以木醇糖作為原料對葡萄糖氧化酶進行發(fā)酵的工藝的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開以木醇糖作為原料對葡萄糖氧化酶進行發(fā)酵的工藝。具體步驟如下：將原料木糖醇作為發(fā)酵生產(chǎn)葡萄糖氧化酶的出發(fā)菌株，對其進行紅外線的誘變處理；培養(yǎng)基中的初糖濃度質(zhì)量分數(shù)不能低于百分之十；再對其進行紫外誘變，選擇具有最佳產(chǎn)酶的葡萄糖濃度；搖瓶發(fā)酵，初定葡萄糖氧化酶膜過濾發(fā)酵工藝中的初糖濃度至少為百分之八；運用雙層紗膜進行透析；加入氯化氫或者氫氧化鈉溶液，調(diào)節(jié)其PH為4-7范圍內(nèi)；再次進行傳代實驗，3-5次，即可。所述具有最佳產(chǎn)酶的葡萄糖濃度為百分之七點五至百分之八點二；所選用的接種菌齡應該為其生長后期。本發(fā)明的有益效果是：產(chǎn)酶反應活度高，變化比較平穩(wěn)，有效減少了發(fā)酵過程中代謝物的產(chǎn)生以及其對產(chǎn)物合成的阻礙作用。
【專利說明】以木醇糖作為原料對葡萄糖氧化酶進行發(fā)酵的工藝
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及生化物質(zhì)的制備方法，具體來說，是指以木醇糖作為原料對葡萄糖氧化酶進行發(fā)酵的工藝。
【背景技術(shù)】
[0002]葡萄糖氧化酶(G I u c ο s eOxidase，簡稱G0D)系統(tǒng)名為β _D_葡萄糖:氧化還原酶(EC1.1.3.4)它能專一地將β -D-葡萄糖氧化成葡萄糖酸和過氧化氫。葡萄糖氧化酶是酶【技術(shù)領(lǐng)域】中一種非常重要的酶，由于葡萄糖氧化酶與生命重要物質(zhì)葡萄糖和氧的密切關(guān)系，導致了它在科研、醫(yī)藥和食品工業(yè)生產(chǎn)上廣泛的應用。20世紀初Maximou在黑曲霉培養(yǎng)物中發(fā)現(xiàn)吸氧酶系統(tǒng)。1924年Malliard發(fā)現(xiàn)了葡萄糖酸。1928年，Muller用黑曲霉菌絲體壓制進行葡萄糖酸形成的酶學研究，探明在葡萄糖存在時能消耗氧，并命名為葡萄糖氧化酶，把它歸入脫氫酶。以后許多研究者對該酶的性質(zhì)作了大量的工作，尤其對葡萄糖氧化酶的輔基一黃素腺嘌呤二核苷酸(FAD)作了深入的研究，并給予詳細的說明。BentleyNeubergar應用同位素1802.2180明確了在有過氧化氫酶存在下的一系列試驗。Keilin等對黑曲霉的葡萄糖氧化酶的動力學及其作用形式也作了較詳細的研究。1961年國際生化協(xié)會酶委員會將該酶的系統(tǒng)名稱叫做(β -D-萄萄糖-氧化還原酶(EC1.1.3.4)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]為克服上述技術(shù)問題，我們提出了以下技術(shù)方案: 以木醇糖作為原料對葡萄糖氧化酶進行發(fā)酵的工藝，具體步驟如下:
將原料木糖醇作為發(fā)酵生產(chǎn)葡萄糖氧化酶的出發(fā)菌株，對其進行紅外線的誘變處理； 培養(yǎng)基中的初糖濃度質(zhì)量分數(shù)不能低于百分之十；
再對其進行紫外誘變，選擇具有最佳產(chǎn)酶的葡萄糖濃度；
搖瓶發(fā)酵，初定葡萄糖氧化酶膜過濾發(fā)酵工藝中的初糖濃度至少為百分之八；
運用雙層紗膜進行透析；
加入氯化氫或者氫氧化鈉溶液，調(diào)節(jié)其PH為4-7范圍內(nèi)；
再次進行傳代實驗，3-5次，即可。
[0004]本發(fā)明中，所述具有最佳產(chǎn)酶的葡萄糖濃度為百分之七點五至百分之八點二。
[0005]本發(fā)明中，所選用的接種菌齡應該為其生長后期。
[0006]本發(fā)明的有益效果是:產(chǎn)酶反應活度高，變化比較平穩(wěn)，有效減少了發(fā)酵過程中代謝物的產(chǎn)生以及其對產(chǎn)物合成的阻礙作用。
【具體實施方式】
[0007]以木醇糖作為原料對葡萄糖氧化酶進行發(fā)酵的工藝，具體步驟如下:
將原料木糖醇作為發(fā)酵生產(chǎn)葡萄糖氧化酶的出發(fā)菌株，對其進行紅外線的誘變處理； 培養(yǎng)基中的初糖濃度質(zhì)量分數(shù)為百分之十；再對其進行紫外誘變，選擇具有最佳產(chǎn)酶的葡萄糖濃度；
搖瓶發(fā)酵，初定葡萄糖氧化酶膜過濾發(fā)酵工藝中的初糖濃度為百分之八；
運用雙層紗膜進行透析；
加入氯化氫或者氫氧化鈉溶液，調(diào)節(jié)其PH為6范圍內(nèi)；
再次進行傳代實驗，5次，即可。
[0008]所述具有最佳產(chǎn)酶的葡萄糖濃度為百分之七點五。
[0009]所選用的接種菌齡應該為其生長后期。
[0010]以上所述，僅為本發(fā)明較佳的【具體實施方式】，但本發(fā)明的保護范圍并不局限于此，任何熟悉本【技術(shù)領(lǐng)域】的技術(shù)人員在本發(fā)明披露的技術(shù)范圍內(nèi)，根據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案及其發(fā)明構(gòu)思加以等同替換或改變， 都應涵蓋在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.以木醇糖作為原料對葡萄糖氧化酶進行發(fā)酵的工藝，其特征在于，具體步驟如下: 將原料木糖醇作為發(fā)酵生產(chǎn)葡萄糖氧化酶的出發(fā)菌株，對其進行紅外線的誘變處理； 培養(yǎng)基中的初糖濃度質(zhì)量分數(shù)不能低于百分之十； 再對其進行紫外誘變，選擇具有最佳產(chǎn)酶的葡萄糖濃度； 搖瓶發(fā)酵，初定葡萄糖氧化酶膜過濾發(fā)酵工藝中的初糖濃度至少為百分之八； 運用雙層紗膜進行透析； 加入氯化氫或者氫氧化鈉溶液，調(diào)節(jié)其PH為4-7范圍內(nèi)； 再次進行傳代實驗，3-5次，即可。
2.如權(quán)利要求1所述的以木醇糖作為原料對葡萄糖氧化酶進行發(fā)酵的工藝，其特征在于，所述具有最佳產(chǎn)酶的葡萄糖濃度為百分之七點五至百分之八點二。
3.如權(quán)利要求1所述的以木醇糖作為原料對葡萄糖氧化酶進行發(fā)酵的工藝，其特征在于，所選用的接種菌齡應該為其`生長后期。
【文檔編號】C12N9/04GK103627682SQ201310588368
【公開日】2014年3月12日 申請日期:2013年11月21日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月21日
【發(fā)明者】周懂懂 申請人:周懂懂