專利名稱：牡蠣生物活性物質(zhì)的制備方法及其產(chǎn)品的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種海產(chǎn)保健營養(yǎng)品及其加工方法，具體地說是一種以牡蠣為原料進行提取、酶水解制取其中的營養(yǎng)物質(zhì)的牡蠣生物活性物質(zhì)的制備方法及其產(chǎn)品。
背景技術(shù)：
牡蠣屬于軟體動物門，在北方稱為海蠣子，南方叫蠔，為沿海習見且大量生長的一種貝類，其肉嫩味鮮，是一種營養(yǎng)價值極高的名貴海產(chǎn)品。
牡蠣既是食品又能當作藥品，現(xiàn)已證明牡蠣具有降血脂、抑制血小板聚集，提高機體免疫力，促進新陳代謝等功能，因此在動脈硬化、冠心病、高血脂、糖尿病、慢性肝炎、免疫力降低等疾病的輔助治療中取得了良好的療效，同時在抗癌及防止癌細胞擴散方面也有一定的效果，已經(jīng)分離出了抗癌的多肽物質(zhì)。
由于直接食用牡蠣受地理條件所限，加之有些人對直接食用不適應，直接食用人群不廣，因此人們開始研究從牡蠣中提取營養(yǎng)物質(zhì)的方法，相應的也有許多牡蠣制成品。
如中國專利申請CN1302561A公開了牡蠣營養(yǎng)素及其制作方法，將牡蠣清洗、干燥、粉碎、包裝，并將牡蠣粉置于膠囊內(nèi)制成片或顆粒。
又如中國專利CN1067553C公開的牡蠣提取物及其制劑的制備方法，制備方法包括水提、過濾、真空濃縮、噴霧干燥等步驟，可用該方法得到牡蠣提取物。
又如中國專利申請CN 1486634A公開的一種牡蠣提取物及其制備方法，是以牡蠣的可食部分為原料制成固體粉末，制備方法依次包括食用乙醇處理、水提取、固液分離、調(diào)節(jié)pH值沉淀分離出蛋白質(zhì)、脫除電解質(zhì)、脫色、真空濃縮、噴霧干燥等幾個步驟。
這些方法雖能較好的保留或提取牡蠣現(xiàn)有的營養(yǎng)成分，具有食用方便、食用量可人為控制、營養(yǎng)成分不損失、吸收充分等優(yōu)點，但這些方法不能有效轉(zhuǎn)化和提高牡蠣中的有效成分，活性物質(zhì)的濃度不夠高。
因此也采用了牡蠣酶解方法來轉(zhuǎn)化和提高牡蠣中的有效成分，如中國專利申請CN 1370451A公開的一種牡蠣口服液的制備方法，其包括下列主要步驟a.取新鮮牡蠣軟體加水勻漿，并以適量的木瓜蛋白酶水解，木瓜蛋白酶能有效地清除腥味蛋白的腥味；b.牡蠣勻漿經(jīng)過酶解后，進行加糖及加熱處理，以減少堿性物質(zhì)腥臭味；c.進行加酸及加熱處理，以進一步清除堿性物質(zhì)的腥臭味，經(jīng)過上述步驟可獲得用于配制牡蠣口服液的牡蠣勻漿液。
又如中國專利申請CN1478420A公開的一種牡蠣膠囊食品及其制備方法，以牡蠣肉為原料，打漿后經(jīng)常溫、低溫及紫外線照射自溶后，再用胃蛋白酶酶解；還可用牡蠣的自溶酶作外源酶酶解；還可用枯草桿菌中性蛋白酶單酶酶解；還可用枯草桿菌中性蛋白酶和胃蛋白酶雙外源酶酶解。脫除酶解液異味可用葡萄糖處理，也可用檸檬酸與蘋果酸的混酸處理，也可用β-環(huán)糊精和酵母粉處理，還可用復合風味蛋白酶處理，將上述酶解液澄清后，經(jīng)濃縮、冷凍干燥后即可裝入膠囊。
這類方法中采用的酶一般用胃蛋白酶、枯草桿菌中性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶等單酶或這些單酶的簡單組合，這些牡蠣酶水解方法存在以下缺點(1)由于直接將牡蠣制成漿料酶解，牡蠣中的許多原始活性物質(zhì)就會被破壞，因此從牡蠣中制得的營養(yǎng)物質(zhì)就會失去特有的生理功能。(2)由于采用的酶的特性強，因此酶解時的pH值范圍窄，且需要用酸、堿或緩沖液來調(diào)節(jié)，其制備復雜，而且其功能肽、游離氨基酸和多糖的產(chǎn)量低，既增加了產(chǎn)品的生產(chǎn)成本，又不能有效轉(zhuǎn)化和利用牡蠣的營養(yǎng)物質(zhì)，因此牡蠣的營養(yǎng)和藥理功能也沒有得到有效的發(fā)揮。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是克服現(xiàn)有技術(shù)的上述缺陷而提供牡蠣生物活性物質(zhì)的制備方法，以保留牡蠣原有的活性物質(zhì)，利用復合蛋白酶充分轉(zhuǎn)化牡蠣的營養(yǎng)物質(zhì)，提高牡蠣中的人體易吸收、有功效的活性成分，達到高效、低成本制備牡蠣生物活性物質(zhì)的目的。
本發(fā)明的另一目的在于利用牡蠣的原有天然活性成分，如低聚功能肽、游離氨基酸和寡糖，以及牡蠣酶解產(chǎn)物，制備具有一定特殊生理功能的牡蠣酶解液的口服液、膠囊、片劑和沖劑，以提高產(chǎn)物的營養(yǎng)成分，方便食用，并充分提高牡蠣的利用價值。
本發(fā)明解決上述技術(shù)問題所采用的方案為牡蠣生物活性物質(zhì)的制備方法，包括以下步驟(1)、將牡蠣洗凈、去殼、加水打漿，過濾、膜超濾得到分子量在一定范圍的濾液和沉淀物，濾液可直接冷凍干燥或添加乳糖等物質(zhì)噴霧干燥；(2)、在(1)的沉淀物中加入水制成溶液，再加入酶進行酶解，制得酶解液；(3)將步驟(2)制得的酶解液過濾冷凍干燥或添加乳糖等物質(zhì)噴霧干燥得成品。
為了保證牡蠣原有生物活性物質(zhì)特性，發(fā)揮一些特殊物質(zhì)的生理功能，如降血脂、抑制血小板聚集，提高機體免疫力，促進新陳代謝等，本發(fā)明的步驟(1)利用磷酸緩沖液或去離子水同去殼后的牡蠣混合、粉碎、攪拌、提取、過濾、膜超濾，截留分子量∠10,000Da的牡蠣純天然的生物活性物質(zhì)，冷凍或噴霧干燥后再制成膠囊。
步驟(2)將牡蠣的大分子物質(zhì)充分酶解，得到富含功能肽、游離氨基酸和多糖等營養(yǎng)物質(zhì)的酶解液。
為了方便上述牡蠣酶水解液的使用，還可制成口服液、膠囊、片劑或沖劑等。由于牡蠣酶水解液和其他相似海產(chǎn)品的酶解液體做成各種制劑的方法相似，因此只要在上述牡蠣酶解液中加入相應的物質(zhì)，就可制成口服液、膠囊、片劑和沖劑，這些制劑的制備方法已經(jīng)公知，不做詳細論述，但其組成和功能卻比較獨特。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點在于(1)由于先將牡蠣中的許多原始活性物質(zhì)提取出來，因此從牡蠣中制得的生物活性物質(zhì)就能保持原有的生物活性和營養(yǎng)。
(2)選用不用酸或堿調(diào)節(jié)pH值、水解效果好的復合蛋白酶，因此操作簡便、生產(chǎn)成本低。制得的牡蠣酶水解液中含有更多的低聚功能肽、游離氨基酸和多糖，營養(yǎng)成分更高、具有更好的抗腫瘤、抗衰老、抗病毒、消炎、提高機體免疫力等生理功能。
(3)利用制得的牡蠣復合酶水解液可進一步加工成口服液、膠囊、沖劑、片劑等，這樣使用更方便。
具體實施例方式
以下結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步詳細描述。
實施例1
牡蠣生物活性物質(zhì)的制備方法(1)、新鮮牡蠣清洗干凈后去殼，然后加2-4倍的磷酸緩沖液或去離子水，勻漿提取30min左右，離心、超濾后直接冷凍干燥或添加乳糖等物質(zhì)噴霧干燥制得純天然產(chǎn)物；(2)、取步驟(1)中離心后的沉淀物質(zhì)按一定比例加水稀釋后制得的牡蠣水溶液加入蛋白酶進行酶解；(3)將步驟(1)(2)制得的純天然提取物和經(jīng)過濾的酶解液冷凍干燥或添加乳糖等噴霧干燥。
酶解的條件所使用的酶1389中性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、復合蛋白酶。
濃度5％ 10％ 15％ 20％，濃度為牡蠣占整個牡蠣水溶液的百分比；溫度中性蛋白酶50℃；胰蛋白酶45℃；木瓜蛋白酶65℃；復合蛋白酶從35℃開始逐漸升溫到70℃。
時間4小時。
酶解的條件和結(jié)果見表1-表8。
酶解程度隨酶解時間的變化結(jié)果見表9和表10。
從表1至表8中可以看出，牡蠣液可采用常用的酶酶解，但更好的是用復合蛋白酶水解。
從表9和表10可以看出，酶解時間越長越好，最少至2小時就可以得到很好的酶解結(jié)果。
從表1至表10可知，復合蛋白酶解條件為牡蠣的濃度為5-20％(重量)，濃度為牡蠣占整個牡蠣水溶液的百分比。
酶的加入量為2×104IU/kg-8×104IU/kg(牡蠣)，根據(jù)常理推斷可以擴大范圍到1×104IU/kg-10×104IU/kg(牡蠣)；溫度選用復合酶的使用溫度，一般為35-70℃，溫度為逐漸升溫；時間為2-6h。
實施例2由實施例1步驟(3)中得到的牡蠣酶解液加入β環(huán)糊精去腥，酶解液過濾、添加蜂蜜、檸檬酸、維生素C、山梨酸鉀后滅菌灌裝。蜂蜜用于掩蓋腥味和調(diào)節(jié)口感，山梨酸鉀為防腐劑，加入量均為常用量。
實施例3由實施例1步驟(3)中得到的牡蠣酶解液直接或加入乳糖后噴霧干燥制成粉劑裝膠囊，制成膠囊的乳糖的具體比例可由所需產(chǎn)品的最終多糖和氨基酸的含量而定。
實施例4將由實施例1步驟(3)中得到的牡蠣酶解液濃縮，用淀粉作為添充料壓片包糖衣，打光，制成片劑。
實施例5在由實施例1步驟(3)中得到的牡蠣酶解液中加入乳糖或β環(huán)糊精造粒制成沖劑。
以下是實驗條件和結(jié)果。
表1牡蠣復合蛋白酶水解后多糖含量(mg/ml)

表2牡蠣復合蛋白酶水解后氨基酸含量(mg/ml)

表3牡蠣中性蛋白酶水解后氨基酸含量(mg/ml)

表4牡蠣中性蛋白酶水解后多糖的含量(mg/ml)

表5牡蠣胰蛋白酶水解后氨基酸含量(mg/ml)

表6牡蠣胰蛋白酶水解后多糖的含量(mg/ml)

表7牡蠣木瓜蛋白酶水解后氨基酸含量(mg/ml)

表8牡蠣木瓜蛋白酶水解后多糖含量(mg/ml)

表9牡蠣酶解液中氨基酸含量(mg/ml)與酶解時間的關(guān)系酶加入量為5×104IU/kg，溫度為逐漸升溫

表10牡蠣酶水解液中多糖含量(mg/ml)與酶解時間的關(guān)系酶加入量為5×104IU/kg，溫度為逐漸升溫

權(quán)利要求
1.牡蠣生物活性物質(zhì)的制備方法，其特征在于包括以下步驟(1)將牡蠣洗凈、去殼、加水打漿，過濾、膜超濾得到濾液和殘余物，濾液直接冷凍干燥或添加乳糖等物質(zhì)噴霧干燥制得牡蠣活性物質(zhì)干粉；(2)在(1)中的殘余物中加入水制成溶液，再加入酶進行酶解，制得酶解液；(3)將步驟(2)制得的酶解液過濾、冷凍干燥或加乳糖噴霧干燥后制得成品。
2.如權(quán)利要求1所述的牡蠣生物活性物質(zhì)的制備方法，其特征在于所述的酶為復合蛋白酶。
3.如權(quán)利要求2所述的牡蠣生物活性物質(zhì)的制備方法，其特征在于所述的牡蠣液酶解條件為牡蠣液中牡蠣的含量為5-20％(重量)，1×104IU/kg-10×104IU/kg；酶解溫度為復合蛋白酶的使用溫度，35-70℃；酶解時間為2-6h。
4.牡蠣天然產(chǎn)物干粉，其特征在于由權(quán)利要求1或2或3得到的牡蠣酶解液加乳糖噴霧干燥或冷凍干燥制成。
5.牡蠣口服液，其特征在于由權(quán)利要求1或2或3得到的牡蠣酶解液添加β環(huán)糊精、調(diào)味劑和防腐劑后經(jīng)滅菌灌裝而成。
6.牡蠣膠囊，其特征在于由權(quán)利要求4得到的牡蠣干粉制成。
7.牡蠣片劑，其特征在于由權(quán)利要求4得到的牡蠣干粉添加淀粉而成。
8.牡蠣沖劑，其特征在于由權(quán)利要求4得到的干粉加入乳糖或β環(huán)糊精造粒而成。
全文摘要
牡蠣生物活性物質(zhì)的制備方法及其產(chǎn)品，包括以下步驟(1)將牡蠣洗凈、去殼、加水打漿，過濾、超濾得到濾液和殘余物，濾液直接冷凍干燥或添加乳糖等物質(zhì)噴霧干燥制得干粉；(2)在(1)中的殘余物中加入水制成溶液，再加入酶進行酶解，制得酶解液；(3)將步驟(2)制得的酶解液過濾、冷凍干燥或添加劑乳糖后噴霧干燥得粉劑。其優(yōu)點在于(1)從牡蠣中制得的純天然營養(yǎng)物質(zhì)能保持原有的生物功能。(2)操作簡便、生產(chǎn)成本低。制得的牡蠣酶水解液中含有更多的功能肽、游離氨基酸和多糖，營養(yǎng)成分更高、具有更好的抗腫瘤、抗衰老、提高機體免疫力等生理功能。(3)牡蠣復合酶水解液可進一步加工成口服液、膠囊、沖劑、片劑等，使用更方便，保健功能更明顯。
文檔編號A23L3/3571GK1586312SQ200410054048
公開日2005年3月2日 申請日期2004年8月27日 優(yōu)先權(quán)日2004年8月27日
發(fā)明者劉志明, 蘇秀榕, 李妍妍 申請人:寧波大學