專利名稱：：一種生長抑素受體介導(dǎo)的腫瘤靶向藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：-本發(fā)明涉及一種腫瘤靶向藥物組合物，特別涉及一種生長抑素受體介導(dǎo)的腫瘤耙向藥物組合物。
背景技術(shù)：
：惡性腫瘤一直是困擾人類的重要疾病，目前尚無治愈癌癥的方法。對(duì)于惡性實(shí)體瘤的傳統(tǒng)療法為手術(shù)切除腫瘤后再用抗腫瘤藥物進(jìn)行化療。大部分的化療藥物沒有選擇性，這些藥物在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時(shí)，'也會(huì)對(duì)正常的細(xì)胞產(chǎn)生殺傷作用，因此會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重的副作用，如阿霉素的心臟毒性作用等。將抗腫瘤藥物用適當(dāng)?shù)妮d體系統(tǒng)(如脂質(zhì)體，膠束等)進(jìn)行包載后可以明顯延長其在體內(nèi)循環(huán)的時(shí)間，有利于抗腫瘤藥物向腫瘤區(qū)蓄積，從而增加抗癌藥物的治療指數(shù)，即增加療效，減少了毒副作用。目前已有阿霉素脂質(zhì)體、柔紅霉素脂質(zhì)體、紫杉醇脂質(zhì)體、紫杉醇膠束等產(chǎn)品上市。親水性聚乙二醇(PEG)修飾的長循環(huán)脂質(zhì)體能夠逃避血漿中的調(diào)理素的調(diào)理從而避免了被巨噬細(xì)胞攝取(故也稱為隱性脂質(zhì)體)，顯著延長了其在循環(huán)系統(tǒng)中的滯留時(shí)間，血藥濃度也明顯提高。長循環(huán)脂質(zhì)體經(jīng)增強(qiáng)滯留和滲透作用(EPR)可增加被包載藥物向腫瘤組織內(nèi)的蓄積，從而提高了抗癌藥物傳遞的耙向性。目前己有阿霉素隱性脂質(zhì)體上市(DOXIL氣CAELYX)。已有研究表明，PEG修飾可穩(wěn)定脂質(zhì)體，減少藥物的釋放(進(jìn)而減少藥物擴(kuò)散)，并在一定程度上阻礙脂質(zhì)體的融合和吞噬，因此長循環(huán)脂質(zhì)體盡管能夠增加腫瘤組織中的濃度，但療效卻不一定有所增加。因此提高脂質(zhì)體與腫瘤相關(guān)細(xì)胞的作用就很重要了。目前用配體修飾的長循環(huán)脂質(zhì)體已成為提高抗癌藥物靶向性的重要手段。PEG修飾膠束或納米粒等也具有同樣的效果。國內(nèi)外有學(xué)者用葉酸、轉(zhuǎn)鐵蛋白和單克隆抗體等來修飾隱性脂質(zhì)體等，以增加藥物傳遞的靶向性，動(dòng)物試驗(yàn)證明能夠顯著提高抗癌藥物的療效，相關(guān)產(chǎn)品有的已進(jìn)入臨床研究。原發(fā)腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移依賴于新生血管的生成(angiogenesis)。腫瘤既可通過腫瘤血管從宿主獲取營養(yǎng)和氧氣，又可通過腫瘤血管源源不斷地向宿主輸送轉(zhuǎn)移細(xì)胞，并在機(jī)體的其他部位繼續(xù)生長和誘導(dǎo)血管形成，導(dǎo)致腫瘤轉(zhuǎn)移。因此，腫瘤的血管系統(tǒng)已成為一個(gè)嶄新的、有希望的抗腫瘤治療耙點(diǎn)。人們已致力于開發(fā)和研究破壞或抑制血管生成，有效地阻止腫瘤生長和轉(zhuǎn)移的藥物，這類藥物稱為腫瘤血管生成抑制劑(tumorangiogenesiinhibitor，TAI)。TAI通過切斷腫瘤賴以生長和轉(zhuǎn)移的營養(yǎng)來源和遷移通道，具有許多優(yōu)勢(shì)(l)治療發(fā)生時(shí)，血管形成已被啟動(dòng)，故TAI治療具有良好的特異性。(2)血管內(nèi)皮細(xì)胞暴露于血流中，藥物能直接發(fā)揮作用，故劑量小、療效高。(3)內(nèi)皮細(xì)胞基因表達(dá)相對(duì)穩(wěn)定，不易產(chǎn)生耐藥性。(4)腫瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖速度較正常血管內(nèi)皮細(xì)胞快許多倍，故TAI對(duì)正常組織毒性小。我們?cè)暾?qǐng)二項(xiàng)中國發(fā)明專利(200510063388.0，2008101345812)，涉及供注射用的載抗癌藥物的長循環(huán)脂質(zhì)體，其特征在于脂質(zhì)體同時(shí)用PEG鏈和含RGD序列的線性多肽或含RGD類似物的線性片段修飾。研究表明，這種新型載體的確可以在一定程度上增加腫瘤細(xì)胞內(nèi)藥物的濃度，提高抗腫瘤效果。研究已經(jīng)證實(shí)，生長抑素受體(SSTR)廣泛分布于人體各種組織。尤其在神經(jīng)內(nèi)分泌功能的腫瘤和部分實(shí)體瘤，如類癌、胃泌素瘤、高胰高血糖素瘤、胰腺炎、肺癌、肝癌、胃癌、乳腺癌、卵巢上皮癌、子宮癌、直腸癌等均有高密度、高親和力的生長抑素受體(SSTR)的表達(dá)。與正常組織相比，腫瘤組織及其轉(zhuǎn)移灶中SSTR表達(dá)水平高，與生長抑素SST及其類似物的親和力大，可以作為腫瘤診斷和治療水平的新的靶物質(zhì)。體內(nèi)外研究表明SSTR有5種亞型(SSTR1-SSTR5)存在，且不同類型的腫瘤表達(dá)的SSTR亞型不同。絕大多數(shù)人類腫瘤高表達(dá)一種或幾種SSTR亞型。例如小細(xì)胞肺癌一般高表達(dá)SSTR2亞型，嗜鉻細(xì)胞主要以表達(dá)SSTR2和SSTR3為主。奧曲肽是一個(gè)人工合成的由8個(gè)氨基酸組成的生長抑素類環(huán)肽，其性質(zhì)與生長抑素SST性質(zhì)相似，對(duì)生物酶的分解有很強(qiáng)的抵抗作用，半衰期長。Hofland等的研究表明5中SSTR亞型對(duì)奧曲肽的內(nèi)化作用各異，其中SSTR2、SSTR3亞型對(duì)奧曲肽的親和力最強(qiáng)。因此，多數(shù)SSTR陽性腫瘤SSTR2和SSTR3亞型的高表達(dá)，以及奧曲肽與SSTR2和SSTR3亞型的高親和力和高特異性，為SSTR陽性腫瘤采用以奧曲肽等SST類似物為靶頭的藥物載送系統(tǒng)的設(shè)計(jì)，在分子水平上提供了可靠的依據(jù)。目前，臨床上采用放射性同位素標(biāo)記的奧曲肽作為腫瘤示蹤劑，已被批準(zhǔn)用于腫瘤的定位與診斷?；谏鲜霰尘?，我們?cè)O(shè)計(jì)了一種全新的藥物輸送系統(tǒng)，裝載藥物(抗腫瘤藥物或/和抗血管藥物)，以EPR效應(yīng)增加被動(dòng)靶向作用，以生長抑素受體介導(dǎo)增加主動(dòng)靶向作用和藥物在腫瘤細(xì)胞的蓄積，增強(qiáng)腫瘤靶向治療效果。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種生長抑素受體介導(dǎo)的腫瘤靶向藥物組合物。本發(fā)明的藥物組合物其組成為具有靶向生長抑素受體的功能多肽、聚乙二醇、藥用載體以及藥物。上述的藥物組合物，各組分之間的重量百分比為靶向生長抑素受體的功能多肽0.0P/f10%聚乙二醇O.01%-20%藥用載體40%-99.88%藥物O.1%-30%。上述的藥物組合物，其中靶向生長抑素受體的功能多肽選自生長抑素及類似物，優(yōu)選為奧曲肽(octreotide),伐普肽(Vapreotide)，蘭瑞肽(Lanreotide)，更優(yōu)選為奧曲肽(octreotide)。上述的藥物組合物，其中聚乙二醇的分子量為200-5000。所述的藥用載體包括脂質(zhì)體、納米粒、微球、微乳、膠束及泡囊。所述藥物為抗腫瘤藥物或/和抗血管藥物。其中抗腫瘤藥物選自阿霉素、環(huán)磷酰胺、放線菌素、博來霉素、正定霉素，表阿霉素、絲裂霉素、甲氨喋呤、紫杉醇、多西紫杉醇、喜樹堿、羥基喜樹堿、柔紅霉素、5-氟脲嘧啶、卡鉑、卡氮芥、順鉑、龜臼乙叉甙、干擾素、長春堿、長春新堿、三苯氧胺以及相應(yīng)的鹽類。其中抗血管藥物選自康貝司汀(CA-4)、ZD6126、范得它尼(ZD6474)、Iressa(ZD1839)、舒尼替尼(SU11248)、SU5416、a-2a干擾素(IFNa-2a)、白介素-12(IL-12)、煙曲霉素類似物(TNP-470)、阿曲生坦(ABT-627)、抗血管生成肽anginex、索拉非尼(BAY439006)、PTK787/ZK222584(vatalanib)、AG-013736、AG3340、沙利度胺(Thaiidomide)及其衍生物(雷尼度胺和Actimid)、血管抑素(angiostatin)、內(nèi)皮抑素(endostatin)、阿曲生坦(ABT-627)、Neovastat(AE941)、己酮可可堿(DMXAA)，角鯊胺以及抗血管生成單抗(VEGFR-2單抗DC101,貝伐單抗(Bevacizumab)，EGFR單抗(Erbitux)。上述的藥物組合物，其中，抗血管藥物和抗腫瘤藥物的重量比例為1:1-100。上述的藥物組合物，所述的藥用載體包括脂質(zhì)體、納米粒、微球、微乳、膠束及泡囊，其中載體材料包括磷脂、PEG化磷脂、膽固醇、聚乳酸(PLA)、聚乳酸-聚乙醇酸共聚物(PLGA)、PCL、PEG-PLA、PEG-PLGA、PEG-PCL、聚氰基丙烯酸烷基酯、白蛋白、明膠、殼聚糖，聚氧乙烯蓖麻油、普蘭尼克F68、山梨酸甘油酯、單硬脂酸甘油脂、植物油。其中，藥用載體中的磷脂選自大豆磷脂、二月桂酰卵磷脂、二肉豆蔻酰卵磷脂、二棕櫚酰卵磷脂、二硬脂酰卵磷脂、二硬脂酰卵磷脂、l-肉豆蔻酰-2-棕櫚酰卵磷脂、1-棕櫚酰-2-肉豆蔻酰卵磷脂、l-棕櫚酰-2-硬脂酰卵磷脂、l-硬脂酰-2-棕櫚酰卵磷脂、蛋黃卵磷脂、氫化豆磷脂、二油?；蚜字?、二月桂酰磷脂酰甘油、二棕櫚脂酰甘油、二硬脂酰磷脂酰甘油、二油酰磷脂酰甘油、二肉豆蔻酰磷脂酸、二棕櫚酰磷脂酸、二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺、二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺、二肉豆蔻酰磷脂酰絲氨酸、二棕櫚酰磷脂酰二絲氨酸、腦磷脂酰絲氨酸、腦神經(jīng)鞘磷脂、二棕櫚酰神經(jīng)鞘磷脂、二硬脂酰神經(jīng)鞘磷脂或二硬脂酰磷脂酰乙醇胺之一種或一種以上者。本發(fā)明的藥物組合物的制備方法如下(1)將功能多肽(生長抑素或類似物)與適當(dāng)?shù)妮d體材料采用化學(xué)偶聯(lián)方法制備得到導(dǎo)向化合物，其中優(yōu)選的是將功能多肽與PEG化的載體材料偶聯(lián)制得導(dǎo)向化合物;(2)將該導(dǎo)向化合物插入到藥用載體的核殼結(jié)構(gòu)中構(gòu)成靶向載體；(3)抗腫瘤藥物或/和抗血管藥物可在制備時(shí)包入到藥用載體中或包入已制備好的靶向載體中，也可以通過化學(xué)方法與高分子材料偶聯(lián)。上述的藥物組合物，可按常規(guī)方法(必要時(shí)加入常規(guī)藥用輔料)制備成注射劑、固體制劑和液體制劑。上述藥物組合物制備的藥物制劑，是靜脈注射、皮下注射、肌內(nèi)注射、瘤內(nèi)注射、口服給藥、鼻腔給藥和肺部給藥的制劑。本發(fā)明的藥物組合物優(yōu)選的制備方法如下(1)對(duì)于脂質(zhì)體系統(tǒng)，一般可將PEG化的磷脂(如DSPE-PEG)的PEG末端活化，形成活化酯DSPE-PEG-BTC(或DSPE-PEG-NHS)，生長抑素及類似物(以SST表示)與DSPE-PEG-BTC(或DSPE-PEG-NHS)反應(yīng)，形成DSPE-PEG-SST導(dǎo)向化合物；(2)再取磷脂、膽固醇、DSPE-PEG、DSPE-PEG-SST作為制備脂質(zhì)體的原料，按脂質(zhì)體的常規(guī)制備方法，制備SSTA修飾的長循環(huán)脂質(zhì)體；也可先制備長循環(huán)脂質(zhì)體，再將導(dǎo)向化合物插入到制備好的脂質(zhì)體中形成長循環(huán)靶向脂質(zhì)體；(3)用擠壓過膜、超聲或高壓勻質(zhì)等方法將脂質(zhì)體的粒徑控制在100nm左右，抗腫瘤藥物(如阿霉素，紫杉醇，多西紫杉醇)或/和抗血管藥物(如CA-4，DMXAA，ZD6126)可在制備脂質(zhì)體的同時(shí)加入或者通過其他方法裝載到已制備好的脂質(zhì)體中。其中，對(duì)于納米膠束系統(tǒng)，一般可將PEG化高分材料(如PEG-PLA、PEG-PLGA、PEG-PCL，以POLYMER-PEG表示)的PEG末端活化，形成活化酯POLYMER-PEG-BTC(或POLYMER-PEG-NHS)，SST與POLYMER-PEG-BTC(或POLYMER-PEG-麗S)反應(yīng)，形成POLYMER-PEG-SST導(dǎo)向化合物。再以POLYMER-PEG-SST和POLYMER-PEG為原料，按常規(guī)方法制備高分子納米膠束(納米粒)。抗腫瘤藥物(如紫杉醇，多西紫杉醇，阿霉素)或/和抗血管藥物(如CA-4)可在制備膠束的同時(shí)包入，也可與POLYMER進(jìn)行化學(xué)偶聯(lián)。本發(fā)明藥物組合物最優(yōu)選的制備方法在實(shí)施例中。本發(fā)明的藥物組合物優(yōu)點(diǎn)本發(fā)明的藥物組合物用SSTA與PEG同時(shí)修飾的藥用載體包載抗腫瘤藥物或/和抗血管藥物，以便進(jìn)一步提高抗腫瘤藥物的治療效果。本發(fā)明的組合物中采用生長抑素或其類似物進(jìn)行表面修飾，其特異性和高效結(jié)合腫瘤表面生長抑素受體的效果已得到臨床廣泛證實(shí)。本發(fā)明的PEG的長循環(huán)作用也已被證明切實(shí)有效。本發(fā)明利用上述長循環(huán)耙向載體包載抗腫瘤藥物或/和抗血管藥物，其中PEG修飾可增加EPR效應(yīng)，SST修飾可增加主動(dòng)靶向效果并增加藥物在腫瘤組織，特別是腫瘤細(xì)胞中的蓄積。雙重作用的結(jié)果可明顯增中抗腫瘤效果。如載體中同時(shí)裝載兩種藥物，兩種藥物可在腫瘤部位先后或同時(shí)釋放，抗血管藥物封閉血管，使抗腫瘤藥物在腫瘤部位滯留蓄積并發(fā)揮殺傷腫瘤細(xì)胞的作用。以脂質(zhì)體為例，脂溶性的抗血管藥物以分子狀態(tài)分散在脂質(zhì)體的脂質(zhì)雙層中，可以釋放較快，而蒽環(huán)類抗腫瘤藥物由于在脂質(zhì)體中產(chǎn)生不溶性沉降而釋放較慢，因此物理裝載的兩種藥物就可以方便地實(shí)現(xiàn)不同的釋放速度，先釋放的抗血管藥物可封閉血管，使抗腫瘤藥物多數(shù)還沒有釋放出來就被關(guān)在腫瘤組織中，避免了抗腫瘤藥物再分布進(jìn)入體循環(huán)，因此特別有利于高效地殺傷腫瘤細(xì)胞?？偠灾景l(fā)明充分發(fā)揮了長循環(huán)靶向載體的特點(diǎn)，以及兩種不同作用機(jī)理的藥物特點(diǎn)，合理整合了載體和藥物的優(yōu)勢(shì)，為腫瘤治療提供了新的思路，不同于現(xiàn)有的抗腫瘤藥物治療方案。本發(fā)明的藥物組合物制備方法生產(chǎn)簡單。只需要合成導(dǎo)向化合物，然后按常規(guī)方法制備藥用載體，藥物可按性質(zhì)不同采用不同的加入方法，獲得的包封率都可以達(dá)到治療通過研究已證實(shí)，本發(fā)明的藥物組合物在體外對(duì)腫瘤細(xì)胞具有明顯的選擇性。圖l、兩種阿霉素脂質(zhì)體(L[D]和OCT-L[D])的細(xì)胞毒試驗(yàn)比較圖2a、載藥膠束的性質(zhì)考察(平均粒徑)圖2b、載藥膠束的性質(zhì)考察(粒子分散)圖3、3種膠束系統(tǒng)考察細(xì)胞內(nèi)的遞送效率左一空白細(xì)胞中一非主動(dòng)耙向膠束右一奧曲肽修飾的主動(dòng)靶向膠束圖4a、非主動(dòng)靶向PLGA膠束圖4b、奧曲肽主動(dòng)靶向PLGA膠束具體的實(shí)施方式通過以下實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明，但不作為本發(fā)明的限制。實(shí)施例1、同時(shí)包載CA-4和阿霉素的奧曲肽(OCT)修飾的長循環(huán)脂質(zhì)體OCT-L[CD]脂質(zhì)體的處方分別為EPC:CHOL:DSPE-PEG:CA-4(25:1.28:6.24:2)(單位mg)。精密稱取處方量的EPC，CHOL，DSPE-PEG，DSPE-PEG-OCT(2°/。摩爾比)及CA-4置梨形瓶中，加適量氯仿溶解。37。C減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)成均勻的透明薄膜。加入123mM的硫酸銨溶液，水浴超聲至出現(xiàn)藍(lán)色乳光。再擠壓過200nm的聚碳酯膜5次。將制得的脂質(zhì)體過SephadexG50柱，用PBS緩沖液(pH7.4)作為流動(dòng)相洗脫，收集脂質(zhì)體部分，將收集到的脂質(zhì)體置40°C水浴中加熱，加入阿霉素粉末孵育20分鐘，并時(shí)時(shí)振搖，即得本品。實(shí)施例2、同時(shí)包載CA-4和阿霉素的奧曲肽(OCT)修飾的長循環(huán)脂質(zhì)體OCT-L[CD]基本理化性質(zhì)本發(fā)明制備的同時(shí)包載CA-4和阿霉素的長循環(huán)脂質(zhì)體L[CD]和OCT-L[CD]基本理化性質(zhì)比較見表l:<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>L(D)88.650.237-4.916OCT-L(D)86.870.169-5.189L(CD)92.700.232-2.198OCT-L(CD)91.430.199-4.911實(shí)施例3、包載阿霉素的OCT修飾的長循環(huán)脂質(zhì)體OCT-L[D]體外腫瘤細(xì)胞(NCI-H446)生長抑制試驗(yàn)。研究結(jié)果表明，奧曲肽OCT修飾的脂質(zhì)體的細(xì)胞毒作用要比非靶向修飾的脂質(zhì)體的作用明顯，這也說明的奧曲肽修飾的脂質(zhì)體腫瘤細(xì)胞靶向作用可以顯著增強(qiáng)抗腫瘤藥物的細(xì)胞攝入。具體結(jié)果見圖l。實(shí)施例4、同時(shí)包載CA-4和阿霉素的伐普肽(VAP)修飾的長循環(huán)脂質(zhì)體VAP-L[CD〗脂質(zhì)體的處方分別為EPC:CHOL:DSPE-PEG:CA-4(25:1.28:6.24:2)(單位mg)。精密稱取處方量的EPC，CHOL，DSPE-PEG,DSPE-PEG-VAP(5%摩爾比)及CA-4置梨形瓶中，加適量氯仿溶解。37'C減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)成均勻的透明薄膜。加入50mM的硫酸銨溶液，水浴超聲至出現(xiàn)藍(lán)色乳光。再擠壓過200nm的聚碳酯膜5次。將制得的脂質(zhì)體過SephadexG50柱，用PBS緩沖液(pH7.4)作為流動(dòng)相洗脫，收集脂質(zhì)體部分，將收集到的脂質(zhì)體置37。C水浴中加熱，加入阿霉素粉末孵育20分鐘，并時(shí)時(shí)振搖，即得本品。上述制得阿霉素脂質(zhì)體的粒徑應(yīng)控制在100nm左右。實(shí)施例5、同時(shí)包載CA-4和阿霉素的蘭瑞肽(LAN)修飾的長循環(huán)脂質(zhì)體LAN-L[CD]脂質(zhì)體的處方分別為EPC:CHOL:DSPE-PEG:CA-4(25:1.28:6.24:2)(單位mg)。精密稱取處方量的EPC，CHOL，DSPE-PEG、DSPE-PEG-LAN(2%摩爾比)及CA-4置梨形瓶中，加適量氯仿溶解。37t:減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)成均勻的透明薄膜。加入50mM的硫酸銨溶液，水浴超聲至出現(xiàn)藍(lán)色乳光。再擠壓過200應(yīng)的聚碳酯膜5次。將制得的脂質(zhì)體過SephadexG50柱，用PBS緩沖液(pH7.4)作為流動(dòng)相洗脫，收集脂質(zhì)體部分，將收集到的脂質(zhì)體置37。C水浴中加熱，加入阿霉素粉末孵育20分鐘，并時(shí)時(shí)振搖，即得本品。上述制得阿霉素脂質(zhì)體的粒徑應(yīng)控制在100nm左右。實(shí)施例6、同時(shí)包載CA-4和阿霉素的OCT修飾的長循環(huán)脂質(zhì)體OCT-L[CD]脂質(zhì)體的處方分別為EPC:CHOL:DSPE-PEG:CA-4(25:1.28:6.24:2)(單位mg)。精密稱取處方量的EPC，CHOL，DSPE-PEG，DSPE-PEG-OCT(1.5%摩爾比)及CA-4置梨形瓶中，加適量氯仿溶解。37r減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)成均勻的透明薄膜。加入50mM的硫酸銨溶液，水浴超聲至出現(xiàn)藍(lán)色乳光。再擠壓過200nm的聚碳酯膜5次。將制得的脂質(zhì)體過SephadexG50柱，用PBS緩沖液(pH7.4)作為流動(dòng)相洗脫，收集脂質(zhì)體部分，將收集到的脂質(zhì)體置37°C水浴中加熱，加入阿霉素粉末孵育20分鐘，并時(shí)時(shí)振搖，即得本品。實(shí)施例7、同時(shí)包載CA-4和阿霉素的OCT修飾的長循環(huán)脂質(zhì)體OCT-L[CD]脂質(zhì)體的處方分別為HSPC:CHOL:DSPE-PEG:CA-4(25:1.28:6.24:2)(單位mg)。精密稱取處方量的HSPC，CHOL,DSPE-PEG,DSPE-PEG-OCT(2%摩爾比)及CA-4置梨形瓶中，加適量氯仿溶解。37'C減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)成均勻的透明薄膜。加入123mM的硫酸銨溶液，水浴超聲至出現(xiàn)藍(lán)色乳光。再擠壓過200nm的聚碳酯膜5次。將制得的脂質(zhì)體過Sephadex柱，用PBS緩沖液(pH7.4)作為流動(dòng)相洗脫，收集脂質(zhì)體部分，將收集到的脂質(zhì)體置40°C水浴中加熱,加入阿霉素粉末孵育20分鐘，并時(shí)時(shí)振搖，即得本品。實(shí)施例8、同時(shí)包載DMXAA(—種血管破壞劑)和阿霉素的OCT修飾的長循環(huán)脂質(zhì)體脂質(zhì)體的處方分別為HSPC:CHOL:DSPE-PEG:DMXAA(20:1.5:5:2)(單位mg)。精密稱取處方量的EPC，CHOL，DSPE-PEG,DSPE-PEG-OCT(1.5%摩爾比)及DMXAA置梨形瓶中，加適量氯仿溶解。4(TC減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)成均勻的透明薄膜。加入150mM的硫酸銨溶液，水浴超聲至出現(xiàn)藍(lán)色乳光。再擠壓過200nm的聚碳酯膜5次。將制得的脂質(zhì)體過SephadexG50柱，用PBS緩沖液(pH7.4)作為流動(dòng)相洗脫，收集脂質(zhì)體部分，將收集到的脂質(zhì)體置40°C水浴中加熱，加入阿霉素粉末孵育20分鐘，并時(shí)時(shí)振搖，即得本品。上述制得阿霉素脂質(zhì)體的粒徑應(yīng)控制在100nm左右。實(shí)施例9、同時(shí)包載ZD6126(—種新生血管抑制劑)和阿霉素的OCT修飾的長循環(huán)脂質(zhì)體脂質(zhì)體的處方分別為EPC:CHOL:DSPE-PEG:ZD6126(25:2:5:2).(單位:mg)。精密稱取處方量的EPC，CHOL，DSPE-PEG，DSPE-PEG-OCT(2%摩爾比)及ZD6126置梨形瓶中，加適量氯仿溶解。37'C減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)成均勻的透明薄膜。加入lOOmM的硫酸銨溶液，水浴超聲至出現(xiàn)藍(lán)色乳光。再擠壓過200nm的聚碳酯膜5次。將制得的脂質(zhì)體過SephadexG50柱，用PBS緩沖液(pH7.4)作為流動(dòng)相洗脫，收集脂質(zhì)體部分，將收集到的脂質(zhì)體置37。C水浴中加熱，加入阿霉素粉末孵育20分鐘，并時(shí)時(shí)振搖，即得本品。實(shí)施例10、同時(shí)包載CA-4和紫杉醇(PTX)的OCT修飾的長循環(huán)脂質(zhì)體脂質(zhì)體的處方分別為EPC:CHOL:DSPE-PEG:CA-4:PTX(25:1.5:5:2:1)(單位mg)。精密稱取處方量的EPC,CHOL，DSPE-PEG，DSPE-PEG-OCT(2%摩爾比)，紫杉醇及CA-4置梨形瓶中，加適量氯仿溶解。37。C減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)成均勻的透明薄膜。精密吸取適量生理鹽水加入梨形瓶中，渦旋振蕩使脂膜完全脫落，在5(TC水浴條件下超聲20min至出現(xiàn)淡藍(lán)色乳光，并于4匸室冷藏備用。實(shí)施例ll、同時(shí)包載CA-4和多烯紫杉醇(DTX)的OCT肽修飾的長循環(huán)脂質(zhì)體脂質(zhì)體的處方分別為EPC:CHOL:DSPE-PEG:CA-4:DTX(25:1.5:5:2:1)(單位mg)。精密稱取處方量的EPC,CHOL，DSPE-PEG，DSPE-PEG-OCT(2%摩爾比)，多西紫杉醇(DTX)及CA-4置梨形瓶中，加適量氯仿溶解。37。C減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)成均勻的透明薄膜。精密吸取適量生理鹽水加入梨形瓶中，渦旋振蕩使脂膜完全脫落，在5(TC水浴條件下超聲20mm至出現(xiàn)淡藍(lán)色乳光，并于4'C室冷藏備用。實(shí)施例12、單獨(dú)包載阿霉素的OCT修飾的長循環(huán)脂質(zhì)體OCT-L[D]脂質(zhì)體的處方分別為EPC:CHOL:DSPE-PEG(25:1.28:6.24:)(單位mg)。精密稱取處方量的EPC,CHOL，DSPE-PEG,DSPE-PEG-OCT(1.5%摩爾比)置梨形瓶中，加適量氯仿溶解。37'C減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)成均勻的透明薄膜。加入123mM的硫酸銨溶液，水浴超聲至出現(xiàn)藍(lán)色乳光。再擠壓過200nm的聚碳酯膜5次。將制得的脂質(zhì)體過SephadexG50柱，用PBS緩沖液(pH7.4)作為流動(dòng)相洗脫，收集脂質(zhì)體部分，將收集到的脂質(zhì)體置40。C水浴中加熱，加入阿霉素粉末孵育20分鐘，并時(shí)時(shí)振搖，即得本品。實(shí)施例13、單獨(dú)包載阿霉素的VAP肽修飾的長循環(huán)脂質(zhì)體VAP-L[CD]脂質(zhì)體的處方分別為HSPC:CHOL:DSPE-PEG(25:1.28:6.24)(單位:mg)。精密稱取處方量的HSPC，CHOL，DSPE-PEG,DSPE-PEG-VAP(2%摩爾比)置梨形瓶中，加適量氯仿溶解。37'C減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)成均勻的透明薄膜。加入123mM的硫酸銨溶液，水浴超聲至出現(xiàn)藍(lán)色乳光。再擠壓過200nm的聚碳酯膜5次。將制得的脂質(zhì)體過SephadexG50柱，用PBS緩沖液(pH7.4)作為流動(dòng)相洗脫，收集脂質(zhì)體部分，將收集到的脂質(zhì)體置40。C水浴中加熱，加入阿霉素粉末孵育20分鐘，并時(shí)時(shí)振搖，即得本品。實(shí)施例14、單獨(dú)包載阿霉素的LAN肽修飾的長循環(huán)脂質(zhì)體LAN-L[CD]脂質(zhì)體的處方分別為EPC:CHOL:DSPE-PEG(25:1.28:6.24)(單位:mg)。精密稱取處方量的EPC，CHOL，DSPE-PEG,DSPE-PEG-OCT(2%摩爾比)置梨形瓶中，加適量氯仿溶解。37"減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)成均勻的透明薄膜。加入50mM的硫酸銨溶液，水浴超聲至出現(xiàn)藍(lán)色乳光。再擠壓過200nm的聚碳酯膜5次。將制得的脂質(zhì)體過SephadexG50柱，用PBS緩沖液(pH7.4)作為流動(dòng)相洗脫，收集脂質(zhì)體部分，將收集到的脂質(zhì)體置37°C水浴中加熱，加入阿霉素粉末孵育20分鐘，并時(shí)時(shí)振搖，即得本品。實(shí)施例15、導(dǎo)向化合物的合成奧曲肽與NHS-PEG，-PLGA細(xì)。/NHS-PEG咖。-PLA測(cè),按摩爾比1:2加入到反應(yīng)介質(zhì)DMSO中，奧曲肽在DMSO中的濃度為lmg/ml，同時(shí)加入少量三乙胺(三乙胺與活潑酯的摩爾比為3:1)，避光，在室溫下劇烈攪拌l小時(shí)，偶聯(lián)產(chǎn)物的反應(yīng)產(chǎn)率可達(dá)85%以上(OCT-PEG:,-PLGA細(xì)。的產(chǎn)率比OCT-PEG謹(jǐn)廠PLA週)略低)。反應(yīng)結(jié)束后，透析48小時(shí)，凍干，至-20度備用。載藥膠束的制備將膠束材料和多西紫杉醇溶解于少量乙腈中，渦旋混勻，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)將乙腈溶劑揮千，將茄形瓶至60度水浴中溫浸片刻，加入一定量的60度蒸餾水水化，使PLGA膠束的材料濃度為2mg/ml，PLA膠束的材料濃度為10mg/ml，劇烈渦旋3分鐘，PEG-PLGA材料在50度的水浴中超聲，PEG-PLA材料在60度水浴中超聲，直至溶液澄清透亮。將制好的膠束溶液至5毫升離心管中10000轉(zhuǎn)離心5分鐘，吸取上清液，0.22um水系過膜，即得。載藥膠束的性質(zhì)考察平均粒徑為40nm左右，粒子分散均勻(圖2a、2b)。實(shí)施例16、體外腫瘤細(xì)胞靶向性評(píng)價(jià)采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)用包載Dil探針的3種膠束系統(tǒng)考察細(xì)胞內(nèi)的遞送效率，選擇小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H446作為細(xì)胞模型。藥物與細(xì)胞一起孵育3小時(shí)后，采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞攝入熒光量。研究結(jié)果表明，與非靶向膠束相比，奧曲肽修飾的靶向膠束可以顯著地增加細(xì)胞對(duì)膠束的攝入量(圖3)。采用激光共聚焦檢測(cè)將NCI-H446細(xì)J1分別與主動(dòng)靶向和非主動(dòng)靶向膠束共同孵育3小時(shí)后，依次用冷PBS緩沖液洗3次，用組織細(xì)胞固定液固定10分鐘，吸去固定液，用冷PBS洗3次，然后用Hoechest33258進(jìn)行細(xì)胞染核5分鐘，吸去染液，用冷PBS洗3次后，加入2mlPBS液封片，避光測(cè)定。由圖4(a、b)可見，主動(dòng)靶向膠束進(jìn)入細(xì)胞的量明顯增加，細(xì)胞內(nèi)熒光強(qiáng)度遠(yuǎn)強(qiáng)于非主動(dòng)靶向膠束。實(shí)施例17、各組分的重量百分比為奧曲肽0.01%聚乙二醇0.01%脂質(zhì)體99.88%CA-4和阿霉素0.1%，兩者重量比為l:1制備方法同實(shí)施例1實(shí)施例18、各組分的重量百分比為奧曲肽10%聚乙二醇20%脂質(zhì)體40%CA-4和阿霉素30%，兩者重量比為1:100制備方法同實(shí)施例1實(shí)施例19、各組分的重量百分比為奧曲肽5%聚乙二醇10%脂質(zhì)體70%CA-4和阿霉素15%兩者重量比為1:50制備方法同實(shí)施例1。權(quán)利要求1、一種生長抑素受體介導(dǎo)的腫瘤靶向藥物組合物，其組成為具有靶向生長抑素受體的功能多肽、聚乙二醇、藥用載體以及藥物，其中所述藥物為抗腫瘤藥物或/和血管抑制劑，其中所述的藥用載體選自脂質(zhì)體、納米粒、微球、微乳、膠束或泡囊。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于，它們之間的重量百分比為靶向生長抑素受體的功能多肽0.01%-10%聚乙二醇O.01%-20%藥用載體40%-99.88%藥物0,1%-30%。3、根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于，所述靶向生長抑素受體的功能多肽選自生長抑素及類似物；所述聚乙二醇的分子量為200-5000;所述抗腫瘤藥物選自阿霉素、環(huán)磷酰胺、放線菌素、博來霉素、正定霉素，表阿霉素、絲裂霉素、甲氨喋呤、紫杉醇、多西紫杉醇、喜樹堿、羥基喜樹堿、柔紅霉素、5-氟脲嘧啶、卡鉑、卡氮芥、順鉑、龜臼乙叉甙、干擾素、長春堿、長春新堿、三苯氧胺以及相應(yīng)的鹽；所述腫瘤血管抑制劑選自新生血管抑制劑和血管破壞藥物康貝司汀、ZD6126、范得它尼、Iressa、舒尼替尼、SU5416、a-2a干擾素、白介素-12)、煙曲霉素類似物、阿曲生坦、抗血管生成肽、索拉非尼、PTK787、AG-013736、AG3340、沙利度胺、雷尼度胺、Actimid、血管抑素、內(nèi)皮抑素、、Neovastat、已酮可可堿，角鯊胺、VEGFR-2單抗DCIOI，貝伐單抗，EGFR單抗，所述藥用載體，其中載體材料選自磷脂、PEG化磷脂、膽固醇、聚乳酸、聚乳酸-聚乙醇酸共聚物、PCL、PEG-PLA、PEG-PLGA、PEG-PCL、聚氰基丙烯酸烷基酯、白蛋白、明膠、殼聚糖，聚氧乙烯蓖麻油、普蘭尼克F68、山梨酸甘油酯、單硬脂酸甘油脂、植物油。4、根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于，抗血管藥物和抗腫瘤藥物的重量比為1:1-100。5、根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于，所述的磷脂選自大豆磷脂、二月桂酰卵磷脂、二肉豆蔻酰卵磷脂、二棕櫚酰卵磷脂、二硬脂酰卵磷脂、二硬脂酰卵磷脂、l-肉豆蔻酰-2-棕櫚酰卵磷脂、1-棕櫚酰-2-肉豆蔻酰卵磷脂、l-棕櫚酰-2-硬脂酰卵磷脂、1-硬脂酰-2-棕櫚酰卵磷脂、蛋黃卵磷脂、氫化豆磷脂、二油?；蚜字?、二月桂酰磷脂酰甘油、二棕櫚脂酰甘油、二硬脂酰磷脂酰甘油、二油酰磷脂酰甘油、二肉豆蔻酰磷脂酸、二棕櫚酰磷脂酸、二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺、二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺、二肉豆蔻酰磷脂酰絲氨酸、二棕櫚酰磷脂酰二絲氨酸、腦磷脂酰絲氨酸、腦神經(jīng)鞘磷脂、二棕櫚酰神經(jīng)鞘磷脂、二硬脂酰神經(jīng)鞘磷脂或二硬脂酰磷脂酰乙醇胺之一種或一種以上者。6、含有權(quán)利要求1所述的藥物組合物的藥物制劑，所述藥物制劑是注射劑、固體制劑或液體制劑，在制成制劑時(shí)，如果必要，加入常規(guī)藥用輔料。7、如權(quán)利要求6所述的藥物制劑，其特征在于，是靜脈注射、皮下注射、肌內(nèi)注射、瘤內(nèi)注射、口服給藥、鼻腔給藥或肺部給藥的藥物制劑。8、權(quán)利要求1所述的組合物的制備方法，其特征在于，將功能多肽與藥用載體材料采用化學(xué)偶聯(lián)方法制備得到導(dǎo)向化合物，將該導(dǎo)向化合物插入到藥用載體的核殼結(jié)構(gòu)中構(gòu)成靶向載體；抗腫瘤藥物或/和抗血管藥物可先加入到藥用載體中或加入已制備好的靶向載體中，或通過化學(xué)方法與高分子材料偶聯(lián)。9、權(quán)利要求8的制備方法，其特征在于，對(duì)于脂質(zhì)體，將PEG化的磷脂的PEG末端活化，形成活化酯DSPE-PEG-BTC或DSPE-PEG-NHS，生長抑素及類似物與DSPE-PEG-BTC或DSPE-PEG-NHS反應(yīng)，形成DSPE-PEG-SST導(dǎo)向化合物；再取磷脂、膽固醇、DSPE-PEG、DSPE-PEG-SST作為制備脂質(zhì)體的原料，按脂質(zhì)體的常規(guī)制備方法，制備生長抑素及類似物修飾的長循環(huán)脂質(zhì)體；或先制備長循環(huán)脂質(zhì)體，再將導(dǎo)向化合物插入到制備好的脂質(zhì)體中形成長循環(huán)耙向脂質(zhì)體；用擠壓過膜、超聲或高壓勻質(zhì)等方法將脂質(zhì)體的粒徑控制在lOOnm左右，抗藥物可在制備脂質(zhì)體的同時(shí)加入或者通過其他方法裝載到已制備好的脂質(zhì)體中；對(duì)于納米膠束系統(tǒng)，將PEG化.高分材料的PEG末端活化，形成活化酯POLYMER-PEG-BTC或POLYMER-PEG-NHS，生長抑素及類似物與POLYMER-PEG-BTC或POLYMER-PEG-NHS反應(yīng)，形成POLYMER-PEG-生長抑素及類似物導(dǎo)向化合物。再以POLYMER-PEG-SST和POLYMER-PEG為原料，按常規(guī)方法制備高分子納米膠束，藥物在制備膠束的同時(shí)包入，或與POLYMER進(jìn)行化學(xué)偶聯(lián)。10、權(quán)利要求8的制備方法，其特征在于，歩驟如下取EPC，CHOL，DSPE-PEG，DSPE-PEG-OCT及CA-4置梨形瓶中，加氯仿溶解，37'C減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)成均勻的透明薄膜，加入123mM的硫酸銨溶液，水浴超聲至出現(xiàn)藍(lán)色乳光，再擠壓過200腿的聚碳酯膜5次，將制得的脂質(zhì)體過SephadexG50柱，用PBS緩沖液作為流動(dòng)相洗脫，收集脂質(zhì)體部分，將收集到的脂質(zhì)體置40。C水浴中加熱，加入阿霉素粉末孵育20分鐘，并時(shí)時(shí)振搖，得藥物脂質(zhì)體。全文摘要本發(fā)明涉及一種生長抑素受體介導(dǎo)的腫瘤靶向藥物組合物，采用靶向生長抑素受體的功能多肽和聚乙二醇同時(shí)修飾藥用載體，將抗腫瘤藥物或/和抗血管藥物輸送到腫瘤部位，增強(qiáng)腫瘤治療效果。文檔編號(hào)A61K45/00GK101439182SQ200810183548公開日2009年5月27日申請(qǐng)日期2008年12月18日優(yōu)先權(quán)日2008年12月18日發(fā)明者元張,強(qiáng)張,烜張,王堅(jiān)成,章俊麟,武金申請(qǐng)人:北京大學(xué)