專利名稱：：一種全氟化碳乳劑及其制備方法
技術領域：
：本發(fā)明屬于醫(yī)藥制備
技術領域：
，具體涉及一種全氟化碳乳劑及其制備方法。
背景技術：
：全氟碳化物具有疏水疏油性,其磁化率與水接近，，對氣體的溶解能力高、密度大、易擴散。其攜氧能力高，在病理狀態(tài)可釋放82%的氧，超過患者自身紅細胞的供氧能力。其表面張力低、粘度適中、流動性好、蒸汽壓高，便于經(jīng)呼吸道排出，不參與人體新陳代謝。氟化碳液體具有人血樣的重要功能，能將從肺部吸進的氧氣輸送到人體的各個部位，又能將各個臟器排出的二氧化碳輸送到肺部排出體外。全氟化碳輸送氣體是個單純的物理溶解過程，氧氣和二氧化碳機易溶解在全氟化碳液體中，在流動中完成氣體的傳遞。100毫升的全氟化碳能溶氧氣50毫升，是人血載氧能力的50倍；全氟化碳和氧的結合速度是14-20毫秒，比紅血球快得多。同時由于其呈化學和生物惰性，所以具有不需要配型，生物相容性好的優(yōu)點，同時，全氟化碳可以通過呼吸完全排出體外。ttl此可見，全氟化碳是較理想的血液代用物。早在1966年Clark和Gollan就開始考慮將氟碳化合物作為紅細胞代用品，并且進行了動物實驗。1979年美國和R本分別開始研制可用于臨床的氟碳化合物。因氟碳化合物粘稠，表面張力很小，難溶于水，直接靜脈注射極易造成栓塞，但可以其為原料制成與人體血液的pH、電解質濃度、滲透壓相似的并具有良好載氧功能的乳劑。全氟碳乳劑的優(yōu)點在于其不參與生物代謝，輸注時無需配型，攜氧能力強(是人血的50倍)，保質期長(可達3年)，價格低廉，原料易得，粒徑小(是紅細胞體積的l/80);是一種新型的血液代用品。目前己經(jīng)冇法閨、中國、俄羅斯、Fl本等國家在20世紀7080年代對全氟化碳乳劑進行了全面、詳細的研究，部分產(chǎn)品進入臨床試驗。以上閨家研究的產(chǎn)品大多數(shù)采用了泊洛沙姆F-68為表面活性劑，雖然部分取得了成功，例如俄羅斯的Pt、rftoran在俄羅斯上巿銷售，但是其共同的副作用在于可以使機體補體激活，導致血J丄:突將，白細胞升高。說明其生物相容性還不夠好，同時該類產(chǎn)品還存在不能采用流通蒸汽滅菌及需要冷凍保存的缺點。氟碳乳不僅具有良好的擴容、攜氧能力，而且可以避免輸血可能帶來的一系列fuj題，是一種新型的血液代用品，因此該項目的開展，必然有著深刻的現(xiàn)實意義。
發(fā)明內容針對
背景技術：
存在的缺陷或不足，本發(fā)明的目的是提供一種可非冷凍儲存，副作用小的新型全氟化碳乳劑及其制備方法。為了實現(xiàn)上述任務，本發(fā)明采用如下的技術解決方案一種全氟化碳乳劑，其特征在于，該全氟化碳乳劑的平均粒徑小于400nm，pH值為49.5，滲透壓為270mMOS310mMOS;其中包含有作為藥物的全氟萘烷和全氟-N-4-甲基環(huán)己基哌啶，它們在全氟化碳乳劑中的最終體積比例為5%30%，其中，全氟萘垸和全氟-14-甲基環(huán)己基哌啶的體積比為100%:00:100%;作為乳化劑的磷脂，該磷脂在全氟化碳乳劑中的最終濃度為0.5%4.0%。上述全氟化碳乳劑的制備方法，其特征在于，該方法包括以下歩驟(1)將適量的磷脂分散于水或者分散于含有穩(wěn)定劑及滲透壓調節(jié)劑的緩沖液中，制備磷脂分散液；(2)將全氟化合物全氟萘烷及全氟-N-4-甲基環(huán)己基哌啶按體積比混合制備氟碳混合液體；(3)將歩驟(2)中所得到的氟碳混合液體分散在歩驟(1)中得到的磷脂分散液中，形成初乳(4)將歩驟(3)中得到的初乳進行均質或微射流，形成穩(wěn)定的乳液，將該乳液分裝、滅菌，即得全氟化碳乳劑；或者將該乳液與含有穩(wěn)定劑及滲透壓調節(jié)劑的緩沖液按比例混合，分裝、滅菌，即得全氟化碳乳劑。本發(fā)明的全氟碳乳劑具有粒徑小，并可在非冷凍狀態(tài)下儲存，是--種新型的人工氧氣載體制劑。圖1是Per「toran0天的粒度分布圖；閣2是l)erl'toran5天的粒度分布圖；圖3是Perftoranl()天的粒度分布圖；圖4是Perftoran30天的粒度分布圖圖5是Perftoran90天的粒度分布圖圖6是本發(fā)明的產(chǎn)品0天的粒度分布圖；圖7是本發(fā)明的產(chǎn)品5天的粒度分布圖圖8是本發(fā)明的產(chǎn)品IO天的粒度分布圖；圖9是本發(fā)明的產(chǎn)品30天的粒度分布圖；圖10是本發(fā)明的產(chǎn)品90天的粒度分布以下結合附圖和發(fā)明人給出的實施例對本發(fā)明作進一步的詳細說明。具體實施例方式本發(fā)明制備的全氟化碳乳劑，其平均粒徑小于400nm，pH值為49.5，滲透壓為270mMOS3iOmMOS;其中包含有作為表面活性劑的磷脂，該磷脂在全氟化碳乳劑中的最終濃度為0.5%4.0%;作為藥物的全氟萘烷和全氟-N-4-甲基環(huán)己基哌啶，它們在全氟化碳乳劑中的最終比例為5%30%，其中，全氟萘烷和全氟-N-4-甲基環(huán)己基哌啶的體積比為100%:00:100%。其全氟化碳乳劑的制備方法包括以下步驟(1)將一定量的磷脂分散于水或者含有穩(wěn)定劑及滲透壓調節(jié)劑的緩沖液中，制備磷脂分散液。(2)將全氟化合物全氟萘烷(perfluorodecalin，PFD)及全氟-N-4-甲基環(huán)己基哌啶(perfluoro-N-(4iethylcyclohexyl)-piperidine，PFMCP)按一定體積比混合制備氟碳混合液體。(3)將步驟(2)中所得到的一定量的氟碳混合液分散在步驟U)中得到的磷脂分散液中，形成初乳。(4)將步驟(3)中得到的初乳在一定壓力條件下均質或微射流形成穩(wěn)定的乳液，完成后將該乳液分裝、滅菌，即得全氟化碳乳劑；或者將該乳液與含有穩(wěn)定劑及滲透壓調節(jié)劑的緩沖液按比例彌含，分裝、滅菌，即得全氟化碳乳劑。磷脂為蛋黃卵磷脂、氫化蛋黃卵磷脂、大豆卵磷脂或氫化大豆卵ff森脂。其在乳劑中的最終濃度為0.54.0%(w/v)，其最佳濃度為1.23%(w/v)。磷脂分散在水中的方法可以是攪拃、高速剪切或者均質。磷脂分散溫度為208(rC，最佳溫度為3555X:。氣碳混合液體由全氟萘烷(perf丄uorodecalin,PFD)及全氟-N-4-甲基環(huán)己基哌噴(perfluoro-N-(4-methylcyclohexy1)-piperidine，PFMCP)組成，其組分體積比例為100:0%(v/v)0:100%(v/v)，其最佳比例為100%:0%(v/v)60%:40%(v/v)。氟碳混合液體在乳劑中的體積百分比例為5%30%(v/v)?？梢杂酶咚贉p切、高壓均質或者微射流的方法將氟碳混合液體與憐脂分散液體混合而形成穩(wěn)定的乳液。制備穩(wěn)定乳液過程中的溫度應當控制在208(TC，最佳溫度為3555°C。將穩(wěn)定的乳液與含有穩(wěn)定劑及滲透壓調節(jié)劑的緩沖液混合后分裝滅菌，其體積比例是10:00:6,5，其最佳比例為10:02:1。緩沖液為磷酸鹽緩沖液，擰檬酸鹽緩沖液或者碳酸鹽緩沖液等，其pH值范圍為49.5。緩沖液含有穩(wěn)定劑及滲透壓調節(jié)劑。穩(wěn)定劑可以是焦磷酸鈉，焦亞磷酸鈉，次亞磷酸鈉，EDTA-2Na，a—生育酚，焦亞硫酸鈉，亞硫酸氫鈉，抗懷血酸等中的一種或多種。穩(wěn)定劑在乳液中的最終含量為01.5%，在乳液中的最佳濃度為0.020.5%;滲透壓調節(jié)劑可以是氯化鈉，甘油，葡萄糖，氨基酸，山梨醇或者甘露醇中的一種或多種。以下是發(fā)明人給出的實施例，需要說明的是，這些是一些較佳的例子，本發(fā)明不限于這些實施例，根據(jù)申請人的實驗證明，本發(fā)明給出的技術方案內，均可以達到本發(fā)明的目的。實施例1:處方PFD6(MPFMCP40m丄蛋黃卵磷脂5g磷酸氫二鈉0.284g磷酸二氫鈉0.24g甘油25g注射用水適量制法一整個過程在氮氣保護下進行。取PFD和PFMCP，攪勻，加熱至80'C土5'C，作為油相，備用。另取注射用水迠量，加熱至8()°C±5°C，加入磷酸氫二鈉和磷酸二氫鈉和甘油，攪拌至溶解，然后加入蛋黃卵磷脂，強力攪拌至分散均勻，緩緩加入油相，加完后再攪拌一段時W，然后用高壓均質機進行均質，保持均質溫度為60°C±5°C，調節(jié)均質壓力及均質次數(shù)，使平均粒徑在400nm以下，加注射用水至1000ml，充氮分裝，密封，濕熱高壓滅菌(12rC、20分鐘)，即得。制法二-整個過程在氮氣保護下進行。取注射用水875ml，加入磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉和甘油，攪拌至溶解，作為等滲緩沖液，備用。取PFD和PFMCP，攪勻，加熱至8(TC土5。C，作為油相，備用。另取注射用水適量，加熱至8(TC土5。C，加入蛋黃卵磷脂，強力攪拌至分散均勻，緩緩加入油相，加完后再攪拌一段時間，然后用高壓均質機進行均質，保持均質溫度為60°C±5°C，調節(jié)均質壓力及均質次數(shù)，使平均粒徑在400nni以下，均質完畢，加入等滲緩沖液，加注射用水至1000ml，攪勻，充氮分裝，密封，濕熱高壓滅菌(12rC、20分鐘)，即得。以上兩種制法所得產(chǎn)品的pH值均為7.2±0.5，平均粒徑約為28()rai，滲透壓約為290m0sm士20m0sm。實施例2:處方PFD140mlPFMCP60ml蛋黃卵磷脂20g磷酸氫二鈉0.284g磷酸二氫鈉0.24g維生素E0.lg氯化鈉7.92g注射用水適量全量l()()()ml.制法一整個過程在氮氣保護下進行。取PFD和PFMCP，攪勻，加熱至40t:土5。C，作為油相，備用。另取注射用水適量，加熱至4(TC士5。C，加入磷酸氫二鈉和磷酸二氫鈉和氯化鈉，攪拌至溶解，然后加入維生素E和蛋黃卵磷脂，強力攪拌至分散均勻，緩緩加入油相，加完后再攪袢一段時間，然后用高壓均質機進行均質，保持均質溫度為4(TC±5°C，調節(jié)均質壓力及均質次數(shù)，使平均粒徑在400nm以下，加注射用水至lOOOml，充氮分裝，密封，濕熱高壓滅菌(121°C、20分鐘)，即得。制法二整個過程在氮氣保護下進行。取注射用水500ml，加入磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉和氯化鈉，攪拌至溶解，作為等滲緩沖液，備用。取PFD和PFMCP，攪勻，加熱至4(TC土5。C，作為油相，備用。另取注射用水適量，加熱至4(TC土5'C,加入維生素E和蛋黃卵磷脂，強力攪拌至分散均勻，緩緩加入油相，加完后再攪拌一段時間，然后用高壓均質機進行均質，保持均質溫度為4(TC土5"C，調節(jié)均質壓力及均質次數(shù)，使平均粒徑在400nm以下，均質完畢，加入等滲緩沖液，加注射用水至1000ml，攪勻，充氮分裝，密封，濕熱高壓滅菌(12rC、20分鐘)，即得。以上兩種制法所得產(chǎn)品的pH值均為7.2±0.5，平均粒徑約為250nrn，滲透壓約為290mOsm土20mOsm。實施例3:處方PFD300ml蛋黃卵磷脂40g檸檬酸鈉1.55g鹽酸(0.ltnol/L)40ml維生素Elg葡萄糖44.3g注射用水適量全量1000ml制法整個過程在氮氣保護下進行。収注射用水適量，加入檸檬酸鈉、鹽酸(0.lmol/L)和葡萄糖，攪拌至溶解，然后加入維生袤E和蛋黃卵磷脂，高速剪切至分散均勻，緩緩加入PEI)，加完后再攪拌一段時間，然后用卨壓均質機進行均質，保持均質溫度為25°C±5'C,調節(jié)均質壓力及均質次數(shù)，使平均粒徑在400nm以下，加注射用水至100()ml，充氮分裝，密封，濕熱高壓滅菌G2rC、15分鐘)，即得。所得產(chǎn)品的pH值為4.5±0.5，平均粒徑約為220nm，滲透壓為290inO，土2(W)sm。實施例4:處方PFMCPIO(M氫化大豆磷脂5g磷酸二氫鉀2.72g氫氧化鈉0.285g維生素E5g甘露醇32.7g注射用水適量"1畫ml制法整個過程在氮氣保護下進行。取注射用水250ml，加入磷酸二氫鉀、氫氧化鈉和甘露醇，攪拌至溶解，作為等滲緩沖液，備用。取PFMCP，攪勻，加熱至4(TC土5'C,作為油相，備用。另取注射用水適量，加熱至4CTC土5。C，加入維生素E和氫化大豆磷脂，高速剪切至分散均勻，緩緩加入油相，加完后再攪拌一段時間，然后用高壓均質機進行均質，保持均質溫度為4(TC土5。C，調節(jié)均質壓力及均質次數(shù)，使平均粒徑在400nm以下，均質憲畢，加入等滲緩沖液，加注射用水至lOOOml，攪勻，充氮分裝，密封，濕熱高壓滅菌U21'C、20分鐘)，即得。所得產(chǎn)品的pH值為6.5土0.5，平均粒徑約為140隨，滲透壓為29(M)sm土20m0sm。實施例5:處方PFD160m丄PI,CP40m丄氫化大豆磷脂20g甘氨酸3.56g氣化鈉2.78g氫氧化鈉0.lg焦磷酸鈉()lg山梨醇12g注射用水_適量全量1000ml制法整個過程在氮氣保護下進行。取PFD和PPMCP，攪勻，加熱至40。C士5'C，作為油相，備用。另取注射用水適量，加熱至4(TC士5'C，加入甘氨酸、氯化鈉、氫氧化鈉、焦磷酸鈉和山梨醇，攪拌至溶解，然后加入氫化大豆磷脂，高速剪切至分散均勻，緩緩加入油相，加完后再攪拌一段時間，然后用高壓均質機進行均質，保持均質溫度為4(TC土5。C，調節(jié)均質壓力及均質次數(shù)，使平均粒徑在400nm以下，加注射用水至1000ml,充氮分裝，密封，濕熱高壓滅菌(L21°C、i5分鐘)，即得。實施例6:處方-PFD30mlPFMCP27(M氫化大豆磷脂40g磷酸二氫鉀5.07g碳酸氫鈉0.48g焦磷酸鈉5g注射用水__全量1000ml制法一整個過程在氮氣保護下進行。取PFD和PFMCP,攪拌，加熱至8(TC士5。C，作為油相，備用。另取注射用水適量，加熱至8(TC土5X:，加入磷酸二氫鉀、碳酸氫鈉和焦磷酸鈉，攪拌至溶解，然后加入氫化大豆磷脂，強力攪拌至分散均勻，緩緩加入油相，加完后再攪拌一段時間，制得初乳，調P微射流袋壓力，使初乳勻速通過微射流泵，保持乳液溫度在W)。C士5。C'并使乳液的平均粒徑在4()()nm以下，加注射用水至,ml，充氮分裝，密封，濕熱島壓滅菌(12TC、ir)分鐘.)，即得。制法二整個過程在氮氣保護下進行。取注射用水250ml，加入磷酸二氫鉀、碳酸氫鈉和焦磷酸鈉，攪拌至溶解，作為等滲緩沖液，備用。取PFD和PFMCP，攪勻，加熱至8(TC土5'C，作為油相，備用。另取注射用水適量，加熱至8crc土rrc，加入氫化大豆磷脂，強力攪拌至分散均勻，緩緩加入油相，加完后再攪拌一段時間，制得初乳，調節(jié)微射流泵壓力，使初乳勻速通過微射流泵，保持乳液溫度在60。C土5'C，并使乳液的平均粒徑在400nm以下，加入等滲緩沖液，加注射用水至lOOOml,攪勻，充氮分裝，密封，濕熱高壓滅菌(12rC、15分鐘)，即得。以上兩種制法所得產(chǎn)品的pH值均為6.0±0.5，平均粒徑約為l'30nm,滲透壓約為290m0sm土20mOsm。實施例7:處方PFD70mlPFMCP30ml大豆磷脂5g醋酸1.77g醋酸鈉5.78g焦磷酸鈉10g注射用水__全量1000ml制法一整個過程在氮氣保護下進行。取PFD和PFMCP，攪拌，加熱至4(TC土5'C，作為油相，備用。另取注射用水適量，加熱至40'C±5°C，加入醋酸、醋酸鈉和焦磷酸鈉，攪拌至溶解，然后加入大豆磷脂，高速剪切至分散均勻，緩緩加入油相，加完后再攪拌一段時間，制得初乳，調節(jié)微射流泵壓力，使初乳勻速通過微射流泵，保持乳液溫度在40°C±5°C，并使乳液的平均粒徑在4()0nm以下，加注射用水至10()0ml，充氮分裝，密封，濕熱高壓滅菌(12rC、15分鐘)，即得。制法二整個過程在氮氣保護下進行。取注射用水2()0ml.，加入醋酸、醋酸鈉和焦磷酸鈉，攪拌至溶解，攪拌至溶解，作為等滲緩沖液，備用。取PFD和PFMCP，攪勻，加熱至4(TC土5r，作為油相，備用。另取注射用水適置，加熱至40t:土5'C，加入大豆磷脂，高速剪切至分散均勻，緩緩加入油相，加完后再攪拌一段時間，制得初乳，調節(jié)微射流泵壓力，使初乳勻速通過微射流泵，保持乳液溫度在4(TC土5'C，并使乳液的平均粒徑在4()()nm以下，加入等滲緩沖液，加注射用水至1000ml，攪勻，充氮分裝，密封，濕熱高壓滅菌(12rC、15分鐘)，即得。以上兩種制法所得產(chǎn)品的pH值均為5.0±0.5,平均粒徑約為HOnm，滲透壓約為290mOsm土20m()sm。實施例8:處方PFD70mlPFMCP30ml大豆磷脂20g酒石酸0.M3g酒石酸鈉3.14g次亞磷酸鈉0.lg甘油20.4g注射用水__全量1000ml制法整個過程在氮氣保護下進行。取PFD和PFMCP，攪勻，作為油相，備用。另取注射用水適量，加入酒石酸、酒石酸鈉、次亞磷酸鈉和甘油，攪拌至溶解，然后加入大豆磷脂，強力攪拌至分散均勻，緩緩加入油相，加完后再攪拌一段時間，制得初乳，調節(jié)微射流泵壓力，使初乳勻速通過微射流泵，保持乳液溫度在25°C±5°C，并使乳液的平均粒徑在400nni以下，加注射用水至1000ml，分裝，濕熱高壓滅菌(U6°C、40分鐘)，即得。所得產(chǎn)品的pH值為4.5±0.5，平均粒徑約為180nm，滲透壓為29(M3sm土20ni0sni。實施例9:處方PFD30mlPFMCP70ml大豆磷脂4()g乳酸0.27g乳酸鈉10.86g次亞磷酸鈉ig注射用水__全量1000ml制法整個過程在氮氣保護下進行。取注射用水250ml，加入乳酸、乳酸鈉和次亞磷酸鈉，攪拌至溶解，作為等滲緩沖液，備用。取PFD和PFMCP，攪勻，作為油相，備用。另取注射用水適量，加入大豆磷脂，強力攪拌至分散均勻，緩緩加入油相，加完后再攪拌一段時間，然后用高壓均質機進行均質，保持均質溫度為25r土5t:,調節(jié)均質壓力及均質次數(shù)，使平均粒徑在400nm以下，加入等滲緩沖液，加入注射用水至1000ml，攪勻，分裝，濕熱高壓滅菌(12rC、20分鐘)，即得。得產(chǎn)品的pH值為4.5±0.5，平均粒徑約為190nm，滲透壓為290m0sm士20m0sm。實施例10-處方-PFD70mlPFMCP30ml氫化蛋黃卵磷脂5g氫氧化鈉適量次亞磷酸鈉5g果糖12g注射用水適量全量1000ml制法一取PFD和PFMCP，攪勻，加熱至8(TC土5。C,作為油相，備用。另取注射用水適量，加入次亞磷酸鈉和果糖，攪拌至溶解，然后用氫氧化鈉調節(jié)pH值至8.5士().5，加熱至8()°C±5°C，然后加入氫化蛋黃卵磷脂，高速剪切至分散均勻，緩緩加入油相，加完后界攪拌一段時間，然后用高壓均質機進行均質，保持均質溫度為60°C±5°C,調節(jié)均質壓力及均質次數(shù)，使平均粒徑在400nm以下，加注射用水至lOO()ml，分裝，濕熱卨壓滅齒(il5'C、30分鐘).即得。制法二取注射用水75()ml，加入次亞磷酸鈉和果糖，攪拌至溶解，作為等淺緩沖液，備用。取PFD和PFMCP，攪勻，加熱至8(TC土5r，作為油相，備用。另取注射用水適量，加熱至8(TC土5t:，加入氫化蛋黃卵磷脂，高速剪切至分散均勻，緩緩加入油相，加完后兩攪拌一段時間，然后用高壓均質機進行均質，保持均質溫度為6(rc土5r，調節(jié)均質壓力及均質次數(shù)，使平均粒徑在400nm以下，加入等滲緩沖液，攪勻，用氫氧化鈉調節(jié)pH值至8.5±0.5,加入注射用水至1000ml，攪勻，分裝，濕熱高壓滅菌(115°C、30分鐘)，即得。以上兩種制法所得產(chǎn)品的pH值均為6.5±0.5，平均粒徑約為160nm，滲透壓約為290mOsm土20mOsm。實施例11:處方PFD90mlPFMCP編氫化蛋黃卵磷脂20g谷氨酸13gEDTA-2Na0.lg注射用水_55_全量1000ml制法一-整個過程在氮氣保護下進行。取PFD和PFMCP，攪勻，加熱至4(TC土5t:，作為油相，備用。另取注射用水適量，加熱至40'C土5t:，加入谷氨酸和EDTA-2Na，攪拌至溶解，然后加入氫化蛋黃卵磷脂，高速剪切至分散均勻，緩緩加入油相，加完后再攪拌一段時間，制得初乳，調節(jié)微射流泵壓力，使初乳勻速通過微射流泵，保持乳液溫度在4(rC±5°C，并使乳液的平均粒徑在400,以下，加注射用水至1000ml，充氮分裝，密封，濕熱高壓滅菌U2rC、15分鐘)，即得。制法二整個過程在氮氣保護下進行。取注射用水125ml，加入谷氨酸和EDTA-2Na，攪拌至溶解，作為等滲緩沖液，備用。取i刊和pfm(:p，攪勻，加熱至4(rc土5。c，作為油相，各用。另取沐射用水適:I:，加熱至40°C±5°C，加入氫化蛋黃卵磷脂，高速剪切至分散均勻，緩緩加入油相，加完后再攪拌一段時間，制得初乳，調節(jié)微射流泵壓力，使初乳勻速通過微時流泵，保持乳液溫度在4(TC土5。C,并使乳液的平均粒徑在400nm以下，加入等滲緩沖液，加注射用水至i000iTi1，攪勻，充氮分裝，密封，濕熱高壓滅菌(121°C、15分鐘)，即得。以上兩種制法所得產(chǎn)品的pH值均為5.0±0.5,平均粒徑約為M0師，滲透壓約為2卯mOsm土20mOsm。實施例12:處方PFDSoilPFMCP95ml氫化蛋黃卵磷脂40g碳酸鈉0.53g碳酸氫鈉7.56gEDTA-2Na2g注射用水_51_全量1000ml制法取PFD和PFMCP，攪勻，作為油相，備用。另取注射用水適量，加入碳酸鈉、碳酸氫鈉和EDTA-2Na，攪拌至溶解，然后加入氫化蛋黃卵磷脂，強力攪拌至分散均勻，緩緩加入油相，加完后再攪拌一段時間，然后用高壓均質機進行均質，調節(jié)均質壓力及均質次數(shù)，使平均粒徑在400師以下，加注射用水至1000ml，充氮分裝，密封，濕熱高壓滅菌(12rc、20分鐘)，即得。所得產(chǎn)品的pH值為9.0±0.5，平均粒徑約為170nm，滲透壓為290mOsm土20m()sm。實施例13:處方PFD70mlPFMCP3C)tnL蛋黃卵磷脂2()g檸檬酸2.52g憐酸氫二鈉7.85gEl)TA-2Na5g注射用水__制法取注射用水250ml，加入檸檬酸、磷酸氫二鈉和EDTA-2Na，攪拌至溶解，作為等滲緩沖液，備用。取PTO和PFMCP，攪勻，加熱至4(TC土5t:，作為油相，備用。另取注射用水適量，加熱至4(TC土5t:，加入蛋黃卵磷脂，強力攪拌至分散均勻，緩緩加入油相，加完后再攪拌一段時間，制得初乳，調節(jié)微射流泵壓力，使初乳勻速通過微射流泵，保持乳液溫度在40°C±5°C,并使乳液的平均粒徑在400以下，加入等滲緩沖液，加注射用水至1000ml，充氮分裝，密封，濕熱高壓滅菌(12rC、20分鐘)，即得。所得產(chǎn)品的pH值為6.3±0.5，平均粒徑約為180nm，滲透壓為290mOsm±20mOsin。實施例14:處方PFD70mlPFMCP30ml蛋黃卵磷脂20g行檬酸.2.52g磷酸氫二鈉7.85gEDTA-2Na2g維生素E2g注射用水_5^_全量1000ml制法取PFD和PFMCP，攪勻，加熱至4(TC土5'C，作為油相，備用。取注射用水適量，加入檸檬酸、磷酸氫二鈉和EDTA-2Na，攪拌至溶解，加熱至40°C土5。C，加入維生素和蛋黃卵磷脂，強力攪拌至分散均勻，緩緩加入油相，加完后再攪袢一段時間，然后用高壓均質機進行均質，調節(jié)均質壓力及均質次數(shù)，使平均粒徑在400nm以下，加注射用水至lO()Oml.，充氮分裝，密封，濕熱高壓滅菌(12TC、15分鐘)，即得。所得產(chǎn)品的pH值為6.3±0.5，平均粒徑約為180nm，滲透壓為29()mOsm士2(M)sm。實施例15:處方卩卩D70ml.PFMCP30ml蛋黃卵磷脂20g磷酸氫二鈉0.43g磷酸二氫鈉0.36g焦磷酸鈉5g維生素E2g氯化鉀6.5g注射用水__全量1000ml制法取注射用水333ml，加入磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、焦磷酸鈉和氯化鉀，攪拌至溶解，作為等滲緩沖液，備用。取PFD和PFMCP，攪勻，備用。另取注射用水適量，加熱至4(TC土5t:，加入維生素和蛋黃卵磷脂，強力攪拌至分散均勻，緩緩加入油相，加完后再攪拌一段時間，制得初乳，調節(jié)微射流泵壓力，使初乳勻速通過微射流泵，并使乳液的平均粒徑在400nm以下，加入等滲緩沖液，加注射用水至1000ml，充氮分裝，密封，濕熱高壓滅菌G15。C、30分鐘)，即得。所得產(chǎn)品的pH值為6.3±0.5，平均粒徑約為180nm，滲透壓為290mOsm土20m()sm。實施例16-處方PFD70mlPFMCP3(M蛋黃卵磷脂20g磷酸氫二鈉0.57g磷酸二氫鈉0.48g焦磷酸鈉2gEDTA-2Na0.2g甘油10g氯化鈉2.9g注射用水__全量1000m丄制法取PFD和PRCP，攪勻，作為油相，備用。取注射用水適量，加入磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、焦磷酸鈉、E眼-2Na、氯化鈉和甘油，攪拌至溶解，加熱至40'C±5°C，加入蛋黃卵磷脂，強力攪拌至分散均勻，緩緩加入油相，加完后再攪拌-一段時間，制得初乳，調節(jié)微射流泵壓力，使初乳勻速通過微射流泵，并使乳液的平均粒徑在400nm以下，加注射用水至K)00ml，充氮分裝，密封，濕熱高壓滅菌(12廠C、20分鐘)，即得。所得產(chǎn)品的PH值為6.3±0.5，平均粒徑約為180nm，滲透壓為290m0sm士20m0sm。實施例17-處方PFD300ml蛋黃卵磷脂40g擰檬酸鈉1.55g鹽酸(0.lmol/L)40ml抗壞血酸lg亞硫酸氫鈉0.5g葡萄糖44.3g注射用水適量錢1000ml制法-整個過程在氮氣保護下進行。取注射用水適量，加入檸檬酸鈉、鹽酸(0.lmol/L)和葡萄糖，攪拌至溶解，然后加入維生素E和蛋黃卵磷脂，高速剪切至分散均勻，緩緩加入PED，加完后再攪拌一段時間，然后用高壓均質機進行均質，保持均質溫度為25°C±5°C，調節(jié)均質壓力及均質次數(shù)，使平均粒徑在40O圓以下，加注射用水至1000ml，充氮分裝，密封，濕熱高壓滅菌(12rC、15分鐘)，即得。所得產(chǎn)品的pH值為4.5±0.5，平均粒徑約為220nra，滲透壓為29(kOs(n土2(M)sm。實施例18:處方PFMCPL00ml氫化大豆磷脂5g磷酸二'fi鉀2.72g氫氧化鈉().285g焦亞硫酸鈉2g甘露醇32.7g注射用水適量全量1000ml制法整個過程在氮氣保護下進行。取注射用水250ml，加入焦亞硫酸鈉、磷酸二氫鉀、氫氧化鈉和甘露醇，攪拌至溶解，作為等滲緩沖液，備用。取PFMCP，攪勻，加熱至4(TC土5'C，作為油相，備用。另取注射用水適量，加熱至4(TC土5。C，加入維生素E和氫化大豆磷脂，高速剪切至分散均勻，緩緩加入油相，加完后再攪拌一段時間，然后用高壓均質機進行均質，保持均質溫度為4(TC士5C調節(jié)均質壓力及均質次數(shù)，使平均粒徑在4()0nm以下，均質完畢，加入等滲緩沖液，加注射用水至1000ml，攪勻，充氮分裝，密封，濕熱高壓滅菌(12rC、20分鐘)，即得。所得產(chǎn)品的pH值為6.5±0.5，平均粒徑約為140nm，滲透壓為290mOsm土20mOsm。實施例19:處方PFDl編PFMCP60ml蛋黃卵磷脂20g磷酸氫二鈉0.284g磷酸二氫鈉0.24g維生素E0.lg甘油22.5g注射用水適量全量1000m丄制法整個過程在氮氣保護下進行。取PR)和PFMCP，攪勻，加熱至4(TC士5。C，作為油相，備用。另取注射用水適量，加熱至犯'c士5r，加入磷酸氫二鈉和磷酸二氫鈉和甘油，攪拌至溶解，然后加入維生煮E和蛋黃卵(森脂.采用高剪切乳化劑分散，緩緩加入油相，加完后繼續(xù)剪切至分散均勻，然后用高壓均質機進行均質，保持均質溫度為40'C土5'C，調節(jié)均質壓力及均質次數(shù)，使平均粒徑在200nm以下，加注射用水至l()O()ml,充氮分裝，密封，濕熱高壓滅菌(121°C、20分鐘)，即得。所得產(chǎn)品的[)H值均為7.2±0.5，平均粒徑約為l'!2nm,滲透壓約為290m0sm土2(M)sni。實施例20:處方PFD35mlPFMCP15ml蛋黃卵磷脂20g桿檬酸鈉1.55g鹽酸(0.1歸1/L)40ml泊洛沙姆1882g吐溫803g維生素Elg葡萄糖44.3g注射用水適量全量翻ml制法整個過程在氮氣保護下進行。取注射用水適量，加入檸檬酸鈉、吐溫80、泊洛沙姆188、鹽酸(0.1mol/L)和葡萄糖，攪拌至溶解，然后加入維生素E和蛋黃卵磷脂，高速剪切至分散均勻，緩緩加入PED和PFMCP，加完后再攪拌一段時間，然后用高壓均質機進行均質，保持均質溫度為25°C±5°C，調節(jié)均質壓力及均質次數(shù)，使平均粒徑在400，以下，加注射用水至1000ml，充氮分裝，密封，濕熱高壓滅菌(121'C、15分鐘)，即得。所得產(chǎn)品的pH值為4.5±0.5，平均粒徑約為220nin，滲透壓為290mOsm土20mOsm。實施例21:處方PFD70mlPFMCP30ml大豆磷脂5g醋酸l.77g醋酸鈉5.78g焦磷酸鈉10g聚氧乙烯40硬脂酸酯4g注射用水_適量全量1000ml整個過程在氮氣保護下進行。取PFD和PFMCP，攪拌，加熱至4(TC土5'C，作為油相，備用。另取注射用水適量，加熱至4(TC土5。C，加入醋酸、醋酸鈉、聚氧乙烯40硬脂酸酯和焦磷酸鈉，攪拌至溶解，然后加入大豆磷脂，高速剪切至分散均勻，緩緩加入油相，加完后再攪拌一段時間，制得初乳，調節(jié)微射流泵壓力，使初乳勻速通過微射流泵，保持乳液溫度在4(TC±5°C，并使乳液的平均粒徑在400nm以下，加注射用水至1000ml，充氮分裝，密封，濕熱高壓滅菌U15。C、30分鐘)，即得。上述制法所得產(chǎn)品的PH值均為5.0±0.5，平均粒徑約為140nm，滲透壓約為290mOsm土20mOsm。實施例22-處方PFD70mlPFMCP30ml氫化蛋黃卵磷脂5g聚氧乙烯蓖麻油甘油酯3g次亞磷酸鈉5g果糖12g氫氧化鈉適量注射用水_55_全量1000ml整個過程在氮氣保護下進行。取注射用水750ml，加入次亞磷酸鈉、聚氧乙烯蓖麻油甘油酯和果糖，攪拌至溶解，作為等滲緩沖液，備用。取pfd和pfmcp，攪勻，加熱至8(rc土rrc，作為油相，備用。另取注射用水適量，加熱至80°c±5r:，加入氫化蛋黃卵磷脂，高速剪切至分散均勻，緩緩加入油相，加完后再攪拌一段時間，然后用高壓均質機進行均質，保持均質溫度為6(TC士5。C，i周節(jié)均質壓力及均質次數(shù)，使平均粒徑在40()nm以下，加入等漆緩沖液，攪勻，用氫氧化鈉調節(jié)pH值至8.5土0.5，加入注射用水至lOOOml，攪勻，分裝，濕熱高壓滅菌(115匸、30分鐘)，即得。上述制法所得產(chǎn)品的ph值均為6.5±0.5，平均粒徑約為160niTi，滲透壓約為29()mOsm土2()mOsm。上述實施例還可以例舉許多，限于篇幅，不再一一列舉，但只要在本發(fā)明技術方案給出的范圍內，均可以達到本發(fā)明的目的。上述實施例的原輔料配比、乳劑的濃度，穩(wěn)定劑的種類及用量、工藝參數(shù)等沒有--一列舉，經(jīng)申請人的實踐證明原輔料配比、乳劑的濃度，穩(wěn)定劑的種類及用量均在本申請的技術方案的范圍。穩(wěn)定性考察和急性毒性試驗1)穩(wěn)定性考察取上述實施例制備的樣品與perftoran同置于室溫下，以粒徑和pH為參數(shù)進行穩(wěn)定性考察，結果見表1，圖110.表l穩(wěn)定性研究結果<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>2)急性毒性試驗取上述實施例制備的樣品，對該產(chǎn)品進行了藥理學研究，采用大鼠進行急性試驗，試驗結果見表2.表2急性毒性試驗結果<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>從以上試驗結果可以判斷，兩種制劑的毒性都非常小。以25mi/kg的劑量在家兔身上進行試驗,結果發(fā)現(xiàn)注射Perft,的家兔在注射后l小時后出現(xiàn)血壓下降，血小板計數(shù)下降，白細胞計數(shù)增多，24小時內恢復，而注射以本發(fā)明制備的樣品，血壓，血小板及白細胞水平?jīng)]有發(fā)生波動，相對比較平穩(wěn)。本發(fā)明生產(chǎn)的全氟化碳乳劑，性質穩(wěn)定，可于非冷凍狀態(tài)下貯存，適于工業(yè)化生產(chǎn)。本發(fā)明采用磷脂代替泊洛沙姆F-68，其良好的生物相容性可以明顯改善以前產(chǎn)品的不足，同時，由于采用磷脂為表面活性劑，可以解決以前產(chǎn)品無法釆用流通蒸汽滅菌的問題，從而提高了安全性，同時也可以采用非冷凍條件保存該產(chǎn)品，所以臨床上可以直接使用。本發(fā)明生產(chǎn)的全氟化碳乳劑與俄羅斯上市產(chǎn)品的進行了特性比較，結果詳見表3。從表3可以看出，本發(fā)明的全氟化碳乳劑完全可以保證臨床使用的安全性，并且降低臨床使用過程中所發(fā)生的不良反應，可以認為是一種新型的人工氧氣載體制劑。表
發(fā)明內容與Perftoran的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>權利要求1、一種全氟化碳乳劑，其特征在于，制得的該全氟化碳乳劑的平均粒徑小于400nm，pH值為4～9.5，滲透壓為270mMOS～320mMOS；其中包含有作為藥物的全氟萘烷和全氟-N-4-甲基環(huán)己基哌啶，它們在全氟化碳乳劑中的最終體積比例為5％～30％，其中，全氟萘烷和全氟-N-4-甲基環(huán)己基哌啶的體積比為100％∶0～0∶100％；作為乳化劑的磷脂，該磷脂在全氟化碳乳劑中的最終濃度為0.5％～4.0％。2、如權利要求l所述的全氟化碳乳劑，其特征在于，所述的磷脂為蛋黃卵磷脂、氫化蛋黃卵磷脂、大豆卵磷脂和氫化大豆卵磷脂其中的一種。3、權利要求1所述的全氟化碳乳劑的制備方法，其特征在于，該方法包括以下步驟(1)將適量的磷脂分散于水或者分散于含有穩(wěn)定劑及滲透壓調節(jié)劑的緩沖液中，制備磷脂分散液；(2)將全氟化合物全氟萘烷及全氟-N-4--甲基環(huán)己基哌啶按體積比混合制備氟碳混合液體；(3)將步驟(2)中所得到的氟碳混合液體分散在步驟(1)中得到的磷脂分散液中，形成初乳；(4)將步驟(3)中得到的初乳進行均質，形成穩(wěn)定的乳液，將該乳液分裝、滅菌，即得全氟化碳乳劑；或者將該乳液與含有穩(wěn)定劑及滲透壓調節(jié)劑的緩沖液按比例混合，分裝、滅菌，即得全氟化碳乳劑。4、如權利要求3所述的全氟化碳乳劑的制備方法，其特征在于，所述的磷脂為蛋黃卵磷脂、氫化蛋黃卵磷脂、大豆卵磷脂和氫化大豆卵磷脂其中的一種，磷脂在乳劑中的最終重量/體積濃度為0.5%4.0%。5、如權利要求3所述的全氟化碳乳劑的制備方法，其特征在于，所述的磷脂分散在水中的方法采用攪拌、高速剪切或者均質，磷脂分散于水的溫度為2CTC8(TC，所述的氟碳混合液體與磷脂分散液體混合而形成穩(wěn)定的乳液采用高速減切、高壓均質或者微射流的方法，在制備穩(wěn)定乳液過程中的溫度控制在2080°C。6、如權利要求1所述的全氟化碳乳劑的制備方法，其特征在于，所述的含有穩(wěn)定劑及滲透壓調節(jié)劑的緩沖液，其中緩沖液是由磷酸鹽、檸檬酸鹽、碳酸鹽、醋酸鹽、氨基酸、酒石酸鹽、乳酸鹽等中的一種或幾種組成的，其pH值范圍為49.5;所述滲透壓調節(jié)劑是氯化鈉、甘油、葡萄糖、氨基酸、山梨醇或者甘露醇中的一種或幾種組合。7、如權利要求1所述的全氟化碳乳劑的制備方法，其特征在于，所述的乳液與含有穩(wěn)定劑及滲透壓調節(jié)劑的緩沖液混合時，其體積比例是穩(wěn)定劑滲透壓調節(jié)劑=10:01:6.5。8、如權利要求1所述的全氟化碳乳劑的制備方法，其特征在于，所述的緩沖液中的穩(wěn)定劑是焦磷酸鈉、焦亞磷酸鈉、次亞磷酸鈉、EDTA-2Na、a一生育酚、焦亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、抗壞血酸、泊洛沙姆、聚山梨酯、聚氧乙稀脂肪酸酯、聚氧乙稀脂肪醇醚中的一種或幾種的組合，穩(wěn)定劑在乳液中的最終含量為01.5%。9、如權利要求1所述的全氟化碳乳劑的制備方法，其特征在于，所述全氟化碳乳劑的最終pH值49.5;滲透壓為270320mM0S。10、如權利要求1所述的全氟化碳乳劑的制備方法，其特征在于，所述的全氟化碳乳劑平均粒徑小于400nm。全文摘要本發(fā)明公開了一種全氟化碳乳劑及其制備方法，制得的該全氟化碳乳劑的平均粒徑小于400nm，pH值為4～9.5，滲透壓為270mMOS～320mMOS；其中包含有全氟萘烷和全氟-N-4-甲基環(huán)己基哌啶，全氟萘烷和全氟-N-4-甲基環(huán)己基哌啶的體積比例為100％∶0～0∶100％，全氟萘烷和全氟-N-4-甲基環(huán)己基哌啶在全氟化碳乳劑中的體積百分比例為5％～30％，還包含有作為乳化劑的磷脂，其重量百分比為0.5％～4.0％。該全氟化碳乳劑采用高壓均質或者微射流的方法制備，具有粒徑小，可在非冷凍狀態(tài)下儲存的優(yōu)點，是一種新型的人工氧氣載體制劑。文檔編號A61K33/16GK101199548SQ200710188560公開日2008年6月18日申請日期2007年12月11日優(yōu)先權日2007年12月11日發(fā)明者李紅英,歐根坭·馬亞夫斯基,王九成,王智軍,胡忍樂申請人:西安力邦醫(yī)藥科技有限責任公司