一種從天然植物中提取活性物質(zhì)的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及天然植物提取領(lǐng)域，特別是一種從天然植物中提取活性物質(zhì)的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 簕攩花椒Zanthoxylum avicennae為蕓香科花椒屬植物，主要分布于北煒約25° 以南地區(qū)，生長(zhǎng)于低海拔平地、坡地或谷地。我國(guó)分布在海南、福建、廣東、臺(tái)灣、廣西、云南 等南方地區(qū)。在海南三亞，簕攩花椒資源分布豐富。文獻(xiàn)報(bào)道蕓香科花椒屬植物中主要含有 揮發(fā)油、黃酮、生物堿、香豆素、酰胺等成分。鮮葉、根皮及果皮均有花椒氣味，嚼之有粘質(zhì)， 味苦而麻舌，果皮和根皮味較濃。民間用作草藥。有祛風(fēng)去濕、行氣化痰、止痛等功效，治多 類(lèi)痛癥，又作驅(qū)蛔蟲(chóng)劑。臨床上用花椒乙醚提取物或花椒揮發(fā)油進(jìn)行消炎止痛，取得良好的 療效。另?yè)?jù)文獻(xiàn)報(bào)道，花椒屬植物對(duì)4種深部真菌和11種皮膚癬菌都有一定的抑菌和殺菌 作用。簕攩花椒作為一種天然植物，從未發(fā)現(xiàn)有簕攩花椒提取物具有抗腫瘤活性的報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 針對(duì)上述情況，為解決現(xiàn)有技術(shù)之缺陷，本發(fā)明之目的就是提供一種從天然植物 中提取活性物質(zhì)的方法，可有效解決腫瘤治療的問(wèn)題。
[0004] 本發(fā)明解決的技術(shù)方案是，包括以下步驟：
[0005] 1)原料的粉碎和提?。簩⒑{攩花椒的葉子曬干，粉碎成粗粉，過(guò)20-40目篩，置于 容器中，用簕攩花椒粗粉1倍重量的質(zhì)量濃度為50-90%的含水乙醇浸潤(rùn)4_6h，裝入滲漉筒 中，用簕攩花椒粗粉10-15倍重量的50-90%含水乙醇進(jìn)行滲漉提取，以3-10mL/min流速收 集滲源提取液；
[0006] 2)閃蒸濃縮：將得到的提取液在70°C以下閃蒸濃縮至原體積的1/10-1/15,得濃 縮液；
[0007] 3)脫色除雜：將濃縮液分散到水中，水的用量為濃縮液體積的三分之一，用石油 醚萃取2-5次，每次用量為濃縮液體積的1-2倍量，以脫除色素和油脂類(lèi)雜質(zhì)，靜止分層后， 分去石油醚層，合并石油醚萃取液，真空濃縮蒸出石油醚；
[0008] 4)乙醚萃取部位的制備：將脫色除雜后的濃縮液用乙醚萃取3-6次，每次用量為 濃縮液體積的1-3倍量，靜止分層后，分去乙醚層，合并乙醚萃取液，常壓濃縮蒸出乙醚，得 到乙醚萃取部位的濃縮液，繼續(xù)將濃縮液進(jìn)行真空濃縮，再真空干燥，用研缽研細(xì)后，得到 乙醚提取物干粉；
[0009] 5)乙酸乙酯萃取部位的制備：將乙醚萃取后分出的水層濃縮液，用乙酸乙酯萃取 3-6次，每次用量為濃縮液體積的1-3倍量，靜止分層后，分去乙酸乙酯層，合并乙酸乙酯 萃取液，60°C以下真空減壓濃縮蒸出乙酸乙酯后，得到乙酸乙酯萃取部位的濃縮液，真空干 燥，用研缽研細(xì)后，得到乙酸乙酯提取物干粉；
[0010] 6)正丁醇萃取部位的制備：將乙酸乙酯萃取后分出的水層濃縮液，用正丁醇萃取 2-5次，每次用量為濃縮液體積的1-2倍量，靜止分層后，分去正丁醇層，合并正丁醇萃取 液，在80°C以下在閃蒸濃縮裝置中進(jìn)行真空減壓濃縮，蒸出正丁醇后得到正丁醇部位濃縮 液，真空干燥，用研缽研細(xì)后，得到正丁醇提取物干粉；
[0011] 7)活性物質(zhì)的制備：將乙酸乙酯提取物干粉和正丁醇提取物干粉按照重量比1:1 混合，得到抗腫瘤活性物質(zhì)。
[0012] 本發(fā)明簕攩花椒中提取的活性物質(zhì)，用于制備治療抗腫瘤的藥物，從而解決腫瘤 的防治問(wèn)題，開(kāi)辟了簕攩花椒用于治療腫瘤的新用途，這是中藥上的一大創(chuàng)新。
【具體實(shí)施方式】
[0013] 以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】作進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。
[0014] 實(shí)施例1
[0015] 1)原料的粉碎和提?。簩⒑{攩花椒的葉子曬干，粉碎成粗粉，過(guò)20目篩，置于容器 中，用簕攩花椒粗粉1倍重量的質(zhì)量濃度為60%的含水乙醇浸潤(rùn)4小時(shí)，裝入滲漉筒中，用 簕攩花椒粗粉10倍重量的質(zhì)量濃度為60%的含水乙醇進(jìn)行滲漉提取，以7mL/min流速收集 滲源提取液；
[0016] 2)閃蒸濃縮：將得到的提取液在70°C以下采用真空薄膜濃縮裝置進(jìn)行閃蒸濃縮 至原體積的1/10 ;
[0017] 3)脫色除雜：將濃縮液分散到水中，水的用量為濃縮液體積的三分之一，用石油 醚萃取2次，每次用量為濃縮液體積的2倍量，以脫除色素和油脂類(lèi)雜質(zhì)，靜止分層后，分去 石油醚層，合并石油醚萃取液，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中真空濃縮蒸出石油醚；
[0018] 4)乙醚萃取部位的制備：將脫色除雜后的濃縮液，用乙醚萃取6次，每次用量為濃 縮液體積的1倍量，靜止分層后，分去乙醚層，合并乙醚萃取液，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中常壓濃縮 蒸出乙醚，得到乙醚萃取部位的濃縮液，繼續(xù)將濃縮液進(jìn)行真空濃縮，再真空干燥成干粉， 用研缽研細(xì)后，得到乙醚提取物干粉；
[0019] 5)乙酸乙酯萃取部位的制備：將乙醚萃取后分出的水層濃縮液，用乙酸乙酯萃取 6次，每次用量為濃縮液體積的1倍量，靜止分層后，分去乙酸乙酯層，合并乙酸乙酯萃取 液，在閃蒸濃縮裝置中，60°C以下真空減壓濃縮蒸出乙酸乙酯后，得到乙酸乙酯萃取部位的 濃縮液，真空干燥，用研缽研細(xì)后，得到乙酸乙酯提取物干粉；
[0020] 6)正丁醇萃取部位的制備：將乙酸乙酯萃取后分出的水層濃縮液，用正丁醇萃取 5次，每次用量為濃縮液體積的1倍量，靜止分層后，分去正丁醇層，合并正丁醇萃取液，在 80°C以下在閃蒸濃縮裝置中進(jìn)行真空減壓濃縮，蒸出正丁醇后得到正丁醇部位濃縮液，真 空干燥，用研缽研細(xì)后，得到正丁醇提取物干粉；
[0021] 7)活性物質(zhì)的制備：將乙酸乙酯提取物干粉和正丁醇提取物干粉按照1:1組合， 得到抗腫瘤活性物質(zhì)。
[0022] 實(shí)施例2
[0023] 1)原料的粉碎和提?。簩⒑{攩花椒的葉子曬干，粉碎成粗粉，過(guò)20目篩，置于容器 中，用簕攩花椒粗粉1倍重量的質(zhì)量濃度為70%的含水乙醇浸潤(rùn)5小時(shí)，裝入滲漉筒中，用 簕攩花椒粗粉12倍重量的質(zhì)量濃度為70%的含水乙醇進(jìn)行滲漉提取，以6mL/min流速收集 滲源提取液；
[0024] 2)閃蒸濃縮：將得到的提取液在70°C以下采用真空薄膜濃縮裝置進(jìn)行閃蒸濃縮 至原體積的1/12,得濃縮液；
[0025] 3)脫色除雜：將濃縮液分散到水中，水的用量為濃縮液體積的三分之一，用石油 醚萃取4次，每次用量為濃縮液體積的1. 5倍量，以脫除色素和油脂類(lèi)雜質(zhì)，靜止分層后，分 去石油醚層，合并石油醚萃取液，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中真空濃縮蒸出石油醚；
[0026] 4)乙醚萃取部位的制備：將脫色除雜后的濃縮液，用乙醚萃取5次，每次用量為濃 縮液體積的1. 5倍量，靜止分層后，分去乙醚層，合并乙醚萃取液，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中常壓濃 縮蒸出乙醚，得到乙醚萃取部位的濃縮液，繼續(xù)將濃縮液進(jìn)行真空濃縮，再真空干燥，用研 鉢研細(xì)后，得到乙釀提取物干粉；
[0027] 5)乙酸乙酯萃取部位的制備：將乙醚萃取后分出的水層濃縮液，用乙酸乙酯萃取 5次，每次用量為濃縮液體積的1. 5倍量，靜止分層后，分去乙酸乙酯層，合并乙酸乙酯萃取 液，在閃蒸濃縮裝置中，60°C以下真空減壓濃縮蒸出乙酸乙酯后，得到乙酸乙酯萃取部位的 濃縮液，真空干燥，用研缽研細(xì)后，得到乙酸乙酯提取物干粉；
[0028] 6)正丁醇萃取部位的制備：將乙酸乙酯萃取后分出的水層濃縮液，用正丁醇萃取 4次，每次用量為濃縮液體積的1. 5倍量，靜止分層后，分去正丁醇層，合并正丁醇萃取液， 在80°C以下在閃蒸濃縮裝置中進(jìn)行真空減壓濃縮，蒸出正丁醇后，得到正丁醇部位濃縮液， 真空干燥，用研缽研細(xì)后，得到正丁醇提取物干粉；
[0029] 7)活性物質(zhì)的制備：將乙酸乙酯提取物干粉和正丁醇提取物干粉按照1:1組合， 得到抗腫瘤活性物質(zhì)。
[0030] 實(shí)施例3
[0031] 1)原料的粉碎和提?。簩⒑{攩花椒的葉子曬干，粉碎成粗粉，過(guò)40目篩，置于容器 中，用簕攩花椒粗粉1倍重量的質(zhì)量濃度為80%的含水乙醇浸潤(rùn)6小時(shí)，裝入滲漉筒中，用 簕攩花椒粗粉13倍重量的質(zhì)量濃度為80%的含水乙醇進(jìn)行滲漉提取，以8mL/min流速收集 滲源提取液；
[0032] 2)閃蒸濃縮：將得到的提取液在70°C以下采用真空薄膜濃縮裝置進(jìn)行閃蒸濃縮 至原體積的1/13 ;
[0033] 3)脫色除雜：將濃縮液分散到水中，水的用量為濃縮液體積的三分之一，用石油 醚萃取5次，每次用量為濃縮液體積的1倍量，以脫除色素和油脂類(lèi)雜質(zhì)，靜止分層后，分去 石油醚層，合并石油醚萃取液，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中真空濃縮蒸出石油醚；
[0034] 4)乙醚萃取部位的制備：將將脫色除雜后的濃縮液，用乙醚萃取4次，每次用