本發(fā)明屬于分析化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及氣相色譜法分離測定阿立哌唑有關(guān)物質(zhì)二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽和1,4-二溴丁烷的方法。

背景技術(shù)：

阿立哌唑是一種新型的非典型抗精神分裂癥藥物，對da能神經(jīng)系統(tǒng)具有雙向調(diào)節(jié)作用，是da遞質(zhì)的穩(wěn)定劑。與d2、d3、5-ht1a和5-ht2a受體有很高的親和力。通過對d2和5-ht1a受體的部分激動作用及對5-ht2a受體的拮抗作用來產(chǎn)生抗精神分裂癥作用。阿立哌唑?qū)穹至寻Y的陽性和陰性癥狀均有明顯療效，也能改善伴發(fā)的情感癥狀，降低精神分裂癥的復(fù)發(fā)率。阿立哌唑化學(xué)名為：7-{4-[4-(2，3-二氯苯基)-l-哌嗪基]丁氧基}-3，4-二氫-2(1h)-喹啉酮，分子式為c23h27n3o2cl2，結(jié)構(gòu)式為：

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藥品在臨床使用中產(chǎn)生的不良反應(yīng)除了與藥品本身的藥理活性有關(guān)，有時與藥品中存在的雜質(zhì)也有很大關(guān)系，為保證藥品的質(zhì)量與安全性，注冊申報的藥品要求對其工藝過程中引入的雜質(zhì)進(jìn)行研究和有效控制。合成阿立哌唑工藝中引入的有關(guān)物質(zhì)有二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽，其分子式為c4h10cl3n，結(jié)構(gòu)式為：

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1,4-二溴丁烷的分子式為c4h8br2，結(jié)構(gòu)式為：

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選擇合適的分析方法，準(zhǔn)確地分離和測定阿立哌唑中有關(guān)物質(zhì)二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽和1,4-二溴丁烷，對提高阿立哌唑質(zhì)量、保證用藥安全具有重要的意義。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種分離檢測合成阿立哌唑工藝中引入的有機(jī)雜質(zhì)二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽和1,4-二溴丁烷的方法，從而達(dá)到對阿立哌唑純度的有效控制，保證阿立哌唑的質(zhì)量及用藥安全性。

本發(fā)明所述的一種分離、測定阿立哌唑有關(guān)物質(zhì)的方法，是采用氣相色譜分析技術(shù)，選用合適的溶劑將樣品溶解，根據(jù)待分析物質(zhì)的結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)，選用甲基聚硅氧烷類色譜柱和氫火焰離子化檢測器。

上述所說的溶劑可以為乙醇、甲醇、二氯甲烷或二甲基亞砜中的一種或幾種。

上述所說的色譜柱選自agilent、supelco、phenomenex或restek等品牌。

上述所說的色譜柱為中等級性聚硅氧烷類毛細(xì)管色譜柱。

本發(fā)明所述的分離測定方法，可按照以下方法實現(xiàn)：

1）取阿立哌唑適量，加無水乙醇溶解制成每1ml中含阿立哌唑100mg的溶液，作為供試品溶液；另取二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽和1,4-二溴丁烷適量，加無水乙醇溶解制成每1ml中含二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽和1,4-二溴丁烷各5μg的溶液，作為對照品溶液；

2）設(shè)置進(jìn)樣口溫度為200~250℃，載氣流速為1.0~3.5ml/min，程序升溫法，升溫程序為初始溫度135°c，恒溫1~3min，以每分鐘8~15°c的升溫速率至160°c，恒溫2~5min，檢測器溫度為250~300℃，分流比為2:1~10:1；

3）取1）中供試品溶液和對照品溶液各1～3μl，按2）的色譜條件，注入氣相色譜儀，采用外標(biāo)法計算阿立哌唑中二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽和1,4-二溴丁烷的含量。

其中：氣相色譜儀的型號，無特別要求，本發(fā)明采用的氣相色譜儀為島津（2010plus）氣相色譜儀；

檢測器：氫火焰離子化檢測器；

色譜柱：zb-50毛細(xì)管色譜柱（60m×0.32mm，0.50μm）；

進(jìn)樣口溫度：200℃；

檢測器溫度：250℃；

載氣（氮氣）流速：3.0ml/min；

分流比：2:1；

進(jìn)樣體積：1μl。

柱箱升溫程序：

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本發(fā)明采用氣相色譜法，選用甲基聚硅氧烷類中等極性毛細(xì)管色譜柱（60m×0.32mm，0.50μm），能快速有效地分離測定阿立哌唑中二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽和1,4-二溴丁烷，解決了合成阿立哌唑工藝中引入的有關(guān)物質(zhì)二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽和1,4-二溴丁烷的分離測定問題，從而達(dá)到對阿立哌唑純度的有效控制。結(jié)果見附圖1~6。

附圖說明

圖1：實施例1時溶劑（無水乙醇）的氣相色譜圖；

圖2：實施例1時阿立哌唑的氣相色譜圖；

圖3：實施例1時二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽和1,4-二溴丁烷的氣相色譜圖；

圖4：實施例1時加入二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽和1,4-二溴丁烷的阿立哌唑樣品氣相色譜圖；

圖5：實施例2時加入二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽和1,4-二溴丁烷的阿立哌唑樣品的氣相色譜圖；

圖6：實施例3時加入二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽和1,4-二溴丁烷的阿立哌唑樣品的氣相色譜圖。

具體實施方式：

以下實施例用于進(jìn)一步理解本發(fā)明，但不限于本實施的范圍。以下通過實例形式，對本發(fā)明涉及的阿立哌唑有關(guān)物質(zhì)檢測方法作進(jìn)一步的詳細(xì)說明，但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實例，凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。

實施例1

儀器與條件

色譜儀：島津2010plus氣相色譜儀；

檢測器：氫火焰離子化檢測器；

色譜柱：zb-50毛細(xì)管色譜柱（60m×0.32mm，0.50μm）；

進(jìn)樣口溫度：200℃；

檢測器溫度：250℃；

載氣（氮氣）流速：3.0ml/min；

分流比：2:1；

進(jìn)樣體積：1μl。

柱箱升溫程序：

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實驗步驟

取阿立哌唑適量，加無水乙醇溶解制成每1ml中含阿立哌唑100mg的溶液，作為阿立哌唑樣品溶液；取二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽和1,4-二溴丁烷適量，加無水乙醇溶解制成每1ml中含二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽和1,4-二溴丁烷各5μg的溶液，作為對照品溶液；另取無水乙醇作為空白溶液。按上述色譜條件進(jìn)行分析，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以峰面積計算二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽和1,4-二溴丁烷的含量。結(jié)果見附圖1~4，圖1為空白溶液色譜圖；圖2為阿立哌唑樣品溶液色譜圖；圖3中保留時間4.508min的色譜峰為二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽，保留時間4.794min的色譜峰為1,4-二溴丁烷；圖4為加入二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽和1,4-二溴丁烷的阿立哌唑樣品氣相色譜圖。圖1~圖4表明：本發(fā)明提供的方法能快速有效地分離測定阿立哌唑中二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽和1,4-二溴丁烷，并可以準(zhǔn)確進(jìn)行定量檢測，從而達(dá)到對阿立哌唑純度和質(zhì)量的有效控制。

實施例2

儀器與條件

色譜儀：島津2010plus氣相色譜儀；

檢測器：氫火焰離子化檢測器；

色譜柱：zb-50毛細(xì)管色譜柱（60m×0.32mm，0.50μm）；

進(jìn)樣口溫度：205℃；

檢測器溫度：250℃；

載氣（氮氣）流速：3.0ml/min；

分流比：2:1；

進(jìn)樣體積：1μl。

柱箱升溫程序：

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實驗步驟

取二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽和1,4-二溴丁烷適量，加無水乙醇溶解制成每1ml中含有二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽和1,4-二溴丁烷各5μg的溶液，作為對照品溶液；另取無水乙醇作為空白溶液。按上述色譜條件進(jìn)行分析，記錄色譜圖。結(jié)果見附圖5，圖5中保留時間4.502min的色譜峰為二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽，保留時間4.786min的色譜峰為1,4-二溴丁烷。

實施例3

儀器與條件

色譜儀：島津2010plus氣相色譜儀；

檢測器：氫火焰離子化檢測器；

色譜柱：zb-50毛細(xì)管色譜柱（60m×0.32mm，0.50μm）；

進(jìn)樣口溫度：200℃；

檢測器溫度：250℃；

載氣（氮氣）流速：3.2ml/min；

分流比：2:1；

進(jìn)樣體積：1μl。

柱箱升溫程序：

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實驗步驟

取二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽和1,4-二溴丁烷適量，加無水乙醇溶解制成每1ml中含有二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽和1,4-二溴丁烷各5μg的溶液，作為對照品溶液；另取無水乙醇作為空白溶液。按上述色譜條件進(jìn)行分析，記錄色譜圖。結(jié)果見附圖6，圖6中保留時間4.405min的色譜峰為二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽，保留時間4.684min的色譜峰為1,4-二溴丁烷。

本發(fā)明對所述阿立哌唑有關(guān)物質(zhì)二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽和1,4-二溴丁烷分析方法的以下項目進(jìn)行了驗證：

系統(tǒng)適用性實驗

取阿立哌唑及二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽和1,4-二溴丁烷適量，分別用無水乙醇溶解樣品，配制成含阿立哌唑、二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽和1,4-二溴丁烷的供試品溶液。按實施例1的色譜條件進(jìn)行氣相色譜分析，記錄色譜圖。由圖1~圖4可知，在此條件下二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽及1,4-二溴丁烷與相鄰峰之間分離度良好，溶劑和阿立哌唑其他雜質(zhì)均不干擾二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽和1,4-二溴丁烷的測定，故說明該分析方法專屬性良好。

進(jìn)樣重復(fù)性試驗

取阿立哌唑有關(guān)物質(zhì)二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽和1,4-二溴丁烷供試品溶液，按實施例1的色譜條件，重復(fù)進(jìn)樣6次，考察方法的重復(fù)性。由結(jié)果可得，該方法進(jìn)樣重復(fù)性良好。

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定量限、檢測限

取阿立哌唑的有關(guān)物質(zhì)二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽和1,4-二溴丁烷適量，精密稱定，分別用無水乙醇溶解樣品，配制成一定響應(yīng)值的供試品溶液，再精密量取供試品溶液適量，逐級稀釋，按實施例1的色譜條件進(jìn)樣考察。二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽和1,4-二溴丁烷定量限和檢測限數(shù)據(jù)如下表所示：

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線性

取阿立哌唑有關(guān)物質(zhì)二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽和1,4-二溴丁烷適量，精密稱定，分別用無水乙醇溶解，配制成二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽和1,4-二溴丁烷貯備液；精密量取二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽和1,4-二溴丁烷貯備液，分別稀釋成濃度為2.5μg/ml、4.0μg/ml、5.0μg/ml、6.0μg/ml和7.5μg/ml的二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽和1,4-二溴丁烷供試品溶液，將各溶液按實施例1的色譜條件進(jìn)樣考察，結(jié)果見下表：

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準(zhǔn)確度

取阿立哌唑有關(guān)物質(zhì)二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽和1,4-二溴丁烷適量，精密稱定，分別用無水乙醇溶解，配制成二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽和1,4-二溴丁烷貯備液；精密量取二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽和1,4-二溴丁烷貯備液適量，用無水乙醇稀釋，分別配成4.0μg/ml、5.0μg/ml、6.0μg/ml的準(zhǔn)確度試驗溶液。取阿立哌唑約100mg，分別加上述不同濃度的準(zhǔn)確度試驗溶液1ml溶解，作為不同濃度水平的供試品溶液，各濃度水平供試品溶液平行配制3份；另取阿立哌唑約100mg，加入1ml無水乙醇溶解，作為空白樣品溶液。將上述溶液按實施例1的色譜條件進(jìn)樣考察，圖4為5.0μg/ml供試品溶液（即阿立哌唑中加入二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽和1,4-二溴丁烷）的色譜圖，保留時間為4.504min的色譜峰為二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽，保留時間為4.788min的色譜峰為1,4-二溴丁烷，進(jìn)樣結(jié)果見下表：

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耐用性

通過微調(diào)進(jìn)樣口溫度、載氣流速、檢測器溫度和色譜柱品牌等色譜條件，我們進(jìn)一步考察了方法的耐用性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，該方法對不同品牌的色譜柱、進(jìn)樣口溫度變化±5℃、載氣流速變化±0.2ml/min、檢測器溫度變化±5℃等條件下耐用性良好。在不同品牌色譜柱、不同進(jìn)樣口溫度、載氣流速及檢測器溫度條件下，二（2-氯乙基）胺鹽酸鹽和1,4-二溴丁烷保留時間無顯著變化，且均能達(dá)到有效分離。