專利名稱：：外來豚草天敵廣聚螢葉甲的半人工飼料及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及到一種入侵生物(豚草)的天敵——廣聚螢葉甲(OphraellacommimaLeSage)半人工飼料的配方及其制備方法，屬于有害生物的生物防治領(lǐng)域，專用于大規(guī)模飼養(yǎng)繁殖害草天敵廣聚螢葉甲，可代替依賴種植植物或季節(jié)性植物短缺時(shí)大量飼養(yǎng)廣聚螢葉甲。二
背景技術(shù)：
：豚草Ambrosiaartemisiifolia原產(chǎn)于北美，是廣泛傳播的世界性惡性害草。二十世紀(jì)三十年代已入侵我國，后以沈陽、南京、武漢、南昌等4個(gè)擴(kuò)散中心向周邊蔓延危害，現(xiàn)已分布到東北、華北、華中和華東等約20多個(gè)省、市、自治區(qū)。豚草的花粉能引起人的過敏性反應(yīng)——"枯草熱病"，人得此病后，眼、耳、鼻奇癢，陣發(fā)性噴嚏，流眼淚及大量清水樣或粘性鼻涕，哮喘，呼吸困難，癥狀很像感冒，重者可喪失勞動(dòng)力，有時(shí)還伴有支氣管的痙攣，枯草熱病已成為世界性的公害；豚草所披短毛也可引起人體過敏、哮喘、過敏性皮炎等癥；花粉、幼嫩的莖葉，可做羊和兔的飼料，但奶牛吃豚草葉子后，可使牛奶和奶制品產(chǎn)生不愉快的氣味和不適口的味道；豚草對(duì)于土壤中的線蟲類和蚯蚓類有一定地抑制作用；豚草吸肥能力和再生能力極強(qiáng)，可侵入各種農(nóng)作物田，如大麻、玉米、大豆田等，吸收大量的肥水，造成土壤干旱貧瘠，還遮擋陽光，壓抑作物，阻礙農(nóng)業(yè)操作，使作物不能正常生長，影響作物產(chǎn)量。所以豚草在入侵地對(duì)生態(tài)環(huán)境、農(nóng)牧業(yè)生產(chǎn)和人類健康構(gòu)成了嚴(yán)重威脅。我國19871990年由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院生防所曾先后從加拿大、澳大利亞和前蘇聯(lián)引進(jìn)豚草條紋葉甲(Zygogrammasuturalis)、豚草巻蛾(Epiblemastre皿ana)、豚草夜娥(Tarachidiacandefacta)、月豕草實(shí)蟲雖(Eimrestabella)禾口月豕草莉馬(Xiothipssp.)5種天敵昆蟲。經(jīng)初步研究在湖南、北京、遼寧等地釋放了引進(jìn)的豚草條紋葉甲和豚草巻蛾用于防治豚草，但迄今只有豚草巻蛾生存了下來，并未取得滿意的防治效果。自1997年在日本首次發(fā)現(xiàn)原產(chǎn)于北美的廣聚螢葉甲(OphraellacommunaLeSage)(孟玲和李保平，2006)傳入亞洲，隨后在韓國、我國臺(tái)灣和大陸的江蘇、湖北、湖南、江西、安徽、浙江等省相繼發(fā)現(xiàn)，到目前為止廣東、福建等省也有分布。廣聚螢葉甲屬鞘翅目Coleoprera、葉甲科Chrysomelidae、螢葉甲亞科Galercinae，此蟲在野外聚集取食豚草，可將整株葉片食盡致使植株死亡。通過對(duì)野外生態(tài)寄主范圍的調(diào)查和進(jìn)行選擇性與非選擇性的寄主專一性測(cè)定，廣聚螢葉甲是較為安全的具有控害潛力的豚草有效天敵，由于該葉甲對(duì)豚草的專食性和貪食性，在加拿大南部用于防治豚草，目前我國湖南、江西、廣西、廣東等省也大量繁殖廣聚螢葉甲用于豚草的生物防治。鑒于此，為保持和延續(xù)廣聚螢葉甲的種群數(shù)量和大量繁殖和釋放，合適的半人工飼料配方及其制備方法是解決廣聚螢葉甲大量飼養(yǎng)繁殖的關(guān)鍵。用半人工飼料飼養(yǎng)，不僅可以使天敵昆蟲發(fā)育整齊、生理一致，而且在很多情況下是解決季節(jié)性飼料短缺的主要途徑。
發(fā)明內(nèi)容技術(shù)問題本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是針對(duì)目前大力防除外來有害豚草中大量繁殖廣聚螢葉甲常會(huì)出現(xiàn)季節(jié)性飼料短缺及需要大量種植豚草所花費(fèi)的人力、地力和物力的問題，研制廣聚螢葉甲半人工飼料配方及制備技術(shù)，是為解決防控豚草所需的大規(guī)模飼養(yǎng)廣聚螢葉甲的關(guān)鍵技術(shù)。技術(shù)方案一種外來惡性豚草天敵——廣聚螢葉甲半人工飼料配方關(guān)鍵因子的確定，其特征在于影響廣聚螢葉甲成蟲壽命的8種關(guān)鍵成分依次是麥胚、10XK0H、葡萄糖、尼伯金、豚草葉粉、瓊脂、膽固醇、大豆油；影響廣聚螢葉甲幼蟲生長發(fā)育的8種關(guān)鍵成分依次是燕麥片、瓊脂、麥胚、葡萄糖、氯化膽堿、10%KOH、蒸餾水、大豆油。此結(jié)果為研制廣聚螢葉甲人工飼料提供了基礎(chǔ)。廣聚螢葉甲成蟲的半人工飼料，其配方為瓊脂11.6g，苯甲酸甲酯0.8g，蒸餾水672ml，甲醛0.8ml，麥胚22g，山梨酸0.5g，酪蛋白26g，豚草粉1lg，蔗糖26g，維生素混合物0.4g，膽固醇0.05g，10%K0H8ml，韋氏鹽7.4g，蠅蛆粉0.02g，豆油0.2ml。廣聚螢葉甲幼蟲的半人工飼料，其配方為瓊脂9g，豚草粉30g，蒸餾水400ml，尼伯金2g，麥胚20g山梨酸O.3g，燕麥片20g，VC0.5g，酪蛋白25g，|3_谷甾醇2.25g，蔗糖25g，豆油2ml，膽固醇0.3g，橄欖油2ml，氯化膽堿lg，10%KO朋ml，酵母5g，抗壞血酸鈉13.5ml(抗壞血酸鈉配制方法4.2g碳酸鈉和9.4gVC.溶解在100ml蒸餾水中配得)，韋氏鹽6g。廣聚螢葉甲半人工飼料的制備方法1>制取新鮮豚草葉粉從野外采集新鮮豚草葉片帶回室內(nèi)。將采回的新鮮葉片洗凈、瀝干，裝入牛皮紙信封袋中，采用真空冷凍干燥。如無此條件，也可在電熱鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)8(TC烘干10h(含水量在5X以下)。將干燥處理后的豚草干葉取出，加入攪拌機(jī)磨碎成100目以上或細(xì)度在147um以下的細(xì)粉，得到的豚草葉粉裝入自封袋中，放冰箱中(t=0°C)干燥冷藏。2〉半人工飼料的制備將瓊脂、蒸餾水(350ml)歸為X組；麥胚、燕麥片、酪蛋白、蔗糖、膽固醇、氯化膽堿、蒸餾水(50ml)歸為Y組；酵母、韋氏鹽、谷甾醇、豚草葉粉、蠅蛆粉、大豆油、橄欖油、尼伯金、甲醛、山梨酸、維生素混合物、酵母、抗壞血酸鈉、10%KOH、蒸餾水(100ml)歸為Z組。第一步將X組中的瓊脂在蒸餾水中浸泡，用微波爐加熱使瓊脂完全溶解。第二步Y(jié)組中的混合物隨后慢慢加入X組中，充分?jǐn)嚢?事先將Y組中各成分混合攪拌均勻，并完全溶解在蒸餾水中待用)。第三步待以上混合物溫度降到5055。C時(shí)，加入混合均勻的Z組的成分。將混合物攪拌15-20分鐘，混合均勻后轉(zhuǎn)至滅菌的瓷盤中，混合物冷凝即成。3>半人工飼料滅菌采用表面消毒，將配好的半人工飼料用保鮮膜封好，暴露在紫外燈下滅菌IO個(gè)小時(shí)。滅菌后的半人工飼料可以新鮮使用或者放入冰箱(t=4°C)冷藏待用，通常飼料可貯藏一周不影響飼喂效果。有益效果本發(fā)明的廣聚螢葉甲半人工飼料配方和制備方法填補(bǔ)了大規(guī)模用人工飼料繁殖廣聚螢葉甲防治有害豚草的空白，與現(xiàn)有人工種植豚草飼喂廣聚螢葉甲的技術(shù)相比，用半人工飼料飼養(yǎng)，不僅可以使天敵昆蟲發(fā)育整齊、生理一致、便于飼養(yǎng)、節(jié)約飼養(yǎng)空間，而且在很多情況下還可解決季節(jié)性飼料短缺，也是節(jié)約人力、地力、物力等投資的重要途徑，為大規(guī)模人工繁殖提供技術(shù)支撐。具體實(shí)施例方式1、新鮮豚草葉粉的制取從野外采集新鮮豚草葉片帶回室內(nèi)。將采回的新鮮葉片洗凈、瀝干，裝入牛皮紙信封袋中，采用真空冷凍干燥。如無此條件，也可在電熱鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)8(TC烘干10h，鼓風(fēng)待其干燥，要求含水量在5%以下。將干燥處理后的豚草干葉取出，加入攪拌機(jī)磨碎，使其成為100目以上或細(xì)度在147um以下的細(xì)粉。得到的豚草葉粉裝入自封袋中，放冰箱中(t=0°C)干燥冷藏。韋氏鹽的配比表l韋氏鹽的配方成分添加量(mg)成分添力口量(mg)CaC03210KC1120CuS04'5H200.39KH2P04310Fe3(P04)3H2014.7KI0.050024]—MnS040.2NaCl-105MgS0490NaF0.57K2AL(S04)2H200.09Ca(P04)2149維生素混合物配比表2復(fù)合維生素的配方成分添加量(mg)成分添加量(mg)煙酰胺維生素B,維生素82維生素B652.1613.1226.2413.12維生素B12葉酸泛酸鈣生物素0.3213.1252.161.282、廣聚螢葉甲半人工飼料的配方根據(jù)廣聚螢葉甲的食性，參考鞘翅目的柳蘭葉甲Plagioderaversicolors馬鈴薯葉甲、黃瓜條紋葉甲、黃瓜星葉甲和玉米根螢葉甲半人工飼料或人工飼料配方，選取19種營養(yǎng)成分，將其中5個(gè)成分設(shè)計(jì)成4個(gè)水平，將其它成分設(shè)計(jì)成2個(gè)水平，共32個(gè)處理組合，即采用混水平正交試驗(yàn)L32(45X216)，對(duì)各水平進(jìn)行隨機(jī)化處理，確定出正交試驗(yàn)方案(表3)，篩選出影響廣聚螢葉甲成蟲壽命的8種關(guān)鍵成分是麥胚>10%KOH>葡萄糖>尼伯金>豚草葉粉>瓊脂>膽固醇>大豆油；影響廣聚螢葉甲幼蟲生長發(fā)育的8種關(guān)鍵成分是燕麥片>瓊脂>麥胚>葡萄糖>氯化膽堿>10%KOH>蒸餾水>大豆油。表3廣聚螢葉甲半人工飼料正交試驗(yàn)因子水平表(單位g;或ml)5水平l水平2水平3水平4麥胚10152520酪蛋白20152510豚草葉粉1530252010%K0H6789葡萄糖15102025瓊脂910蒸餾水500500燕麥片1520酵母105韋氏鹽56膽固醇0.40.3氯化膽堿11.5尼泊金0.30.4山梨酸0.50.4vc谷甾醇大豆油抗壞血酸鈉2.250.150.251,212.52.50.20.5213.5優(yōu)化的廣聚螢葉甲半人工飼料配方是在對(duì)廣聚螢葉甲半人工飼料正交試驗(yàn)所得配方的基礎(chǔ)上，依據(jù)所測(cè)得的豚草主要營養(yǎng)成分的測(cè)定結(jié)果(表4)和黃瓜條紋葉甲的半人工飼料配方(表5)進(jìn)行了調(diào)整優(yōu)化，確定了廣聚螢葉甲成蟲半人工飼料配方瓊脂11.6g，苯甲酸甲酯0.8g，蒸餾水672ml，甲醛O.8ml，麥胚22g，山梨酸O.5g，酪蛋白26g，豚草粉1lg，蔗糖26g，維生素混合物0.4g，膽固醇0.05g，10%K0H8ml，韋氏鹽7.4g，蠅蛆粉0.02g，豆油0.2ml。廣聚螢葉甲幼蟲半人工飼料配方凍脂9g，豚草粉30g，蒸餾水400ml，尼伯金2g，麥胚20g山梨酸0.3g，燕麥片20g，VC0.5g，酪蛋白25g，P_谷甾醇2.25g，蔗糖25g，豆油2ml，膽固醇0.3g，橄欖油2ml，氯化膽堿lg，10%K0H6ml，酵母5g，抗壞血酸鈉13.5ml(抗壞血酸鈉配制方法4.2g碳酸鈉和9.4gVC.溶解在100ml蒸餾水中配得)，韋氏鹽6g。表4豚草中營養(yǎng)成分含量測(cè)定結(jié)果6<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>3、廣聚螢葉甲半人工飼料的制備按優(yōu)化的廣聚螢葉甲半人工飼料配方方案，分別稱取各成分。將瓊脂、蒸餾水(350ml)為X組；麥胚、燕麥片、酪蛋白、蔗糖、膽固醇、氯化膽堿、蒸餾水(50ml)為Y組；酵母、韋氏鹽、谷甾醇、豚草葉粉、蠅蛆粉、大豆油、橄欖油、尼伯金、甲醛、山梨酸、維生素混合物、酵母、抗壞血酸鈉、10%K0H、蒸餾水(100ml)為Z組。第一步將X組中的瓊脂在蒸餾水中浸泡，用微波爐加熱使瓊脂完全溶解。第二步Y(jié)組中的混合物隨后慢慢加入X組中，充分?jǐn)嚢?事先將Y組中各成分混合攪拌均勻，并完全溶解在蒸餾水中待用)。第三步待以上混合物溫度降到5055。C時(shí)，加入混合均勻的Z組的成分。將混合物攪拌15-20分鐘，混合均勻后轉(zhuǎn)至滅菌的瓷盤中，混合物冷凝即成，放入4t:冰箱中冷藏待用。半人工飼料滅菌采用表面消毒，將配好的半人工飼料用保鮮膜封好，暴露在紫外燈下滅菌IO個(gè)小時(shí)。滅菌后的半人工飼料可以新鮮使用或者放入冰箱(t=4°C)冷藏待用，通常飼料可貯藏一周不影響飼喂效果。實(shí)施例按優(yōu)化的廣聚螢葉甲成蟲半人工飼料配方方案1)分別稱取瓊脂11.6g，苯甲酸甲酯0.8g，蒸餾水672ml，甲醛0.8ml，麥胚22g，山梨酸0.5g，酪蛋白26g，豚草粉llg，蔗糖26g，維生素混合物0.4g，膽固醇0.05g，10%K0H8ml，韋氏鹽7.4g，蠅蛆粉0.02g，豆油0.2ml。2)將瓊脂在蒸餾水(350ml)中浸泡，用微波爐加熱使瓊脂完全溶解；3)隨后把麥胚、燕麥片、酪蛋白、蔗糖、膽固醇、氯化膽堿等混合加入蒸餾水(50ml)，充分?jǐn)嚢瑁雇耆芙庠谡麴s水中后再倒入瓊脂液攪拌均勻，離開加熱源；4)待以上混合物溫度降到50。C時(shí)，加入混合均勻的酵母、韋氏鹽、谷甾醇、豚草葉粉、蠅蛆粉、大豆油、橄欖油、尼伯金、甲醛、山梨酸、維生素混合物、酵母、抗壞血酸鈉、10%KOH、蒸餾水(100ml)，將混合物攪拌15-20分鐘，混合均勻后轉(zhuǎn)至滅菌的瓷盤中，混合物冷凝即成，放入4t:冰箱中冷藏待用，即制成成蟲半人工飼料。用此飼料飼喂廣聚螢葉甲成蟲平均產(chǎn)卵61.25±9.24粒，存活天數(shù)為34.47士0.81d，與對(duì)照豚草葉片飼養(yǎng)的成蟲(存活天數(shù)為35.ll士O.99d)相比，存活天數(shù)與對(duì)照無顯著差異顯著，即該飼料配方在成蟲壽命方面已達(dá)到與天然飼料有著同樣好的效果。按優(yōu)化的廣聚螢葉甲幼蟲的半人工飼料配方方案，1)分別稱取瓊脂9g，豚草粉30g，蒸餾水400ml，尼伯金2g，麥胚20g山梨酸O.3g，燕麥片20g，VCO.5g，酪蛋白25g，13-谷甾醇2.25g，蔗糖25g，豆油2ml，膽固醇0.3g，橄欖油2ml，氯化膽堿lg，10%K0H6ml，酵母5g，抗壞血酸鈉13.5ml(抗壞血酸鈉配制方法4.2g碳酸鈉和9.4gVC.溶解在100ml蒸餾水中配得)，韋氏鹽6g。2)將瓊脂在蒸餾水(350ml)中浸泡，用微波爐加熱使瓊脂完全溶解；3)隨后把麥胚、燕麥片、酪蛋白、蔗糖、膽固醇、氯化膽堿等混合物加入蒸餾水(50ml)，充分?jǐn)嚢?，使完全溶解在蒸餾水中后再倒入瓊脂液攪拌均勻，離開加熱源；4)待以上混合物溫度降到50。C時(shí)，加入混合均勻的酵母、韋氏鹽、谷甾醇、豚草葉粉、大豆油、橄欖油、尼伯金、甲醛、山梨酸、維生素混合物、酵母、抗壞血酸鈉、10XK0H、蒸餾水(100ml)，將混合物攪拌15-20分鐘，混合均勻后轉(zhuǎn)至滅菌的瓷盤中，混合物冷凝即成，放入4t:冰箱中冷藏待用，即制成幼蟲半人工飼料。用此飼料飼喂廣聚螢葉甲幼蟲可以使該蟲完成幼蟲和蛹的發(fā)育，存活率可達(dá)到8.9%。此蟲主要在初齡時(shí)死亡率很高，豚草鮮葉片飼養(yǎng)的l齡幼蟲也只有38.7%的存活率。權(quán)利要求一種外來惡性豚草的天敵——廣聚螢葉甲的半人工飼料，其特征在于廣聚螢葉甲成蟲半人工飼料配方，其成分配比為瓊脂11.6g，苯甲酸甲酯0.8g，蒸餾水672ml，甲醛0.8ml，麥胚22g，山梨酸0.5g，酪蛋白26g，豚草粉11g，蔗糖26g，維生素混合物0.4g，膽固醇0.05g，10％KOH8ml，韋氏鹽7.4g，蠅蛆粉0.02g，豆油0.2ml。2.—種外來惡性豚草的天敵——廣聚螢葉甲的半人工飼料，其特征在于廣聚螢葉甲幼蟲半人工飼料配方，其成分配比為瓊脂9g，豚草粉30g，蒸餾水400ml，尼伯金2g，麥胚20g山梨酸O.3g，燕麥片20g，VCO.5g，酪蛋白25g，|3_谷甾醇2.25g，蔗糖25g，豆油2ml，膽固醇0.3g，橄欖油2ml，氯化膽堿lg，腦KO朋ml，酵母5g，抗壞血酸鈉13.5ml，韋氏鹽6g，其中抗壞血酸鈉配制方法4.2g碳酸鈉和9.4gVC.溶解在100ml蒸餾水中配得。3.權(quán)利要求1或2所述廣聚螢葉甲半人工飼料的制備方法，包括1)制取新鮮豚草葉粉從野外采集新鮮豚草葉片帶回室內(nèi)，8(TC烘干10h至含水量在5%以下，加入攪拌機(jī)磨碎成100目以上或細(xì)度在147um以下的細(xì)粉。2)半人工飼料的制備將瓊脂、蒸餾水350ml歸為X組；麥胚、燕麥片、酪蛋白、蔗糖、膽固醇、氯化膽堿、蒸餾水50ml歸為Y組；酵母、韋氏鹽、谷甾醇、豚草葉粉、蠅蛆粉、大豆油、橄欖油、尼伯金、甲醛、山梨酸、維生素混合物、酵母、抗壞血酸鈉、10%KOH、蒸餾水100ml歸為Z組。第一步將X組中的瓊脂在蒸餾水中浸泡，用微波爐加熱使瓊脂完全溶解；第二步將Y組中各成分混合攪拌均勻，并完全溶解在蒸餾水中，Y組中的混合物隨后慢慢加入X組中，充分?jǐn)嚢瑁坏谌酱陨匣旌衔餃囟冉档?055。C時(shí)，加入混合均勻的Z組的成分；將混合物攪拌15-20分鐘，混合均勻后混合物冷凝即成；3)人工飼料滅菌將配好的半人工飼料用保鮮膜封好，暴露在紫外燈下滅菌10個(gè)小時(shí)，菌后的半人工飼料可以新鮮使用或者放入冰箱4t:冷藏待用。全文摘要本發(fā)明涉及豚草的天敵廣聚螢葉甲的半人工飼料及其制備方法，屬于生物防治領(lǐng)域，其8種關(guān)鍵成分依次是麥胚、10％KOH、葡萄糖、尼伯金、豚草葉粉、瓊脂、膽固醇、大豆油；影響廣聚螢葉甲幼蟲生長發(fā)育的8種關(guān)鍵成分依次是燕麥片、瓊脂、麥胚、葡萄糖、氯化膽堿、10％KOH、蒸餾水、大豆油。在半人工飼料制備過程中，對(duì)豚草葉粉的制取、各成分配制時(shí)的前后順序和配制方法以及滅菌保存的方法進(jìn)行了規(guī)范，可用于大規(guī)模飼養(yǎng)繁殖豚草的天敵廣聚螢葉甲。文檔編號(hào)A23K1/18GK101744156SQ20101011309公開日2010年6月23日申請(qǐng)日期2010年2月24日優(yōu)先權(quán)日2010年2月24日發(fā)明者劉芳,孟玲,李保平申請(qǐng)人:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)