專利名稱：：含格列奈類的預(yù)防肝纖維化醫(yī)藥組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及含有相當(dāng)于才各列奈類的藥物的用于預(yù)防、改善或治療肝纖維化、肝細(xì)胞變性或肝硬化的醫(yī)藥組合物。具體而言，涉及含有那才各列奈的用于預(yù)防、改善或治療肝纖維化、肝細(xì)胞變性或肝硬化的醫(yī)藥組合物。
背景技術(shù)：
：病毒性肝炎、酒精性肝炎、自身免疫性肝炎等大部分肝疾病中，肝纖維化最終形態(tài)的肝硬化引發(fā)諸如肝細(xì)胞癌、食道及胃靜脈瘤等威脅生命的疾病。因此急需確立包括肝硬化在內(nèi)的肝纖維化的抑制方法。有報(bào)道表明，在病毒性肝炎中，通過干擾素和抗病毒劑的組合進(jìn)行的病毒除去療法具有改善纖維化的效果，但是在日本，即便是使用最新的干擾素、抗病毒劑的組合，代表性肝疾病之一的c型病毒性肝炎的完全去除率也才為60%左右，因此，如何延緩那些無應(yīng)答患者的肝硬化發(fā)病十分重要。另一方面，以近年生活習(xí)慣病為背景，由于即便是無飲酒經(jīng)歷或病毒性肝炎，也與酒精性肝炎具有同樣的肝組織病理，非酒精性脂肪性肝炎(NASH)已成為公認(rèn)的問題。Matteoni等人，在對(duì)單純性脂肪肝、單純性脂肪肝并發(fā)炎癥、單純性脂肪肝并發(fā)肝細(xì)胞變性、單純性脂肪肝并發(fā)酒精小體或纖維化進(jìn)行了長期跟蹤之后，報(bào)道了單純性脂肪肝并發(fā)肝細(xì)胞變性、單純性脂肪肝并發(fā)酒精小體或纖維化當(dāng)中的20%有了肝硬化發(fā)病(非專利文獻(xiàn)1)。單純性脂肪肝并發(fā)肝細(xì)胞變性、或單純性脂肪肝并發(fā)酒精小體或纖維化被納入到NASH的范疇當(dāng)中。進(jìn)一步地，對(duì)診斷為肝硬化階段的NASH患者的長期跟蹤揭示了其中的20-30%發(fā)展成了肝癌(非專利文獻(xiàn)2、非專利文獻(xiàn)3)。據(jù)預(yù)測由于飲食生活的西方化、肥胖的增加而具有肝硬化、肝癌發(fā)病可能性的NASH患者在美國有560萬人，在日本有150萬人(非專利文獻(xiàn)4),正在尋找有效的治療方法。盡管NASH的發(fā)病機(jī)制不明，但Day等人提倡2次打擊理論(非專利文獻(xiàn)5)。即，作為第一次打擊，由糖代謝、脂質(zhì)代謝的異常引起脂肪肝發(fā)病，之后，作為第二次打擊，由炎癥等引起氧化應(yīng)激上升，引發(fā)肝細(xì)胞變性或細(xì)胞凋亡介導(dǎo)的肝纖維化、肝硬化。由于作為第一次打擊的脂肪肝被認(rèn)為是起因于生活習(xí)慣病尤其是諸如胰島素抵抗、糖耐量異常、飯后高血糖、糖尿病等糖代謝的異常，故可假定糖尿病藥物是適用的。雖然有通過改善胰島素抵抗使血糖值下降的二甲雙胍(非專利文獻(xiàn)6)和格列酮(非專利文獻(xiàn)7、非專利文獻(xiàn)8)的報(bào)道，但是由于二甲雙胍的效果有限，格列酮有損害肝功能的擔(dān)憂和增加體重的報(bào)道，因此并不能滿足作為NASH的治療藥物的要求。此外，有報(bào)道表明由于磺酰脲(SU)類藥物、胰島素(非專利文獻(xiàn)9)通過使胰島素濃度持續(xù)的上升而誘發(fā)作為NASH的危險(xiǎn)因子的脂肪肝，故難以適用于NASH。在這種情況下，北原等人發(fā)現(xiàn)，以那格列奈為代表的速效型胰島素分泌促進(jìn)劑使門靜脈中的胰島素濃度和血糖濃度降低，作為其結(jié)果，抑制肝的脂肪酸合成，抑制肝TG量，并減輕面臨NASH風(fēng)險(xiǎn)的脂肪肝。即專利文獻(xiàn)l中，發(fā)現(xiàn)在糖尿病模型動(dòng)物中，糖負(fù)荷前的那格列奈給藥可抑制糖負(fù)荷后的肝脂肪酸合成限速酶ATP-枸櫞酸裂解酶的表達(dá)增加，進(jìn)一步地，在臨床上發(fā)現(xiàn)對(duì)53例糖尿病脂肪肝或糖尿病脂肪肝病例中GPT>GOT的5例，12周那;f各列奈給藥在統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著抑制了作為肝損傷指標(biāo)的GOT，GPT,表明對(duì)脂肪肝改善也抑制了其后續(xù)的肝損傷，從而完成了發(fā)明。隨后，對(duì)通過肝活4企而祐:診斷為糖尿病的5例患者進(jìn)4亍16周那格列奈給藥，由給藥前后的肝活檢確認(rèn)了脂肪肝的減小、和肝組織炎癥、肝變性、肝纖維化的改善(非專利文獻(xiàn)IO)。認(rèn)為這些脂肪肝的減小和肝組織炎癥、肝變性、肝纖維化的改善所涉及的藥效的表達(dá)，可以由速效型胰島素分泌促進(jìn)劑的胰島素分泌模式變化的結(jié)果產(chǎn)生的脂肪肝改善作用來充分說明。此外，目前為止還沒有報(bào)道那格列奈除此以外的作用機(jī)制，例如通過不經(jīng)胰島素分泌的作用就引起肝組織炎癥、肝變性、肝纖維化的改善?，F(xiàn)在還不存在速效或可為臨床專家所用的肝纖維化治療藥物。應(yīng)說明的是，此處所述肝纖維化的程度是通過下述步驟來評(píng)價(jià)的將肝活片企的組織切片進(jìn)4t諸如Masson的三色染色、Sweet的網(wǎng)狀纖維染色或Azan染色等纖維成分的特異染色處理；然后對(duì)每個(gè)特征的纖維圖像進(jìn)行定量或者以階段來評(píng)價(jià)。作為一例可列舉出，由于NASH中肝細(xì)胞壞死、變性在多出現(xiàn)在Zone3部分，當(dāng)與其對(duì)應(yīng)的部位的細(xì)胞外周纖維化(類洞區(qū)纖維化)、靜脈外周纖維化(肝靜脈外周纖維化)或病態(tài)加深時(shí)，門靜脈區(qū)纖維化按照其程度用0-4階段來評(píng)價(jià)。此外綜合地分類為階段l:以Zone3為中心，部分或廣泛地存在血管外周/竇狀小管外周/細(xì)胞外周纖維化；階段2:在階段l的基礎(chǔ)上，部分或廣泛地存在門靜脈區(qū)纖維化；階段3:部分或廣泛地存在橋接纖維化；階段4:肝硬化。由于肝活檢組織切片用蘇木精-伊紅染色處理后，細(xì)胞腫大為氣球狀，故以視野內(nèi)觀察到的細(xì)胞數(shù)為基準(zhǔn)對(duì)肝細(xì)胞變性進(jìn)行評(píng)價(jià)。(非專利文獻(xiàn)11)專利文獻(xiàn)l:WO03/099332號(hào)小冊(cè)子非專利文獻(xiàn)l:Gastroenterology1161413-1419,1999非專利文獻(xiàn)2:ShimadaMetal.JournalofHepatology37154-160，2002非專利文獻(xiàn)3:RatziuVetal.Hepatology351485-1493，2002非專利文獻(xiàn)4:WanlessIRetal,Hepatology121106-11101990非專利文獻(xiàn)5:DayCPetal.Gastroenterology114842-845,1998非專利文獻(xiàn)6:MarchesiniGetal.Lancet358893-8942001非專利文獻(xiàn)7:PromratKetal.Hepatology39188-1962004非專利文獻(xiàn)8:Neuschwander誦TetriBAetal.Hepatology381008-10172003非專利文獻(xiàn)9:KhaliliKetal.AJRAmJRoentgenol.1801601-16042003非專利文獻(xiàn)10:MoritaYetal.Hepato國Gastorenterology521338-1343,2005非專利文獻(xiàn)11:BruntEMetal.AmJGastroenterol.199994:2467-247
發(fā)明內(nèi)容因此本發(fā)明的目的是提供預(yù)防、改善或治療肝纖維化的醫(yī)藥組合物。本發(fā)明的目的也包括提供預(yù)防、改善或治療肝細(xì)胞變性的醫(yī)藥組合物。本發(fā)明的目的還包括提供預(yù)防、改善或治療肝硬化的醫(yī)藥組合物。本發(fā)明人，對(duì)糖尿病并發(fā)NASH的患者進(jìn)行那格列奈給藥后，對(duì)每一例的糖尿病改善效果和肝的炎癥、變性、纖維化的改善效果作出比較，令人吃驚的是，發(fā)現(xiàn)即便是在糖尿病癥狀沒有改善的病例當(dāng)中，也產(chǎn)生了肝的炎癥、變性、纖維化的改善，據(jù)此完成了本發(fā)明。NASH的病例包括未見糖代謝的病例、出現(xiàn)胰島素抵抗的病例、出現(xiàn)耐糖量異常的病例，進(jìn)一步地包括初期、中期、末期糖尿病。目前為止，雖然那格列奈被認(rèn)為僅適用于耐糖量異常、胰島素分泌延遲、飯后高血糖、初期糖尿病，但是本發(fā)明的發(fā)現(xiàn)表明，那格列奈可適用于糖尿病指標(biāo)未被那格列奈等速效型胰島素分泌促進(jìn)劑改善的病例、或不能由胰臟有效分泌胰島素的末期糖尿病患者的NASH的治療。進(jìn)一步地，本發(fā)明的發(fā)現(xiàn)還表明，不？1起速效型胰島素分泌的低濃度的那格列奈直接作用于肝，有可能抑制、預(yù)防、改善或治療包括具有高度胰島素抵抗的患者、胰臟不能有效分泌胰島素的末期糖尿病患者在內(nèi)的所有患者的肝組織炎癥、肝變性、肝纖維化。即本發(fā)明提供預(yù)防、改善或治療肝纖維化的醫(yī)藥組合物，其特征在于含有格列奈類、優(yōu)選含有那格列奈。本發(fā)明也提供預(yù)防、改善或治療肝細(xì)胞變性的醫(yī)藥組合物，其特征在于含有格列奈類、優(yōu)選含有那格列奈。本發(fā)明還提供預(yù)防、改善或治療肝硬化的醫(yī)藥組合物，其特征在于含有格列奈類、優(yōu)選含有那格列奈。本發(fā)明進(jìn)一步提供格列奈類優(yōu)選為那格列奈來的用途，以制備預(yù)防、改善或治療肝纖維化、肝細(xì)胞變性或肝硬化的醫(yī)藥組合物。根據(jù)本發(fā)明，可提供在預(yù)防、改善或治療肝纖維化、肝細(xì)胞變性或肝硬化中有用的醫(yī)藥組合物。作為格列奈類，那格列奈特別有用。具體實(shí)施例方式在本"i兌明書中，才各歹廿奈類為(HormoneandMetabolicResearch,vol.27，pp.263-266,1995)中所述的與美格列奈結(jié)構(gòu)相似的化合物，可以舉出優(yōu)選為下述化學(xué)式所示的(-)-N-(反-4-異丙基環(huán)己烷羰基)-D-苯丙氨酸(稱為"那格列奈")等的D-苯丙氨酸衍生物；(2S)-2-苯甲基-4-[(3aR，7aS)-八氫-2H-異吲哚-2-基]-4-氧代丁酸(稱為"KAD-1299")等的千基琥珀酸衍生物；和(S)-2國乙氧基-4{2-[[3-甲基-1-[2-(l-哌啶基)苯基]丁基]氨基]-2-氧代乙基}苯甲酸(稱為"瑞格列奈")等的苯曱酸衍生物，更優(yōu)選為美格列奈、那格列奈、KAD-1229、瑞格列奈。ci.本發(fā)明中，上述格列奈類可單獨(dú)使用，或以與至少一種選自降血糖藥、高脂血癥治療藥、降壓藥、抗氧化劑、保肝藥及抗炎藥的組合的形式來使用。此處，作為降血糖藥，可以舉出例如如胰島素、賴脯胰島素、甘精胰島素的胰島素衍生物；如甲苯磺丁脲、格列齊特、格列本脲、格列美脲的磺酰脲類藥；如阿卡波糖、伏格列波糖、米格列醇的oc-葡萄糖苷酶抑制劑；如二甲雙胍、苯乙雙胍的雙胍類藥；如吡格列酮、羅格列酮、曲格列酮的遙唑烷類或如GI-262570、JTT-501、YM-440、麗-622、KRP-297的含非p塞唑烷骨架的PPARy激動(dòng)劑、拮抗劑的胰島素抵抗改善劑；如AJ-9677的腎上腺素p3受體激動(dòng)劑；如CLX-0901的類胰島素激動(dòng)劑；如GLP-l、醋酸艾塞那肽、NN-2211的GLP-1激動(dòng)劑；如DPP-728A的DPPIV抑制劑；如T1095的SGLT抑制劑；或ACC抑制劑。此外，作為降低血中脂質(zhì)的高脂血癥治療藥可以舉出例如如普伐他汀、辛伐他汀、氟伐他汀、西立伐他汀、阿托伐他汀、伊他伐他汀的HMG-CoA還原酶抑制劑；如雙貝特、氯貝特、克利貝特、苯^L貝特、非諾貝特的貝特類藥物；如考來替蘭、考來烯胺的陰離子交換樹脂；如尼可莫爾、戊四煙酯的煙酸制劑。作為降壓藥，可以舉出例如血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑、釣離子通道拮抗劑、血管緊張素受體抑制劑等。作為抗氧化劑，可以舉出例如維他命C、維他命E等的維他命類；N乙酰半胱氨酸、普羅布考、二十碳五烯酸及其酯等。作為保肝藥，可以舉出例如熊去氧膽酸、甜菜堿。進(jìn)一步地作為抗炎藥，可以舉出例如己酮可可堿、抗TNF抗體等的細(xì)胞因子生成抑制劑。通過與上述藥物的組合使用，可以進(jìn)一步增強(qiáng)本發(fā)明的效果。該組合，既可以是一個(gè)醫(yī)藥組合物中兩者同時(shí)含有的形式，也可以是分別含有各自成分的兩個(gè)醫(yī)藥組合物同時(shí)或稍微間隔地給藥的形式。醫(yī)藥組合物中的格列奈類和至少一種選自降血糖藥、高脂血癥治療藥、降壓藥、抗氧化劑、保肝藥及抗炎藥的藥物的量可為任意的，格列奈類的含量優(yōu)選為0.1-99重量％、至少一種選自降血糖藥、高脂血癥治療藥、降壓藥、抗氧化劑、保肝藥及抗炎藥的藥物的含量優(yōu)選為1-99.9重量％。此外，本發(fā)明的醫(yī)藥組合物中，除了上述成分，可含有可藥用的各種制劑用物質(zhì)(作為輔劑)(以下，稱為"制劑學(xué)上允許的載體")。制劑用物質(zhì)可根據(jù)制劑的劑型來適當(dāng)?shù)剡x擇，例如可舉出賦形劑、稀釋劑、添加劑、崩解劑、粘合劑、包衣劑、潤滑劑、光滑劑、增滑劑、矯味劑、甜味劑、增溶劑等。進(jìn)一步地，作為制劑用物質(zhì)的具體示例，可舉出碳酸鎂、二氧化鈦、乳糖、甘露醇及其它糖類，滑石、牛乳蛋白、明膠、淀粉、纖維素及其衍生物，動(dòng)物及植物油，聚乙二醇，及溶劑、例如滅菌水和一元或多元醇、例如甘油。本發(fā)明的醫(yī)藥組合物，特別對(duì)在對(duì)糖尿病患者中進(jìn)行格列奈類給藥也未改善其糖尿病的患者的肝纖維化、肝細(xì)胞變性的預(yù)防、改善、治療等有效，對(duì)于抑制向肝硬化發(fā)展有效。本發(fā)明的醫(yī)藥制劑的形式可制備為，例如口服給藥、腹腔內(nèi)給藥、透皮給藥、吸入給藥等各種給藥形式。具體地，可舉出適當(dāng)?shù)墓腆w或液體的制劑形態(tài)，例如顆粒、粉劑、包衣片劑、片劑、(微)膠嚢、栓劑、糖漿、果汁、懸浮液、乳液、滴劑、注射用溶液、延長活性物質(zhì)釋放的制劑等。對(duì)于本發(fā)明的藥物中使用的格列奈類(有效成分)的給藥量，按照格列奈類的種類、合并癥的種類、合并癥或神經(jīng)障礙的癥狀的程度、制劑的形態(tài)、副作用的有無或其程度等來進(jìn)行適當(dāng)?shù)剡x擇。例如，制成以那格列奈作為有效成分的制劑時(shí)，按口服給藥對(duì)患者每天，以那格列奈的凈含量計(jì)優(yōu)選為10mg-10g左右、更優(yōu)選為30mg-lg左右、進(jìn)一步優(yōu)選為90-270mg左右。此外，對(duì)重癥可進(jìn)行進(jìn)一步增量。對(duì)于給藥的次數(shù)、時(shí)間，可以按數(shù)日1次或1日l次，但通常按每日數(shù)次，例如分為2-4次，優(yōu)選為飯前進(jìn)行給藥。另外，靜脈給藥等非口服給藥時(shí)，與上述口服給藥相比給藥量可以為1/10-1/20左右。此外，與至少一種選自降血糖藥、高脂血癥治療藥、降壓藥、抗氧化劑、保肝藥及抗炎藥的藥物混合或組合使用時(shí)，對(duì)于這些藥物的給藥或使用量，作為所用該血糖藥、高脂血癥治療藥、降壓藥、抗氧化劑、保肝藥及抗炎藥，或者具有效果的藥物，可按照已開發(fā)的或正在開發(fā)等其他已知的每個(gè)藥物的有效量，來決定適當(dāng)?shù)氖褂昧炕蚪o藥量。實(shí)施例以腹部超聲波診斷或腹部CT檢查中具有脂肪肝特征；各種病毒標(biāo)志物和自身抗體檢查為陰性；可排除飲酒經(jīng)歷、藥物經(jīng)歷；肝活檢中按Bmnt標(biāo)準(zhǔn)(AmJGastroenterol.199994:2467-2474)診斷為NASH;此外食物運(yùn)動(dòng)療法不能獲得治療效果的診斷為糖尿病的5例患者為對(duì)象。同時(shí)，試驗(yàn)方法通過了臨床設(shè)施的倫理審查，并獲得了所有受試者的知情同意。對(duì)這5位患者，按照卯mg、1日3次飯前口服，進(jìn)行16周那格列奈給藥。在第0周和第12周或16周，作為糖尿病的指標(biāo)，對(duì)空腹血糖值，耐糖量試驗(yàn)2小時(shí)的血糖值、血紅蛋白Alc值、作為肝評(píng)價(jià)的基于CT的肝/脾比的脂肪肝的程度、對(duì)肝活檢組織進(jìn)行組織學(xué)解析的肝細(xì)胞的細(xì)胞變性、細(xì)胞外周纖維化、靜脈外周纖維化、門靜脈區(qū)纖維化等進(jìn)行了評(píng)分(BruntEMetal.AmJGastroenterol.199994:2467-2474)。那格列奈給藥前的指標(biāo)如表1所示。那格列奈給藥后的指標(biāo)如表2所示。第0周和第12周的各項(xiàng)指標(biāo)的變動(dòng)值A(chǔ)(給藥前-給藥后)如表3所示。表-1那格列奈給藥前的測定指標(biāo)<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>表_2那格列奈給藥后的測定指標(biāo)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>表-3給藥前后的測定指標(biāo)變化△:給藥前-*會(huì)藥后<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>在由那格列奈的給藥而確認(rèn)的糖尿病指標(biāo)有改善效果的病例中，觀察到了脂肪肝、肝細(xì)胞的細(xì)胞變性、細(xì)胞外周纖維化、靜脈外周纖維化、門靜脈區(qū)纖維化的改善。在確認(rèn)糖尿病指標(biāo)的未^皮改善的病例中，觀察到了脂肪肝的改善效果弱，可認(rèn)為脂肪肝的改善效果與糖尿病的改善效果相對(duì)應(yīng)。另一方面，在該確認(rèn)糖尿病指標(biāo)未^皮改善的病例(1，3)中也觀察到了與糖尿病指標(biāo)有改善效果的病例同程度的肝細(xì)胞的細(xì)胞變性、細(xì)胞外周纖維化、靜脈外周纖維化、門靜脈區(qū)纖維化的改善。權(quán)利要求1.預(yù)防、改善或治療肝纖維化的醫(yī)藥組合物，其特征在于含有格列奈類。2.如權(quán)利要求1所述的醫(yī)藥組合物，其中，格列奈類選自美格列奈、那格列奈、KAD-1229和瑞格列奈。3.如權(quán)利要求2所述的醫(yī)藥組合物，其中，格列奈類為那格列奈。4.如權(quán)利要求l-3任意一項(xiàng)所述的醫(yī)藥組合物，所述醫(yī)藥組合物給藥于糖尿病患者。5.如權(quán)利要求4所述的醫(yī)藥組合物，所述醫(yī)藥組合物給藥于格列奈類給藥未使糖尿病改善的患者。6.制備預(yù)防、改善或治療肝纖維化的醫(yī)藥組合物的格列奈類的用途。7.預(yù)防、改善或治療肝細(xì)胞變性的醫(yī)藥組合物，其特征在于含有格列奈類。8.如權(quán)利要求7所述的醫(yī)藥組合物，其中，格列奈類選自美格列奈、那格列奈、KAD-1229和瑞格列奈。9.如權(quán)利要求8所述的醫(yī)藥組合物，其中，格列奈類為那格列奈。10.如權(quán)利要求7-9任意一項(xiàng)所述的醫(yī)藥組合物，所述醫(yī)藥組合物給藥于糖尿病患者。11.如權(quán)利要求IO所述的醫(yī)藥組合物，所述醫(yī)藥組合物給藥于格列奈類給藥未使糖尿病改善的患者。12.制備預(yù)防、改善或治療肝細(xì)胞變性的醫(yī)藥組合物的^^列奈類的用途。13.預(yù)防、改善或治療肝硬化的醫(yī)藥組合物，其特征在于含有格列奈類。14.如權(quán)利要求13所述的醫(yī)藥組合物，其中，格列奈類選自美格列奈、那格列奈、KAD-1229和瑞格列奈。15.如權(quán)利要求14所述的醫(yī)藥組合物，其中，格列奈類為那格列奈。16.如權(quán)利要求13-15任意一項(xiàng)所述的醫(yī)藥組合物，所述醫(yī)藥組合物給藥于糖尿病患者。17.如權(quán)利要求16所述的醫(yī)藥組合物，所述醫(yī)藥組合物給藥于^^各列奈類給藥未使糖尿病改善的患者。18.制備預(yù)防、改善或治療肝硬化的醫(yī)藥組合物的^^列奈類的用途。全文摘要本發(fā)明提供預(yù)防、改善或治療肝纖維化、肝細(xì)胞變性或肝硬化的醫(yī)藥組合物，其特征在于含有那格列奈等的格列奈類。文檔編號(hào)A61K31/185GK101378745SQ20078000479公開日2009年3月4日申請(qǐng)日期2007年2月8日優(yōu)先權(quán)日2006年2月8日發(fā)明者上野隆登,佐田通夫,岡野明,森田恭代申請(qǐng)人:學(xué)校法人久留米大學(xué);味之素株式會(huì)社