專利名稱：：一種中藥組合物在制備治療慢性心功能不全的藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及芪參益氣滴丸在制備預(yù)防和治療慢性心功能不全的藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：心功能不全又稱充血性心力衰竭(簡(jiǎn)稱心力衰竭或心衰)，是指靜脈回流正常的情況下，由于原發(fā)的心臟損害或者心室長(zhǎng)期壓力或容量負(fù)荷過(guò)重引起的左心排血量減少和心室充盈壓升高，臨床上以組織血液灌注不足以及肺循環(huán)和(或)體循環(huán)瘀血為主要特征的一種臨床綜合征，表現(xiàn)為心悸怔仲、氣短乏力、呼吸困難、肢體水腫、肝臟腫痛等。慢性心功能不全幾乎是所有器質(zhì)性心臟病患者的最終歸宿，該病臨床發(fā)病率高，是重點(diǎn)研究的醫(yī)學(xué)難題之一。心功能不全的治療，西醫(yī)常用的藥物包括利尿劑、血管擴(kuò)張劑、強(qiáng)心劑、洋地黃、非樣地黃類正性肌力藥物、轉(zhuǎn)換酶抑制劑、(3受體阻止劑等，但都有不同程度的副作用或使用禁忌；常用的中成藥主要為參附注射液、參脈注射液等，但療效不甚理想，且出現(xiàn)不同程度的不良反應(yīng)。芪參益氣滴丸由黃芪、丹參、三七和降香組成，由天津天士力制藥股份有限公司生產(chǎn)，用以治療氣虛血瘀型冠心病心絞痛，療效顯著，無(wú)任何明顯的毒副作用。中國(guó)專利申請(qǐng)CN1375316A公開(kāi)了該制劑的組成、制法以及在冠心病心絞痛方面的用途，中國(guó)專利申請(qǐng)CN200510013503.3A、CN200510013504.8、CN200510013505.2、CN200510013506.7、CN200510013507.1分別公開(kāi)了該組合物在制備防治老年癡呆藥物、制備抑制白蛋白外漏藥物、制備抑制肥大細(xì)胞脫顆粒藥物中的應(yīng)用、制備防治高原缺氧藥物中的應(yīng)用、制備治療急性胰腺炎藥物中的應(yīng)用，但該藥在防治慢性心功能不全方面的作用尚未見(jiàn)報(bào)道。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種中藥組合物在制備治療慢性心功能不全的藥物中的用途，該組合物由下列重量百分比的原料藥制備而成黃芪22.2%66.8%，丹參11.6%33.4%，三七2.5%13.5%，降香14.5%44.3%。本發(fā)明所述的中藥組合物，可以改善慢性心功能不全者左心室收縮功能，增加慢性心功能不全者的左室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)和短軸縮短率(FS)，改善慢性心功能不全者的能量代謝，表現(xiàn)為ATP升高，ATP/ADP比值升高，能合(energycharge,EC)升高。本發(fā)明所述的中藥組合物，其優(yōu)選的配比為黃芪30.8%57.2%,丹參15.4%28.6%，三七3.5%6.5%，降香20.6%38.2%;其最佳配比為黃度44.7%、丹參26.7%、三七6.3%、降香22.3%;或者為黃疾41.2%、丹參23.8%、三七4.5%、降香30.5%。本發(fā)明的中藥組合物，可以分別對(duì)原料藥按照常規(guī)的方法或者現(xiàn)有技術(shù)的方法進(jìn)行提取制備，然后混合而成，優(yōu)選地，按照下述方法制備取經(jīng)粉碎的丹參、三七藥材，水煎煮，濾過(guò)，濾液適當(dāng)濃縮后醇沉，上清液回收乙醇，濃縮成浸膏，即丹參三七浸膏；另取經(jīng)粉碎的黃芪藥材，水煎煮，濾過(guò)，濾液適當(dāng)濃縮后醇沉，上清液適當(dāng)濃縮后再醇沉，上清液回收乙醇，濃縮成浸膏，即黃芪浸膏；再取降香藥材，加水，回流提取，收集揮發(fā)油。將以上兩種浸膏及揮發(fā)油和輔料混和均勻后，制成制劑任何一種藥劑學(xué)上所說(shuō)的劑型，其中優(yōu)選劑型為滴丸劑。例如，滴丸劑制法取上述丹參三七浸膏、黃芪浸膏及浸膏總重量25倍的聚乙二醇-6000，水浴溶化，化勻后，加入降香揮發(fā)油，混勻，按常規(guī)制滴丸的方法進(jìn)行制備，即得；照常規(guī)片劑方法可制成片劑；等等。為了更好的理解本發(fā)明，下面通過(guò)本發(fā)明的中藥組合物(以下稱"芪參益氣滴丸浸膏")對(duì)慢性心功能不全大鼠的影響，并行超生心動(dòng)圖檢查測(cè)定左室射血分?jǐn)?shù)(EF)和短軸縮短率(FS)，心肌組織勻漿測(cè)定ATP、ADP、AMP，說(shuō)明芪參益氣滴丸在治療慢性心功能不全中的作用。試驗(yàn)?zāi)康挠^察喪參益氣滴丸對(duì)于慢性心功能不全大鼠的治療作用。材料及方法1，動(dòng)物SD大鼠，雄性，清潔級(jí)，購(gòu)自上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司，合格證號(hào)0016807、00172992，受試藥物(1)疾參益氣滴丸浸膏按照實(shí)施例l的方法制備，每l克浸膏含14.3g生藥，小鼠實(shí)驗(yàn)LDs。為25.807g/kg，折算為大鼠LD5',為:18.0649g/kg，人臨床使用劑量為6.25mg/kg，黃芪浸膏丹參三七浸膏降香揮發(fā)油=1:1:0.0735。去離子水溶解。(2)萬(wàn)爽力(能量代謝調(diào)節(jié)劑，VAS0REL，Trimetazidinedihydrochloride):由法國(guó)施維雅藥廠提供(SERVIER，F(xiàn)rance),每粒20mg，產(chǎn)品批號(hào)(Batch):5J4515。去離子水溶解。(3)雅施達(dá)(腎素-血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑，ACERTIL，Perindopriltablets):由由法國(guó)施維雅藥廠提供(SERVIER，F(xiàn)rance),每粒4mg，產(chǎn)品批號(hào)(Batch):5K0401。去離子水溶解。受試藥物給藥途徑均胃飼，每鼠每天lml。3，試劑及溶液(1)異丙腎上腺素(Sigma,DL-Isoproterenolhydrochloride):No:15627-25G，055kl021用生理鹽水溶解，皮下注射用。(2)肝素鈉注射液(中國(guó)江蘇常州千紅生化制藥有限公司)產(chǎn)品批號(hào)051229，2ml:12500單位，用生理鹽水稀釋，500單位/ml。(3)水合氯醛溶液(江蘇省中醫(yī)院，蘇藥制字H04001110):產(chǎn)品批號(hào)060412，用生理鹽水稀釋為7.5%待用。4，實(shí)驗(yàn)儀器及設(shè)備(1)常規(guī)設(shè)備Ph213微處理pH計(jì)(HANNA)、WS-1磁力攪拌器、大鼠灌胃針、剪刀、鑷子、血管夾、紗布等(2)超聲心動(dòng)圖機(jī)GE公司VIVID7型5,實(shí)驗(yàn)造模除正常對(duì)照組大鼠外，模型組及治療組大鼠在正常飼養(yǎng)3-7天后開(kāi)始進(jìn)行造模，方法如下第1天皮下注射異丙腎(ISO)20mg/Kg,第2天皮下注射異丙腎(ISO)10呢/Kg，第3天ISO5mg/Kg，第4-12天ISO3mg/Kg。6,實(shí)驗(yàn)分組SD大鼠142只，體重201.86±6.68g，隨機(jī)分為兩組正常組(n=18)及模型組(n=124)。實(shí)驗(yàn)第一天始模型組大鼠給予ISO皮下注射造模，方法同上，一個(gè)月后，檢測(cè)部分大鼠超聲，隨機(jī)將部分存活模型組大鼠分為芪參益氣高劑量組(n=16)、芪參益氣中劑量組(『16)、芪參益氣低劑量組(n=16)、萬(wàn)爽力組(n=15)及雅施達(dá)組(n=15)剩余模型組(n=16)，芪參益氣高、中、低劑量組大鼠分別每鼠每天灌胃芪參益氣浸膏78.125mg/kg、39.063mg/kg及19.531mg/kg，萬(wàn)爽力組大鼠每鼠每天灌胃萬(wàn)爽力10mg/kg,雅施達(dá)組大鼠每鼠每天灌胃0.417mg/kg。治療持續(xù)4周，每天一次，治療4周后每組處死6-IO只大鼠，余SD大鼠持續(xù)治療，第6周處死。7，觀察指標(biāo)(1)大鼠一般情況活動(dòng)度、體重、死亡數(shù)等。(2)大鼠超聲指標(biāo)實(shí)驗(yàn)結(jié)束前大鼠水合氯醛麻醉，行二維超聲記錄左室射血分?jǐn)?shù)(EF)和短軸縮短率(FS)。(3)心肌組織勻漿測(cè)定ATP、ADP、細(xì)P。標(biāo)本處理A.ATP測(cè)定a)試劑準(zhǔn)備三乙醇胺緩沖液(50腿ol/L):pH7.2;NADP10誦o1/1;MgCl20.1mol/l;葡萄糖0.5mol/l;酶緩沖液G6P-DH(80U/ml):HK(100U/ml)=l:1ATP標(biāo)準(zhǔn)品100umol/1;200umol/1;400ymol/1.空白緩沖液TEA:NADP:MgCl"葡萄糖=7:1:1:1反應(yīng)緩沖液為每毫升空白緩沖液加20u1的l隱ol/lATPb)實(shí)驗(yàn)步驟空白管反應(yīng)管樣本200ul中和的高氯酸200ul空白緩沖液1000ul反應(yīng)緩沖液1000酶緩沖液20ill20yl加酶混勻并放回冰浴中，全部加完后一起放入37度水裕中，20min后在波長(zhǎng)339nm處比色，以空氣調(diào)零，記空白管為A。，反應(yīng)管為A。AA=A-A。AA與ATP的濃度成正比。B.ADP/AMPa)試劑準(zhǔn)備三乙醇胺緩沖液(50隱ol/L):PH8.0;PEP/MgS04/KCl(PEP14國(guó)o1/1，MgSO40.5mol/l，KC11.8mol/l);NADH(16隱o1/1);LDH2500U/ml;PK2000U/ml;MKlOOU/ml.反應(yīng)緩沖液TEA(600ul)+PEP/MgSOyKCl(120u1)+NADH(35ul)十LDH(20ul)標(biāo)準(zhǔn)品配置AMP200Umol/1300iimol/1400ymol/1AMP標(biāo)準(zhǔn)品中應(yīng)含有相同濃度的ATPADP100ymol/1150umol/1200timol/1b)實(shí)驗(yàn)步驟空白管反應(yīng)管樣本600u1中和的高氯酸600Hi反應(yīng)緩沖液600y1600n1混勻5min339nm處讀數(shù)記AlPK20li120u1混勻20niin339nm處讀數(shù)記A2MK100ul100Pi混勻20min339nm處讀數(shù)記A3aa鮮=aa△aaa^與樣本中adp濃度成正比A州p-ZXA樣本(A:i-A2)空白(A3-A2)AA，與樣本中AMP濃度成正比7、數(shù)據(jù)分析及統(tǒng)計(jì)以均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差表示計(jì)量資料，計(jì)量資料多組比較采用ANOVA分析，組間兩兩比較采用S-N-K檢驗(yàn)；兩組均數(shù)比較采用T檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用卡方檢驗(yàn)。所有統(tǒng)計(jì)利用SPSS12.0軟件分析完成，P〈0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)果(1)一般情況、體重及死亡率比較異丙腎造模后死亡數(shù)及體重與正常組相比見(jiàn)表1，異丙腎造模型后大鼠死亡數(shù)顯著高于正常組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，造模第28天后體重較正常組減輕。造模30天后進(jìn)行藥物治療，各治療組死亡數(shù)及體重比較見(jiàn)表2。治療期間僅1只模型組大鼠死亡，各組間體重?zé)o明顯變化。表l治療前正常組、模型組死亡率、體重比較結(jié)果(體重單位g)分組n歹E亡數(shù)9d-BW23d-BW30d-BW正常組180288.00±6.78(12)406.10±14.91(10)453.56±15.90(18)模型組12426(20.97%)*277.00±17.80(12)378.20±20.55(10)*429.41±27.17*(97)經(jīng)檢驗(yàn)，正常組與模型組大鼠死亡數(shù)P-O.044(PearsonChi-sqL1are=4.620);*與正常組相比，P<0.05表2治療后各組死亡數(shù)、體重比較(體重單位g)分組n死亡數(shù)44d-BW51d-BW58d-BW68d_BW正常組160462.81±19.92492.31±20.25502.00±16.05511.50±11.95模型組161441.25±37.46469.63±39.71484.40±40.47504.83±63.40錢高160448.75±22.60479.25±26.16510.75±25.95506.30±31.22芪參中160459.56±24.07487.44±23.09510.56±27.05艦.78±31.46<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>(2)大鼠超聲心動(dòng)圖比較結(jié)果異丙腎造模后30天模型組與正常組各取8只大鼠行超聲心動(dòng)圖檢測(cè)，結(jié)果見(jiàn)表3，模型組EF和FS明顯低于正常組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。造模30天后進(jìn)行藥物治療。表3治療前(實(shí)驗(yàn)30天)正常組與模型組超聲心動(dòng)圖比較<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>*與正常組相比，P〈0.05;治療4周和6周后，分別取每組大鼠4-6只行超聲心動(dòng)圖檢測(cè)，各組超聲心動(dòng)圖比較見(jiàn)表4。結(jié)果提示模型組及各藥物治療組EF、FS均低于正常組，各藥物治療組FS均高于模型組。芪參益氣高劑量組、萬(wàn)爽力組EF高于模型組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。芪參益氣高劑量組EF高于雅施達(dá)組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。表4治療6周后各組大鼠超聲心動(dòng)圖比較<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>*與正常組相比，P〈0.05;S與模型組相比，P〈0.05;$與芪參高劑量組相比，P〈0.05;&與芪參中劑量組相比，P〈0.05;%與芪參低劑量相比，P〈0.05;@與萬(wàn)爽力組相比，P<0.05(4)大鼠心肌高能磷酸化合物含量比較治療6周各組大鼠心肌高能磷酸化合物含量見(jiàn)表5。表5治療6周大鼠心肌高能磷酸化合物含量<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>*與正常組相比，P〈0.05;tt與模型組相比,P〈0.05;$與芪參高劑量組相比，P〈0.05;&與芪參中劑量組相比，P〈0，05;%與芪參低劑量相比，P〈0.05;@與萬(wàn)爽力組相比，P<0.05結(jié)果1.異丙腎上腺素持續(xù)皮下注射可造成大鼠病理呈現(xiàn)心臟間質(zhì)呈纖維化、鈣化、結(jié)締組織增生、正常心肌細(xì)胞呈島狀，心肌纖維排列紊亂，部分伴有炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，超聲心動(dòng)圖示LVd、LVs、EDV、ESV明顯增高，EF、FS、IVS、LVPW明顯降低，類似慢性心功能不全改變。2.芪參益氣浸膏治療SD心衰大鼠6周，能提高心衰大鼠心功能LVEF和FS。3.疾參益氣浸膏治療能改善慢性心衰大鼠的能量代謝，結(jié)果變化與臨床常用西藥萬(wàn)爽力、雅施達(dá)相似。綜上，可以看出芪參益氣浸膏可以增加心衰大鼠心功能LVEF和FS，改善慢性心功能不全大鼠的左室收縮能力，改善慢性心衰大鼠的能量代謝。具體實(shí)施方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的藥物做進(jìn)一步說(shuō)明，下述各實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明而并非對(duì)本發(fā)明的限制。實(shí)施例一取黃芪86.5g、丹參21.3g、三七3.5g、降香20.6g、輔料聚乙二醇-600030g。將經(jīng)粉碎的丹參、三七，水煎煮2次，每次加7倍量水，每次2小時(shí)，合并煎煮液，濾過(guò)，濾液濃縮至900ml，加入95%乙醇，使醇濃度達(dá)到70%，靜置1224小時(shí)，濾過(guò)，回收乙醇，濃縮成相對(duì)密度為1.321.38(506(TC)的浸膏；將經(jīng)粉碎的黃芪，加水煎煮2次，每次加6倍量水，依次提取2小時(shí)、1小時(shí)，合并濾液，濃縮至1500ml左右時(shí)，加95%乙醇使醇濃度為60%，靜置1224小時(shí)，濾過(guò)，濾液回收乙醇，濃縮至400ml左右時(shí)，加95%乙醇使醇濃度為80%，靜置1224小時(shí)，濾過(guò)，濾液回收乙醇，濃縮成相對(duì)密度為1.321.38(5060°C)的浸膏；取降香，加5倍量水，回流提取5小時(shí)，收集揮發(fā)油；取上述丹參三七浸膏、黃芪浸膏，加入降香揮發(fā)油，混勻。實(shí)施例二取實(shí)施例一的丹參三七浸膏、黃芪浸膏及聚乙二醇-6000，水浴溶化，化勻后，加入降香揮發(fā)油，混勻，移至滴丸機(jī)中，制成1000粒滴丸。實(shí)施例三取黃芪40.6g、丹參44.8g、三七11.2g、例一和實(shí)施例二的方法制成1000粒滴丸。實(shí)施例四取黃芪77.3g、丹參22.8g、三七4.8g、例一和實(shí)施例二的方法制成1000粒滴丸。實(shí)施例五取黃芪42.3g、丹參39.2g、三七8.2g、例一和實(shí)施例二的方法制成1000粒滴丸。實(shí)施例六取黃芪65.2g、丹參38.9g、三七9.3g、例一和實(shí)施例二的方法制成1000粒滴丸。實(shí)施例七取黃芪56.2g、丹參32.5g、三七6.2g、例一和實(shí)施例二的方法制成1000粒滴丸。降香38.6g，輔料聚乙二醇-600030g，按實(shí)施降香30.5g、輔料聚乙二醇-600028g，按實(shí)施降香46.8g、輔料聚乙二醇-600025g,按實(shí)施降香32.5g、輔料聚乙二醇-600040g，按實(shí)施降香41.6g、輔料聚乙二醇-600022g，按實(shí)施實(shí)施例八取黃芪36.5g、丹參32.4g、三七6.2g、降香41.7g、輔料聚乙二醇-600022g，按實(shí)施例一和實(shí)施例二的方法制成1000粒滴丸。實(shí)施例九取黃芪65.6g、丹參25.8g、三七9.5g、降香46.4g,按實(shí)施例一的制備工藝制成浸膏，取清膏、蔗糖和糊精按重量比l:3:l的比例，按照常規(guī)方法制成片劑200片。實(shí)施例十取黃芪35.5g、丹參50.8g、三七16.3g、降香52.3g，按實(shí)施例一的制備工藝制成浸膏，取清膏、蔗糖和糊精按l:3:l的比例，按照常規(guī)方法制成顆粒劑125袋。實(shí)施例十一取黃芪86.5g、丹參21.3g、三七3.5g、降香20.6g，按實(shí)施例一的制備工藝制成浸膏，取清膏、蔗糖和糊精按l:3:l的比例，按照常規(guī)方法制成顆粒，按照常規(guī)方法灌制膠囊。權(quán)利要求1.一種中藥組合物在制備治療慢性心功能不全的藥物中的用途，該組合物由下列重量百分比的原料藥制備而成黃芪22.2％～66.8％，丹參11.6％～33.4％，三七2.5％～13.5％，降香14.5％～44.3％。2.如權(quán)利要求1的用途，其特征在于所述的中藥組合物能改善慢性心功能不全者左心室收縮功能。3.如權(quán)利要求2的用途，其特征在于所述的中藥組合物能增加慢性心功能不全者的左室射血分?jǐn)?shù)。4.如權(quán)利要求2的用途，其特征在于所述的中藥組合物能增加慢性心功能不全者的短軸縮短率。5.如權(quán)利要求1的用途，其特征在于所述的中藥組合物能改善慢性心功能不全者的能量代謝。6.如權(quán)利要求15的任一用途，其中所述的中藥組合物由下列重量百分比的原料藥制備而成黃芪30.8%57.2%，丹參15.4%28.6%，三七3.5%6.5%，降香20.6%38.2%。7.如權(quán)利要求6的用途，其中所述的中藥組合物由下列重量百分比的原料藥制備而成黃芪44.7%，丹參26.7%，三七6.3%，降香22.3%。8.如權(quán)利要求6的用途，其中所述的中藥組合物由下列重量百分比的原料藥制備而成黃芪41.2%，丹參23,8%，三七4.5%，降香30.5%。全文摘要本發(fā)明涉及一種中藥組合物在制備治療慢性心功能不全的藥物中的用途，該組合物由下列重量百分比的原料藥制備而成黃芪22.2％～66.8％，丹參11.6％～33.4％，三七2.5％～13.5％，降香14.5％～44.3％。文檔編號(hào)A61K36/537GK101239099SQ200710056720公開(kāi)日2008年8月13日申請(qǐng)日期2007年2月6日優(yōu)先權(quán)日2007年2月6日發(fā)明者吳迺峰申請(qǐng)人:天津天士力制藥股份有限公司