一種應(yīng)用南極假絲酵母脂肪酶b生產(chǎn)替卡格雷手性藥物中間體的方法
【專(zhuān)利摘要】一種應(yīng)用南極假絲酵母脂肪酶B生產(chǎn)替卡格雷手性藥物中間體的方法，屬于酶工程【技術(shù)領(lǐng)域】。將南極假絲酵母脂肪酶B（簡(jiǎn)稱(chēng)CALB）用于轉(zhuǎn)化具有（a）所示結(jié)構(gòu)式的外消旋替卡格雷中間體為單一構(gòu)型中間體（b），其中R=CnH2n+1CO或CnH2n-1CO(n=2～6)，R’=Cbz或Boc，R=CnH2n+1CO或CnH2n-1CO(n=2～6)，R’=Cbz或BocR’=Cbz或Boc，用CALB對(duì)所述的外消旋藥物中間體進(jìn)行拆分后得到產(chǎn)物（b）構(gòu)型為（1S，4R）。本發(fā)明中，利用CALB對(duì)所述的底物進(jìn)行拆分，催化效率高，得到的產(chǎn)物（b）純度高。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種應(yīng)用南極假絲酵母脂肪酶B生產(chǎn)替卡格雷手性藥物中間體的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于酶工程【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種應(yīng)用CALB拆分具有(a)所示結(jié)構(gòu)式的外消旋替卡格雷中間體，其中R=CnH2n+1C0或CnH2lriCO (n=2~6)，R’ =Cbz或Boc，經(jīng)轉(zhuǎn)化后獲得單一構(gòu)型的中間體(b)的方法。
[0002]

【權(quán)利要求】
1.一種將南極假絲酵母脂肪酶B (簡(jiǎn)稱(chēng)CALB)用于拆分具有(a)所示結(jié)構(gòu)式的外消旋替卡格雷中間體，其中R=CnH2n+1CO或CnHO (n=2~6)，R’ =Cbz或Boc，獲得單一構(gòu)型中間體(b)；
2.按照權(quán)利要求1的一種將CALB用于拆分具有(a)所示結(jié)構(gòu)式的外消旋替卡格雷中間體獲得單一構(gòu)型中間體(b)的方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)生物催化劑選擇:選用南極假絲酵母脂肪酶B為生物催化劑； (2)將南極假絲酵母脂肪酶B溶于通用緩沖液中，再與消旋體底物(a)混合，得到混合液；將所述的混合液在一定溫度下進(jìn)行轉(zhuǎn)化，得到反應(yīng)液； (3)樣品萃取:向反應(yīng)液中加入有機(jī)溶劑，進(jìn)行振蕩混合后，離心分離，得化合物(b)。
3.按照權(quán)利要求2的方法，其特征在于，所述的通用緩沖液為三羥甲基氨基甲烷(Tris) 50mM ;硼酸 50mM ;檸檬酸 33mM ;Na3P0450mM，用 HCl 或 NaOH 調(diào) pH3 ~12。
4.按照權(quán)利要求3的方法，其特征在于，所述的通用緩沖液pH為5。
5.按照權(quán)利要求2的方法，其特征在于，步驟(2)所述的混合液中CALB酶濃度為0.04 ~lmg/ml。
6.按照權(quán)利要求5的方法，其特征在于，混合液中CALB酶濃度為0.08mg/ml。
7.按照權(quán)利要求2的方法，其特征在于，所述的混合液中消旋體底物濃度為lg/L~100g/L。
8.按照權(quán)利要求7的方法，其特征在于，所述的混合液中消旋體底物濃度為20g/L。
9.按照權(quán)利要求2的方法，其特征在于，所述的轉(zhuǎn)化溫度為20~70°C。
10.按照權(quán)利要求2的方法，其特征在于，化合物(a)選自順-1-丙酰氧基-N-芐氧羰基-4-氨基-2-環(huán)戊烯、順-1- 丁酰氧基-N-芐氧羰基-4氨基-2-環(huán)戊烯，對(duì)應(yīng)所得的化合物(b)為(1S，4R) N-芐氧羰基-4-氨基-2-環(huán)戊烯-1-醇。
【文檔編號(hào)】C12R1/72GK104164469SQ201410081155
【公開(kāi)日】2014年11月26日 申請(qǐng)日期:2014年3月6日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月6日
【發(fā)明者】鄭國(guó)鈞, 陳清 申請(qǐng)人:北京化工大學(xué)