清瘟敗毒散中梔子苷的含量測定方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種含量測定方法，具體涉及清瘟敗毒散中梔子苷的含量測定方法。
【背景技術(shù)】
[0002]清瘟敗毒散是清代著名溫病學(xué)家余師愚所創(chuàng)制的名方，載于其所著的《疫疹一得》一書中，現(xiàn)收錄于《中華人民共和國獸藥典》2010年版二部。本藥由石膏、地黃、水牛角、黃連等14味藥材組成，是“白虎湯”、“黃連解毒湯”和“犀角地黃湯”三方加減化裁而得。清瘟敗毒散的處方包括:生石膏120g、生地黃30g、水牛角60g、黃連20g、梔子30g、牡丹皮20g、黃芩25g、赤芍25g、玄參25g、知母30g、連翹30g、桔梗25g、甘草15g、淡竹葉25g;具有瀉火解毒，涼血的功效，在獸藥臨床上主要用于治療熱毒發(fā)斑，高熱神昏。
[0003]2010年版《中華人民共和國獸藥典》二部中清瘟敗毒散的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)僅有顯微鑒別和黃連的薄層鑒別，很難控制其質(zhì)量，保證產(chǎn)品的安全性、有效性與質(zhì)量可控性。但現(xiàn)有技術(shù)中公開的梔子苷含量測定方法的檢測效果較差，不能滿足需求。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是:現(xiàn)有技術(shù)中清瘟敗毒散用梔子苷的含量測定方法效果較差，目的在于提供含量測定效果優(yōu)異的清瘟敗毒散中梔子苷的含量測定方法。
[0005]本發(fā)明通過下述技術(shù)方案實現(xiàn):
清瘟敗毒散中梔子苷的含量測定方法，包括以下步驟:
(1)利用清瘟敗毒散制備供試品溶液；
(2)進(jìn)行液相色譜檢測，液相色譜檢測的流動相為13:87的乙腈和水。
[0006]現(xiàn)有技術(shù)中該梔子苷的含量測定時，通常采用比例為15:85的乙腈和水作為流動相，在該條件下，梔子苷與后一個峰的分離度R=0.86〈1.5，達(dá)不到分離要求，極大影響測量的準(zhǔn)確性。
[0007]通過本發(fā)明流動相的優(yōu)化設(shè)計，可將梔子苷與后一個峰的分離度有效增加，梔子苷與后一個峰的分離度R可達(dá)到1.61，顯著高于現(xiàn)有技術(shù)，且采用該比例的流動相進(jìn)行測量時無陰性干擾，效果十分顯著。
[0008]進(jìn)一步，所述供試品溶液的制備過程如下:
精密量取清瘟敗毒散1.0g、甲醇25ml，將甲醇加入清瘟敗毒散中，稱定重量，超聲處理20min，放冷至室溫，補足減失重量，過濾，濾液作為供試品溶液。
[0009]優(yōu)選地，所述液相色譜檢測中色譜柱采用Ci8色譜柱，色譜柱的尺寸為ID4.6mm、長度250mm、粒徑5um，檢測波長238nm。
[0010]為了能有效確認(rèn)梔子苷與后一個峰的分離效果，以及其他物質(zhì)對梔子苷測定的影響情況，所述硅膠薄層板上還點有對照藥材溶液與陰性樣品溶液，該對照藥材溶液與陰性樣品溶液的制備方法如下:
精密量取對照藥材梔子0.lg、甲醇25ml，將甲醇加入梔子中，稱定重量，超聲處理20min，放冷至室溫，補足減失重量，過濾，濾液作為對照藥材溶液；
首先配置不包括梔子的清瘟敗毒散處方，精密量取取處方量的1/500和甲醇25ml，將甲醇加入不包括梔子的清瘟敗毒散處方中，稱定重量，超聲處理20min，放冷至室溫，補足減失重量，過濾，濾液作為陰性樣品溶液。
[0011]本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有如下的優(yōu)點和有益效果:
通過本發(fā)明流動相的優(yōu)化設(shè)計，可將梔子苷與后一個峰的分離度有效增加，梔子苷與后一個峰的分離度R可達(dá)到1.61，顯著高于現(xiàn)有技術(shù)，且采用該比例的流動相進(jìn)行測量時無陰性干擾，效果十分顯著。
【附圖說明】
[0012]此處所說明的附圖用來提供對本發(fā)明實施例的進(jìn)一步理解，構(gòu)成本申請的一部分，并不構(gòu)成對本發(fā)明實施例的限定。在附圖中:
圖1為實施例1中對照品溶液的檢測結(jié)果示意圖。
[0013]圖2為實施例1中對照藥材溶液的檢測結(jié)果示意圖。
[0014]圖3為實施例1中供試品溶液的檢測結(jié)果示意圖。
[0015]圖4為實施例1中陰性樣品溶液的檢測結(jié)果示意圖。
[0016]圖5為實施例2中對照藥材溶液的檢測結(jié)果示意圖。
[0017]圖6為實施例2中供試品溶液的檢測結(jié)果示意圖。
【具體實施方式】
[0018]為使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點更加清楚明白，下面結(jié)合實施例和附圖，對本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說明，本發(fā)明的示意性實施方式及其說明僅用于解釋本發(fā)明，并不作為對本發(fā)明的限定。
[0019]實施例1
清瘟敗毒散中梔子苷的含量測定方法，包括以下步驟:
(I)分別利用清瘟敗毒散、梔子和不包括梔子的清瘟敗毒散處方制備供試品溶液、對照藥材溶液、對照品溶液、以及陰性樣品溶液;具體制備過程如下:
精密量取清瘟敗毒散1.0g、甲醇25ml，將甲醇加入清瘟敗毒散中，稱定重量，超聲處理20min，放冷至室溫，補足減失重量，過濾，濾液作為供試品溶液；
精密量取梔子0.lg、甲醇25ml，將甲醇加入梔子中，稱定重量，超聲處理20min，放冷至室溫，補足減失重量，過濾，濾液作為對照藥材溶液；
精密量取梔子苷1.5mg、甲醇50ml，將甲醇加入梔子苷中配置后作為對照品溶液；首先配置不包括梔子的清瘟敗毒散處方，精密量取取處方量的1/500和甲醇25ml，將甲醇加入不包括梔子的清瘟敗毒散處方中，稱定重量，超聲處理20min，放冷至室溫，補足減失重量，過濾，濾液作為陰性樣品溶液。
[0020](2 )進(jìn)行液相色譜檢測，液相色譜檢測的流動相為13:87的乙腈和水。
[0021]所述液相色譜檢測中色譜柱采用C18色譜柱，色譜柱的尺寸為ID4.6mm、長度250mm、粒徑5um，檢測波長238nm。
[0022]通過圖1-圖4可知，梔子苷與后一個峰的分離度R=1.61>1.5，且通過圖4與圖1-圖3的對比可知，采用本發(fā)明的方法測定無陰性干擾，檢測結(jié)果準(zhǔn)確。
[0023]并且按照本實施例的液相色譜檢測方法，對照品溶液進(jìn)行六次進(jìn)樣的重復(fù)試驗，根據(jù)峰面積計算RSD值為0.292%，因而可以證明，本發(fā)明的檢測精密度極高。
[0024]實施例2
本實施例是實施例1的對照實施例，本實施例中該流動相的組成比例不同，本實施例中該流動相為比例為15:85的乙腈和水。在該流動相的比例下檢測供試品溶液和對照藥材溶液，檢測結(jié)果如圖5和圖6所示。
[0025]通過圖5和圖6可知，供試品色譜圖中，梔子苷與后一個峰的分離度R=0.86〈1.5，達(dá)不到分離要求。
[0026]以上所述的【具體實施方式】，對本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和有益效果進(jìn)行了進(jìn)一步詳細(xì)說明，所應(yīng)理解的是，以上所述僅為本發(fā)明的【具體實施方式】而已，并不用于限定本發(fā)明的保護(hù)范圍，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所做的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項】
1.清瘟敗毒散中梔子苷的含量測定方法，其特征在于，包括以下步驟: (I)利用清瘟敗毒散制備供試品溶液； (2 )進(jìn)行液相色譜檢測，液相色譜檢測的流動相為13:87的乙腈和水。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的清瘟敗毒散中梔子苷的含量測定方法，其特征在于，所述供試品溶液的制備過程如下: 精密量取清瘟敗毒散1.0g、甲醇25ml，將甲醇加入清瘟敗毒散中，稱定重量，超聲處理20min，放冷至室溫，補足減失重量，過濾，濾液作為供試品溶液。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的清瘟敗毒散中梔子苷的含量測定方法，其特征在于，所述液相色譜檢測中色譜柱采用Ci8色譜柱，色譜柱的尺寸為ID4.6mm、長度250mm、粒徑5um，檢測波長238nm。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的清瘟敗毒散中梔子苷的含量測定方法，其特征在于，所述硅膠薄層板上還點有對照藥材溶液與陰性樣品溶液，該對照藥材溶液與陰性樣品溶液的制備方法如下: 精密量取對照藥材梔子0.lg、甲醇25ml，將甲醇加入梔子中，稱定重量，超聲處理20min，放冷至室溫，補足減失重量，過濾，濾液作為對照藥材溶液； 首先配置不包括梔子的清瘟敗毒散處方，精密量取取處方量的1/500和甲醇25ml，將甲醇加入不包括梔子的清瘟敗毒散處方中，稱定重量，超聲處理20min，放冷至室溫，補足減失重量，過濾，濾液作為陰性樣品溶液。
【專利摘要】本發(fā)明公開了清瘟敗毒散中梔子苷的含量測定方法；解決了現(xiàn)有技術(shù)中清瘟敗毒散用梔子苷含量測定的效果較差的問題。本發(fā)明包括（1）利用清瘟敗毒散制備供試品溶液；（2）進(jìn)行液相色譜檢測，液相色譜檢測的流動相為13∶87的乙腈和水；所述供試品溶液的制備過程如下：精密量取清瘟敗毒散1.0g、甲醇25ml，將甲醇加入清瘟敗毒散中，稱定重量，超聲處理20min，放冷至室溫，補足減失重量，過濾，濾液作為供試品溶液。本發(fā)明可將梔子苷與后一個峰的分離度有效增加，該分離度R可增加到1.61，顯著高于現(xiàn)有技術(shù)，且采用該比例的流動相進(jìn)行測量時無陰性干擾。
【IPC分類】G01N30/34
【公開號】CN105548419
【申請?zhí)枴緾N201610080375
【發(fā)明人】潘春暉, 劉濤, 楊瓊, 張煊
【申請人】四川德成動物保健品有限公司
【公開日】2016年5月4日
【申請日】2016年2月5日