一種雞皮磷脂提取物的制備方法
【專利說明】
一、技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及一種雞皮磷脂提取物的制備方法，屬于食品生物技術(shù)領(lǐng)域。
二、【背景技術(shù)】
[0002]功能性脂質(zhì)包括磷脂、糖脂和其他衍生物，是構(gòu)成人體生物膜的重要組成成分。而這些功能性脂質(zhì)成分絕大多數(shù)均為極性脂質(zhì)。磷脂的攝入可抑制血栓、活化防御機(jī)能、促進(jìn)吞噬作用，并參與體內(nèi)有關(guān)代謝，產(chǎn)生一系列生理活性物質(zhì)，調(diào)節(jié)生理機(jī)能。代表性的磷脂有腦磷脂、卵磷脂、鞘磷脂、磷脂酰絲氨酸、縮醛磷脂等，這些磷脂在人體生命活動(dòng)中發(fā)揮重要作用，經(jīng)常使用能夠促進(jìn)脂肪的新陳代謝、改善大腦機(jī)能，對(duì)肝病、心腦血管疾病、神經(jīng)性疾病、糖尿病、阿爾茨海默病(老年癡呆癥)等病均有一定的療效。
[0003]根據(jù)前人的研宄表明，功能性脂質(zhì)主要存在于動(dòng)物的腦、皮膚等其他組織，也存在于發(fā)芽的大豆籽粒中。雞是人類馴化較早的家禽，養(yǎng)殖最規(guī)模大、消費(fèi)量最多。近年來，我國雞產(chǎn)品加工業(yè)發(fā)展很快，但雞生產(chǎn)中的廢棄物尚未得到充分的利用。雞皮中含脂質(zhì)成分最多，其中包括中性和極性脂肪、酰脂。多不飽和脂肪酸的含量較高。多不飽和脂肪酸相對(duì)飽和脂肪酸來說具有更多的功效，它可以降低血中膽固醇和甘油三脂，調(diào)節(jié)心臟功能，改善血液微循環(huán)，降低血液粘稠度，提高腦細(xì)胞的活性等。
[0004]發(fā)明專利“含類脂物的大豆提取物及其制造方法和藥用及化妝品用組合物”(公開號(hào):CN1335774A)，公開日:2002年2月13日，公開了大豆萃取物的制備方法，確定了鞘磷脂和磷脂的含量，但與本發(fā)明的磷脂提取對(duì)象和生產(chǎn)工藝完全不一樣，發(fā)明專利“以來自皮的鞘磷脂含有物為有效成分的抗高血糖和/或抗高血脂癥劑“(公開號(hào):CN102421439A)公開日:2012年4月18日，專利提取原料為鳥皮，但提取工藝及應(yīng)用領(lǐng)域完全不一樣，且權(quán)利要求內(nèi)容不同。
[0005]本發(fā)明所提供的方法為一種雞皮中磷脂提取物的制備方法，操作方法簡(jiǎn)便，成本低，提取率較高，且可以合理的利用雞加工副產(chǎn)物，適合工業(yè)化生產(chǎn)，生產(chǎn)出來的提取物可作為保健食品的原材料，廣泛應(yīng)用于保護(hù)血管、改善記憶等產(chǎn)品開發(fā)。
三、
【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]技術(shù)問題
[0007]本發(fā)明的目的是提供一種雞皮中功能性磷脂的制備方法，可以合理的利用雞加工副產(chǎn)物，本發(fā)明所提供的功能性磷脂的分離方法操作簡(jiǎn)便，成品低，提取率較高，能夠廣泛適用于雞皮中功能性磷脂的分離純化。
[0008]技術(shù)方案
[0009]1、本發(fā)明所提供的雞皮中功能性磷脂的制備具體方法為:
[0010](I)備料:雞皮均漿或剪碎至2?4mm ;
[0011](2)溶劑準(zhǔn)備:提取液為氯仿:甲醇按適當(dāng)體積比配制；
[0012](3)總脂質(zhì)的提取:按合適的料液比添加，恒溫振蕩提取，靜置收集上清液，重復(fù)2次，將三次上清液過濾合并，加入適當(dāng)比例的氯仿、甲醇和水的混合液，靜置過夜分層，收集脂質(zhì)層；
[0013](4)干燥:將得到的總脂質(zhì)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，真空干燥至恒重；
[0014](5)硅膠柱的制備:取適量硅膠于高溫下活化，裝柱；
[0015](6)極性脂質(zhì)分離:稱取一定量的總脂質(zhì)，用氯仿和甲醇洗脫，中性脂質(zhì)洗脫劑為氯仿，極性脂質(zhì)洗脫劑為甲醇；
[0016](7)濃縮:將甲醇洗脫的極性脂質(zhì)，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮，真空干燥至恒重；
[0017](8)儲(chǔ)存:冷凍儲(chǔ)存。
[0018]發(fā)明效果
[0019](I)本發(fā)明選取雞皮為原料，雞皮中含脂質(zhì)成分最多，功能性脂質(zhì)含量較高，合理的利用了雞產(chǎn)品加工副產(chǎn)物，避免了農(nóng)產(chǎn)品廢棄物的浪費(fèi)。
[0020](2)本發(fā)明所制備的功能性磷脂，主要由磷脂酰乙醇胺、磷脂酰膽堿、磷脂酰絲氨酸、鞘磷脂和磷脂酰肌醇組成，是構(gòu)成人體生物膜的重要組成成分，適量攝入可促進(jìn)脂肪的新陳代謝、改善大腦機(jī)能，對(duì)心腦血管疾病、肝病、神經(jīng)性疾病、糖尿病、老年癡呆等預(yù)防和治療有一定的效果。
[0021](3)本發(fā)明對(duì)雞皮中功能性磷脂提取物的制備方法進(jìn)行了優(yōu)化，確定了最佳料液比、中性脂質(zhì)及極性脂質(zhì)洗脫劑的用量等提取條件，總脂質(zhì)的提取率較高，本發(fā)明采用柱層層析對(duì)總脂質(zhì)進(jìn)行分離，通過對(duì)洗脫劑用量及流速的控制，即可以有效去除中性脂質(zhì)，同時(shí)不會(huì)引起極性脂質(zhì)降解，操作簡(jiǎn)單，成本較低，且能夠廣泛適用于雞皮中功能性磷脂的制備，總脂質(zhì)的提取率為35%?45%，極性脂質(zhì)約為2%?4%。
四、【附圖說明】
[0022]圖1為雞皮中功能性脂質(zhì)分離工藝流程圖。
[0023]圖2為雞皮中功能性脂質(zhì)的TLC圖。
[0024]圖3為雞皮中功能性脂質(zhì)的GC-MS總離子圖。其中數(shù)字代表意義:1，肉豆蔻酸甲酯；2，十五烷酸甲酯；3，順-7-十六碳烯酸甲酯；4，棕櫚油酸甲酯；5，十六烷酸甲酯；6，十七烷酸甲酯；7，順-9-十八碳二烯酸甲酯；8，油酸甲酯；9，11-十八碳烯酸甲酯；10，十八碳烯酸甲酯。
五、具體實(shí)施方案
[0025]下面具體說明本發(fā)明，但本發(fā)明不限定于下述例子。
[0026]實(shí)施例1:
[0027](I)備料:精密稱取南京土雞雞胸體雞皮50g，用剪刀剪碎至約4mm ；
[0028](2)溶劑準(zhǔn)備:提取液為氯仿:甲醇按2: I體積比配制；
[0029](3)總脂質(zhì)的提取:加入300mL氯仿:甲醇(2:1v: v)后在恒溫振蕩器提取lh，靜置收集上清液，殘?jiān)?00mL氯仿:甲醇(2:1v: V)提取lh，重復(fù)2次，溫度控制在35°C左右，將3次上清液過濾合并，用氯仿:甲醇:蒸飽水(8: 4: 3v: V: V)進(jìn)行分層，收集脂質(zhì)層；
[0030](4)干燥:將分離的脂質(zhì)層用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮，45°C真空干燥至衡重，得總脂質(zhì)；
[0031](5)硅膠柱的制備:稱取1g硅膠于燒杯，在120°C高溫下活化2h，加入40ml氯仿溶解，倒入層析柱中；用氯仿溶液進(jìn)行沖液，直至透明；
[0032](6)極性脂質(zhì)分離:隨后將500mg脂質(zhì)滴入層析柱，用175mL氯仿及200mL甲醇溶液洗脫，流速大約每分鐘3ml，中性脂質(zhì)洗脫劑為氯仿，極性脂質(zhì)洗脫劑為甲醇；
[0033](7)濃縮:將甲醇洗脫的極性脂質(zhì)，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮，45°C真空干燥至恒重；
[0034](8)儲(chǔ)存:_20°C冷凍儲(chǔ)存
[0035](9)薄層色譜法(TLC)鑒定脂質(zhì)成分:以鞘磷脂，卵磷脂，腦磷脂，磷脂酰肌醇為標(biāo)樣，樣品點(diǎn)用量為20 μ I。氯仿:甲醇:蒸餾水￠5: 25: 4v/v/v)為展開劑，展開劑展開至巨薄層板上緣2cm處將板取出，晾干，用硫酸:乙醇(25: 75v/v)溶液噴霧后120°C烘干顯色鑒定。
[0036](10)氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)鑒定功能性脂質(zhì)的脂肪酸組成:
[0037]根據(jù)上述雞皮功能性磷脂提取物的制備方法，得到功能性脂質(zhì)含量為2.61%。
[0038]實(shí)施例2:
[0039](I)備料:精密稱取新疆拜城油雞雞胸體雞皮10g，用剪刀剪碎至約4mm ；
[0040](2)溶劑準(zhǔn)備:提取液為氯仿:甲醇按2: I體積比配制；
[0041](3)總脂質(zhì)的提取:加入60mL氯仿:甲醇(2:1v: v)后在恒溫振蕩器提取lh，靜置收集上清液，殘?jiān)?0mL氯仿:甲醇(2:1v: V)提取lh，重復(fù)2次，溫度控