專利名稱：：紫莖澤蘭多糖及制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種紫莖澤蘭多糖、其制備方法、含有紫莖澤蘭多糖的藥物制劑及其用途，具體地說，本發(fā)明涉及由紫莖澤蘭提取的紫莖澤蘭多糖、其制備方法、含有紫莖澤蘭多糖的藥物制劑及其在制備促進(jìn)免疫功能、抗氧化藥物上的用途，屬于藥用天然產(chǎn)物領(lǐng)域。二.
背景技術(shù)：
：紫莖澤蘭(f〃pstorj'M7aofe/o/力。2T^5^re"g)為一禾中菊禾斗澤蘭屬多年生草本植物，俗稱飛機(jī)草、魔鬼草。原產(chǎn)于墨西哥，于上世紀(jì)四十年代經(jīng)澳大利亞進(jìn)入我國南部，現(xiàn)已廣泛分布于云南、海南、廣西、貴州、西藏、四川等省。同時，紫莖澤蘭含有有毒物質(zhì)，常使馬、牛、羊等放牧家畜誤食中毒甚至死亡。紫莖澤蘭給所到之地的農(nóng)業(yè)、牧業(yè)及林業(yè)等造成了難以挽回的巨大損失，對紫莖澤蘭進(jìn)行有效的開發(fā)利用，變害為利，應(yīng)該具有重大的經(jīng)濟(jì)和社會意義。在利用紫莖澤蘭生物活性成分的研究方面，主要集中于昆蟲拒食活性、植物生長的雙向調(diào)節(jié)作用、殺蟲和殺菌活性等。目前開發(fā)利用紫莖澤蘭已公開的方法中，尚未見利用制備多糖及其用途的報道。多糖是一類具有廣泛生物活性的生物大分子物質(zhì)，目前已有300多種多糖類化合物從天然產(chǎn)物中被分離。大量研究顯示，多糖類物質(zhì)具有免疫調(diào)節(jié)、抗氧化、抗腫瘤、抗輻射、抗炎、抗疲勞和抗衰老等作用，植物多糖是其中極為重要的一個類別。植物活性多糖具有廣泛的研究和開發(fā)利用價值。本發(fā)明利用紫莖澤蘭提取活性多糖，拓寬了紫莖澤蘭天然產(chǎn)物的開發(fā)利用途徑，為紫莖澤蘭的資源化提供一種有效利用的方法，有利于提高紫莖澤蘭綜合利用的經(jīng)濟(jì)價值。三.
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種紫莖澤蘭多糖，是從紫莖澤蘭中提取的主要活性多糖部位，以多糖直接入藥，無毒副作用，服用量大大減少，藥物的療效明確，適用范圍廣。本發(fā)明的另一目的在于提供一種紫莖澤蘭多糖藥物組合物，該藥物組合物含有紫莖澤蘭的提取物一一紫莖澤蘭多糖，以及藥學(xué)上可接受的其他輔料、各種藥物劑型的安全、價廉、有效的藥物組合物。本發(fā)明的再一目的在于提供上述紫莖澤蘭多糖、紫莖澤蘭多糖藥物組合物的制備方法，該方法簡單、有效、適于工業(yè)化生產(chǎn)，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定、易于控制。本發(fā)明還有一目的在于提供紫莖澤蘭多糖提取物、紫莖澤蘭多糖藥物在制備促進(jìn)免疫功能、抗氧化保健品、食品或藥物的用途。此外，本發(fā)明還提供了紫莖澤蘭多糖提取物或含有紫莖澤蘭多糖提取物的藥物組合物在制備促進(jìn)免疫功能、抗氧化的飼料添加劑或飼養(yǎng)動物的保健品或藥物的用途。為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為一種紫莖澤蘭多糖，是紫莖澤蘭原料經(jīng)提取得到的，其總糖含量為60一95wt^，分子量在3000—130000道爾頓之間，呈固態(tài)淺棕色。優(yōu)選總糖含量為70—85wt%。優(yōu)選平均分子量為3—8萬。本發(fā)明的紫莖澤蘭多糖呈固態(tài)淺棕色，易溶于熱水，不溶于乙醇。所述紫莖澤蘭多糖藥物組合物含有本發(fā)明紫莖澤蘭多糖和藥學(xué)上可接受的輔料。在紫莖澤蘭多糖藥物組合物中，紫莖澤蘭多糖的含量為1一90wt本發(fā)明紫莖澤蘭多糖的制備方法，具體為方法A:(1)將紫莖澤蘭原料水煮、水煮液濃縮，得濃縮粗提取液，加入醇沉淀，收集紫莖澤蘭多糖粗沉淀物；(2)紫莖澤蘭多糖粗沉淀物用水溶解，再用sevag法除去游離的蛋白質(zhì)反復(fù)進(jìn)行3-9次，濃縮，醇析沉淀，沉淀用無水乙醇、丙酮、乙醚分別洗滌，得到去蛋白后的紫莖澤蘭多糖沉淀物；(3)去蛋白后的紫莖澤蘭多糖沉淀物經(jīng)透析或超濾的方法分離，去除小分子雜質(zhì)，得到多糖分子量在3000—130000道爾頓之間的紫莖澤蘭多糖精制提取液，濃縮，加入醇沉淀，收集精制沉淀物；(4)紫莖澤蘭多糖精制沉淀物經(jīng)干燥得到紫莖澤蘭多糖精制提取物；所述的醇為甲醇、乙醇或丙醇，優(yōu)選乙醇；或者方法B:(1)將紫莖澤蘭原料加水浸泡0.5-2h(小時)后微波2次提取、提取液濃縮，得濃縮粗提取液，加入醇沉淀，收集紫莖澤蘭多糖粗沉淀物；(2)紫莖澤蘭多糖粗沉淀物用水溶解，再用sevag法除去游離的蛋白質(zhì)，反復(fù)進(jìn)行3-9次，濃縮，醇析沉淀，沉淀用無水乙醇、丙酮、乙醚分別洗滌，得到去蛋白后的紫莖澤蘭多糖沉淀物；(3)去蛋白后的紫莖澤蘭多糖沉淀物經(jīng)透析或超濾的方法分離，去除小分子雜質(zhì)，得到多糖分子量在3000—130000道爾頓之間的紫莖澤蘭多糖精制提取液，濃縮，加入醇沉淀，收集精制沉淀物；(4)紫莖澤蘭多糖精制沉淀物經(jīng)干燥得到紫莖澤蘭多糖精制提取物；所述的醇為甲醇、乙醇或丙醇，優(yōu)選乙醇?；蛘叻椒–:(1)將紫莖澤蘭原料加水浸泡0.5-2h后微波2次提取、提取液濃縮，得濃縮粗提取液，加入醇沉淀，收集紫莖澤蘭多糖粗沉淀物；(2)紫莖澤蘭多糖沉淀物經(jīng)透析或超濾的方法分離，去除小分子雜質(zhì)，得到多糖分子量在3000—130000道爾頓之間的紫莖澤蘭多糖精制提取液，濃縮，加入醇沉淀，收集精制沉淀物；(3)紫莖澤蘭多糖精制沉淀物經(jīng)干燥得到紫莖澤蘭多糖精制提取物；所述的醇為甲醇、乙醇或丙醇，優(yōu)選乙醇。所述制備方法中的紫莖澤蘭原料為紫莖澤蘭全草粉碎物；所述方法A(l)紫莖澤蘭的水煮是將紫莖澤蘭在蒸餾水中煎煮；加入5一20倍紫莖澤蘭重量的蒸餾水；煎煮在沸騰下進(jìn)行，煎煮提取1一4次至有效成分充分提取出來，每次1一5小時；所述方法B(l)與C(l)紫莖澤蘭原料加水浸泡O.5-2h后微波2次提取是指將紫莖澤蘭樣品先在常溫下浸泡O.5-2h，用微波l次提取后將殘碴加相同體積水再浸泡O.5-2h，然后微波2次提取；所述微波提取處理條件為微波功率300-800W，料液重量比為l:5-20，微波提取時間2-10min;所述方法A和B中醇沉使用的醇為75X—95%的醇，醇的用量為濃縮液的2—5倍體積量，所述的醇為甲醇、乙醇或丙醇；所述方法A和B中的濃縮為將提取液濃縮至原體積的1/2—1/5，濃縮采用加熱濃縮、減壓濃縮或薄膜蒸發(fā)濃縮，優(yōu)選在50-70°C下采用薄膜蒸發(fā)濃縮。所述方法A(2)和B(2)中用sevag法除去蛋白質(zhì)，其具體方法為將由氯仿和正丁醇按體積比5:1構(gòu)成的Sevag試劑與多糖溶液按1:5的體積比加入，加入試劑后震蕩20—30分鐘，使試劑與溶液充分混合，離心后去除交界處沉淀的蛋白，如此反復(fù)3-9次；所述方法A(3)和B(3)及(2)中多糖沉淀物經(jīng)透析或超濾的方法分離、去除小分子雜質(zhì)，均指沉淀物用水充分溶解后進(jìn)行，優(yōu)選透析方法，所述的透析使用自來水或去離子水；所述干燥為加熱干燥、冷凍干燥或噴霧干燥。上述紫莖澤蘭多糖、紫莖澤蘭多糖水溶液，可以采用現(xiàn)有技術(shù)公知的方法制成含有紫莖澤蘭多糖提取物或紫莖澤蘭多糖的藥物組合物，以及任何一種藥劑學(xué)上可接受的劑型，如顆粒劑、口服液、膠囊、片劑、注射劑、粉劑等藥物組合物等。采用本發(fā)明方法得到的紫莖澤蘭多糖呈固態(tài)淺棕色，易溶于熱水，不溶于乙醇，平均分子量在3萬一8萬之間，總糖含量為60—95%?？梢灾瞥扇魏我环N藥劑學(xué)上所說的劑型。本發(fā)明采用水煮醇沉及微波提取醇沉的方法提取分離紫莖澤蘭中的有效成分紫莖澤蘭多糖，提取過程中，采用Sevag試劑去除紫莖澤蘭原藥中的蛋白及其他雜質(zhì)；通過多次醇沉淀、透析等方法可以進(jìn)一步提純和分離，得到含有一定分子量的紫莖澤蘭多糖，經(jīng)檢測，總糖含量較高，避免了由于雜質(zhì)較多引起的毒、副作用。本發(fā)明方法得到的紫莖澤蘭多糖原料易得，方法簡單，生產(chǎn)成本低，產(chǎn)品多糖含量較高，質(zhì)量穩(wěn)定、易于控制。采用本發(fā)明方法制備的紫莖澤蘭多糖的毒性實驗及藥效實驗結(jié)果如下1、毒性觀察取昆明種小鼠64只，隨機(jī)分組，采用服用和不服用紫莖澤蘭多糖進(jìn)行毒性對比實驗研究，結(jié)果表明，紫莖澤蘭多糖組在高達(dá)500mg/Kg的劑量下，無任何毒副作用，通過對心、肝、腎、肺解剖觀察均無異常，并且體重均有增加。實驗結(jié)果見表1。表l.紫莖澤蘭多糖(簡稱紫多糖)毒性實驗<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>2.抗氧化活性研究小鼠肝組織過氧化脂質(zhì)(LPO)抑制作用實驗是目前檢測藥物體外抗氧化作用的常用和重要指標(biāo)之一。參照相關(guān)常規(guī)方法，取2ml5%實驗肝勻漿液和0.5ml實驗樣品液(紫莖澤蘭多糖簡稱紫多糖)于試管中混勻，37。C溫育2h后，使其充分氧化。恒溫后，在每管中加入20g/L三氯乙酸1.5ml，以終止反應(yīng)。3000r/min離心15min，取上清2ml，加入0.67%TBAlml，0.lmol/LHCl2ml，沸水浴(IO(TC)15min，取出迅速冷卻。測定^532，計算抑制率，并以TEP為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，計算LPO的二級產(chǎn)物丙二醛的含量，即每克濕組織中過氧化脂質(zhì)的生成量(nmol/gtissue)。結(jié)果如表2:表2紫莖澤蘭多糖對小鼠肝組織過氧化脂質(zhì)(LPO)抑制活性質(zhì)量濃度LPO士S.D.抑制率<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>上述體外抗氧化活性測定結(jié)果表明，紫莖澤蘭多糖具有極其顯著的抗氧化活性，其抗氧化能力與陽性對照BHT相當(dāng)。紫莖澤蘭多糖可用于制備動物(包括人)用抗氧化藥物；也可用于制備食品或飼料用抗氧化劑。3.免疫實驗研究取新鮮分離的小鼠脾淋巴細(xì)胞，調(diào)整濃度為lxl0y/ml，取96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，每孔加入細(xì)胞懸液100uL/孔，再根據(jù)實驗設(shè)計加入刺激劑ConA100ul/孔和樣品100ul/孔，每個樣品設(shè)3個平行孔，并設(shè)有對照孔(僅加RPMT1640)，每孔總體積為200ul。然后將培養(yǎng)板置于5%0)2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48小時，取出培養(yǎng)板，每孔吸棄100ul，各孔加入5mg/mlMTT10ul，繼續(xù)培養(yǎng)4小時，取出培養(yǎng)板，各孔加入l(mSDS裂解液100ul，放置培養(yǎng)箱中過夜，于酶聯(lián)免疫儀上測570nm處的OD值。實驗結(jié)果見表3:表3.紫莖澤蘭多糖免疫實驗<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>上述實驗結(jié)果表明，本發(fā)明的紫莖澤蘭多糖在各種劑量下，具有顯著的免疫調(diào)節(jié)活性。四.具體實施例方式本發(fā)明通過下列實施例進(jìn)行進(jìn)一步的舉例說明實施例1取紫莖澤蘭粉碎全草適量，用5倍量蒸餾水加熱回流，提取3次，每次提取時間分別為3、2、1小時，合并三次提取液，150目雙層濾布過濾，濾液在70°C下使用薄膜蒸發(fā)濃縮至原體積的1/3;攪拌下向濃縮提取液中加入5倍75Q^的乙醇，將濃縮提取液中的多糖沉淀出，收集紫莖澤蘭多糖粗沉淀物；向多糖粗沉淀物中加入蒸餾水溶解，使之充分復(fù)溶，用sevag法去蛋白，反復(fù)進(jìn)行9次，濃縮(方法同上)，濃縮液中加入5倍75%的甲醇進(jìn)行醇析沉淀，沉淀用無水乙醇、丙酮、乙醚分別洗滌，得到去蛋白后的紫莖澤蘭多糖沉淀物；將多糖沉淀溶于水，分別用清水和二次蒸餾水透析，得到多糖分子量在3000—130000道爾頓之間的紫莖澤蘭多糖精制液。該紫莖澤蘭多糖精制液可以進(jìn)一步制備為各種藥學(xué)上可接受的組合物及各種劑型。如果需要，得到的紫莖澤蘭多糖精制液還可以進(jìn)一步醇沉精制，方法為在攪拌下再加入5倍75%的乙醇，靜置析出沉淀，沉淀經(jīng)冷凍干燥得紫莖澤蘭多糖固體。所得紫莖澤蘭多糖顏色為淡棕色，總糖含量為90%。實施例2取紫莖澤蘭粉碎全草適量，用20倍量蒸餾水加熱回流，提取4次，每次提取時間分別為3、2、1小時，合并三次提取液，100目雙層濾布過濾，濾液在50°C下使用薄膜蒸發(fā)濃縮至原體積的1/5;攪拌下向濃縮提取液中加入2倍95%的乙醇，將濃縮提取液中的多糖沉淀出，收集紫莖澤蘭多糖粗沉淀物；向多糖粗沉淀物中加入蒸餾水溶解，使之充分復(fù)溶，用sevag法去蛋白，反復(fù)進(jìn)行3次，濃縮(方法同上)，濃縮液中加入3倍85%的甲醇進(jìn)行醇析沉淀，沉淀用無水乙醇、丙酮、乙醚分別洗滌，得到去蛋白后的紫莖澤蘭多糖沉淀物；將多糖沉淀溶于水，加熱至70°C溶解，趁熱濾出不溶物，濾液經(jīng)超濾精制，得到多糖平均分子量為3000—80000的紫莖澤蘭多糖精制液。該紫莖澤蘭多糖精制液可以進(jìn)一歩制備為各種藥學(xué)上可接受的組合物及各種劑型。如果需要，得到的紫莖澤蘭多糖精制液還可以進(jìn)一歩醇沉精制，方法為在攪拌下再加入3倍90%的丙醇，靜置析出沉淀，沉淀經(jīng)加熱干燥得紫莖澤蘭多糖固體。所得紫莖澤蘭多糖顏色為淡棕色，總糖含量為77%。實施例3取紫莖澤蘭粉碎全草適量，用5倍量蒸餾水浸泡2h，在微波功率為600W，料液重量比為1:5，微波提取時間2min的處理條件下，用微波1次提取后將殘碴加相同體積水再浸泡lh，然后微波2次提取；合并2次提取液，150目雙層濾布過濾，濾液在7(TC下使用減壓濃縮至原體積的1/3;攪拌下向濃縮提取液中加入5倍75%的乙醇，將濃縮提取液中的多糖沉淀出，收集紫莖澤蘭多糖粗沉淀物；向多糖粗沉淀物中加入蒸餾水溶解，使之充分復(fù)溶，用sevag法去蛋白，反復(fù)進(jìn)行9次，濃縮(方法同上)，濃縮液中加入5倍75%的甲醇進(jìn)行醇析沉淀，沉淀用無水乙醇、丙酮、乙醚分別洗滌，得到去蛋白后的紫莖澤蘭多糖沉淀物；將多糖沉淀溶于水，分別用清水和二次蒸餾水透析，得到多糖分子量為3000—130000的紫莖澤蘭多糖精制液。該紫莖澤蘭多糖精制液可以進(jìn)一步制備為各種藥學(xué)上可接受的組合物及各種劑型。如果需要，得到的紫莖澤蘭多糖精制液還可以進(jìn)一步醇沉精制，方法為在攪拌下再加入5倍75%的乙醇，靜置析出沉淀，沉淀經(jīng)冷凍干燥得紫莖澤蘭多糖固體。所得紫莖澤蘭多糖顏色為淡棕色，總糖含量為95%。實施例4取紫莖澤蘭粉碎全草適量，用20倍量蒸餾水浸泡0.5h，在微波功率為300W，料液重量比為l:20，微波提取時間10min的處理條件下，用微波l次提取后將殘碴加相同體積水再浸泡lh，然后微波2次提取；合并2次提取液，IOO目雙層濾布過濾，濾液在5(TC下使用薄膜蒸發(fā)濃縮至原體積的1/5;攪拌下向濃縮提取液中加入2倍95%的乙醇，將濃縮提取液中的多糖沉淀出，收集紫莖澤蘭多糖粗沉淀物；向多糖粗沉淀物中加入蒸餾水溶解，使之充分復(fù)溶，用sevag法去蛋白，反復(fù)進(jìn)行5次，濃縮(方法同上)，濃縮液中加入4倍90%的甲醇進(jìn)行醇析沉淀，沉淀用無水乙醇、丙酮、乙醚分別洗滌，得到去蛋白后的紫莖澤蘭多糖沉淀物；將多糖沉淀溶于水，加熱至70°C溶解，趁熱濾出不溶物，濾液經(jīng)超濾精制，得到多糖平均分子量為3000—80000的紫莖澤蘭多糖精制液。該紫莖澤蘭多糖精制液可以進(jìn)一步制備為各種藥學(xué)上可接受的組合物及各種劑型。如果需要，得到的紫莖澤蘭多糖精制液還可以進(jìn)一步醇沉精制，方法為在攪拌下再加入3倍90%的丙醇，靜置析出沉淀，沉淀經(jīng)加熱干燥得紫莖澤蘭多糖固體。所得紫莖澤蘭多糖顏色為淡棕色，總糖含量為83%。實施例5取紫莖澤蘭粉碎全草適量，用20倍量蒸餾水浸泡lh，在微波功率為800W，料液重量比為l:20，微波提取時間10min的處理條件下，用微波l次提取后將殘碴加相同體積水再浸泡lh，然后微波2次提?。缓喜?次提取液，100目雙層濾布過濾，濾液在5(TC下使用薄膜蒸發(fā)濃縮至原體積的1/5;攪拌下向濃縮提取液中加入2倍95%的乙醇，將濃縮提取液中的多糖沉淀出，收集紫莖澤蘭多糖粗沉淀物；將多糖沉淀溶于水，加熱至70°C溶解，趁熱濾出不溶物，濾液經(jīng)超濾精制，得到多糖分子量為3000—130000的紫莖澤蘭多糖精制液。該紫莖澤蘭多糖精制液可以進(jìn)一步制備為各種藥學(xué)上可接受的組合物及各種劑型。如果需要，得到的紫莖澤蘭多糖精制液還可以進(jìn)一步醇沉精制，方法為在攪拌下再加入3倍90%的丙醇，靜置析出沉淀，沉淀經(jīng)加熱干燥得紫莖澤蘭多糖固體。所得紫莖澤蘭多糖顏色為淡棕色，總糖含量為60%。實施例6取紫莖澤蘭多糖1000g，粉碎，過篩，裝膠囊，即得膠囊劑.實施例7取紫莖澤蘭多糖250g，加水200ml，加熱至溶，成稠浸膏，加入蔗糖750g，制粒，干燥，分裝，即得顆粒劑。實施例8取紫莖澤蘭多糖1000g，加入注射用水1500ml，溶解，過濾，濾液灌裝，即得口服液。實施例9取紫莖澤蘭多糖1000g，粉碎，加入10g硬脂酸鎂，混合，壓片，包薄膜衣，干燥，即得片劑。實施例10取紫莖澤蘭多糖500g，加入注射用水1000ml，70°C加熱溶解，加入10g活性碳，保溫30分鐘，過濾，灌裝，100°C流通蒸汽滅菌15分鐘，即得注射劑。實施例ll取藏紫莖澤蘭多糖30g，粉碎，加入500g蔗糖粉、100g羧甲基纖維素鈉、100g微晶纖維素混合均勻，分裝成袋即得粉劑。本發(fā)明紫莖澤蘭多糖測定方法及穩(wěn)定性實驗例如下1.本發(fā)明實施例1一5的紫莖澤蘭多糖lml濃度10%的溶液，加苯酚一硫酸試劑呈桔紅色，加蔥酸試劑呈藍(lán)綠色，說明制備得到的為多糖。2.穩(wěn)定性實驗采用留樣觀察法，將濃度為10%,50%，80%的樣品分別貯藏于3—5°C、20—25i:、33—37。C的恒溫箱中，隔月取樣觀察，l年內(nèi)外觀色澤無變化，無沉淀物。3.總糖量的測定方法精密稱取D—葡萄糖0.20g于250ml容量瓶中，加蒸餾水稀釋至刻度，為標(biāo)準(zhǔn)品溶液。精密吸取標(biāo)準(zhǔn)品溶液0.5、1、2、3、4、5ml，加蒸餾水稀釋至25ml，得不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。精密吸取標(biāo)準(zhǔn)品溶液2ml，加5%的苯酚水溶液lml,緩緩加入濃硫酸5ml，搖勻，放冷至室溫，以lmls^的苯酚水溶液為空白，在490nm下測定吸收度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。然后取多糖樣品，按標(biāo)準(zhǔn)液配制的方法配制成樣品液，同法操作，測定吸收度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線計算其總糖含量。本發(fā)明利用凝膠滲透色譜法(GPC)測定實施例1一5的紫莖澤蘭多糖分子量，方法如下色譜條件TSKG-5000PWXL凝膠柱，TSKG—3000PWxL凝膠柱；流動相為O.02mol/LKH2P04溶液，PH6.0;流速O.6ml/min:柱溫40"C:進(jìn)樣20ul:標(biāo)樣為己知分子量的葡聚糖標(biāo)準(zhǔn)品(Dextran，Sigma公司)；檢測器為Waters2410示差折光檢測器。測定方法將已知分子量的葡聚糖標(biāo)準(zhǔn)品分別用流動相配制成l.0mg/ml的溶液，進(jìn)樣量為20ul，記錄色譜圖，用BreezeGPC軟件以標(biāo)準(zhǔn)葡聚糖分子量的對數(shù)logMw對洗脫體積ElutionVol咖e進(jìn)行回歸處理。將多糖樣品用流動相配制成1.0mg/ml的溶液，進(jìn)樣20ul，測得多糖樣品的保留時間，利用標(biāo)準(zhǔn)曲線求得多糖分子量。權(quán)利要求1.一種紫莖澤蘭多糖提取物，由紫莖澤蘭原料提取得到，其特征在于所述的多糖提取物中，總糖含量為60一95wt％，多糖分子量在3000一130000道爾頓之間，呈固態(tài)淺棕色，所述紫莖澤蘭原料為紫莖澤蘭全草粉碎物。2.根據(jù)權(quán)利要求l所述的紫莖澤蘭多糖提取物，其特征在于，多糖平均分子量為3—8萬。3.含有權(quán)利要求1或2所述紫莖澤蘭多糖提取物的藥物組合物，其特征在于所述的紫莖澤蘭多糖提取物輔以藥學(xué)上可接受的輔料，其中紫莖澤蘭多糖提取物的含量為1一90wt%。4.權(quán)利要求1所述紫莖澤蘭多糖提取物的制備方法，其特征在于采用方法A進(jìn)行制備(1)將紫莖澤蘭原料水煮，將水煮液進(jìn)行濃縮，得濃縮粗提取液，加入醇沉淀，收集紫莖澤蘭多糖粗沉淀物，其中所述水煮是將紫莖澤蘭在蒸餾水中煎煮；加入5—20倍紫莖澤蘭重量的蒸餾水；煎煮在沸騰下進(jìn)行，煎煮提取1-4次至有效成分充分提取出來，每次1一5小時；(2)將紫莖澤蘭多糖粗沉淀物用水溶解，再用sevag法除去游離的蛋白質(zhì)，該除去游離蛋白質(zhì)的過程反復(fù)進(jìn)行3-9次，濃縮，醇析沉淀，沉淀物用無水乙醇、丙酮、乙醚分別洗滌，得到去蛋白質(zhì)后的紫莖澤蘭多糖沉淀物；(3)去蛋白質(zhì)后的紫莖澤蘭多糖沉淀物經(jīng)透析或超濾的方法分離，去除小分子雜質(zhì)，得到多糖分子量在3000—130000道爾頓之間的紫莖澤蘭多糖精制提取液，濃縮，加入醇沉淀，收集精制沉淀物；(4)紫莖澤蘭多糖精制沉淀物經(jīng)干燥得到紫莖澤蘭多糖精制提取物；所述的醇為甲醇、乙醇或丙醇。5.權(quán)利要求1所述紫莖澤蘭多糖提取物的制備方法，其特征在于采用方法B進(jìn)行制備(1)將紫莖澤蘭原料加水浸泡0.5-2h后微波提取2次，提取液濃縮，得濃縮粗提取液，加入醇沉淀，收集紫莖澤蘭多糖粗沉淀物；(2)紫莖澤蘭多糖粗沉淀物用水溶解，再用sevag法除去游離的蛋白質(zhì)，該除去游離蛋白質(zhì)的過程反復(fù)進(jìn)行3-9次，濃縮，醇析沉淀，沉淀物用無水乙醇、丙酮、乙醚分別洗滌，得到去蛋白質(zhì)后的紫莖澤蘭多糖沉淀物；(3)去蛋白質(zhì)后的紫莖澤蘭多糖沉淀物經(jīng)透析或超濾的方法分離，去除小分子雜質(zhì)，得到多糖分子量在3000—130000道爾頓之間的紫莖澤蘭多糖精制提取液，濃縮，加入醇沉淀，收集精制沉淀物；(4)紫莖澤蘭多糖精制沉淀物經(jīng)干燥得到紫莖澤蘭多糖精制提取物；所述的醇為甲醇、乙醇或丙醇。6.權(quán)利要求1所述紫莖澤蘭多糖提取物的制備方法，其特征在于采用方法C進(jìn)行制備(l)將紫莖澤蘭原料加水浸泡0.5-2h后微波2次提取、提取液濃縮，得濃縮粗提取液，加入醇沉淀，收集紫莖澤蘭多糖粗沉淀物，所述紫莖澤蘭原料為紫莖澤蘭全草粉碎物；(2)紫莖澤蘭多糖沉淀物經(jīng)透析或超濾的方法分離，去除小分子雜質(zhì)，得到多糖分子量在3000—130000道爾頓之間的紫莖澤蘭多糖精制提取液，濃縮，加入醇沉淀，收集精制沉淀物；(3)紫莖澤蘭多糖精制沉淀物經(jīng)干燥得到紫莖澤蘭多糖精制提取物；所述的醇為甲醇、乙醇或丙醇。7.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述紫莖澤蘭多糖提取物的制備方法，其特征在于所述方法A(2)和B(2)中用sevag法除去蛋白質(zhì)，其具體方法為將由氯仿和正丁醇按體積比5:1構(gòu)成的Sevag試劑與多糖溶液按1:5的體積比加入，加入試劑后震蕩20—30分鐘，使試劑與溶液充分混合，離心后去除交界處沉淀的蛋白，如此反復(fù)3-9次。8.根據(jù)權(quán)利要求4至6任一所述的紫莖澤蘭多糖提取物的制備方法，其特征在于所述方法A和B及C中醇析沉淀使用的醇為75%—95%的醇，醇的用量為濃縮液的2—5倍體積量；所述方法A和B及C中的濃縮為將提取液濃縮至原體積的1/2—1/5，濃縮采用加熱濃縮、減壓濃縮或薄膜蒸發(fā)濃縮；所述方法A(3)和B(3)及C(2)中多糖沉淀物經(jīng)透析或超濾的方法分離，去除小分子雜質(zhì)，所述的透析使用自來水或去離子水；所述干燥為加熱干燥、冷凍干燥或噴霧干燥。9.權(quán)利要求1或2所述的紫莖澤蘭多糖提取物或權(quán)利要求3所述的含有紫莖澤蘭多糖提取物的藥物組合物在制備促進(jìn)免疫功能或抗氧化作用的保健品、食品或藥物的用途。10.權(quán)利要求1或2所述的紫莖澤蘭多糖提取物或權(quán)利要求3所述的含有紫莖澤蘭多糖提取物的藥物組合物在制備促進(jìn)免疫功能、抗氧化的飼料添加劑或詞養(yǎng)動物的保健品或藥物的用途。全文摘要本發(fā)明提供一種由紫莖澤蘭植物中提取的紫莖澤蘭多糖、其制備方法、含有紫莖澤蘭多糖的藥物制劑及其在制備促進(jìn)免疫功能、抗氧化作用的保健品、食品、飼料添加劑或藥物的用途。本發(fā)明提供的紫莖澤蘭多糖、紫莖澤蘭多糖藥物組合物的制備方法簡單、有效、適于工業(yè)化生產(chǎn)，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定、易于控制。本發(fā)明利用紫莖澤蘭提取活性多糖，拓寬了紫莖澤蘭天然產(chǎn)物的開發(fā)利用途徑，為紫莖澤蘭的資源化提供一種有效利用的方法，有利于提高紫莖澤蘭綜合利用的經(jīng)濟(jì)價值。文檔編號A61P39/00GK101423558SQ20081014789公開日2009年5月6日申請日期2008年12月17日優(yōu)先權(quán)日2008年12月17日發(fā)明者皮寧寧,蘇東海,蘇文濤,平高申請人:四川大學(xué)