一種低聚木糖快速鑒別方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于木糖鑒別技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種低聚木糖快速鑒別方法；依次包括下述步驟：1)取低聚木糖原料加60％乙醇溶解；2)取上清液照薄層色譜法試驗(yàn)，以正丁醇?異丙醇?乙酸?水為展開劑，展開；3)取出薄層板，吹干，噴以顯色劑顯色，加熱至條帶清晰；4)木糖系列顯灰綠色條帶，葡萄糖系列顯藍(lán)色條帶，果糖系列則顯紅色條帶。本發(fā)明具有高效、簡便、準(zhǔn)確、可靠的優(yōu)點(diǎn)，填補(bǔ)了低聚木糖原料特異性快速鑒別方法的空白，可用于低聚木糖原料的質(zhì)量控制。
【專利說明】
一種低聚木糖快速鑒別方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明屬于木糖鑒別技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及低聚木糖原料高效薄層色譜快速鑒別方法。
【背景技術(shù)】
[0002]低聚糖一般是由3-9個單糖以結(jié)合而成的功能性聚合糖，低聚木糖通常由富含木質(zhì)纖維素的材料通過化學(xué)或者酶解方法制備(A.F.A.Carvalho，et al.,Food Res.1nt.,2013,51: 75-85)。因生產(chǎn)工藝影響，國產(chǎn)低聚木糖主要為由2_7個木糖以β_1，4糖苷鍵結(jié)合而成的功能性聚合糖(GB/T 23747-2009和QB/T2384-2008)。
[0003]低聚木糖具有高選擇性促進(jìn)腸道雙歧桿菌等有益菌增殖、抑制有害菌生長的功能，其雙歧因子功能為其他聚合糖類的10?20倍，是一種高效的益生元(S.M.Finegold，etal.,Food Funct.，2014，5:436-445)。低聚木糖還能通過改善食品風(fēng)味以及生理化學(xué)特性來提高食品品質(zhì)，且具有耐酸、耐熱，穩(wěn)定性好，低熱值等特性，被廣泛用作食品、醫(yī)藥、飼料等行業(yè)，需求量增長迅速，具有十分廣闊的應(yīng)用前景[M.J.Vazquez,et al.,Trends FoodSc1.Tech.，2000，11:387-393]。
[0004]目前，低聚木糖檢測主要采用酸水解法測定木糖，或高效液相色譜儀結(jié)合蒸發(fā)光散射檢測器對不同聚合度的木糖進(jìn)行定性定量分析，由于糖類成分的復(fù)雜性，不同單糖相同或相近聚合度的低聚糖可具有相同或相近的保留特征，易造成定性結(jié)果錯誤。此外，液相色譜分析耗時較長、有機(jī)流動相消耗量大、同時低聚木糖標(biāo)準(zhǔn)品不易獲取，造成檢測費(fèi)用高，不適合低聚木糖快速檢測與鑒別。因此，開發(fā)高效、簡便、準(zhǔn)確、可靠的低聚木糖鑒別方法對于產(chǎn)品質(zhì)量控制具有重要意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]為了解決上述問題，本發(fā)明的目的在于提供一種低聚木糖的高效薄層色譜鑒別方法。
[0006]發(fā)明是通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的:
[0007]—種低聚木糖快速鑒別方法，所述測定方法包括如下步驟:
[0008]I)取低聚木糖原料于溶劑中溶解，渦旋混勻、離心，取上清液作為供試品溶液；
[0009]2)另取木糖、果糖、蔗糖、麥芽糖、葡聚糖部分酸水解產(chǎn)物、木聚糖部分酸水解產(chǎn)物，分別配成60 %乙醇對照品溶液；
[0010]3)吸取上述對照品溶液和供試品溶液，點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-異丙醇-乙酸-水為展開劑，展開、取出、吹干、噴苯胺-二苯胺-丙酮溶液顯色，加熱至條帶清晰，對照品及供試品薄層色譜中，木糖系列顯灰綠色條帶，葡萄糖系列顯藍(lán)色條帶，果糖系列則顯紅色條帶。
[0011 ]其中，所述步驟I)中的溶劑為水或醇。
[0012]較佳地，所述醇為甲醇或乙醇。
[0013]較佳地，所述的展開劑為正丁醇、異丙醇、乙酸、水的混合物，它們之間的體積比正丁醇:異丙醇:乙酸:水為5?10:3?8:1:1?5。最優(yōu)選正丁醇:異丙醇:乙酸:水為5?10:3?8:1:1?5。
[0014]較佳地，所述的顯色劑為苯胺-二苯胺-丙酮溶液或硫酸乙醇溶液。硫酸乙醇顯色劑為10%硫酸乙醇溶液，其顯色和苯胺-二苯胺-丙酮溶液不同，但可用對照品進(jìn)行判斷。
[0015]本發(fā)明的高效薄層色譜快速鑒別低聚木糖方法，其具有高效、簡便、準(zhǔn)確、可靠的優(yōu)點(diǎn)，填補(bǔ)了低聚木糖原料特異性快速鑒別方法的空白，可用于低聚木糖原料的質(zhì)量控制。
【附圖說明】
[0016]圖1本發(fā)明方法檢測的不同低聚木糖原料HPTLC色譜圖。
[0017]其中，低聚木糖原料(XY1-XY14);S1:木糖、果糖、蔗糖、麥芽糖(由上至下)；S2:葡聚糖部分酸水解產(chǎn)物;S3:木聚糖部分酸水解產(chǎn)物
[0018]具體的實(shí)施方式
[0019]下面結(jié)合【具體實(shí)施方式】對本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說明，以助于本領(lǐng)域技術(shù)人員理解本發(fā)明。
[0020]若無特殊說明，所用實(shí)驗(yàn)方法為常規(guī)實(shí)驗(yàn)方法;所使用的試劑和材料等均可通過商業(yè)途徑獲得。
[0021 ]按照本發(fā)明所實(shí)施的優(yōu)選實(shí)施例的分析檢測方法如下
[0022]實(shí)施例1
[0023]取低聚木糖原料1mg(樣品XY1-XY14)，加溶劑lmL，渦旋混勻，10000g，離心lOmin，取上清作為供試品溶液;另取單糖及二糖標(biāo)品:木糖、果糖、蔗糖、麥芽糖;葡聚糖部分酸水解產(chǎn)物及木聚糖部分酸水解產(chǎn)物，配制對照品溶液;照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述對照品溶液及供試品溶液各5yL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，展開(以正丁醇、異丙醇、乙酸和水的混合物為展開劑，所述體積比正丁醇:異丙醇:乙酸:水為6:4:1:3)，取出，吹干，噴以苯胺-二苯胺-丙酮溶液(4mL苯胺，4g二苯胺，20mL85 %磷酸溶于200mL丙酮)顯色，加熱至條帶清晰;對照品及供試品薄層色譜中，木糖系列顯灰綠色條帶，葡萄糖系列顯藍(lán)色條帶，果糖系列則顯紅色條帶，具體見圖1。由圖1可見:樣品XYl至XYl I中含低聚木糖，其中XYl — XY3、XY8和XYlO明顯含葡萄糖系列雜質(zhì)(藍(lán)色)；樣品ΧΥ12 — ΧΥ14中只含有藍(lán)色條帶，說明為低聚葡萄糖。
[0024]實(shí)施例2
[0025]取低聚木糖原料2mg(樣品ΧΥ1-ΧΥ14)，加溶劑lmL，渦旋混勻，10000g，離心lOmin，取上清作為供試品溶液;另取單糖及二糖標(biāo)品:木糖、果糖、蔗糖、麥芽糖;葡聚糖部分酸水解產(chǎn)物及木聚糖部分酸水解產(chǎn)物，配制對照品溶液;照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述對照品溶液及供試品溶液各5yL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，展開(以正丁醇、異丙醇、乙酸和水的混合物為展開劑，所述體積比正丁醇:異丙醇:乙酸:水為5:8:1:1)，取出，吹干，噴以苯胺-二苯胺-丙酮溶液(4mL苯胺，4g二苯胺，20mL85 %磷酸溶于200mL丙酮)顯色，加熱至條帶清晰;對照品及供試品薄層色譜中，木糖系列顯灰綠色條帶，葡萄糖系列顯藍(lán)色條帶，果糖系列則顯紅色條帶。
[0026]實(shí)施例3
[0027]取低聚木糖原料5mg(樣品XY1-XY14)，加溶劑lmL，渦旋混勻，10000g，離心lOmin，取上清作為供試品溶液;另取單糖及二糖標(biāo)品:木糖、果糖、蔗糖、麥芽糖;葡聚糖部分酸水解產(chǎn)物及木聚糖部分酸水解產(chǎn)物，配制對照品溶液;照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述對照品溶液及供試品溶液各5yL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，展開(以正丁醇、異丙醇、乙酸和水的混合物為展開劑，所述體積比正丁醇:異丙醇:乙酸:水為10:3:1:3)，取出，吹干，噴以苯胺-二苯胺-丙酮溶液(4mL苯胺，4g二苯胺，20mL85 %磷酸溶于200mL丙酮)顯色，加熱至條帶清晰;對照品及供試品薄層色譜中，木糖系列顯灰綠色條帶，葡萄糖系列顯藍(lán)色條帶，果糖系列則顯紅色條帶。
[0028]實(shí)施例4
[0029]取低聚木糖原料8mg(樣品XY1-XY14)，加溶劑lmL，渦旋混勻，10000g，離心lOmin，
取上清作為供試品溶液;另取單糖及二糖標(biāo)品:木糖、果糖、蔗糖、麥芽糖;葡聚糖部分酸水解產(chǎn)物及木聚糖部分酸水解產(chǎn)物，配制對照品溶液;照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述對照品溶液及供試品溶液各5yL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，展開(以正丁醇、異丙醇、乙酸和水的混合物為展開劑，所述體積比正丁醇:異丙醇:乙酸:水為8: 5:1:2)，取出，吹干，噴以苯胺-二苯胺-丙酮溶液(4mL苯胺，4g二苯胺，20mL85 %磷酸溶于200mL丙酮)顯色，加熱至條帶清晰;對照品及供試品薄層色譜中，木糖系列顯灰綠色條帶，葡萄糖系列顯藍(lán)色條帶，果糖系列則顯紅色條帶。
[0030]上述實(shí)施例，只是本發(fā)明的較佳實(shí)施例，并非用來限制本發(fā)明實(shí)施范圍，故凡以本發(fā)明權(quán)利要求所述的特征及原理所做的等效變化或修飾，均應(yīng)包括在本發(fā)明權(quán)利要求范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種低聚木糖快速鑒別方法，其特征在于，所述測定方法包括如下步驟: 1)取低聚木糖原料于溶劑中溶解，渦旋混勻、離心，取上清液作為供試品溶液； 2)另取木糖、果糖、蔗糖、麥芽糖、葡聚糖部分酸水解產(chǎn)物、木聚糖部分酸水解產(chǎn)物，分別配成60%乙醇對照品溶液； 3)吸取上述對照品溶液和供試品溶液，點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-異丙醇-乙酸-水為展開劑，展開、取出、吹干、噴苯胺-二苯胺-丙酮溶液顯色，加熱至條帶清晰，對照品及供試品薄層色譜中，木糖系列顯灰綠色條帶，葡萄糖系列顯藍(lán)色條帶，果糖系列則顯紅色條帶。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的低聚木糖快速鑒別方法，其特征在于:所述步驟I)中的溶劑為水或醇。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的低聚木糖快速鑒別方法，其特征在于:所述醇為甲醇或乙醇。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的低聚木糖快速鑒別方法，其特征在于:所述步驟I)中，取低聚木糖適量2?10mg，加60%乙醇lmL，渦旋混勻，10000g，離心lOmin，取上清液作為供試品溶液。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的低聚木糖快速鑒別方法，其特征在于:所述的展開劑為正丁醇、異丙醇、乙酸、水的混合物，它們之間的體積比正丁醇:異丙醇:乙酸:水為5?10:3?8:1:1 ?5。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的低聚木糖快速鑒別方法，其特征在于:所述正丁醇:異丙醇:乙酸:水為5?10:3?8:1:1?5。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的低聚木糖快速鑒別方法，其特征在于:所述的顯色劑為苯胺_二苯胺-丙酮溶液或硫酸乙醇溶液。
【文檔編號】G01N30/90GK105974043SQ201610288251
【公開日】2016年9月28日
【申請日】2016年5月3日
【發(fā)明人】趙靜
【申請人】趙靜