專利名稱：：一種人工接種鑒定菊花蚜蟲抗性的方法
技術領域：
：本發(fā)明利用人工接種單株并有效隔離的方法鑒定不同菊花材料的抗蚜蟲性，適用于任何一種栽培菊花品種和菊屬及其近緣屬的野生種，方法簡單易行、成本低廉，結果準確可靠，可用于種質(zhì)資源的抗蚜蟲性篩選和評價、抗性育種后代材料的早期篩選和育成品種的抗蟲性鑒定，作為一種有效的育種輔助手段和技術，屬于抗性育種領域。二
背景技術：
：菊花(De"(iraW/2ewflmon/o"ww)又名鞠秋、鞠、菊華、女華、黃花、茱英、金英、帝女花等，原產(chǎn)我國，是中國十大傳統(tǒng)名花和世界四大切花之一，也是世界上最重要的觀賞花卉之一，距今已有1600多年的栽培歷史。唐朝時期，中國菊花經(jīng)朝鮮傳入日本，17世紀中葉始，中國菊花傳入荷蘭、法國、英國等歐美國家。菊花盛開于秋季花少時節(jié)，而且花期長達一個月以上，給眾花凋零的秋曰園林帶來了璀璨的美；也使我們十一、十二月的寒冷季節(jié)充滿了花卉的芬芳，因此它在觀賞園藝領域有著特殊重要的地位，特別值得花卉育種家的注意。目前，我國選育的菊花品種約有4000多個，全球品種總數(shù)在2萬之上(陳俊愉，2001)，是世界上商品產(chǎn)值最高的花卉(Boaes，1997)。菊花不僅在切花和盆花中具有十分重要的地位，而且在露地栽培中也起到了越來越大的作用，因此加強菊花育種具有很高的經(jīng)濟效益和社會效益。在菊花栽培中，最容易發(fā)生的蟲害是蚜蟲。蚜蟲的危害不僅在于蚜蟲本身對菊花體內(nèi)汁液的吸取導致的菊花營養(yǎng)不良，還在于它會傳播多種病毒，導致菊花發(fā)生嚴重的病毒病，從而給生產(chǎn)帶來嚴重損失。因此，開展菊花的抗蟲性育種，尤其是抗蚜蟲育種，既可提高菊花生產(chǎn)的產(chǎn)量和品質(zhì)，又可減少農(nóng)藥的用量，能產(chǎn)生顯著的經(jīng)濟效益、生態(tài)效益和社會效益。鑒于此，找到一種簡單易行、成本低廉、準確可靠的菊花抗蚜能力的比較鑒定方法和技術，就顯得十分重要，可以為育種家縮短育種周期、培育出抗性較強的品種提供技術支撐。三
發(fā)明內(nèi)容技術問題本發(fā)明的目的是針對目前菊花抗蟲育種上沒有一套簡易實用的抗性鑒定方法這一現(xiàn)狀，提供一套簡單易行、成本低廉、結果準確可靠的人工接種鑒定菊花抗蚜蟲能力的方法，達到獲得菊花抗性種質(zhì)、縮短菊花抗蟲育種周期的目的，實用性和科學性突出。技術方案本發(fā)明利用人工接種鑒定菊花嫁蟲抗性的方、法，包括1)需要鑒定菊花材料的獲得選擇需要對其進行蚜蟲抗性鑒定的菊花材料，進行苗床播種或扦插繁殖，在苗高約10cm時選擇長勢健壯、整齊一致植株移栽到塑料花盆中，花盆規(guī)格為盆口直徑15cm、高13cm。每盆種植1株，每品種重復30盆以上。移栽后置入溫室中常規(guī)管理，10d后即可用于接種蚜蟲，獲得需要鑒定蚜蟲抗性的菊花材料;2)蚜蟲隔離罩的制作選擇厚度為0.1mm高度透明的聚酯投影片，制作成高度為2530cm、直徑為12cm的圓筒，將其一端用紗布或80目防蟲網(wǎng)封住，在接種蚜蟲后罩于植株上，既可為植株和蚜蟲的正常生長提供必要的空間、光照和空氣，又能夠有效地防止蚜蟲的遷飛和交叉?zhèn)魅?，保證鑒定結果的準確度和科學性，即為鑒定蚜蟲抗性所需的隔離罩。3)人工接種與觀察統(tǒng)計的方法(一)收集蟲源在生有蚜蟲的菊花植株上，用毛筆輕輕把23日齡的蚜蟲刷到或抖落到培養(yǎng)皿中。(二)人工接種把收集到的蚜蟲用毛筆小心接到鑒定植株的莖端或未展開幼葉處；每株接種5只蚜蟲，每處理重復30株。接種完畢后立即罩上蚜蟲隔離罩，將植株置溫室內(nèi)常規(guī)管理。(三)調(diào)査統(tǒng)計接種3周后統(tǒng)計植株上的嫁蟲數(shù)量，計算蚜蟲的繁殖率(調(diào)查蟲口數(shù)/接種蟲口數(shù))；求其平均值，按以下際準對鑒定材料幼M亍抗性評價<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>有益效果本發(fā)明提供的利用人工接種單株隔離鑒定菊花蚜蟲抗性的方法，與現(xiàn)有技術相比具有如下優(yōu)點和積極效果(1)本發(fā)明利用的原材料非常普通，簡單易行，成本低廉，可操作性強，實用性非常突出。試驗所需的塑料花盆、聚酯透明膠片、紗布或防蟲網(wǎng)、毛筆等在市場上非常易購，所有開展菊花育種的單位和個人都有條件實施本發(fā)明所提供的技術和方法。(2)和原有的鑒定方法如田間鑒定或蚜蟲撒播鑒定相比，本技術更能保證蚜蟲的接種密度均勻和百分百成活率，試驗結果受環(huán)境或人為因素的影響極小，因而能更客觀地反應出鑒定對象在抗蚜蟲能力上的差異，鑒定結果的準確性和科學性突出。(3)在本發(fā)明基礎上，使篩選出對蚜蟲抗性強的菊花種質(zhì)進行菊花育種成為可能，同時可大大縮短開展菊花抗蚜蟲性育種所需的時間，確保所育品種對蚜蟲抗性的真實性和穩(wěn)定性。四圖1、應用人工接種單株隔離法對菊花種質(zhì)資源抗蚜蟲性進行篩選評價l.甘菊；2.芙蓉菊；3.菊花腦；4.南京野菊；5.小紅菊；6.野路菊；7.陰歧的油菊圖2、應用人工接種單株隔離法對菊花抗蚜蟲育種的后代材料進行鑒定l.母本，抗性低；2.雜交后代，抗性高；3.父本，抗性極高五具體實施例方式本發(fā)明所提供的人工接種單株隔離鑒定菊花蚜蟲抗性的方法，其實施方式如下1)需要鑒定菊花材料的獲得選擇需要對其進行蚜蟲抗性鑒定的菊花材料，進行苗床播種或扦插繁殖，在苗高約10cm時選擇長勢健壯、整齊一致植株移栽到塑料花盆中，花盆規(guī)格為盆口直徑15cm、高13cm。每盆種植1株，每品種重復30株以上。移栽后置入溫室中常規(guī)管理，10d后即可用于接種蚜蟲，獲得需要鑒定蚜蟲抗性的菊花材料;2)蚜蟲隔離罩的制作選擇厚度為O.lmm高度透明的聚酯投影片，制作成高度為2530cm、直徑為12cm左右的圓筒，將其一端用紗布或80目防蟲網(wǎng)封住，在接種蚜蟲后罩于植株上，既可為植株和蚜蟲的正常生長提供必要的空間、光照和空氣，又能夠有效地防止蚜蟲的遷飛和交叉?zhèn)魅?，保證鑒定結果的準確度和科學性，獲得鑒定蚜蟲抗性所需的隔離罩。3)人工接種與觀察統(tǒng)計的方法(一)收集蟲源在生有蚜蟲的菊花植株上，用毛筆輕輕把23日齡的蚜蟲刷到或抖落到培養(yǎng)皿中。(二)人工接種把收集到的蚜蟲用毛筆小心接到鑒定植株的莖端或未展開幼葉處；每株接種5只蚜蟲，每處理重復30株。接種完畢后立即罩上蚜蟲隔離罩，將植株置溫室內(nèi)常規(guī)管理。(三)調(diào)査統(tǒng)計接種3周后統(tǒng)計植株上的岈蟲數(shù)量，計算嫁蟲的繁殖率(調(diào)查蟲口數(shù)/接種蟲口數(shù))；求其平均值，按以下4際準對鑒定材料翅5行抗性評價<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>實施實例一應用本方法對菊屬及其近緣屬約20份種質(zhì)資源的抗蚜蟲性進行初步篩選評價，在不到l個月的時間里即有了滿意結果，篩選出對蚜蟲抗性極強的材料多份，如黃金艾蒿、芙蓉菊、短舌匹菊和濱菊等(見圖1)，為開展菊花的抗蚜蟲育種提供了很好的親本材料，鑒定結果見下表-<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>實施實例二應用本方法對菊屬栽培菊花品種"鐘山金桂"與蒿屬野生種黃金艾蒿的雜交后代進行抗岈蟲性鑒定(鑒定結果見下表)，在早期世代即鑒定出具高抗性的后代株系，大大縮短了育種周期。<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>權利要求1、一種人工接種鑒定菊花蚜蟲抗性的方法，包括1)需要鑒定菊花材料的獲得選擇需要對其進行蚜蟲抗性鑒定的菊花材料，進行苗床播種或扦插繁殖，在苗高10cm時選擇長勢健壯、整齊一致植株移栽到塑料花盆中，花盆規(guī)格為盆口直徑15cm、高13cm，每盆種植1株，每品種重復30盆以上，移栽后置入溫室中常規(guī)管理，10d后即可用于接種蚜蟲，獲得需要鑒定蚜蟲抗性的菊花材料；2)蚜蟲隔離罩的制作選擇厚度為0.1mm高度透明的聚酯投影片，制作成高度為25～30cm、直徑為12cm的圓筒，將其一端用紗布或80目防蟲網(wǎng)封住，為蚜蟲隔離罩；3)人工接種與觀察統(tǒng)計的方法(一)收集蟲源在生有蚜蟲的菊花植株上，用毛筆輕輕把2～3日齡的蚜蟲刷到或抖落到培養(yǎng)皿中；(二)人工接種把收集到的蚜蟲用毛筆小心接到鑒定植株的莖端或未展開幼葉處；每株接種5只蚜蟲，每處理重復30株；接種完畢后立即罩上蚜蟲隔離罩，將植株置溫室內(nèi)常規(guī)管理；(三)調(diào)查統(tǒng)計接種3周后統(tǒng)計植株上的蚜蟲數(shù)量，計算蚜蟲的繁殖率＝調(diào)查蟲口數(shù)/接種蟲口數(shù)；求其平均值，按以下標準對鑒定材料進行抗性評價級別抗性結果蚜蟲繁殖倍率1極高抗性<12高抗性1～43中抗性4～74低抗性7～105無抗性>10。全文摘要本發(fā)明利用人工接種單株隔離對菊花抗蚜蟲性鑒定的方法，屬于抗性育種領域。選擇苗高約10cm植株移栽，用毛筆將蚜蟲接到鑒定植株的莖端或未展開幼葉處，隨即用圓筒罩于植株上，使植株和蚜蟲處于可以正常生長繁殖的條件下。接種后3周觀察統(tǒng)計植株上的蚜蟲數(shù)量，根據(jù)蚜蟲的繁殖倍率對不同菊花材料的抗蚜蟲能力做出比較鑒定。本發(fā)明利用的原材料非常普通，簡單易行，成本低廉，可操作性強，實用性突出；試驗結果受環(huán)境或人為因素的影響小，使篩選出對蚜蟲抗性強的種質(zhì)資源進行菊花育種成為可能，同時可用于抗蚜蟲育種后代材料的早期鑒定，大大縮短開展菊花抗蚜蟲育種所需的時間，確保所育品種對蚜蟲抗性的真實性、科學性和穩(wěn)定性。文檔編號A01H1/04GK101520447SQ20091002962公開日2009年9月2日申請日期2009年4月8日優(yōu)先權日2009年4月8日發(fā)明者何俊平,房偉民,滕年軍,管志勇,鄧衍明,陳發(fā)棣,陳素梅申請人:南京農(nóng)業(yè)大學