專利名稱：一種魚鱗膠原多肽及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物技術(shù)，具體的說是一種利用乳酸菌發(fā)酵的魚鱗膠原多肽及其制備方法。
背景技術(shù)：
近年來，伴隨水產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)的調(diào)整，我國水產(chǎn)加工業(yè)也逐步發(fā)展壯大。加工魚產(chǎn)品的同時產(chǎn)生大量下腳料，占加工魚總質(zhì)量30% 50%，其中約5%是魚鱗。受技術(shù)和傳統(tǒng)觀念的制約，在較長的一段時間里，魚鱗并沒有被充分利用，而是當作垃圾被扔掉。據(jù)估計，我國每年廢棄的魚鱗達30萬噸。魚鱗中含有人體所需的多種營養(yǎng)物質(zhì)，除含有大量鈣質(zhì)，還含有大腦生長活動不可缺少的磷脂質(zhì)、磷蛋白以及其它生命活動所需物質(zhì)，如魚鱗中含有豐富的膠原蛋白，占 20% 40%。海水魚鱗中含有較為豐富的磷脂，占7%左右，具有提高機體免疫力、延緩衰老、增強骨細胞和神經(jīng)細胞功能的作用，還與機體的生殖生理和激素的代謝密切相關(guān)。但是，如果直接應(yīng)用魚鱗粉，它的吸收率很有限。為了更有效的利用魚鱗的營養(yǎng)成分，本研究將魚鱗加工成魚鱗粉，然后制成培養(yǎng)液，再接入乳酸菌經(jīng)混合發(fā)酵，利用微生物及其代謝產(chǎn)物的作用，使原來的結(jié)合鈣即羥基磷灰石變?yōu)橐妆粰C體吸收的離子鈣，膠原蛋白轉(zhuǎn)化為膠原多肽及氨基酸等。要預(yù)防和改善骨質(zhì)疏松，最科學的方法是同時補充鈣和膠原蛋白。這樣，鈣才能在膠原蛋白的粘合下沉積在骨骼，加強骨的韌性、硬度。而膠原蛋白是大分子蛋白質(zhì)，并不能被人體直接吸收。膠原多肽是膠原蛋白的酶解產(chǎn)物，分子量在1萬Da以下，含有膠原蛋白全部的氨基酸，具有良好的吸收性、溶解性。鈣的吸收利用不僅與攝入量有關(guān)，還與其形態(tài)和鈣磷比例有關(guān)，本研究通過乳酸菌發(fā)酵，液體化魚鱗中富集了大量的游離鈣，還將膠原蛋白降解為膠原多肽，且該發(fā)酵液中的鈣磷比適合人體吸收，還含有對人體有益的乳酸菌，可以制成復(fù)合補鈣產(chǎn)品，將會在目前以人工合成鈣為主要補鈣方式的市場增加生物態(tài)補鈣新方式。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種利用乳酸菌發(fā)酵的魚鱗膠原多肽及其制備方法。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用技術(shù)方案為—種魚鱗膠原多肽利用乳酸菌對魚鱗進行發(fā)酵，即得魚鱗膠原多肽發(fā)酵物，其產(chǎn)物為分子量為1000 3000道爾頓。化吸收率幾乎達100%，其營養(yǎng)及生理功能顯著提高。 所述乳酸菌為按體積比為1 1混合的保加利亞乳桿菌和嗜熱鏈球菌。所述魚鱗為羅非魚、 大黃魚或真鯛加工下腳料。魚鱗膠原多肽的制備方法將乳酸菌接種到含有魚鱗的發(fā)酵培養(yǎng)液中42°C下培養(yǎng)M小時，即得到魚鱗膠原蛋白。將保加利亞乳桿菌和嗜熱鏈球菌分別在脫脂乳培養(yǎng)基中進行活化培養(yǎng)，活化培養(yǎng)后的利亞乳桿菌和嗜熱鏈球菌按體積比為1 1接種到發(fā)酵液中，每升發(fā)酵液培養(yǎng)液中接種1 %上述活化培養(yǎng)后的菌種，同時加入5 %的蔗糖在42 V下培養(yǎng)M小時，過濾后濾液即為魚鱗膠原蛋白。所述脫脂乳培養(yǎng)基為將鮮乳煮沸后在100°C下靜止30min，而后自然冷卻，待出現(xiàn)脂肪層后，取下層乳液，滅菌后待用。發(fā)酵培養(yǎng)液，按重量百分比計魚鱗15%，酵母膏0.5%，磷酸氫二鉀0.2%， 檸檬酸銨0. 2 %，乙酸鈉0. 5 %，葡萄糖2 %,硫酸鎂(MgSO4 · 7H20)0. 058 %,硫酸錳 (MnSO4 · 4H20)0. 025%，吐溫801. OmL/L，余量為水，pH 6. 2-6. 4。所述魚鱗為羅非魚、大黃魚或真鯛加工下腳料。本發(fā)明所具有的優(yōu)點本發(fā)明實施例測定乳酸菌發(fā)酵魚鱗粉產(chǎn)生的主要營養(yǎng)物質(zhì)為游離鈣和膠原多肽， 其利用腸道有益菌——乳酸菌發(fā)酵天然富含膠原蛋白和適宜鈣磷比的魚鱗粉，乳酸菌發(fā)酵過程成產(chǎn)生的酸性末端產(chǎn)物能夠?qū)Ⅳ~鱗中的不可溶鈣(羥基磷灰石)部分轉(zhuǎn)化為可溶性鈣 (乳酸鈣，氨基酸鈣)，而且胞外蛋白酶可以水解魚鱗蛋白質(zhì)提供輔助鈣吸收的膠原多肽、 氨基酸和磷。同時，發(fā)酵過程中產(chǎn)生的乙醛，乙酸乙酯，雙乙酰等風味物質(zhì)，能改善發(fā)酵魚鱗口服液的口感和氣味，乳酸菌還是腸道有益菌，將魚鱗經(jīng)發(fā)酵后加工成含有活性菌體的補鈣制品，可大大地改善腸道的消化吸收功能。魚鱗通過乳酸菌發(fā)酵后，經(jīng)過濃縮、干燥、成型，加入填充劑等不同工序，可以制成各種高營養(yǎng)價值、風味獨特的飲品，亦可制成新型的口服液、膠囊、片劑等生物態(tài)補鈣健胃整腸的新型功能食品。
具體實施例方式實施例1)魚鱗粉的制備將魚鱗用清水浸泡2天，再在浸泡的清水中加入質(zhì)量體積比的碳酸氫鈉浸泡脫脂(即質(zhì)量體積比每IOOml中溶質(zhì)的克數(shù))，而后沖洗、晾干至恒重，最后粉碎到80目，待用。其中魚鱗可為來源于羅非魚、大黃魚、真鯛魚類加工下腳料。2)菌種活化①脫脂乳活化培養(yǎng)基將鮮乳煮沸后裝入三角燒杯中，在100°C下靜止30min，然后自然冷卻，待出現(xiàn)脂肪層后，取下層乳液分裝于試管中，加量于試管的1/3處，包裝好，利用間歇滅菌法滅菌，冷卻，低溫保存，備用。間歇滅菌法即106°C，30min滅菌，每天一次，連續(xù)3天。②將丁二酮乳酸鏈球菌Nisin butanedione、保加利亞乳桿菌Lactobacillus bulgaricus和嗜熱鏈球菌Mi^ptococcus thermophilus分別接入脫脂乳培養(yǎng)基中， 40. 5°C溫箱內(nèi)培養(yǎng)6 10h，連續(xù)活化三次。3)發(fā)酵培養(yǎng)①發(fā)酵培養(yǎng)液按重量百分比計，魚鱗粉5-15 %，酵母膏0. 5 %，磷酸氫二鉀 0.2%,檸檬酸銨0.2%,乙酸鈉0.5%,葡萄糖2 %，硫酸鎂(MgSO4 · 7H20) 0. 058 %，硫酸錳 (MnSO4 · 4H20) 0. 025%，吐溫 801. 0mL/L，余量為水，pH6. 2-6. 4。②活化培養(yǎng)后按體積比為1 1接種到發(fā)酵液中，每升發(fā)酵液培養(yǎng)液中接種上述活化培養(yǎng)后的菌種，同時加入質(zhì)量體積比3-8%的蔗糖(質(zhì)量體積比每100ml中溶質(zhì)的克數(shù)，即每IOOml發(fā)酵液中蔗糖的克數(shù))在42°C下培養(yǎng)12-48小時(步驟條件參見表1)， 過濾后濾液即為魚鱗膠原蛋白。③將上述所得魚鱗膠原蛋白采用EDTA滴定法進行鈣離子的測定，并用雙縮脲法進行可溶性蛋白的測定(參見表2)。表1因素水平表
權(quán)利要求
1.一種魚鱗膠原多肽，其特征在于利用乳酸菌對魚鱗進行發(fā)酵，即得魚鱗膠原多肽發(fā)酵物，其產(chǎn)物為分子量為1000 3000道爾頓。
2.按權(quán)利要求1所述的魚鱗膠原蛋白，其特征在于所述乳酸菌為按體積比為1 1混合的保加利亞乳桿菌和嗜熱鏈球菌。
3.按權(quán)利要求1所述的魚鱗膠原多肽，其特征在于所述魚鱗為羅非魚、大黃魚或真鯛加工下腳料。
4.一種權(quán)利要求1所述的魚鱗膠原多肽的制備方法，其特征在于將乳酸菌接種到含有魚鱗的發(fā)酵培養(yǎng)液中42°C下培養(yǎng)M小時，即得到魚鱗膠原蛋白。
5.按權(quán)利要求4所述的魚鱗膠原多肽的制備方法，其特征在于將保加利亞乳桿菌和嗜熱鏈球菌分別在脫脂乳培養(yǎng)基中進行活化培養(yǎng)，活化培養(yǎng)后的利亞乳桿菌和嗜熱鏈球菌按體積比為1 1接種到發(fā)酵液中，每升發(fā)酵液培養(yǎng)液中接種上述活化培養(yǎng)后的菌種， 同時加入5%的蔗糖在42°C下培養(yǎng)M小時，過濾后濾液即為魚鱗膠原蛋白。
6.按權(quán)利要求4或5所述的魚鱗膠原多肽的制備方法，其特征在于所述脫脂乳培養(yǎng)基為將鮮乳煮沸后在100°c下靜止30min，而后自然冷卻，待出現(xiàn)脂肪層后，取下層乳液，滅菌后待用。
7.按權(quán)利要求4或5所述的魚鱗膠原多肽的制備方法，其特征在于發(fā)酵培養(yǎng)液，按重量百分比計魚鱗15 %，酵母膏0.5%，磷酸氫二鉀0.2%，檸檬酸銨0. 2 %，乙酸鈉0. 5 %，葡萄糖 2 %，硫酸鎂(MgSO4 · 7H20) 0. 058 %，硫酸錳(MnSO4 · 4H20) 0. 025 %，吐溫 801. OmL/L,余量為水，pH 6. 2-6. 4。
8.按權(quán)利要求4或5所述的魚鱗膠原多肽的制備方法，其特征在于所述魚鱗為羅非魚、大黃魚或真鯛加工下腳料。
全文摘要
本發(fā)明涉及生物技術(shù)，具體的說是一種利用乳酸菌發(fā)酵的魚鱗膠原多肽及其制備方法。利用乳酸菌對魚鱗進行發(fā)酵，即得魚鱗膠原多肽，其主要產(chǎn)物為分子量分布范圍1000～3000道爾頓的多肽，消化吸收率幾乎達100％，其營養(yǎng)及生理功能顯著提高。本發(fā)明實施例測定乳酸菌發(fā)酵魚鱗粉產(chǎn)生的主要營養(yǎng)物質(zhì)為游離鈣和膠原多肽，其利用腸道有益菌——乳酸菌發(fā)酵天然富含膠原蛋白多肽和適宜鈣磷比的魚鱗粉，乳酸菌發(fā)酵過程成產(chǎn)生的酸性末端產(chǎn)物能夠?qū)Ⅳ~鱗中的不可溶鈣(羥基磷灰石)部分轉(zhuǎn)化為可溶性鈣(乳酸鈣，氨基酸鈣)，而且胞外蛋白酶可以水解魚鱗蛋白質(zhì)提供輔助鈣吸收的膠原多肽、氨基酸和磷。
文檔編號A23L1/29GK102318843SQ201110191660
公開日2012年1月18日 申請日期2011年7月1日 優(yōu)先權(quán)日2011年7月1日
發(fā)明者劉梅, 葉素艷, 周海洋, 孫姝娟, 李振, 王寶杰, 王雷, 蔣克勇 申請人:中國科學院海洋研究所, 濟寧華能制藥廠