專利名稱：：Cd80拮抗劑的鹽的制作方法CD80拮抗劑的鹽本發(fā)明涉及CD80拮抗劑化合物4-(6-氟-3-氧代-l,3-二氫-卩比唑并[4,3-c〗噌啉-2-基)-N-(2，2-二氟-乙基)-苯甲酰胺的膽堿鹽。
背景技術(shù)：
：國際專利申請?zhí)朩O2004/08101涉及一類化合物，包括具有結(jié)構(gòu)式(A)的化合物4-(6-氟-3-氧代-l,3-二氫-卩比唑并[4,3-c]噌啉-2-基)-N-(2，2-二氟-乙基)-苯甲酰胺等WO2004/08101所述的化合物是CD80拮抗劑，它能夠抑制CD80和CD28的相互作用，因此可用于免疫抑制，例如治療類風濕性關(guān)節(jié)炎。游離酸形式的化合物(A)的水溶性差。通常，作為藥品口服給藥，或在水基載體中胃腸外或局部給藥時，需要化合物具有良好的水溶性特征。WO2004/08101也涉及化合物(A)所屬化合物類型的鹽。然而，并非所有該化合物的鹽的水溶性均顯著高于其游離酸形式，以便成為該化合物方便的口服給藥形式或基于水溶液的形式。本發(fā)明基于以下發(fā)現(xiàn)化合物(A)的膽堿鹽具有所需的良好水溶性。HN一N、發(fā)明概述發(fā)明詳述本發(fā)明提供了上式(八)4-(6-氟-3-氧代-1，3-二氫-吡唑并[4,3-0]噌啉-2-基)-N-(2,2-二氟-乙基)-苯甲酰胺的膽堿鹽。含有所述膽堿鹽和至少一種藥學上可接受載體的口服給藥的藥物組合物也構(gòu)成了本發(fā)明的一個方面。所述膽堿鹽的可注射水溶液，以及含有所述膽堿鹽的局部應(yīng)用水基液體(aqueousbasedliquid)或乳膏組合物構(gòu)成了本發(fā)明的另一方面?？诜o藥的組合物可以是片劑、膠囊、微型藥片、粉末劑、顆粒劑、液體或凝膠制劑形式。口服給藥的片劑和膠囊可以是單位劑量形式，并且可含有常用輔料，例如粘合劑，如糖漿、阿拉伯膠、明膠、山梨糖醇、西黃蓍膠或聚乙烯吡咯烷酮；填充劑，如乳糖、糖、玉米淀粉、磷酸鈣、山梨糖醇或甘氨酸；壓片潤滑劑，如硬脂酸鎂、滑石粉、聚乙二醇或二氧化硅；崩解劑，如馬鈴薯淀粉；或者可接受的濕潤劑如十二烷基硫酸鈉?？砂凑掌胀ㄋ帉W實踐中熟知的方法對片劑包衣。口服液體制劑可以是(例如)水性或油性混懸劑、溶液劑、乳劑、糖漿劑或酏劑的形式，或者可以是臨用前用水或其他合適的載體重建的干燥產(chǎn)品。這類液體制劑可含有常用的添加劑，例如助懸劑，如山梨糖醇、糖漿、甲基纖維素、葡萄糖糖漿、明膠、氫化食用脂肪；乳化劑，如卵磷脂、去水山梨糖醇單油酸酯或阿拉伯膠；非水性載體(可包含食用油)，如杏仁油、分級椰子油，油酯如甘油、丙二醇或乙醇；防腐劑，如對羥基苯甲酸甲酯或?qū)αu基苯甲酸丙酯或山梨酸，如果需要還可含有常用調(diào)味劑或著色劑。局部應(yīng)用于皮膚時，可將藥物制成乳膏劑、洗劑或油膏劑?？捎糜谠撍幬锏娜楦鄤┗蛴透鄤┦潜绢I(lǐng)域熟知的常規(guī)制劑，例如藥劑學標準教科書如英國藥典(BritishPharmacopoeia)中所述。也可通過注射或輸注，以無菌介質(zhì)經(jīng)胃腸外途徑給予活性成分。根據(jù)所用的載體和濃度，藥物可懸浮或溶解于該載體中。有利的是，輔助試劑如局部麻醉劑、防腐劑和緩沖劑也可溶解于載體中。以下實施例中進一步描述了本發(fā)明膽堿鹽的制備和水溶性。實施例-如下所述，制備4-(6-氟-3-氧代-1，3-二氫-吡唑并[4,3-c]噌啉-2-基)-N-(2,2-二氟-乙基)-苯甲酰胺，并形成其膽堿(即(2-羥基-乙基)-三甲基-銨)鹽N-(2，2-二氟-乙基)-4-(6-氟-3-氧代-l,3-二氫-吡唑并[4，3-c]噌啉-2-基)-苯甲酰胺的制備將按照WO2004/08101實施例5所述制備的4-(6-氟-3-氧代-1，3-二氫-吡唑并[4,3-c]噌啉-2-基)-苯甲酸(12.9g)裝入裝有磁力攪拌器、回流冷凝器和鼓泡器的圓底燒瓶中。緩慢加入亞硫酰氯(65ml)。施加氮氣氣氛，將該混合物加熱至回流。觀察到加熱氣體溢出后，將氣體導(dǎo)入洗滌器中。氣體發(fā)生終止時(約2小時后)，該混合物的顏色由橙紅色懸液轉(zhuǎn)變?yōu)樯罴t色懸液，冷卻至室溫。真空去除過量亞硫酰氯，所得紅色固體與甲苯(50ml)共沸。獲得深紅色固體，收集到無水DMA(65ml)中得到深紅色溶液。將二異丙基乙胺(12.9g,17.4ml)與2,2-二氟氨基乙烷(3.24g，2.76ml)混合，用4-5分鐘逐滴加入上述溶液中。觀察到放熱。室溫下攪拌該混合物。用0.5MHCl(150ml)終止該反應(yīng)混合物，得到深紅色懸液。過濾收集固體，用水洗滌。在室溫下用甲醇(250ml)研磨該固體約1小時，過濾并用甲醇洗滌。在室溫下用丙酮(250ml)研磨該固體約1小時，過濾并用丙酮洗滌。最后用乙酸乙酯(250ml)研磨該固體約45分鐘，過濾并用乙酸乙酯洗滌。將產(chǎn)物(約8g)收集到約10mlDMA中得到濃稠的深紅色溶液。加入甲醇(150ml)和丙酮(150ml)，過濾收集沉淀。LC-MS:—個所需產(chǎn)物的峰。該物質(zhì)的QC分析顯示純度為91.6%。2-[4-(2,2二氟-乙基氨甲?；?-苯萄-6-氟-2H-吡唑并[4，lc]噌啉J-酸P-羥基乙基)-三甲基銨的制備將^(2,2-二氟-乙基)-4-(6-氟-3-氧代-1,3-二氫-吡唑并[4，3-0]噌啉-2-基)-苯甲酰胺(2.50g)加入裝有磁力攪拌器的圓底燒瓶中。將固體懸浮于甲醇(25ml)中，逐滴加入膽堿氫氧化物(782mg,1.74ml45%w/w的甲醇溶液)。加入后形成澄清的深褐色溶液。室溫下攪拌該溶液2小時。真空濃縮該反應(yīng)混合物，得到深褐色油狀物。加入乙酸乙酯(100ml)，獲得兩相體系。超聲處理后，褐色油狀物變得粘稠并開始固化。碾碎該固體，加入異丙醇(30ml)并將該混合物加熱到65-70°C。獲得懸浮液。將該混合物冷卻至室溫，用乙酸乙酯(約100ml)稀釋。過濾收集固體，用乙酸乙酯(50ml)洗滌。真空干燥該固體。LC-MS:分離的固體；一個主峰[M+H]+388，純度95%。固體鹽是褐色粗粉末，2.26g，4.61mmol，71%。熔點172-180°C，分解。如下所述，通過重結(jié)晶進一步純化該產(chǎn)物將該鹽與乙醇混合，加熱至回流，攪拌20分鐘，趁熱過濾。將濾過的乙醇溶液加熱至回流，然后冷卻至約5°C，攪拌1小時。接著過濾該溶液，用乙醇和庚烷洗滌，干燥至恒用下述實驗檢測N-(2,2-二氟-乙基)-4-(6-氟-3-氧代-l,3-二氫-卩比唑并[4,3-c]噌啉-2-基)-苯甲酰胺的膽堿鹽在水和乙醇中的溶解度。也用相同實驗檢測N-(2,2-二氟-乙基)-4-(6-氟-3-氧代-l,3-二氫-卩比唑并[4,3-c]噌啉-2-基)-苯甲酰胺的非鹽形式(游離酸)及其一系列其它鹽的溶解度。稱取10mg受試化合物加入一管形瓶中，加入lml溶劑。如果樣品立即溶解形成澄清溶液，則加入更多的受試化合物，并將該管形瓶超聲處理15分鐘。重復(fù)該步驟，直到無法溶解更多的受試化合物(形成懸液)。然后將含有該懸液的管形瓶超聲處理15分鐘，并放置在振蕩器上在25°C/60%相對濕度下振蕩24小時。從振蕩器中取出后，離心樣品，用HPLC分析上清液。結(jié)果見表I。<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>權(quán)利要求1.式(A)的4-(6-氟-3-氧代-1，3-二氫-吡唑并[4，3-c]噌啉-2-基)-N-(2，2-二氟-乙基)-苯甲酰胺的膽堿鹽。2.—種口服給藥的藥物組合物，其含有權(quán)利要求1所述的膽堿鹽和至少一種藥學上可接受的載體。3.如權(quán)利要求1所述的膽堿鹽的可注射的水溶液。4.一種局部應(yīng)用的水基液體或乳膏組合物，其含有權(quán)利要求l所述的膽堿鹽。全文摘要CD80拮抗劑化合物4-(6-氟-3-氧代-1，3-二氫-吡唑并[4，3-c]噌啉-2-基)-N-(2，2-二氟-乙基)-苯甲酰胺的膽堿鹽具有良好的水溶性，因此可方便地用于藥學應(yīng)用。文檔編號A61K31/5025GK101384595SQ200780005116公開日2009年3月11日申請日期2007年2月19日優(yōu)先權(quán)日2006年2月22日發(fā)明者I·R·馬修斯申請人:麥迪金有限公司