TSLP與TSLP受體特異的中和抗體、可溶性TSLP受體分子和TSLP受體融合蛋白，包括TSLPR-免疫球蛋白Fc分子或編碼超過一個受體鏈的組分的多肽。在某些方面中，所述至少一種另外的治療劑選自由以下各項組成的組標準的非甾體抗炎藥(NSAID' S)、吡羅昔康、雙氯芬酸；丙酸、萘普生、氟苯布洛芬、非諾洛芬、酮洛芬和布洛芬；芬那酯、甲芬那酸、吲哚美辛、舒林酸、阿扎丙宗；吡唑啉酮、保泰松；水楊酸鹽、阿司匹林；止痛劑或關(guān)節(jié)內(nèi)療法、皮質(zhì)類固醇；透明質(zhì)酸、海爾根、欣維可；免疫抑制劑、 環(huán)孢霉素、干擾素；TNF-α抑制劑、Enbrel ；低劑量的甲氨蝶呤、Iefimimide、羥氯喹、d_青霉胺、金諾芬、腸胃外金和口服金。在具體的實施方案中，所述至少一種另外的治療劑選自由以下各項組成的CNS藥劑組抗抑郁劑、舍曲林、氟西汀、帕羅西??；抗震顫麻痹藥；鹽酸司來吉蘭、L-多巴、羅匹尼羅、普拉克索；MAOB抑制劑、司來吉蘭、雷沙吉蘭；COMP抑制劑、托卡朋、答是美；A-2抑制劑、多巴胺再攝取抑制劑、NMDA拮抗劑、尼古丁激動劑、多巴胺激動劑、神經(jīng)型一氧化氮合酶抑制齊IJ、抗阿爾茨海默病藥；乙酰膽堿酯酶抑制齊 、美曲膦酯、多奈哌齊、安理申、艾斯能、 ΕΝΑ713或利凡斯的明；四氫氨基吖啶、他克林、鹽酸他克林或THA ；C0X-1或C0X-2抑制劑、 塞來考昔、西樂葆、羅非考昔、萬絡(luò)；丙戊茶堿、抗卒中藥物、NR2B選擇性拮抗劑、甘氨酸位點拮抗劑、以及嗜中性粒細胞抑制因子(NIF)。在某些方面中，所述至少一種另外的治療劑選自由以下各項組成的組雌激素；選擇性雌激素調(diào)節(jié)劑、雌激素、雷洛昔芬、他莫昔芬、屈洛昔芬、拉索昔芬；導(dǎo)致 Α. β. 1-40/1-42減少的藥劑、淀粉樣蛋白聚集抑制劑、分泌酶抑制劑；骨質(zhì)疏松癥藥劑、屈洛昔芬、fosomax ；免疫抑制劑、FK-506、雷帕霉素；抗癌劑、內(nèi)皮抑素、血管抑素；細胞毒素藥、多柔比星、道諾霉素、順鉬、依托泊苷、紫杉醇、泰素帝；生物堿、長春新堿；抗代謝藥、甲氨蝶呤；心血管藥劑、鈣通道阻斷藥；降血脂藥劑、抑制素；貝特類、β阻滯藥、ACE抑制劑、 血管緊張素-2受體拮抗劑以及血小板聚集抑制劑。在具體的方法方面中，調(diào)整細胞膜電位和細胞膜電導(dǎo)率中的至少一種包括改變細胞膜結(jié)構(gòu)或功能中的至少一種，所述改變細胞膜結(jié)構(gòu)或功能包括改變膜相關(guān)蛋白或構(gòu)成成分的構(gòu)象、配體結(jié)合活性和催化活性中的至少一種。在某些方面中，所述膜相關(guān)蛋白包括選自由以下各項組成的組的至少一種受體、跨膜受體、離子通道蛋白、細胞內(nèi)附著蛋白、細胞黏附蛋白、整聯(lián)蛋白等。在某些實施方案中，所述跨膜受體包括G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)。在具體的方面中，所述G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)與G蛋白α亞基相互作用，例如，其中G蛋白 α亞基包括選自由以下各項組成的組的至少一種Giis、G α ”G α ,和G α 12，并且在某些實施方案中，所述至少一種G蛋白α亞基是Ga
在具體的方法方面中，調(diào)整細胞膜電位和細胞膜電導(dǎo)率中的至少一種包括調(diào)整全細胞電導(dǎo)，例如，其中調(diào)整全細胞電導(dǎo)包括調(diào)整所述全細胞電導(dǎo)的線性和非線性電壓依賴性貢獻中的至少一種。在某些方法方面中，調(diào)整細胞膜電位和細胞膜電導(dǎo)率中的至少一種包括調(diào)整鈣依賴性細胞信息傳遞途徑或系統(tǒng)。在某些方法方面中，調(diào)整細胞膜電位和細胞膜電導(dǎo)率中的至少一種包括調(diào)整磷脂酶C活性。在某些方法方面中，調(diào)整細胞膜電位和細胞膜電導(dǎo)率中的至少一種包括調(diào)整腺苷酸環(huán)化酶(AC)活性。在某些方法方面中，調(diào)整細胞膜電位和細胞膜電導(dǎo)率中的至少一種包括調(diào)整與選自由以下各項組成的組的至少一種病癥或癥狀有關(guān)的細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)阻塞性氣道疾病、慢性阻塞性肺病、哮喘、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、 動脈粥樣硬化、癌癥、多發(fā)性硬化癥、阿爾茨海默病、卒中/腦缺血、頭部創(chuàng)傷、脊髓損傷、肌萎縮性側(cè)索硬化癥、亨廷頓病、帕金森病、偏頭痛、腦淀粉樣血管病、AIDS、年齡相關(guān)的認知損害；輕度認知損害和朊病毒病。具體的方法方面包括將所述動電學(xué)流體施用于細胞網(wǎng)絡(luò)或?qū)?，并且還包括調(diào)整其中的細胞間連接。在某些實施方案中，所述細胞間連接包括選自由緊密連接、間隙連接、黏附區(qū)和橋粒組成的組的至少一種。在具體的方面中，所述細胞網(wǎng)絡(luò)或?qū)影ㄟx自由肺上皮細胞、支氣管上皮細胞和腸上皮細胞組成的組的至少一種。在某些方法方面中，所述動電學(xué)改變的水性流體是氧合的，其中所述流體中的氧在大氣壓下以至少％)pm、至少Mppm、至少^ppm、至少30ppm、至少40ppm、至少50ppm或至少60ppm氧的量存在。在某些方法方面中，所述動電學(xué)改變的水性流體包括溶劑化電子、和動電學(xué)改性或荷電的氧物種中的至少一種，例如，其中所述溶劑化電子或者動電學(xué)改性或荷電的氧物種的形式以至少0. Olppm、至少0. lppm、至少0. 5ppm、至少lppm、至少3ppm、至少5ppm、至少 7ppm、至少lOppm、至少15ppm或至少20ppm的量存在。在某些方面中，所述動電學(xué)改變的水性流體包括由分子氧穩(wěn)定的溶劑化電子的形式。在某些方面中，所述動電學(xué)改變的流體調(diào)整細胞膜電位和細胞膜電導(dǎo)率中的至少一種的能力在封閉的氣密容器中持續(xù)至少2個月、至少3個月、至少4個月、至少5個月、至少6個月、至少12個月或更長時期。在某些方面中，在所述動電學(xué)改變的流體的電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)中存在的氧的量為在大氣壓下至少8ppm、至少15ppm、至少20ppm、至少25ppm、至少30ppm、至少40ppm、 至少50ppm或者至少60ppm氧。在具體的方面中，治療包括通過局部、吸入、鼻內(nèi)和靜脈內(nèi)中的至少一種方式施用。動電學(xué)產(chǎn)生的流體如本文所用的“動電學(xué)產(chǎn)生的流體”是指出于本文工作實施例的目的通過本文詳細描述的示例性混合裝置(還參見US200802190088和W02008/052143，通過引用將二者整體并入本文)而產(chǎn)生的申請人發(fā)明的動電學(xué)產(chǎn)生的流體。如本文公開和呈現(xiàn)的資料所證明，動電學(xué)流體表示相對于現(xiàn)有技術(shù)非動電學(xué)流體，包括相對于現(xiàn)有技術(shù)氧合的非動電學(xué)流體(例如壓力罐氧合的流體及類似物)的新穎的且從根本上不同的流體。如在本文各方面中所公開的那樣，動電學(xué)產(chǎn)生的流體具有獨特且新穎的物理和生物特性，包括但不限于以下在具體的方面，動電學(xué)改變的水性流體包含電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)的離子水性溶液，所述納米結(jié)構(gòu)基本上具有小于約100納米的平均直徑并以足以在流體與活細胞接觸時提供對細胞膜電位和細胞膜電導(dǎo)率中的至少一種的調(diào)整的量穩(wěn)定地配置在離子水性流體中。在具體的方面，動電學(xué)產(chǎn)生的流體是指在流體動力誘導(dǎo)的、局部化(例如就全部流體體積而言是非均一的)的動電學(xué)效應(yīng)(例如電壓/電流的脈沖)例如本文所述的裝置部件-局部化效應(yīng)的存在下產(chǎn)生的流體。在具體的方面，所述流體動力誘導(dǎo)的、局部化的動電學(xué)效應(yīng)與本文公開并討論的表面相關(guān)的雙層和/或流動電流效應(yīng)組合。在具體的方面，動電學(xué)改變的水性流體適合于調(diào)整其中溶解的報告溶質(zhì)(例如海藻糖(trehelose))的13C-NMR線寬。NMR線寬效應(yīng)是在測量例如在具體工作實施例中如本文所述的測試流體中的溶質(zhì)“翻滾”的間接方法中。在具體的方面，動電學(xué)改變的水性流體的特征為以下至少一種 在-0. 14V、-0. 47V、-1. 02V和-1. 36V的任何一個下的明顯不同的方波伏安峰差異；在-0. 9 伏特的極譜峰；以及在-0. 19和-0. 3伏特不存在極譜峰，在-0. 19和-0. 3伏特的極譜峰是具體工作實施例中本文所公開的動電學(xué)產(chǎn)生的流體所獨有的。在具體的方面，動電學(xué)改變的水性流體適合于改變細胞膜電導(dǎo)率(例如在本文公開的膜片鉗研究中測量的全細胞電導(dǎo)的電壓依賴性貢獻)。在具體的方面，動電學(xué)改變的水性流體是氧合的，其中在該流體中的氧的存在量為大氣壓下至少Mppm、至少^ppm、至少30ppm、至少40ppm、至少50ppm或至少60ppm的溶解氧。在具體的方面，動電學(xué)改變的水性流體具有小于15ppm、小于IOppm的大氣壓下的溶解氧或大致環(huán)境氧水平。在具體的方面，動電學(xué)改變的水性流體是氧合的，其中在該流體中的氧的存在量在大約8ppm與大約15ppm之間，并且在這種情況中有時在本文稱作“Solas”。在具體的方面，動電學(xué)改變的水性流體包括溶劑化電子(例如，通過分子氧穩(wěn)定) 和動電學(xué)改變和/或荷電的氧物種的至少一種，并且其中在某些實施方案中所述溶劑化電子和/或動電學(xué)改變或帶電的氧物種的存在量為至少0. Olppm、至少0. lppm、至少0. 5ppm、 至少lppm、至少3ppm、至少5ppm、至少7ppm、至少lOppm、至少15ppm或至少20ppm。在具體的方面，動電學(xué)改變的水性流體適合于改變細胞膜的結(jié)構(gòu)或功能(例如改變膜相關(guān)蛋白的構(gòu)象、配體結(jié)合活性或催化活性)至足以提供對細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的調(diào)整， 其中在具體的方面，所述膜相關(guān)蛋白包括選自由以下組成的組的至少一種受體、跨膜受體 (例如G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR) ,TSLP受體、β 2腎上腺素能受體、緩激肽受體等)、離子通道蛋白、細胞內(nèi)附著蛋白、細胞粘附蛋白和整聯(lián)蛋白。在某些方面，發(fā)揮效應(yīng)的G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)與G蛋白的α亞基(例如G α s、G α ρ G α q禾口 G α 12)相互作用。在具體的方面，動電學(xué)改變的水性流體適合于調(diào)整細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，包括鈣依賴性細胞信息傳遞途徑或系統(tǒng)的調(diào)整(例如磷脂酶C活性的調(diào)整或腺苷酸環(huán)化酶(AC)活性的調(diào)整)。在具體的方面，動電學(xué)改變的水性流體的特征為本文所述的各種生物活性(例如細胞因子、受體、酶和其他蛋白質(zhì)和細胞內(nèi)信號傳導(dǎo)途徑的調(diào)控)。
在具體的方面，如本文中所示，動電學(xué)改變的水性流體表現(xiàn)出與沙丁胺醇，和與布地奈德的協(xié)同作用。在具體的方面，如本文工作實施例所示，動電學(xué)改變的水性流體降低支氣管上皮細胞(BEC)中的DEP誘導(dǎo)的TSLP受體的表達。在具體的方面，如本文工作實施例所示，動電學(xué)改變的水性流體抑制在支氣管上皮細胞(BEC)中DEP誘導(dǎo)的細胞表面結(jié)合的MMP9水平。在具體的方面，如本文中所示，動電學(xué)改變的水性流體的生物效應(yīng)被白喉毒素抑制，表明β阻斷、GPCR阻斷和鈣離子阻斷影響動電學(xué)改變的水性流體的活性(例如，對調(diào)節(jié)性T細胞的功能的影響)。在具體的方面，動電學(xué)改變的水性流體的物理和生物效應(yīng)(例如改變細胞膜的結(jié)構(gòu)或功能至足以提供對細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的調(diào)整的能力)在一個封閉的容器(例如，封閉的氣密容器)中持續(xù)至少兩個月、至少三個月、至少四個月、至少五個月、至少六個月或更長的時間。因此，其他方面提供所述動電學(xué)產(chǎn)生的溶液和制備動電學(xué)改變的氧合的水性流體或溶液的方法，所述方法包括在相對運動的兩個間隔的表面間提供流體材料流，并且在所述兩個間隔的表面間界定混合體積，其中流動的流體材料在混合體積內(nèi)和穿過混合體積的單次通過的滯留時間為大于0. 06秒或大于0. 1秒；和在適于將至少20ppm、至少25ppm、至少30、至少40、至少50或至少60ppm的氧(O2)溶解在材料中并動電學(xué)改變所述流體或溶液的條件下將氧引入混合體積內(nèi)的流動的流體材料。在某些方面，在小于100毫秒、小于200 毫秒、小于300毫秒或小于400毫秒內(nèi)將氧注入材料中。在具體實施方案中，表面積與體積比為至少12、至少20、至少30、至少40或至少50。其他方面提供制備動電學(xué)改變的氧合的水性流體或溶液的方法，所述方法包括 在兩個間隔的表面間提供流體材料流，所述兩個間隔的表面在其間界定了混合體積；在適于在小于100毫秒、小于200毫秒、小于300毫秒或小于400毫秒內(nèi)將至少20ppm、至少 25ppm、至少30、至少40、至少50或至少60ppm的氧擴散到材料中的條件下將氧引入在混合體積中的流動的材料中。在某些方面，在混合體積內(nèi)的所述流動的材料的滯留時間為大于 0. 06秒或大于0. 1秒。在具體實施方案中，表面積與體積比為至少12、至少20、至少30、至少40或至少50。在具體的方面中，所施用的本發(fā)明的動電學(xué)改變的流體包括足以調(diào)整細胞膜電位和細胞膜電導(dǎo)率中的至少一種的量的電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)。在某些實施方案中，動電學(xué)改變的流體是超氧合的(例如RNS-20、RNS-40和RNS-60，在標準鹽水中分別包含20ppm、 40ppm和60ppm的溶解氧)。在具體的實施方案中，動電學(xué)改變的流體是非超氧合的(例如 RNS-10或Solas，包含10ppm(例如，在標準鹽水中為大約環(huán)境水平的溶解氧))。在某些方面中，在以動電學(xué)方式產(chǎn)生所述流體時建立本發(fā)明的動電學(xué)改變的流體的鹽度、無菌性、PH 等，并且通過合適的途徑施用所述無菌流體。備選地，在施用所述流體之前，對所述流體的鹽度、無菌性、PH等中的至少一種進行適當(dāng)?shù)卣{(diào)節(jié)(例如使用無菌鹽水或合適的稀釋液)， 從而使其與給藥途徑是生理學(xué)相容的。優(yōu)選的是，用于調(diào)節(jié)所述流體的鹽度、無菌性、pH等中的至少一種的稀釋液和/或鹽水溶液和/或緩沖液組合物也是動電學(xué)流體，或者否則也是相容的。
在具體的方面中，本發(fā)明的動電學(xué)改變的流體包括鹽水(例如一種或多種溶解鹽；例如基于堿金屬的鹽(Li、Na、K、Rb、Cs等)，基于堿土金屬的鹽(例如Mg、Ca)等，基于過渡金屬的鹽(例如Cr、Fe、C0、Ni、Cu、ai等)，以及任何合適的陰離子/反離子成分)。具體的方面包括基于混合鹽的動電學(xué)流體(例如Na、K、Ca、Mg等，以不同的組合和濃度)。在具體的方面中，本發(fā)明的動電學(xué)改變的流體包括標準鹽水(例如，大約0.9%NaCl，或者大約0. 15M NaCl)。在具體的方面中，本發(fā)明的動電學(xué)改變的流體包括濃度為至少0. 0002M、至少 0. 0003M、至少 0. 001M、至少 0. 005M、至少 0. 01M、至少 0. 015M、至少 0. 1M、至少 0. 15M 或者至少0. 2M的鹽水。在具體的方面中，本發(fā)明的動電學(xué)改變的流體的電導(dǎo)率為至少10 μ S/ cm、至少 40 μ S/cm、至少 80 μ S/cm、至少 100 μ S/cm、至少 150 μ S/cm、至少 200 μ S/cm、至少 300 μ S/cm、或至少 500 μ S/cm、至少 lmS/cm、至少 5mS/cm、10mS/cm、至少 40mS/cm、至少 80mS/cm、至少 100mS/cm、至少 150mS/cm、至少 200mS/cm、至少 300mS/cm 或者至少 500mS/ cm。在具體的方面中，可以使用任何鹽來制備本發(fā)明的動電學(xué)改變的流體，只要它們可以形成本文所公開的具有生物學(xué)活性的鹽穩(wěn)定的納米結(jié)構(gòu)(例如，鹽穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu))即可。根據(jù)具體的方面，本發(fā)明的包含電荷穩(wěn)定的含氣體納米結(jié)構(gòu)的流體組合物的生物學(xué)效應(yīng)可以通過改變例如上文所述的流體的離子成分和/或通過改變所述流體的氣體成分來調(diào)整(例如增加、降低、調(diào)節(jié)等)。在優(yōu)選的方面中，使用氧來制備本發(fā)明的動電學(xué)流體。在另外的方面中，使用氧與選自氮、氧、氬、二氧化碳、氖、氦、氪、氫和氙中的至少一種其他氣體的混合物。示例性的相關(guān)分子相互作用傳統(tǒng)上，量子特性被認為是屬于小于10,米的基本粒子，而我們?nèi)粘Ｉ畹暮暧^世界則被稱為是經(jīng)典的，因為它遵循牛頓運動定律。近來，分子已被描述為形成尺寸隨著稀釋而增加的簇。測得這些簇的直徑為若干微米，并且已經(jīng)報道尺寸隨著稀釋呈非線性增加。推測測量為直徑為100納米的量子相干域在純水中產(chǎn)生，并且相干域中的水分子的集合振動可最終成為鎖定為電磁場波動的相， 提供水中的穩(wěn)定振蕩，以激發(fā)長久的相干震蕩的形式提供“記憶”形式，該長久的相干震蕩對于改變水的集合結(jié)構(gòu)的水中溶解物質(zhì)具有特異性，這可依次地確定發(fā)生的特異性相干震蕩。當(dāng)這些震蕩由磁場相耦合變?yōu)榉€(wěn)定時，稀釋時水仍可傳播“種子”相干震蕩。當(dāng)分子的簇尺寸增加時，其電磁信號相應(yīng)擴大，增強由水傳播的相干震蕩。盡管溶解分子的簇尺寸和水的詳細微觀結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，但是相干震蕩的特異性可能存在。一種考慮水的性質(zhì)變化的模型基于對結(jié)晶的考慮。在申請人之前的專利申請WO 2009/0557 中顯示了形成納米級籠8700的簡化的質(zhì)子化水簇。質(zhì)子化水簇通常呈現(xiàn)H+(H2O)n形式。一些質(zhì)子化水簇是天然存在的，如在電離層中。不受任何具體理論的束縛，并且根據(jù)具體方面，其他類型的水簇或結(jié)構(gòu)(簇、納米籠等)是可行的，包括包含傳遞給本發(fā)明的輸出材料的氧和穩(wěn)定化電子的結(jié)構(gòu)。氧原子可以被捕獲到所得結(jié)構(gòu)中。半結(jié)合的納米籠的化學(xué)性質(zhì)容許氧和/或穩(wěn)定化電子在延長的時間段內(nèi)保持溶解。諸如醫(yī)藥化合物的其他原子或分子可以被籠蔽以用于持續(xù)遞送的目的。 溶液材料與溶解化合物的特定化學(xué)性質(zhì)取決于那些材料的相互作用。之前通過實驗已經(jīng)顯示了該混合裝置所處理的流體，所述流體表現(xiàn)出不同的結(jié)構(gòu)特征，這與在簇結(jié)構(gòu)的情況下對 流體的分析是一致的。參見，例如，WO 2009/055729。輸穩(wěn)繩賊馳(_輸穩(wěn)繩傭賊馳)如之前申請人的WO 2009/055729中所述，“雙層效應(yīng)” “滯留時間” “輸注速率”和
“泡尺寸測量”，動電學(xué)混合裝置采用復(fù)雜的動力學(xué)湍流，在幾毫秒內(nèi)產(chǎn)生第一材料和第二材料的獨特非線性流體動力學(xué)相互作用，提供與大量表面積有效接觸(包括裝置的表面積和小于IOOnm的特別小氣泡的表面積)的復(fù)雜混合，從而提供本文所公開的新型動電學(xué)效應(yīng)。此外，使用包括絕緣的轉(zhuǎn)子和定子部件的專門設(shè)計的混合裝置證明了部件局部化的動電學(xué)效應(yīng)(電壓/電流)。如本領(lǐng)域已公認的，已知電荷再分配和/或溶劑化電子在水溶液中高度不穩(wěn)定。 根據(jù)具體的方面，申請人的動電學(xué)效應(yīng)(例如電荷再分配，包括，具體方面中的溶劑化電子)在輸出材料(例如，鹽水溶液，離子溶液)中驚人地穩(wěn)定。事實上，如本文所述，本發(fā)明的動電學(xué)流體(例如RNS-60或Solas)的性質(zhì)和生物活性的穩(wěn)定性可在氣密性容器中保持數(shù)月，這說明溶解的氣體(例如氧)的參與有助于產(chǎn)生和/或保持和/或介導(dǎo)本發(fā)明的溶液的性質(zhì)和活性。顯著地，電荷再分配和/或溶劑化電子可以穩(wěn)定地配置在本發(fā)明的動電學(xué)離子水性流體中，其量足以在流體與活細胞(例如，哺乳動物細胞)接觸時提供對細胞膜電位或細胞膜電導(dǎo)率中的至少一種的調(diào)整(例如，參見WO 2009/055729的細胞膜片鉗工作實施例23和如本文所公開的)。如本文“分子相互作用”部分所描述的，為了解釋本發(fā)明的動電學(xué)流體(例如，動電學(xué)鹽水溶液)的穩(wěn)定性和生物相容性，申請人已提出水分子和溶解于水中的物質(zhì)(例如氧)分子之間的相互作用改變水的集合結(jié)構(gòu)并提供納米籠簇，包括包含傳遞給本發(fā)明的輸出材料的氧和/或穩(wěn)定化電子的納米結(jié)構(gòu)。不受機制的約束，在具體的方面納米結(jié)構(gòu)的配置如下含有(至少用于形成和/或穩(wěn)定性和/或生物活性)溶解的氣體(例如氧)；在與細胞膜或其相關(guān)構(gòu)成成分接觸時，這樣的配置使動電學(xué)流體(例如RNS-60或Solas鹽水流體)能夠調(diào)整(例如傳遞或接受)電荷和/或電荷效應(yīng)；和在具體的方面，以生物學(xué)相關(guān)形式提供用于穩(wěn)定的(例如，攜帶、容納、捕獲)溶劑化電子。根據(jù)具體的方面以及由本發(fā)明所支持，在離子或鹽水(例如標準鹽水，NaCl)溶液中，本發(fā)明的納米結(jié)構(gòu)包括電荷穩(wěn)定的納米結(jié)構(gòu)(例如平均直徑小于lOOnm)，該納米結(jié)構(gòu)可以包含電荷穩(wěn)定的水合外層中的至少一種溶解的氣體分子(例如氧)。根據(jù)其他的方面， 電荷穩(wěn)定的水合外層可包括容納有至少一種溶解的氣體分子(例如，氧)的籠或空隙。根據(jù)進一步的方面，由于提供合適的電荷穩(wěn)定的水合外層，電荷穩(wěn)定的納米結(jié)構(gòu)和/或電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)可另外地包含溶劑化電子(例如穩(wěn)定的溶劑化電子)。不受機理和具體理論的限制，本發(fā)明的優(yōu)先權(quán)日之后，已經(jīng)提出了與環(huán)境氣體(大氣)平衡的水性液體中被離子穩(wěn)定的電荷穩(wěn)定的微泡(Bimkin等，Journal of Experimental and Theoretical Physics，104 :486_498，2007 ；通過引用并入本文)。根據(jù)本發(fā)明的具體方面，申請人的新的動電學(xué)流體包括電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)的新的生物活性形式，并可進一步包括這種結(jié)構(gòu)的新陣列(array)、簇或締合。根據(jù)電荷穩(wěn)定的微泡模型，水結(jié)構(gòu)的短程分子序態(tài)被氣體分子(例如，開始與非吸附離子復(fù)合的溶解的氣體分子提供短程序態(tài)缺陷)的存在所破壞，提供離子液滴的凝聚，其中，所述缺陷被水分子的第一和第二配位層包圍，所述水分子的第一和第二配位層可選地被配位層中占據(jù)六個和12個空缺位的吸附性離子(例如獲取Na+離子屏蔽層以形成電雙層)和非吸附性離子(例如占據(jù)第二配位層Cl-離子)填充。在不飽和離子溶液中 (例如不飽和鹽水溶液)，這種水合的“核”保持穩(wěn)定直至第一和第二層分別被六個吸附性離子和五個吸附性離子填充，然后，經(jīng)過庫倫擴增產(chǎn)生含氣體分子的內(nèi)部空隙，其中吸附性離子(例如，Na+離子)被吸附至形成的空隙的表面，同時非吸附性離子(或一些部分)被分散進入溶液(同上Bimkin等)。在這個模型中，納米結(jié)構(gòu)的空隙防止吸 附至其表面的離子 (例如，Na+離子)之間的庫倫排斥所導(dǎo)致的塌陷。含空隙的納米結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性被假設(shè)為由于具有類似電荷的溶解離子選擇性吸附在空隙/氣泡表面上和在溶解氣體和氣泡內(nèi)的氣體之間的擴散平衡所引起的，其中得到的電雙層所施加的朝向外部的負性靜電壓力為表面張力提供穩(wěn)定的代償，并且氣泡內(nèi)部的氣體壓力與環(huán)境壓力平衡。根據(jù)這個模型，這些微泡的形成需要離子組分，在特定方面，粒子之間碰撞介導(dǎo)的締合可提供更大序態(tài)的簇(陣列) 的形成(同前)。電荷穩(wěn)定的微泡模型說明粒子可以是氣體微泡，但是僅考慮離子溶液中形成同時與環(huán)境空氣平衡的這些結(jié)構(gòu)，其不能表征并且不能表示是否氧能夠形成這些結(jié)構(gòu)，以及同樣不表示是否溶劑化電子可通過這些結(jié)構(gòu)締合和/或穩(wěn)定。根據(jù)具體的方面，本發(fā)明的包括電荷穩(wěn)定的納米結(jié)構(gòu)和/或電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)的動電學(xué)流體是新穎的，并且根據(jù)微泡模型從根本上不同于假設(shè)的非動電學(xué)的大氣電荷穩(wěn)定的微泡結(jié)構(gòu)。顯著地，這個結(jié)論是無法回避的，至少部分來自下面的事實，即對照鹽水溶液不具有本發(fā)明公開的生物學(xué)性質(zhì)，而申請人的電荷穩(wěn)定的納米提供新的，生物活性形式的電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)。根據(jù)本發(fā)明的具體的方面，申請人的新的動電學(xué)裝置和方法提供新的動電學(xué)改變的流體，所述流體包含非常大量的電荷穩(wěn)定的納米結(jié)構(gòu)，該量超過了在與空氣平衡的離子流體中可能自發(fā)或不自發(fā)存在的量，或在任何非動電學(xué)產(chǎn)生的流體中的量。在具體的方面， 電荷穩(wěn)定的納米結(jié)構(gòu)包含電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)。在另外的方面，電荷穩(wěn)定的納米結(jié)構(gòu)是所有或基本上所有電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)或電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)是動電學(xué)流體中主要的電荷穩(wěn)定的含氣體納米結(jié)構(gòu)物種。根據(jù)又進一步的方面，電荷穩(wěn)定的納米結(jié)構(gòu)和/或電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)可包括或容納溶劑化電子，從而提供新的穩(wěn)定的溶劑化電子載體。在具體的方面，電荷穩(wěn)定的納米結(jié)構(gòu)和/或電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)提供新型電極(或倒置電極)，這與常規(guī)的具有單一有機配位陽離子的溶質(zhì)電極相反，其具有多個繞空隙或含氧原子的空隙穩(wěn)定排列的陽離子，其中，所排列的鈉離子可與水合外層配位，而不是與有機分子配位。根據(jù)具體的方面，溶劑化電子可由水分子的水合外層來容納，或優(yōu)選地容納在分布在所有陽離子上的納米結(jié)構(gòu)空隙中。在特定的方面，本發(fā)明的納米結(jié)構(gòu)提供溶液中的新型“超級電極”結(jié)構(gòu)，其不僅通過提供溶劑化電子在多個陣列的鈉陽離子上的分布/穩(wěn)定，還提供溶劑化電子與空隙中捕獲的(多個)氧分子的締合或部分締合——溶劑化電子分布在鈉原子和至少一個氧原子的陣列上。根據(jù)具體的方面，因此，作為本發(fā)明公開的與本發(fā)明的動電學(xué)流體締合的“溶劑化電子”在包括被水分子直接水合的傳統(tǒng)模型中可能不被溶劑化。可選地，與干燥的電極鹽類相同之處很少，本發(fā)明的動電學(xué)流體中的溶劑化電子可分布在多個電荷穩(wěn)定的納米結(jié)構(gòu)上以提供“格點粘合劑(lattice glue)”以穩(wěn)定水性溶液中的較高序態(tài)陣列。
在具體的方面，本發(fā)明的電荷穩(wěn)定的納米結(jié)構(gòu)和/或電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)能夠與細胞膜或其組分或蛋白質(zhì)等發(fā)生相互作用以介導(dǎo)生物活性。在具體的方面，容納了溶劑化電子的本發(fā)明的電荷穩(wěn)定的納米結(jié)構(gòu)和/或電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)能夠與細胞膜或其組分或蛋白質(zhì)等發(fā)生相互作用以介導(dǎo)生物活性。 在具體的方面，本發(fā)明的電荷穩(wěn)定的納米結(jié)構(gòu)和/或電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)作為電荷和/或電荷效應(yīng)供體(遞送)和/或作為電荷和/電荷效應(yīng)受體與細胞膜或其組分或蛋白質(zhì)等發(fā)生相互作用以介導(dǎo)生物活性。在具體的方面，容納了溶劑化電子的本發(fā)明的電荷穩(wěn)定的納米結(jié)構(gòu)和/或電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)作為電荷和/或電荷效應(yīng)供體和/或作為電荷和/或電荷效應(yīng)受體與細胞膜發(fā)生相互作用以介導(dǎo)生物活性。在具體的方面，本發(fā)明的電荷穩(wěn)定的納米結(jié)構(gòu)和/或電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)與所觀察到的本發(fā)明的動電學(xué)流體的穩(wěn)定性和生物性質(zhì)一致且是所觀察到的本發(fā)明的動電學(xué)流體的穩(wěn)定性和生物性質(zhì)的原因并進一步提供新的電極(或倒置電極(inverted electride))，所述電極提供水性離子溶液(例如鹽水溶液，NaCl等)中穩(wěn)定的溶劑化電子。在具體的方面，電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)基本上包括，采取下面的形式或可產(chǎn)生， 電荷穩(wěn)定的含氧納米氣泡。在具體的方面，電荷穩(wěn)定的含氧簇提供形成電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)的相對較大的陣列和/或電荷穩(wěn)定的含氧納米氣泡或其陣列。在具體的方面，電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)可提供在與疏水表面接觸之后形成疏水納米氣泡。在具體的方面，電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)基本含有至少一個氧分子。在特定的方面，電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)基本含有至少1、至少2、至少3、至少4、至少5、至少10至少 15、至少20、至少50、至少100或更多個氧分子。在具體的方面，電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)含有或產(chǎn)生約20nmX 1. 5nm的納米氣泡(例如疏水納米氣泡)，含有約12個氧分子(例如基于氧分子的尺寸(約0. 3nmX0. 4nm)，假設(shè)為理想氣體并應(yīng)用η = PV/RT，其中P = Iatm, R = O. 082 □ 057 □ 1. atm/mol. K ;T = 295Κ ；V = pr2h = 4. 7 X ICT22L,其中 r = 10Xl(T9m， h = 1· 5 X l(T9m，且 η = 1· 95 X l(T22mol)。在特定的方面，流體中存在的氧分子的百分比是選自由下列各項組成的組的百分比量大于0. ；大于；大于2% ；大于5% ；大于10% ；大于15% ；大于20% ；大于 25% ；大于30% ；大于35% ；大于40% ；大于45% ；大于50% ；大于55% ；大于60% ；大于 65% ；大于70% ；大于75% ；大于80% ；大于85% ；大于90% ；且大于95%，所述氧分子處于離子水性流體中的具有電荷穩(wěn)定的配置的所述納米結(jié)構(gòu)或其陣列中。優(yōu)選地，此百分比大于約5%，大于約10%，大于約15%，或大于約20%。在另外的方面，在離子水性流體中具有電荷穩(wěn)定的構(gòu)造的電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)或其陣列的大體尺寸選自由下列各項組成的組小于IOOnm ；小于90nm ；小于80nm ；小于70nm ；小于60nm ；小于50nm ；小于40nm ；小于30nm ；小于20nm ；小于IOnm ；小于5nm ；小于4nm ；小于3nm ；小于2nm ；禾口小于Inm0優(yōu)選地,這個尺寸小于約50nm，小于約40nm，小于約30nm，小于約20nm或小于約10nm。在特定的方面，本發(fā)明的動電學(xué)流體包含溶劑化電子。在進一步的方面，本發(fā)明的動電學(xué)流體包含電荷穩(wěn)定的納米結(jié)構(gòu)和/或電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)，和/或其陣列，其包括下列中的至少一種一種或多種溶劑化電子；和獨特的電荷分布(極性、對稱、非對稱電荷分布)。在具體的方面，電荷穩(wěn)定的納米結(jié)構(gòu)和/或電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)和/或其陣列具有順磁性。
相反，相對于本發(fā)明的動電學(xué)流體，對照壓力罐氧合流體(非動電學(xué)流體)等不含有能夠調(diào)整細胞膜電位和細胞膜電導(dǎo)率中的至少一種的這種動電學(xué)產(chǎn)生的電荷穩(wěn)定的生物學(xué)活性納米結(jié)構(gòu)和/或生物學(xué)活性的電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)和/或其陣列。用于制備富含氣體的流體的系統(tǒng)本發(fā)明公開的系統(tǒng)和方法容許以高濃度穩(wěn)定地富集氣體(例如，氧)而具有最小限度的被動損失。這種系統(tǒng)和方法可以有效地用于將很多種氣體以較高的百分比富集到很多種流體中。僅舉例來說，使用公開的系統(tǒng)和/或方法，在室溫下通常具有約 2-3ppm(百萬分率)的溶解氧的去離子水可以達成如下范圍內(nèi)的溶解氧水平至少約5ppm、 至少約lOppm、至少約15ppm、至少約20ppm、至少約25ppm、至少約30ppm、至少約35ppm、至少約40ppm、至少約45ppm、至少約50ppm、至少約55ppm、至少約60ppm、至少約65ppm、至少約70ppm、至少約75ppm、至少約80ppm、至少約85ppm、至少約90ppm、至少約95ppm、至少約lOOppm、或更高或在它們之間的任何值。根據(jù)具體的示例性實施方案，可以產(chǎn)生具有約 30-60ppm溶解氧水平的富含氧的水。表1說明了在用富含氧的鹽水溶液(表1)處理的愈合傷口和在本發(fā)明的富含氣體的富含氧的鹽水溶液的樣品中進行的各種分壓測量。表1
組織氧測量探針 Z082BC)在空氣中171mmHg23°C列分壓(mmHg)Bl32-36B2169-200B320-180*B440-60*傷口深度最小，大多數(shù)>150，偶爾20 sMMP-9介導(dǎo)的病癥MMP-9被認為涉及多種類型疾病、紊亂和/或病癥，包括但不限于幾種類型的癌癥 (例如乳腺癌、胃癌、子宮內(nèi)膜癌、成膠質(zhì)細胞瘤和原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤(PCNSL))、 心血管疾病(例如動脈粥樣硬化和再狹窄)、神經(jīng)精神疾病(例如精神分裂癥和雙相型疾患)、肺部疾病(例如哮喘和慢性支氣管炎)、神經(jīng)炎性退行性疾病(例如阿爾茨海默病、帕金森病、亨廷頓病、肌萎縮性側(cè)索硬化癥(ALS，也稱為Lou Gehrig疾病)和糖尿病視網(wǎng)膜病變)、自身免疫疾病(例如多發(fā)性硬化癥、全身性紅斑狼瘡和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)、以及神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)的紊亂和病癥(例如卒中/腦缺血、頭部創(chuàng)傷、脊髓損傷、偏頭痛、腦淀粉樣血管病、 HIV伴發(fā)的癡呆(AIDS)、年齡相關(guān)的認知損害、輕度認知損害以及朊病毒病)。適應(yīng)證傷口愈合已經(jīng)顯示MMP-9在裸鼠的無瘢痕傷口愈合中起作用(Manuel 禾口 Gawronska-Kozak， Matrix Biology，25 :505_514，2006)。具體而言，Manuel 禾口 Gawronska-Kozak表明在傷口愈合的重塑階段期間，與野生型小鼠相比，注射后的皮膚組織具有高水平的MMP_9mRNA和蛋白質(zhì)。另一項研究發(fā)現(xiàn)，在受傷后，人類口腔粘膜中高度表達MMP-9。由于傷口愈合需要角質(zhì)形成細胞移行和肉芽組織重塑，因此該研究表明在傷口愈合中，MMP-9參與角質(zhì)形成細胞移行和肉芽組織重塑(Salo等，Lab Invest. 70 176-82， 1994)。這些結(jié)果表明MMP-9在傷口愈合中起到了重要的作用。但是，最近的研究證明MMP-9 的持續(xù)產(chǎn)生導(dǎo)致糖尿病患者的潰瘍傷口愈合不良，這至少部分是由于持續(xù)炎癥所導(dǎo)致(Liu 等，Diabetes Care, 32 117-119，2009)。該結(jié)果表明盡管在傷口愈合的重塑階段期間MMP_9 是必不可少的，但其抑制潰瘍的完全愈合。本申請人在此(使用BEC模型)表明，本發(fā)明的動電學(xué)改變的流體顯著地下調(diào)MMP-9的產(chǎn)生。根據(jù)某些實施方案，本發(fā)明的動電學(xué)改變的流體具有治療傷口和類似病癥的實質(zhì)效用。癌癥近來的綜述描述了 MMP-9在不同癌癥中的作用(Rybakowski.， Cardiovascular Psychiatry and Neurology,Vol. 2009,Article ID 904836,7pages)。更具體而言，該綜述討論了增加MMP_9mRNA的表達的基因突變經(jīng)常與某些類型的癌癥的風(fēng)險增加以及更嚴重的腫瘤進展和/或更大的轉(zhuǎn)移動力有關(guān)。此外，多項研究顯示這些特定的基因突變與結(jié)腸癌、乳腺癌、胃癌和以及膀胱癌中腫瘤的惡性程度、生長和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的嚴重程度有關(guān)。此外，檢查與正常的胃粘膜相比較來自胃癌的腫瘤的MMP-9水平的一項近來研究證明癌癥具有顯著升高的MMP-9蛋白質(zhì)水平并且這種升高與患者的較差生存顯著相關(guān)(Sier 等，J. Thrombosis and Haemostasis，4 127-127，2006)。另一項研究證明與正常腦相比，神經(jīng)膠質(zhì)瘤中的MMP_9mRNA和MMP-9活性較高，并且與腫瘤的嚴重程度更密切相關(guān) (Forsyth，等，British J. Cancer, 79 1828-1835，1999)。這些研究表明 MMP-9 在多種類型癌癥的發(fā)病機理中起到了重要的作用。本申請人在此(使用BEC模型)表明，本發(fā)明的動電學(xué)改變的流體顯著地下調(diào)MMP-9的產(chǎn)生。根據(jù)某些實施方案，本發(fā)明的動電學(xué)改變的流體具有用于治療某些癌癥(例如，結(jié)腸癌、乳腺癌、胃癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤和膀胱癌)和相似病癥， 和限制淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及減輕與癌癥病癥有關(guān)的并發(fā)癥的實質(zhì)效用。肺部疾病(例如哮喘和慢性支氣管炎)最近，已經(jīng)證實與健康對照受試者相比， MMP-9的水平在患有穩(wěn)定型哮喘的患者體內(nèi)顯著增加，在患有急性哮喘的患者體內(nèi)甚至更高。MMP-9在氣道炎性細胞的浸潤和氣道高反應(yīng)性的誘導(dǎo)方面發(fā)揮重要作用，這說明MMP-9 可具有誘導(dǎo)和維持哮喘的重要作用(Vignola等，Sputum metalloproteinase-9/tissue inhibitor of metalloproteinase-1 ratio correlates with airflow obstruction in asthma and chronic bronchitis (痰金屬蛋白酶-9/金屬蛋白酶-1的組織抑制劑的比率與哮喘和慢性支氣管炎中的氣道阻塞相關(guān))，Am J Respir Crit Care Medl58 :1945_1950， 1998 ；Hoshino 等，Inhaled corticosteroids decrease subepithelial collagen deposition by modulation of the balance between matrix metalloproteinase-9 and tissue inhibitor of metal loproteinase-1 expression in asthma (吸人白勺皮質(zhì)類固醇通過調(diào)節(jié)哮喘中基質(zhì)金屬蛋白酶-9和金屬蛋白酶-1的組織抑制劑的表達之間的平衡來減少上皮下膠原沉積)，J Allergy Clin Immunol 104 =356-363,1999 ；Simpson 等，Differential proteolytic enzyme activity in eosinophilic and neutrophilic asthma(在嗜酸性和嗜中性哮喘中不同的蛋白水解酶活性)，Am J Respir Crit Care Med 172 :559_565，2005 ；Lee 等，A murine model of toluene diisocyanate-induced asthma can be treated with matrix metalloproteinase inhibitor (甲苯二異氰酸酉旨誘發(fā)哮喘的鼠模型可以用基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑治療)，J Allergy Clin Immunol 108:1021-1026， 2001 ；禾口 Lee 等人,Matrix metal loproteinase inhibitor regulates inflammatory cell migration by reducing ICAM-I and VCAM-lexpression in a murine model of toluene diisocyanate-induced asthma(基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑通過減少甲苯二異氰酸酯誘發(fā)哮喘的鼠模型中ICAM-I和VCAM-I表達來調(diào)節(jié)炎性細胞遷移)，J Allergy Clin Immunol 2003 ；111 :1278-1284)。此外，近來的研究證明使用MMP-9對根尖進行治療導(dǎo)致1)在緊密連接中存在的蛋白質(zhì)的免疫染色減少；和2)病毒(例如接近上皮細胞底外側(cè)表面的病毒) 的感染效率增加，這兩個結(jié)果表明屏障功能被破壞(Vermeer等，Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol, 296 :L751-L762, 2009) 這些研究表明，MMP-9在肺部疾病(例如，哮喘和慢性支氣管炎)的發(fā)病機理中起到了重要的作用。本申請人在此(使用BEC模型)表明，本發(fā)明的動電學(xué)改變的流體顯著地下調(diào)MMP-9的產(chǎn)生。根據(jù)某些實施方案，本發(fā)明的動電學(xué)改變的流體具有用于治療肺部疾病例如哮喘和慢性支氣管炎)和相似病癥的實質(zhì)效用。心血管疾病近來的綜述描述了 MMP-9在心血管疾病(例如CHD、動脈粥樣硬性和高血壓)中的作用(Rybakowski，2009)。更具體而言，該綜述討論了增加MMP_9mRNA表達的基因突變是如何與冠狀動脈心臟病(CHD)的進展和死亡率的增加、動脈粥樣硬化的增加以及高血壓的進展的增加相關(guān)的。在進一步的研究中，發(fā)現(xiàn)較高的MMP-9水平與冠狀動脈擴張、 較高的MMP-9水平與肥厚型心肌病、以及較高的MMP-9水平與高血壓患者之間具有相關(guān)性。 這些研究表明MMP-9在心血管疾病(例如CHD、動脈粥樣硬化和高血壓)的發(fā)病機理中起到重要的作用。本申請人在此(使用BEC模型)表明，本發(fā)明的動電學(xué)改變的流體顯著地下調(diào)MMP-9的產(chǎn)生。根據(jù)某些實施方案，本發(fā)明的動電學(xué)改變的流體具有用于治療心血管疾病(例如CHD、動脈粥樣硬化和高血壓)和相似病癥的實質(zhì)效用。神經(jīng)精神疾病近期的綜述描述了 MMP-9在神經(jīng)精神疾病(例如精神分裂癥和雙相型心境障礙)中的作用(Rybakowski.，2009)。該綜述討論了患有雙相性心境障礙的患者與健康對照受試者相比是如何具有較高的增加MMP_9mRNA表達的基因突變的發(fā)生率的。但是，與普通患者相比，精神分裂癥患者具有顯著較低的增加MMP_9mRNA表達的基因突變的相關(guān)性。這些研究表明MMP-9在神經(jīng)精神疾病(例如，精神分裂癥和雙相型心境障礙)具有相關(guān)的作用。本申請人在此(使用BEC模型)表明，本發(fā)明的動電學(xué)改變的流體顯著地下調(diào)MMP-9的產(chǎn)生。根據(jù)某些實施方案，本發(fā)明的動電學(xué)改變的流體具有用于治療神經(jīng)精神疾病(例如，精神分裂癥和雙相型心境障礙)和相似病癥的實質(zhì)效用。神經(jīng)炎性退行性疾病近幾年，MMP-9已經(jīng)被認為涉及像阿爾茨海默病和ALS之類的疾病的發(fā)病機理。還報告了 MMP-9在尸檢阿爾茨海默病和ALS腦組織中的表達增加 (Lorenzl 等，Neurochem. Int. 43 191-6，2003)。Lorenzl 等還報告了在阿爾茨海默病患者的血漿中循環(huán)的MMP-9水平增加。有趣的是，近來的研究證明MMP-9可以降解緊密聚集的淀粉樣蛋白原纖維，并且可以有助于從充滿淀粉樣蛋白的腦中不斷清除斑塊(Yan等， J Biol Chem. 281 =24566-74, 2006) 0近來的另一項研究表明與對照相比，在尸檢亨廷頓病患者樣品的皮層和小腦中ΜΜΡ-9的表達增多(Silverstroni，等，Clinical Neuroscience and Neuropathology, 20 :1098_1103，2009)。這些研究表明MMP-9在神經(jīng)炎性退行性疾病 (例如阿爾茨海默病、亨廷頓病和ALS)中具有重要作用。本申請人在此(使用BEC模型) 表明，本發(fā)明的動電學(xué)改變的流體顯著地下調(diào)MMP-9的產(chǎn)生。根據(jù)某些實施方案，本發(fā)明的動電學(xué)改變的流體具有用于治療神經(jīng)炎性退行性疾病(例如阿爾茨海默病、亨廷頓病和 ALS)和相似病癥的實質(zhì)效用。HIV 伴發(fā)的癡呆(HIV-associated dementia) (AIDS)MMP-9 涉及降解細胞外基質(zhì)并導(dǎo)致血腦屏障的堅韌程度降低，如果MMP-9太活躍，則血腦屏障的堅韌程度降低會導(dǎo)致血腦屏障功能障礙。根據(jù)某些實施方案，本發(fā)明的動電學(xué)改變的流體顯著地下調(diào)MMP-9的產(chǎn)生(參見下文)并由此可以增加血腦屏障的彈性，從而減少腦的HIV感染以及隨后的癡呆。自身免疫疾病近幾年，研究已經(jīng)證明來自許多自身免疫疾病(包括但不限于多發(fā)性硬化癥、SLE和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)的體液中存在有MMP-9或存在有增加的MMP-9。近來的綜述討論并概括了一些研究，這些研究檢查了患有多發(fā)性硬化癥、SLE和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的患者的血清、腦脊液(CSF)和滑液中MMP-9的存在和量(Ram等，J. Clinical Immunology, 26 :299-307，2006)。通常，各項研究發(fā)現(xiàn)與對照相比，各種體液中MMP9增多。在另一項研究中，Ainiala等發(fā)現(xiàn)血清MMP-9的增多與患有SLE的患者中的神經(jīng)精神病表現(xiàn)(例如具有至少一種神經(jīng)精神病癥狀(如認知障礙)的患者)、小血管腦血管病變、以及腦缺血事件的風(fēng)險增加之間的相關(guān)性(Ainiala，等，Arthritis Rheum 50 =858-65,2004) 對于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎而言，一項研究證明在患者的血清和滑液中MMP-9的水平大幅升高(Gruber 等，Clin Immunol Immunopathol，78 161-71，1996)。該研究還發(fā)現(xiàn)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎中MMP-9的來源是來自類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的滑膜。原位逆轉(zhuǎn)錄酶PCR發(fā)現(xiàn)在幾種不同類型的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎滑膜細胞中產(chǎn)生了 MMP-9轉(zhuǎn)錄物。在另一項研究中，發(fā)現(xiàn)與來自骨關(guān)節(jié)炎的關(guān)節(jié)液相比，來自類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的關(guān)節(jié)液中MMP-9水平大幅提高(Seki等， Modern Rheumatology, 7 :197_209，2009)。此外，該研究證明來自類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者的關(guān)節(jié)液中活性MMP-9的濃度與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎滑膜中的MMP-9陽性細胞以及淋巴細胞的彌散浸潤的評分呈正相關(guān)。這些結(jié)果表明活性MMP-9積極地參與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的關(guān)節(jié)破壞。對于多發(fā)性硬化癥而言，研究已經(jīng)顯示在多發(fā)性硬化癥急性損害中MMP-9占優(yōu)勢地位。此外，多項研究已經(jīng)證明血清和CSF中MMP-9的水平是不同的，其取決于該患者患有哪種類型的疾病。具體而言，一項研究顯示與原發(fā)性進行性多發(fā)性硬化癥相比，短病程的復(fù)發(fā)緩解型多發(fā)性硬化癥具有高得多的MMP-9水平(Avolio等，J Neuroimmunol，136 =46-53, 2003)。但是，與患有非活動性多發(fā)性硬化癥的患者相比，原發(fā)性進行性多發(fā)性硬化癥具有高得多的MMP-9水平。一項近期研究檢查了雌激素三醇(一種具有抗炎性質(zhì)的孕激素)對從女性多發(fā)性硬化癥患者收集的外周血單核細胞(PBMC)產(chǎn)生MMP-9的影響(Gold等，Lab Investigation89 1076-83，2009)。Gold等證明在來自那些患有復(fù)發(fā)緩解型多發(fā)性硬化癥的患者的PBMC中，MMP-9的產(chǎn)生顯著減少。有趣的是，這種MMP-9的減少與MRI上增強病變的減少、以及T細胞和巨噬細胞浸潤到中樞神經(jīng)系統(tǒng)中減少有關(guān)，如在EAE小鼠模型中所不。這些研究表明MMP-9在自身免疫疾病(例如多發(fā)性硬化癥、SLE和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)中具有重要的作用。本申請人在此(使用BEC模型)表明，本發(fā)明的動電學(xué)改變的流體顯著地下調(diào)MMP-9的產(chǎn)生。根據(jù)某些實施方案，本發(fā)明的動電學(xué)改變的流體具有用于治療自身免疫疾病(例如多發(fā)性硬化癥、SLE和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)和相似病癥的實質(zhì)效用。偏頭痛近來，一項研究已經(jīng)顯示在偏頭痛發(fā)作期間偏頭痛患者中MMP-9的產(chǎn)生增加，表明偏頭痛發(fā)作具有炎癥和/或血腦屏障破壞成分。這些研究表明MMP-9在偏頭痛發(fā)作中起作用。本申請人在此(使用BEC模型)表明，本發(fā)明的動電學(xué)改變的流體顯著地下調(diào)MMP-9的產(chǎn)生。根據(jù)某些實施方案，本發(fā)明的動電學(xué)改變的流體具有用于治療偏頭痛發(fā)作和相似病癥的實質(zhì)效用。卒中在本領(lǐng)域中已經(jīng)長期認識到MMP-9參與重塑細胞外基質(zhì)、更具體而言會降解血腦屏障。已經(jīng)檢查到MMP-9在卒中后康復(fù)中的作用(Clark等，Neuroscience Letters, 238 :53-56，1997)。Clark等證明在梗塞后兩天，梗死組織中MMP-9活性顯著升高。有趣的是，死于卒中的那些患者從第2天開始并持續(xù)直到死亡具有升高的活性MMP-9水平，表明持續(xù)的活性MMP-9在由卒中引起的死亡中具有一定的作用。這些研究表明MMP-9在卒中康復(fù)中具有一定作用。本申請人在此(使用BEC模型)表明，本發(fā)明的動電學(xué)改變的流體顯著地下調(diào)MMP-9的產(chǎn)生。根據(jù)某些實施方案，本發(fā)明的動電學(xué)改變的流體具有用于治療從卒中康復(fù)的患者和相似病癥的實質(zhì)效用。MMP 抑制劑已知許多金屬蛋白酶抑制劑(參見，例如由Beckett R. P.和Whittaker M.，1998， Exp. Opin. Ther. Patents, 8 (3) 259-282 禾口 Whittaker M.等，1999， Chemical Reviews 99(9) 2735-2776對MMP抑制劑的綜述)。WO 02/074767公開了乙內(nèi)酰脲衍生物的通式，其可用作MMP抑制劑，尤其是用作有效的MMP12抑制劑。美國專利申請序列號11/721，590(公開為20080032997)公開了另一組乙內(nèi)酰脲衍生物，其是金屬蛋白酶的抑制劑并特別感興趣的是抑制MMP，例如MMP12和MMP9。用于抑制MMP例如MMP12和MMP9的新的三唑酮衍生物在美國專利申請序列號10/593543 (公開為20070219217)中公開。在11/509，490 (公開為20060287338)(也參見10/831265 (公開為20040259896))中也公開了另外的MMP12和 MMP9抑制劑。其他示例性MMP抑制劑在下表2中概述HIlIlIlH
權(quán)利要求
1.一種用于治療MMP9介導(dǎo)的病癥或疾病的方法，包括向需要所述方法的哺乳動物施用治療有效量的動電學(xué)改變的水性流體，所述水性流體包含電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)的離子水性溶液，所述電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)基本上具有小于大約100納米的平均直徑，并且以足以治療MMP9介導(dǎo)的病癥或疾病的量穩(wěn)定地配置在所述離子水性流體中。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)以在所述流體與活細胞相接觸時足以提供對細胞膜電位和細胞膜電導(dǎo)率中的至少一種的調(diào)整的量穩(wěn)定地配置在所述離子水性流體中。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)是所述流體中主要的電荷穩(wěn)定的含氣體納米結(jié)構(gòu)物種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述流體中作為所述電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)存在的溶解氧分子的百分比是選自由以下各項組成的組的百分比大于0.01%、大于0. 1%, 大于1%、大于5% ；大于10% ；大于15% ；大于20% ；大于25% ；大于30% ；大于35% ’大于40% ；大于45% ；大于50% ；大于55% ；大于60% ；大于65% ；大于70% ；大于75% ；大于80% ；大于85% ；大于90% ；和大于95%。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中全部的溶解氧基本上以所述電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)存在。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)基本上具有小于選自由以下各項組成的組的尺寸的平均直徑小于90nm ；小于80nm ；小于70nm ；小于60nm ；小于50nm ；小于40nm ；小于30nm ；小于20nm ；小于IOnm ；和小于5nm。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述離子水溶液包括鹽水溶液。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述流體是超氧合的。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述流體包括溶劑化電子的形式。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述動電學(xué)改變的水性流體的改變包括所述流體暴露于流體動力誘導(dǎo)的局部動電學(xué)效應(yīng)。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法，其中暴露于所述局部動電學(xué)效應(yīng)包括暴露于電壓脈沖和電流脈沖中的至少一種。
12.根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法，其中所述流體暴露于流體動力誘導(dǎo)的局部動電學(xué)效應(yīng)包括所述流體暴露于用以產(chǎn)生所述流體的裝置的誘導(dǎo)動電學(xué)效應(yīng)的結(jié)構(gòu)部件。
13.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述MMP9介導(dǎo)的病癥或疾病包括阻塞性氣道疾 病。
14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的方法，其中所述阻塞性氣道疾病包括哮喘和慢性阻塞性肺病中的至少一種。
15.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述MMP9介導(dǎo)的病癥或疾病包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、動脈粥樣硬化、癌癥和多發(fā)性硬化癥中的至少一種。
16.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述MMP9介導(dǎo)的病癥或疾病包括以MMP9的持久或持續(xù)表達和/或活性為特征的外周或中樞神經(jīng)系統(tǒng)的至少一種疾病或紊亂，所述疾病或紊亂選自由以下各項組成的組哺乳動物中的阿爾茨海默病、卒中/腦缺血、頭部創(chuàng)傷、脊髓損傷、多發(fā)性硬化癥、肌萎縮性側(cè)索硬化癥、亨廷頓病、帕金森病、偏頭痛、腦淀粉樣血管病、AIDS、年齡相關(guān)的認知損害、輕度認知損害和朊病毒病。
17.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，包括聯(lián)合療法，其中將至少一種另外的治療劑施用于^^ ο
18.根據(jù)權(quán)利要求17所述的方法，其中所述至少一種另外的治療劑包括施用至少一種 MMP的另外的抑制劑。
19.根據(jù)權(quán)利要求18所述的方法，其中所述至少一種MMP選自由以下各項組成的組 MMP-U MMP-2、MMP-7、MMP-8、MMP-9、MMP-10、MMP-IU MMP-12、MMP-13、MMP-14、MMP-15, MMP-16、MMP-17、MMP-18、MMP-19 禾口 MMP-20MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-7、MMP-8、MMP-9、 MMP-10, MMP-IU MMP-12、MMP-13、MMP-14、MMP-15、MMP-16、MMP-17、MMP-18、MMP-19 禾口 MMP-20。
20.根據(jù)權(quán)利要求17所述的方法，其中所述至少一種另外的治療劑為TSLP和/或 TSUR拮抗劑。
21.根據(jù)權(quán)利要求21所述的方法，其中所述TSLP和/或TSLPR拮抗劑選自由下列各項組成的組對TSLP與TSLP受體特異的中和抗體、可溶性TSLP受體分子和TSLP受體融合蛋白，包括TSLPR-免疫球蛋白Fc分子或編碼超過一個受體鏈的組分的多肽。
22.根據(jù)權(quán)利要求17所述的方法，其中所述至少一種另外的治療劑選自由以下各項組成的組標準的非留體抗炎藥(NSAID' S)、吡羅昔康、雙氯芬酸；丙酸、萘普生、氟苯布洛芬、非諾洛芬、酮洛芬和布洛芬；芬那酯、甲芬那酸、吲哚美辛、舒林酸、阿扎丙宗；吡唑啉酮、保泰松；水楊酸鹽、阿司匹林；止痛劑或關(guān)節(jié)內(nèi)療法、皮質(zhì)類固醇；透明質(zhì)酸、海爾根、 欣維可；免疫抑制劑、環(huán)孢霉素、干擾素；TNF-α抑制劑、Enbrel ;低劑量的甲氨蝶呤、 Iefunimide、羥氯喹、d_青霉胺、金諾芬、腸胃外金和口服金。
23.根據(jù)權(quán)利要求17所述的方法，其中所述至少一種另外的治療劑選自由以下各項組成的CNS藥劑組抗抑郁劑、舍曲林、氟西汀、帕羅西??；抗震顫麻痹藥；鹽酸司來吉蘭、 L-多巴、羅匹尼羅、普拉克索；MAOB抑制劑、司來吉蘭、雷沙吉蘭；COMP抑制劑、托卡朋、答是美；A-2抑制劑、多巴胺再攝取抑制劑、NMDA拮抗劑、尼古丁激動劑、多巴胺激動劑、神經(jīng)型一氧化氮合酶抑制劑、抗阿爾茨海默病藥；乙酰膽堿酯酶抑制劑、美曲膦酯、多奈哌齊、安理申、艾斯能、ENA713或利凡斯的明；四氫氨基吖啶、他克林、鹽酸他克林或THA ；C0X-1或 C0X-2抑制劑、塞來考昔、西樂葆、羅非考昔、萬絡(luò)；丙戊茶堿、抗卒中藥物、NR2B選擇性拮抗劑、甘氨酸位點拮抗劑、以及嗜中性粒細胞抑制因子(NIF)。
24.根據(jù)權(quán)利要求17所述的方法，其中所述至少一種另外的治療劑選自由以下各項組成的組雌激素；選擇性雌激素調(diào)節(jié)劑、雌激素、雷洛昔芬、他莫昔芬、屈洛昔芬、拉索昔芬； 導(dǎo)致Α. β . 1-40/1-42減少的藥劑、淀粉樣蛋白聚集抑制劑、分泌酶抑制劑；骨質(zhì)疏松癥藥劑、屈洛昔芬、fosomax ；免疫抑制劑、Π(-506、雷帕霉素；抗癌劑、內(nèi)皮抑素、血管抑素；細胞毒素藥、多柔比星、道諾霉素、順鉬、依托泊苷、紫杉醇、泰素帝；生物堿、長春新堿；抗代謝藥、甲氨蝶呤；心血管藥劑、鈣通道阻斷藥；降血脂藥劑、抑制素；貝特類、β阻滯藥、ACE抑制劑、血管緊張素-2受體拮抗劑以及血小板聚集抑制劑。
25.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中調(diào)整細胞膜電位和細胞膜電導(dǎo)率中的至少一種包括改變細胞膜結(jié)構(gòu)或功能中的至少一種，所述改變細胞膜結(jié)構(gòu)或功能包括改變膜相關(guān)蛋白或構(gòu)成成分的構(gòu)象、配體結(jié)合活性和催化活性中的至少一種。
26.根據(jù)權(quán)利要求25所述的方法，其中所述膜相關(guān)蛋白包括選自由以下各項組成的組的至少一種受體、跨膜受體、離子通道蛋白、細胞內(nèi)附著蛋白、細胞黏附蛋白、整聯(lián)蛋白等。
27.根據(jù)權(quán)利要求沈所述的方法，其中所述跨膜受體包括G-蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)。
28.根據(jù)權(quán)利要求27所述的方法，其中所述G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)與G蛋白α亞基相互作用。
29.根據(jù)權(quán)利要求觀所述的方法，其中所述G蛋白α亞基包括選自由以下各項組成的組的至少一種=GapGapGaJPGa120
30.根據(jù)權(quán)利要求四所述的方法，其中所述至少一種G蛋白α亞基是Ga,。
31.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中調(diào)整細胞膜電位和細胞膜電導(dǎo)率中的至少一種包括調(diào)整全細胞電導(dǎo)。
32.根據(jù)權(quán)利要求31所述的方法，其中調(diào)整全細胞電導(dǎo)包括調(diào)整所述全細胞電導(dǎo)的線性和非線性電壓依賴性貢獻中的至少一種。
33.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中調(diào)整細胞膜電位和細胞膜電導(dǎo)率中的至少一種包括調(diào)整鈣依賴性細胞信息傳遞途徑或系統(tǒng)。
34.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中調(diào)整細胞膜電位和細胞膜電導(dǎo)率中的至少一種包括調(diào)整磷脂酶C活性。
35.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中調(diào)整細胞膜電位和細胞膜電導(dǎo)率中的至少一種包括調(diào)整腺苷酸環(huán)化酶(AC)活性。
36.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中調(diào)整細胞膜電位和細胞膜電導(dǎo)率中的至少一種包括調(diào)整與選自由以下各項組成的組的至少一種病癥或癥狀有關(guān)的細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)阻塞性氣道疾病、慢性阻塞性肺病、哮喘、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、動脈粥樣硬化、癌癥、多發(fā)性硬化癥、阿爾茨海默病、卒中/腦缺血、頭部創(chuàng)傷、脊髓損傷、肌萎縮性側(cè)索硬化癥、亨廷頓病、帕金森病、偏頭痛、腦淀粉樣血管病、AIDS、年齡相關(guān)的認知損害；輕度認知損害和朊病毒病。
37.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，包括將所述動電學(xué)流體施用于細胞網(wǎng)絡(luò)或?qū)樱⑶疫€包括調(diào)整其中的細胞間連接。
38.根據(jù)權(quán)利要求37所述的方法，其中所述細胞間連接包括選自由緊密連接、間隙連接、黏附區(qū)和橋粒組成的組的至少一種。
39.根據(jù)權(quán)利要求37所述的方法，其中所述細胞網(wǎng)絡(luò)或?qū)影ㄟx自由肺上皮細胞、支氣管上皮細胞和腸上皮細胞組成的組的至少一種。
40.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述動電學(xué)改變的水性流體是氧合的，并且其中所述流體中的氧在大氣壓下以至少8ppm、至少15ppm、至少25ppm、至少30ppm、至少40ppm、 至少50ppm或至少60ppm氧的量存在。
41.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述動電學(xué)改變的水性流體包括溶劑化電子、和動電學(xué)改性或荷電的氧物種中的至少一種。
42.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中所述溶劑化電子或者動電學(xué)改性或荷電的氧物種的形式以至少0. Olppm、至少0. lppm、至少0. 5ppm、至少lppm、至少3ppm、至少5ppm、至少 7ppm、至少lOppm、至少15ppm或至少20ppm的量存在。
43.根據(jù)權(quán)利要求42所述的方法，其中所述動電學(xué)改變的水性流體包括由分子氧穩(wěn)定的溶劑化電子的形式。
44.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中所述調(diào)整細胞膜電位和細胞膜電導(dǎo)率中的至少一種的能力在封閉的氣密容器中持續(xù)至少2個月、至少3個月、至少4個月、至少5個月、至少6個月、至少12個月或更長時期。
45.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中在所述動電學(xué)改變的流體的電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)中存在的氧的量為在大氣壓下至少8ppm、至少15ppm、至少20ppm、至少25ppm、至少 30ppm、至少40ppm、至少50ppm或者至少60ppm氧。
46.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中治療包括通過局部、吸入、鼻內(nèi)和靜脈內(nèi)中的至少一種方式施用。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種用于治療MMP9介導(dǎo)的病癥或疾病的方法，包括施用動電學(xué)改變的水性流體，該水性流體包含電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)的離子水性溶液，所述電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)基本上具有小于大約100納米的平均直徑，并且以足以治療MMP9介導(dǎo)的病癥或疾病的量穩(wěn)定地配置在所述離子水性流體中。優(yōu)選的是，所述電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)以足以提供調(diào)整細胞膜電位和/或電導(dǎo)率的量穩(wěn)定地配置在所述流體中。
文檔編號A61K31/74GK102256607SQ200980151711
公開日2011年11月23日 申請日期2009年10月22日 優(yōu)先權(quán)日2008年10月22日
發(fā)明者安東尼·B·伍德, 格雷戈里·J·阿咸賓, 理查德·L·華森 申請人:利發(fā)利希奧公司