專利名稱：治療腫瘤放、化療后白細胞減少癥的中藥合劑及質(zhì)控方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥合劑及其質(zhì)量控制方法，特別涉及一種用于治療腫瘤放、化療后白細胞減少癥的中藥合劑及其質(zhì)量控制方法。
背景技術(shù)：
放療和化療是目前臨床治療腫瘤的有效手段，但常常出現(xiàn)白細胞減少及免疫功能降低現(xiàn)象。2004年11月10日中國專利公報公開了由本申請人申報的名稱為“用于治療腫瘤放、化療后白細胞減少癥的中成藥及其制備方法”、公開號為1544078的專利申請，它主要由紅參、黃芪、枸杞子、酒蒸女貞子、豬苓、茯苓制成，我們在原來的基礎上，通過大量的實驗，將其制成合劑，科學地進行質(zhì)量控制，臨床藥效學實驗效果顯著。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種效果顯著的治療腫瘤放、化療后白細胞減少癥的中藥合劑及其質(zhì)量控制方法。
本發(fā)明技術(shù)方案是這樣實現(xiàn)的一、處方紅參50g、黃芪100g、枸杞子100g、女貞子(酒蒸)100g、豬苓150g、茯苓100g。
二、制法以上六味，加水煎煮(煮沸后保持微沸)三次，第一次2.5小時，第二次1.5小時，第三次1小時，分次濾過，合并濾液，濃縮至相對密度為1.05～1.10(60℃)，置2℃冷藏箱中冷藏48小時，濾過，另取甜菊甙1.4g，加適量的熱水溶解后加入藥液中，用5mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至6.0左右，加水調(diào)整總量至1000ml，使相對密度不低于1.02(60℃)，分裝，即得。
三、性狀本品為棕褐色的液體；味甜、微苦。
四、鑒別(1)取本品20ml，用乙醚振搖提取2次，每次20ml，合并醚液，用水洗滌2次，每次20ml，棄去水液，醚液用5g無水硫酸鈉干燥后，揮干，加醋酸乙酯0.5ml使溶解，作為供試品溶液。另取枸杞子對照藥材2.5g，加水30ml，超聲提取20分鐘，濾過，濾液加乙醚提取3次，每次15ml，合并醚液，用水洗滌2次，每次5ml，棄去水洗液，取乙醚液揮干，加醋酸乙酯2ml使溶解，作為對照藥材溶液。照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-乙醚(2∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈下(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同的藍色熒光斑點。
(2)取本品30ml，用氯仿洗滌2次，每次10ml，棄去氯仿液，取水層，用水飽和的正丁醇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨試液40ml洗滌后，取正丁醇液蒸干，加硫酸的45％乙醇溶液(7→100)15ml，加熱回流1小時，揮去乙醇，加氯仿10ml振搖提取，分取氯仿層，加適量無水硫酸鈉脫水，濾過，濾液濃縮至約0.5ml，作為供試品溶液。另取人參二醇、人參三醇對照品，加氯仿制成每1ml各含1mg的混合溶液作為對照品溶液。照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各4μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-甲酸甲酯-甲酸(10∶4∶1)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加熱5～10分鐘，至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(3)取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗，吸取[含量測定]項下的供試品溶液及上述對照品溶液各4μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水(65∶35∶10)的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
五、檢查(1)相對密度按中國藥典相對密度測定法測定，應不低于1.02。
(2)pH值按中國藥典pH值測定法測定，應為4.5～6.5。
(3)其他應符合中國藥典合劑項下的各項規(guī)定。
(4)正丁醇提取物精密量取本品25ml，置分液漏斗中，加水飽和的正丁醇提取5次，每次20ml，合并提取液，用正丁醇飽和的水洗滌2次，每次40ml，棄去水液，正丁醇液蒸干后，于105℃干燥3小時，移至干燥器中，冷卻30分鐘，迅速精密稱定重量，計算，即得。
本品含正丁醇提取物每1ml不得低于2.0mg。
六、含量測定取本品20.0ml，以水飽和的正丁醇振搖提取3次，每次20ml，合并正丁醇提取液，以氨試液洗滌2次，每次20ml，合并氨試液層，以水飽和的正丁醇洗滌2次，每次10ml，正丁醇層與前次正丁醇層合并，減壓回收至干，用3～5ml水溶解，置D101型大孔吸附樹脂柱上(1.5cm×12cm)，分別以50ml水、40％乙醇30ml洗脫，棄去洗脫液，再用70％乙醇50ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，以適量甲醇溶解，定容至2ml，置冰箱內(nèi)靜置，取上清液，作為供試品溶液。精密稱取黃芪甲苷對照品適量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照中國藥典薄層色譜法試驗，分別吸取供試品溶液4μl與10μl、對照品溶液4μl與10μl，分別交叉點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水(65∶35∶10)10℃以下放置過夜的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加熱5分鐘，至斑點顯色清晰，取出，在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定。放置0.5小時后，照中國藥典薄層掃描法進行掃描，波長λs＝400nm，λr＝700nm，測量供試品吸收度積分值與對照品吸收度積分值，計算，即得。
本品每1ml含黃芪以黃芪甲苷(C41H68O14)計，不得少于0.030mg。
七、功能與主治益氣健脾，滋養(yǎng)肝腎，用于腫瘤患者化療后引起的氣陰兩虛，癥見神疲乏力，少氣懶言，五心煩熱，口干咽燥等癥及白細胞減少。
八、用法與用量口服，一次20ml，一日3次。
九、注意忌食辛辣之品。
十、主要藥學試驗(1)驅(qū)邪作用進行了本發(fā)明中藥合劑對小鼠肉瘤180的療效、小鼠Heps的療效、小鼠艾氏腹水癌療效的三個實驗，結(jié)果表明，本發(fā)明中藥合劑對S180、Heps和EAC實體瘤均有不同程度的抑制作用，其中對Heps的抑制作用較強，可達47.5％，其抑瘤作用作用呈良好的量效關(guān)系。
(2)扶正作用主要進行了本發(fā)明中藥合劑對小鼠免疫功能影響的試驗和本品對動物一般狀況影響試驗。結(jié)果表明本發(fā)明中藥合劑可提高機體的非特異性免疫、體液免疫及細胞免疫功能，且對免疫抑制劑及腫瘤所致的體液免疫與細胞免疫功能降低具有明顯恢復作用；本發(fā)明中藥合劑具有抗疲勞和抗應激作用。
(3)減毒增效作用試驗結(jié)果表明，本發(fā)明中藥合劑不但可明顯對抗環(huán)磷酰胺引起的荷瘤小鼠和正常大鼠外周白細胞和骨髓有核細胞減少，而且能顯著對抗Co60照射小鼠免疫器官指數(shù)及骨髓有核細胞下降，提示本發(fā)明中藥合劑對化、放療有明顯的減毒作用；本發(fā)明中藥合劑與環(huán)磷酰胺合用具有明顯的協(xié)同作用。
權(quán)利要求
1.一種治療腫瘤放、化療后白細胞減少癥的中藥合劑，其特征在于它是通過如下方法制成的稱取原料紅參50g、黃芪100g、枸杞子100g、酒蒸女貞子100g、豬苓150g、茯苓100g，加水煎煮三次，第一次2.5小時，第二次1.5小時，第三次1小時，煮沸后保持微沸，分次濾過，合并濾液，濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.10，置2℃冷藏箱中冷藏48小時，濾過；另取甜菊甙1.4g，加適量的熱水溶解后加入藥液中，用5mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至6.0左右，加水調(diào)整總量至1000ml，使60℃時測定相對密度不低于1.02，分裝，即得。
2.如權(quán)利要求1所述的治療腫瘤放、化療后白細胞減少癥的中藥合劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述方法為如下方法中的一種或幾種的組合(1)枸杞子的薄層鑒別取本發(fā)明中藥合劑20ml，用乙醚振搖提取2次，每次20ml，合并醚液，用水洗滌2次，每次20ml，棄去水液，醚液用5g無水硫酸鈉干燥后，揮干，加醋酸乙酯0.5ml使溶解，作為供試品溶液；另取枸杞子對照藥材2.5g，加水30ml，超聲提取20分鐘，濾過，濾液加乙醚提取3次，每次15ml，合并醚液，用水洗滌2次，每次5ml，棄去水洗液，取乙醚液揮干，加醋酸乙酯2ml使溶解，作為對照藥材溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以配比為2∶1的氯仿-乙醚為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm的紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同的藍色熒光斑點。(2)紅參的薄層鑒別取硫酸7ml，加45％乙醇使成100ml，得硫酸的45％乙醇溶液；取本發(fā)明中藥合劑30ml，用氯仿洗滌2次，每次10ml，棄去氯仿液，取水層，用水飽和的正丁醇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨試液40ml洗滌后，取正丁醇液蒸干，加硫酸的45％乙醇溶液15ml，加熱回流1小時，揮去乙醇，加氯仿10ml振搖提取，分取氯仿層，加適量無水硫酸鈉脫水，濾過，濾液濃縮至約0.5ml，作為供試品溶液；另取人參二醇、人參三醇對照品，加氯仿制成每1ml各含1mg的混合溶液作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各4μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以配比為10∶4∶1的甲苯-甲酸甲酯-甲酸的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加熱5～10分鐘，至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。(3)黃芪的薄層鑒別取本發(fā)明中藥合劑20.0ml，以水飽和的正丁醇振搖提取3次，每次20ml，合并正丁醇提取液，以氨試液洗滌2次，每次20ml，合并氨試液層，以水飽和的正丁醇洗滌2次，每次10ml，正丁醇層與前次正丁醇層合并，減壓回收至干，用3～5ml水溶解，置1.5cm×12cm的D101型大孔吸附樹脂柱上，分別以50ml水、40％乙醇30ml洗脫，棄去洗脫液，再用70％乙醇50ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，以適量甲醇溶解，定容至2ml，置冰箱內(nèi)靜置，取上清液，作為供試品溶液；取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液及對照品溶液各4μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以配比為65∶35∶10的氯仿-甲醇-水的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。(4)相對密度的檢查按中國藥典相對密度測定法測定，應不低于1.02。(5)pH值的檢查按中國藥典pH值測定法測定，應為4.5～6.5。(6)正丁醇提取物的檢查精密量取本發(fā)明中藥合劑25ml，置分液漏斗中，加水飽和的正丁醇提取5次，每次20ml，合并提取液，用正丁醇飽和的水洗滌2次，每次40ml，棄去水液，正丁醇液蒸干后，于105℃干燥3小時，移至干燥器中，冷卻30分鐘，迅速精密稱定重量，計算，本發(fā)明中藥合劑含正丁醇提取物每1ml不得低于2.0mg。(7)黃芪的含量測定取本發(fā)明中藥合劑20.0ml，以水飽和的正丁醇振搖提取3次，每次20ml，合并正丁醇提取液，以氨試液洗滌2次，每次20ml，合并氨試液層，以水飽和的正丁醇洗滌2次，每次10ml，正丁醇層與前次正丁醇層合并，減壓回收至干，用3～5ml水溶解，置1.5cm×12cm的D101型大孔吸附樹脂柱上，分別以50ml水、40％乙醇30ml洗脫，棄去洗脫液，再用70％乙醇50ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，以適量甲醇溶解，定容至2ml，置冰箱內(nèi)靜置，取上清液，作為供試品溶液；精密稱取黃芪甲苷對照品適量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，分別吸取供試品溶液4μl與10μl、對照品溶液4μl與10μl，分別交叉點于同一硅膠G薄層板上，以配比為65∶35∶10的氯仿-甲醇-水10℃以下放置過夜的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加熱5分鐘，至斑點顯色清晰，取出，在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定；放置0.5小時后，照中國藥典薄層掃描法進行掃描，波長λs＝400nm，λr＝700nm，測量供試品吸收度積分值與對照品吸收度積分值，計算，本發(fā)明中藥合劑每1ml含黃芪以分子式為C41H68O14的黃芪甲苷計，不得少于0.030mg。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種治療腫瘤放、化療后白細胞減少癥的中藥合劑及其質(zhì)量控制方法，該合劑由紅參、黃芪、枸杞子、酒蒸女貞子、豬苓、茯苓制成；該合劑的質(zhì)量控制方法包括枸杞子、紅參、黃芪的薄層鑒別，相對密度、pH值、合劑、正丁醇提取物的檢查，黃芪的含量測定。
文檔編號A61K36/481GK1739676SQ200510043149
公開日2006年3月1日 申請日期2005年8月26日 優(yōu)先權(quán)日2005年8月26日
發(fā)明者趙濤 申請人:咸陽步長醫(yī)藥科技發(fā)展有限公司