專利名稱：治療跌打損傷的藥物組合物及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及治療跌打損傷的藥物組合物，具體地，是采用天然藥材為原料制備而成的藥劑，屬于醫(yī)藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
急性傷筋是指各種暴力突然作用于人體軟組織——筋，導(dǎo)致筋結(jié)構(gòu)、形態(tài)和位置的異常變化而無骨折、脫位、皮膚破損的外傷病癥，局部出現(xiàn)瘀斑或青紫，嚴重者可致局部功能障礙。急性軟組織損傷主要是指人體皮膚、皮下組織、肌肉、關(guān)節(jié)筋絡(luò)突然遭受暴力撞擊、壓迫、牽拉、強力扭轉(zhuǎn)等原因引起的損傷。
在現(xiàn)代工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、交通、運輸、體育運動、軍事訓(xùn)練或日常生活中，急性筋傷的發(fā)病率往往很高，其病機以瘀血阻滯為主，多以局部疼痛、腫脹，甚至功能障礙為主，嚴重影響患者的工作和生活。目前，國內(nèi)市場治療急性筋傷的外用中成藥品有膏藥外貼，藥液外搽，中藥濕敷、熏、熱熨等，但真正療效優(yōu)越，作用迅速，價格公道的中成藥制劑品種卻十分有限。而化學藥品方面，多采用非甾體類抗炎藥進行鎮(zhèn)痛、解熱、抗炎治療，但卻易引起嚴重的胃腸道反應(yīng)或中樞神經(jīng)并發(fā)癥。還有用皮質(zhì)類固醇類藥物等來治療急性軟組織損傷，但總因較嚴重的副作用而不為廣大醫(yī)生和患者接受。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所解決的技術(shù)問題是提供一種治療跌打損傷的藥物組合物，制成其活性成分的原料包括下述重量配比的組分乳香2～4份、沒藥3～5份、川芎1～4份、紅花1～4份、土鱉蟲1～3份、血竭1～4份、膽南星1～4份、馬錢子1～3份加入藥學上可接受的輔料或輔助性成分制備而成的制劑。
進一步地，本發(fā)明藥物組合物，制成其活性成分的原料還包括下述重量配比的組分、當歸1～2份、防風1～4份、白芷1～4份、羌活1～2份、升麻1～4份、菖蒲1～2份、螃蟹1～2份、龍骨1～2份。
上述所述制劑為外用制劑，可以為酒劑、酊劑、搽劑、軟膏劑、噴霧劑、貼膏劑或膏劑等外用制劑。
本發(fā)明所解決的另一個技術(shù)問題是提供本發(fā)明藥物組合物的制備方法，它包括如下步驟a、稱取下述重量配比的原料乳香2～4份、沒藥3～5份、川芎1～4份、紅花1～4份、土鱉蟲1～3份、血竭1～4份、膽南星1～4份、馬錢子1～3份、當歸1～2份、防風1～4份、白芷1～4份、羌活1～2份、升麻1～4份、菖蒲1～2份、螃蟹1～2份、龍骨1～2份；b、取原料用濃度為50～80％的乙醇提取，所得提取液按照常規(guī)制藥方法，加入可接受的輔料或輔助性成分制備即得。
本發(fā)明藥物組合物以乳香、沒藥、川芎、紅花、土鱉蟲、血竭、膽南星、馬錢子為活性成分，用于治療跌打損傷時即可達到治療目的。以乳香、沒藥、川芎、紅花、土鱉蟲、血竭、膽南星、馬錢子、當歸、防風、白芷、羌活、升麻、菖蒲、螃蟹、龍骨十六味原料配伍使用時，可以達到最佳用藥配伍。本發(fā)明組合物中乳香、沒藥為君藥，乳香味辛苦性溫，功能活血化瘀，行氣散滯，又有較好的消腫止痛作用；沒藥味苦性平，亦長于活血止痛消腫；本發(fā)明藥物組合物重用乳香和沒藥，相須為君。川芎、紅花、土鱉蟲、血竭為臣藥，川芎味辛性溫，功能通達氣血，活血定痛，亦為傷科常用之品；紅花味辛性溫，功能活血化瘀，通利經(jīng)脈；土鱉蟲味咸性寒，功能破血逐瘀，續(xù)筋接骨，療傷止痛；血竭味甘咸性平，既能活血化瘀止痛，又可止血生??；以上四味，均為跌撲損傷常用之品，合以活血化瘀，消腫止痛，又兼止血之用，是為臣藥。膽南星味苦性寒，功能清熱化痰，用于本發(fā)明藥物組合物，其義有二，既可清泄瘀血可能所化之熱，又有化痰散結(jié)以助消腫之功；馬錢子味苦性寒，長于散結(jié)消腫，通絡(luò)止痛；膽南星與馬錢子共起通絡(luò)化痰、散結(jié)消腫作用，同屬寒涼之品，既可制約本發(fā)明藥物組合物中諸藥的溫燥，又可清解瘀熱，是為臣藥而兼佐藥之用。當歸味甘辛性溫，功能補血活血止痛，既可佐助化瘀消腫止痛之力，又有化瘀生新之用，屬于佐助之品。羌活味辛苦性溫，功能祛風勝濕止痛；白芷味辛性溫，功能祛風除濕，消腫止痛；防風味辛甘性微溫，功能祛風勝濕，解痙止痛；升麻味辛甘性微寒，功能升散透表，清熱解毒，羌活、白芷、防風、升麻四味，共起祛風除濕，消腫透邪之功，既可助君臣諸藥消腫止痛，又可防止外傷之后，風濕表邪乘虛客犯之虞，亦屬佐藥。菖蒲味辛性溫，功能化濕寧神，化濕有助于消腫，寧神有助于止痛；螃蟹味辛甘性溫，功能補腎、利尿、舒筋，用于腎病，水腫，小便不利，小腿肌肉轉(zhuǎn)筋等，螃蟹用于本發(fā)明藥物組合物，意在利水舒筋，有助于祛濕消腫，以促進筋肉和柔活利而恢復(fù)功能；龍骨味甘澀微寒，功能鎮(zhèn)靜安神，收斂固澀，既可以安神寧心而除煩，又可以制約升散溫燥諸藥之太過。菖蒲、螃蟹、龍骨三味，亦為佐藥。制備本發(fā)明藥物組合物采用50～80％的乙醇或高度白酒(約50～80％)浸泡或提取，酒性辛溫升散，有活血舒筋之功，又可助諸藥布散患部組織，是為使藥。
綜上，本發(fā)明藥物組合物以乳香、沒藥、川芎、紅花、土鱉蟲、血竭、膽南星、馬錢子、當歸、防風、白芷、羌活、升麻、菖蒲、螃蟹、龍骨十六味原料配伍使用時，以活血化瘀為主，消腫止痛、通絡(luò)散結(jié)為輔，兼顧祛濕透表，清熱寧神之功。針對急性傷筋所致的瘀血阻滯病機，確屬合拍之方，療效顯著，止痛、消腫時間短，關(guān)節(jié)功能恢復(fù)優(yōu)良，適用于各類外傷所致的急性傷筋(癥見局部腫脹、出現(xiàn)瘀斑或青紫、疼痛劇烈、功能障礙等)以及急性軟組織損傷而見上述主治證侯者，為臨床治療跌打損傷提供了新的選擇。
具體實施例方式
本發(fā)明提供了一種治療跌打損傷的藥物組合物，制成其活性成分的原料包括下述重量配比的組分乳香2～4份、沒藥3～5份、川芎1～4份、紅花1～4份、土鱉蟲1～3份、血竭1～4份、膽南星1～4份、馬錢子1～3份。
進一步優(yōu)選，制成其活性成分的原料包括下述重量配比的組分乳香2.5份、沒藥3.2份、川芎1.6份、紅花1.6份、土鱉蟲1.3份、血竭1.6份、膽南星1.6份、馬錢子1.3份。
進一步優(yōu)選，在上述原料的基礎(chǔ)上再添加下述重量配比的組分當歸1～2份、防風1～4份、白芷1～4份、羌活1～2份、升麻1～4份、菖蒲1～2份、螃蟹1～2份、龍骨1～2份，輔助發(fā)揮治療跌打損傷的作用。
優(yōu)選，下述重量配比的組分當歸1份、防風1.6份、白芷1.6份、羌活1份、升麻1.6份、菖蒲1份、螃蟹1份、龍骨1份。
本發(fā)明治療跌打損傷的藥物組合物，它是以乳香、沒藥、川芎、紅花、土鱉蟲、血竭、膽南星和馬錢子為活性成分，加入藥學上可接受的輔料或輔助性成分制備而成的外用制劑。使用上述八味原料配伍治療跌打損傷時即可達到治療目的，也可以在這八味原料的基礎(chǔ)上根據(jù)臨床需要，適量加減。如本發(fā)明藥物添加當歸、防風、白芷、羌活、升麻、菖蒲、螃蟹、龍骨。
其中，所述的外用制劑可以為酒劑、酊劑、搽劑、軟膏劑、噴霧劑、貼膏劑或膏劑等外用制劑。
本發(fā)明還提供了制備本發(fā)明藥物組合物的方法，它包括如下步驟a、稱取原料；b、取原料用濃度為50～80％的乙醇提取，所得提取液按照常規(guī)制藥方法，加入可接受的輔料或輔助性成分制備即得。也可以采用高濃度白酒采用浸提的方式，制備成酒劑。
本發(fā)明還提供了本發(fā)明藥物組合物在制備治療急性傷筋或急性軟組織損傷的藥物中的作用。急性傷筋有局部腫脹、出現(xiàn)瘀斑或青紫、疼痛劇烈、功能障礙等癥狀。
通過以下藥效試驗證明本發(fā)明藥物組合物的有益效果。
1、試驗藥物與試劑本發(fā)明藥物組合物，黃褐色液體，為60％乙醇滲濾液，由申請人制劑研究室制備。4種濃度分別為0.375g(生藥)/ml、0.250g(生藥)/ml、0.125g(生藥)/ml、0.0625g(生藥)/ml。批號為000407-1，000407-2，000407-3，000407-4。
本發(fā)明藥物組合物原料用量配比均為乳香2.5份、沒藥3.2份、川芎1.6份、紅花1.6份、土鱉蟲1.3份、血竭1.6份、膽南星1.6份、馬錢子1.3份、當歸1份、防風1.6份、白芷1.6份、羌活1份、升麻1.6份、菖蒲1份、螃蟹1份、龍骨1份。根據(jù)濃度要求按照上述用量配比稱取不同重量的原料。
制備方法為上述十六味原料，除馬錢子外，其余十五味粉碎成粗粉，照流浸膏劑與浸膏劑項下的滲漉法(《中國藥典2005年版》一部附錄IO)，用60％乙醇作溶劑，浸漬48小時后，以每kg藥材1～3ml/min的流速滲漉，收集漉液946ml；馬錢子粉碎成粗粉，每次加10倍量60％乙醇回流三次，每次1小時，合并濾液，回收乙醇，濃縮至相對密度為1.05～1.15(70～80℃熱測)，用95％乙醇適量調(diào)節(jié)乙醇濃度為60％，濾過，濾液與上述滲漉液合并，靜置，濾過，用60％乙醇調(diào)至總量1000ml，分裝，即得。
正骨水由廣西玉林制藥廠生產(chǎn)，批號99121306。
醋酸氟輕松軟膏由天津藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號001463。
其余試劑均為國產(chǎn)分析純等級。
2、實驗動物昆明種小鼠由成都中醫(yī)藥大學實驗動物研究中心提供，一級，合格證號川實動管第7號。SD大鼠由四川省中藥研究所實驗動物研究室或四川省輸血研究所提供，合格證號分別為川實動管第132號及川實動管第057號。
3、主要儀器WX-9B型微循環(huán)儀徐州光學儀器總廠；CS501型超級恒溫器重慶試驗設(shè)備廠；JN-A型精密扭力天平上海第二天平儀器廠；722光柵分光光度計上海第三分析儀器廠。
4、實驗方法本研究所用實驗方法主要根據(jù)衛(wèi)生部藥政局發(fā)布的“中藥新藥研究指南(藥學、藥理學、毒理學)”關(guān)章節(jié)進行。
5、數(shù)據(jù)處理本研究數(shù)據(jù)均以X±S(均值±標準差)表示。計量資料用t值法比較組間差異的顯著性，計數(shù)資料用X2法比較組間差異，或用四川大學PEMS統(tǒng)計軟件進行相應(yīng)的統(tǒng)計學處理。
6、結(jié)果6.1對角叉菜膠、PGE1所致大鼠皮膚毛細血管通透性亢進的影響SD大鼠40只，體重250～300g，雌雄各半，將其脊柱兩側(cè)剪毛，每側(cè)各2塊，每塊約1.5×1.5cm2，每塊間隔1.5～2cm，剪毛處給藥0.5ml/次，4次/天，每次間隔2h，涂抹去毛處。第二日，取0.25％角叉菜膠皮內(nèi)注射于剪毛的上側(cè)2點，每點0.05ml，2小時后，再取200μg/mlPGE1皮內(nèi)注射于剪毛的下側(cè)2點，每點0.05ml，同時每半小時給藥1次。于注射角叉菜膠3.5h后，尾靜脈注入0.5％伊文思藍生理鹽水溶液1ml/100g(體重)，30min后大鼠脫頸椎致死，剪下背部去毛處皮膚，翻轉(zhuǎn)后貼于白色搪瓷盤上，根據(jù)各盤斑色深淺將其分為10個級別，1個級別記1分，評分后剪碎，放入盛有丙酮生理鹽水提取液(7∶3)10ml的有塞玻璃試管內(nèi)，置陰暗處放置，每日輕輕搖動試管2～3次，3日后，離心取上清液于590nm處比色測定光密度，結(jié)果見表1。
表1 對角叉菜膠、PGE1所致大鼠皮膚毛細血管通透性亢進的影響(X±S；n＝4)

與對照比*P＜0.05由表1結(jié)果可見，濃度為37.5％的本發(fā)明藥物組合物對角叉菜膠及PGE1所致的毛細血管通透性亢進均有顯著的抑制效果，濃度為25％本發(fā)明藥物組合物有一定作用，但12.5％的藥液無明顯影響。
6.2對大鼠外傷瘀血模型毛細血管通透性亢進的影響SD大鼠40只，體重320～365g，雌雄各半，隨機分為5組。將大白鼠大腿脫毛，選皮膚無損傷的大鼠在常規(guī)情況下飼養(yǎng)24小時，預(yù)給藥一天，給藥組每次每只0.1ml，共3次，涂抹去毛處，第2天用200g的砝碼，自50cm高度自由落下，砸傷大白鼠的大腿，給藥方式同前，24小時后自尾靜脈注射0.5％伊文思藍生理鹽水溶液1ml/100g，20min后斷頭處死，剝下大腿著色皮膚，評分后剪碎，放入丙酮與生理鹽水(7∶3)混合液10ml，置暗處放置，每日輕輕搖動試管2～3次，3日后，3000rpm離心后取上清液于590nm比色測定OD值，結(jié)果見表2。
表2 本發(fā)明藥物組合物對大鼠外傷瘀血模型毛細血管通透性的影響(X±S；n＝8)

與60％乙醇比*P＜0.05，**P＜0.01由表2結(jié)果可見，濃度分別為37.5％和25％的本發(fā)明藥物組合物對外傷瘀血型大鼠的毛細血管通透性亢進均有顯著的抑制效果，能明顯抑制外傷瘀血模型的皮膚炎癥，濃度為12.5％的本發(fā)明藥物組合物則無明顯作用。
6.3對蛋清所致大鼠足腫脹的影響SD大鼠50只，體重100～120g，隨機分5組，每鼠右后足每次浸泡于藥液或60％的乙醇中1min，每目2次，連續(xù)3日，末次藥后0.5h，于每鼠右后爪足墊皮下注射新鮮蛋清0.05ml致炎，分別于致炎后0.5、1、2、4、6h用不同濃度的藥液或60％乙醇浸泡大鼠右后足，每次每足1min，共4次(6h后不再用藥)，并于致炎前及致炎后0.5、1、2、4、6h，分別用排水法測定鼠爪腫脹程度，計算腫脹百分率，結(jié)果見表3。
表3 本發(fā)明藥物組合物對蛋清所致大鼠足腫脹的影響(X±S；n＝10)

與對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01由表3所示，本發(fā)明藥物組合物對蛋清所致大鼠足腫脹有較為明顯的抑制作用。
6.4對甲醛所致小鼠足腫脹的影響昆明種雄性小鼠50只，體重17～22g，隨機分為5組，每鼠每次雙足分別用不同濃度的藥液或60％乙醇浸泡1min，每日2次，連續(xù)3日，第4日于每鼠右后爪足墊皮下注射5％甲醛0.015ml致炎，致炎后每間隔0.5h浸泡小鼠雙足，每足1min，連續(xù)8次，并于4h后將小鼠斷頸處死，在小鼠同一部位剪取左右雙足，稱取致炎及對照足重量，以左右足重量之差的mg數(shù)為足腫脹程度，結(jié)果表4。
表4 本發(fā)明藥物組合物對甲醛所致小鼠足腫脹的影響(X±S；n＝10)

由表4可見，本發(fā)明藥物組合物對甲醛所致小鼠足腫脹有顯著的抑制作用。
6.5對二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響昆明雄性種小鼠50只，體重18～22g，隨機分為5組，每日分別用0.03ml不同濃度的藥液或60％乙醇均勻涂小鼠兩耳兩次，間隔4h，連續(xù)3日，第4日每鼠左耳用二甲苯0.02ml均勻涂于耳廓兩側(cè)致炎，然后每間隔0.5h分別用0.03ml藥液或60％乙醇涂小鼠左、右耳片，連續(xù)3次，2h后將小鼠斷頸處死，沿耳廓基線剪下左右耳片，稱取致炎及對照耳片重量，以左右耳片重量之差的mg數(shù)為耳腫脹程度，結(jié)果見表5。
表5 本發(fā)明藥物組合物對二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響(X±S；n＝10)

由表5可見，本發(fā)明藥物組合物對二甲苯所致小鼠耳腫脹有顯著抑制作用，且具有良好的量—效關(guān)系。
6.6對小鼠熱板致痛的影響將體重18～22g的昆明種雌性小鼠放到55±0.5℃的恒溫熱板上，測定每鼠的正常痛閾，以舔后足作為痛反應(yīng)的指標。凡舔后足時間小于5秒或大于30秒或跳躍者棄之不用，將合格小鼠50只，重復(fù)測其正常痛閾值，取2次正常痛閾值平均值作為該鼠的基礎(chǔ)痛閾，按其基礎(chǔ)痛閾均勻分為4組，測基礎(chǔ)痛閾后，用不同濃度的藥液和60％乙醇浸泡小鼠雙足1min，連續(xù)3次。第二日，每隔30min浸泡小鼠雙足一次，連續(xù)4次，末次浸泡后30、60、90min分別測小鼠痛閾。若60秒仍無反應(yīng)，將小鼠取出，按60秒計算，比較給藥后痛反應(yīng)的差異，結(jié)果見表6。
表6 本發(fā)明藥物組合物對小鼠熱板致痛的影響(X±S；n＝10)

與60％乙醇比較*P＜0.05由表6可見，本發(fā)明藥物組合物可使小鼠對熱板致痛舔后足的反應(yīng)發(fā)生時間延遲，提示本發(fā)明藥物組合物有一定的鎮(zhèn)痛作用，并在給藥后30min，60min時有顯著的鎮(zhèn)痛作用。
6.7對熱刺激鼠尾致痛的影響選140±10g體重大白鼠，雌雄不拘。用手固定大鼠后，將其尾浸于47±0.5℃的水浴中，以尾部回縮(甩尾)作為痛反應(yīng)指標，凡甩尾時間小于6秒或大于10秒者，均棄之不用。選合格大鼠36只，重復(fù)測其正常痛閾值，取2次正常痛閾平均值，作為該鼠的基礎(chǔ)痛閾值，測基礎(chǔ)痛閾后，將大鼠尾放入盛有藥液或60％乙醇的試管中浸泡1min，每1h浸泡1次，連續(xù)5次，次日晨每0.5h按法浸泡4次，末次浸泡后30min、60min、90min時測大鼠痛閾，比較給藥前后的痛閾提高率，結(jié)果見表7。
表7 本發(fā)明藥物組合物對熱刺激鼠尾致痛的影響(X±S；n＝9)

與60％的乙醇比較*P＜0.05由表7可見，本發(fā)明藥物組合物對熱刺激致痛引起的大鼠甩尾有抑制作用，能使大鼠疼痛反應(yīng)的潛伏期明顯延長，且具良好的量—效關(guān)系，提示本發(fā)明藥物組合物有一定鎮(zhèn)痛作用。
6.8對小鼠耳廓微循環(huán)的影響昆明種雌性小鼠50只，體重19～25g，隨機分為5組，腹腔注射戊巴比妥35mg/kg麻醉后，將小鼠側(cè)臥于解剖鏡載物臺上，耳廓展開，表面滴液體石蠟，在微循環(huán)儀上進行監(jiān)測，測定給藥前的管徑、血流情況，在耳廓上局部涂沫不同濃度的藥液或60％乙醇，每耳0.02ml，共3次，測定末次給藥后10min、20min時的小鼠血管管徑及血流變化情況，結(jié)果見表8和9。
表8 本發(fā)明藥物組合物對小鼠耳廓微血管管徑的影響(X±S；n＝10)

與60％的乙醇比較*P＜0.05表9 本發(fā)明藥物組合物對小鼠耳廓微循環(huán)血流的影響(X±S；n＝10)

由表8和表9可見，高濃度的本發(fā)明藥物組合物能使小鼠耳廓血管管徑明顯擴大，低濃度僅有一定的作用趨勢，提示本發(fā)明藥物組合物具有一定擴張血管的作用，且具有量—效關(guān)系，但其對耳廓微血管流速無明顯作用。
6.9對小鼠實驗性微循環(huán)障礙的影響昆明種雄性小鼠40只，體重19～27g，隨機分為4組，腹腔注射戊巴比妥35mg/kg麻醉后，將小鼠側(cè)臥于載物臺上，耳廓涂液體石蠟，固定于玻璃板上，在耳廓上局部涂不同濃度的藥液或60％的乙醇，每耳0.02ml，10min后，腹腔注射腎上腺素(Ad)1mg/kg，注射腎上腺素的同時，第二次在小鼠耳廓上局部給藥。在微循環(huán)儀進行監(jiān)測，測定給藥前和注射腎上腺素后5、10、15min時的血管管徑和毛細血管開放個數(shù)，結(jié)果見表10、表11、表12。
表10 本發(fā)明藥物組合物對小鼠耳廓微動脈血管管徑的影響(X±S；n＝10)

與60％的乙醇比較*P＜0.05表11 本發(fā)明藥物組合物對小鼠耳廓微靜脈血管管徑的影響(X±S；n＝10)

與60％的乙醇比較*P＜0.05，**P＜0.01表12 本發(fā)明藥物組合物對小鼠耳廓毛細血管開放個數(shù)的影響(X±S；n＝10)

與60％的乙醇比較*P＜0.05由表10、表11及表12可見，高濃度本發(fā)明藥物組合物對由腹腔注射腎上腺素造成的小鼠實驗性耳廓微循環(huán)障礙有一定的改善作用，能縮短管徑恢復(fù)正常所需時間，并且能有效地使毛細血管開放個數(shù)恢復(fù)正常。提示本發(fā)明藥物組合物對應(yīng)用腎上腺素引起的微循環(huán)障礙有良好的預(yù)防和改善作用。
6.10體外透皮吸收實驗6.10.1樣品制備將昆明種小鼠背部以8％Na2S脫毛，24h后選皮膚無損傷的小鼠處死，剝下皮膚，仔細分離除去皮下脂肪及結(jié)締組織，剪取1cm2左右以502膠水將其固定在樣品池下口，角質(zhì)層面向樣品池。將本發(fā)明藥物組合物56.3％2ml放入樣品池中，于接收池中加入20ml生理鹽水作接受液，置于37℃恒溫水浴中并不斷攪拌。于一定的時間(16h、24h、48h)取接受液5ml，并補加5ml生理鹽水到接受池中。將取出的接受液蒸干，加濃氨水1ml及水9ml，移至分液漏斗中，加氯仿20ml萃取，分取氯仿層，水層用氯仿萃取3次，每次10ml，合并氯仿液，蒸干，殘渣加甲醇2ml溶解，作為測試樣品。
6.10.2標準液制備精密稱取士的寧標準品1.20mg，甲醇定容至2ml，取200μl溶液置于25ml容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，即4.8μg/ml。
6.10.3測試條件用十八烷基鍵合硅膠為填充劑，十二烷基硫酸鈉溶液(0.001mol/L，H3PO4調(diào)pH4.2)-乙腈-水(60∶37∶3)為流動相，檢測波長為254nm，理論塔板數(shù)按士的寧峰計算不低于9000。
6.10.4結(jié)果見表13。
表13 本發(fā)明藥物組合物體外對士的寧的透皮吸收

從表13可見，很高濃度的本發(fā)明藥物組合物體外士的寧的透皮吸收量也甚微小。
7、討論本發(fā)明藥物組合物以乳香、沒藥、川芎、紅花、土鱉蟲、血竭、膽南星、馬錢子、當歸、防風、白芷、羌活、升麻、菖蒲、螃蟹、龍骨為原料配伍而成的中藥復(fù)方制劑，具有活血化瘀、消腫止痛、舒筋散結(jié)的功效，主治急性軟組織損傷、急性傷筋等癥。
炎癥反應(yīng)一般分為早、中、晚三期，即以毛細血管擴張和通透性亢進，滲出水腫為主的早期炎癥，以白細胞向炎灶內(nèi)聚集為主的中期炎癥及以組織增生、炎灶屏障形成為主的晚期炎癥，上述三期又可稱為血管反應(yīng)期、細胞反應(yīng)期和組織反應(yīng)期。就軟組織損傷而言，早期炎癥在其病理損傷上占主要地位。實驗結(jié)果表明，本發(fā)明藥物組合物對早期炎癥較為敏感，具有良好的抗炎作用，對角叉菜膠和PGE1所致大鼠皮膚毛細血管通透性亢進有明顯抑制作用，表明其不僅可抑制PGE1的合成，而且可直接對抗PGE1的致炎作用；本發(fā)明藥物組合物還能顯著抑制蛋清所致的大鼠足跖腫脹，對二甲苯所致的小鼠耳腫脹、甲醛所致的小鼠足腫脹也顯示出良好的對抗作用。本發(fā)明藥物組合物還能有效的降低大鼠外傷瘀血模型毛細血管的通透性，明顯抑制外傷瘀血模型的皮膚炎癥，從而達到活血化瘀、消腫、抗炎的目的。
采用熱刺激致痛大鼠甩尾和熱板所致小鼠疼痛兩個實驗?zāi)Ｐ蛯Ρ景l(fā)明藥物組合物的鎮(zhèn)痛效果進行研究，結(jié)果表明，本發(fā)明藥物組合物能顯著提高熱板所致小鼠疼痛的痛閾值，延遲小鼠舔后足反應(yīng)發(fā)生的時間。對熱刺激致痛所引起的大鼠甩尾試驗具明顯的抑制作用，能使大鼠疼痛反應(yīng)潛伏期延長，藥效發(fā)揮快。
研究結(jié)果表明，本發(fā)明藥物組合物不僅對正常小鼠耳廓微血管具擴張作用，而且對腎上腺素引起的微循環(huán)障礙有良好的預(yù)防和改善作用。與60％乙醇組同一時間比較，高濃度37.5％本發(fā)明藥物組合物對微動脈、微靜脈管徑、毛細血管開放個數(shù)的恢復(fù)均有改善作用，能縮短局部微循環(huán)恢復(fù)正常所需的時間。
綜上，本發(fā)明藥物組合物抗炎、鎮(zhèn)痛、改善微循環(huán)作用明顯，某些指標優(yōu)于陽性對照組，且在較多的藥理作用中均有良好的劑量—效應(yīng)關(guān)系。
申請人將本發(fā)明藥物組合物提供給國家體委乒乓球隊教練，國家體委摩托技術(shù)學校，湖南株州運動創(chuàng)傷研究所，四川省宜賓市第一人民醫(yī)院副院長，高縣人民醫(yī)院，宜賓市醫(yī)藥檢驗所及個人無償使用，病例約900余例，有效率達98％以上，療效顯著。申請人將本發(fā)明藥物組合物制備而得的酒劑在四川省宜賓市翠屏區(qū)人民醫(yī)院民生分院及宜賓縣骨科醫(yī)院進行試驗，接受試驗的65例患者，均為年齡在15～65周歲，其中急性57例，發(fā)病時間短于一周，經(jīng)過1～3日治療后，全部痊愈，痊愈率達100％，慢性8例，發(fā)病時間為3～7年的腰肌勞損等經(jīng)過3～7日治療，疼痛、功能障礙等癥狀明顯減輕，總有效率達100％，具體統(tǒng)計如下一、本發(fā)明藥物組合物在四川省宜賓市翠屏區(qū)人民醫(yī)院民生分院進行臨床試驗的報告1、病例選擇各種中、西醫(yī)診斷為急、慢性軟組織損傷，關(guān)節(jié)扭傷，韌帶拉傷，年齡在10～75周歲的患者。本組32例中男26例(占81.25％)，女6例(占18.75％)；年齡15-65歲；急性軟組織損傷27例(占84.38％)，慢性軟組織損傷5例(占15.62％)；其中肌肉損傷12例(占37.5％)，韌帶損傷15例(占46.9％)例，關(guān)節(jié)損傷5例(占15.6％)。
2、排除病例A、開放性損傷，或合并有心腦血管、肝、腎、造血系統(tǒng)等原發(fā)性疾病及精神病患者。
B、年齡在10周歲以下或75周歲以上，妊娠及哺乳期婦女，對酒精過敏者。
C、其它不符合納入標準，未按規(guī)定用藥，無法判斷療效，或資料不全等影響療效或安全性判斷者。
3、治療方法所有病例均單獨使用本發(fā)明藥物組合物酒劑外搽或外敷(視損傷程度每天用藥4～10次)，同時停用其它藥物。
4、治療結(jié)果(1)療效評定標準A、急性(或慢性)軟組織損傷用藥3天(或7天以內(nèi))受傷部位疼痛、腫脹完全消失，瘀血完全消散，能自由活動，關(guān)節(jié)功能等完全恢復(fù)為痊愈。
B、急性(或慢性)軟組織損傷用藥3天(或7天以內(nèi))受傷處疼痛、腫脹明顯減輕，瘀血明顯消散，能較自由活動，關(guān)節(jié)功能部分恢復(fù)為顯效。
C、急性(或慢性)軟組織損傷用藥3天(或7天以內(nèi))受傷處疼痛、腫脹稍有減輕，瘀血稍有消散，不能自由活動，關(guān)節(jié)功能稍有恢復(fù)為有效。
D、急性(或慢性)軟組織損傷用藥3天(或7天以內(nèi))受傷處癥狀沒有改善或者加重為無效。
(2)治療結(jié)果本組32例，急性軟組織損傷27例經(jīng)1-3日治療后全部痊愈。慢性軟組織損傷5例經(jīng)3-7日治療后3例痊愈，2例顯效。痊愈率93.8％，顯效率6.2％，總有效率100％。
二、本發(fā)明藥物組合物在四川省宜賓縣骨科醫(yī)院進行臨床試驗的報告1、病例選擇各種中、西醫(yī)診斷為急、慢性軟組織損傷，關(guān)節(jié)扭傷，韌帶拉傷，年齡在10～75周歲的患者。本組33例中男22例(占67％)，女11例(占33％)；年齡15-65歲；急性軟組織損傷30例(占91％)，發(fā)病時間在10分鐘至1周之間，慢性軟組織損傷3例(占9％)發(fā)病時間在3年至7年之間。其中肌肉、肌腱損傷12例(占37％)，韌帶損傷7例(占21％)例，關(guān)節(jié)損傷5例(占15％)，其它共9例(占27％)。
2、排除病例A、開放性損傷，或合并有心腦血管、肝、腎、造血系統(tǒng)等原發(fā)性疾病及精神病患者。
B、年齡在10周歲以下或75周歲以上，妊娠及哺乳期婦女，對酒精過敏者。
C、其它不符合納入標準，未按規(guī)定用藥，無法判斷療效，或資料不全等影響療效或安全性判斷者。
3、治療方法所有病例均單獨使用本發(fā)明藥物組合物酒劑外搽或外敷(視損傷程度每天用藥4-10次)，同時停用其它藥物。
4、治療結(jié)果(1)療效評定標準A、急性(或慢性)軟組織損傷用藥3天(或7天以內(nèi))受傷部位疼痛、腫脹完全消失，瘀血完全消散，能自由活動，關(guān)節(jié)功能等完全恢復(fù)為痊愈。
B、急性(或慢性)軟組織損傷用藥3天(或7天以內(nèi))受傷處疼痛、腫脹明顯減輕，瘀血明顯消散，能較自由活動，關(guān)節(jié)功能部分恢復(fù)為顯效。
C、急性(或慢性)軟組織損傷用藥3天(或7天以內(nèi))受傷處疼痛、腫脹稍有減輕，瘀血稍有消散，不能自由活動，關(guān)節(jié)功能稍有恢復(fù)為有效。
D、急性(或慢性)軟組織損傷用藥3天(或7天以內(nèi))受傷處癥狀沒有改善或者加重為無效。另對一些損傷程度較嚴重患者可適當延長使用。
(2)治療結(jié)果本組33例，急性軟組織損傷30例經(jīng)1-3日治療后全部痊愈。慢性軟組織損傷3例經(jīng)3-7日治療后1例痊愈，2例顯效。痊愈率94％，顯效率6％，總有效率100％。
權(quán)利要求
1.治療跌打損傷的藥物組合物，其特征在于，制成其活性成分的原料包括下述重量配比的組分乳香2～4份、沒藥3～5份、川芎1～4份、紅花1～4份、土鱉蟲1～3份、血竭1～4份、膽南星1～4份、馬錢子1～3份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療跌打損傷的藥物組合物，其特征在于，制成其活性成分的原料包括下述重量配比的組分乳香2.5份、沒藥3.2份、川芎1.6份、紅花1.6份、土鱉蟲1.3份、血竭1.6份、膽南星1.6份、馬錢子1.3份。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的治療跌打損傷的藥物組合物，其特征在于，制成其活性成分的原料還包括下述重量配比的組分當歸1～2份、防風1～4份、白芷1～4份、羌活1～2份、升麻1～4份、菖蒲1～2份、螃蟹1～2份、龍骨1～2份。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的治療跌打損傷的藥物組合物，其特征在于，制成其活性成分的原料還包括下述重量配比的組分當歸1份、防風1.6份、白芷1.6份、羌活1份、升麻1.6份、菖蒲1份、螃蟹1份、龍骨1份。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的治療跌打損傷的藥物組合物，其特征在于，它是以乳香、沒藥、川芎、紅花、土鱉蟲、血竭、膽南星、馬錢子、當歸、防風、白芷、羌活、升麻、菖蒲、螃蟹、龍骨為活性成分，加入藥學上可接受的輔料或輔助性成分制備而成的外用制劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的治療跌打損傷的藥物組合物，其特征在于，所述的外用制劑為酒劑、酊劑、搽劑、軟膏劑、噴霧劑、貼膏劑或膏劑。
7.制備權(quán)利要求1所述的藥物組合物的方法，它包括如下步驟a、稱取下述重量配比的原料乳香2～4份、沒藥3～5份、川芎1～4份、紅花1～4份、土鱉蟲1～3份、血竭1～4份、膽南星1～4份、馬錢子1～3份；b、取原料用濃度為50～80％的乙醇提取，所得提取液按照常規(guī)制藥方法，加入可接受的輔料或輔助性成分制備即得。
8.制備權(quán)利要求3所述的藥物組合物的方法，它包括如下步驟a、稱取下述重量配比的原料乳香2～4份、沒藥3～5份、川芎1～4份、紅花1～4份、土鱉蟲1～3份、血竭1～4份、膽南星1～4份、馬錢子1～3份、當歸1～2份、防風1～4份、白芷1～4份、羌活1～2份、升麻1～4份、菖蒲1～2份、螃蟹1～2份、龍骨1～2份；b、取原料用濃度為50～80％的乙醇提取，所得提取液按照常規(guī)制藥方法，加入可接受的輔料或輔助性成分制備即得。
9.權(quán)利要求1所述的藥物組合物在制備治療急性傷筋或急性軟組織損傷的藥物中的作用。
10.權(quán)利要求3所述的藥物組合物在制備治療急性傷筋或急性軟組織損傷的藥物中的作用。
全文摘要
本發(fā)明涉及治療跌打損傷的藥物組合物，具體地，是采用天然藥材為原料制備而成的藥劑，屬于醫(yī)藥領(lǐng)域。制成其活性成分的原料包括下述重量配比的組分乳香2～4份、沒藥3～5份、川芎1～4份、紅花1～4份、土鱉蟲1～3份、血竭1～4份、膽南星1～4份、馬錢子1～3份；還包括當歸1～2份、防風1～4份、白芷1～4份、羌活1～2份、升麻1～4份、菖蒲1～2份、螃蟹1～2份、龍骨1～2份。本發(fā)明藥物組合物以活血化瘀為主，消腫止痛、通絡(luò)散結(jié)為輔，兼顧祛濕透表，清熱寧神之功；針對急性傷筋所致的瘀血阻滯病機，療效顯著，止痛、消腫時間短，關(guān)節(jié)功能恢復(fù)優(yōu)良，為臨床治療跌打損傷提供了新的選擇。
文檔編號A61K35/56GK101062217SQ20071004916
公開日2007年10月31日 申請日期2007年5月24日 優(yōu)先權(quán)日2007年5月24日
發(fā)明者丁方 申請人:四川省宜賓五糧液集團有限公司