專利名稱：一種紫莖澤蘭中綠原酸的提取工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種紫莖澤蘭中綠原酸的提取工藝。
背景技術(shù)：
紫莖澤蘭(五i^aton'w"7 a&朋; /2on^ Spreng)為菊科澤蘭屬多年生草本植物，原產(chǎn)墨 西哥，20世紀50年代前后自緬甸和越南傳入我國云南南部，因其生長及繁殖能力極 強，已在云南省及其周邊許多地區(qū)蔓延。由于它對生態(tài)環(huán)境的破壞，給農(nóng)林牧副業(yè)帶 來了嚴重危害。
鑒于紫莖澤蘭已成為我國危害最為嚴重的外來入侵物種之一，各地在加強控制紫 莖澤蘭蔓延措施的同時，紛紛展開對其綜合利用的研究，力圖變害為寶。在文獻1: 閏乾勝，陳慶華，楊婕，李華民，曹拗程，文永奇，何蘭.入侵物種紫莖澤蘭化學成 分及生物活性研究進展.北京師范大學學報(自然科學版)，2006， 42(1):70中，報道了 紫莖澤蘭中含有化學成分綠原酸(Chlorogenicacid， CHA)。綠原酸又稱咖啡單寧酸， 具有顯著的抗菌、抗病毒、抗氧化、抗誘變、抗腫瘤及利膽、降壓、增高白血球、興 奮中樞神經(jīng)系統(tǒng)等多種生理活性，在國內(nèi)外已被作為添加劑廣泛用于食品、功能(保 健)食品、飲料中。
現(xiàn)在，國內(nèi)主要以金銀花為原料提取綠原酸，如文獻2:王天制，李永梅.金銀花 的研究進展.華西藥學雜志，2000, 15(4):292中公開的方法，但是該方法提取物中僅 含1%的綠原酸，產(chǎn)率低；金銀花資源大量采集，造成資源的浪費。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種紫莖澤蘭中綠原酸的提取工藝，該方法以紫莖澤蘭為 起始原料，不僅可以彌補以金銀花為原料提取綠原酸時資源有限的不足，還可以在將 紫莖澤蘭毒草為我所用，變害為寶，獲得高產(chǎn)率地綠原酸。
本發(fā)明的目的是通過如下的技術(shù)方案實現(xiàn)的 本發(fā)明提供的紫莖澤蘭中綠原酸的提取工藝，包括如下步驟1) 將紫莖澤蘭的嫩莖葉粉碎成粉末；
2) 將步驟1)中得到的紫莖澤蘭嫩莖葉粉末，加入體積比為20 — 60%的乙醇水溶 液，并用鹽酸調(diào)pH值至2—6;在50 — 8(TC，將混和液煎煮2—5小時；
所加入的紫莖澤蘭嫩莖葉粉末和乙醇水溶液的重量比為1: 8—13;
3) 減壓抽濾，濾出濾液l;將濾渣再次加入體積比為20_60%的乙醇水溶液，并 用鹽酸調(diào)pH值至2—6;在50—8(TC，將混和液回流2 — 5小時；
4) 減壓抽濾，濾出濾液2;將濾渣再次加入體積比為20—60%的乙醇水溶液，并 用鹽酸調(diào)pH值至2—6;在50 — 80。C，將混和液回流2 — 5小時；
5) 減壓抽濾，濾出濾液3;合并三次的濾液，蒸發(fā)除去溶劑，將所得浸膏用空氣 泵吹干，得到綠原酸的粗產(chǎn)品；
6) 用大孔樹脂法純化綠原酸的粗產(chǎn)品，將綠原酸的粗產(chǎn)品溶于乙醇中，上樣到大 孔樹脂中，用去離子水作為洗脫液，過柱兩次；將水洗脫物除去溶劑，干燥，得到綠 原酸提取物。
在本技術(shù)方案中，所述步驟6)的大孔樹脂為NKA-9型、NKA-II型或DIOI型大 孔樹脂。
在本技術(shù)方案中，所述步驟6)中綠原酸的粗產(chǎn)品、溶樣的乙醇和洗脫的去離子
水的比例為10g: 100mL: 400mL。
在本技術(shù)方案中，所述步驟6)中過柱時控制流速l一3mL/min。 在本技術(shù)方案中，所述步驟6)中，還可使用乙醇進一步洗脫，得到少量的綠原
酸提取物。
本發(fā)明先用20-60%的乙醇溶液進行提取，再通過大孔樹脂進一步純化產(chǎn)品，開 發(fā)出一套適合從紫莖澤蘭中提取綠原酸的最優(yōu)路線。該方法使用紫莖澤蘭為起始原料， 其在我國分布廣闊，所以原料豐富。本發(fā)明的方法可以得到含量高達52.56%的綠原 酸提取物，高產(chǎn)率地獲得綠原酸。本發(fā)明提供的方法簡單，成本低廉，適于工業(yè)化生 產(chǎn)。
具體實施方式
' 實施例1、
先將紫莖澤蘭的嫩莖葉粉碎成粉末，然后稱取100克紫莖澤蘭嫩莖葉粉末，裝于 圓底燒瓶中，加入800g20X (體積比)的乙醇水溶液，并用鹽酸調(diào)pH值至6;在80。C，將混和液回流2小時。
用布氏漏斗減壓抽濾，濾出濾液l移至茄型瓶中；將濾渣重新裝回圓底燒瓶中， 再次加入800g20X (體積比)的乙醇水溶液，并用鹽酸調(diào)pH值至6;在80'C，將混 和液煎煮2小時。
再次用布氏漏斗減壓抽濾，濾出濾液2移至茄型瓶中；將濾渣重新裝回圓底燒瓶
中，再次加入800g20X (體積比)的乙醇水溶液，并用鹽酸調(diào)pH值至6;在8(TC， 將混和液回流2小時。
減壓抽濾，濾出濾液3，棄去濾渣；合并三次的濾液，蒸發(fā)除去溶劑，將所得浸 膏轉(zhuǎn)移至已稱重的小錐形瓶中，用空氣泵吹干，得到綠原酸的粗產(chǎn)品370.01g，計算出 綠原酸得率為14.91%，使用HPLC分析，在浸膏中綠原酸的含量為32.24%。
用大孔樹脂法純化綠原酸的粗產(chǎn)品。首先，對樹脂進行預處理將NKA-9型大孔 樹脂用去離子水溶脹后浮選，然后用lmol/L的氫氧化鈉溶液浸泡4h，去離子水洗至 中性，再用0.5mol/L的鹽酸溶液浸泡12h，去離子水洗至中性；最后用70%乙醇浸泡 24h，不斷攪拌，再用去離子水洗至無白色混濁現(xiàn)象、無醇味止；去離子水浸泡，待用。 然后，將已經(jīng)預處理好的大孔樹脂裝柱。最后，稱取10g綠原酸的粗產(chǎn)品溶于100mL 乙醇中，上樣；使用400mL去離子水洗脫，控制流速l一3mL/min，過柱兩次，將水 洗脫物除去溶劑，干燥，得到綠原酸提取物，使用HPLC分析，該提取物中綠原酸的 含量為52.56%。
實施例2、
先將紫莖澤蘭的嫩莖葉粉碎成粉末，然后稱取100克紫莖澤蘭葉粉末，裝于圓底 燒瓶中，加入1300g40X (體積比)的乙醇水溶液，并用鹽酸調(diào)pH值至4;在50。C， 將混和液煎煮5小時。
用布氏漏斗減壓抽濾，濾出濾液l移至茄型瓶中；將濾渣重新裝回圓底燒瓶中， 再次加入1300g40X (體積比)的乙醇水溶液，并用鹽酸調(diào)pH值至4;在50。C，將 混和液煎煮5小時。
再次用布氏漏斗減壓抽濾，濾出濾液2移至茄型瓶中；將濾渣重新裝回圓底燒瓶 中，再次加入1300g40X (體積比)的乙醇水溶液，并用鹽酸調(diào)pH值至4;在5(TC， 將混和液煎煮5小時。
減壓抽濾，濾出濾液3，棄去濾渣；合并三次的濾液，蒸發(fā)除去溶劑，將所得浸 膏轉(zhuǎn)移至已稱重的小錐形瓶中，用空氣泵吹干，得到綠原酸的粗產(chǎn)品568.7g，計算出綠原酸得率為13.89%，使用HPLC分析，在浸膏中綠原酸的含量為31.75%。
用大孔樹脂法純化綠原酸的粗產(chǎn)品。首先，對樹脂進行預處理將D101型大孔 樹脂用去離子水溶脹后浮選，然后用lmol/L的氫氧化鈉溶液浸泡4h，去離子水洗至 中性，再用0.5mol/L的鹽酸溶液浸泡12h，去離子水洗至中性；最后用70%乙醇浸泡 24h，不斷攪拌，再用去離子水洗至無白色混濁現(xiàn)象、無醇味止；去離子水浸泡，待用。 然后，將已經(jīng)預處理好的大孔樹脂裝柱。最后，稱取10g綠原酸的粗產(chǎn)品溶于100mL 乙醇中，上樣；使用400mL去離子水洗脫，控制流速l一3mL/min，過柱兩次，將水 洗脫物除去溶劑，干燥，得到綠原酸提取物，使用HPLC分析，該提取物中綠原酸的 含量為50.08%。
實施例3、
先將紫莖澤蘭的葉子粉碎成粉末，然后稱取100克紫莖澤蘭葉粉末，裝于圓底燒 瓶中，加入1000g 60% (體積比)的乙醇水溶液，并用鹽酸調(diào)pH值至2;在60。C， 將混和液煎煮4小時。
用布氏漏斗減壓抽濾，濾出濾液l移至茄型瓶中；將濾渣重新裝回圓底燒瓶中， 再次加入1000g 60% (體積比)的乙醇水溶液，并用鹽酸調(diào)pH值至2;在60。C，將 混和液煎煮4小時。
再次用布氏漏斗減壓抽濾，濾出濾液2移至茄型瓶中；將濾渣重新裝回圓底燒瓶 中，再次加入1000g60X (體積比)的乙醇水溶液，并用鹽酸調(diào)pH值至2;在60。C， 將混和液煎煮4小時。
減壓抽濾，濾出濾液3，棄去濾渣；合并三次的濾液，蒸發(fā)除去溶劑，將所得浸 膏轉(zhuǎn)移至已稱重的小錐形瓶中，用空氣泵吹干，得到綠原酸的粗產(chǎn)品444.1g，計算出 綠原酸得率為14.23%，使用HPLC分析，在浸膏中綠原酸的含量為32.04%。
用大孔樹脂法純化綠原酸的粗產(chǎn)品。首先，對樹脂進行預處理將NKA-II型大 孔樹脂用去離子水溶脹后浮選，然后用lmol/L的氫氧化鈉溶液浸泡4h，去離子水洗 至中性，再用0.5mol/L的鹽酸溶液浸泡12h，去離子水洗至中性；最后用70%乙醇浸 泡24h，不斷攪拌，再用去離子水洗至無白色混濁現(xiàn)象、無醇味止；去離子水浸泡， 待用。然后，將己經(jīng)預處理好的大孔樹脂裝柱。最后，稱取10g綠原酸的粗產(chǎn)品溶于 lOOmL乙醇中，上樣；使用400mL去離子水洗脫，控制流速1 一3mL/min，過柱兩次， 將水洗脫物除去溶劑，干燥，得到綠原酸提取物，使用HPLC分析，該提取物中綠原 酸的含量為51.07%。還可使用乙醇進一步洗脫，得到少量的綠原酸提取物。
權(quán)利要求
1、一種紫莖澤蘭中綠原酸的提取工藝，包括如下步驟1)將紫莖澤蘭的葉子粉碎成粉末；2)將步驟1)中得到的紫莖澤蘭葉子粉末，加入體積比為20-60％的乙醇水溶液，并用鹽酸調(diào)pH值至2-6；在50-80℃，將混和液煎煮2-5小時；所加入的紫莖澤蘭葉子粉末和乙醇水溶液的重量比為1∶8-13；3)減壓抽濾，濾出濾液1；將濾渣再次加入體積比為20-60％的乙醇水溶液，并用鹽酸調(diào)pH值至2-6；在50-80℃，將混和液煎煮2-5小時；4)減壓抽濾，濾出濾液2；將濾渣再次加入體積比為20-60％的乙醇水溶液，并用鹽酸調(diào)pH值至2-6；在50-80℃，將混和液煎煮2-5小時；5)減壓抽濾，濾出濾液3；合并三次的濾液，蒸發(fā)除去溶劑，將所得浸膏用空氣泵吹干，得到綠原酸的粗產(chǎn)品；6)用大孔樹脂法純化綠原酸的粗產(chǎn)品，將綠原酸的粗產(chǎn)品溶于乙醇中，上樣到大孔樹脂中，用去離子水作為洗脫液，過柱兩次；將水洗脫物除去溶劑，干燥，得到綠原酸提取物。
2、 如權(quán)利要求1所述的紫莖澤蘭中綠原酸的提取工藝，其特征在于所述步驟6)的大孔樹脂為NKA-9型、NKA-II型或DIOI型大孔樹脂。
3、 如權(quán)利要求1所述的紫莖澤蘭中綠原酸的提取工藝，其特征在于所述步驟6) 中綠原酸的粗產(chǎn)品、溶樣的乙醇和洗脫的去離子水的比例為10g: 100mL: 400mL。
4、 如權(quán)利要求1所述的紫莖澤蘭中綠原酸的提取工藝，其特征在于所述步驟6) 中，過柱時控制流速1—3mL/min。
5、 如權(quán)利要求1所述的紫莖澤蘭中綠原酸的提取工藝，其特征在于所述步驟6) 中，使用乙醇進一步洗脫，得到少量的綠原酸提取物。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種紫莖澤蘭中綠原酸的提取工藝，該方法以紫莖澤蘭為起始原料，先用20-60％的乙醇溶液進行提取，再通過大孔樹脂進一步純化產(chǎn)品，可以得到含量高達52.56％的綠原酸提取物。本發(fā)明的方法彌補以金銀花為原料提取綠原酸時資源有限的不足，還可以在將紫莖澤蘭變害為寶的同時，高產(chǎn)率地獲得綠原酸，且方法簡單，成本低廉，適于工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號A61K36/185GK101302156SQ20071009899
公開日2008年11月12日 申請日期2007年5月8日 優(yōu)先權(quán)日2007年5月8日
發(fā)明者蘭 何, 婧 侯, 吳建平, 曹坳程, 宇 田, 郭美霞 申請人:中國農(nóng)業(yè)科學院植物保護研究所