專利名稱：治療肝纖維化的抗madcam抗體和抗纖維化半胱天冬蛋白酶抑制劑的新組合的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及抗-MAdCAM抗體與抗纖維化藥劑的新組合，該抗纖 維化藥劑是例如蛋白酶抑制劑，優(yōu)選半胱天冬蛋白酶(caspase)抑制 劑。本發(fā)明還涉及包括本發(fā)明的組合的藥物組合物，以及該組合在治 療肝纖維化中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
慢性肝病每年造成超過140萬例死亡(WHO, World Health Report 2004)，在美國(guó)是前十名疾病相關(guān)的死亡原因之一 (CDC， National Center for Health Statistics, 2004)。肝纖維化是持續(xù)性肝炎的后果，如果 不加控制的話，對(duì)于患者的患病率和死亡率都具有嚴(yán)重的長(zhǎng)期后果。肝纖維化是肝臟受損時(shí)發(fā)生的過程之一 。這種損傷的原因可以是， 例如，病毒活性(例如慢性乙肝或丙肝)或其他肝感染(例如寄生物、 細(xì)菌)；化學(xué)品(例如藥品、輕閑性(recreational)藥物、過量飲酒、 接觸污染物)；免疫過程(例如自身免疫肝炎)；代謝異常(例如脂質(zhì)、 糖原或金屬存儲(chǔ)異常)；或癌生長(zhǎng)(原發(fā)或繼發(fā)肝癌)。纖維化是肝損 傷的病征，也是可能經(jīng)由進(jìn)行性肝硬化而導(dǎo)致肝衰竭的因素。有著嚴(yán)重的尚未滿足的醫(yī)療需求。本發(fā)明涉及抗-粘膜地址素細(xì)胞 粘附分子(MAdCAM)抗體與抗纖維化藥劑的組合，抗纖維化藥劑優(yōu) 選蛋白酶抑制劑，更優(yōu)選半胱天冬蛋白酶抑制劑，其有益于肝纖維化 的治療。粘膜地址素細(xì)胞粘附分子(MAdCAM)是細(xì)胞粘附受體的免疫球 蛋白超家族的一員。它是當(dāng)需要時(shí)通過與淋巴細(xì)胞表面上的整聯(lián)蛋白 分子相互作用而將淋巴細(xì)胞募集(recruitment)至組織的粘附分子中的一種。己經(jīng)顯示，抑制MAdCAM與其整聯(lián)蛋白結(jié)合配偶體014(37結(jié)合的 抗體，例如抗-MAdCAM抗體(例如MECA-367; US 5,403,919， US5,538,724)或抗-"4卩7抗體(例如Act-l; US 6,551,593)，可以抑制淋 巴細(xì)胞外滲至發(fā)炎的腸內(nèi)，因此可以有益于炎性腸病(IBD)的治療。發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的一個(gè)方面是抗-MAdCAM抗體或其抗原結(jié)合部分與抗纖 維化藥劑的組合。優(yōu)選地，抗纖維化藥劑是蛋白酶抑制劑，更優(yōu)選半 胱天冬蛋白酶抑制劑，進(jìn)一步優(yōu)選半胱天冬蛋白酶抑制劑是式I的化合 物式I的化合物<formula>formula see original document page 10</formula>其中A、 B、 Rl和R2如下文中所定義。 優(yōu)選地，式I的化合物選自pS)-S-[N-(N'-P-氟-^碘苯基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(T,:3'乂6，-四氟苯氧基>4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-氯苯基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2',3'，5',6'-四氟苯 氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-溴苯基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2'，3',5',6'-四氟苯 氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-氟苯基)草氨酰)纈氨酸基腐基-5-(2'，3',5',6'-四氟苯 氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-三氟甲基苯基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2',3'，5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N—(N'-G-惠基傳氨酰)纈氨酸基]氨基-5-P'，3'，5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'—(2-叔丁基苯基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(38)-3-[^(>^-(2-三氟甲基苯基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(2',3'，5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2，6-二氟苯基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(2',3'，5',6'-四 氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(l-萘基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(2',3',5'，6'-四氟苯氧 基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(4-甲氧基苯基)草氨酰兩氨酸萄氨基-5-(2'，3',5'，6'-四 氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-三氟甲基苯基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-4-氧代丁(3S)-3-[N-(N'-(2-叔丁基甲基苯基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-4-氧代丁(3S)-3-[N-(N'-(2-芐基苯基)草氨酰)纈氨酸萄氨基斗氧代丁酸； (3S)-3-[N-(N'-(2-苯基苯基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-4-氧代丁酸。 再更優(yōu)選地，化合物為(3S)-3-[N-(N'-(2-叔丁基苯基)草氨酰)丙氨酸蜀氨基-5 (2',3',5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸。在本發(fā)明的一個(gè)方面，組合中的抗-MAdCAM抗體或其抗原結(jié)合部分是特異性結(jié)合MAdCAM的抗體或其抗原結(jié)合部分。優(yōu)選地，抗體或部分是人單克隆抗體或其抗原結(jié)合部分。優(yōu)選地，抗體或部分具備如下性質(zhì)中的至少一種(a) 與人細(xì)胞結(jié)合(b) 對(duì)MAdCAM的選擇性相對(duì)于VCAM或纖連蛋白為至少100(c) 與人MAdCAM以3xl0-"M或更低的Kd結(jié)合；或(d) 抑制a4(37表達(dá)細(xì)胞與人MAdCAM的結(jié)合；(e) 抑制淋巴細(xì)胞向胃腸淋巴組織中的募集。優(yōu)選地，抗體或其抗原結(jié)合部分抑制人MAdCAM與a4(37的結(jié)合， 并具有以下性質(zhì)中的至少--種(a) 與結(jié)合MAdCAM的參比抗體交叉競(jìng)爭(zhēng)；(b) 與結(jié)合MAdCAM的參比抗體競(jìng)爭(zhēng)；(c) 與參比抗體結(jié)合相同的MAdCAM表位；(d) 以與參比抗體基本相同的Kd與MAdCAM結(jié)合；(e) 以與參比抗體基本相同的脫離速率(off rate)與MAdCAM結(jié)合；其中參比抗體選自單克隆抗體1.7.2、單克隆抗體1.8.2、單克隆抗體 6.14.2、單克隆抗體6.22.2、單克隆抗體6.34.2、單克隆抗體6.67.1、單 克隆抗體6.73.2、單克隆抗體6.77.1、單克隆抗體7.16.6、單克隆抗體 7.20.5、單克隆抗體7.26.4、單克隆抗體9.8.2、單克隆抗體6.22.2-mod、 單克隆抗體6.34.2-mod、單克隆抗體6.67.1-mod、單克隆抗體6.77.1-mod 和單克隆抗體7.26.4-mod。在本發(fā)明的另一個(gè)方面，抗-MAdCAM抗體的重鏈可變區(qū)、輕鏈 可變區(qū)或二者在氨基酸序列上與選自下列的單克隆抗體的相應(yīng)區(qū)的同 源性至少為90%:單克隆抗體1.7.2、單克隆抗體1.8.2、單克隆抗體 6.14.2、單克隆抗體6.22.2、單克隆抗體6.34.2、單克隆抗體6.67.1、單 克隆抗體6.73.2、單克隆抗體6.77.1、單克隆抗體7.16.6、單克隆抗體 7.20.5、單克隆抗體7.26.4、單克隆抗體9.8.2、單克隆抗體6.22.2-mod、 單克隆抗體6.34.2-mod、單克隆抗體6.67.1-mod、單克隆抗體6.77.1-mod 和單克隆抗體7.26.4-mod。優(yōu)選地，抗體選自(a) 包括SEQ ID NO: 2和SEQ ID NO: 4所示的氨基酸序列、且 沒有信號(hào)序列的抗體；(b) 包括SEQ ID NO: 6和SEQ ID NO: 8所示的氨基酸序列、且 沒有信號(hào)序列的抗體；(c) 包括SEQ ID NO: 10和SEQ ID NO: 12所示的氨基酸序列、 且沒有信號(hào)序列的抗體；(d) 包括SEQ ID NO: 14和SEQ ID NO: 16所示的氨基酸序列、且沒有信號(hào)序列的抗體；(e) 包括SEQ ID NO: 18和SEQ ID NO: 20所示的氨基酸序列、且沒有信號(hào)序列的抗體；(f) 包括SEQ ID NO: 22和SEQ ID NO: 24所示的氨基酸序列、 且沒有信號(hào)序列的抗體；(g) 包括SEQ ID NO: 26和SEQ ID NO: 28所示的氨基酸序列、 且沒有信號(hào)序列的抗體；(h) 包括SEQ ID NO: 30和SEQ ID NO: 32所示的氨基酸序列、且沒有信號(hào)序列的抗體；(i)包括SEQ ID NO: 34和SEQ ID NO: 36所示的氨基酸序列、 且沒有信號(hào)序列的抗體；(j)包括SEQ ID NO: 38和SEQ ID NO: 40所示的氨基酸序列、 且沒有信號(hào)序列的抗體；(k)包括SEQ ID NO: 42和SEQ ID NO: 44所示的氨基酸序列、 且沒有信號(hào)序列的抗體；(1)包括SEQ ID NO: 46和SEQ ID NO: 48所示的氨基酸序列、 且沒有信號(hào)序列的抗體；(m)包括SEQ ID NO: 52和SEQ ID NO: 54所示的氨基酸序列、且沒有信號(hào)序列的抗體；(n)包括SEQ ID NO: 56和SEQ ID NO: 58所示的氨基酸序列、 且沒有信號(hào)序列的抗體；(o)包括SEQ ID NO: 60和SEQ ID NO: 62所示的氨基酸序列、且沒有信號(hào)序列的抗體；(p)包括SEQ ID NO: 64和SEQ ID NO: 66所示的氨基酸序列、 且沒有信號(hào)序列的抗體；和(q)包括SEQ ID NO: 42和SEQ ID NO: 68所示的氨基酸序列、 且沒有信號(hào)序列的抗體。在本發(fā)明的一個(gè)方面，重鏈C-端的賴氨酸可以從組合的抗 -MAdC AM抗體中切割。在本發(fā)明的另一個(gè)方面，單克隆抗體或其抗原結(jié)合部分選自以下 抗體(a) 重鏈包括選自下列的參比抗體的重鏈CDR1、 CDR2和CDR3 氨基酸序歹U: 1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1、 6.73.2、 6.77.1、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2-mod、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod禾口 7.26.4-mod(b) 輕鏈包括選自下列的參比抗體的輕鏈CDR1、 CDR2和CDR3 氨基酸序列:1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1、 6.73.2、 6.77,1、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2-mod、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod禾卩7.26.4-mod(C)抗體包括(a)的重鏈和(b)的輕鏈；以及(d)在(c)的抗體中，重鏈和輕鏈CDR氨基酸序列選自相同的參比抗體。在本發(fā)明的另一方面，單克隆抗體或其抗原結(jié)合部分包括(a) 重鏈，其包括選自以下的抗體的重鏈可變區(qū)氨基酸序列1.7.2 (SEQIDNO:2); 1.8.2 (SEQ ID NO: 6); 6.14.2 (SEQ ID NO: 10); 6.22.2 (SEQ ID NO: 14); 6.34.2 (SEQ ID NO: 18); 6,67.1 (SEQ ID NO: 22); 6.73.2 (SEQ ID NO: 26); 6.77.1 (SEQ ID NO: 30); 7.16.6 (SEQ ID NO: 34); 7.20.5 (SEQ ID NO: 38); 7.26.4 (SEQ ID NO: 42);和9.8.2 (SEQ ID NO: 46); 6.22.2-mod (SEQ ID NO: 52); 6.34.2-mod (SEQ ID NO: 56); 6.67.1-mod (SEQ ID NO: 60); 6.77.1-mod (SEQ ID NO: 64);和 7.26.4-mod (SEQ ID NO: 42);(b) 輕鏈，其包括選自以下的抗體的輕鏈可變區(qū)氨基酸序列1.7.2(SEQ ID NO: 4); 1.8.2 (SEQ ID NO: 8); 6.14.2 (SEQ ID NO: 12); 6.22.2 (SEQ ID NO: 16); 6.34.2 (SEQ ID NO: 20); 6.67.1 (SEQ ID NO: 24); 6.73.2 (SEQ ID NO: 28); 6.77.1 (SEQ ID NO: 32); 7.16.6 (SEQ ID NO: 36); 7.20.5 (SEQ ID NO: 40); 7.26.4 (SEQ ID NO: 44);禾卩9.8.2 (SEQ ID NO: 48); 6.22.2-mod (SEQ ID NO: 54); 6.34.2-mod (SEQ ID NO: 58); 6.67.1-mod (SEQ ID NO: 62); 6.77.1-mod (SEQ ID NO: 66);和 7.26.4-mod (SEQ ID NO: 68);或(c) (a)的重鏈和(b)的輕鏈。 本發(fā)明的又一個(gè)方面是抗-014(37整聯(lián)蛋白抗體或其抗原結(jié)合部分與本文定義的半胱天冬蛋白酶抑制劑的組合。優(yōu)選地，抗體抑制 MAdCAM與o437整聯(lián)蛋白的相互作用。更優(yōu)選地，抗體是人化Act-l， 也稱作MLN02 (WO 01/078779)。本發(fā)明的另一個(gè)方面是本文所述的任意組合的醫(yī)藥用途，優(yōu)選用 于治療肝纖維化，其包括但不限于，治療丙肝導(dǎo)致的肝損壞、酒精肝 疾病、非酒精性脂肪肝(NASH)。本發(fā)明的另一個(gè)方面是使用本文所述的抗-MAdCAM抗體和本文 所述的抗纖維化藥劑治療肝纖維化的方法，包括但不限于，治療丙肝 導(dǎo)致的肝損壞、酒精肝疾病、非酒精性脂肪肝(NASH)。本發(fā)明的另一個(gè)方面是包括本文所述的任意組合以及藥物可接受 的載體或賦形劑的藥物組合物。本發(fā)明的另一個(gè)方面是包括用于同時(shí)、單獨(dú)或依次使用的本文所述的抗-MAdCAM抗體和本文所述的抗纖維化藥劑的藥物產(chǎn)品。本發(fā)明的進(jìn)一個(gè)方面是包括本文所述的抗-MAdCAM抗體和本文 所述的抗纖維化藥劑的試劑盒。
具體實(shí)施方式
本發(fā)明的組合的抗纖維化藥劑優(yōu)選是蛋白酶抑制劑，更優(yōu)選半胱 天冬蛋白酶抑制劑，進(jìn)一步優(yōu)選式I的化合物、或其藥物可接受的鹽<formula>formula see original document page 15</formula>其中，A是式Ha-i的天然或非天然氨基酸<formula>formula see original document page 15</formula>B是氫原子、氘原子、垸基、環(huán)烷基、苯基、取代苯基、萘基、取代萘基、2-苯并噁唑基、取代2-噁唑基、(CH2)n-環(huán)烷基、(CH2)n-苯基、(CH2V(取代苯基)、(CH2)n-(l或2-萘基)、(CH丄-(取代1或2-萘基)、 (CH2V(雜芳基)、(CH2)n-(取代雜芳基)、鹵代甲基、C02R12、 CONR"R'4、 CH2ZR15、 CH20CO(芳基)、CH20CO(雜芳基)或CH20PO(R16)1117，其中 Z是氧或硫原子，或者B是式IIIa-c的基團(tuán)Ri為垸基、環(huán)烷基、(環(huán)烷基)垸基、苯基，取代苯基、苯基烷基、 取代苯基垸基、萘基、取代萘基、(l或2萘基)垸基、取代(1或2萘基) 垸基、雜芳基、取代雜芳基、(雜芳基)烷基、取代(雜芳基)垸基、R'a(Rlb)N 或R"0;并且R"是氫、低級(jí)垸基、環(huán)烷基、(環(huán)烷基)垸基、苯基、取代苯基、苯 基垸基、取代苯基烷基、萘基、取代萘基、(l或2萘基)烷基、或取代 (1或2萘基)烷基；并且其中Rh和R"獨(dú)立地為氫、烷基、環(huán)烷基、(環(huán)垸基)垸基、苯基、取代 苯基、苯基烷基、取代苯基烷基、萘基、取代萘基、(1或2萘基)垸基、 取代(l或2萘基)垸基、雜芳基、取代雜芳基、(雜芳基)烷基、或取代(雜 芳基)烷基，其條件是R"和R'b不都為氫；R'e為烷基、環(huán)垸基、(環(huán)烷基)垸基、苯基、取代苯基、苯基烷基、取代苯基垸基、萘基、取代萘基、(l或2萘基)烷基、取代(1或2萘基) 烷基、雜芳基、取代雜芳基、(雜芳基)烷基、或取代(雜芳基)烷基；R3為C,-6烷基、環(huán)烷基、苯基、取代苯基、(CH2)nNH2、 (CH2)NHCOR9、 (CH2)nN(C=NH)NH2 、 (CH2)mC02R2 、 (CH2)mOR10 、(CH2)mSR"、 (CH2)n環(huán)垸基、(CH2)n苯基、(CH2)n(取代苯基)、(CH2)n(l 或2-萘基)或(CH2)n(雜芳基)，其中雜芳基包括吡啶基、噻吩基、呋喃基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、異噁唑基、吡嗪基、嘧啶基、三嗪基、四唑基和n引哚基；R^為氫或甲基，或者RS與Rh—起為-(CH2)d-，其中d是2-6的整數(shù)；W為苯基、取代苯基、(CH2)m苯基、(CH2)m(取代苯基)、環(huán)垸基或苯并稠合環(huán)烷基；R5為氫、低級(jí)烷基、環(huán)烷基、苯基、取代苯基、(CH2)n環(huán)烷基、(CH2)n苯基、(CH2)n(取代苯基)、或(CH2)n(1或2-萘基)；w為氫、氟、氧代、低級(jí)烷基、環(huán)垸基、苯基、取代苯基、萘基、(CH2)n環(huán)垸基、(CH2)n苯基、(CH2)n(取代苯基)、(CH2)n(l或2-萘基)、OR10、 SR^NHCOR9;W為氫、氧代(§卩=0)、低級(jí)烷基、環(huán)烷基、苯基、取代苯基、萘基、(CH2)n環(huán)垸基、(CH2)n苯基、(CH2)n(取代苯基)、或(CH2)n(1或 2-萘基)；RS為低級(jí)烷基、環(huán)垸基、(CH2)n環(huán)烷基、(CH2)n苯基、,2彥代苯基)、(CH2)n(l或2-萘基)、或COR9;R9為氫、低級(jí)烷基、環(huán)烷基、苯基、取代苯基、萘基、(CH2)n環(huán) 烷基、(CH2)n苯基、(CH2)n(取代苯基)、(CH2)n(l或2-萘基)、OR12或 NR13R14;R"為氫、低級(jí)烷基、環(huán)烷基、苯基、取代苯基、萘基、(CHA環(huán)烷基、(CH2)n苯基、(CH2)n(取代苯基)、或(CH2)n( 1或2-萘基)；R"為低級(jí)烷基、環(huán)烷基、苯基、取代苯基、萘基、(CH2)n環(huán)烷基、(CH2)n苯基、(CH2)n(取代苯基)、或(CH2)n( 1或2-萘基)；R'2為低級(jí)烷基、環(huán)烷基、(CH2)n環(huán)烷基、(CH2)n苯基、(CH2)n^代苯基)、或(CH2)n(1或2-萘基)；R"為氫、低級(jí)烷基、環(huán)烷基、苯基、取代苯基、萘基、取代萘基、(CH2)n環(huán)垸基、(CH2)n苯基、(CH2)n(取代苯基)、或(CH2)。( 1或2-萘基);R"為氫或低級(jí)烷基；或者11|3和R"—起形成5-7元碳環(huán)或雜環(huán)，例如嗎啉或N-取代哌嗪； R"為苯基、取代苯基、萘基、取代萘基、雜芳基、(CH^苯基、(CH2)n(取代苯基)、(CH2)n(l或2-萘基)、或(CH2)n(雜芳基)；R"或R卩獨(dú)立地為低級(jí)烷基、環(huán)烷基、苯基、取代苯基、萘基、 苯基烷基、取代苯基烷基、或(環(huán)烷基)烷基；R's和R^獨(dú)立地為氫、垸基、苯基、取代苯基、(CHA苯基、(CH2)n(取 代苯基)，或者R'8和R"—起為-(CHK:H)2-;R^為氫、烷基、苯基、取代苯基、(CH2)n苯基、(CH2)n(取代苯基)、R21、 R^和R"獨(dú)立地為氫或烷基； X為CEb、 (CH2)2、 (CH2)3或S;Y1為0或NR";丫2為CH2、 0或NR";a為0或l，且b為l或2，其條件是當(dāng)a為l時(shí)，b是l; c為l或2，其條件是當(dāng)c為l時(shí)，a為0，且b為l; m為1或2;并且 n為1、 2、 3或4。如本文所使用的，術(shù)語"垸基"是指直鏈或支鏈C,至do碳鏈， 例如甲基、乙基、叔丁基、異丙基、正辛基和類似物。術(shù)語"低級(jí)烷 基"是指直鏈或支鏈C,至C6碳鏈，例如甲基、乙基、異丙基和類似物。術(shù)語"環(huán)烷基"是指完全飽和的或部分不飽和的單-、二-、或三環(huán)。 這種環(huán)的例子包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、金剛 烷基、環(huán)辛基、順式或反式十氫化萘、二環(huán)[2.2.1]庚-2-烯、環(huán)己-l-烯 基、環(huán)戊-l-烯基、1，4-環(huán)辛二烯基和類似物。術(shù)語"(環(huán)烷基)烷基"是指被一個(gè)上述環(huán)垸基環(huán)取代的以上定義的 烷基。這種基團(tuán)的例子包括(環(huán)己基)甲基、3-(環(huán)丙基)-正丙基、5-(環(huán)戊 基)己基、6-金剛垸基)己基和類似物。術(shù)語"取代苯基"是指被一個(gè)或更多個(gè)選自以下的取代基取代的 苯基鹵素、羥基、保護(hù)的羥基、氰基、硝基、三氟甲基、烷基、烷 氧基、酰基、酰氧基、羧基、保護(hù)的羧基、羧甲基、保護(hù)的羧甲基、 羥甲基、保護(hù)的羥甲基、氨基、保護(hù)的氨基、(單取代)氨基、保護(hù)的(單 取代)氨基、(二取代)氨基、氨甲酰、保護(hù)的氨甲酰、N-(低級(jí)垸基)氨甲 酰、N-((低級(jí)烷基)磺酰基)氨基、N-(苯基磺?；?氨基，或者被取代或 未取代的苯基取代的苯基，使得在后一種情況下，形成聯(lián)苯基或萘基， 或者其中取代苯基環(huán)上兩個(gè)相鄰的烷基取代基一起形成環(huán)垸基，以形 成，例如，四氫萘基或茚滿基。術(shù)語"取代苯基"的例子包括單-、二-、三-、四或五(鹵代)苯基，例如2-、 3-或4-氯苯基、2,6-二氯苯基、2，5-二氯苯基、3,4-二氯苯基、 2、 3-或4-溴苯基、3，4-二溴苯基、3-氯-4-氟苯基、2-、 3-或4-氟苯基、 2,4,6-三氟苯基、2,3，5,6-四氟苯基、2，3,4，5-四氟苯基、2,3,4,5,6-五氟苯 基和類似物；單或二(羥基)苯基，例如2-、 3-或4-羥基苯基、2,4-二羥 基苯基、其保護(hù)的羥基衍生物和類似物；硝基苯基，例如2-、 3-或4-硝基苯基；氰基苯基，例如2-、 3-或4-氰基苯基；單或二(垸基)苯基， 例如2-、 3-或4-乙基苯基、2-、 3-或4-(正丙基)苯基和類似物；單或二 (烷氧基)苯基，例如2,6-二甲氧基苯基、2-、 3-或4-(異丙氧基)苯基、2- 、 3-或4-(叔丁氧基)苯基、3-乙氧基-4-甲氧基苯基和類似物；2-、 3-或4-(保護(hù)的羥基甲基)苯基或3，4-二(羥基甲基)苯基；單-或二(氨基甲 基)苯基或(保護(hù)的氨基甲基)苯基，例如2-、 3-或4-(氨基甲基)苯基或 2,4-(保護(hù)的氨基甲基)苯基；或單-或二(N-(甲基磺酰基氨基))苯基，例 如2-、 3-或4-(N-(甲基磺?；被?)苯基。術(shù)語"取代苯基"還表示其 屮取代基不同的二取代苯基，例如3-甲基-4-羥基苯基、3-羥基-4-硝基 苯基、2-羥基-4-氯苯基和類似物。術(shù)語"苯基烷基"是指與上述垸基之一相連的上述苯基之一，術(shù) 語"取代苯基垸基"是指苯基或烷基或二者被一個(gè)或多個(gè)以上定義的 取代基所取代。這種基團(tuán)的例子包括2-苯基-l-氯乙基、2-(4'-甲氧基苯 基)乙基、4-(2'6'-二羥基苯基)正己基、2-(5'氰基-3'-甲氧基苯基)正戊基、3- (2'6'-二甲基苯基)正丙基、4-氯-3-氨基芐基、6-(4'-甲氧基苯基)-3-羧基 (正己基),5-(4'-氨基甲基苯基)-3-(氨基甲基)正戊基、5-苯基-3-氧代-正戊 -l-基、(4-羥基萘-2-基)甲基和類似物。術(shù)語"取代萘基"是指被一個(gè)或多個(gè)以上的取代基所取代的萘基， 術(shù)語"(1或2萘基)烷基"是指與上述烷基中的一個(gè)連接的萘基(l或 2)。術(shù)語"鹵代"和"鹵素"是指氟、氯、溴或碘基團(tuán)。這些術(shù)語也 可以用于描述一個(gè)或更多個(gè)鹵素，其可以相同或不同。在本發(fā)明中優(yōu) 選的鹵素是氯和氟。術(shù)語"芳基"是指芳香性五元或六元碳環(huán)。優(yōu)選六元環(huán)。 術(shù)語"雜芳基"是指任選取代的芳香性五元或六元雜環(huán)，其具有 l-4個(gè)雜原子，例如氧、硫和/或氮原子，特別是單獨(dú)的或連同硫或氧環(huán)原子的氮。以下環(huán)體系絲術(shù)語“雜芳基”(取代或未取代)所指的雜環(huán)基的表性例子噻吩基、呋喃基、吡咯基、吡咯烷基、咪唑基、異噁唑基、三唑基、噻二唑基、噁二唑基、四唑基、噻三唑基、噁三唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗉基、噠嗪基、噁嗪基、三嗪基、噻二嗪基、四唑并、1，5-[b]噠嗪基和嘌呤基，以及苯并稠合衍生物，例如苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并咪唑基和茚滿基。上述任選取代的雜芳基環(huán)的取代基為1至3個(gè)鹵素、三鹵代甲基、氨基、保護(hù)的氨基、氨基鹽、單-取代氨基、二-取代氨基、羧基、保護(hù) 的羧基、羧酸鹽、羥基、保護(hù)的羥基、羥基的鹽、低級(jí)烷氧基、低級(jí) 烷基硫代、低級(jí)烷基、取代低級(jí)烷基、環(huán)烷基、取代環(huán)烷基、(環(huán)烷基) 烷基、取代(環(huán)烷基)烷基、苯基、取代苯基、苯基垸基和取代苯基烷基。 雜芳基的取代基如上文所定義，或者如下所述。結(jié)合上述雜芳基 環(huán)取代基使用時(shí)，"三鹵代甲基"可以是三氟甲基、三氯甲基、三溴甲基或三碘甲基；"低級(jí)垸氧基"是指C,至Q垸氧基，類似地，"低級(jí)垸 基硫代"是指C,至C4烷基硫代基。術(shù)語"取代低級(jí)烷基"是指被羥基、 保護(hù)的羥基、氨基、保護(hù)的氨基、氰基、鹵素、三氟甲基、單-取代氨 基、二-取代氨基、低級(jí)烷氧基、低級(jí)烷基硫代、羧基、保護(hù)的羧基、 或羧基、氨基和/或羥基鹽取代1至3次的上文定義的低級(jí)烷基。結(jié)合雜芳基環(huán)的取代基使用時(shí)，術(shù)語"取代(環(huán)烷基)垸基"和"取 代環(huán)烷基"如上文所述被"取代烷基"基團(tuán)所列的相同基團(tuán)所取代。 術(shù)語"(單取代)氨基"是指被1個(gè)選自以下的取代基所取代的氨基苯基、取代苯基、烷基、取代垸基、C,至C7?；?、C2至C7烯基、C2至 C7取代烯基、C2至CV炔基、C7至C,6烷基芳基、C7至C,6取代烷基芳基和雜芳基。(單取代)氨基可以額外地具有氨基-保護(hù)基，其被術(shù)語"保 護(hù)的(單取代)氨基"所包括。術(shù)語"(二取代)氨基"是指被兩個(gè)選自以下的取代基取代的氨基苯基、取代苯基、烷基、取代垸基、d至C7 ?；2至C7烯基、C2至C7炔基、C7至C,6取代烷基芳基和雜芳基。兩個(gè)取代基可以相同或不同。術(shù)語"雜芳基(烷基)"表示上文定義的烷 基，其在任意位置被上文定義的雜芳基所取代。而且，上述任選取代的五元或六元雜環(huán)以及上述環(huán)烷基環(huán)，可以任選地稠合到芳香性五元或六元環(huán)體系上，例如稠合在吡啶或三唑體 系上，優(yōu)選稠合在苯環(huán)上。本文所用的術(shù)語"羧基保護(hù)基"是指羧酸基團(tuán)的酯衍生物中的一 種，其常常用于在化合物上的其他官能團(tuán)進(jìn)行反應(yīng)時(shí)對(duì)羧酸基團(tuán)進(jìn)行 阻擋或保護(hù)。這種羧酸保護(hù)基的例子包括叔丁基、4-硝基芐基、4-甲氧基節(jié)基、3，4-二甲氧基節(jié)基、2，4-二甲氧基芐基、2,4,6-三甲氧基芐基、 2，4,6-三甲基節(jié)基、五甲基芐基、3,4-亞甲基二氧芐基、二苯甲基、4，4'-二甲氧基三苯甲基、4,4',4"-三甲氧基三苯甲基、2-苯基丙基、三甲基甲 硅烷基、叔丁基二甲基甲硅垸基、苯甲酰甲基、2,2,2-三氯乙基、p-(三 甲基甲硅烷基)乙基、(3-(二(正丁基)甲基甲硅烷基)乙基、對(duì)甲苯磺?；?乙基、4-硝基芐基磺酰基乙基、烯丙基、肉桂基、l-(三甲基甲硅烷基 甲基)-丙烯基和類似部分。所使用的羧基保護(hù)基的種類并不重要，只要 衍生的羧酸對(duì)后續(xù)反應(yīng)條件穩(wěn)定，并且可以在合適的時(shí)刻不破壞分子 其余部分而脫除。術(shù)語"羥基保護(hù)基"是指很容易切除的與羥基結(jié)合的基團(tuán)，例如 四氫吡喃基、2-甲氧基丙-2-基、l-乙氧基乙-l-基、甲氧基甲基、P-甲氧 基乙氧基甲基、甲基硫代甲基、叔丁基、叔戊基、三苯甲基、4-甲氧基 」三苯甲基、4,4'-二甲氧基三苯甲基、4，4',4"-三甲氧基三苯甲基、芐基、 烯丙基、三甲基甲硅垸基、(叔丁基)二甲基甲硅烷基、2，2，2-三氯乙氧 基羰基和類似物。本文所用的術(shù)語"氨基保護(hù)基"是指氨基的取代基，其常常用于 在分子的其他官能團(tuán)進(jìn)行反應(yīng)時(shí)對(duì)氨基官能團(tuán)進(jìn)行阻擋或保護(hù)。術(shù)語 "保護(hù)的(單取代)氨基"是指在單取代氨基氮原子上有氨基保護(hù)基。這 種氨基保護(hù)基的例子列舉于WO 00/01666。術(shù)語"天然和非天然氨基酸"是指天然氨基酸，以及其他的肽化 學(xué)領(lǐng)域技術(shù)人員在合成天然肽的合成類似物時(shí)常常使用的非蛋白源a-氨基酸，包括D型和L型。天然氨基酸為甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、 亮氨酸、異亮氨酸、絲氨酸、甲硫氨酸、蘇氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、 色氨酸、半胱氨酸、脯氨酸、組氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、谷氨酸、 谷氨酰胺、？羧基谷氨酸、精氨酸、鳥氨酸和賴氨酸。非天然a-氨基 酸的例子包括羥基賴氨酸、瓜氨酸、犬尿氨酸、(4-氨基苯基)丙氨酸、3-(2'-萘基)丙氨酸、3-(l'-萘基)丙氨酸、甲硫氨酸砜、(叔丁基)丙氨酸、(叔丁基)甘氨酸、4-羥基苯基-甘氨酸、氨基丙氨酸、苯基甘氨酸、乙烯 基丙氨酸、炔丙基-甘氨酸、1，2，4-三唑并-3-丙氨酸、甲狀腺原氨酸、6-羥基色氨酸、5-羥基色氨酸、3-羥基犬尿氨酸、3-氨基酪氨酸、三氟甲 基丙氨酸、2-噻吩基丙氨酸、(2-(4-吡啶基)乙基)半胱氨酸、3,4-二甲氧 基-苯丙氨酸、3-(2'-噻唑基)丙氨酸、鵝膏蕈氨酸、l-氨基-l-環(huán)戊垸-甲 酸、l-氨基-l-環(huán)己烷甲酸、使君子氨酸、3-(三氟甲基苯基)丙氨酸、(環(huán) 己基)甘氨酸、硫代組氨酸、3-甲氧基酪氨酸、正亮氨酸、正纈氨酸、 別異亮氨酸、高精氨酸、硫代脯氨酸、脫水脯氨酸、羥基脯氨酸、高 脯氨酸(homoproline)、 二氫吲哚-2-甲酸、1，2,3,4-四氫異喹啉-3-甲酸、 1，2,3,4-四氫喹啉-2-甲酸、a-氨基-正丁酸、環(huán)己基丙氨酸、2-氨基-3-苯 基丁酸、苯基部分在鄰、間或?qū)ξ槐灰粋€(gè)或兩個(gè)如下基團(tuán)取代的苯丙 氨酸(C,至C4烷基、(Ci至C4)烷氧基、鹵素或硝基，或者被亞甲基 二氧基取代一次；b-2-和3-噻吩基丙氨酸；(3-2-和3-呋喃基丙氨酸；|3-2-、 3—和4-吡啶基丙氨酸、(3-(苯并噻吩基-2-和3-基)丙氨酸；卩-(l-和2-萘基) 丙氨酸；絲氨酸、蘇氨酸或酪氨酸的O-烷基化衍生物；S-烷基化的半 胱氨酸、S-烷基化的高半胱氨酸、酪氨酸的O-硫酸酯、O-磷酸酯和O-羧酸酯、3-(磺基)酪氨酸、3-(羧基)酪氨酸、3-(二氧磷基)酪氨酸、酪氨 酸的4-甲磺酸酯、酪氨酸的4-甲膦酸酯、3,5-二碘酪氨酸、3-硝基酪氨 酸、s-烷基賴氨酸和5-烷基鳥氨酸。任何這些cc-氨基酸都可以在(x-位 被甲基取代，在a-氨基側(cè)鏈的芳族殘基的任意位置被鹵素取代，或者 在側(cè)鏈殘基的O、 N或S原子上被合適的保護(hù)基取代。合適的保護(hù)基 如上文討論。根據(jù)溶劑的選擇和其他技術(shù)人員已知的條件，這些化合物可以采 取縮酮或縮醛形式，本發(fā)明組合中這些形式的使用也包括在本發(fā)明之 內(nèi)。這些化合物可以如WO 00/01666或US 6,544,951中所述而制備， 在此將其全文并入作為參考。優(yōu)選的亞組是US 6,544,951中列舉者。 優(yōu)選的式I的化合物選自(3S)-3-[N-(N'-(2-芐基苯基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(l-萘基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯氧 基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(芐基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2',3',5'，6'-四氟苯氧 基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-苯氧基苯基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2',3'，5'，6'-四 氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(l-萘基甲基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2',3',5'，6'-四氟 苯氧基)-4-氧代戊酸；(38)-3-^-^-(4-氯-1-萘基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2'，3'，5'，6'-四 氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-蒽基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2'，3'，5',6'-四氟苯氧 基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(苯乙基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯 氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(苯基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯氧 基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-苯基苯基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2'，3',5',6'-四氟 苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)—3-[N-(N'-(4-正庚基苯基傳氨酰)纈氨酸蜀氨基-5-(2',3'，5'，6'-四 氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(5,6,7,8-四氫-1-萘基)草氨酰)纈氨酸基]氨基 -5-(2'，3'，5'，6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(l-金剛烷基傳氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2',3',5'，6'-四氟 苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(4-氟苯基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2'，3'，5',6'-四氟苯 氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-萘基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2',3',5'，6'-四氟苯氧 基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-甲氧基苯基)草氨酰)纈氨酸萄氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(N"-N'"-聯(lián)苯基氨基)草氨酰)纈氨酸基]氨基 -5-(2'，3',5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(4-吡啶基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2'，3',5',6'-四氟苯 氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-吡嗪基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2'，3',5'，6'-四氟苯 氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(l,2，3，4-四氫-1-萘基)草氨酰)纈氨酸基]氨基 -5-(2',3',5'，6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(3，4，5-三甲氧基芐基)草氨酰)纈氨酸基]氨基 -5-(2'，3'，5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N4二苯甲基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2',3',5'，6'—四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(3-苯氧基苯基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四 氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-叔丁基苯基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四 氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-吡啶基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯 氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2,3,5,6-四氟-4-吡啶基)草氨酰)纈氨酸基]氨基 -5-(2'，3',5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-碘苯基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2',3',5'，6'-四氟苯 氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2，6-二氟苯基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四 氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2,5- 二 -叔丁基苯基)草氨酰)纈氨酸基]氨基 -5-(2'，3'，5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(5二氫化茚基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2',3',5'，6'-四 氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-甲基)草氨酰]纈氨酸基]氨基-5-(2',3',5'，6'-四氟苯氧 基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(正庚基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2',3'，5'，6'-四氟苯氨基氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(叔辛基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯 氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(環(huán)己基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2',3'，5',6'-四氟苯 氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(5-苯基-3-吡唑基)草氨酰)纈氨酸基 -5-(2',3'，5'，6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2，3，4，5-四氟苯基)草氨酰)纈氨酸基 -5-(2'，3'，5'，6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2，3，4，6-四氟苯基)草氨酰)纈氨酸基 -5-(2'，3',5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2,3,5,6-四氟苯基)草氨酰)纈氨酸基 -5-(2'，3',5'，6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2,3,4,5,6-五氟苯基)草氨酰)纈氨酸基 -5-(2',3',5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-苯并咪唑基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2',3'，5',6'-四 氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-( 1 -萘基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2',6'- 二氟苯氧 基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(l-萘基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2'，4',6'-三氟苯氧 基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(l-萘基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(二苯基膦酰氧 基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(l-萘基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(甲基苯基膦酰氧 基)-4-氧代戊酸；(3RS)-3-[N-(N'-(l-萘基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-氟-4-氧代戊酸； (3S)-3-[N-(N'-(苯基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(2'，3',5',6'-四氟苯氧 基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(5,6,7,8-四氫-l-萘基)草氨酰)丙氨酸基]氨基 -5-(2',3',5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-苯基苯基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(2',3',5'，6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-節(jié)基苯基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(2'，3',5'，6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(l-萘基甲基)草氨酰)丙氨酸萄氨基-5-(2',3'，5'，6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-苯氧基苯基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(2'，3'，5'，6'-四 氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(3-苯氧基苯基)草氨酰)丙氨酸基廣基-5-(2',3',5'力'-四 氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(4-苯基苯基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-S-P'，^S',四氟 苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(二苯甲基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(2',3'，5',6'-四氟 苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-苯基苯基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(2'-氟苯氧 基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-叔丁基苯基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(2'-氟苯氧 基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-苯基苯基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(二苯基膦酰 氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(l-萘基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(二苯基膦酰氧 基)-4-氧代戊酸；。S)-HN-(N'-(l-萘基)草氨酰)亮氨酸基]氨基-5-PW,三氟苯氧 基)-4-氧代戊酸；(38)-3-[^1-(^-(1-萘基)草氨酰)(叔丁基)甘氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(l-萘基)草氨酰)(叔丁基)正亮氨酸基]氨基 -5-(2',3，5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(^-(1-萘基)草氨酰)(叔丁基)丙氨酸基]氨基-5-(2'，3'，5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(l-萘基)草氨酰)亮氨酸基]氨基-5-(2'，3'，5',6'-四氟苯氧 基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(l-萘基)草氨酰)亮氨酸基]氨基-5-(甲基苯基膦酰氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(l-萘基)草氨酰)亮氨酸基]氨基-5-氟-4-氧代戊酸； (3S)-3-[N-(N'-(l-萘基)草氨酰)亮氨酸基]氨基-5-(二苯基膦酰氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-(lH-四唑-5-基)苯基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-4-氧 代丁酸；(3S)-3-[N-(N'-(l-金剛垸基)苯基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-4-氧代丁酸；(3S)-3-[N-(N'-(苯基)草氨酰)纈氨酸基腐基-4-氧代丁酸； (3S)-3-[N-(N'-(芐基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-4-氧代丁酸； (3S)-3-[N-(N'-(苯乙基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-4-氧代丁酸； (3S)-3-[N-(N'-(2-苯氧基苯基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-4-氧代丁酸； (3S)-3-[N-(N'-(l-萘基)草氨酰)纈氨酸萄氨基-4-氧代丁酸； (3S)-3-[N-(N'-(2-萘基)草氨酰)纈氨酸蜀氨基-4-氧代丁酸； (3S)-3-[N-(N'-(4-氯-1-萘基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-4-氧代丁酸； (3S)-3-[N-(N'-(5,6，7,8-四氫-l-萘基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-4-氧代 戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(l，2,3,4-四氫-l-萘基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-4-氧代 丁酸；(3S)-3-[N-(N'-(l-萘基甲基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-4-氧代丁酸；(3S)-3-[N-(N'-(l-萘基)草氨酰)亮氨酸萄氨基-4-氧代丁酸；特別優(yōu)選的化合物選自(38)-3-[化(>^'-(2-氟-4-碘苯基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-氯苯基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2'，3',5',6'-四氟苯 氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-溴苯基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2',3'，5',6'-四氟苯 氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-氟苯基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯 氧基)-4_氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-三氟甲基苯基傳氨酰)纈氨酸基腐基-5-(2',3'，5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(l-蒽基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯氧 基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-叔丁基苯基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(2'，3',5',6'-四 氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-三氟甲基苯基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(2，,3，,5，，6，-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2，6-二氟苯基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(2',3'，5'，6'-四 氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(l-萘基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(2'，3',5'，6'-四氟苯氧 基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(4-甲氧基苯基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(2'，3'，5',6'-四 氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-三氟甲基苯基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-4-氧代丁酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-叔丁基甲基苯基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-4-氧代丁酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-芐基苯基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-4-氧代丁酸； (3S)-3-[N-(N'-(2-苯基苯基傳氨酰)纈氨酸基腐基-4-氧代丁酸。 最優(yōu)選地，化合物為(3S)-3-[N-(N'-(2-叔丁基苯基)草氨酰)丙氨酸基:氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸。抗-MAdCAM抗體或其抗原結(jié)合部分優(yōu)選WO2005/067620中公開的抗體，在此將其全文并入作為參考。具體地，所有本文涉及的SEQ IDNo都與WO2005/067620中實(shí)際公開的序列有關(guān)。優(yōu)選地，本發(fā)明中使用的抗-M AdC AM抗體特異性結(jié)合M AdC AM 。再更優(yōu)選地，至少所述抗體的CDR序列是人CDR序列、或人抗體的抗原結(jié)合部分。優(yōu)選地，抗體是人抗體，更優(yōu)選抗體充當(dāng)MAdCAM拮抗劑。本發(fā)明的另一方面是所述抗-MAdCAM抗體的重和/或氫鏈或其可 變區(qū)或其他抗原結(jié)合部分、或編碼前述任意者的核酸分子，以及藥物可接受載體的組合應(yīng)用。本發(fā)明的該方面包括任意前述抗體的片段的應(yīng)用，所述片段包括但不限于Fab片段、F(ab')2片段、單鏈Fv (scFv)片斷。優(yōu)選地，抗-MAdCAM抗體是選自1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1、 6.73.2、 6.77.1、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2-mod、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod或7.26.4-mod的人抑制性抗 -MAdCAM抗體，如WO2005/067620中所公開。優(yōu)選地，抗-MAdCAM 抗體包括輕鏈，所述輕鏈包括選自如WO2005/067620中公開的SEQ ID NO:4、 8、 12、 16、 20、 24、 28、 32、 36、 40、 44、 48、 54、 58、 62、 66或68的氨基酸序列(具有或沒有信號(hào)序列)、或任一個(gè)所述氨基酸 序列的可變區(qū)、或一個(gè)或多個(gè)來自這些氨基酸序列的CDR?？?-MAdCAM抗體優(yōu)選包括重鏈，所述重鏈包括選自如WO2005/067620 中所公開的SEQIDNO: 2、 6、 10、 14、 18、 22、 26、 30、 34、 38、 42、 46、 52、 56、 60或64的氨基酸序列(具有或沒有信號(hào)序列)、或可變 區(qū)的氨基酸序列、或一個(gè)或多個(gè)來自這些氨基酸序列的CDR。抗 -MAdCAM抗體優(yōu)選為包括上述序列任一個(gè)的從CDR1開始至CDR3 結(jié)束的氨基酸序列的人抗-MAdCAM抗體。本發(fā)明中使用的抗 -MAdCAM抗體也可以是包括一個(gè)或多個(gè)任何上述序列的FR區(qū)的抗 -MAdCAM抗體。本發(fā)明的組合中使用的抗-MAdCAM抗體也可以包括如下抗 -MAdCAM抗體，其包括其中已經(jīng)進(jìn)行一處或多處修飾的上述氨基酸 序列之一。例如，抗體中化學(xué)反應(yīng)性的半胱氨酸被另一殘基取代，例 如但不限于，丙氨酸或絲氨酸。取代可以在非規(guī)范(non-canonical)半 胱氨酸處或規(guī)范半胱氨酸處。取代可以在抗體的可變區(qū)域的CDR或框 架區(qū)中或恒定區(qū)域中進(jìn)行。也可以進(jìn)行氨基酸取代，以消除抗體中可能的蛋白水解位點(diǎn)。這 種位點(diǎn)可以在抗體的可變區(qū)域的CDR或框架區(qū)中或者在恒定區(qū)中中發(fā) 生。半胱氨酸殘疾的取代和蛋白水解位點(diǎn)的消除可以降低抗體產(chǎn)品的 異質(zhì)性。精氨酸-甘氨酸對(duì)，形成可能的脫酰胺位點(diǎn)，其可以通過改變 殘基中的一個(gè)或兩個(gè)來消除?？梢赃M(jìn)行氨基酸取代，以在本發(fā)明使用 的抗體的可變區(qū)中加入或消除可能的糖基化位點(diǎn)。本發(fā)明中使用的抗-MAdCAM抗體重鏈區(qū)的C-端賴氨酸可以被切 除?？?MAdCAM抗體的重鏈和輕鏈可以任選地包括信號(hào)序列。WO2005/067620中詳細(xì)描述了本發(fā)明的組合中使用的12種優(yōu)選的 抑制性人抗-MAdCAM單克隆抗體1.7.2、 1.8,2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1、 6.73.2、 6.77.1、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4禾卩9.8.2。 叛-M^C贏貧沐麟應(yīng)舒類抗體可以是IgG、 IgM、 IgE、 IgA或IgD分子。優(yōu)選抗體是IgG 類，并且是IgG,、 IgG2、 IgG3或IgG4子類。更優(yōu)選地，抗-MAdCAM 抗體是子類IgG2或IgG4。更優(yōu)選地，抗-MAdCAM抗體是與 WO2005/067620中描述的抗體1.7.2、 1.8.2、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 6.22.2-mod、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod或7.26.4-mod (其為 IgG2)或者6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1、 6.73.2、 6.77.1或9.8.2 (其 為IgG》相同的類別和子類?？?MAdCAM抗體的類別和子類可以通過本領(lǐng)域任何已知方法來 確定。通常，抗體的類別和子類可以使用對(duì)特定類別和子類的抗體有 特異性的抗體確定。這些抗體是市售的。ELISA、蛋白質(zhì)免疫印跡法以 及其他技術(shù)均可以確定類別和子類。另外可選地，類別和子類可以通 過如下方法確定對(duì)抗體的重鏈和/或輕鏈恒定區(qū)域的全部或部分進(jìn)行 測(cè)序，將其氨基酸序列與各種類別和子類的免疫球蛋白的已知氨基酸 序列進(jìn)行比較，確定抗體的類別和子類為表現(xiàn)出最高序列同源性的類 別。激/^ 7分f游透摔沒本發(fā)明的組合中使用的抗-MAdCAM抗體表現(xiàn)出物種和分子的選 擇性?？?MAdCAM抗體可以結(jié)合人、獼猴或犬MAdCAM。本發(fā)明的 組合中使用的其他抗-MAdCAM抗體不結(jié)合新世紀(jì)猴(New World monkey)物種，例如狨猴?？梢允褂帽绢I(lǐng)域公知的方法確定抗 -MAdCAM抗體的物種選擇性。例如，可以使用蛋白質(zhì)免疫印跡法、 FACS、 ELISA或免疫組織化學(xué)確定物種選擇性。在優(yōu)選的實(shí)施方式中， 可以使用免疫組織化學(xué)確定物種選擇性。本發(fā)明的組合中使用的抗-MAdCAM抗體特異性地結(jié)合 MAdCAM，其對(duì)MAdCAM的選擇性相對(duì)于VCAM、纖連蛋白或任何其他抗原為至少10倍，優(yōu)選至少20、 30、 40、 50、 60、 70、 80或90 倍，最優(yōu)選至少100倍。優(yōu)選地，抗-MAdCAM抗體對(duì)VCAM、纖連 蛋白或任何MAdCAM之外的其他抗原表現(xiàn)不出任何可察覺的結(jié)合力。 可以使用本領(lǐng)域公知的方法遵照說明書的教導(dǎo)測(cè)定抗-MAdCAM抗體 對(duì)MAdCAM的選擇性。例如，可以使用蛋白質(zhì)免疫印跡法、FACS、 ELISA或免疫組織化學(xué)來測(cè)定選擇性。 界M4t/C贏拔沐對(duì)M4dC4M游祭》薪〃力本發(fā)明的組合中使用的抗-MAdCAM抗體優(yōu)選以很高的親和力與 MAdCAM特異性結(jié)合。如通過表面等離子共振，例如BIAcore測(cè)量， 本發(fā)明的組合中使用的一種抗-MAdCAM抗體以3 x 10—8 M或更低的 Kd與MAdCAM特異性結(jié)合。優(yōu)選地，抗體以1 x 10—8或更低或1 x 10—9 M或更低的Kd與MAdCAM特異性結(jié)合。更優(yōu)選地，抗體以1 x 10—1QM 或更低的Kd與MAdCAM特異性結(jié)合。組合中使用的抗體以2.66 x 10—1QM或更低、2.35 x 10—或更低、或9 x 10—12M或更低的Kd與 MAdCAM特異性結(jié)合。優(yōu)選地，抗體以1 x 10—"M或更低的Kd與 MAdCAM特異性結(jié)合。優(yōu)選地，抗體以與選自以下的抗體基本相同的 Kd與MAdCAM特異性結(jié)合:1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1 、 6.73.2、 6.77.1、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2-mod、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod或7.26.4-mod。與參比抗體的"Kd基本相同" 的抗體在相同的實(shí)驗(yàn)中與參比抗體的Kd相比，其Kd為士100pM，優(yōu)選 士50pM，更優(yōu)選士20pM，再更優(yōu)選土10pM、 土5pM或士2pM。優(yōu)選 地，抗體以與包括選自以下WO2005/067620中所公開的抗體的一個(gè)或 多個(gè)可變區(qū)域或一個(gè)或多個(gè)CDR的抗體基本相同的Kd與MAdCAM特 異性結(jié)合1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1 、 6.73.2、 6.77.1、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2-mod、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod或7.26.4-mod 。優(yōu)選地，抗體以與包括選自以下 WO2005/067620中所公開的氨基酸序列之一或其可變區(qū)域的抗體基本 相同的Kd與MAdCAM結(jié)合SEQIDNO:2、 4、 6、 8、 10、 12、 14、 16、 18、 20、 22、 24、 26、 28、 30、 32、 34、 36、 38、 40、 42、 44、 46、 48、 52、 54、 56、 58、 62、 64、 66或68 (具有或沒有信號(hào)序列)。 優(yōu)選地，抗體以與以下抗體基本相同的Kd與MAdCAM結(jié)合所述抗體包括一個(gè)或多個(gè)來自包括選自以下WO2005/067620中所公開的氨基 酸序列的抗體的CDR: SEQIDNO:2、 4、 6、 8、 10、 12、 14、 16、 18、 20、 22、 24、 26、 28、 30、 32、 34、 36、 38、 40、 42、 44、 46、 48、 52、 54、 56、 58、 62、 64、 66或68?？?MAdCAM抗體與MAdCAM的結(jié)合親和力可以通過本領(lǐng)域任 何已知方法測(cè)定。在一個(gè)實(shí)施方式中，結(jié)合親和力可以通過競(jìng)爭(zhēng) ELISA、 RIA或表面等離子共振(例如BIAcore)來測(cè)量。在更優(yōu)選的 實(shí)施方式中，結(jié)合親和力通過表面等離子共振測(cè)量。在進(jìn)一步優(yōu)選的 實(shí)施方式中，結(jié)合親和力和解離速率使用BIAcore測(cè)量。測(cè)定結(jié)合親 和力的例子可以參見WO2005/067620。貧-My^C4M貧沐游 ,銜本發(fā)明的組合中使用的抗-MAdCAM抗體在體外或體內(nèi)的半衰期 為至少1天。優(yōu)選地，抗體或其部分的半衰期為至少3天。更優(yōu)選地， 抗體或其部分的半衰期為4天或更長(zhǎng)。再更優(yōu)選地，抗體或其部分的 半衰期為8天或更長(zhǎng)。本發(fā)明中使用的抗體或其抗原結(jié)合部分也可以 進(jìn)行衍?；蛐揎棧蛊浒胨テ诟L(zhǎng)，如下文所討論。在另一優(yōu)選實(shí) 施方式中，抗體可以含有點(diǎn)突變，以增加血清半衰期，例如WO 00/09560 屮所描述?？贵w半衰期可以通過任何本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的方式測(cè)量。 例如，抗體半衰期可以通過蛋白質(zhì)免疫印記法、ELISA或RIA在合適 的時(shí)間內(nèi)進(jìn)行測(cè)量?？贵w半衰期可以在任何合適的動(dòng)物體內(nèi)測(cè)量，例 如靈長(zhǎng)類，如獼猴或人。M4t/C4M表位凝貧-M4c/C4M叛沐^^游緣定本發(fā)明還提供了人抗-MAdCAM抗體與抗纖維化藥劑的組合，該 抗體結(jié)合與本文提供的人抗-MAdCAM抗體相同的抗原或表位。而且， 本發(fā)明提供了人抗-MAdCAM抗體與抗纖維化藥劑的組合，該抗體與 人抗-MAdCAM抗體競(jìng)爭(zhēng)或交叉競(jìng)爭(zhēng)。優(yōu)選地，人抗-MAdCAM抗體 為1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1、 6.73.2、 6.77.1、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2-mod、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod 或7.26.4-mod。優(yōu)選地，人抗-MAdCAM抗體包括來自選自以下抗體的 一個(gè)或多個(gè)可變區(qū)域或一個(gè)或多個(gè)CDR: 1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、6.34.2、 6.67.1、 6.73.2、 6.77,1、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2，d、 6.34.2，d、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod或7.26.4-mod。優(yōu)選地，人抗 -MAdCAM抗體包括選自以下WO2005/067620中所述的氨基酸序列之 一或其可變區(qū)域SEQIDNO:2、 4、 6、 8、 10、 12、 14、 16、 18、 20、 22、 24、 26、 28、 30、 32、 34、 36、 38、 40、 42、 44、 46、 48、 52、 54、 56、 58、 62、 64、 66或68 (具有或沒有信號(hào)序列)。優(yōu)選地，人 抗-MAdCAM抗體包括一個(gè)或多個(gè)來自以下抗體的CDR，所述抗體包 括選自如下WO2005/067620中所述的氨基酸序列之一SEQ ID NO: 2、 4、 6、 8、 10、 12、 14、 16、 18、 20、 22、 24、 26、 28、 30、 32、 34、 36、 38、 40、 42、 44、 46、 48、 52、 54、 56、 58、 62、 64、 66或68。 可以使用多種本領(lǐng)域已知的方法確定抗-MAdCAM抗體是否結(jié)合 與其他抗-MAdCAM抗體相同的抗原。例如，可以使用已知的抗 -MAdCAM抗體來捕獲抗原，將抗原從抗-MAdCAM抗體中洗脫，然 后測(cè)定檢驗(yàn)抗體是否與洗脫出的抗原結(jié)合?？梢酝ㄟ^如下方法確定抗 體是否與抗-MAdCAM抗體競(jìng)爭(zhēng)在飽和條件下使抗-MAdCAM抗體 與MAdCAM結(jié)合，然后測(cè)量檢驗(yàn)抗體與MAdCAM結(jié)合的能力。如果 檢驗(yàn)抗體能夠同時(shí)與MAdCAM和抗-MAdCAM抗體結(jié)合，則檢驗(yàn)抗體 與抗-MAdCAM抗體的不同表位結(jié)合。但是，如果檢驗(yàn)抗體不能同時(shí) 與MAdCAM結(jié)合，則檢驗(yàn)抗體與人抗-MAdCAM抗體競(jìng)爭(zhēng)。該實(shí)驗(yàn)可 以使用ELISA或表面等離子共振或優(yōu)選的BIAcore進(jìn)行。為了檢驗(yàn)抗 -MAdCAM抗體是否與其他抗-MAdCAM抗體交叉競(jìng)爭(zhēng)，可以雙向使 用上述的競(jìng)爭(zhēng)方法，即確定已知抗體是否阻斷檢驗(yàn)抗體以及相反的情 況。輕淑疆縫娜鄉(xiāng)本發(fā)明還提供了抗-MAdCAM抗體與抗纖維化藥劑的組合，該抗 體包括人k基因編碼的輕鏈可變區(qū)。優(yōu)選地，輕鏈可變區(qū)由人VicA2、 A3、 A26、 B3、 012或018基因族編碼。優(yōu)選地，輕鏈包括從幼體 (germline)人VkA2、 A3、 A26、 B3、 012或018序列不超過11個(gè)、 不超過6個(gè)、或不超過3個(gè)氨基酸置換。優(yōu)選地，氨基酸置換是保守 置換。優(yōu)選地，相對(duì)于幼體氨基酸序列，抗-MAdCAM抗體的VL含有與任意一個(gè)或多個(gè)抗體1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1 、 6.73.2、 6.77.1 、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2-mod、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod或7.26.4-mod的VL相同的突變。本發(fā)明包括抗-MAdCAM抗體與抗纖維化藥劑的組合，該抗體采用與所示例的抗體相同的人Vk 和人Jic基因?？贵w可以包括與一個(gè)或多個(gè)所示例的抗體相同的一個(gè)或 多個(gè)從幼體的突變，或者抗體可以在一個(gè)或多個(gè)與所示例的抗體相同 的位置處包括不同的置換。例如，抗-MAdCAM抗體的VL可以含有一 個(gè)或多個(gè)與抗體7.16.6中存在者相同的氨基酸置換，以及另一個(gè)與抗 體7.26.4相同的氨基酸置換。通過這種方式，人們可以混合并匹配不 同的抗體結(jié)合特性，以改變，例如，抗體對(duì)MAdCAM的親和力或其 從抗原解離的速率。突變可以在與發(fā)現(xiàn)于任何一個(gè)或多個(gè)以下抗體的 VL中的相同的位置進(jìn)行1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1、 6.73.2、 6.77.1、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2-mod、 6.34.2-mod、6.67.1- mod、 6.77.1-mod或7.26.4-mod，但是保守氨基酸置換不使用相 同的氨基酸進(jìn)行。例如，如果相比于以下抗體之一的幼體1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67,1、 6.73.2、 6.77.1、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2-rnod、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod或7.26.4-mod， 氨基酸置換為谷氨酸，則可以保守地置換天冬氨酸。類似地，如果氨 基酸置換為絲氨酸，則可以保守地置換蘇氨酸?？?MAdCAM抗體的輕鏈可以包括與1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1、 6.73.2、 6.77.1、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22,2-mod、6.34.2- mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod或7.26.4-mod的VL氨基酸序列 相同的氨基酸序列。輕鏈優(yōu)選地包括與1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1、 6.73.2、 6.77.1、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2-mod、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod或7.26.4-mod的輕鏈CDR區(qū)相同 的氨基酸序列。輕鏈可以包括具有至少一個(gè)1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1、 6.73.2、 6.77.1、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2-mod、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod或7.26.4-mod的輕鏈CDR區(qū)的氨 基酸序列。輕鏈可以包括具有來自不同輕鏈的CDR的氨基酸序列，該 不同輕鏈?zhǔn)褂孟嗤腣k和Jk基因。優(yōu)選來自不同輕鏈的CDR獲自 1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1、 6.73,2、 6.77.1、 7.16.6、7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2-mod、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod 或7.26.4-mod。優(yōu)選輕鏈包括選自如下WO2005/067620中所述的具有 或沒有信號(hào)序列的氨基酸序列SEQIDNO:4、 8、 12、 16、 20、 24、 28、 32、 36、 40、 44、 48、 54、 58、 62、 64、 66或68。優(yōu)選輕鏈包括 由選自如下WO2005/067620中所述的核苷酸序列所編碼的氨基酸序 歹lj: SEQIDNO:3、 7、 11、 15、 19、 23、 27、 31、 35、 39、 43、 47、 53、 57、 61、 65或67 (具有或沒有信號(hào)序列)，或者編碼其中有1-11 個(gè)氨基酸被插入、缺失或置換的氨基酸序列的核苷酸序列。優(yōu)選地， 氨基酸置換是保守氨基酸置換。抗體或其部分可以包括^輕鏈。本發(fā)明還提供了抗-MAdCAM抗體或其部分與抗纖維化藥劑的組 合，該抗體包括人VH基因序列或衍生自人VH基因的序列。重鏈氨 基酸序列可以源自人VH 1-18、 3-15、 3-21、 3-23、 3-30、 3-33或4-4 基因族。優(yōu)選地，重鏈包括不多于15處、不多于6處或不多于3處的 從幼體人VH1-18、 3-15、 3-21、 3-23、 3-30、 3-33 or 4-4基因序列的氨 基酸改變。WO2005/067620中所描述的SEQ IDNO: 2、 6、 10、 14、 18、 22、 26、 30、 34、 38、 42和46提供了 12種可以用于本發(fā)明的組合的抗 -MAdCAM抗體的全長(zhǎng)重鏈。優(yōu)選地，相對(duì)于幼體氨基酸序列，抗-MAdCAM抗體的VH含有 與任意-一個(gè)或多個(gè)如下抗體的VH的相同突變1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1、 6.73.2、 6.77.1、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2掘d、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod或7.26.4-mod。與上 述討論類似，抗體包括一處或多處與一個(gè)或多個(gè)所示例的抗體相同的 從幼體的突變?？贵w還可以在一處或多處與一個(gè)或多個(gè)所示例的抗體 相同的位置包括不同的置換。例如，抗-MAdCAM抗體的VH可以含 有與抗體7.16.6中所存在者相同的氨基酸置換，以及另一處與抗體 7.26.4相同的氨基酸置換。通過這種方式，人們可以混合并匹配不同的 抗體結(jié)合特性，以改變，例如，抗體對(duì)MAdCAM的親和力或其從抗 原解離的速率。相比較于幼體的氨基酸置換，可以在發(fā)現(xiàn)于任何一個(gè) 或多個(gè)以下參比抗體的VL中的來自幼體的置換的相同位置進(jìn)行 1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1、 6.73.2、 6.77,1、 7.16.6、7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2-mod、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod 或7.26.4-mod，但是該位置被不同的殘基置換，其為相比較于參比抗體 的保守置換。本發(fā)明的組合中使用的抗-MAdCAM抗體的重鏈優(yōu)選包括與 1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1、 6.73.2、 6.77.1、 7.16.6、7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2-mod、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod 或7.26.4-mod的VL氨基酸序列相同的氨基酸序列。更優(yōu)選地，重鏈 包括與1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1、 6.73.2、 6.77.1、7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2-mod、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod或7.26.4-mod的重鏈CDR區(qū)相同的氨基酸序列。優(yōu)選地， 重鏈包括來自至少一個(gè)1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1、 6.73.2、 6.77.1、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2，d、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod或7.26.4-mod的重鏈CDR區(qū)的氨基酸序列， 或者重鏈可以包括具有來自不同重鏈的CDR的氨基酸序列。優(yōu)選地， 來自不同重鏈的CDR獲自1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1、 6.73.2、 6.77.1、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2-mod、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod或7.26.4-mod 。優(yōu)選重鏈包括選自如下 WO2005/067620中所述的具有或沒有信號(hào)序列的氨基酸序列SEQ ID NO: 2、 6、 10、 14、 18、 22、 26、 30、 34、 38、 42、 46、 52、 56、 60 或64。重鏈還可以包括由選自如下WO2005/067620中所述的核苷酸序 列所編碼的氨基酸序列SEQ ID NO: 1、 5、 9、 13、 17、 21、 25、 29、 33、 37、 41、 45、 51、 55、 59或63，或者編碼其中有1-15個(gè)氨基酸被 插入、缺失或置換的氨基酸序列的核苷酸序列。優(yōu)選氨基酸置換是保 守氨基酸置換。制造抗體的核酸、載體、宿主細(xì)胞和重組方法制造這些抗體的核酸、載體、宿主細(xì)胞和重組方法描述于WO 2005/067620中。 衍生化和標(biāo)記的抗體本發(fā)明的組合的抗體或抗體部分可以加以衍生化，或者與另一分 子(例如另一肽或蛋白)連接。通常，抗體或其部分加以衍生化，使 得MAdCAM結(jié)合不受衍生化或標(biāo)記的不利影響。因此，用于本發(fā)明的組合的抗體或抗體部分意在包括本文所述的人抗-MAdCAM抗體的天然和修飾的形式。例如，本發(fā)明中使用的抗體或抗體部分可以與一 個(gè)或多個(gè)其他分子實(shí)體功能性連接(通過化學(xué)耦連、基因融合、非共 價(jià)結(jié)合或通過其他方式)，例如另一抗體(例如雙特異性抗體或雙功能抗體(diabody))、檢測(cè)試劑、細(xì)胞毒性試劑、藥物試劑和/或可以調(diào)節(jié) 抗體或抗體部分與另一分子(例如鏈親和素核心區(qū)或聚組氨酸標(biāo)記) 的結(jié)合的蛋白或肽。一種類型的衍生化抗體通過將兩個(gè)或多個(gè)抗體(相同類型或不同 類型，例如，以產(chǎn)生雙特異性抗體)交聯(lián)產(chǎn)生。合適的交聯(lián)劑包括具 有兩個(gè)被合適的間隔基隔開的兩個(gè)不同反應(yīng)基團(tuán)的異雙官能性 (heterobifunctional)交聯(lián)劑(例如m-馬來酰亞胺苯甲酰-N-羥基琥珀 酰亞胺酯)或同雙官能性(homobifunctional)交聯(lián)劑(例如二琥珀酰 亞胺基辛二酸酯)。這些交聯(lián)劑可以獲自Pierce Chemical Company, Rockford, III。另一類型的衍生化抗體是標(biāo)記抗體。可以用于本發(fā)明的抗體或抗 體部分衍生化的檢測(cè)試劑包括熒光化合物，包括熒光素、熒光素異硫 氰酸酯、若丹明、5-二甲基胺-l-萘磺?；取⒃寮t蛋白、鑭系磷 (lanthanide phosphor)和類似物?？贵w還可以用可用于檢測(cè)的酶來標(biāo) 記，例如辣根過氧化物酶、(3-半乳糖苷酶、熒光素酶、堿性磷酸酶、葡 糖氧化酶和類似物。當(dāng)抗體用可檢測(cè)酶標(biāo)記時(shí)，其通過添加額外的試 劑檢測(cè)，酶用于產(chǎn)生可以鑒別的反應(yīng)產(chǎn)物。例如，當(dāng)存在試劑辣根過 氧化物酶時(shí)，加入過氧化氫和二氨基聯(lián)苯胺產(chǎn)生可以檢測(cè)的著色反應(yīng) 產(chǎn)物?？贵w也可以用生物素標(biāo)記，并通過抗生物素蛋白或鏈親和素結(jié) 合的間接測(cè)量而檢測(cè)?？贵w可以用磁性試劑例如釓標(biāo)記?？贵w還可以 用被二次報(bào)告基因(reporter)(例如，亮氨酸拉鏈對(duì)(zipper pair)序 列、二次抗體結(jié)合位點(diǎn)、金屬結(jié)合區(qū)域、表位標(biāo)記)識(shí)別的預(yù)定多肽 表位標(biāo)記。在一些實(shí)施方式中，標(biāo)記通過不同長(zhǎng)度的間隔基手臂(spacer arm)連接，以減少可能的空間阻礙。抗-MAdCAM抗體也可以用放射性同位素標(biāo)記的氨基酸來標(biāo)記。放射性同位素標(biāo)記可以用于診斷和治療用途。例如，放射性同位素標(biāo) 記可以用于通過x-射線或其他診斷技術(shù)來檢測(cè)表達(dá)MAdCAM的組織。而且，放射性同位素標(biāo)記可以在治療上用作患病組織或表達(dá)MAdCAM的腫瘤的毒素。多肽標(biāo)記的例子包括但不限于如下放射性同位素或放射性核素3H、 l4C、 l5N、 35S、 90Y、 "Tc、川In、 125I、 1311?？?MAdCAM抗體也可以用化學(xué)基團(tuán)衍生化，例如聚乙二醇 (PEG)、甲基或乙基、或糖基。這些基團(tuán)可以用于提高抗體的生物特 性，例如增加血清半衰期或增加組織結(jié)合力。該方法學(xué)還可以應(yīng)用于 任何抗原結(jié)合片斷或抗-MAdCAM抗體的形式。 藥物組合物和試劑盒在另一方面，本發(fā)明提供了包括抑制性人抗-MAdCAM抗體的組 合物，以及用該組合物治療受試者的方法。在一些實(shí)施方式中，治療 的受試者是人。在其他實(shí)施方式中，受試者是獸醫(yī)受試者。在一些實(shí) 施方式中，獸醫(yī)受試者是犬或非人靈長(zhǎng)類。治療可以包括將一種或多種抑制性抗-MAdCAM單克隆抗體或其 抗原結(jié)合片段單獨(dú)給藥或與藥物可接受的載體結(jié)合給藥。抑制性抗 -MAdCAM抗體以及包括其的組合物可以與一種或多種其他的治療劑、 診斷劑或預(yù)防劑組合給藥。如本文所使用，"藥物可接受的載體"是指生理學(xué)可相容的任意和 全部的溶劑、分散介質(zhì)、涂層、抗菌劑和抗真菌劑、等滲和吸收促進(jìn) 或延緩劑和類似物。藥物可接受的載體的一些例子有水、鹽水、磷酸 鹽緩沖鹽水、具有氯化鈉的醋酸鹽緩沖液、葡萄糖、甘油、聚乙二醇、 乙醇和類似物、以及其組合。在許多情況下，其優(yōu)選在組合物中包括 等滲劑，例如糖、如甘露醇、山梨糖醇的多元醇、或氯化鈉。藥物可 接受的物質(zhì)的其他例子有表面活性劑、潤(rùn)濕劑和提高抗體半衰期或有 效性的微量輔助物質(zhì)，例潤(rùn)濕劑或乳化劑、防腐劑或緩沖劑。本發(fā)明中使用的組合物可以是多種形式，例如液體、半固體和固 體劑型，例如液體溶液(例如可注射或可輸注的溶液)、分散體或懸浮 體、片劑、丸劑、凍干餅、干燥粉末、脂質(zhì)體和栓劑。優(yōu)選的形式取 決于既定的給藥方式和治療應(yīng)用。典型的優(yōu)選組合物是可注射或可灌 注溶液的形式，例如類似于用于人被動(dòng)免疫的那些組合物。優(yōu)選的給 藥方式是腸胃外(例如靜脈、皮下、腹膜內(nèi)、肌內(nèi)、皮內(nèi))。在優(yōu)選的 實(shí)施方式中，抗體通過靜脈內(nèi)灌注或注射給藥。在另一優(yōu)選的實(shí)施方式中，抗體通過肌內(nèi)、皮內(nèi)或皮下注射給藥。如果需要，抗體可以通 過使用泵、灌腸、栓劑或留置式儲(chǔ)器或類似方式給藥。藥物組合物通常必須是無菌的，而且在制造和存儲(chǔ)條件下都很穩(wěn) 定。組合物可以配置成溶液、凍干餅、干燥粉末、微乳液、分散體、 脂質(zhì)體或其他適于高藥物濃度的有序結(jié)構(gòu)。無菌可注射的溶液可以通過將所需量的抗-MAdCAM抗體加入到具有所需要的上述所列舉成分的一種或組合的合適溶劑中，然后進(jìn)行滅菌來制備。在用于制備無菌 可注射溶液的無菌粉末的情況下，優(yōu)選的制備方法是真空干燥和冷凍 干燥，其由其之前的無菌溶液產(chǎn)生活性成分加任何額外所需成分的粉末。通常，分散體通過將活性化合物加入到含有基礎(chǔ)分散介質(zhì)和上述 列舉的所需其他成分的無菌載體中來制備。溶液的所需特性可以，例 如，通過使用表面活性劑來保持，而在分散體的情況下，通過使用表 面活性劑、磷脂和聚合物來保持所需粒徑。延長(zhǎng)可注射組合物的吸收 口J"以通過在組合物中包括延緩吸收的藥劑，例如單硬脂酸鹽、聚合材 料、油和明膠而實(shí)現(xiàn)。本發(fā)明的組合物的抗體可以通過多種本領(lǐng)域已知的方法給藥，盡 管對(duì)于許多治療用途來說，優(yōu)選的給藥途徑/方式是皮下、肌內(nèi)、皮內(nèi) 或靜脈內(nèi)灌注。如本領(lǐng)域技術(shù)人員所認(rèn)識(shí)，給藥的途徑和/或方式將取 決于所需的結(jié)果。在某些實(shí)施方式中，抗體組合物可以用保護(hù)抗體免于迅速釋放的 載體制備，例如受控釋放制劑，包括植入物、經(jīng)皮貼劑和微膠囊遞送 系統(tǒng)?？梢允褂蒙锟山到?、生物相容的聚合物，例如乙烯醋酸乙烯 酯、聚酐、聚乙醇酸、膠原、聚原酸酯和聚乳酸。這些制劑的許多制 備方法是有專利的，或者是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的。參見，例如，Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems (持續(xù)禾口控帝U禾華 放的藥物遞送系統(tǒng))(J. R. Robinson, ed.， Marcel Dekker, Inc., New York (1978》。在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明的組合的抗-MAdCAM抗體可以口服 給藥，例如，用惰性稀釋劑或可吸收可食用的載體。化合物(以及所 需的其他成分)也可以包封在硬殼或軟殼的明膠膠囊中、壓縮成片劑、 或直接加入到受試者飲食當(dāng)中。對(duì)于口服治療給藥，抗-MAdCAM抗體可以結(jié)合有賦形劑，并以可攝取片劑、口腔片劑、錠劑、膠囊、酏劑、懸浮劑、糖漿、餅狀(wafer)和類似物的形式使用。為了將本發(fā) 明的化合物通過腸胃外給藥以外的方式給藥，可能有必要將化合物用 防止其失活的材料包衣、或者與該材料共同給藥。本發(fā)明的組合物可以包括"治療有效量"或"預(yù)防有效量"的本 發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合部分。"治療有效量"是指以必要的劑量和時(shí) 間有效實(shí)現(xiàn)所需治療結(jié)果的量?？贵w或抗體部分的治療有效量可以根 據(jù)多種因素變化，例如個(gè)體的疾病狀態(tài)、年齡、性別和體重，以及抗 體或抗體部分在個(gè)體體內(nèi)引起所需反應(yīng)的能力。治療有效量也是抗體 或抗體部分的任何毒性或有害效果被治療上有益的效果超過的量。"預(yù) 防有效量"是指以必要的劑量和時(shí)間有效實(shí)現(xiàn)所需預(yù)防結(jié)果的量。通 常，由于預(yù)防劑量在疾病發(fā)生前或其早期用于受試者，預(yù)防有效量可 以少于治療有效量。劑量服法可以加以調(diào)節(jié)，以提供最優(yōu)的所需反應(yīng)(例如治療或預(yù) 防反應(yīng))。例如，可以給予單個(gè)的大藥丸，可以隨著時(shí)間給予數(shù)份分開 的劑量，或者可以根據(jù)治療狀況的緊急程度成比例地減少或增加劑量。 特別有利的是，將腸胃外組合物配制成易于給藥且劑量均勻的劑量單 位劑型。本文所使用的劑量單位劑型是指適合于被治療的哺乳動(dòng)物受 試者單一劑量的物理上分散的單元；每個(gè)單元含有計(jì)算成產(chǎn)生所需治 療效果的預(yù)定量活性化合物以及所需的藥物載體。本發(fā)明的劑量單位 劑型的說明通過并直接取決于以下因素而規(guī)定(a)抗-MAdCAM抗 體或其部分的獨(dú)特特性和要實(shí)現(xiàn)的特定治療或預(yù)防效果；(b)配制用 于個(gè)體中治療敏感度的該抗體的工藝本身的限制。本發(fā)明的抗體或抗體部分的治療或預(yù)防有效量的示例性、非限制 性范圍為0.025-50 mg/kg，更優(yōu)選0.1-50 mg/kg，更優(yōu)選0.1-25、 0.1-10 或0.1-3 mg/kg。在一些實(shí)施方式中，制劑含有在20 mM醋酸鈉、pH 5.5、 40 mM NaCl和0.2 mg/mL聚山梨酸酯80的緩沖液中的5 mg/mL抗體。 在其他實(shí)施方式中，制劑含有10mg/ml抗體，其在用冰乙酸調(diào)節(jié)至pH 5.5的2.73 mg/ml醋酸鈉三水化物、45 mg/ml甘露醇、0.02 mg/ml EDTA 二鈉鹽二水化物、0.2mg/ml聚山梨酸酯80中，例如用于靜脈內(nèi)應(yīng)用。 在其它實(shí)施方式中，制劑含有50mg/ml抗體，其在用冰乙酸調(diào)節(jié)至pH5.5的2.73 mg/ml醋酸鈉三水化物、45 mg/ml甘露醇、0.02 mg/ml EDTA 二鈉鹽二水化物、0.4 mg/ml聚山梨酸酯80中，例如用于皮下或皮內(nèi)應(yīng) 用。應(yīng)當(dāng)注意，劑量值可以隨著待緩解病狀的類型和嚴(yán)重程度而變化。 應(yīng)進(jìn)一步理解到，對(duì)于任何特定的受試者，應(yīng)當(dāng)根據(jù)個(gè)體的需要和給 予并指導(dǎo)組合物給藥的人的專業(yè)判斷，隨著時(shí)間調(diào)整具體的劑量服法， 而且本文所述的劑量范圍僅僅是為了舉例說明，并不是要對(duì)要求保護(hù) 的組合物的范圍或?qū)嵤┻M(jìn)行限定。本發(fā)明的另一方面提供了包括本發(fā)明的抗-MAdCAM抗體或抗體 部分或者包括本文所述的抗體以及抗纖維化藥劑的組合物的試劑盒。 除抗體或組合物和抗纖維化藥劑以外，試劑盒還可以包括其他診斷或 治療藥劑。試劑盒還可以包括在診斷或治療方法中應(yīng)用的說明書。 基斷抓本發(fā)明的組合中使用的抗體可以通過基因治療給予對(duì)其有需要的 患者。該治療可以是體內(nèi)或先體外后體內(nèi)的。在優(yōu)選的實(shí)施方式中， 可以將編碼重鏈和輕鏈的核酸分子給予患者。在更優(yōu)選的實(shí)施方式中， 將核酸分子給藥，使得它們穩(wěn)定地整聯(lián)成B細(xì)胞的染色體，因?yàn)檫@些 細(xì)胞專用于產(chǎn)生抗體。在優(yōu)選的實(shí)施方式中，前體B細(xì)胞先體外后體 內(nèi)轉(zhuǎn)染或感染，并再移植到對(duì)其有需要的患者體內(nèi)。在另一實(shí)施方式 中，前體B細(xì)胞或其他細(xì)胞使用已知感染所關(guān)注細(xì)胞類型的重組病毒 在體內(nèi)感染?；蛑委熤型ǔＪ褂玫妮d體包括脂質(zhì)體、質(zhì)粒和病毒載 體。示范性的病毒載體有逆轉(zhuǎn)錄酶病毒、腺病毒和與腺相關(guān)性的病毒。 在體內(nèi)或先體外后體內(nèi)感染后，通過從被治療患者中取樣，并使用本 領(lǐng)域公知或本文所討論的任何免疫檢驗(yàn)法，可以監(jiān)控抗體表達(dá)的水平。在優(yōu)選的實(shí)施方式中，基因療法包括給予編碼抗-MAdCAM抗體 的重鏈或其抗原結(jié)合部分的分離核酸分子，以及表達(dá)該核酸分子的步 驟。在另一實(shí)施方式中，基因療法包括給予編碼抗-MAdCAM抗體的 輕鏈或其抗原結(jié)合部分的分離核酸分子，以及該表達(dá)核酸分子的步驟。 在更優(yōu)選的方法中，基因療法包括給予編碼本發(fā)明的抗-MAdCAM抗 體的重鏈或其抗原結(jié)合部分的分離核酸分子、編碼輕鏈或其抗原結(jié)合 部分的核酸分子，以及表達(dá)核酸分子的步驟?；虔煼ㄟ€可以包括給 予其他抗炎藥劑或免疫調(diào)節(jié)藥劑的步驟。通過抗-MAdCAM抗體抑制依賴cuBVMAdCAM的粘附本發(fā)明還提供了抗-MAdCAM抗體與抗纖維化藥劑的組合，該抗 體結(jié)合MAdCAM，并抑制帶有(X4P7-整聯(lián)蛋白的細(xì)胞與MAdCAM或其 他同源配體(例如L-選擇素)與MAdCAM的結(jié)合和粘附。在優(yōu)選的 實(shí)施方式中，MAdCAM是人的，并且是可溶形式的，或者在細(xì)胞表面 表達(dá)。在另一優(yōu)選的實(shí)施方式中，抗-MAdCAM抗體是人抗體。在另 一實(shí)施方式中，抗體或其部分以不大于50 nM的ICso值抑制014(37和 MAdCAM之間的結(jié)合。在優(yōu)選的實(shí)施方式中，ICs。值不大于5nM。在 更優(yōu)選的實(shí)施方式中，IC5。值小于5nM。在更優(yōu)選的實(shí)施方式中，IC50 值小于0.05叱/mL、 0.04 |ig/mL或0.03 jig/mL。在另一優(yōu)選的實(shí)施方式 中，IC50值小于O.5 |ig/mL、 0.4 (ig/mL或0.3 |ig/mL。 IC5。值可以通過 本領(lǐng)域已知的任何方法測(cè)量。典型地，IC5。值可以通過ELISA或粘附 檢驗(yàn)測(cè)量。在優(yōu)選地實(shí)施方式中，IC5o值通過使用天然表達(dá)MAdCAM 的細(xì)胞或組織、或者已經(jīng)改造成表達(dá)MadCAM的細(xì)胞或組織，通過粘 附化驗(yàn)來測(cè)量。除非本文中另有定義，本發(fā)明使用的科學(xué)和技術(shù)術(shù)語的含義是本 領(lǐng)域普通技術(shù)人員通常理解的含義。而且，除非上下文另有要求，單 數(shù)術(shù)語應(yīng)包括復(fù)數(shù)，復(fù)數(shù)術(shù)語應(yīng)包括單數(shù)。通常，有關(guān)本文所述的細(xì) 胞和組織培養(yǎng)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、遺傳學(xué)、蛋白質(zhì)和 核酸化學(xué)和雜交的術(shù)語及其技術(shù)是本領(lǐng)域公知并通常使用的。除非另 外指出，本發(fā)明的方法和技術(shù)通常根據(jù)本領(lǐng)域公知的常規(guī)方法進(jìn)行， 如本說明書中引用和討論的各種通用和更具體的參考文獻(xiàn)中所描述。 參見，例如，Sambrook等人,_Mo/ecw/ar C7om'wgvZ^6oratof_y _Maw"fl/f分f克虔.'實(shí)教皇手#入2nd ed.， Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (1989)禾口 Ausubel等人，CWeW尸ratocoAs Mo/ecw/ar Szb/ogy f分f生激學(xué)爐游觀/f方法J , Greene Publishing Associates (1992)，以及Harlow禾口 Lane, Jw"6cxi/es:爿丄a6orato^y Afawwa/fi沐.'實(shí)^^皇手U ， Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (1990)，在此將其并入本文作為參考。酶促反應(yīng)和提純技 術(shù)如本領(lǐng)域通常進(jìn)行那樣根據(jù)制造商的說明書，或者如本文所描行。使用標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)進(jìn)行化學(xué)合成、化學(xué)分析、藥物制備、配制和遞送 以及患者的治療。術(shù)語"多肽"包括天然或人工的蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)片段和蛋白質(zhì)序 列的多肽類似物。多肽可以是單體或聚合的。術(shù)語"分離蛋白質(zhì)"或"分離多肽"是通過其原始或衍生源符合 如下條件的蛋白質(zhì)或多肽(1)與其在天然狀態(tài)下所伴隨的天然結(jié)合的成分不結(jié)合；(2)不含來自相同物種的其他蛋白質(zhì)；(3)由來自不 同物種的細(xì)胞表達(dá)；或(4)在天然中不存在。因此，化學(xué)合成的或者 在不同于其天然起源的細(xì)胞的細(xì)胞系統(tǒng)中合成的多肽，將從其天然結(jié) 合的組分中"分離"。還可以使用本領(lǐng)域公知的蛋白質(zhì)提純技術(shù)，通過 分離使蛋白質(zhì)基本上不含天然結(jié)合的成分。當(dāng)至少大約60-75%的樣品表現(xiàn)出單一物種的多肽時(shí)，蛋白質(zhì)或多 肽是"基本上純的"、"基本上同質(zhì)的"或"基本上提純的"。多肽或蛋 白質(zhì)可以是單體或多體的?；旧霞兊亩嚯幕虻鞍踪|(zhì)通常包括大約 50%、 60%、 70%、 80%或90% W/W的蛋白質(zhì)樣品，更通常大約95% 純度，優(yōu)選大于99%純度。蛋白質(zhì)純度或同質(zhì)度可以通過若干本領(lǐng)域 公知的方式指示，例如蛋白質(zhì)樣品的聚丙烯酰胺凝膠電泳，然后通過 用本領(lǐng)域公知的染色劑對(duì)凝膠進(jìn)行染色，觀測(cè)單個(gè)多肽帶。對(duì)于某些 用途，使用HPLC或本領(lǐng)域公知的其他提純方式提供更高的分離度。本文所使用的術(shù)語"多肽片段"是指具有氨基端和/或羧基端缺失、 但其余氨基酸序列與天然序列相應(yīng)位置相同的多肽。在一些實(shí)施方式 中，片段長(zhǎng)度至少為5、 6、 8或10個(gè)氨基酸。在其他實(shí)施方式中，片 段長(zhǎng)度至少為14個(gè)氨基酸，優(yōu)選至少20個(gè)氨基酸，通常至少50個(gè)氨 基酸，再更優(yōu)選至少70、 80、 90、 100、 150或200個(gè)氨基酸。本文所使用的術(shù)語"多肽類似物"是指包括至少25個(gè)氨基酸的片 段的多肽，該片段基本上與氨基酸序列的一部分相同，并具備以下性 質(zhì)中的至少-一個(gè)(l)在適當(dāng)?shù)慕Y(jié)合條件下特異性結(jié)合MAdCAM， (2) 能夠抑制整014(37聯(lián)蛋白和/或L-選擇素與MAdCAM的結(jié)合，或(3) 能夠降低體內(nèi)或體外的MAdCAM細(xì)胞表面表達(dá)。通常，多肽類似物 包括相對(duì)于天然序列的保守氨基酸置換(或插入或缺失)。類似物的長(zhǎng) 度通常為至少20個(gè)氨基酸，優(yōu)選至少50、 60、 70、 80、卯、100、 150或200個(gè)氨基酸或者更長(zhǎng)，并且常?？梢耘c全長(zhǎng)天然多肽一樣長(zhǎng)。"免疫球蛋白"是一種四聚分子。在天然免疫球蛋白中，每個(gè)四 聚體由兩個(gè)相同的多肽鏈對(duì)組成，每一對(duì)都具有一個(gè)"輕"鏈(大約25 kDa)和一個(gè)"重"鏈(大約50-70 kDa)。每個(gè)鏈的氨基端部分包 括大約100至110或更多個(gè)氨基酸的可變區(qū)，其主要負(fù)責(zé)抗原識(shí)別。 每個(gè)鏈的羧基端部分形成恒定區(qū)，其主要負(fù)責(zé)效應(yīng)器功能。人輕鏈分 類為k和X輕鏈。重鏈分類成ii、 S、 Y、 a或s，并分別形成作為IgM、 IgD、 IgG、 IgA和IgE的抗體同種型。在輕鏈和重鏈內(nèi)，可變區(qū)和恒定 區(qū)通過大約12或更多個(gè)氨基酸的"J"區(qū)連接，重鏈還包括大約10或 更多個(gè)氨基酸的"D"區(qū)。通常參見，F(xiàn),^w^wto〃附w""o/ogy r基鄉(xiāng) 免瘦 ， Ch. 7 (Paul, W., ed.， 2nd ed. Raven Press, N.Y. (1989))(在此鑒 于所有目的將其全文并入作為參考)。每個(gè)重鏈/輕鏈對(duì)的可變區(qū)形成抗 體結(jié)合位點(diǎn)，使得完整的免疫球蛋白具有兩個(gè)結(jié)合位點(diǎn)。免疫球蛋白鏈表現(xiàn)出相同的通過三個(gè)超可變區(qū)連接的相對(duì)保守的 構(gòu)架區(qū)(FR)的總體結(jié)構(gòu)，也稱作互補(bǔ)性決定區(qū)或CDR。來自每一對(duì) 兩個(gè)鏈的CDR通過構(gòu)架區(qū)排列，形成表位特異性結(jié)合位點(diǎn)。輕鏈和重 鏈均從N-端到C-端包括以下結(jié)構(gòu)域FR1、 CDR1、 FR2、 CDR2、 FR3、 CDR3和FR4。每個(gè)結(jié)構(gòu)域的氨基酸的指認(rèn)根據(jù)如下文獻(xiàn)的定義進(jìn)行 Kabat， Se《認(rèn)"c&s1 尸rafez'm1 o//mm鵬o/og7'c"/ 7w em^ f免資學(xué)關(guān)注游蛋 ^^^^"^/J (National Institutes of Health, Bethesda， Md. (1987 and 1991)) 或Chothia & Lesk， J. Mo/. 196:901-917(1987); Chothia等人，A^wm, 342:878-883(1989)，在此將其均全文并入作為參考。"抗體"是指完整的免疫球蛋白，或者是指其與完整抗體競(jìng)爭(zhēng)特 異性結(jié)合的抗原結(jié)合部分。在一些實(shí)施方式中，抗體是其抗原結(jié)合部 分。抗原結(jié)合部分可以通過重組DNA技術(shù)或通過完整抗體的酶促或化 學(xué)切割產(chǎn)生。抗原結(jié)合部分包括，特別是Fab、 Fab'、 F(ab')2、 Fv、 dAb、 和互補(bǔ)性決定區(qū)(CDR)片段、單鏈抗體(scFv)、嵌合抗體、雙功能 抗體、和含有足以使特定抗原與多肽結(jié)合的免疫球蛋的至少一部分的 多肽。Fab片段是由VL、VH、CL和CHI結(jié)構(gòu)域組成的單價(jià)片段；F(ab)2 片段是包括兩個(gè)通過二硫橋在鉸鏈區(qū)連接的Fab片段的二價(jià)片段；Fd 片段由VH和CHI結(jié)構(gòu)域組成；Fv片段由抗體單臂的VL和VH結(jié)構(gòu)域組成；dAb片段(Ward等人，A^w", 341:544-546(1989))由VH結(jié)構(gòu)域組成。如本文使用的，稱作例如1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.34.2、 6.67.1 、 6.77.2、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4或9.8.2的抗體是通過相同名稱的雜交瘤產(chǎn)生的 單克隆抗體。例如，抗體1.7.2通過雜交瘤1.7.2產(chǎn)生。稱作6.22.2-mod、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod或7.26.4-mod的抗體是序列從其 對(duì)應(yīng)的親本通過定位誘變而修飾的單克隆抗體。單鏈抗體(scFv)是VL和VH區(qū)經(jīng)由合成連接基配對(duì)形成單價(jià)分 子的抗體，該連接基使其能夠成為單個(gè)蛋白鏈(Bird等人，5Wewce， 242: 423-426 (1988)和Huston等人，尸rac. 7VW/.爿cad t/&4， 85:5879-5883 (1988))。雙功能抗體是二價(jià)雙特異性抗體，其中VH和VL區(qū)域在單 一多肽鏈上表達(dá)，但使用的連接基太短不能使同一鏈上的兩個(gè)結(jié)構(gòu)域 之間成對(duì)，從而迫使結(jié)構(gòu)域與另一鏈上的互補(bǔ)結(jié)構(gòu)域成對(duì)，產(chǎn)生兩個(gè) 抗原結(jié)合位點(diǎn)(參見，例如，Holliger, P.等人，尸rac. A^/. Jcad OS/i, 90: 6444-6448 (1993)和Poljak, R. J.等人，^n^we， 2:1121-1123 (1994))。 來自本發(fā)明的抗體的一個(gè)或多個(gè)CDR可以共價(jià)或非共價(jià)地結(jié)合到分子 中，使其成為與MAdCAM特異性結(jié)合的免疫粘附素。免疫粘附素可 以作為更大的多肽鏈的一部分與CDR結(jié)合，可以將CDR與另一多肽 鏈共價(jià)連接，或者可以使CDR非共價(jià)結(jié)合。CDR使免疫粘附素與特定 的目標(biāo)抗原特異性結(jié)合?？贵w可以具有一個(gè)或多個(gè)結(jié)合位點(diǎn)。如果有一個(gè)以上的結(jié)合位點(diǎn)， 結(jié)合位點(diǎn)可以彼此相同，或者可以不同。例如，天然免疫球蛋白具有 兩個(gè)相同的結(jié)合位點(diǎn)，單鏈抗體或Fab片段具有一個(gè)結(jié)合位點(diǎn)，而"雙 特異性"或"雙功能性"抗體(雙功能抗體)具有兩個(gè)不同的結(jié)合位 點(diǎn)。"分離抗體"是如下抗體(1)不結(jié)合有天然狀態(tài)下伴隨的天然 結(jié)合的成分，包括其他天然結(jié)合的抗體，(2)不含相同物種的其他蛋白質(zhì)，(3)從不同物種的細(xì)胞表達(dá)，或(4)天然不存在。分離抗體的 例子包括已經(jīng)使用MAdCAM經(jīng)過親和力提純的抗-MAdCAM抗體、通 過雜交瘤或其他細(xì)胞系在體外產(chǎn)生的抗-MAdCAM抗體、和來自轉(zhuǎn)基 因哺乳動(dòng)物或植物的人抗-MAdCAM抗體。如本文所使用的，術(shù)語"人抗體"是指可變區(qū)和恒定區(qū)序列是人 序列的抗體。該術(shù)語包括序列衍生自人基因、但已經(jīng)進(jìn)行改變的抗體， 例如，以增加可能的免疫原性、增加親和力、消除可能導(dǎo)致有害折疊 的半胱氨酸或糖基化位點(diǎn)等。該術(shù)語包括在非人細(xì)胞中重組產(chǎn)生的抗 體，該非人細(xì)胞能夠賦予對(duì)于人細(xì)胞非典型性的糖基化作用。該術(shù)語 還包括轉(zhuǎn)基因小鼠中生成的抗體，其包括一些或全部的人免疫球蛋白重鏈和輕鏈位點(diǎn)(loci)。一方面，本發(fā)明提供了人化抗體。在一些實(shí)施方式中，人化抗體 是從非人物種得到的抗體，其中重鏈和輕鏈的框架和恒定區(qū)的某些氨 基酸已經(jīng)經(jīng)過突變，以避免或消除在人體內(nèi)的免疫反應(yīng)。在一些實(shí)施 方式中，人化抗體可以通過將來自人抗體的恒定區(qū)與非人物種的可變 區(qū)融合而產(chǎn)生。如何產(chǎn)生人化抗體的例子可以參見美國(guó)專利第6,054,297號(hào)、第5,886,152號(hào)和第5,877,293號(hào)。在一些實(shí)施方式中， 本發(fā)明的人化抗-MAdCAM抗體包括本發(fā)明的一種或多種人抗 -MAdCAM抗體的一個(gè)或多個(gè)構(gòu)架區(qū)的氨基酸序列。另一方面，本發(fā)明包括"嵌合抗體"的應(yīng)用。在一些實(shí)施方式中， 嵌合抗體是指含有來自一種抗體的一個(gè)或多個(gè)區(qū)域以及來自一種或多 種其他抗體的一個(gè)或多個(gè)區(qū)域的抗體。在優(yōu)選的實(shí)施方式中， 一個(gè)或 多個(gè)CDR來自本發(fā)明的人抗-MAdCAM抗體。在更優(yōu)選的實(shí)施方式中， 所有CDR都來自本發(fā)明的人抗-MAdCAM抗體。在另一優(yōu)選的實(shí)施方 式中，來自一種以上的本發(fā)明的人抗-MAdCAM抗體的CDR在嵌合抗 體中混合并匹配。例如，嵌合抗體可以包括來自第一人抗-MAdCAM 抗體輕鏈的CDR1，可以與來自第二人抗-MAdCAM抗體輕鏈的CDR2 和CDR3結(jié)合，并且重鏈CDR可以來自第三抗-MAdCAM抗體。而且， 構(gòu)架區(qū)可以來自相同抗-MAdCAM抗體之一，來自一種或更多種不同 抗體，例如人抗體，或者來自人化抗體。"中和抗體"、"抑制性抗體"或拮抗劑抗體是以至少20%抑制014(37 或表達(dá)a4p7的細(xì)胞或任何其他同源配體或表達(dá)同源配體的細(xì)胞與 MAdCAM結(jié)合的抗體。在優(yōu)選的實(shí)施方式中，抗體以至少40%、更優(yōu) 選60%、再更優(yōu)選80%、 85%、 90%、 95%或100%降低/抑制014(37整聯(lián) 蛋白或表達(dá)01437的細(xì)胞與MAdCAM的結(jié)合。結(jié)合降低可以通過本領(lǐng)域普通技術(shù)人員己知的任何方式測(cè)量，例如，在體外競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合檢驗(yàn)中測(cè)量。測(cè)量表達(dá)014(37的細(xì)胞與MAdCAM的結(jié)合降低的例子描述于實(shí)施例1 ?？贵w的片段或類似物可以由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員遵照本說明書的 教導(dǎo)很容易地制備。優(yōu)選的片段或類似物的氨基-和羧基-端在功能結(jié)構(gòu) 域的邊緣附近。結(jié)構(gòu)和功能區(qū)域可以通過將核苷酸和/或氨基酸序列數(shù) 據(jù)與公眾或私有的序列數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比較而鑒別。優(yōu)選地，使用計(jì)算機(jī) 比較方法來鑒別序列基序或發(fā)生在已知結(jié)構(gòu)和/或功能的其他蛋白中的 預(yù)測(cè)的蛋白質(zhì)構(gòu)象結(jié)構(gòu)域。折疊成已知三位結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)序列的鑒別方法是己知的(Bowie等人，Science, 253:164 (1991))。術(shù)語"k。ff"是指抗體從抗體/抗原復(fù)合物中解離的脫離速率常數(shù)。 術(shù)語"Kd"是指特定抗體-抗原相互作用的解離常數(shù)。當(dāng)解離常數(shù) Sl^iM、優(yōu)選^100nM、最優(yōu)選^10nM時(shí)，稱抗體與抗原結(jié)合。.術(shù)語"表位"包括任何能夠特異性結(jié)合免疫球蛋白或T-細(xì)胞受體 或通過其他方式與分子相互作用的蛋白質(zhì)決定子(diterminant)。表位 決定子通常由分子的化學(xué)活性表面基團(tuán)例如氨基酸或糖側(cè)鏈組成，并 且通常具有特定的三維結(jié)構(gòu)特征，以及特定的電荷特征。表位可以是 "線性"或"構(gòu)象"的。在線性表位中，蛋白質(zhì)與作用分子(例如抗 體)之間所有的相互作用位點(diǎn)沿蛋白質(zhì)的一級(jí)氨基酸序列線性發(fā)生。 在構(gòu)象表位中，相互作用位點(diǎn)在蛋白質(zhì)上跨過彼此隔開的氨基酸殘基 發(fā)生。如本文所使用，20個(gè)傳統(tǒng)氨基酸及其縮寫遵照傳統(tǒng)用法。參見 /w麵wo/ogy -爿/Sy^/ze^ f免疫學(xué)一^(2nd Edition, E.S. Golub and D.R. Gren, Eds" Sinauer Associates, Sunderland, Mass. (1991))，在此將其 并入作為參考。20個(gè)傳統(tǒng)氨基酸的立體異構(gòu)體(例如D-氨基酸)、非 天然氨基酸(例如a,a-二取代氨基酸、N-烷基氨基酸、乳酸)、和其他 非傳統(tǒng)氨基酸也可以合適地用作本發(fā)明多肽的組分。非傳統(tǒng)氨基酸的 例子包括4-羥基脯氨酸、Y-羧基谷胺酸、s-N,N,N-三甲基賴氨酸、￡-N-乙?；嚢彼帷-磷酸絲氨酸、N-乙?；z氨酸、N-甲?；琢虬彼?、 3-甲基組氨酸、5-羥基賴氨酸、s-N-甲基精氨酸、和其他類似的氨基酸 和亞氨基酸(例如4-羥基脯氨酸)。在本文所使用的多肽符號(hào)中，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)用法和常規(guī)，左手方向是氨基端方向，右手方向是羧基端方向。本文所稱的術(shù)語"聚核苷酸"是指長(zhǎng)度至少為io個(gè)堿基的核苷酸(核糖核苷酸或脫氧核該酸或任一類型核苷酸的修飾形式)的聚合形 式。該術(shù)語包括單鏈和雙鏈形式的DNA。本文所使用的術(shù)語"分離聚核苷酸"是指遺傳、cDNA或合成來源 或其一些組合的聚核苷酸，通過"分離聚核苷酸"的原始形態(tài)，其(1) 與其在天然狀態(tài)下發(fā)現(xiàn)的"分離聚核苷酸"中的全部或部分的聚核苷 酸不結(jié)合，(2)與天然不連接的聚核苷酸可操作地連接，或(3)在天 然中不作為較大序列的一部分存在。本文所稱的術(shù)語"寡核苷酸"包括通過天然、非天然寡核苷酸鏈 連接在一起的天然或修飾的核苷酸。寡核苷酸是通常包括長(zhǎng)度200個(gè) 堿基或更少的聚核苷酸亞型(subset)。優(yōu)選地，寡核苷酸長(zhǎng)度為10-60 個(gè)堿基，更優(yōu)選長(zhǎng)度為12、 13、 14、 15、 16、 17、 18、 19或20-40個(gè) 堿基。寡核苷酸通常是單鏈的，例如，用于探針；盡管寡核苷酸也可 以是雙鏈的，例如用于基因突變體的構(gòu)建。本發(fā)明的寡核苷酸可以是 正義或反義寡核苷酸。本文所稱的術(shù)語"天然核苷酸"包括脫氧核糖核苷酸和核糖核苷 酸。本文所稱的術(shù)語"修飾核苷酸"包括具有修飾或取代糖基等的核 昔酸。本文所稱的術(shù)語"寡核苷酸連接基"包括如下寡核苷酸連接基， 例如，存t逐石粦酸、酉旨、二硫代石粦酸酉旨、phosphoroselenoate 、phosphorodiselenoate、 phosphoroanilothioate、 phoshoraniladate、氨基磷酸酯等。參見，例如LaPlanche等人，7Vwc/. ^c/A L 14:9081 (1986);Stec等人， /爿w. C/2ew. 5bc. 106:6077(1984); Stein等人，M/c/.i 仏16:3209(1988); Zon等人，^w"-Ca"cw Z>wg r^"i^^"激設(shè)^^6:539(1991); Zon等人,Wgo冊(cè)c/ec^/tfes a d爿憩/ogww爿Prac"ca/4^raac/ r^^",麼,類敘激；實(shí)^方法入pp. 87-108 (F. Eckstein, Ed., Oxford University Press, Oxford England(1991)); Stec等人，美國(guó)專利第 5,151,510號(hào)；Uhlmann和Peyman, C7ze冊(cè)'ca/WeWev^, 90:543(1990)，將其公開內(nèi)容并入本文作為參考。如果需要，寡核苷酸可以包括用于檢 測(cè)的標(biāo)記。"可操作連接"的序列包括與所關(guān)注的基因相鄰的表達(dá)控制序列以及在反式(in trans)或在遠(yuǎn)處作用以控制所關(guān)注的基因的表達(dá)控制 序列。本文所使用的術(shù)語"表達(dá)控制序列"是指影響其所連接的編碼 序列的表達(dá)和加工所必需的聚核苷酸序列。表達(dá)控制序列包括合適的 轉(zhuǎn)錄起始、終止、啟動(dòng)子和增強(qiáng)子序列；有效的RNA加工信號(hào)，例如 接合(splicing)和聚腺苷酰作用信號(hào)；使細(xì)胞質(zhì)mRNA穩(wěn)定的序列； 增強(qiáng)翻譯效率的序列(即Kozak共有序列)；增強(qiáng)蛋白質(zhì)穩(wěn)定性的序列； 和當(dāng)需要時(shí)，增強(qiáng)蛋白質(zhì)分泌的序列。這些控制序列的性質(zhì)取決于宿 主生物體而不同；在原核生物中，這些控制序列通常包括啟動(dòng)子、核 糖體結(jié)合位點(diǎn)和轉(zhuǎn)錄終止序列；在真核生物中，這些控制序列通常包 括啟動(dòng)子和轉(zhuǎn)錄終止序列。術(shù)語"控制序列"意在最少包括其存在對(duì) 表達(dá)和加工必不可少的所有組分，并且還可以包括其存在有利的、額 外的成分，例如前導(dǎo)序列和融合配偶序列。本文所使用的術(shù)語"載體"意指能夠轉(zhuǎn)運(yùn)與其連接的其他核酸的 核酸分子。 一種類型的載體是"質(zhì)粒"，這是指其中可連接有額外的 DNA片段的圓形雙鏈DNA環(huán)。另一種類型的載體是病毒載體，其中 額外的DNA片段可以連接到病毒基因組中。某些載體能夠在其進(jìn)入的 宿主細(xì)胞內(nèi)自我復(fù)制(例如，具有復(fù)制的細(xì)菌源的細(xì)菌載體和附加型 哺乳動(dòng)物載體)。其他載體(例如非附加型哺乳動(dòng)物載體)可以在引入 宿主細(xì)胞時(shí)整合到宿主細(xì)胞的基因組中，從而與宿主基因組一起被復(fù) 制。而且，某些載體能夠引導(dǎo)與其可操作連接的基因的表達(dá)。這些載 體被本文稱作"重組表達(dá)載體"(或簡(jiǎn)稱"表達(dá)載體")。通常，重組 DNA技術(shù)中使用的表達(dá)載體常常是質(zhì)粒的形式。在本說明書中，"質(zhì) 粒"和"載體"可以互換使用，因?yàn)橘|(zhì)粒是最常使用的載體形式。但 是，本發(fā)明意在包括其他形式的表達(dá)載體，例如病毒載體(例如復(fù)制 缺陷逆轉(zhuǎn)錄病毒、腺病毒和腺相關(guān)的病毒)，其發(fā)揮同等功能。本文所使用的術(shù)語"重組宿主細(xì)胞"(或簡(jiǎn)稱"宿主細(xì)胞")是指 其中已經(jīng)引入重組表達(dá)載體的細(xì)胞。應(yīng)當(dāng)理解，該術(shù)語不僅指特定的 受試者細(xì)胞，而且指該細(xì)胞的子代。因?yàn)殡S后一代中可能由于突變或 環(huán)境影響而發(fā)生某些修飾，實(shí)際上，這些子代可以與親本細(xì)胞不同， 但仍包括在本文所用的術(shù)語"宿主細(xì)胞"的范圍之內(nèi)。術(shù)語"選擇性雜交"在本文中是指可檢測(cè)地且特異性地結(jié)合。根據(jù)本發(fā)明的聚核苷酸、寡核苷酸及其片段在雜交和洗滌條件下選擇性 地與核酸鏈雜交，該條件使與非特異性核酸分子的可檢測(cè)結(jié)合的可感 知量最小化。"高度嚴(yán)格性"或"高度嚴(yán)格的"條件可以用于實(shí)現(xiàn)選擇 性雜交條件，這是本領(lǐng)域公知的，并在本文中加以討論。"高度嚴(yán)格性" 或"高度嚴(yán)格的"條件的例子是將聚核苷酸與另一聚核苷酸一起孵育 的方法，其中一種核苷酸可以附于固體表面(例如膜)上，孵育在42。C的雜交溫度下，在6XSSPE或SSC、 50%甲酰胺、5X Denhardt's試 劑、0.5% SDS、 100 (ig/ml變性的片斷的鮭精DNA的雜交緩沖液中進(jìn) 行12-16小時(shí)，然后在55。C下使用IX SSC、 0.5% SDS的洗滌緩沖液 洗滌兩次。另外參見，Sambrook等人，出處同上，pp. 9.50-9.55。關(guān)于核苷酸序列的術(shù)語"百分比序列同源性"是指當(dāng)以最大的對(duì) 應(yīng)性排列時(shí)兩個(gè)序列中相同的殘基。序列同源性對(duì)比的長(zhǎng)度可以是在 至少大約9個(gè)核苷酸的一段序列上，通常至少大約18個(gè)核苷酸，更通 常至少大約24個(gè)核苷酸，典型地至少大約28個(gè)核苷酸，更典型地至 少大約32個(gè)核苷酸，優(yōu)選至少大約36、 48或更多個(gè)核苷酸。本領(lǐng)域 中已知有若干不同的測(cè)量核苷酸序列同源性的算法。例如，聚核苷酸 序列可以使用FASTA、 Gap或Bestfit進(jìn)行對(duì)比，其均為Wisconsin Package Version 10.3， Accelrys， San Diego, CA. FASTA中的程序，包括， 例如，程序FASTA2和FASTA3，提供了查詢和搜索序列之間重疊最好 的區(qū)域的排比和百分比序列同源性(Pearson, Af"/zoA ￡"z_ymo/.， 183: 63-98 (1990); iW謂，她AoA組脂.，132: 185-219 (2000); Pearson, A^ /wA 266: 227-258 (1996);尸e"^o"' 乂 Mo/. 5/o/.， 276: 71-84(1998);在此將其并入本文作為參考)。除非另外指出，使用具體程序 或算法的缺省參數(shù)。例如，核苷酸序列之間的百分比序列同源性可以 使用具有缺省參數(shù)(字長(zhǎng)為6，記分矩陣(scoring matrix)使用NOPAM 因子)的FASTA確定，或者使用具有缺省參數(shù)的Gap確定，上述程序 在Wisconsin Package Version 10.3中提供，將其并入本文作為參考。除非另外指出，核苷酸序列的參比包括其互補(bǔ)體。因此，具有特 定序列的核酸分子的參比應(yīng)當(dāng)理解成包括具有其互補(bǔ)序列的其互補(bǔ) 鏈。在分子生物學(xué)領(lǐng)域中，研究者可互換地使用術(shù)語"百分比序列同一性"、"百分比序列相似性"和"百分比序列同源性"。在本申請(qǐng)中， 這些術(shù)語僅相對(duì)于核苷酸序列而言含義相同。當(dāng)涉及核酸或其片斷時(shí)，術(shù)語"基本上相似"或"基本上序列相 似"表示，當(dāng)以合適的核苷酸插入或缺失與另一核酸(或其互補(bǔ)鏈) 最優(yōu)地排比時(shí)，通過任何公知的序列同源性算法，例如上文討論的FASTA、 BLAST或Gap測(cè)量，核苷酸序列同源性至少為核苷酸堿基的 大約85%，優(yōu)選至少大約90%，更優(yōu)選至少大約95%、 96%、 97%、 98%或99%。應(yīng)用于多肽時(shí)，術(shù)語"基本同一"是指當(dāng)通過例如使用缺省空位 權(quán)重(gap weight)的GAP或BESTFIT程序進(jìn)行最優(yōu)排比時(shí)，兩個(gè)多 肽序列共享至少75%或80%的序列同源性，優(yōu)選至少90%或95%的序 列同源性，再更優(yōu)選至少98%或99%的序列同源性。優(yōu)選地，不相同 的殘基位置通過保守氨基酸置換而不同。"保守氨基酸置換"是氨基酸 殘基被側(cè)鏈(R基團(tuán))化學(xué)性質(zhì)(例如電荷或疏水性)相似的另一氨 基酸殘基取代的置換。通常，保守氨基酸置換基本上不改變蛋白質(zhì)的 功能特性。在兩個(gè)或更多個(gè)氨基酸序列通過保守置換而彼此不同的情 況下，百分比序列同源性或相似程度可以向上調(diào)節(jié)，以對(duì)置換的保守 性質(zhì)進(jìn)行校正。進(jìn)行這種調(diào)節(jié)的方式是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的。參見， 例如，Pearson, Methods Mol. Biol" 24: 307-31 (1994)，將其并入本文作為參考。側(cè)鏈化學(xué)性質(zhì)相似的氨基酸分組的例子包括1)脂肪族側(cè)鏈 甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸和異亮氨酸；2)脂肪族-羥基側(cè)鏈 絲氨酸和蘇氨酸；3)含酰胺的側(cè)鏈天冬酰胺和谷胺酰胺；4)芳族 側(cè)鏈苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸；5)堿性側(cè)鏈賴氨酸、精氨酸和 組氨酸；和6)含硫側(cè)鏈半胱氨酸和甲硫氨酸。優(yōu)選的保守氨基酸置 換組為纈氨酸-亮氨酸-異亮氨酸、苯丙氨酸-酪氨酸、賴氨酸-精氨酸、 丙氨酸-纈氨酸、谷氨酸-天冬氨酸、和天冬酰胺-谷胺酰胺。另外可選地，保守取代是任何在Gonnet等人，Sc/e"ce, 256: 1443-45 (1992)公開的PAM250對(duì)數(shù)-可能性矩陣中具有正值的變化，將上述文 獻(xiàn)并入本文作為參考。"中等保守"取代是任何在PAM250對(duì)數(shù)-可能 性矩陣中具有非負(fù)值的變化。多肽的序列相似度通常使用序列分析軟件進(jìn)行。蛋白質(zhì)分析軟件使用指認(rèn)給不同置換、缺失或其他修飾(包括保守氨基酸置換)的相 似度度量而對(duì)類似序列進(jìn)行匹配。例如，GCG含有例如"G叩"和"Bestfit"的程序，其可以以缺省參數(shù)用于確定密切相關(guān)的多肽(例如 來自不同生物物種的同源多肽)之間或野生型蛋白及其突變型蛋白之 間的序列同源性或序列同一性。參見，例如，Wisconsin package Version 10.3。多肽序列還可以使用FASTA使用缺省或推薦參數(shù)進(jìn)行比較，這 是Wisconsin package Version 10.3. FASTA中的程序(例如FASTA2和 FASTA3)，提供了查詢和搜索序列之間最佳重疊區(qū)域的排比和百分比 序列同源性(Pearson (1990); Pearson (2000))。將本發(fā)明的序列與含有 大量來自不同生物體的序列的數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比較時(shí)，另一種優(yōu)選的算法 是計(jì)算機(jī)程序BLAST,特別是blastp或tblastn，使用缺省參數(shù)。參見， 例如，Altschul等人, / M /.脂.215: 403-410 (1990); Altschul等人, M/c/e/c/ic^s 25:3389-402 (1997);將其并入本文作為參考。進(jìn)行同源性比較的多肽序列的長(zhǎng)度通常為至少大約16個(gè)氨基酸殘 基，通常至少大約20個(gè)殘基，更通常至少大約24個(gè)殘基，典型地至 少大約28個(gè)殘基，優(yōu)選大于大約35個(gè)殘基。當(dāng)對(duì)含有來自大量不同 生物體的序列的數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行搜索時(shí)，優(yōu)選對(duì)氨基酸序列進(jìn)行比較。如本文所使用，術(shù)語"標(biāo)記"或"標(biāo)記的"是指抗體中結(jié)合有另 一分子。在一個(gè)實(shí)施方式中，標(biāo)記是可檢測(cè)的標(biāo)記物，例如結(jié)合有放 射性同位素標(biāo)記的氨基酸，或多肽連接有可以通過標(biāo)記的抗生物素蛋 白檢測(cè)的生物素基部分(例如，含有熒光標(biāo)記物或酶活性的可以通過 光學(xué)或比色方法檢測(cè)的抗生物素蛋白鏈菌素)。在另一實(shí)施方式中，標(biāo) 記或標(biāo)記物可以是治療性的，例如，藥物綴合物或毒素。標(biāo)記多肽和 糖蛋白的各種方法是本領(lǐng)域已知的，都可以使用。多肽標(biāo)記的例子包 括，但不限于以下放射性同位素或放射性核素(例如&、 14C、 15N、 35S、 9QY、 "Tc、 mIn、 l25l、 131I)、熒光標(biāo)記(例如FITC、若丹明、鑭 系磷)、酶標(biāo)記(例如辣根過氧化物酶、卩-半乳糖苷酶、熒光素酶、堿 性磷酸酶)、化學(xué)發(fā)光標(biāo)記物、生物素基、被二次報(bào)告基因識(shí)別的預(yù)定 多肽表位(例如，亮氨酸拉鏈對(duì)序列、二次抗體結(jié)合位點(diǎn)、金屬結(jié)合 結(jié)構(gòu)域、表位標(biāo)記)、磁性試劑例如釓螯合物、毒素例如百日咳毒素、 紫杉醇(taxol)、細(xì)胞松弛素B、短桿菌肽D、溴乙錠、吐根堿、絲裂霉素、足葉乙甙(etoposide)、鬼臼噻吩甙(tenoposide)、長(zhǎng)春新堿、 長(zhǎng)春堿、秋水仙堿、阿霉素、柔紅霉素、二羥炭疽菌素二酮、米托蒽 醌、光神霉素、放線菌素D、 l-去氫睪酮、糖皮質(zhì)激素、普魯卡因、丁 卡因、利多卡因、普萘洛爾和嘌呤霉素及其類似物或同系物。在一些 實(shí)施方式中，標(biāo)記通過不同長(zhǎng)度的連接基手臂連接，以降低可能的空 間位阻。
權(quán)利要求
1.一種抗-MAdCAM單克隆抗體或其抗原結(jié)合部分與抗纖維化藥劑的組合。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合，其中所述的抗纖維化藥劑是半胱 天冬蛋白酶抑制劑。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的組合，其中所述的半胱天冬蛋白酶抑制 劑是式I的化合物、或其藥物可接受的鹽B是氫原子、氘原子、烷基、環(huán)烷基、苯基、取代苯基、萘基、取代萘基、2-苯并噁唑基、取代2-噁唑基、(CH2)n-環(huán)垸基、(CH2)。-苯基、(CH2)"取代苯基)、(CH2)n-(l或2-萘基)、(CH2V(取代1或2-萘基)、(CH2)n-(雜芳基)、(CH2)n-(取代雜芳基)、鹵代甲基、C02R12、 CONR"R14、 CH2ZR15、 CH20CO(芳基)、CH20CO(雜芳基)、或CH2OPO(R16)R17，其 中Z是氧或硫原子，或者B是式IIIa-c的基團(tuán)R'為烷基、環(huán)烷基、(環(huán)烷基)垸基、苯基、取代苯基、苯基垸基、 取代苯基烷基、萘基、取代萘基、(1或2萘基)烷基、取代(l或2萘基) 烷基、雜芳基、取代雜芳基、(雜芳基)垸基、取代(雜芳基)烷基、Rla(Rlb)N 或R"0;并且W是氫、低級(jí)烷基、環(huán)烷基、(環(huán)垸基)烷基、苯基、取代苯基、苯 基烷基、取代苯基烷基、萘基、取代萘基、(l或2萘基)烷基、或取代 (1或2萘基)烷基；并且其中R'a和R'b獨(dú)立地為氫、烷基、環(huán)垸基、(環(huán)垸基)烷基、苯基、取代苯基、苯基烷基、取代苯基烷基、萘基、取代萘基、(1或2萘基)烷基、 取代(l或2萘基)垸基、雜芳基、取代雜芳基、(雜芳基)烷基、或取代(雜 芳基)烷基，其條件是R'a和R"不都為氫；Rk為烷基、環(huán)烷基、(環(huán)烷基)烷基、苯基、取代苯基、苯基烷基、 取代苯基烷基、萘基、取代萘基、(1或2萘基)烷基、取代(l或2萘基) 烷基、雜芳基、取代雜芳基、(雜芳基)烷基、或取代(雜芳基)烷基；R3為C,-6烷基、環(huán)垸基、苯基、取代苯基、(CH2)nNH2、 (CH2)NHCOR9、 (CH2)nN(C=NH)NH2 、 (CH2)mC02R2 、 (CH2)mOR10 、(CH2)mSR11、 (CH2)n環(huán)垸基、((^2) 苯基、(CH2)n(取代苯基)、(CH2)n(l或2-萘基)或(CH2;u雜芳基)，其中雜芳基包括吡啶基、噻吩基、呋喃基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、異噁唑基、吡嗪基、嘧啶基、三嗪基、四唑基和B引哚基；R3a為氫或甲基，或者R3和R3a—起為-(CH2)d-，其中d是2-6的整數(shù)；W為苯基、取代苯基、(CH2)m苯基、(CH^(取代苯基)、環(huán)烷基或苯并稠合的環(huán)烷基；R5為氫、低級(jí)烷基、環(huán)垸基、苯基、取代苯基、(CH2)n環(huán)烷基、(CH2)n苯基、(CH2)n(取代苯基)、或(CH2)"1或2-萘基)；W為氫、氟、氧代、低級(jí)烷基、環(huán)垸基、苯基、取代苯基、萘基、(CH2)n環(huán)烷基、(CH2)n苯基、(012)。(取代苯基)、(CH2)n(l或2-萘基)、OR10、 SR'InHCOR9;R"為氫、氧代(即=0)、低級(jí)烷基、環(huán)烷基、苯基、取代苯基、萘基、(CH2)n環(huán)烷基、(CH2)n苯基、(CH2)。(取代苯基)、或(CH2M1或 2-萘基)；R8為低級(jí)烷基、環(huán)烷基、(CH2)n環(huán)垸基、(CH2)n苯基、(CH2)n(取 代苯基)、(CH2)n(l或2-萘基)或COR9;R9為氫、低級(jí)烷基、環(huán)垸基、苯基、取代苯基、萘基、(CH2)n環(huán) 烷基、(CH2)n苯基、(CH2)n(取代苯基)、(CH2)n(l或2-萘基)、011'2或 NR13R14;R"為氫、低級(jí)烷基、環(huán)烷基、苯基、取代苯基、萘基、(CH^環(huán)烷基、(CH2)n苯基、(CH2)n(取代苯基)、或(CH2)n(1或2-萘基)；R"為低級(jí)垸基、環(huán)垸基、苯基、取代苯基、萘基、(CH2)n環(huán)烷基、(CH2),，苯基、(CH2)。(取代苯基)、或(CH2)n(1或2-萘基)；1112為低級(jí)烷基、環(huán)垸基、(CH2)n環(huán)垸基、(CH^苯基、(CH2)n(取代苯基)、或(CH。n(1或2-萘基)；R"為氫、低級(jí)烷基、環(huán)烷基、苯基、取代苯基、萘基、取代萘基、(CH2)n環(huán)垸基、(CH2)n苯基、(CH2)n(取代苯基)、或(CH2)n(1或2-萘基);R"為氫或低級(jí)垸基；或者1113和R"—起形成5-7元碳環(huán)或雜環(huán)，例如嗎啉或N-取代哌嗪；R"為苯基、取代苯基、萘基、取代萘基、雜芳基、(CH2)n苯基、 (CH2)n(取代苯基)、(CH2)n(l或2-萘基)、或(CH2)n(雜芳基)；R"或R"獨(dú)立地為低級(jí)烷基、環(huán)烷基、苯基、取代苯基、萘基、 苯基烷基、取代苯基烷基、或(環(huán)烷基)烷基；r18和r19獨(dú)立地為氫、烷基、苯基、取代苯基、(ch2)n苯基、(ch》n(取 代苯基)，或者r18和r19 —起為-(ch-ch)2-;R"為氫、烷基、苯基、取代苯基、(CH2)n苯基、(CH^(取代苯基);r21、 r"和r"獨(dú)立地為氫或垸基； X為CH2、 (CH2)2、 (CH2)3或S;Y'為0或NR23;丫2為ch2、 o或nr23;a為0或l，且b為l或2，其條件是當(dāng)a為l時(shí)，則b為l; c為l或2，其條件是當(dāng)c為l時(shí)，a為0，且b為l; m為1或2;并且 n為1、 2、 3或4。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的組合，其中所述式I的化合物選自以下化合物(3s)-3-[n-(n'-(2-氟4-碘苯基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2，，3，,6，-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-氯苯基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯 氧基)-4-氧代戊酸；(3s)-3-[n-(n'-(2-溴苯基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2'，3'，5',6'-四氟苯 氧基)-4-氧代戊酸；(3s)-3-[n-(n'-(2-氟苯基)草氨酰)纈氨酸基]氨基—5-(2'，3'，5',6'-四氟苯 氧基)-4-氧代戊酸；(3s)-3-[n-(n'-(2-三氟甲基苯基傳氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2，,3，,5，,6，-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3s)-3-[N-(N'-(l-蒽基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-5-(2'，3'，5',6'-四氟苯氧 基)-4-氧代戊酸；(3s)-3-[n-(n'-(2-叔丁基苯基傳氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四 氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3s)-3-[n-(n'-(2-三氟甲基苯基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-s-(2'，3'，5'，6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3s)-3-[n-(n'-(2-二氟苯基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(2',3'，5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；pS)-HN-(N'-(l-萘基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-P',3'乂6'-四氟苯氧 基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(4-甲氧基苯基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(2'，3'，5'，6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S"-[N-(N'-(2—三氟甲基苯基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-4-氧代丁酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-叔丁基甲基苯基)草氨酰)纈氨酸基腐基-4-氧代丁酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-芐基苯基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-4-氧代丁酸； (3S)-3-[N-(N'《2—苯基苯基)草氨酰)纈氨酸基]氨基-4-氧代丁酸。
5. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的組合，其中所述的抗 -MAdCAM抗體或其抗原結(jié)合部分是人單克隆抗體或其抗原結(jié)合部分。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的組合，其中所述的抗體或部分具備如下 性質(zhì)中的至少一種(a) 與人細(xì)胞結(jié)合(b) 對(duì)MAdCAM的選擇性相對(duì)于VCAM或纖連蛋白為至少100倍；(c) 與人MAdCAM以3 x 10—1QM或更低的Kd結(jié)合；或(d) 抑制(X4P7表達(dá)細(xì)胞與人MAdCAM的結(jié)合-，(e) 抑制淋巴細(xì)胞向胃腸淋巴組織中的募集。
7. 根據(jù)權(quán)利要求5或6中任一項(xiàng)所述的組合，其中所述的抗體或 抗原結(jié)合部分抑制人MAdCAM與014(37的結(jié)合，并且其中所述抗體或 其部分具有以下性質(zhì)中的至少一種(a) 與參比抗體交叉競(jìng)爭(zhēng)與MAdCAM的結(jié)合；(b) 與參比抗體競(jìng)爭(zhēng)與MAdCAM的結(jié)合；(c) 與參比抗體結(jié)合相同的MAdCAM表位；(d) 以基本上與參比抗體相同的Kd與MAdCAM結(jié)合；(e)以基本上與參比抗體相同的脫離速率與MAdCAM結(jié)合； 其中所述參比抗體選自單克隆抗體1.7.2、單克隆抗體1.8.2、單克隆 抗體6.14.2、單克隆抗體6.22.2、單克隆抗體6.34.2、單克隆抗體6.67.1 、 單克隆抗體6.73.2、單克隆抗體6.77.1、單克隆抗體7.16.6、單克隆抗 體7.20.5、單克隆抗體7.26.4、單克隆抗體9.8.2、單克隆抗體6.22.2-mod、 單克隆抗體6.34.2-mod、單克隆抗體6.67.1-mod、單克隆抗體6.77.1-mod 和單克隆抗體7.26.4-mod。
8. 根據(jù)權(quán)利要求5-7中任一項(xiàng)所述的組合，其中所述的單克隆抗 體或其抗原結(jié)合部分選自以下抗體(a) 重鏈包括選自下列的參比抗體的重鏈CDR1、 CDR2和CDR3 宴l基酸〖,歹U: 1.7.2、 1.8.2、 6.14,2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1、 6,73.2、 6,77.1、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2-mod、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod和7.26.4-mod(b) 輕鏈包括選自下列的參比抗體的輕鏈CDR1、 CDR2和CDR3 氨基酸序列1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1、 6.73.2、 6.77,1、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2-mod、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod禾口 7.26.4-mod(c) 抗體包括(a)的重鏈和(b)的輕鏈；以及(d) 在(c)的抗體中，重鏈和輕鏈CDR氨基酸序列選自相同的 參比抗體。
9. 一種抗-014(37整聯(lián)蛋白抗體或其抗原結(jié)合部分與權(quán)利要求2-4中 任-項(xiàng)所定義的半胱天冬蛋白酶抑制劑的組合。
10. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的組合在制造用于治療肝纖 維化的藥物中的應(yīng)用。
11. 根據(jù)權(quán)利要求10所述的應(yīng)用，其中所述的肝纖維化是丙肝相 關(guān)的肝纖維化、酒精肝疾病或非酒精性脂肪肝。
12. —種根據(jù)權(quán)利要求l-9中任一項(xiàng)所述的組合與藥物可接受的載 體或賦形劑的藥物組合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及抗-MAdCAM抗體與抗纖維化藥劑的新組合，該抗纖維化藥劑是例如蛋白酶抑制劑，優(yōu)選半胱天冬蛋白酶抑制劑。本發(fā)明還涉及包括本發(fā)明的組合的藥物組合物，以及該組合在治療肝纖維化中的應(yīng)用。
文檔編號(hào)A61K39/395GK101217980SQ200680025308
公開日2008年7月9日 申請(qǐng)日期2006年7月3日 優(yōu)先權(quán)日2005年7月11日
發(fā)明者G·C·伯吉斯, R·凱麗 申請(qǐng)人:輝瑞有限公司