一種檢測(cè)海藻生物質(zhì)內(nèi)還原性糖類(lèi)物質(zhì)的方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明提出了一種檢測(cè)海藻生物質(zhì)中還原性糖類(lèi)物質(zhì)的方法，其包括：（1）將所述海藻生物質(zhì)粉碎，以便獲得樣品粉末；（2）利用酸對(duì)所述樣品粉末進(jìn)行水解處理，以便得到含有所述還原性糖類(lèi)物質(zhì)的水解液；（3）從所述水解液中純化所述還原性糖類(lèi)物質(zhì)，以便得到待檢測(cè)樣品；以及（4）采用高效液相色譜法，通過(guò)蒸發(fā)光散射檢測(cè)器檢測(cè)所述待測(cè)樣品中的所述還原性糖類(lèi)物質(zhì)。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，利用本發(fā)明的方法能夠準(zhǔn)確、高效地檢測(cè)海藻生物質(zhì)內(nèi)還原性糖類(lèi)物質(zhì)。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種檢測(cè)海藻生物質(zhì)內(nèi)還原性糖類(lèi)物質(zhì)的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種檢測(cè)海藻生物質(zhì)內(nèi)還原性糖類(lèi)物質(zhì)的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]近年來(lái)，利用非耕地養(yǎng)殖的海藻生物質(zhì)來(lái)生產(chǎn)第三代生物能源，成為生物能源領(lǐng)域的熱點(diǎn)。由于海藻中高含量的碳水化合物經(jīng)過(guò)處理可被微生物利用，以其為原料產(chǎn)生物燃料的研究進(jìn)展迅速。表1給出了干海帶、干江蘺中的基本組分。從表1中可以看出，粗纖維和總糖即碳水化合物的含量非常高，因此水解后可產(chǎn)生大量發(fā)酵性糖，可被微生物利用進(jìn)行發(fā)酵。
[0003]表1干海帶、干江蘺的基本組分(単位:％)
【權(quán)利要求】
1.一種檢測(cè)海藻生物質(zhì)中還原性糖類(lèi)物質(zhì)的方法，其特征在于，包括: (1)將所述海藻生物質(zhì)粉碎，以便獲得樣品粉末； (2)利用酸對(duì)所述樣品粉末進(jìn)行水解處理，以便得到含有所述還原性糖類(lèi)物質(zhì)的水解液； (3)從所述水解液中純化所述還原性糖類(lèi)物質(zhì)，以便得到待檢測(cè)樣品；以及 (4)采用高效液相色譜法，通過(guò)蒸發(fā)光散射檢測(cè)器檢測(cè)所述待測(cè)樣品中的所述還原性糖類(lèi)物質(zhì)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述海藻生物質(zhì)為選自海帶、馬尾藻、江蘺以及石花菜中的至少ー種， 所述還原性糖類(lèi)物質(zhì)為選自海藻糖、葡萄糖、木糖、半乳糖、阿拉伯糖、甘露糖和甘露醇的至少ー種。
3.根據(jù)權(quán)利2所述的方法，其特征在于，在步驟(1)中，所述樣品粉末的粒度為177~840微米范圍內(nèi)， 其中，當(dāng)所述海藻生物質(zhì)為海帶時(shí)，在進(jìn)行粉碎之前，預(yù)先對(duì)其依次進(jìn)行洗浄、去鹽和風(fēng)干處理， 當(dāng)所述海藻生物質(zhì)為江蘺時(shí)，將其干燥后直接進(jìn)行粉碎。
4.根據(jù)權(quán)利I所述的方法，其特征在于，在步驟(2)中，所述酸為濃度為廣3重量％的稀硫酸，所述水解處理是在1KT130攝氏度下進(jìn)行3(T60分鐘，并且所述稀硫酸與所述樣品粉末的液固比為100:1~5。
5.根據(jù)權(quán)利I所述的方法，其特征在于，在步驟(2)中，所述水解處理是在110攝氏度下進(jìn)行60分鐘，并且在所述水解處理過(guò)程中施加微波進(jìn)行輔助水解。
6.根據(jù)權(quán)利I所述的方法，其特征在于，在步驟(3)中，從所述水解液中純化所述還原性糖類(lèi)物質(zhì)進(jìn)ー步包括: 對(duì)所述含有還原性糖類(lèi)物質(zhì)的水解液依次進(jìn)行中和、離心去除沉淀、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)、水提醇沉、離心去除沉淀和蒸發(fā)こ醇預(yù)處理，以便得到所述待檢測(cè)樣品。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在干，所述中和包括使用碳酸鈣將所述水解液的pH值調(diào)節(jié)至7。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)包括: 在55飛5攝氏度的溫度下，在100~200 mbar的真空度下，將所述水解液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至液態(tài)體積小于I mL，以便得到濃縮液。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在干，所述水提醇沉包括: 向經(jīng)過(guò)所述旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)后得到的濃縮液中，加入95(v/v)%的こ醇，其中，所述濃縮液與所述こ醇的體積比為1:4飛。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述蒸發(fā)光散射檢測(cè)器的載氣為氮?dú)?，漂移管溫度?05 °C，載氣流速2.5 L/min,色譜柱為Benson BP-1OOPb++碳水化合物分析柱，流動(dòng)相為純水，流速0.4 mL/min,以及進(jìn)樣量10 u L，柱溫90°C。
【文檔編號(hào)】G01N30/14GK103604884SQ201310593952
【公開(kāi)日】2014年2月26日 申請(qǐng)日期:2013年11月21日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月21日
【發(fā)明者】李暉, 陳祎, 曹遜, 肖乾坤, 韋萍, 歐陽(yáng)平凱 申請(qǐng)人:南京工業(yè)大學(xué)