專利名稱：一種膠原多肽及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及生物技術領域，具體涉及一種膠原多肽及其制備方法。
背景技術：
膠原多肽是膠原蛋白或明膠蛋白經(jīng)酶解生成的多肽或寡肽的小分子物質，具有較高的的消化吸收性，普遍應用在食品、醫(yī)藥、美容等領域。膠原多肽富含人體需要的甘氨酸、脯氨酸、羥脯氨酸等氨基酸，營養(yǎng)價值高，具有多方面功效，如保護胃黏膜、防止?jié)儾?、抑制血壓上升、促進成骨作用、預防骨質疏松、促進皮膚膠原代謝、美容作用、對各種骨關節(jié)疾病的預防及治療作用以及促進鈣的吸收等。當膠原多肽不足時，不僅皮膚及骨骼會出現(xiàn)問題，對內(nèi)臟器官也會產(chǎn)生不利影響。膠原多肽是維持身體正?；顒铀豢扇鄙俚闹匾煞郑瑫r也是使身體保持年輕、防止老化的物質。目前，在制備膠原多肽的方法中有利用魚鱗制備膠原多肽的工藝，其工藝流程一般為清洗魚鱗-脫灰-脫鹽-煮膠-酶解-脫色-脫腥-濃縮、干燥，所謂脫灰就是除去魚鱗表面的羥基磷灰石以及少量的鈣，而脫鹽則是除去脫灰后產(chǎn)生的鈣鹽，煮膠則是用水煮沸魚鱗。有關研究表明，魚鱗含有豐富的蛋白質，占魚鱗總重的50-70%，主要為膠原蛋白和角蛋白，可見魚鱗是非常好的膠原多肽的生產(chǎn)原料，無論在成本上還是膠原蛋白的含量上均具有顯著優(yōu)勢。然而，現(xiàn)有工藝步驟繁多，魚鱗需要脫灰和脫鹽處理，酶解完后還需要進行脫色以及脫腥等處理工藝，極其影響膠原多肽的生產(chǎn)效率。

發(fā)明內(nèi)容
有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種膠原多肽及其制備方法，使得該方法能夠減少工藝流程，更加簡便，同時保證膠原多肽具有較高品質。為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術方案一種膠原多肽的制備方法，將魚鱗用堿液浸泡后洗凈，于蒸餾水中加熱煮沸，冷卻后加濃磷酸調節(jié)PH值為I. 6-1. 8，并加入酸性蛋白酶酶解，然后加入氫氧化鈣調節(jié)pH值為
5.5-6.0，并加入中性蛋白酶酶解，酶解后滅酶活性、過濾，濾液濃縮、干燥后所得干粉即為膠原多肽。其中，所述魚鱗與蒸餾水的質量比優(yōu)選為I : 10-15?，F(xiàn)有工藝在脫灰的時候采用鹽酸，利用鹽酸與羥基磷灰石反應生成氯化鈣和磷酸二氫鈣的原理，溶解羥基磷灰石，并用水洗滌除去鈣鹽，然后進行后續(xù)一系列步驟。但是這種工藝步驟過于繁多，不能提高膠原多肽的生產(chǎn)效率，而且洗滌產(chǎn)生污水污染環(huán)境。為此，本發(fā)明改變脫灰方法，先利用磷酸與羥基磷灰石反應生成磷酸二氫鈣和磷酸鈣，再加入氫氧化鈣與磷酸二氫鈣反應生成沉淀磷酸鈣，達到除去羥基磷灰石的目的，同時在脫灰過程中進行酶解工序，生成的磷酸鈣也能夠作為吸附腥味的物質進行除腥，最后通過過濾除去鈣鹽，使得酶解、脫灰、脫腥一并進行，并且不用額外水洗滌脫鹽，減少了工序步驟和廢水排放，提高了膠原多肽的生產(chǎn)效率。、
在脫灰的時候，由于加入了磷酸和氫氧化鈣，溶液中的pH值會發(fā)生變化，申請人在經(jīng)過研究后，通過限定PH值來限定磷酸和氫氧化鈣的加入量，最大程度確保反應完全生成磷酸鈣沉淀，同時加入適合PH值的蛋白酶酶解。蛋白酶根據(jù)最適pH值來分，分為酸性蛋白酶、中性蛋白酶以及堿性蛋白酶，加入磷酸后PH值為I. 6-1. 8，需要酸性蛋白酶，加入量優(yōu)選為占魚鱗總重的O. 8% (即魚鱗與酸性蛋白酶的質量比為125 1)，本發(fā)明優(yōu)選胃蛋白酶。加入氫氧化鈣后PH值為5. 5-6. 0，需要中性蛋白酶，加入量優(yōu)選為占魚鱗總重的
0.8% (即魚鱗與中性蛋白酶的質量比為125 I)，本發(fā)明優(yōu)選木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、端肽酶或沙雷肽酶。配合脫灰工序，本發(fā)明進行了兩次酶解，可有效地酶解膠原蛋白成為膠原多肽，保證產(chǎn)品品質。其中，用酸性蛋白酶酶解的時間優(yōu)選為7h，用中性蛋白酶酶解的時間優(yōu)選為3h。魚鱗表面除了有羥基磷灰石，還附有一些脂肪，為了有效除去脂肪，需要加入堿液浸泡，而本發(fā)明優(yōu)選采用氫氧化鈉溶液、碳酸氫鈉溶液或碳酸鈉溶液為堿液，并且優(yōu)選浸泡 30mino為了便于蛋白酶酶解膠原蛋白，本發(fā)明用水煮沸魚鱗一段時間，利用沸水熱量初步斷裂膠原蛋白的化學鍵，使其復雜三維結構變?yōu)橹辨溄Y構，作為優(yōu)選本發(fā)明煮沸的時間為3h，且用于煮沸的蒸汽壓強為IMPa。酶解完成后，過濾溶液除去沉淀，將濾液濃縮、干燥即可得到膠原多肽干粉。其中，濃縮倍數(shù)優(yōu)選為4倍，干燥可采用常規(guī)干燥方法，如噴霧干燥。本發(fā)明所述制備方法制備的膠原多肽經(jīng)理化檢測，符合各種標準要求，具有較高品質。因此，本發(fā)明還提供一種由本發(fā)明所述制備方法制備的膠原多肽。由以上技術方案可知，本發(fā)明制備方法改變脫灰方法，利用磷酸和氫氧化鈣將羥基磷灰石轉變?yōu)榱姿徕}沉淀，過濾除去，并同時進行酶解和利用沉淀脫腥，減少了工序步驟和廢水排放，提高了膠原多肽的生產(chǎn)效率，并且保證了膠原多肽具有較高品質。
具體實施例方式本發(fā)明公開了一種膠原多肽及其制備方法，本領域技術人員可以借鑒本文內(nèi)容，適當改進工藝參數(shù)實現(xiàn)。特別需要指出的是，所有類似的替換和改動對本領域技術人員來說是顯而易見的，它們都被視為包括在本發(fā)明。本發(fā)明所述制備方法已經(jīng)通過較佳實施例進行了描述，相關人員明顯能在不脫離本發(fā)明內(nèi)容、精神和范圍內(nèi)對本文所述的方法和應用進行改動或適當變更與組合，來實現(xiàn)和應用本發(fā)明技術。以下就本發(fā)明所提供的一種膠原多肽及其制備方法做進一步說明。實施例I :用本發(fā)明所述制備方法制備膠原多肽稱取5kg魚鱗加O. 5 %氫氧化鈉溶液浸泡30分鐘,用水反復沖洗至無氫氧化鈉殘留。將魚鱗放入提取罐中，加入75kg蒸餾水，煮沸3小時，蒸汽壓強為IMpa。補加適量蒸餾水(維持魚鱗和蒸餾水質量為為I : 10-15)，冷卻至45°C，加入濃磷酸調pH至I. 62，加入魚鱗總重O. 8%的胃蛋白酶酶解7小時，加入氫氧化鈣調pH至5. 60，加入魚鱗總重O. 8%的木瓜蛋白酶酶解3小時。酶解完畢加熱滅酶活性，過濾，去渣取濾液濾液真空濃縮(濃縮倍數(shù)4倍)，濃縮液進入噴霧干燥機，進風溫度180°C，出風溫度90°C，即得膠原多肽干粉。取樣進行理化檢測，檢驗結果如表I :
表I檢測結果
權利要求
1.一種膠原多肽的制備方法，其特征在于，將魚鱗用堿液浸泡后洗凈，于蒸餾水中加熱煮沸，冷卻后加濃磷酸調節(jié)PH值為I. 6-1. 8，并加入酸性蛋白酶酶解，然后加入氫氧化鈣調節(jié)pH值為5. 5-6. O,并加入中性蛋白酶酶解，酶解后滅酶活性、過濾，濾液濃縮、干燥后所得干粉即為膠原多肽。
2.根據(jù)權利要求I所述制備方法，其特征在于，所述堿液為氫氧化鈉溶液、碳酸氫鈉溶液或碳酸鈉溶液。
3.根據(jù)權利要求I所述制備方法，其特征在于，所述煮沸的時間為3h。
4.根據(jù)權利要求I所述制備方法，其特征在于，所述酸性蛋白酶為胃蛋白酶。
5.根據(jù)權利要求I所述制備方法，其特征在于，所述中性蛋白酶為木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、端肽酶或沙雷肽酶。
6.根據(jù)權利要求I所述制備方法，其特征在于，所述濃縮倍數(shù)為4倍。
7.根據(jù)權利要求I所述制備方法，其特征在于，所述魚鱗與蒸餾水的質量比為I 10-15。
8.根據(jù)權利要求I所述制備方法，其特征在于，所述魚鱗與酸性蛋白酶的質量比為125 I。
9.根據(jù)權利要求I所述制備方法，其特征在于，所述魚鱗與中性蛋白酶的質量比為125 I。
10.權利要求1-9任意一項所述制備方法制備的膠原多肽。
全文摘要
本發(fā)明涉及生物技術領域，公開了一種膠原多肽及其制備方法。本發(fā)明所述制備方法將魚鱗用堿液浸泡后洗凈，于蒸餾水中加熱煮沸，冷卻后加濃磷酸調節(jié)pH值為1.6-1.8，并加入酸性蛋白酶酶解，然后加入氫氧化鈣調節(jié)pH值為5.5-6.0，并加入中性蛋白酶酶解，酶解后滅酶活性、過濾，濾液濃縮、干燥后所得干粉即為膠原多肽。本發(fā)明制備方法改變脫灰方法，利用磷酸和氫氧化鈣將羥基磷灰石轉變?yōu)榱姿徕}沉淀，過濾除去，并同時進行酶解和利用沉淀脫腥，減少了工序步驟和廢水排放，提高了膠原多肽的生產(chǎn)效率，并且保證了膠原多肽具有較高品質。
文檔編號C12P21/06GK102643890SQ201210131030
公開日2012年8月22日 申請日期2012年4月28日 優(yōu)先權日2012年4月28日
發(fā)明者伍增利, 王海生, 韓金光 申請人:韓金光