一種小麥中氟環(huán)唑殘留量的檢測方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及農(nóng)藥殘留檢測領(lǐng)域，具體涉及一種小麥中氟環(huán)唑殘留量的檢測方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 氟環(huán)唑是一種內(nèi)吸性三唑類殺菌劑，其活性成分氟環(huán)唑抑制病菌麥角留醇的合 成，阻礙病菌細(xì)胞壁的形成，并且氟環(huán)唑分子對(duì)一種真菌酶有強(qiáng)力親和性，與目前已知的殺 菌劑相比，能更有效抑制病菌原真菌。氟環(huán)唑可提高作物的幾丁質(zhì)酶活性，導(dǎo)致真菌吸器的 收縮，抑制病菌侵入，這是氟環(huán)唑在所有三唑類產(chǎn)品中獨(dú)一無二的特性。對(duì)香蕉、蔥蒜、芹 菜、菜豆、瓜類、蘆筍、花生、甜菜等作物上的葉斑病、白粉病、銹病以及葡萄上的炭疽病、白 腐病等病害有良好的防效。其使用過程中，往往會(huì)有殘留。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 為解決上述問題，本發(fā)明提供了一種小麥中氟環(huán)唑殘留量的檢測方法。
[0004] 為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案為：
[0005] -種小麥中氟環(huán)唑殘留量的檢測方法，包括如下步驟：
[0006] S1、稱取10.0 g樣品于50mL離心管中，加入5mL去離子水，混勾，再加入20mL乙 腈，于快速混勻器渦旋lmin，超聲波提取lOmin，3000r/min離心5min，轉(zhuǎn)移上清液到加有3g NaCl的IOOmL具塞量筒中，加5mL 7jC，20mL乙腈重復(fù)提取一次，合并提取液于IOOmL具塞量 筒中，震蕩lmin，靜置30min，定量轉(zhuǎn)移上述20mL乙腈層于50mL燒杯中，放于加熱板上60°C 氮吹近干，加入2mL正己烷浸泡，蓋上錫箱紙，待凈化；
[0007] S2、將弗羅里硅土柱依次用5mL丙酮+正己烷（20+80)、5mL正己烷預(yù)淋條件化，當(dāng) 溶劑液面達(dá)到柱吸附層表面時(shí)，立即倒入步驟Sl所得的樣品溶液，用30mL燒杯接收洗脫 液；
[0008] S3、用5. OmL丙酮+正己烷（20+80)洗刷燒杯后淋洗弗羅里硅土柱，并重復(fù)一次。 將盛有淋洗液的燒杯放在加熱板上50°C氮吹近干，用正己烷準(zhǔn)確定容至2mL，移入進(jìn)樣瓶 中，待測；
[0009]S4、可采用以下兩種方法：
[0010] 方法一、將步驟S3所得的樣品（土壤和小麥粉）過色譜柱 DB-608(30mX0.32mmX0.25ym)后用 ECD 檢測器檢測，柱溫：180 °C (Imin)^y ^2201： (5min)(初始溫度 180°C，以 30°C /min 升溫至 220°C，保持 lmin， 以5°C /min升溫至270°C，保持5min);進(jìn)樣口溫度：230°C ;檢測器溫度：300°C ;氮?dú)猓ㄝd 氣，純度彡99.999%):5111171^11;進(jìn)樣量：11^(不分流進(jìn)樣）；
[0011] 方法二、
[0012] 將步驟S3所得的樣品（小麥植株）過色譜柱DB-5(30mX0. 32mmX0. 25ym)后用 NPD檢測器檢測，柱溫：120°C(0.51^11)^^245°(： (0.5min)a：￡yMfl260°C(8min);進(jìn)樣口溫 度：240°C;檢測器溫度：300°C;氣體流量：氫氣：2. 3mL/min;空氣：60mL/min;氮?dú)猓ㄝd氣， 純度彡99. 999% ) :2mL/min ;進(jìn)樣量：1 y L(不分流進(jìn)樣）。
[0013] 本發(fā)明具有以下有益效果：
[0014] 本發(fā)明建立了乙腈提取土壤、小麥植株及小麥籽粒中氟環(huán)唑的前處理方法和氣相 色譜儀-電子捕獲檢測器（土壤和小麥粉）、氣相色譜儀-氮磷檢測器（小麥植株）檢測 的儀器方法。最小檢出量為2.5X10 ng(E⑶hl.OXloWgWPD)?？瞻滋砑悠骄厥章蕿?82. 41% -92. 77 %，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2. 98% -9. 72 %，最低檢測濃度均為0. 05mg/kg。本方 法以50mL乙腈作為提取液，與已報(bào)道的丙酮作為提取液相比用量較少，后期凈化較簡單； 與甲醇作為提取液相比，提取、鹽析后，加熱板蒸干，不需要旋蒸，能提高工作效率；檢測所 用的儀器普及率較高，方法易推廣應(yīng)用。方法的重現(xiàn)性，準(zhǔn)確度、精密度及檢出限均可滿足 該農(nóng)藥在小麥上的殘留分析要求。
【附圖說明】
[0015] 圖1為本發(fā)明實(shí)施例中氟環(huán)唑標(biāo)準(zhǔn)曲線。
【具體實(shí)施方式】
[0016] 為了使本發(fā)明的目的及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步 詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā) 明。
[0017] 實(shí)施例1
[0018] 稱取小麥粉樣品10.0 g于50mL離心管中，加入5mL去離子水，混勾，再加入20mL 乙腈，于快速混勻器渦旋lmin，超聲波提取lOmin，4000r/min離心5min，轉(zhuǎn)移上清液到加 有3g NaCl的IOOmL具塞量筒中，樣品再加5mL7K，20mL乙腈重復(fù)提取一次，合并提取液于 IOOmL具塞量筒中，震蕩lmin，靜置30min，定量轉(zhuǎn)移20mL乙腈層于50mL燒杯中，放于加熱 板上60 °C氮吹近干，加入2mL正己烷浸泡，蓋上錫箱紙，待凈化。
[0019] 實(shí)施例2
[0020] 稱取10.0 g已粉碎好的小麥猜桿樣品于250mL錐形瓶中，加入10mL7jC，40mL乙腈， 于水浴振蕩器中震蕩30min，超聲波提取5min，過濾上清液到加有3g NaCl的IOOmL具塞 量筒中，樣品再加5mL水，40mL乙腈重復(fù)提取一次，合并提取液于IOOmL具塞量筒中，震蕩 lmin，靜置30min，定量轉(zhuǎn)移30mL乙腈層于50mL燒杯中，放于加熱板上60°C氮吹近干，加入 2mL正己烷浸泡，蓋上錫箱紙，待凈化。
[0021] 實(shí)施例3
[0022] 稱取土壤樣品10.0 g于50mL離心管中，加入5mL去離子水，混勾，再加入20mL乙 腈，于快速混勻器渦旋lmin，超聲波提取lOmin，3000r/min離心5min，轉(zhuǎn)移上清液到加有3g NaCl的IOOmL具塞量筒中，樣品再加5mL 7K，20mL乙腈重復(fù)提取一次，合并提取液于IOOmL 具塞量筒中，震蕩lmin，靜置30min，定量轉(zhuǎn)移20mL乙腈層于50mL燒杯中，放于加熱板上 60 °C氮吹近干，加入2mL正己烷浸泡，蓋上錫箱紙，待凈化。
[0023] 將弗羅里硅土柱依次用5mL丙酮+正己烷（20+80)、5mL正己烷預(yù)淋條件化，當(dāng)溶 劑液面達(dá)到柱吸附層表面時(shí)，立即倒入實(shí)施例3所得的土壤樣品溶液、實(shí)施例2所得的小 麥秸桿樣品溶液和實(shí)施例1所得的小麥粉樣品溶液，用30mL燒杯接收洗脫液，用5. OmL丙 酮+正己烷（20+80)洗刷燒杯后淋洗弗羅里硅土柱，并重復(fù)一次。將盛有淋洗液的燒杯放 在加熱板上50°C氮吹近干，用正己烷準(zhǔn)確定容至2mL，移入進(jìn)樣瓶中，將所得的土壤樣品溶 液和小麥粉樣品溶液過色譜柱DB-608 (30mX 0. 32mmX 0. 25 y m)，用美國Thermo公司Trace GC的氣相色譜儀和檢測器ECD進(jìn)行檢測，柱溫：180°C (Imin) 30°C /min220°C (Imin) 5°C / min270°C (5min)進(jìn)樣口溫度：230°C ;檢測器溫度：300°C ;氮?dú)猓ㄝd氣，純度彡99. 999% ): 5mL/min。進(jìn)樣量：1 y L (不分流進(jìn)樣）。
[0024] 將所得的小麥秸桿樣品溶液過色譜柱DB-5(30mX0. 32mmX0. 25 ym)后用檢測器 NPD 進(jìn)行檢測，柱溫：120 °C (0. 5min)20°C /min245°C (0. 5min)3°C /min260°C (8min)，進(jìn)樣 口溫度：240°C ;檢測器溫度：300°C ;氣體流量：氫氣：2. 3mL/min ;空氣：60mL/min ;氮?dú)猓ㄝd 氣，純度彡99.999%):2111171^11。進(jìn)樣量：11^(不分流進(jìn)樣）。
[0025] 稱取一定量的氟環(huán)唑標(biāo)準(zhǔn)樣品，用正己烷溶解定容并逐級(jí)稀釋成0.05、0. 1、0. 5、 I. 0、2. Omg/L，以峰面積㈧一進(jìn)樣量（M)作標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程為y = 2. 0X 106x-17364， r2= 0. 9994,見圖1。最小檢出量：2. 5X10 ng(ECD) IOXlO10g(NPD);最低檢測濃度：均 為 0. 05mg/kg ;相對(duì)保留時(shí)間：約 10. 3min (ECD);約 8. 2min 和 8. 8min (NPD)
[0026] 在小麥粉、小麥秸桿和土壤的對(duì)照樣品中添加不同濃度的氟環(huán)唑標(biāo)樣溶液，搖勻， 放置2h后依樣品提取，凈化方法進(jìn)行處理，測得本方法的添加回收率見表3。當(dāng)添加水平為 0.05、0.1、0.511^/1^時(shí)，測得小麥粉的平均回收率為82.41%~86.04%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為 6. 63 %~9. 72 %;小麥秸桿的平均回收率為84. 45 %~90. 74 %，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為3. 65 %~ 6. 26% ;土壤的平均回收率為91. 00 %~92. 77%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2. 98 %~7. 45%，符合 殘留分析要求。
[0027] 以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人 員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以作出若干改進(jìn)和潤飾，這些改進(jìn)和潤飾也應(yīng) 視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種小麥中氟環(huán)唑殘留量的檢測方法，其特征在于，包括如下步驟： 51、 稱取10.Og樣品于50mL離心管中，加入5mL去離子水，混勾，再加入20mL乙腈，于 快速混勾器禍旋lmin，超聲波提取lOmin，3000r/min離心5min，轉(zhuǎn)移上清液到加有3gNaCl 的IOOmL具塞量筒中，加5mL水，20mL乙腈重復(fù)提取一次，合并提取液于IOOmL具塞量筒中， 震蕩lmin，靜置30min，定量轉(zhuǎn)移上述20mL乙腈層于50mL燒杯中，放于加熱板上60°C氮吹 近干，加入2mL正己烷浸泡，蓋上錫箱紙，待凈化； 52、 將弗羅里硅土柱依次用5mL丙酮+正己烷、5mL正己烷預(yù)淋條件化，當(dāng)溶劑液面達(dá)到 柱吸附層表面時(shí)，立即倒入步驟Sl所得的樣品溶液，用30mL燒杯接收洗脫液； 53、 用5.OmL丙酮+正己烷洗刷燒杯后淋洗弗羅里硅土柱，并重復(fù)一次；將盛有淋洗液 的燒杯放在加熱板上50°C氮吹近干，用正己烷準(zhǔn)確定容至2mL，移入進(jìn)樣瓶中，待測； 54、 可采用以下兩種方法： 方法一、將步驟S3所得的樣品過色譜柱DB-608(30mX0. 32mmX0. 25ym)后用ECD檢 測器檢測，柱溫：180°C(1min) 220°C(1min) 5^ZYCTC(Smin);進(jìn)樣口 溫度：230°C;檢測器溫度：300°C;氮?dú)猓ㄝd氣，純度彡99. 999% ) :5mL/min;進(jìn)樣量：1yL; 方法二、將步驟S3所得的樣品過色譜柱DB-5(30mX0. 32mmX0. 25ym)后用NPD檢測 器檢測，柱溫：120°C(0.5min) 2Q!SMIL245°C(0.5min) _260°C(8min);進(jìn)樣 口溫度：240°C;檢測器溫度：300°C;氣體流量：氫氣：2. 3mL/min;空氣：60mL/min;氮?dú)猓?2mL/min;進(jìn)樣量：1yL02. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種小麥中氟環(huán)唑殘留量的檢測方法，其特征在于，丙酮和 正己烷的體積比為20 : 80。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種小麥中氟環(huán)唑殘留量的檢測方法，包括如下步驟：稱取樣品于離心管中，加入去離子水和乙腈，渦旋1min后，超聲波提取10min，離心，轉(zhuǎn)移上清液到加有3g？NaCl的具塞量筒中，加水和乙腈重復(fù)提取一次，合并提取液于具塞量筒中，震蕩1min，靜置；定量轉(zhuǎn)移上述乙腈層于燒杯中，置于加熱板上氮吹近干，加入正己烷浸泡，蓋上錫箔紙；將弗羅里硅土柱預(yù)淋條件化，當(dāng)溶劑液面達(dá)到柱吸附層表面時(shí)，倒入樣品溶液，用燒杯接收洗脫液；用丙酮+正己烷洗刷燒杯后淋洗弗羅里硅土柱，并重復(fù)一次；將盛有淋洗液的燒杯放在加熱板上氮吹近干，用正己烷準(zhǔn)確定容至2mL，移入進(jìn)樣瓶中，過色譜柱后用ECD和NPD檢測器檢測。
【IPC分類】G01N30/02
【公開號(hào)】CN105136924
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510528548
【發(fā)明人】馬婧瑋, 吳緒金, 張軍鋒, 周玲, 劉進(jìn)璽, 李通, 祁玉峰, 俎建英, 王鐵良, 司敬沛, 馬瑩
【申請(qǐng)人】河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測技術(shù)研究所
【公開日】2015年12月9日
【申請(qǐng)日】2015年8月21日