本申請(qǐng)是申請(qǐng)日為2007年3月15日、申請(qǐng)?zhí)枮椤?00780017558.9”、發(fā)明名稱(chēng)為“凝溶膠蛋白診斷和治療炎性疾病的用途”的中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)的分案申請(qǐng)，原申請(qǐng)是國(guó)際申請(qǐng)pct/us2007/006451的中國(guó)國(guó)家階段申請(qǐng)。

本發(fā)明涉及凝溶膠蛋白的診斷和治療應(yīng)用。

背景技術(shù)：

炎癥是機(jī)體對(duì)損傷、感染或被免疫系統(tǒng)視為外來(lái)物之分子的反應(yīng)。炎癥的特征為受影響組織的疼痛、腫脹和功能改變。盡管啟動(dòng)炎癥反應(yīng)的能力對(duì)于生存是必不可少的，但控制炎癥的能力對(duì)于健康也是必要的。炎性疾病的特征在于組織或器官中免疫系統(tǒng)被活化到異常水平，以致于有可能導(dǎo)致該組織或器官中的異常功能和/或疾病。

炎性疾病是全世界發(fā)病和死亡的一種主要原因。它們影響各種器官和組織比如血管、心臟、腦、神經(jīng)、關(guān)節(jié)、皮膚、肺、眼睛、胃腸道、腎、甲狀腺、腎上腺、胰腺、肝臟和肌肉。炎性疾病的治療已經(jīng)引起了制藥工業(yè)的很多注意。在炎性病癥治療選擇討論中的一個(gè)經(jīng)常出現(xiàn)的話題是護(hù)理標(biāo)準(zhǔn)的不適當(dāng)?？刂坪椭委熣诟纳?，但尚不能根治。最近十年中炎性病癥治療的最常見(jiàn)措施是針對(duì)細(xì)胞因子的促炎作用以及結(jié)合這些分子或其受體的化合物。

盡管已有這些新進(jìn)展，炎性疾病的當(dāng)前治療仍然需要用非特異性藥物減輕癥狀和減少炎癥、用疾病改進(jìn)劑減緩疾病進(jìn)程、以及用生活方式改變來(lái)提高生活質(zhì)量，同時(shí)都還需要應(yīng)對(duì)藥物治療的副作用和耐藥性。還需要有較少副作用可能的更好的治療選擇。

因?yàn)橹委熃Y(jié)果依賴(lài)于恰當(dāng)?shù)脑\斷，具有恰當(dāng)?shù)臋z驗(yàn)來(lái)診斷炎性疾病以及監(jiān)測(cè)這些疾病的治療是重要的。恰當(dāng)?shù)脑\斷使得醫(yī)生可以實(shí)施恰當(dāng)且及時(shí)的治療。對(duì)治療的適當(dāng)監(jiān)測(cè)使得醫(yī)生能夠決定治療過(guò)程以及向患者及其家屬建議預(yù)期的疾病過(guò)程。因此，還強(qiáng)烈需要有診斷和評(píng)價(jià)炎性疾病治療的新的改進(jìn)的測(cè)試和方法。

凝溶膠蛋白首先作為參與細(xì)胞運(yùn)動(dòng)的細(xì)胞內(nèi)肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白而被發(fā)現(xiàn)(yin，h.l.&stossel，t.p.(1979)nature281，583-6)，最近已經(jīng)注意到它參與多種疾病。盡管血漿凝溶膠蛋白的真實(shí)功能尚不知道，臨床和動(dòng)物研究已經(jīng)表明，損傷和炎癥所致血漿凝溶膠蛋白的消耗與不利的結(jié)果相關(guān)。凝溶膠蛋白消耗的一種推測(cè)機(jī)制是它結(jié)合由于組織破壞而暴露的細(xì)胞中高豐度的肌動(dòng)蛋白。更近以來(lái)，發(fā)現(xiàn)凝溶膠蛋白結(jié)合生物活性炎性介質(zhì)如溶血磷脂酸、二腺嘌呤磷酸酯、aβ肽(參與阿爾茨海默氏病發(fā)病的一種肽)、血小板活化因子，并且可能還有其它物質(zhì)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

凝溶膠蛋白(gsn)，尤其是胞漿凝溶膠蛋白(cgsn)，除了是參與細(xì)胞運(yùn)動(dòng)的細(xì)胞內(nèi)肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白以外，還是高豐度的分泌蛋白(yin，h.l.，kwiatkowski，d.j.，mole，j.e.&cole，f.s.(1984)jbiolchem259，5271-6)。外泌型凝溶膠蛋白被稱(chēng)為血漿凝溶膠蛋白(pgsn)，具有額外的25個(gè)氨基酸，來(lái)源于單基因的另外可供的選擇性剪接(kwiatkowski，d.j.，stossel，t.p.，orkin，s.h.，mole，j.e.，colten，h.r.&yin，h.l.(1986)nature323，455-8)。

本發(fā)明基于以下令人驚奇的發(fā)現(xiàn)：在來(lái)自具有炎性疾病類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(ra)的人對(duì)象的血樣中血漿凝溶膠蛋白水平被降低。這些發(fā)現(xiàn)支持這種假設(shè)：血漿凝溶膠蛋白水平的降低反映了由于類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的因素使關(guān)節(jié)組織所受的初步損傷，這種損傷先于因后繼炎癥過(guò)程所導(dǎo)致的關(guān)節(jié)疼痛和破壞。這些現(xiàn)象提供了用凝溶膠蛋白處理來(lái)預(yù)防和/或抑制炎性疾病之表現(xiàn)的基礎(chǔ)。這些現(xiàn)象的一個(gè)關(guān)聯(lián)因素是，監(jiān)測(cè)血漿凝溶膠蛋白水平能夠成為類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎控制策略的一部分。

盡管不打算受限于任何特定機(jī)制或理論，相信凝溶膠蛋白可能通過(guò)抑制炎癥介質(zhì)來(lái)發(fā)揮它的保護(hù)效應(yīng)。因此，本發(fā)明涉及使用凝溶膠蛋白來(lái)診斷炎性疾病以及監(jiān)測(cè)治療效果的方法。本發(fā)明還包括凝溶膠蛋白治療發(fā)炎以及炎性疾病的用途。

根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)方面，提供一種表征對(duì)象未來(lái)發(fā)生炎性疾病(例如在一些優(yōu)選實(shí)施方案中的類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)的風(fēng)險(xiǎn)特征的方法。所述方法包括：獲得所述對(duì)象中的凝溶膠蛋白水平以及將該凝溶膠蛋白水平與預(yù)定值進(jìn)行比較?；谂c所述預(yù)定值相比其凝溶膠蛋白水平來(lái)表征所述對(duì)象發(fā)生炎性疾病(例如類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)的風(fēng)險(xiǎn)特征。凝溶膠蛋白水平處于或低于該預(yù)定水平指示了所述對(duì)象有更高的風(fēng)險(xiǎn)發(fā)生該炎性疾病，而凝溶膠蛋白水平處于或高于該預(yù)定水平則指示了所述對(duì)象沒(méi)有發(fā)生該炎性疾病的更高風(fēng)險(xiǎn)。

在一些實(shí)施方案中，所述方法還包括進(jìn)行一或更多次檢驗(yàn)以評(píng)價(jià)該炎性疾病。評(píng)價(jià)炎性疾病可以包括測(cè)量所述對(duì)象中炎癥標(biāo)記物的水平。炎癥標(biāo)記物的實(shí)例包括但不限于crp、可溶性細(xì)胞間粘附分子(sicam-1)、icam3、bl-cam、lfa-2、vcam-1、ncam、pecam、纖維蛋白原、血清淀粉樣蛋白a(saa)、脂蛋白相關(guān)的磷脂酶a2(lppla2)、scd40配體(scd40l)、髓過(guò)氧化物酶、白介素-6(il-6)或白介素-8(il-8)。

根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供一種表征對(duì)象未來(lái)發(fā)生炎性疾病(例如在一些優(yōu)選實(shí)施方案中的類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)的風(fēng)險(xiǎn)特征的方法。所述方法包括：獲得所述對(duì)象中的凝溶膠蛋白水平以及將該凝溶膠蛋白水平與第一預(yù)定值進(jìn)行比較以建立第一風(fēng)險(xiǎn)值。獲得所述對(duì)象中第二種炎癥標(biāo)志物的水平，并將該第二種炎癥標(biāo)志物的水平與第二預(yù)定值進(jìn)行比較以建立第二風(fēng)險(xiǎn)值?；诘谝伙L(fēng)險(xiǎn)值和第二風(fēng)險(xiǎn)值的組合來(lái)表征所述對(duì)象發(fā)生炎性疾病的風(fēng)險(xiǎn)特征，其中第一風(fēng)險(xiǎn)值和第二風(fēng)險(xiǎn)值的組合建立不同于所述第一和第二風(fēng)險(xiǎn)值的第三風(fēng)險(xiǎn)值。

在一些實(shí)施方案中，所述對(duì)象是表面上健康的對(duì)象。

在一些實(shí)施方案中，第一預(yù)定值可以是多個(gè)預(yù)定凝溶膠蛋白水平范圍，多個(gè)范圍其中之一低于約250mg/l血漿，所述范圍中另一個(gè)高于約250mg/l血漿，并且所述比較步驟包括確定所述對(duì)象的凝溶膠蛋白水平落入所述多個(gè)預(yù)定凝溶膠蛋白水平范圍中的哪個(gè)之內(nèi)。

根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供一種治療患有炎性疾病(例如在一些優(yōu)選實(shí)施方案中的類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)或有發(fā)生此病風(fēng)險(xiǎn)的對(duì)象的方法。所述方法包括向需要這種治療的對(duì)象施用有效量的凝溶膠蛋白以治療所述對(duì)象。

根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供一種治療患有炎性疾病(例如在一些優(yōu)選實(shí)施方案中的類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)或有發(fā)生此病風(fēng)險(xiǎn)的對(duì)象的方法。所述方法包括向需要這種治療的對(duì)象施用有效量的凝溶膠蛋白以將所述對(duì)象中的凝溶膠蛋白水平提高到預(yù)定值之上。

在一些實(shí)施方案中，所述對(duì)象在其它方面沒(méi)有需要用凝溶膠蛋白治療的適應(yīng)癥。所述凝溶膠蛋白優(yōu)選地通過(guò)口服、舌下、含服、鼻內(nèi)、靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、腹膜內(nèi)、皮下或局部(topical)來(lái)施用。所述凝溶膠蛋白可以預(yù)防性施用。

在一些實(shí)施方案中，所述治療方法包括施用第二藥劑用于治療所述炎性疾病(例如在一些優(yōu)選實(shí)施方案中為類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)。用于治療炎性疾病的藥劑的實(shí)例包括但不限于阿氯芬酸(alclofenac)，二丙酸阿氯米松(alclometasonedipropionate)，醋苯阿爾孕酮(algestoneacetonide)，阿爾法淀粉酶，阿西納發(fā)(amcinafal)，安西非特(amcinafide)，氨芬酸鈉(amfenacsodium)，鹽酸氨普立糖(amiprilosehydrochloride)，阿那白滯素(anakinra)，艾利洛克(anirolac)，阿尼扎芬(anitrazafen)，阿扎丙酮(apazone)，巴柳氮二鈉(balsalazidedisodium)，芐達(dá)酸(bendazac)，苯噁洛芬(benoxaprofen)，鹽酸芐達(dá)明(benzydaminehydrochloride)，菠蘿蛋白酶(bromelains)，溴四拉莫(broperamole)，布地縮松(budesonide)，卡洛芬(carprofen)，環(huán)洛芬(cicloprofen)，西諾戊宗(cintazone)，氯噻托酸(cliprofen)，丙酸氯倍他索(clobetasolpropionate)，丁酸氯倍氟松(clobetasonebutyrate)，氯苯吡乙酸(clopirac)，丙酸氯替卡松(cloticasonepropionate)，醋酸可美薩松(cormethasoneacetate)，去氧可的松(cortodoxone)，環(huán)加氧酶-2(cox-2)抑制劑，去氟可特(deflazacort)，待索利德(desonide)，去氧米松(desoximetasone)，二丙酸地塞米松(dexamethasonedipropionate)，雙氯芬酸鉀，雙氯芬酸鈉，雙醋二氟松(diflorasonediacetate)，二氟米酮鈉(diflumidonesodium)，雙氟尼酸(diflunisal)，雙氟潑龍酯(difluprednate)，雙酞嗪酮(diftalone)，二甲基亞砜，丙縮氫炎松(drocinonide)，因甲羥松(endrysone)，恩莫單抗(enlimomab)，艾洛利康鈉(enolicamsodium)，甲氧嘧唑(epirizole)，依托度酸(etodolac)，依托芬那酯(etofenamate)，非必拉克(felbinac)，非那莫(fenamole)，芬布芬(fenbufen)，二氯苯氧苯乙酸(fenclofenac)，氯環(huán)苯乙酸(fenclorac)，芬度柳(fendosal)，苯吡噁二酮(fenpipalone)，芬噻唑酸(fentiazac)，氟苯哌酮(flazalone)，氟扎可松(fluazacort)，氟芬那酸(flufenamicacid)，氟咪唑(flumizole)，醋酸氟尼縮松(flunisolideacetate)，氟尼克辛(flunixin)，氟芐煙酸(flunixinmeglumine)，氟可丁酯(fluocortinbutyl)，氟氫縮松醋酸酯(fluorometholoneacetate)，苯氟喹酮(fluquazone)，氟比洛芬(flurbiprofen)，氟瑞托芬(fluretofen)，丙酸氟地松(fluticasonepropionate)，呋拉布洛芬(furaprofen)，丁酸酰氧芴(furobufen)，哈西奈德(halcinonide)，丙酸鹵倍他索(halobetasolpropionate)，醋酸鹵潑尼松(halopredoneacetate)，布芬酸(ibufenac)，布洛芬(ibuprofen)，布洛芬鋁，皮考布洛芬，伊洛達(dá)普(ilonidap)，吲哚美辛(indomethacin)，吲哚美辛鈉，吲哚布洛芬(indoprofen)，吲哚克索(indoxole)，吲四唑(intrazole)，醋酸異氟潑尼松(isoflupredoneacetate)，伊索克酸(isoxepac)，伊索昔康(isoxicam)，酮基布洛芬(ketoprofen)，鹽酸羅非咪唑(lofemizolehydrochloride)，氯諾昔康(lornoxicam)，依碳氯替潑諾(loteprednoletabonate)，甲氯芬那酸鈉(meclofenamatesodium)，甲氯芬那酸，甲氯松二丁酯(meclorisonedibutyrate)，甲芬那酸(mefenamicacid)，美沙拉秦(mesalamine)，甲塞克那唑(meseclazone)，磺庚甲潑尼松龍(methylprednisolonesuleptanate)，莫尼氟酯(morniflumate)，萘丁美酮(nabumetone)，萘普生(naproxen)，萘普生鈉，萘普醇，尼馬宗(nimazone)，奧沙拉秦鈉(olsalazinesodium)，奧古蛋白(orgotein)，歐哌洛星(orpanoxin)，奧沙普秦(oxaprozin)，氧苯丁唑(oxyphenbutazone)，鹽酸雷尼托林(paranylinehydrochloride)，戊聚糖多硫酸鈉(pentosanpolysulfatesodium)，保泰松甘油酸鈉(phenbutazonesodiumglycerate)，哌非尼酮(pirfenidone)，吡羅昔康(piroxicam)，肉桂酸吡羅昔康，吡羅昔康乙醇胺(piroxicamolamine)，吡氯布洛芬(pirprofen)，潑那扎特(prednazate)，叔丁非隆(prifelone)，丙哚酸(prodolicacid)，丙喹酮(proquazone)，普咯沙唑(proxazole)，枸櫞酸普咯沙唑，利美索龍(rimexolone)，諾馬及特(romazarit)，柳膽立司(salcolex)，沙那西定(salnacedin)，水楊酰水楊酸(salsalate)，血根氯銨(sanguinariumchloride)，氯唑噁酮(seclazone)，絲炎痛(sermetacin)，噻氧噻嗪(sudoxicam)，舒林酸(sulindac)，舒洛芬(suprofen)，他美達(dá)辛(talmetacin)，他尼氟酯(talniflumate)，塔羅賽特(talosalate)，泰布芬隆(tebufelone)，替尼達(dá)普(tenidap)，替尼達(dá)普鈉，替諾昔康(tenoxicam)，替昔康(tesicam)，芐叉異喹酮(tesimide)，四氫達(dá)明(tetrydamine)，噻匹萊克(tiopinac)，特戊酸硫氫可的松(tixocortolpivalate)，托美汀(tolmetin)，托美汀鈉，三氯氟松(triclonide)，三氟米酯(triflumidate)，疊氮吲酸(zidometacin)或佐美酸鈉(zomepiracsodium)。

抗炎藥還包括環(huán)加氧酶-2(cox-2)抑制劑。環(huán)加氧酶是一種在從花生四烯酸產(chǎn)生各種前列腺素和血栓烷的大多數(shù)組織中存在的酶復(fù)合物。非甾體抗炎藥通過(guò)抑制所述環(huán)加氧酶(亦稱(chēng)前列腺素g/h合酶和/或前列腺素-內(nèi)過(guò)氧化物合酶)來(lái)發(fā)揮它們大部分的抗炎、鎮(zhèn)痛和解熱活性并抑制激素誘導(dǎo)的子宮收縮和某些類(lèi)型的癌癥生長(zhǎng)。開(kāi)始時(shí)，僅知道一種形式的環(huán)加氧酶，即“組成型酶”或環(huán)加氧酶-1(cox-1)。最初它是在牛精囊中被鑒定。

已經(jīng)從雞、鼠和人來(lái)源中克隆、測(cè)序并表征了環(huán)加氧酶-2(cox-2)(例如見(jiàn)美國(guó)專(zhuān)利5,543,297，1996年8月6日授權(quán)給cromlish等人，并轉(zhuǎn)讓給merckfrosstcanada，inc.，kirkland，ca，發(fā)明名稱(chēng)為“humancyclooxygenase-2cdnaandassaysforevaluatingcyclooxygenase-2activity”)。該酶與cox-1不同。cox-2快速并且很容易被多種藥劑(包括絲裂原、內(nèi)毒素、激素、細(xì)胞因子以及生長(zhǎng)因子)誘導(dǎo)。由于前列腺素兼?zhèn)渖砗筒±碜饔?，人們相信所述組成型酶cox-1主要負(fù)責(zé)前列腺素的內(nèi)源性基礎(chǔ)釋放，因此在其生理功能如保持胃腸道的完整性以及腎血流量中很重要。相比而言，人們相信所述可誘導(dǎo)形式的酶cox-2則主要負(fù)責(zé)前列腺素的病理性作用，在此情況下作為對(duì)炎性因子、激素、生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子等藥劑的反應(yīng)，該酶被快速誘導(dǎo)。所以，相信cox-2的選擇性抑制劑具有與傳統(tǒng)非甾體抗炎藥類(lèi)似的抗炎、解熱和鎮(zhèn)痛性質(zhì)，此外還抑制激素誘導(dǎo)的子宮收縮并且還有潛在的抗癌作用，但有少量的副作用。具體來(lái)說(shuō)，這些cox-2抑制劑被認(rèn)為具有更少的胃腸道毒性潛力、更少的腎副作用的潛力、更少的對(duì)出血時(shí)間的影響以及可能在阿司匹林敏感型哮喘對(duì)象中更少的誘導(dǎo)哮喘的潛力，因此在本發(fā)明中是有用的。

許多選擇性cox-2抑制劑在現(xiàn)有技術(shù)中已知。選擇性cox-2抑制劑的實(shí)例包括例如塞來(lái)考昔伐地考昔和羅非考昔選擇性cox-2抑制劑還包括但不限于以下所述的cox-2抑制劑：美國(guó)專(zhuān)利5,474,995″phenylheterocyclesascox-2inhibitors″；美國(guó)專(zhuān)利5,521,213″diarylbicyclicheterocyclesasinhibitorsofcyclooxygenase-2″；美國(guó)專(zhuān)利5,536,752″phenylheterocyclesascox-2inhibitors″；美國(guó)專(zhuān)利5,550,142″phenylheterocyclesascox-2inhibitors″；美國(guó)專(zhuān)利5,552,422″arylsubstituted5,5fusedaromaticnitrogencompoundsasanti-inflammatoryagents″；美國(guó)專(zhuān)利5,604,253″n-benzylindol-3-ylpropanoicacidderivativesascyclooxygenaseinhibitors″；美國(guó)專(zhuān)利5,604,260″5-methanesulfonamido-l-indanonesasaninhibitorofcyclooxygenase-2″；美國(guó)專(zhuān)利5,639,780n-benzylindol-3-ylbutanoicacidderivativesascyclooxygenaseinhibitors″；美國(guó)專(zhuān)利5,677,318diphenyl-l，2-3-thiadiazolesasanti-inflammatoryagents″；美國(guó)專(zhuān)利5,691,374″diaryl-5-oxygenated-2-(5h)-furanonesascox-2inhibitors″；美國(guó)專(zhuān)利5,698,584″3,4-diaryl-2-hydroxy-2，5-dihydrofuransasprodrugstocox-2inhibitors″；美國(guó)專(zhuān)利5,710,140″phenylheterocyclesascox-2inhibitors″；美國(guó)專(zhuān)利5,733,909″diphenylstilbenesasprodrugstocox-2inhibitors″；美國(guó)專(zhuān)利5,789,413″alkylatedstyrenesasprodrugstocox-2inhibitors″；美國(guó)專(zhuān)利5,817,700″bisarylcyclobutenesderivativesascyclooxygenaseinhibitors″；美國(guó)專(zhuān)利5,849,943″stilbenederivativesusefulascyclooxygenase-2inhibitors″；美國(guó)專(zhuān)利5,861,419″substitutedpyridinesasselectivecyclooxygenase-2inhibitors″；美國(guó)專(zhuān)利5,922,742″pyridinyl-2-cyclopenten-l-onesasselectivecyclooxygenase-2inhibitors″；美國(guó)專(zhuān)利5,925,631″alkylatedstyrenesasprodrugstocox-2inhibitors″；所有這些都共同轉(zhuǎn)讓給merckfrosstcanada，inc.(kirkland，ca)。另一些cox-2抑制劑還描述于美國(guó)專(zhuān)利5,643,933中，其轉(zhuǎn)讓給g.d.searle&co.(skokie，il)，發(fā)明名稱(chēng)為″substitutedsulfonylphenylheterocyclesascyclooxygenase-2and5-lipoxygenaseinhibitors.″

很多以上列出的cox-2抑制劑是選擇性cox-2抑制劑的前藥，并通過(guò)體內(nèi)轉(zhuǎn)化為活性和選擇性cox-2抑制劑來(lái)發(fā)揮作用。從以上列出的cox-2抑制劑前藥形成的活性和選擇性cox-2抑制劑詳細(xì)描述于wo95/00501(其公開(kāi)日為1995年1月5日)，wo95/18799(其公開(kāi)日為1995年7月13日)和美國(guó)專(zhuān)利5,474,995(授權(quán)日1995年12月12日)。基于美國(guó)專(zhuān)利5,543,297(標(biāo)題為humancyclooxygenase-2cdnaandassaysforevaluatingcyclooxygenase-2activity)的教導(dǎo)，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將能確定一種藥劑是選擇性cox-2抑制劑還是cox-2抑制劑的前體，并因此其構(gòu)成本發(fā)明的一部分。

在一些實(shí)施方案中，所述方法還包括施用用于治療類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的第二藥劑。用于治療類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥劑的實(shí)例包括但不限于羥基氯喹(plaquenil)、氯喹(aralen)、氨甲蝶呤、柳氮磺胺吡啶(azulfidine)、來(lái)氟米特(arava)、硫唑嘌呤(依木蘭imuran)、青霉胺(cuprimine或depen)、金鹽(ridaura或aurolate)、米諾環(huán)素(dynacin或米諾星)、環(huán)孢菌素(neoral或sandimmune)、環(huán)磷酰胺(cytoxan或neosar)、依那西普(enbrel)、英夫利昔單抗(remicade)、阿那白滯素(kineret)或阿達(dá)木單抗(humira)。

根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供一種治療對(duì)象以減少炎性疾病(例如在一些優(yōu)選實(shí)施方案中的類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)之風(fēng)險(xiǎn)的方法。所述方法包括基于已知其具有低于正常水平的凝溶膠蛋白來(lái)選擇對(duì)象以及向該對(duì)象施用有效量的凝溶膠蛋白和/或第二藥劑以降低該對(duì)象發(fā)生炎性疾病(例如在一些優(yōu)選實(shí)施方案中的類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)的風(fēng)險(xiǎn)。

根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供一種治療對(duì)象以減少炎性疾病(例如在一些優(yōu)選實(shí)施方案中的類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)之風(fēng)險(xiǎn)的方法。所述方法包括基于已知其具有低于正常水平的凝溶膠蛋白來(lái)選擇對(duì)象以及向該對(duì)象施用有效量的凝溶膠蛋白和/或第二藥劑以將該對(duì)象中的凝溶膠蛋白水平提高到高于預(yù)定值。

在一些實(shí)施方案中，所述治療方法包括向所述對(duì)象施用用于治療所述炎性疾病(例如在一些優(yōu)選實(shí)施方案中為類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)的第二藥劑。用于治療所述炎性疾病和類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥劑的實(shí)例如上列出。

根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供一種治療具有低于正常水平的凝溶膠蛋白的對(duì)象的方法。所述方法包括使用用于治療炎性疾病(例如在一些優(yōu)選實(shí)施方案中的類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)或降低其風(fēng)險(xiǎn)的第一治療法來(lái)治療所述對(duì)象。獲得所述對(duì)象中的凝溶膠蛋白水平。將所述凝溶膠蛋白水平與預(yù)定值進(jìn)行比較，該預(yù)定值對(duì)應(yīng)于凝溶膠蛋白的預(yù)定水平(例如在表面上健康的對(duì)照群體中)。如果未達(dá)到該預(yù)定的凝溶膠蛋白水平，使用用于治療炎性疾病(例如在一些優(yōu)選實(shí)施方案中的類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)或降低其風(fēng)險(xiǎn)的第二藥劑來(lái)治療所述對(duì)象，直至達(dá)到該預(yù)定的凝溶膠蛋白水平。

″低于正常水平的凝溶膠蛋白″是比給定對(duì)象群體中所測(cè)量平均水平至少小10％的凝溶膠蛋白水平。所述平均凝溶膠蛋白水平可以依賴(lài)于具體的對(duì)象群體。例如，表面上健康的群體將具有與已有在先病癥的對(duì)象相比不同的“正?！狈秶哪苣z蛋白。在一些實(shí)施方案中，所述凝溶膠蛋白水平比給定對(duì)象群體中所測(cè)量平均水平至少小10％。在另一些實(shí)施方案中，所述凝溶膠蛋白水平比給定對(duì)象群體中所測(cè)量平均水平至少小20％。在再一些實(shí)施方案中，所述凝溶膠蛋白水平比給定對(duì)象群體中所測(cè)量平均水平至少小30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％、99％或100％。在其中一個(gè)實(shí)施方案中，所述凝溶膠蛋白水平低于約250mg/l血漿。在另一些重要的實(shí)施方案中，所述凝溶膠蛋白低于約2.4μm/l(微摩爾/升)血漿。

在一些實(shí)施方案中，所述對(duì)象在其它方面沒(méi)有需要用該藥劑治療的適應(yīng)癥。當(dāng)所述藥劑是凝溶膠蛋白時(shí)，在其它方面沒(méi)有需要用凝溶膠蛋白治療之適應(yīng)癥的對(duì)象是沒(méi)有需要用凝溶膠蛋白治療之征兆或癥狀的對(duì)象。凝溶膠蛋白適用于治療膿毒病和感染。凝溶膠蛋白也適用于治療肌動(dòng)蛋白相關(guān)病癥，比如成人呼吸窘迫綜合征(ards)、爆發(fā)性肝壞死、急性腎功能衰竭、肌肉損傷、以bun和/或肌酸酐水平升高為特征的病癥。肌動(dòng)蛋白相關(guān)病癥對(duì)本領(lǐng)域普通技術(shù)人員是已知的。

在另一些實(shí)施方案中，所述對(duì)象是表面上健康的對(duì)象。如本文所用，″表面上健康的對(duì)象″是沒(méi)有疾病征兆和/或癥狀的對(duì)象。

根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供一種評(píng)價(jià)用于治療對(duì)象中炎性疾病(例如在一些優(yōu)選實(shí)施方案中的類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)或降低其風(fēng)險(xiǎn)的治療法之功效的方法。所述方法包括獲得對(duì)象中的凝溶膠蛋白水平，其中所述對(duì)象接受用治療炎性疾病(例如在一些優(yōu)選實(shí)施方案中的類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)或降低其風(fēng)險(xiǎn)的藥劑的治療法。將所獲得的凝溶膠蛋白水平與預(yù)定值進(jìn)行比較，該預(yù)定值對(duì)應(yīng)于凝溶膠蛋白的預(yù)定水平(例如在表面上健康的對(duì)照群體中)。確定凝溶膠蛋白水平是否高于預(yù)定水平用于指示所述治療法是否有療效。在一些實(shí)施方案中，重復(fù)獲得凝溶膠蛋白水平，以監(jiān)測(cè)在一段時(shí)間中所述對(duì)象的凝溶膠蛋白水平。

所述治療可以用凝溶膠蛋白，阿氯芬酸(alclofenac)，二丙酸阿氯米松(alclometasonedipropionate)，醋苯阿爾孕酮(algestoneacetonide)，阿爾法淀粉酶，阿西納發(fā)(amcinafal)，安西非特(amcinafide)，氨芬酸鈉(amfenacsodium)，鹽酸氨普立糖(amiprilosehydrochloride)，阿那白滯素(anakinra)，艾利洛克(anirolac)，阿尼扎芬(anitrazafen)，阿扎丙酮(apazone)，巴柳氮二鈉(balsalazidedisodium)，芐達(dá)酸(bendazac)，苯噁洛芬(benoxaprofen)，鹽酸芐達(dá)明(benzydaminehydrochloride)，菠蘿蛋白酶(bromelains)，溴四拉莫(broperamole)，布地縮松(budesonide)，卡洛芬(carprofen)，環(huán)洛芬(cicloprofen)，西諾戊宗(cintazone)，氯噻托酸(cliprofen)，丙酸氯倍他索(clobetasolpropionate)，丁酸氯倍氟松(clobetasonebutyrate)，氯苯吡乙酸(clopirac)，丙酸氯替卡松(cloticasonepropionate)，醋酸可美薩松(cormethasoneacetate)，去氧可的松(cortodoxone)，環(huán)加氧酶-2(cox-2)抑制劑，去氟可特(deflazacort)，待索利德(desonide)，去氧米松(desoximetasone)，二丙酸地塞米松(dexamethasonedipropionate)，雙氯芬酸鉀，雙氯芬酸鈉，雙醋二氟松(diflorasonediacetate)，二氟米酮鈉(diflumidonesodium)，雙氟尼酸(diflunisal)，雙氟潑龍酯(difluprednate)，雙酞嗪酮(diftalone)，二甲基亞砜，丙縮氫炎松(drocinonide)，因甲羥松(endrysone)，恩莫單抗(enlimomab)，艾洛利康鈉(enolicamsodium)，甲氧嘧唑(epirizole)，依托度酸(etodolac)，依托芬那酯(etofenamate)，非必拉克(felbinac)，非那莫(fenamole)，芬布芬(fenbufen)，二氯苯氧苯乙酸(fenclofenac)，氯環(huán)苯乙酸(fenclorac)，芬度柳(fendosal)，苯吡噁二酮(fenpipalone)，芬噻唑酸(fentiazac)，氟苯哌酮(flazalone)，氟扎可松(fluazacort)，氟芬那酸(flufenamicacid)，氟咪唑(flumizole)，醋酸氟尼縮松(flunisolideacetate)，氟尼克辛(flunixin)，氟芐煙酸(flunixinmeglumine)，氟可丁酯(fluocortinbutyl)，氟氫縮松醋酸酯(fluorometholoneacetate)，苯氟喹酮(fluquazone)，氟比洛芬(flurbiprofen)，氟瑞托芬(fluretofen)，丙酸氟地松(fluticasonepropionate)，呋拉布洛芬(furaprofen)，丁酸酰氧芴(furobufen)，哈西奈德(halcinonide)，丙酸鹵倍他索(halobetasolpropionate)，醋酸鹵潑尼松(halopredoneacetate)，布芬酸(ibufenac)，布洛芬(ibuprofen)，布洛芬鋁，皮考布洛芬，伊洛達(dá)普(ilonidap)，吲哚美辛(indomethacin)，吲哚美辛鈉，吲哚布洛芬(indoprofen)，吲哚克索(indoxole)，吲四唑(intrazole)，醋酸異氟潑尼松(isoflupredoneacetate)，伊索克酸(isoxepac)，伊索昔康(isoxicam)，酮基布洛芬(ketoprofen)，鹽酸羅非咪唑(lofemizolehydrochloride)，氯諾昔康(lornoxicam)，依碳氯替潑諾(loteprednoletabonate)，甲氯芬那酸鈉(meclofenamatesodium)，甲氯芬那酸，甲氯松二丁酯(meclorisonedibutyrate)，甲芬那酸(mefenamicacid)，美沙拉秦(mesalamine)，甲塞克那唑(meseclazone)，磺庚甲潑尼松龍(methylprednisolonesuleptanate)，莫尼氟酯(morniflumate)，萘丁美酮(nabumetone)，萘普生(naproxen)，萘普生鈉，萘普醇，尼馬宗(nimazone)，奧沙拉秦鈉(olsalazinesodium)，奧古蛋白(orgotein)，歐哌洛星(orpanoxin)，奧沙普秦(oxaprozin)，氧苯丁唑(oxyphenbutazone)，鹽酸雷尼托林(paranylinehydrochloride)，戊聚糖多硫酸鈉(pentosanpolysulfatesodium)，保泰松甘油酸鈉(phenbutazonesodiumglycerate)，哌非尼酮(pirfenidone)，吡羅昔康(piroxicam)，肉桂酸吡羅昔康，吡羅昔康乙醇胺(piroxicamolamine)，吡氯布洛芬(pirprofen)，潑那扎特(prednazate)，叔丁非隆(prifelone)，丙哚酸(prodolicacid)，丙喹酮(proquazone)，普咯沙唑(proxazole)，枸櫞酸普咯沙唑，利美索龍(rimexolone)，諾馬及特(romazarit)，柳膽立司(salcolex)，沙那西定(salnacedin)，水楊酰水楊酸(salsalate)，血根氯銨(sanguinariumchloride)，氯唑噁酮(seclazone)，絲炎痛(sermetacin)，噻氧噻嗪(sudoxicam)，舒林酸(sulindac)，舒洛芬(suprofen)，他美達(dá)辛(talmetacin)，他尼氟酯(talniflumate)，塔羅賽特(talosalate)，泰布芬隆(tebufelone)，替尼達(dá)普(tenidap)，替尼達(dá)普鈉，替諾昔康(tenoxicam)，替昔康(tesicam)，芐叉異喹酮(tesimide)，四氫達(dá)明(tetrydamine)，噻匹萊克(tiopinac)，特戊酸硫氫可的松(tixocortolpivalate)，托美汀(tolmetin)，托美汀鈉，三氯氟松(triclonide)，三氟米酯(triflumidate)，疊氮吲酸(zidometacin)，佐美酸鈉(zomepiracsodium)，羥基氯喹(plaquenil)、氯喹(aralen)、氨甲蝶呤、柳氮磺胺吡啶(azulfidine)、來(lái)氟米特(arava)、硫唑嘌呤(依木蘭)、青霉胺(cuprimine或depen)、金鹽(ridaura或aurolate)、米諾環(huán)素(dynacin或minocin)、環(huán)孢菌素(neoral或sandimmune)、環(huán)磷酰胺(cytoxan或neosar)、依那西普(enbrel)、英夫利昔單抗(remicade)、阿那白滯素(kineret)或阿達(dá)木單抗(humira)。

根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供一種用于決定對(duì)象的治療過(guò)程的方法。該方法包括獲得對(duì)象中的凝溶膠蛋白水平，其中所述對(duì)象接受治療炎性疾病(例如在一些優(yōu)選實(shí)施方案中的類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)或降低其風(fēng)險(xiǎn)的治療法。將所述凝溶膠蛋白水平與預(yù)定值進(jìn)行比較，該預(yù)定值對(duì)應(yīng)于凝溶膠蛋白的某一水平(例如在表面上健康的對(duì)照群體中)。確定所獲得的凝溶膠蛋白水平是等于或高于還是等于或低于預(yù)定水平，并基于這種確定來(lái)決定治療過(guò)程。在一些實(shí)施方案中，重復(fù)獲得凝溶膠蛋白水平，以監(jiān)測(cè)在一段時(shí)間中所述對(duì)象的凝溶膠蛋白水平。

除非另外指出，下列實(shí)施方案應(yīng)用于本文所述發(fā)明的各個(gè)方面。

所述炎性疾病可以是關(guān)節(jié)炎、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、哮喘、炎性腸病(克羅恩氏病或潰瘍性結(jié)腸炎)、慢性阻塞性肺病(copd)、過(guò)敏性鼻炎、血管炎(結(jié)節(jié)性多動(dòng)脈炎、顳動(dòng)脈炎、韋格納氏肉芽腫、高安氏動(dòng)脈炎、白塞氏綜合征)、炎性神經(jīng)病、牛皮癬、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(sle)、慢性甲狀腺炎、橋本氏甲狀腺炎、阿狄森氏病、風(fēng)濕性多肌痛、干燥綜合征(sjogren’ssyndrome)或churg-strauss綜合征。在一些重要的實(shí)施方案腫，該炎性疾病是類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。

所述凝溶膠蛋白水平可以是所述對(duì)象體液中的水平。體液的實(shí)例包括但不限于血、血漿、血清、尿、滑液、或肺泡液。

所述凝溶膠蛋白水平可以是所述對(duì)象身體組織中的水平。所述身體組織可以是關(guān)節(jié)、胃腸道、甲狀腺、腎上腺、血管、肺、腎、心臟、皮膚、眼、腦、胰臟、肝臟、神經(jīng)或肌肉組織。在一些實(shí)施方案中，所述對(duì)象是表面上健康的對(duì)象。

在一些實(shí)施方案中，該預(yù)定值是250mg/l血漿或更低。在一些實(shí)施方案中，該預(yù)定的凝溶膠蛋白值大約是240mg/l、230mg/l、220mg/l、210mg/l、200mg/l、190mg/l、180mg/l、170mg/l、160mg/l、150mg/l、140mg/l、130mg/l、120mg/l、110mg/l、100mg/l、90mg/l、80mg/l、70mg/l、60mg/l、50mg/l、40mg/l、30mg/l、20mg/l或10mg/l血漿或更低。

在另一些實(shí)施方案中，該預(yù)定值是2.4μm/l血漿或更低。在一些實(shí)施方案中，所述預(yù)定的凝溶膠蛋白值大約是2.3μm/l、2.2μm/l、2.1μm/l、2.0μm/l、1.9μm/l、1.8μm/l、1.7μm/l、1.6μm/l、1.5μm/l、1.4μm/l、1.3μm/l、1.2μm/l、1.1μm/l、1.0μm/l、0.9μm/l、0.8μm/l、0.7μm/l、0.6μm/l、0.5μm/l、0.4μm/l、0.3μm/l、0.2μm/l血漿或更低。

本發(fā)明的每一項(xiàng)限定可以包括本發(fā)明的多種實(shí)施方案。因此，可以想到涉及任一要素或要素組合的本發(fā)明的每一項(xiàng)限定可以包括在本發(fā)明的每個(gè)方面中。本發(fā)明還能夠有其他的實(shí)施方案而且可以各種方式來(lái)實(shí)施或?qū)崿F(xiàn)。此外，本文中使用的措辭和術(shù)語(yǔ)是用于描述目的，而不應(yīng)該認(rèn)為是限定。本文中使用“包括”、“包含”、或者“有”、“含有”及其變型意思是涵蓋其后列出的項(xiàng)目及其等同物以及其它項(xiàng)目。

本發(fā)明的這些和其他方面以及各種優(yōu)點(diǎn)和效用在參考發(fā)明詳述時(shí)將是顯而易見(jiàn)的。本發(fā)明的每個(gè)方面可以包括可從中理解的各種實(shí)施方案。

本申請(qǐng)中列出的所有文件以其整體通過(guò)引用并入本文。

附圖說(shuō)明

圖1的直方圖顯示，與健康對(duì)照相比，類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(ra)患者中血漿凝溶膠蛋白(pgsn)濃度降低，并且在ra患者的滑液中比血液中更低。

圖2是使用對(duì)凝溶膠蛋白血漿同工型有特異性之抗體的免疫印跡，其顯示ra患者滑液(sf)中存在的凝溶膠蛋白主要由血漿同工型構(gòu)成。

圖3是一組直方圖，其顯示在膿毒性關(guān)節(jié)炎小鼠模型中血漿凝溶膠蛋白(pgsn)濃度降低：a)金黃色葡萄球菌(staphylococcusaureus(s.aureus))誘發(fā)的關(guān)節(jié)炎，b)由金黃色葡萄球菌(s.aureus)誘發(fā)的膿毒癥，和c)無(wú)乳鏈球菌(streptococcusagalactiae)誘發(fā)的膿毒性關(guān)節(jié)炎。所述降低發(fā)生在測(cè)試的最早時(shí)間點(diǎn)(接種后兩天)。

可以理解，實(shí)施本發(fā)明并不需要所述附圖。

具體實(shí)施方式

本發(fā)明基于以下令人驚奇的發(fā)現(xiàn)：在來(lái)自具有炎性疾病類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(ra)的人對(duì)象的血樣中血漿凝溶膠蛋白水平有所降低。推測(cè)血漿凝溶膠蛋白水平是響應(yīng)于由導(dǎo)致ra的藥劑所引起的初步(未知)損傷而降低的。所以，外周血凝溶膠蛋白置換(perpheralgelsolinreplacement)可以改善由各種炎癥細(xì)胞介導(dǎo)的繼發(fā)性損傷。相信利用凝溶膠蛋白消耗模式來(lái)預(yù)測(cè)疾病以及使用凝溶膠蛋白治療疾病對(duì)于炎性疾病通常是真實(shí)的。

因此，在一些方面，本發(fā)明包括向?qū)ο笫┯媚苣z蛋白以治療所述對(duì)象中的炎性疾病。術(shù)語(yǔ)“處理”或“治療”意思包括預(yù)防、改善、防止或根治疾病。

如本文所用，術(shù)語(yǔ)“對(duì)象”意思是指可能需要治療的任何哺乳動(dòng)物。對(duì)象包括但不限于：人、非人靈長(zhǎng)類(lèi)、貓、狗、綿羊、豬、馬、牛、嚙齒動(dòng)物比如小鼠、倉(cāng)鼠和大鼠。優(yōu)選的對(duì)象是人對(duì)象。

如本文所用，術(shù)語(yǔ)“凝溶膠蛋白”包括野生型凝溶膠蛋白(genbank登記號(hào)：x04412)、凝溶膠蛋白的同工型、類(lèi)似物、變體、片段或功能衍生物。

不同于其他的哺乳動(dòng)物蛋白質(zhì)，凝溶膠蛋白(gsn)兼?zhèn)浒麧{型(cgsn)和分泌或外泌性同工型，也稱(chēng)為血漿凝溶膠蛋白(pgsn)，它們來(lái)源于單個(gè)基因的信使rna的可供選擇性剪接(sunetal.j.biol.chem.274：33179-33182(1999))。如本文所用，凝溶膠蛋白同工型包括在其氨基酸序列中有一些小差異的凝溶膠蛋白變型，通常是剪接變體或是一些翻譯后修飾的結(jié)果。

凝溶膠蛋白包括天然的以及合成和重組的凝溶膠蛋白和凝溶膠蛋白類(lèi)似物。凝溶膠蛋白是一種高豐度的分泌蛋白質(zhì)(yin，h.l.，kwiatkowski，d.j.，mole，j.e.&cole，f.s.(1984)jbiolchem259，5271-6)。外泌型凝溶膠蛋白pgsn具有額外的25個(gè)氨基酸，其來(lái)源于單個(gè)基因的選擇性剪接(kwiatkowski，d.j.，stossel，t.p.，orkin，s.h.，mole，j.e.，colten，h.r.&yin，h.l.(1986)nature323，455-8)。重組的人凝溶膠蛋白(rhgsn)(biogenidec，inc.，cambridge，ma)在大腸桿菌中生產(chǎn)；盡管它與天然蛋白有相同的一級(jí)結(jié)構(gòu)，在標(biāo)準(zhǔn)純化條件下，它與天然的人血漿凝溶膠蛋白區(qū)別在于天然蛋白中存在的二硫鍵。因此，所述重組蛋白在純化后被適當(dāng)?shù)匮趸?，并且其結(jié)構(gòu)和功能無(wú)法與人血漿凝溶膠蛋白相區(qū)分(wenet.al，biochemistry35：9700-9709(1996))。在本發(fā)明的一些重要的治療方面和實(shí)施方案中，優(yōu)選使用rhgsn。在本發(fā)明的一些重要的診斷方面和實(shí)施方案中，優(yōu)選使用pgsn。

“凝溶膠蛋白類(lèi)似物”表示在功能上與天然凝溶膠蛋白或其片段實(shí)質(zhì)上相似的化合物。凝溶膠蛋白類(lèi)似物包括與凝溶膠蛋白序列實(shí)質(zhì)上相似的生物活性氨基酸序列，并且其可以具有取代、缺失、延長(zhǎng)、替換或其它修飾的序列，其中所述修飾序列具有與凝溶膠蛋白實(shí)質(zhì)上相似的生物活性。例如，凝溶膠蛋白的一種類(lèi)似物不具有與凝溶膠蛋白相同的氨基酸序列但與凝溶膠蛋白足夠同源以致于保留了凝溶膠蛋白的生物活性。例如，生物活性可以通過(guò)測(cè)定凝溶膠蛋白類(lèi)似物的性質(zhì)來(lái)確定和/或通過(guò)測(cè)定凝溶膠蛋白類(lèi)似物治療或預(yù)防類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的能力來(lái)確定。凝溶膠蛋白生物活性測(cè)定的一個(gè)實(shí)例是凝溶膠蛋白刺激肌動(dòng)蛋白核化的能力。凝溶膠蛋白生物活性測(cè)定描述于實(shí)施例中并且是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的。

“片段”意思包括提供維持凝溶膠蛋白生物活性之凝溶膠蛋白區(qū)段的凝溶膠蛋白分子的任何部分；該術(shù)語(yǔ)意思包括由任何來(lái)源(例如來(lái)自天然存在的肽序列、合成的或化學(xué)合成的肽序列以及遺傳工程改造的肽序列)組成的凝溶膠蛋白片段。

凝溶膠蛋白的“變體”意思是指在結(jié)構(gòu)和生物活性上與天然凝溶膠蛋白或其片段實(shí)質(zhì)上相似的化合物。術(shù)語(yǔ)變體包括凝溶膠蛋白家族的蛋白質(zhì)。所述凝溶膠蛋白家族的蛋白質(zhì)是一組肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白，它們共有采取相似折疊的約15kda同源結(jié)構(gòu)域的重復(fù)序列。凝溶膠蛋白家族蛋白質(zhì)的實(shí)例包括但不限于絨毛蛋白樣蛋白(advillin)、絨毛蛋白(villin)、capg、非飛行蛋白質(zhì)(flightlessproteins)、截?cái)嗟鞍?fragmin)、肌割蛋白、微絲肌割蛋白(adseverin)、原絨毛蛋白(protovillin)以及超絨毛蛋白(supervillin)。

凝溶膠蛋白的“功能衍生物”是具有與凝溶膠蛋白生物活性實(shí)質(zhì)上相似之生物活性的衍生物?！皩?shí)質(zhì)上相似”意思是指活性有定量的差異但定性上相同。例如，凝溶膠蛋白的功能衍生物可以包含與凝溶膠蛋白相同的氨基酸骨架但還含有其它修飾比如翻譯后修飾例如結(jié)合的磷脂或共價(jià)連接的碳水化合物，這取決于這些修飾對(duì)于實(shí)施診斷測(cè)定或治療性處理的必要性。如本文所用，該術(shù)語(yǔ)意思還包括凝溶膠蛋白的化學(xué)衍生物。這些衍生物可以提高凝溶膠蛋白的溶解性、吸收、生物半衰期等。所述衍生物還可以降低凝溶膠蛋白的毒性、或者消除或減弱凝溶膠蛋白的任何不受歡迎的副作用等。能夠介導(dǎo)這種作用的化學(xué)部分已經(jīng)公開(kāi)于remington′spharmaceuticalsciences(1980)中。將這些部分偶聯(lián)到諸如凝溶膠蛋白等分子的方法是本領(lǐng)域公知的。術(shù)語(yǔ)“功能衍生物”意思包括凝溶膠蛋白的“片段”、“變體”、“類(lèi)似物”或“化學(xué)衍生物″。

根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供治療對(duì)象中炎性疾病(例如在一些優(yōu)選實(shí)施方案中的類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)的方法。所述對(duì)象已知具有或懷疑具有炎性疾病或有發(fā)生炎性疾病的風(fēng)險(xiǎn)。所述凝溶膠蛋白以有效治療對(duì)象中所述炎性疾病的量來(lái)施用。

對(duì)本發(fā)明治療方法的反應(yīng)例如可以通過(guò)確定所述治療的生理效應(yīng)來(lái)測(cè)量，比如在施用所述治療后癥狀的降低或缺失。

根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供一種用于監(jiān)測(cè)對(duì)象中治療的方法。該方法包括獲得對(duì)象中的凝溶膠蛋白水平，其中所述對(duì)象接受了治療炎性疾病(例如在一些優(yōu)選實(shí)施方案中的類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)的治療法。將所述凝溶膠蛋白水平與預(yù)定值進(jìn)行比較，該預(yù)定值對(duì)應(yīng)于凝溶膠蛋白的對(duì)照水平(例如在表面上健康的群體中)。確定所述凝溶膠蛋白水平是否處于或低于預(yù)定水平指示了所述對(duì)象是將從用相同治療來(lái)繼續(xù)治療中受益還是將受益于治療改變。在一些實(shí)施方案中，重復(fù)獲得凝溶膠蛋白水平，以監(jiān)測(cè)在一段時(shí)間中所述對(duì)象的凝溶膠蛋白水平。在一些實(shí)施方案中，所述對(duì)象可以已接受所述治療至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12周或更長(zhǎng)時(shí)間。在一些實(shí)施方案中，所述對(duì)象可以已接受所述治療至少3、4、5、6個(gè)月或更長(zhǎng)時(shí)間。

凝溶膠蛋白治療的變化是指凝溶膠蛋白劑量的增加、從一種凝溶膠蛋白轉(zhuǎn)換為另一種凝溶膠蛋白、從凝溶膠蛋白轉(zhuǎn)換為另一種藥劑、向所述凝溶膠蛋白治療方案中添加另一種藥劑、或者其組合。

根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供一種評(píng)價(jià)用于治療對(duì)象中炎性疾病(例如在一些優(yōu)選實(shí)施方案中的類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)或降低其風(fēng)險(xiǎn)的療法之功效的方法。該方法包括獲得對(duì)象中的凝溶膠蛋白水平，其中所述對(duì)象接受了治療所述炎性疾病的治療法。將所述凝溶膠蛋白水平與預(yù)定值進(jìn)行比較，該預(yù)定值對(duì)應(yīng)于凝溶膠蛋白的對(duì)照水平(例如在表面上健康的群體中)。確定到凝溶膠蛋白水平處于或高于預(yù)定水平指示了所述治療有療效。在一些實(shí)施方案中，所述對(duì)象可以已接受所述治療至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12周或更長(zhǎng)時(shí)間。在一些實(shí)施方案中，所述對(duì)象可以已接受所述治療至少3、4、5、6個(gè)月或更長(zhǎng)時(shí)間。

本發(fā)明的一個(gè)方面涉及測(cè)量凝溶膠蛋白來(lái)指導(dǎo)治療以改善對(duì)象中的治療結(jié)果。凝溶膠蛋白的治療中水平(on-therapylevels)對(duì)于對(duì)炎性疾病(例如在一些優(yōu)選實(shí)施方案中的類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)治療的反應(yīng)具有預(yù)測(cè)價(jià)值。凝溶膠蛋白的所述治療中水平是對(duì)疾病結(jié)果的現(xiàn)有預(yù)測(cè)方案的補(bǔ)充。

將受益于本發(fā)明此方面的對(duì)象是正接受治療以治療或預(yù)防炎性疾病例如類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的對(duì)象(即“治療中”對(duì)象)。治療中對(duì)象是已經(jīng)診斷并處于用治療炎性疾病比如類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的療法進(jìn)行治療過(guò)程的對(duì)象。所述治療法可以是本文提到的任何治療劑。所述治療法還可以是非藥物治療。在一些重要的實(shí)施方案中，所述治療法是提高凝溶膠蛋白水平的治療法。在一個(gè)特別重要的實(shí)施方案，所述治療法是用凝溶膠蛋白進(jìn)行的治療。優(yōu)選的對(duì)象是人對(duì)象。最可能受益于本發(fā)明的對(duì)象是處于治療中并且其凝溶膠蛋白水平等于或低于約250mg/l(或2.4μm/l)血漿的人對(duì)象。

在一些實(shí)施方案中，所述對(duì)象已經(jīng)有所述疾病。在一些實(shí)施方案中，所述對(duì)象可能患所述疾病的風(fēng)險(xiǎn)增加。

疾病風(fēng)險(xiǎn)因素對(duì)本領(lǐng)域普通技術(shù)人員是已知的。例如，類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的風(fēng)險(xiǎn)因素：年齡(在25和45歲之間)、女性、白種人或美洲土著人、肥胖以及陽(yáng)性家族史。類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的風(fēng)險(xiǎn)程度取決于很多因素以及對(duì)象中所述風(fēng)險(xiǎn)因素的嚴(yán)重性或程度。有風(fēng)險(xiǎn)表和預(yù)測(cè)算法可供用于基于風(fēng)險(xiǎn)因素的存在性和嚴(yán)重性來(lái)評(píng)定對(duì)象中炎性疾病比如類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的風(fēng)險(xiǎn)。在一些實(shí)施方案中，患炎性疾病的風(fēng)險(xiǎn)增加的對(duì)象可以是表面上健康的對(duì)象。表面上健康的對(duì)象是沒(méi)有疾病征兆或癥狀的對(duì)象。

評(píng)定對(duì)象中炎性疾病風(fēng)險(xiǎn)的其他方法是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的。

本發(fā)明的優(yōu)選治療是凝溶膠蛋白。凝溶膠蛋白可以單獨(dú)施用、在藥物組合物中施用或聯(lián)合其它治療方案來(lái)施用。凝溶膠蛋白和任選地其它治療劑可以同時(shí)施用或依次施用。當(dāng)同時(shí)施用所述其它治療劑時(shí)，它們可以在相同的制劑中施用，或者在分開(kāi)的制劑中但同時(shí)施用。當(dāng)從時(shí)間上分開(kāi)施用所述其它治療劑和凝溶膠蛋白時(shí)，所述其它治療劑可以彼此互相并且與凝溶膠蛋白依次施用。施用這些化合物之間的時(shí)間分開(kāi)可以是以分鐘計(jì)或者可以更長(zhǎng)。

在實(shí)施本發(fā)明的某些方法中，需要獲得對(duì)象中的凝溶膠蛋白水平。然后將該水平與預(yù)定值進(jìn)行比較，其中與所述預(yù)定值相比的所述凝溶膠蛋白水平用于指示所述對(duì)象將受益于繼續(xù)治療的可能性。然后可以基于可能從治療改變中將獲得的凈利益來(lái)表征所述對(duì)象。

可以通過(guò)現(xiàn)有技術(shù)已知的任何方法來(lái)獲得所述對(duì)象的凝溶膠蛋白水平。典型地，通過(guò)測(cè)量體液(例如血、血清、血漿、淋巴、唾液、尿、滑液等)中的凝溶膠蛋白水平來(lái)確定該水平?？梢酝ㄟ^(guò)elisa或其它免疫測(cè)定或確定凝溶膠蛋白存在的其它常規(guī)技術(shù)來(lái)測(cè)定該水平。通常的方法可以包括將對(duì)象的體液樣品送到商業(yè)測(cè)量實(shí)驗(yàn)室。在實(shí)施例中描述了測(cè)量凝溶膠蛋白的方法。

所述發(fā)明還包括將所述對(duì)象的凝溶膠蛋白水平與預(yù)定值進(jìn)行比較。所述預(yù)定值可以采用各種形式。它可以是單截?cái)嘀?，比如中位值或平均值。它可以基于比較群體來(lái)建立，例如，其中一個(gè)確定組中的風(fēng)險(xiǎn)是另一確定組中風(fēng)險(xiǎn)的2倍。它可以是一個(gè)范圍，例如，其中將所測(cè)試群體平均(或不平均)分成群，比如低風(fēng)險(xiǎn)群、中風(fēng)險(xiǎn)群和高風(fēng)險(xiǎn)群；或者四等分，最低的四分之一是具有最高風(fēng)險(xiǎn)的對(duì)象而最高四分之一是具有最低風(fēng)險(xiǎn)的對(duì)象；或者三等分，最低的三分之一是具有最高風(fēng)險(xiǎn)的對(duì)象而最高三分之一是具有最低風(fēng)險(xiǎn)的對(duì)象。所述預(yù)定值可以是由以下事實(shí)預(yù)先確定的截?cái)嘀担号c比較組相比，在發(fā)生炎性疾病(例如在一些優(yōu)選實(shí)施方案中的類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)的風(fēng)險(xiǎn)方面，具有不小于所述截?cái)嘀档哪苣z蛋白水平的組表現(xiàn)出統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著的增加。在一些實(shí)施方案中，所述比較組是具有較低凝溶膠蛋白水平的組。

所述預(yù)定值可以依賴(lài)于所選的具體對(duì)象群體。例如，表面上健康的群體可以具有與具有其它病癥的對(duì)象群體相比不同的“正常”凝溶膠蛋白范圍。因此，選擇的所述預(yù)定值可以考慮對(duì)象所屬的類(lèi)群。可以由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員通過(guò)不超過(guò)常規(guī)試驗(yàn)來(lái)選擇適當(dāng)?shù)姆秶皖?lèi)群。優(yōu)選的體液是血。在一些實(shí)施方案中，凝溶膠蛋白的所述預(yù)定值是約250mg/l血漿或更低。在一些實(shí)施方案中，該預(yù)定的凝溶膠蛋白值大約是240mg/、230mg/l、220mg/l、210mg/l、200mg/l、190mg/l、180mg/l、170mg/l、160mg/l、150mg/l、140mg/l、130mg/l、120mg/l、110mg/l、100mg/l、90mg/l、80mg/l、70mg/l、60mg/l、50mg/l、40mg/l、30mg/l、20mg/l或10mg/l血漿或更低。

在一些實(shí)施方案中，凝溶膠蛋白的所述預(yù)定值是約2.4μm/l血漿或更低。在一些實(shí)施方案中，所述預(yù)定的凝溶膠蛋白值大約是2.3μm/l、2.2μm/l、2.1μm/l、2.0μm/l、1.9μm/l、1.8μm/l、1.7μm/l、1.6μm/l、1.5μm/l、1.4μm/l、1.3μm/l、1.2μm/l、1.1μm/l、1.0μm/l、0.9μm/l、0.8μm/l、0.7μm/l、0.6μm/l、0.5μm/l、0.4μm/l、0.3μm/l、0.2μm/l血漿或更低。

凝溶膠蛋白的重要預(yù)定值是健康對(duì)象群體(即沒(méi)有疾病征兆和癥狀的對(duì)象)的平均值。當(dāng)然，所述預(yù)定值將取決于對(duì)象所屬對(duì)象群體的特征。在確定風(fēng)險(xiǎn)特征時(shí)，可以建立許多的預(yù)定值。

現(xiàn)在，有商業(yè)來(lái)源生產(chǎn)供測(cè)定凝溶膠蛋白的試劑。例如，這些包括cytoskeleton(denver，co)，sigma(st.louis，mo)和calbiochem(sandiego，ca)。

在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明還包括測(cè)量所述凝溶膠蛋白水平以及炎性疾病(例如在一些優(yōu)選實(shí)施方案中的類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)的第二種標(biāo)志物的水平。炎性疾病標(biāo)志物是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的，其實(shí)例如上所述。例如，類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎標(biāo)志物的實(shí)例包括抗環(huán)狀瓜氨酸肽(抗-ccp)抗體、hla-dr4和c反應(yīng)蛋白(crp)。獲得所述對(duì)象中的凝溶膠蛋白水平。將所述凝溶膠蛋白水平與預(yù)定值相比較以建立第一風(fēng)險(xiǎn)值。還獲得所述對(duì)象中第二種炎性疾病標(biāo)志物的水平。將所述對(duì)象中所述第二種炎性疾病標(biāo)志物的水平與第二預(yù)定值進(jìn)行比較以建立第二風(fēng)險(xiǎn)值。然后基于第一風(fēng)險(xiǎn)值和第二風(fēng)險(xiǎn)值的組合來(lái)表征所述對(duì)象發(fā)生炎性疾病(例如在一些優(yōu)選實(shí)施方案中的類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)的風(fēng)險(xiǎn)特征，其中第一風(fēng)險(xiǎn)值和第二風(fēng)險(xiǎn)值的組合建立了不同于所述第一和第二風(fēng)險(xiǎn)值的第三風(fēng)險(xiǎn)值。在一些實(shí)施方案中，所述第三風(fēng)險(xiǎn)值大于第一和第二風(fēng)險(xiǎn)值中任何一個(gè)。優(yōu)選的供測(cè)試對(duì)象和預(yù)定值如上所述。所述疾病可以是如上所述的任何炎性疾病。

本發(fā)明提供用于確定對(duì)象是將受益于繼續(xù)治療還是受益于治療改變的方法。所述利益典型地是疾病征兆和癥狀的減少或者從疾病表現(xiàn)中更快的恢復(fù)。疾病的征兆、癥狀和表現(xiàn)是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的。例如，在類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎中，疾病的征兆和癥狀包括受影響關(guān)節(jié)的疼痛、腫脹和觸痛。

這些方法對(duì)患者治療有重要影響，并且還對(duì)臨床開(kāi)發(fā)新治療法有重要影響。確定對(duì)象是將受益于繼續(xù)治療還是受益于治療改變?cè)谂R床上是有用的。本發(fā)明方法的臨床有用性的一個(gè)實(shí)例包括識(shí)別更少或更多可能對(duì)治療產(chǎn)生反應(yīng)的對(duì)象。本發(fā)明的方法還可用于預(yù)測(cè)或者確定對(duì)象是將受益于繼續(xù)治療還是將受益于治療改變。保健專(zhuān)業(yè)人員基于對(duì)所述對(duì)象的預(yù)期凈利益來(lái)選擇治療方案。所述凈利益來(lái)源于風(fēng)險(xiǎn)/收益比。本發(fā)明允許確定對(duì)象是將受益于繼續(xù)治療還是將受益于治療改變，從而輔助醫(yī)生選擇治療法。

例如對(duì)于人對(duì)象來(lái)說(shuō)，臨床有用性的另一個(gè)實(shí)例包括輔助臨床調(diào)查人員選擇具有高概率獲得凈收益的對(duì)象進(jìn)行臨床試驗(yàn)。預(yù)期臨床調(diào)查人員將使用本發(fā)明用于確定臨床試驗(yàn)的入選標(biāo)準(zhǔn)。

將受益于繼續(xù)治療的對(duì)象是其治療中凝溶膠蛋白水平達(dá)到某一預(yù)定值或者其凝溶膠蛋白水平正在升高的對(duì)象。凝溶膠蛋白的預(yù)定值如上所述。將受益于治療改變的對(duì)象是其治療中凝溶膠蛋白水平未達(dá)到某一預(yù)定值或者其治療中凝溶膠蛋白水平未在升高的對(duì)象。

如本文所用，“治療改變”表示現(xiàn)有治療之劑量的增加或減少、從一種治療轉(zhuǎn)換為另一種治療、向現(xiàn)有治療中增加另一種治療、或者其組合。從一種治療轉(zhuǎn)換為另一種治療可以包括轉(zhuǎn)換為具有高風(fēng)險(xiǎn)特征但其中預(yù)期收益之概率增加的治療。在一些實(shí)施方案中，優(yōu)選的治療法是提高凝溶膠蛋白水平的治療法。通過(guò)增加現(xiàn)有治療的劑量而將受益于治療改變的對(duì)象例如是正接受治療但未接受所述治療的最大耐受劑量或最大允許劑量的對(duì)象，并且該對(duì)象的凝溶膠蛋白水平未達(dá)到某一預(yù)定值。在此情況下，增加現(xiàn)有治療的劑量，直至所述凝溶膠蛋白水平達(dá)到某一預(yù)定值。在有些情況下，將現(xiàn)有治療的劑量從現(xiàn)有劑量增加到更高劑量，但該更高劑量不是所述治療的最大耐受劑量也不是最大允許劑量。在另一些情況下，所述劑量被增加到所述治療的最大耐受劑量或最大允許劑量。通過(guò)降低現(xiàn)有治療的劑量而將受益于治療改變的對(duì)象例如是這樣的對(duì)象，利用更低劑量的所述治療使其治療中凝溶膠蛋白水平達(dá)到或能夠達(dá)到某一預(yù)定值。

將從一種治療轉(zhuǎn)換為另一種治療中受益的對(duì)象例如是這樣的對(duì)象，其正接受所述治療的最大耐受劑量或最大允許劑量并且其凝溶膠蛋白水平未達(dá)到某一預(yù)定值。另一個(gè)實(shí)例是這樣的對(duì)象，其未接受所述治療的最大耐受劑量或最大允許劑量但由保健專(zhuān)業(yè)人員確定更可能受益于另一種治療。這種確定是基于，例如，在初始治療中對(duì)象中發(fā)生了不想要的副作用或者缺乏對(duì)初始治療的反應(yīng)。

將通過(guò)向現(xiàn)有治療中加入另一種治療而受益于治療改變的對(duì)象是例如這樣的對(duì)象，其正接受治療但其凝溶膠蛋白水平未達(dá)到某一預(yù)定值。在這些情況下，向現(xiàn)有治療中添加另一種治療。被加到現(xiàn)有治療中的所述治療在增加凝溶膠蛋白水平方面可以有不同于現(xiàn)有治療的作用機(jī)制。在有些情況下，可以使用前述治療改變的組合。

本發(fā)明還提供用于確定治療功效的方法。所述功效通常是所述治療在增加凝溶膠蛋白水平方面的功效。有時(shí)這還被稱(chēng)作陽(yáng)性反應(yīng)或有利的反應(yīng)?？赏ㄟ^(guò)凝溶膠蛋白血液測(cè)試來(lái)確定功效，以確定凝溶膠蛋白水平是否作為治療結(jié)果而增加。在一些實(shí)施方案中，功效確定是基于治療法在增加凝溶膠蛋白和校準(zhǔn)炎癥標(biāo)志物水平和/或校準(zhǔn)白細(xì)胞(wbc)計(jì)數(shù)中的功效。

所述凝溶膠蛋白測(cè)量通常表示為μm/l(微摩爾/升)，mg/dl(毫克/分升)或者mg/l(毫克/毫升)。

本發(fā)明還提供決定正接受炎性疾病比如類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎治療的對(duì)象中治療過(guò)程的方法。這種治療過(guò)程是基于凝溶膠蛋白的水平來(lái)決定。在一些實(shí)施方案中，所述對(duì)象已經(jīng)具有所述疾病或有發(fā)生該炎性疾病的風(fēng)險(xiǎn)。在一些實(shí)施方案中，所述對(duì)象發(fā)生炎性疾病的風(fēng)險(xiǎn)增加，所述對(duì)象有一種或更多種患所述疾病的風(fēng)險(xiǎn)因素。

治療量可以變化，例如通過(guò)增加或減少凝溶膠蛋白或藥用劑或治療組合物的量，通過(guò)改變所施用的治療組合物，通過(guò)改變給藥途徑，通過(guò)改變給藥時(shí)間安排等。所述有效量將隨要治療的具體病癥、所治療對(duì)象的年齡和身體狀況、病癥嚴(yán)重性、治療持續(xù)時(shí)間、并行治療(如果需要)、特定給藥途徑以及類(lèi)似因素，這些都在健康專(zhuān)業(yè)人員的知識(shí)和技能范圍內(nèi)。例如，有效量可以依賴(lài)于個(gè)體已經(jīng)患炎性疾病的持續(xù)時(shí)間。

有效量是足以提供醫(yī)學(xué)可期望結(jié)果的治療劑的劑量。例如，有效量還可以依賴(lài)于個(gè)體具有異常降低的凝溶膠蛋白水平的程度。很清楚本發(fā)明的治療劑可用于治療或預(yù)防炎性疾病(比如類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)；也就是說(shuō)，它們可以在有發(fā)生炎性疾病(比如類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)之風(fēng)險(xiǎn)的對(duì)象中預(yù)防性使用。因此，有效量是能夠降低發(fā)生炎性疾病(比如類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)之風(fēng)險(xiǎn)、減緩或者可能完全預(yù)防發(fā)生炎性疾病(比如類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)的量。應(yīng)該認(rèn)識(shí)到，當(dāng)在急性情況下使用所述治療劑時(shí)，它被用于防止一種或更多種醫(yī)學(xué)上不期望的結(jié)果，這種結(jié)果通常來(lái)自于這些不良反應(yīng)。

與決定有效量相關(guān)的因素對(duì)本領(lǐng)域普通技術(shù)人員是公知的，并且通過(guò)不超出常規(guī)試驗(yàn)就能夠確定。通常優(yōu)選使用本發(fā)明藥用劑(單獨(dú)或與其它治療劑聯(lián)用)的最大劑量；也就是說(shuō)，根據(jù)合理醫(yī)學(xué)判斷的最高安全劑量。然而，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將會(huì)知道，由于醫(yī)學(xué)原因、心理原因或者幾乎任何其它理由，患者可以堅(jiān)持更低劑量或者可耐受劑量。

本發(fā)明藥用劑的治療有效量是指可有效治療炎性疾病的量。例如，就類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎而言，期望的反應(yīng)是抑制類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的發(fā)展。這可以包括僅僅暫時(shí)減緩類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的發(fā)展，盡管更優(yōu)選地，它包括永久地停止類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)的發(fā)展。這可以通過(guò)本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的常規(guī)診斷方法來(lái)監(jiān)測(cè)。治療類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的期望反應(yīng)還可以是延遲類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的發(fā)病或者甚至阻止類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的發(fā)病。

本發(fā)明方法中所用的藥用劑優(yōu)選地是無(wú)菌的，并含有有效量的凝溶膠蛋白用于產(chǎn)生期望的反應(yīng)，其以適于施用給對(duì)象的重量或體積單元形式存在。施用給對(duì)象的藥用劑的劑量可以根據(jù)不同的參數(shù)選擇，尤其是根據(jù)所用給藥方式和對(duì)象的狀態(tài)來(lái)選擇。另一些因素包括期望的治療周期。在所用初始劑量下對(duì)象中反應(yīng)不足的情況下，可以利用更高的劑量(或者由于不同的更局限性的遞送途徑而更高的有效劑量)，直到患者能夠耐受或允許的程度。藥用劑的劑量可以由醫(yī)生或獸醫(yī)獨(dú)立地調(diào)整，尤其是在有任何并發(fā)癥的情況下。治療有效量通常在0.01mg/kg到約1000mg/kg之間變化，優(yōu)選地在約0.1mg/kg到約500mg/kg之間，最優(yōu)選在約0.2mg/kg到約250mg/kg，每天給藥一次或更多次，持續(xù)一天或更多天。

凝溶膠蛋白和任選地其它治療可以其自身或以可藥用鹽的形式來(lái)施用。

各種給藥方式是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的，它們可以有效地將本發(fā)明藥用劑遞送至期望組織、細(xì)胞或體液。給藥方法在本申請(qǐng)中另外討論。本發(fā)明不限于本文公開(kāi)的具體給藥方式。本領(lǐng)域標(biāo)準(zhǔn)參考書(shū)(例如，remington′spharmaceuticalsciences，20thedition，lippincott，williamsandwilkins，baltimoremd，2001)提供在藥物載體中各種藥物制劑和配方的給藥方式和遞送劑型?？捎糜谑┯帽景l(fā)明藥用劑的其它方案對(duì)于一個(gè)本領(lǐng)域普通技術(shù)人員也將是已知的，其中劑量、施用時(shí)間表、施用部位和施用方式等不同于此處所示的這些。

將本發(fā)明藥用劑施用給除人以外的哺乳動(dòng)物，例如用于測(cè)試目的或獸醫(yī)治療目的，其在實(shí)際上與如上所述相同的條件下來(lái)進(jìn)行。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將會(huì)知道，本發(fā)明既適用于人類(lèi)疾病也適用于動(dòng)物疾病。因此，本發(fā)明意圖用于畜牧業(yè)和獸醫(yī)學(xué)以及用于人類(lèi)治療。

當(dāng)施用時(shí)，以藥學(xué)可接受的量以及在藥學(xué)可接受的組合物中來(lái)應(yīng)用本發(fā)明的藥物制劑。所述術(shù)語(yǔ)″藥學(xué)可接受的″意思是指不干擾活性成分生物活性之有效性的無(wú)毒材料。這些制劑通?？梢院宣}、緩沖劑、防腐劑、相容的載體以及任選地其它治療劑。當(dāng)用于醫(yī)學(xué)時(shí)，所述鹽應(yīng)該是藥學(xué)可接受的，但是藥學(xué)不可接受的鹽可以方便地用于制備藥學(xué)可接受的鹽，因此并不排除在本發(fā)明范圍之外。這些藥理學(xué)以及藥學(xué)可接受的鹽包括但不限于從以下酸制備的那些：鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、馬來(lái)酸、乙酸、水楊酸、檸檬酸、甲酸、丙二酸和琥珀酸等。此外，藥學(xué)可接受的鹽可以制備成堿金屬或堿土金屬鹽，比如鈉、鉀或鈣鹽。

如果需要，藥用劑或藥用組合物可以與藥學(xué)可接受的載體相組合。如本文所用，術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)可接受的載體”意思是指適于施用給人的一種或更多種相容的固體或液體填充劑、稀釋劑或包封物質(zhì)。術(shù)語(yǔ)“載體”表示天然或合成的有機(jī)或無(wú)機(jī)成分，與活性成分相組合以促進(jìn)其應(yīng)用。藥物組合物的組分還能夠以一定方式與本發(fā)明藥用劑共混，以及各組分和藥用劑之間相互混合，所述方式應(yīng)使得沒(méi)有能顯著消弱期望藥效的相互作用。

所述藥物組合物可以含有適當(dāng)?shù)娜缟纤龅木彌_劑，包括：醋酸鹽、磷酸鹽、檸檬酸鹽、甘氨酸、硼酸鹽、碳酸鹽、碳酸氫鹽、氫氧化物(以及其它堿)以及前述化合物的藥學(xué)可接受的鹽。所述藥物組合物任選地還可以含有適當(dāng)?shù)姆栏瘎?，比如：苯扎氯銨、氯代丁醇、尼泊金酯以及硫柳汞。

所述藥物組合物可以方便地以單位劑型來(lái)提供，并且可以通過(guò)藥學(xué)領(lǐng)域公知的任何方法來(lái)制備。所有的方法包括將活性劑與載體結(jié)合的步驟，它們構(gòu)成了一種或更多種輔助成分。通常，通過(guò)均勻和緊密地將活性化合物與液體載體、精細(xì)粉碎的固體載體或者兩者相結(jié)合然后必要時(shí)將產(chǎn)品成型來(lái)制備所述組合物。

當(dāng)期望將所述化合物全身遞送時(shí)，它可以配制成胃腸外經(jīng)注射施用，例如經(jīng)快速推注或連續(xù)輸注。注射制劑可以與添加的防腐劑一起以單位劑型來(lái)提供，例如在安瓿中或者多劑量容器中。所述組合物可以采用例如如下形式：在油性或水性介質(zhì)中的混懸劑、溶液劑或乳劑，并且可以含有成型劑(formulatoryagents)比如助懸劑、穩(wěn)定劑和/或分散劑。

胃腸外施用的藥物制劑包括水溶性形式的活性化合物的水溶液。此外，活性化合物的混懸劑可以制備成適當(dāng)?shù)挠托宰⑸浠鞈覄?。合適的親脂性溶劑或介質(zhì)包括脂肪油比如芝麻油，或者合成脂肪酸酯比如油酸乙酯或甘油三酯，或者脂質(zhì)體。水性注射混懸劑可以含有增加混懸劑粘度的物質(zhì)，比如羧甲基纖維素鈉、山梨糖醇或右旋糖苷。任選地，所述混懸劑還可以含有合適的穩(wěn)定劑或增加所述化合物溶解性的試劑，以允許制備高度濃縮的溶液。

作為替代，所述活性化合物可以是粉末形式，用于在使用前用合適的介質(zhì)(例如鹽水、緩沖液或無(wú)菌無(wú)熱原水)來(lái)重構(gòu)。

適于口服施用的組合物可以作為離散單元來(lái)提供，比如膠囊、片劑、丸劑、錠劑，每個(gè)分別含有預(yù)定量的活性化合物(例如凝溶膠蛋白)。其它組合物包括在水性液體或非水液體中的混懸劑，比如糖漿、酏劑、乳劑或凝膠。

供口服使用的藥物制劑可以作為固體賦形劑獲得，任選地研磨所得混合物，以及需要時(shí)在添加適當(dāng)助劑后加工顆粒混合物，從而獲得片劑或糖錠核心。適當(dāng)?shù)馁x形劑尤其是填充劑，比如糖，包括乳糖、蔗糖、甘露醇、山梨糖醇或纖維素制劑，例如玉米淀粉、小麥淀粉、米淀粉、馬鈴薯淀粉、明膠、黃蓍膠、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和/或聚乙烯吡咯烷酮(pvp)。如果需要，還可以添加崩解劑，比如交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、瓊脂、或海藻酸或其鹽比如海藻酸鈉。任選地，口服制劑還可以配制在鹽水或緩沖液即edta中，用于中和內(nèi)酸條件，或者可以不加任何載體來(lái)施用。

此外，還明確包括的是上述一種或多種組分的口服劑型。所述一種或多種組分可以被化學(xué)修飾，使得所述衍生物的口服遞送是有療效的。一般來(lái)說(shuō)，預(yù)期的化學(xué)修飾是將一種部分(moiety)附著至所述組分分子自身，由此所述部分允許(a)抑制蛋白水解；和(b)從胃或腸吸收入血流。還期望的是所述一種或多種組分的整體穩(wěn)定性的增加以及體內(nèi)循環(huán)時(shí)間的增加。這種部分的實(shí)例包括：聚乙二醇、乙二醇和丙二醇共聚物、羧甲基纖維素、右旋糖苷、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮以及聚脯氨酸。abuchowskianddavis，1981，″solublepolymer-enzymeadducts″in：enzymesasdrugs，hocenbergandroberts，eds.，wiley-interscience，newyork，ny，pp.367-383；newmark，etal.，1982，j.appl.biochem.4：185-189.能夠使用的另一些聚合物是聚l，3-二氧戊環(huán)以及聚l，3，6-tioxocane。如上所示，優(yōu)選用于藥用的是聚乙二醇部分。

對(duì)于所述組分(或衍生物)，所述釋放位置可以是胃、小腸(十二指腸、空腸或回腸)或大腸。本領(lǐng)域技術(shù)人員有可利用的劑型，這些劑型不在胃中溶解而將在十二指腸或在腸中其它地方釋放所述物質(zhì)。優(yōu)選地，通過(guò)保護(hù)凝溶膠蛋白或者通過(guò)將生物活性物質(zhì)在胃部環(huán)境以外(比如在腸中)釋放，所述釋放將避免了胃部環(huán)境的有害作用。

為了確保完全的胃部抵抗，不可透過(guò)至少ph5.0的包衣是必需的。用作腸溶包衣的更常見(jiàn)的惰性成份的實(shí)例是醋酸纖維素偏苯三酸酯(cat)、羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯(hpmcp)、hpmcp50、hpmcp55、聚醋酸乙烯酯鄰苯二甲酸酯(pvap)、eudragitl30d、aquateric、醋酸鄰苯二甲酸纖維素(cap)、eudragitl、eudragits以及蟲(chóng)膠。這些包衣劑可以用作混合膜。

包衣劑或包衣劑混合物還可以用在不是為胃保護(hù)而設(shè)計(jì)的片劑上。這可以包括糖衣、或者使片劑更易于吞咽的包衣。膠囊可以由硬殼(比如明膠)組成，用于遞送干的治療劑即粉末；對(duì)于液體形式，可以使用軟明膠殼。扁囊劑(cachets)的殼材料可以是厚的淀粉或其它可食用紙。對(duì)于丸劑、錠劑、模制片劑或研制片劑，可以使用濕法成團(tuán)技術(shù)。

所述治療劑可以作為粒徑約1mm的顆粒或小丸形式的精細(xì)多顆粒包含在制劑中。用于膠囊施用的材料的劑型還可以是粉末劑、輕度壓縮的栓塞(plug)或者是片劑?？梢酝ㄟ^(guò)壓縮來(lái)制備治療劑。

著色劑和芳香劑都可以包含。例如，可以配制凝溶膠蛋白(比如通過(guò)脂質(zhì)體或微球包封)，然后進(jìn)一步包含在可食用制品比如含著色劑和芳香劑的冷凍飲料中。

可以用惰性物質(zhì)來(lái)稀釋或增加治療劑的體積。這些稀釋劑可以包括碳水化合物，尤其是甘露醇、乳糖、無(wú)水乳糖、纖維素、蔗糖、改性右旋糖苷和淀粉。有些無(wú)機(jī)鹽也可以用作填充劑，包括磷酸鈣、碳酸鎂和氯化鈉。一些可商業(yè)供應(yīng)的稀釋劑是fast-flo、emdex、sta-rx1500、emcompress和avicell。

崩解劑可以包含在制成固體劑型的治療劑的制劑中。用作崩解劑的物質(zhì)包括但不限于淀粉，包括基于淀粉的商品崩解劑explotab。乙醇酸淀粉鈉、amberlite、羧甲基纖維素鈉、超級(jí)支鏈淀粉(ultramylopectin)、海藻酸鈉、明膠、橙皮、酸性羧甲基纖維素、天然海綿和膨潤(rùn)土都可以使用。另一種崩解劑形式是不溶性陽(yáng)離子交換樹(shù)脂。粉末化樹(shù)膠可以用作崩解劑和粘合劑，這可以包括比如以下的粉末化樹(shù)膠：瓊脂、刺梧桐樹(shù)膠或黃蓍膠。海藻酸及其鈉鹽也可以用作崩解劑。

粘合劑可以用于將治療劑保持在一起以形成硬片，其包括來(lái)自天然產(chǎn)物的材料，比如阿拉伯膠、黃蓍膠淀粉和明膠。其它還包括甲基纖維素(mc)、乙基纖維素(ec)和羧甲基纖維素(cmc)。聚乙烯吡咯烷酮(pvp)和羥丙基甲基纖維素(hpmc)都可以用于醇溶液中使治療劑成顆粒。

抗磨劑(anti-frictionalagent)可以包含在治療劑的制劑中以在制劑過(guò)程中防止粘連。潤(rùn)滑劑可以用作治療劑和模具壁之間的層，這些可以包括但不限于硬脂酸(包括其鎂鹽和鈣鹽)、聚四氟乙烯(ptfe)、液體石蠟、植物油和蠟。也可以使用可溶性潤(rùn)滑劑，比如月桂基硫酸鈉、月桂基硫酸鎂、各種分子量的聚乙二醇、carbowax4000和6000。

可以添加助流劑，助流劑能夠提高配制過(guò)程中藥物的流動(dòng)性并在壓制過(guò)程中輔助重排。助流劑可以包括淀粉、滑石粉、煅制二氧化硅和水化鋁硅酸鹽。

為了輔助治療劑溶解到水性環(huán)境中，可以添加表面活性劑作為潤(rùn)濕劑。表面活性劑可以包括陰離子去污劑，比如月桂基硫酸鈉、磺基琥珀酸二辛基鈉和磺酸二辛基鈉?？梢允褂藐?yáng)離子去污劑，它們可以包括苯扎氯銨或芐索氯銨(benzethomiumchloride)?？梢宰鳛楸砻婊钚詣┌谥苿┲械臐撛诘姆请x子去污劑的列表是聚桂醇400(lauromacrogol400)，硬脂酸聚乙二醇酯40(polyoxyl40stearate)，聚乙二醇?xì)浠吐橛?0、50和60，甘油單硬脂酸酯，聚失水山梨醇酯40、60、65和80，蔗糖脂肪酸酯，甲基纖維素和羧甲基纖維素。這些表面活性劑可以單獨(dú)或作為不同比例的混合物存在于凝溶膠蛋白的制劑中。

可以口服使用的藥物制備物包括由明膠制成的推入-契合膠囊(push-fitcapsule)，以及由明膠和增塑劑(比如甘油或山梨醇)制成的軟密封膠囊。推入-契合膠囊可以含有與填充劑比如乳糖、粘合劑比如淀粉和/或潤(rùn)滑劑比如滑石粉或硬脂酸鎂以及任選地穩(wěn)定劑相混合的活性成分。在軟膠囊中，活性化合物可以溶解或懸浮于適當(dāng)?shù)囊后w(比如脂肪油、液體石蠟或液體聚乙二醇)中。此外，可以添加穩(wěn)定劑。

還可以使用配制成供口服施用的微球。這種微球已經(jīng)在現(xiàn)有技術(shù)中充分描述。所有的口服施用制劑應(yīng)該制成適于這種施用的劑量。

對(duì)于頰部施用(buccaladministration)，組合物可以采用以常規(guī)方式配制的片劑或錠劑形式。

對(duì)于吸入施用，用于本發(fā)明的化合物可以方便地以氣霧劑形式從加壓包裝或噴霧器中遞送，其中使用適當(dāng)?shù)膾伾鋭缍榷淄?、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其它合適的氣體。對(duì)于加壓氣霧劑而言，可以通過(guò)提供遞送計(jì)量量的閥來(lái)確定劑量單位。用于吸入器或吹入器中的(例如明膠)膠囊和藥筒可以配制成含有化合物和適當(dāng)粉末基質(zhì)(比如乳糖或淀粉)的粉末混合物。

本文還涉及經(jīng)肺遞送凝溶膠蛋白。凝溶膠蛋白通過(guò)吸入遞送至哺乳動(dòng)物肺部，并穿過(guò)肺部上皮內(nèi)層進(jìn)入血流。吸入分子的另一些報(bào)道包括：adjeietal.，1990，pharmaceuticalresearch，7：565-569；adjeietal.，1990，internationaljournalofpharmaceutics，63：135-144(醋酸亮丙瑞林)；braquetetal.，1989，journalofcardiovascularpharmacology，13(suppl.5)：143-146(內(nèi)皮素-1)；hubbardetal.，1989，annalsofinternalmedicine，vol.iii，pp.206-212(αl-抗胰蛋白酶)；smithetal.，1989，j.clin.invest.84：1145-1146(a-1-蛋白酶)；osweinetal.，1990，″aerosolizationofproteins″，proceedingsofsymposiumonrespiratorydrugdeliveryii，keystone，colorado，march，(重組人生長(zhǎng)激素)；debsetal.，1988，j.immunol.140：3482-3488(干擾素-γ和腫瘤壞死因子α)以及plateetal.，美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5,284,656(粒細(xì)胞集落刺激因子)。經(jīng)肺遞送用于全身作用的藥物的方法和組合物描述于美國(guó)專(zhuān)利no.5,451,569，其于1995年9月19日授權(quán)給wong等人。

用于實(shí)施本發(fā)明的還包括設(shè)計(jì)用于經(jīng)肺遞送治療性產(chǎn)品的廣泛的機(jī)械裝置；包括但不限于噴霧器、計(jì)量劑量吸入器和粉末吸入器，所有這些都是本領(lǐng)域技術(shù)人員熟悉的。

適于實(shí)施本發(fā)明的商業(yè)供應(yīng)裝置的一些具體實(shí)例是ultravent吸入器(制造商為mallinckrodt，inc.，st.louis，missouri)；acornii噴霧器(制造商為marquestmedicalproducts，englewood，colorado)；ventolin計(jì)量劑量吸入器(制造商為glaxoinc.，researchtrianglepark，northcarolina)和spinhaler粉末吸入器(制造商為fisonscorp.，bedford，massachusetts)。

所有這些裝置需要使用適于分配凝溶膠蛋白的劑型。通常，每種劑型特異性針對(duì)所用裝置類(lèi)型，可能包括使用適當(dāng)?shù)膾伾鋭┎牧希约翱捎糜谥委煹某Ｓ孟♂寗?、助劑?或載體。此外，還包括使用脂質(zhì)體、微囊或微球、包合物或其它類(lèi)型的載體。根據(jù)化學(xué)修飾類(lèi)型或所用裝置類(lèi)型，化學(xué)修飾的凝溶膠蛋白還可以制備成不同劑型。

適用于(噴射或超聲)噴霧器的劑型通常將包含濃度為約0.1至25mg生物活性凝溶膠蛋白/ml溶液的溶于水中的凝溶膠蛋白。所述劑型還可以包含緩沖劑和單糖(例如用于穩(wěn)定凝溶膠蛋白和調(diào)節(jié)滲透壓)。噴霧器劑型還可以含有表面活性劑，以減少或防止在形成氣霧劑中因溶液霧化引起的表面誘導(dǎo)的凝溶膠蛋白聚集。

用于計(jì)量劑量吸入裝置的劑型通常將包含含有凝溶膠蛋白的精細(xì)粉末，其在表面活性劑輔助下懸浮于拋射劑中。拋射劑可以是用于此目的的任何常規(guī)物質(zhì)，比如氯氟烴、氫氯氟烴(hydrochlorofluorocarbon)、氫氟烴(hydrofluorocarbon)或烴類(lèi)，包括三氯氟甲烷、二氯二氟甲烷、二氯四氟乙烷和1，1，1，2-四氟乙烷或者它們的組合。合適的表面活性劑包括失水山梨醇三油酸酯和大豆卵磷脂。油酸也可以用作表面活性劑。

用于從粉末吸入裝置中分配的劑型將包含含有凝溶膠蛋白的精細(xì)干燥粉末，其還可以包含填充劑(bulkingagent)，比如乳糖、山梨醇、蔗糖或甘露醇，填充劑的量足以促進(jìn)從裝置中分配粉末，例如制劑重量的50-90％。凝溶膠蛋白最有利地應(yīng)該制成平均粒徑小于10mm(或微米)(最優(yōu)選0.5-5mm)的顆粒形式，以最有效地遞送至遠(yuǎn)端肺。

本發(fā)明藥物組合物的經(jīng)鼻(鼻內(nèi))遞送也包括在內(nèi)。經(jīng)鼻遞送允許在將治療產(chǎn)品施用至鼻后直接將本發(fā)明的藥物組合物傳遞血流，而不必將產(chǎn)品沉積在肺中。經(jīng)鼻遞送的劑型包括使用右旋糖苷(dextran)或環(huán)狀右旋糖苷(cyclodextran)的那些。

對(duì)于經(jīng)鼻遞送，可用的裝置是附帶計(jì)量劑量噴霧器的小硬瓶。在一個(gè)實(shí)施方案中，通過(guò)使本發(fā)明溶液的藥物組合物進(jìn)入體積確定的腔室來(lái)遞送所述計(jì)量劑量，所述腔室具有能夠氣霧化的孔徑，當(dāng)腔室中液體被壓縮時(shí)通過(guò)形成噴霧得到氣霧劑。壓縮所述腔室以施用本發(fā)明的藥物組合物。在一個(gè)具體實(shí)施方案中，所述腔室是活塞構(gòu)造。這種裝置有商業(yè)供應(yīng)。

作為替代，使用具有孔或開(kāi)口的塑料擠瓶，所述孔或開(kāi)口大小適于通過(guò)在壓擠時(shí)形成噴霧而使氣霧劑氣溶膠化。所述開(kāi)口通常發(fā)現(xiàn)于瓶子的頂部，并且頂部一般逐漸變細(xì)以部分匹配鼻腔通道內(nèi)，用于高效施用氣霧劑。優(yōu)選地，經(jīng)鼻吸入器提供計(jì)量量的氣霧劑，用于施用確定劑量的藥物。

所述化合物還可以配制成直腸或陰道組合物，比如栓劑或置留灌腸劑，例如其中含有常規(guī)栓劑基質(zhì)比如可可脂或其它甘油酯。

除了前面所述的劑型以外，所述化合物還可以配制成儲(chǔ)庫(kù)(depot)制劑。這種長(zhǎng)時(shí)間作用的劑型可以用適當(dāng)?shù)木酆衔锘蚴杷牧?例如作為可接受油中的乳液)或離子交換樹(shù)脂來(lái)配制，或者配制成低溶解性(sparinglysoluble)的衍生物，例如低溶解性的鹽。

所述藥物組合物還可以包含適當(dāng)?shù)墓腆w或凝膠相載體或賦形劑。這種載體或賦形劑的實(shí)例包括但不限于碳酸鈣、磷酸鈣、各種糖、淀粉、纖維素衍生物、明膠和聚合物比如聚乙二醇。

例如，合適的液體或固體藥物制劑形式是供吸入的水溶液或鹽水溶液，微囊化、encochleated、包被到顯微金顆粒上、包含在脂質(zhì)體中、噴霧化的氣霧劑，供植入皮膚中的小粒(pellet)，或者干燥到供劃入皮膚的尖銳物品上。所述藥物組合物還可以包括顆粒劑、粉末、片劑、包衣片劑、(微)膠囊、栓劑、糖漿、乳劑、混懸劑、乳膏、滴劑或用于長(zhǎng)時(shí)間釋放活性化合物的制劑，在其制備中如上所述常規(guī)使用賦形劑和添加劑和/或助劑，比如崩解劑、粘合劑、包衣劑、膨脹劑、潤(rùn)滑劑、著味劑、甜味劑或助溶劑。所述藥物組合物適用于各種藥物遞送系統(tǒng)。關(guān)于藥物遞送方法的簡(jiǎn)要綜述請(qǐng)見(jiàn)langer，science249：1527-1533，1990，其通過(guò)引用并入本文。

治療劑(尤其包括但不限于凝溶膠蛋白)可以在顆粒中提供。本文所用的顆粒是指納米或微顆粒(或者有時(shí)更大)，其可以完全或部分由凝溶膠蛋白或本文所述的其它治療劑構(gòu)成。所述顆粒可以在被包衣(包括但不限于腸溶包衣)圍繞的核心中含有所述治療劑。治療劑還可以分散在顆粒中。治療劑還可以吸附到顆粒中。所述顆粒可以有任何級(jí)別的釋放動(dòng)力學(xué)，包括零級(jí)釋放、一級(jí)釋放、二級(jí)釋放、延遲釋放、持續(xù)釋放、立即釋放以及其任意組合等。除了治療劑以外，所述顆粒還可以包含藥學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中常規(guī)使用的任何材料，包括但不限于易蝕材料、非易蝕材料、生物降解材料、或非生物降解材料或其組合。所述顆?？梢允翘幱谌芤夯虬牍腆w狀態(tài)的含有凝溶膠蛋白的微膠囊。所述顆?？梢允菐缀跞魏涡螤?。

非生物降解材料和生物降解材料都可以用于制造供遞送治療劑的顆粒。這些聚合物可以是天然或合成聚合物?；谄谕尫艜r(shí)間來(lái)選擇所述聚合物。尤其重要的生物粘附聚合物包括下文所述的生物易蝕水凝膠：h.s.sawhney，cp.pathakandj.a.hubellinmacromolecules，(1993)26：581-587，其教導(dǎo)并入本文。這些包括聚透明質(zhì)酸、酪蛋白、明膠、谷膠酪蛋白、聚酐、聚丙烯酸、海藻酸鹽、甲殼素、聚(甲基丙烯酸甲酯)、聚(甲基丙烯酸乙酯)、聚(甲基丙烯酸丁酯)、聚(甲基丙烯酸異丁酯)、聚(甲基丙烯酸己酯)、聚(甲基丙烯酸異癸基酯)、聚(甲基丙烯酸月桂基酯)、聚(甲基丙烯酸苯酯)、聚(丙烯酸甲酯)、聚(丙烯酸異丙基酯)、聚(丙烯酸異丁基酯)和聚(丙烯酸十八醇酯)、

所述治療劑還可以包含在控制釋放系統(tǒng)中。術(shù)語(yǔ)“控制釋放”意思是指從制劑中釋放藥物的方式和特征譜受到控制的任何含藥劑型。這涉及立即釋放以及非立即釋放劑型，其中非立即釋放劑型包括但不限于持續(xù)釋放和延遲釋放劑型。術(shù)語(yǔ)“持續(xù)釋放”(也稱(chēng)“延長(zhǎng)釋放”)通常用于表示提供在一段長(zhǎng)時(shí)間中逐漸釋放藥物的藥物劑型，并且盡管不必需但是優(yōu)選地導(dǎo)致在一段長(zhǎng)時(shí)間中持續(xù)恒定的血藥水平。術(shù)語(yǔ)“延遲釋放”通常用于表示在施用劑型和藥物釋放之間有時(shí)間延遲的藥物劑型?！把舆t釋放”可以包括或不包括藥物在一段長(zhǎng)時(shí)間中的逐漸釋放，因此可能是也可能不是“持續(xù)釋放”。

使用長(zhǎng)期持續(xù)釋放的植入物對(duì)于治療慢性疾病特別適合。如本文所用，“長(zhǎng)期”釋放是指植入物被構(gòu)造和配置成在至少7天(優(yōu)選30至60天)中遞送治療水平的活性成分。長(zhǎng)期持續(xù)釋放植入物是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的，包括上述的一些釋放系統(tǒng)。

對(duì)于局部施用至眼、鼻膜、粘膜或皮膚，凝溶膠蛋白可以配制成軟膏、乳膏或洗劑，或者配制成透皮貼劑或眼內(nèi)插入物或離子電滲治療。例如，軟膏和乳膏劑可以單獨(dú)用水性或油性基質(zhì)或者配合適當(dāng)?shù)脑龀韯┖?或凝膠劑來(lái)配制。洗劑可以用水性或油性基質(zhì)來(lái)配制，通常還包含一種或更多種乳化劑、穩(wěn)定劑、分散劑、助懸劑、增稠劑或著色劑。(例如見(jiàn)授權(quán)給mueller，d.等人的美國(guó)專(zhuān)利5,563,153，其標(biāo)題為“steriletopicalanestheticgel”，其中描述了藥物可接受的凝膠基表面用載體。)

一般來(lái)說(shuō)，根據(jù)組合物的總重，凝溶膠蛋白在局部劑型中存在量的范圍是約0.01％至約30.0％重量。優(yōu)選地，凝溶膠蛋白存在量的范圍是約0.5至約30％重量；最優(yōu)選地，凝溶膠蛋白存在量的范圍是約0.5至約10％重量。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明組合物包含凝膠混合物，以盡可能擴(kuò)大與局限性疼痛表面的接觸，并盡可能縮小緩解局限性疼痛所必需的體積和劑量。(基于甲基纖維素的凝膠，由upjohncorporation制造)是一種優(yōu)選的藥物可接受的表面用載體。其它藥物可接受載體包括供透皮藥物遞送的離子電滲治療。

本發(fā)明還涉及藥盒的用途。在本發(fā)明的一些方面，所述藥盒可以包含藥物制劑小管(vial)、藥物制劑稀釋劑小管以及凝溶膠蛋白。所述含藥物制劑之稀釋劑的小管是任選的。稀釋劑管含有稀釋劑比如生理鹽水，用于稀釋可能的凝溶膠蛋白的濃縮溶液或凍干粉末。使用說(shuō)明可以包括將特定量的稀釋劑與特定量的濃縮藥物制劑相混合的說(shuō)明，從而制備最終的注射劑或輸注劑。使用說(shuō)明可以包括用有效量的凝溶膠蛋白治療對(duì)象的說(shuō)明。還可以理解，無(wú)論含有所述制劑的容器是瓶、帶間隔的管、帶間隔的安瓿、輸注袋等，都可以含有標(biāo)志比如常規(guī)標(biāo)識(shí)，當(dāng)所述制劑已經(jīng)高壓滅菌或其它滅菌處理時(shí)所述標(biāo)志將改變顏色。

本發(fā)明進(jìn)一步通過(guò)以下實(shí)施例舉例說(shuō)明，這些實(shí)施例無(wú)論如何不構(gòu)成進(jìn)一步限制。本申請(qǐng)引用的所有參考(包括參考文獻(xiàn)、授權(quán)專(zhuān)利、專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)和共同未決的專(zhuān)利申請(qǐng))的全部?jī)?nèi)容經(jīng)引用明確并入本文。

實(shí)施例

血漿凝溶膠蛋白(pgsn)是一種分泌蛋白，以平均250mg/l的濃度循環(huán)于人細(xì)胞外液。各種類(lèi)型的組織損傷導(dǎo)致血漿凝溶膠蛋白水平的長(zhǎng)時(shí)間降低。在急性創(chuàng)傷、燒傷、膿毒癥、大手術(shù)和造血干細(xì)胞移植患者中遇到的嚴(yán)重組織損傷之后，首先凝溶膠蛋白(gsn)水平降低至正常水平的大約不到25％，并由此可預(yù)見(jiàn)到重要的護(hù)理并發(fā)癥，這可以通過(guò)以下來(lái)測(cè)量：輔助呼吸需要、加護(hù)病房居住以及整個(gè)住院期的時(shí)間長(zhǎng)度、死亡和特異性后遺癥比如繼發(fā)性肺損傷(如成人呼吸窘迫綜合征(ards)、急性肺損傷(ali)、多器官功能障礙綜合征(mods))。在動(dòng)物模型中相似的血漿凝溶膠蛋白減少在肺通透性改變和炎癥之前出現(xiàn)，重組血漿凝溶膠蛋白的輸注能改善這些作用。

實(shí)施例1：和健康對(duì)照相比，類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(ra)患者中的血漿凝溶膠蛋白(pgsn)濃度下降，并且在ra患者滑液中的濃度比在血液中更低。

我們測(cè)量了血漿凝溶膠蛋白(pgsn)在類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(ra)患者中的水平，來(lái)從實(shí)驗(yàn)上驗(yàn)證以下假設(shè)：作為對(duì)引發(fā)類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的因素所造成初始(未知)損傷的反應(yīng)，血漿凝溶膠蛋白水平下降。如圖1所示，ra患者中循環(huán)中(pgsn)水平顯著低于與其配對(duì)的健康對(duì)照(103±23對(duì)比142±29，p＝0.0002，圖1)。pgsn水平在男性和女性當(dāng)中相似，不依賴(lài)于患者年齡或關(guān)節(jié)炎持續(xù)時(shí)間。循環(huán)中pgsn水平與c-反應(yīng)蛋白的水平呈負(fù)相關(guān)(r＝-0.272，p＝0.026)。

材料和方法：

患者：血漿和滑液樣品收集自82例因用于急性關(guān)節(jié)積液就診于哥德堡sahlgrenska大學(xué)醫(yī)院風(fēng)濕病門(mén)診的ra患者。根據(jù)美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)來(lái)診斷ra。在采集滑液和血液樣品時(shí)，所有患者接受非甾體抗炎藥。獲得所有患者最近的手和足射線照片。骨侵蝕的存在被定義為關(guān)節(jié)皮層輪廓的喪失，在前足的近端指間、掌指、腕、指間和跖趾關(guān)節(jié)中記錄了存在骨侵蝕。存在一處侵蝕足以滿(mǎn)足侵蝕性疾病的要求。將所檢測(cè)任何免疫球蛋白亞型(igm、-a、-g)的類(lèi)風(fēng)濕因子的存在當(dāng)作是陽(yáng)性。從來(lái)到sahlgrenska大學(xué)醫(yī)院輸血部并且與ra患者的年齡和性別相匹配的獻(xiàn)血者獲得對(duì)照血液樣品(n＝87)。

樣品的收集和準(zhǔn)備：通過(guò)關(guān)節(jié)穿刺術(shù)從膝關(guān)節(jié)中獲得滑液，在無(wú)菌條件下將其吸出并轉(zhuǎn)移至含檸檬酸鈉(0.129mol/l；ph7.4)的管中。同時(shí)從肘靜脈獲得血液樣品并將其收集至檸檬酸鈉介質(zhì)中。收集的血液和滑液樣品在800g下離心15分鐘，分裝，在-70℃冷凍保存?zhèn)溆谩?/p>

通過(guò)芘肌動(dòng)蛋白-成核測(cè)定(pyreneactin-nucleationassay)來(lái)測(cè)量血漿和滑液中pgsn濃度：pgsn經(jīng)鈣激活，與兩個(gè)肌動(dòng)蛋白單體結(jié)合而形成核，肌動(dòng)蛋白由此沿尖端(pointedend)(最慢生長(zhǎng))方向聚合。用n-芘基碘乙酰胺(molecularprobes，eugeneoregon)衍生化肌動(dòng)蛋白來(lái)制備芘肌動(dòng)蛋白。使用之前，在解聚緩沖液(緩沖液a：0.5mmatp、5mmβ-巰基乙醇、0.2mmtris、0.2mmcacl2、ph7.4)中將芘肌動(dòng)蛋白稀釋至20μm，在37℃下保存1小時(shí)以達(dá)到單體平衡，用optima^tmtl超離心機(jī)(beckman)將其在250,000g、4℃下離心30分鐘以沉淀任何殘留的絲狀肌動(dòng)蛋白。吸取上清液并保存在冰水浴中備用。在緩沖液b(0.1mkci、0.2mmmgcl2、0.2mmcacl2、0.5mmatp、10mmtris、0.5mmβ-巰基乙醇、ph7.4)中按照1∶5稀釋待分析的貧血小板血漿。用發(fā)光熒光計(jì)(jobinyvon-spexinstrumentss.a.，inc)記錄芘肌動(dòng)蛋白熒光。激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)分別是366和386nm。在6x50mm硼硅酸鹽玻璃培養(yǎng)管(kimble)中，向含有0.4μm鬼筆環(huán)肽、1.5mmcacl2和5μl稀釋樣品的280μl緩沖液b中加入芘肌動(dòng)蛋白使其終濃度為1μm?？焖贉u旋混合后，240秒內(nèi)用熒光計(jì)監(jiān)測(cè)成核。計(jì)算100-200秒之間的熒光增強(qiáng)的線性斜率。所有樣品重復(fù)測(cè)定。通過(guò)使用重組人pgsn的標(biāo)準(zhǔn)曲線將每個(gè)樣品的聚合速率轉(zhuǎn)化為pgsn濃度。

統(tǒng)計(jì)：血液和滑液樣品中的pgsn水平表示為平均值±sd。通過(guò)成對(duì)t-檢驗(yàn)分析匹配血液和滑液樣品間的比較。也在患者血液樣品和健康對(duì)照之間進(jìn)行pgsn水平的比較。為了進(jìn)一步比較，根據(jù)放射學(xué)結(jié)果(侵蝕性ra對(duì)比非侵蝕性ra)將患者材料進(jìn)行分級(jí)。用mann-whitneyu檢驗(yàn)分別計(jì)算組間血液和滑液中pgsn水平的差異。為了評(píng)價(jià)正在進(jìn)行的治療對(duì)pgsn水平的可能影響，根據(jù)dmard處理(處理對(duì)比未處理)對(duì)患者材料分級(jí)。用mann-whitneyu檢驗(yàn)計(jì)算組間比較。對(duì)于結(jié)果的所有統(tǒng)計(jì)評(píng)價(jià)，p-值低于0.05被認(rèn)為是統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著的。

實(shí)施例2：ra患者滑液(sf)中出現(xiàn)的凝溶膠蛋白同工型是凝溶膠蛋白的血漿同工型(pgsn)。

由于凝溶膠蛋白是以細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞外同工型兩種形式而產(chǎn)生的，它們都具有誘導(dǎo)肌動(dòng)蛋白聚合的能力，因此我們通過(guò)用對(duì)血漿亞型(α-pgsn)有特異性的抗體進(jìn)行免疫印跡來(lái)分析凝溶膠蛋白活性的起源。sf中存在的凝溶膠蛋白主要由血漿同工型組成(圖2)。匹配成對(duì)樣品中血漿和滑液中凝溶膠蛋白水平之間的相關(guān)性(r＝0.39，p＝0.0006)也支持凝溶膠蛋白的血漿起源。然而，在ra患者sf樣品中的pgsn活性顯著低于血漿中(pg/ml，69±18對(duì)比103±23，p＝0.04)，這表明其在局部消耗。

材料和方法

免疫印跡：在1x樣品緩沖液(sb，20％甘油、4.6％tris、0.25mtris-鹽酸、0.01％溴酚藍(lán)、10％v/v的2-巰基乙醇、ph6.8)中按照1∶100稀釋貧血小板血漿或滑液用于凝溶膠蛋白亞型檢測(cè)，簡(jiǎn)單進(jìn)行渦旋混合，在100℃下煮沸10分鐘。在改進(jìn)的laemmli系統(tǒng)中，在10％sds-page(十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳)上分析樣品(10μl)。分別將血小板裂解物(2x10^8/ml，5μl)和人重組pgsn作為pgsn的陰性和陽(yáng)性對(duì)照。在120v下將蛋白質(zhì)分離1.5小時(shí)。轉(zhuǎn)印之前，將immobilonp膜(pvdf，0.45μm；milliporecorp.，bedford，ma)在甲醇中浸泡1分鐘，在轉(zhuǎn)移緩沖液(192mm甘氨酸、25mmtris、0.1％十二烷基硫酸鈉、20％甲醇)中浸泡5分鐘。在可變電壓、1a下進(jìn)行轉(zhuǎn)印，持續(xù)90分鐘。4℃下，在含有0.05％吐溫-20、5％carnation脫脂奶粉和0.05％疊氮化鈉ph7.4的pbs中封閉膜過(guò)夜。針對(duì)pgsn，使用特異性抗人血漿亞型的多克隆抗體(1∶2000，2小時(shí)，實(shí)驗(yàn)室制備)。針對(duì)gsn的所有亞型，使用單克隆第一抗體2c4抗凝溶膠蛋白抗體(1∶2500，2小時(shí)，實(shí)驗(yàn)室制備)。所用第二抗體分別為兔抗小鼠igg(h+l)-hrp(1∶5000，80分鐘)和羊抗小鼠igg(h+l)-hrp綴合物(1∶3300，80分鐘，bio-rad，hercules，ca)。孵育之間，在含0.05％吐溫-20的pbs中將膜漂洗3次。

用westpico供檢測(cè)hrp的化學(xué)發(fā)光底物進(jìn)行化學(xué)發(fā)光檢測(cè)(pierce，rockford，il)。將膜暴露于各2ml的westpico穩(wěn)定過(guò)氧化物溶液和westpico魯米諾/增強(qiáng)劑溶液，持續(xù)2分鐘。在fbxc810放射自顯影盒(fischerbiotech，pittsburgh，pa)中，用hyblotcl放射自顯影膠片(denvillescientific，inc.，metuchen，nj)暴露于膜1分鐘。用m35ax-omat處理器(柯達(dá))顯影膠片。

實(shí)施例3：pgsn在化膿性關(guān)節(jié)炎/膿毒癥試驗(yàn)小鼠模型的早期階段下降。

循環(huán)中pgsn的水平在鏈球菌和葡萄球菌感染期間均下降。這種下降在疾病時(shí)程中的早期就發(fā)生了，細(xì)菌接種于關(guān)節(jié)炎和膿毒癥組的動(dòng)物后2天開(kāi)始。注射之前(0天)，小鼠的平均pgsn水平是200±20mg/l。到第2天時(shí)，對(duì)于關(guān)節(jié)炎金黃色葡萄球菌(s.aureus)處理的(7x10^6cfu/小鼠)動(dòng)物，pgsn水平下降到138±16mg/l；對(duì)于膿毒癥金黃色葡萄球菌(s.aureus)注射的動(dòng)物(3.5x10^7cfu/小鼠)為157+15mg/l；以及對(duì)于注射無(wú)乳鏈球菌(streptococcusagalactiae)(str.agalactiae)的動(dòng)物(1x10^7cfu/4、鼠)為152±15mg/l。第9天時(shí)，pgsn水平分別為141±21、151±15和124±13mg/l。在第9天時(shí)，只有注射鏈球菌的動(dòng)物表現(xiàn)出循環(huán)pgsn水平的進(jìn)一步降低。pgsn的下降和感染強(qiáng)度無(wú)關(guān)，因?yàn)槭┯媚摱景Y劑量(高出關(guān)節(jié)炎劑量5倍)之后pgsn濃度不低于在關(guān)節(jié)炎劑量之小鼠中觀察到的量，這導(dǎo)致更高的死亡率，。

材料和方法

金黃色葡萄球菌關(guān)節(jié)炎及膿毒癥的誘導(dǎo)：5-6周齡的雌性nmri小鼠購(gòu)自alab(stockholm，sweden)，飼養(yǎng)于大學(xué)風(fēng)濕病系的動(dòng)物房中。在溫度和光照的標(biāo)準(zhǔn)條件下，每籠安置10-11只動(dòng)物，飼喂標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)飼料并隨意飲水。金黃色葡萄球菌(s.aureus)ls-1株(最初分離自自發(fā)性關(guān)節(jié)炎nzbxw小鼠的腫脹關(guān)節(jié))、newman株以及無(wú)乳鏈球菌(str.agalactiae)6313株(屬于血清型iii的臨床分離株)用于化膿性關(guān)節(jié)炎和膿毒癥的誘導(dǎo)。在含有5％牛血清白蛋白和10％二甲基亞砜的pbs(0.13m氯化鈉、10mm磷酸鈉、ph7.4)中在-20℃下冷凍保存細(xì)菌備用。注射前，將細(xì)菌溶液解凍，用pbs漂洗兩次，用pbs將其調(diào)整到期望濃度。用懸浮于0.2mlpbs中的金黃色葡萄球菌或無(wú)乳鏈球菌經(jīng)尾靜脈注射入小鼠。確定剩余溶液中的存活數(shù)以檢查注射細(xì)菌的確切數(shù)目，并以集落形成單位(cfu/ml)表示。

在8-9天的觀察期期間，通過(guò)評(píng)價(jià)關(guān)節(jié)外觀、重量、整體外觀、警覺(jué)性和皮膚異常來(lái)對(duì)所有小鼠單獨(dú)進(jìn)行監(jiān)測(cè)。在不含抗凝劑的無(wú)菌管中，從尾靜脈獲得血液樣品，保持6-8小時(shí)使其凝結(jié)。樣品在3000xg下離心15分鐘，將血清等分并冷凍保存在-70℃下備用。

實(shí)驗(yàn)方案：通過(guò)靜脈注射(i.v.)，20只小鼠獲得化膿性(ls-1，4x10⁷cfu/鼠，n＝10)或關(guān)節(jié)炎性(7x10⁶cfu/鼠，n＝10)劑量的金黃色葡萄球菌。另外10只小鼠通過(guò)靜脈注射獲得化膿性劑量的無(wú)乳鏈球菌(1x10⁶cfu/鼠)。在-3、2、4、6和9天的時(shí)候，通過(guò)尾靜脈切割收集血液樣品用于確定pgsn水平。在第9天時(shí)，通過(guò)頸椎脫臼法將所有小鼠處死。用和人樣品相同的方法確定pgsn水平(芘肌動(dòng)蛋白成核測(cè)定)。

實(shí)施例4：向小鼠補(bǔ)充pgsn可延遲關(guān)節(jié)炎的發(fā)展。

細(xì)菌接種(4x10⁷/ml)之前立即開(kāi)始以24h間隔持續(xù)7天向小鼠補(bǔ)充重組凝溶膠蛋白。5只小鼠接受凝溶膠蛋白，7只小鼠接受pbs并用作對(duì)照。在葡萄球菌感染的頭9天，在體重減輕、存活率或關(guān)節(jié)炎發(fā)展方面，凝溶膠蛋白-處理組和對(duì)照組間沒(méi)有觀察到差異。然而，在第3天時(shí)，凝溶膠蛋白-處理組中發(fā)生關(guān)節(jié)炎的更少(1只處理對(duì)比4只未處理-見(jiàn)表1)。

表1.靜脈注射感染金黃色葡萄球菌的nmri小鼠中重量、存活和關(guān)節(jié)炎發(fā)生的動(dòng)力學(xué)。g＝血漿凝溶膠蛋白，c＝對(duì)照。

材料和方法

用化膿性劑量的金黃色葡萄球菌(newman，4x10⁷cfu/小鼠)靜脈注射(i.v.)12只小鼠。在0-7天時(shí)5只小鼠通過(guò)腹膜內(nèi)注射(i.p.)接受重組人pgsn，而其余7只小鼠接受pbs。對(duì)小鼠進(jìn)行單獨(dú)監(jiān)測(cè)直至第28天，記錄關(guān)節(jié)炎征兆、體重、整體外觀和警覺(jué)性。

由biogen-idec，inc.(cambridge，ma)在大腸桿菌中生產(chǎn)重組pgsn，用gssg進(jìn)行重折疊，配制在0.1mnacl和1mmcacl2中，在-70℃下保存?zhèn)溆?。用?xì)菌進(jìn)行攻毒前1小時(shí)，向小鼠i.p.注射重組pgsn(6mg/鼠)，并且以24小時(shí)間隔持續(xù)7天(3mg/鼠)。對(duì)照接受相應(yīng)體積的pbs。

實(shí)施例5：

在膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎(cia)的嚙齒動(dòng)物模型(一種類(lèi)似類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的自身免疫模型)上檢驗(yàn)施用凝溶膠蛋白能夠影響炎癥過(guò)程的假說(shuō)。通過(guò)用在弗氏完全佐劑中的異源或同源ii型膠原(約50微克)皮內(nèi)引發(fā)，并且兩周之后用在弗氏不完全佐劑中的相同量的ii型膠原加強(qiáng)，在純系dba/1雄性小鼠中可誘導(dǎo)cia。引發(fā)給藥后約3周發(fā)生關(guān)節(jié)炎，并且引發(fā)后8周內(nèi)達(dá)到最大值。小鼠具有高水平的ii型膠原特異性抗體，ii型膠原特異性t細(xì)胞以及全身炎癥表現(xiàn)(如產(chǎn)生il-6、tnf等)。在關(guān)節(jié)局部觀察到強(qiáng)烈的炎癥滲透物(由t細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和成纖維細(xì)胞構(gòu)成)以及軟骨和軟骨下骨的嚴(yán)重破壞。這些特征很好地模仿了人類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎中所見(jiàn)的過(guò)程(myersetal.，lifesciences61.p1861-1878，1997)。

在治療測(cè)試中，一組測(cè)試動(dòng)物，例如，從治療開(kāi)始起第十天接受一次(1x)或者在第2、5和10天(3x)接受三次的皮下8mg牛血清白蛋白或8mg重組人血漿凝溶膠蛋白。以前已經(jīng)顯示，這種施用途徑和劑量可以將因膿毒癥減少50％的凝溶膠蛋白水平提高到正常水平。測(cè)量疾病的幾種參數(shù)(如臨床征兆和癥狀、發(fā)作、進(jìn)展、嚴(yán)重程度以及癥狀緩解)。

總之，我們的發(fā)現(xiàn)從兩個(gè)方面支持所提出的假說(shuō)，即血漿凝溶膠蛋白水平的降低在炎性疾病(如類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎)表現(xiàn)之前出現(xiàn)，以及用血漿凝溶膠蛋白系統(tǒng)性處理可以預(yù)防和/或抑制這些表現(xiàn)。這些觀察的一個(gè)臨床關(guān)聯(lián)是連續(xù)監(jiān)測(cè)血漿凝溶膠蛋白水平可以成為炎性疾病(如類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎)控制策略的一部分，從而標(biāo)明何時(shí)應(yīng)當(dāng)加強(qiáng)治療。另一個(gè)關(guān)聯(lián)是，預(yù)防性提高血漿凝溶膠蛋白水平可能保護(hù)患者免于炎癥后遺癥。

盡管無(wú)意受任何具體機(jī)制和理論限制，推測(cè)血漿凝溶膠蛋白在炎性疾病(如類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(ra))期間從血液中耗盡，并且定位或停留在損傷/炎癥部位(類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎中的關(guān)節(jié)腔)。認(rèn)為血漿凝溶膠蛋白在炎癥部位通過(guò)結(jié)合炎癥介質(zhì)來(lái)發(fā)揮作用，并通過(guò)抑制它們對(duì)細(xì)胞受體的作用來(lái)防止其引起進(jìn)一步破壞。這得到以下事實(shí)的支持，即血漿凝溶膠蛋白在體外結(jié)合一些炎癥介質(zhì)，如溶血磷脂酸(lpa)、aβ(阿爾茨海默)肽、二腺苷5′，5″′-p1，p3-三磷酸(ap3a)、纖連蛋白、纖維蛋白原和脂多糖(lps)，并降低對(duì)血小板活化因子(paf)的某些反應(yīng)。此外，發(fā)炎關(guān)節(jié)處的受損細(xì)胞釋放肌動(dòng)蛋白，并且凝溶膠蛋白結(jié)合肌動(dòng)蛋白。凝溶膠蛋白可能通過(guò)切斷纖維狀肌動(dòng)蛋白而具有保護(hù)性作用，否則纖維狀肌動(dòng)蛋白可能是有毒性的。我們認(rèn)為凝溶膠蛋白具有抗炎作用，但當(dāng)炎癥嚴(yán)重且長(zhǎng)期(如在類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎中)時(shí)，補(bǔ)充凝溶膠蛋白可能有利于減少或治療炎癥。將凝溶膠蛋白停留或募集到炎癥部位(如類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎中的關(guān)節(jié)腔)可以解釋其血漿水平的降低，盡管其他的解釋也是可能的。

等同方案

認(rèn)為上述書(shū)面說(shuō)明足以使本領(lǐng)域技術(shù)人員實(shí)施本發(fā)明。本發(fā)明不限于實(shí)施例所提供的范圍，因?yàn)閷?shí)施例僅意圖舉例說(shuō)明本發(fā)明的一個(gè)或更多方面。其他功能上等同的實(shí)施方案被認(rèn)為是在本發(fā)明的范圍內(nèi)。除了本文所示和描述的以外，基于上述說(shuō)明，可知本發(fā)明的各種變化對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見(jiàn)的。本發(fā)明的每一限定可以包括本發(fā)明的各種變化。因此可以預(yù)期，涉及任何一種要素或要素組合的本發(fā)明的各種限定可以包括在本發(fā)明的每個(gè)方面中。本發(fā)明的應(yīng)用不限于附圖中所列或舉例說(shuō)明的構(gòu)建細(xì)節(jié)以及組成安排。本發(fā)明能夠有其他實(shí)施方案，并且能夠以各種方式實(shí)現(xiàn)或?qū)嵤?/p>

此外，此處所用措辭和用語(yǔ)用于描述性目的，不應(yīng)當(dāng)被視為是限制性的。使用“包括”、“包含”或“具有”、“含有”、“涉及”及其變化意思是包括其后所列的項(xiàng)目及其等同方案以及另外的項(xiàng)目。

本申請(qǐng)所引用的所有參考文獻(xiàn)、專(zhuān)利和專(zhuān)利申請(qǐng)通過(guò)引用全部并入本文。

以下實(shí)施方案對(duì)應(yīng)于原申請(qǐng)的權(quán)利要求書(shū)：

1.表征對(duì)象未來(lái)發(fā)生炎性疾病的風(fēng)險(xiǎn)特征的方法，其包括：

獲得所述對(duì)象中的凝溶膠蛋白水平，

將所述凝溶膠蛋白水平與預(yù)定值進(jìn)行比較，和

基于所述凝溶膠蛋白水平與所述預(yù)定值的比較來(lái)表征所述對(duì)象發(fā)生炎性疾病的風(fēng)險(xiǎn)特征，其中凝溶膠蛋白水平處于或低于該預(yù)定水平指示所述對(duì)象有升高的風(fēng)險(xiǎn)發(fā)生該炎性疾病，以及其中凝溶膠蛋白水平處于或高于該預(yù)定水平則指示所述對(duì)象沒(méi)有升高的風(fēng)險(xiǎn)發(fā)生該炎性疾病。

2.實(shí)施方案1的方法，其中所述炎性疾病是關(guān)節(jié)炎、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、哮喘、炎性腸病(克羅恩氏病或潰瘍性結(jié)腸炎)、慢性阻塞性肺病(copd)、過(guò)敏性鼻炎、血管炎(結(jié)節(jié)性多動(dòng)脈炎、顳動(dòng)脈炎、韋格納氏肉芽腫、高安氏動(dòng)脈炎或白塞氏綜合征)、炎性神經(jīng)病、牛皮癬、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(sle)、慢性甲狀腺炎、橋本氏甲狀腺炎、阿狄森氏病、風(fēng)濕性多肌痛、干燥綜合征或churg-strauss綜合征。

3.實(shí)施方案2的方法，其中所述炎性疾病是類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。

4.實(shí)施方案1的方法，其中所述凝溶膠蛋白水平是所述對(duì)象體液中的水平。

5.實(shí)施方案4的方法，其中所述體液是血、血漿、血清、尿、滑液或肺泡液。

6.實(shí)施方案1的方法，其中所述凝溶膠蛋白水平是所述對(duì)象身體組織中的水平。

7.實(shí)施方案6的方法，其中所述身體組織是關(guān)節(jié)、胃腸道、甲狀腺、腎上腺、血管、肺、腎、心臟、皮膚、眼、腦、胰腺、肝臟、神經(jīng)或肌肉組織。

8.實(shí)施方案1的方法，其中所述預(yù)定值是約250mg/l血漿或更低。

9.實(shí)施方案1的方法，其中所述對(duì)象是表面上健康的對(duì)象。

10.實(shí)施方案1的方法，還包括實(shí)施一或更多次測(cè)試以評(píng)價(jià)所述炎性疾病。

11.實(shí)施方案10的方法，其中所述測(cè)試是測(cè)量所述對(duì)象中炎癥標(biāo)志物的水平。

12.實(shí)施方案11的方法，其中所述炎癥標(biāo)志物是crp、可溶性細(xì)胞間粘附分子(sicam-1)、icam3、bl-cam、lfa-2、vcam-1、ncam、pecam、纖維蛋白原、血清淀粉樣蛋白a(saa)、脂蛋白相關(guān)的磷脂酶a2(lppla2)、scd40配體(scd40l)、髓過(guò)氧化物酶、白介素-6(il-6)或白介素-8(il-8)。

13.表征對(duì)象未來(lái)發(fā)生炎性疾病的風(fēng)險(xiǎn)特征的方法，其包括：

獲得所述對(duì)象中的凝溶膠蛋白水平，

將所述凝溶膠蛋白水平與第一預(yù)定值進(jìn)行比較以建立第一風(fēng)險(xiǎn)值，

獲得所述對(duì)象中第二炎癥標(biāo)志物的水平，

將所述第二炎癥標(biāo)志物的水平與第二預(yù)定值進(jìn)行比較以建立第二風(fēng)險(xiǎn)值，和

基于所述第一風(fēng)險(xiǎn)值和第二風(fēng)險(xiǎn)值的組合來(lái)表征所述對(duì)象發(fā)生所述炎性疾病的風(fēng)險(xiǎn)特征，其中所述第一風(fēng)險(xiǎn)值和第二風(fēng)險(xiǎn)值的組合建立不同于所述第一和第二風(fēng)險(xiǎn)值的第三風(fēng)險(xiǎn)值。

14.實(shí)施方案13的方法，其中所述對(duì)象是表面上健康的對(duì)象。

15.實(shí)施方案13的方法，其中所述第一預(yù)定值是約250mg/l血漿或更低。

16.實(shí)施方案13的方法，其中所述第一預(yù)定值是多個(gè)預(yù)定的凝溶膠蛋白水平范圍，所述多個(gè)范圍之一低于約250mg/l血漿，所述范圍中另一個(gè)高于約250mg/l血漿，并且其中所述比較步驟包括確定所述對(duì)象的凝溶膠蛋白水平落入所述多個(gè)預(yù)定凝溶膠蛋白水平范圍中的哪個(gè)之內(nèi)。

17.實(shí)施方案13的方法，其中所述炎性疾病是關(guān)節(jié)炎、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、哮喘、炎性腸病(克羅恩氏病或潰瘍性結(jié)腸炎)、慢性阻塞性肺病(copd)、過(guò)敏性鼻炎、血管炎(結(jié)節(jié)性多動(dòng)脈炎、顳動(dòng)脈炎、韋格納氏肉芽腫、高安氏動(dòng)脈炎或白塞氏綜合征)、炎性神經(jīng)病、牛皮癬、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(sle)、慢性甲狀腺炎、橋本氏甲狀腺炎、阿狄森氏病、風(fēng)濕性多肌痛、干燥綜合征或churg-strauss綜合征。

18.實(shí)施方案17的方法，其中所述炎性疾病是類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。

19.治療患有炎性疾病或有發(fā)生炎性疾病之風(fēng)險(xiǎn)的對(duì)象的方法，其包括：

向需要這種治療的對(duì)象施用有效量的凝溶膠蛋白以治療所述對(duì)象。

20.治療患有炎性疾病或有發(fā)生炎性疾病之風(fēng)險(xiǎn)的對(duì)象的方法，其包括：

向需要這種治療的對(duì)象施用有效量的凝溶膠蛋白以將所述對(duì)象中的凝溶膠蛋白水平提高到預(yù)定值之上。

21.實(shí)施方案19或20的方法，其中所述對(duì)象在其它方面沒(méi)有需要用凝溶膠蛋白治療的適應(yīng)癥。

22.實(shí)施方案19或20的方法，其中所述炎性疾病是關(guān)節(jié)炎、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、哮喘、炎性腸病(克羅恩氏病或潰瘍性結(jié)腸炎)、慢性阻塞性肺病(copd)、過(guò)敏性鼻炎、血管炎(結(jié)節(jié)性多動(dòng)脈炎、顳動(dòng)脈炎、韋格納氏肉芽腫、高安氏動(dòng)脈炎或白塞氏綜合征)、炎性神經(jīng)病、牛皮癬、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(sle)、慢性甲狀腺炎、橋本氏甲狀腺炎、阿狄森氏病、風(fēng)濕性多肌痛、干燥綜合征或churg-strauss綜合征。

23.實(shí)施方案22的方法，其中所述炎性疾病是類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。

24.實(shí)施方案19或20的方法，其中所述凝溶膠蛋白是血漿凝溶膠蛋白(pgsn)、胞漿凝溶膠蛋白(cgsn)、絨毛蛋白樣蛋白、絨毛蛋白、capg、非飛行蛋白質(zhì)、截?cái)嗟鞍?、肌割蛋白、微絲肌割蛋白、原絨毛蛋白或超絨毛蛋白。

25.實(shí)施方案19或20的方法，其中經(jīng)口服、舌下、含服、鼻內(nèi)、靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、腹膜內(nèi)、皮下或局部施用所述凝溶膠蛋白。

26.實(shí)施方案19或20的方法，其中預(yù)防性施用所述凝溶膠蛋白。

27.實(shí)施方案19、20或23的方法，其還包括施用用于治療所述炎性疾病的第二藥劑。

28.實(shí)施方案27的方法，其中所述用于治療所述炎性疾病的第二藥劑是阿氯芬酸，二丙酸阿氯米松，醋苯阿爾孕酮，阿爾法淀粉酶，阿西納發(fā)，安西非特，氨芬酸鈉，鹽酸氨普立糖，阿那白滯素，艾利洛克，阿尼扎芬，阿扎丙酮，巴柳氮二鈉，芐達(dá)酸，苯噁洛芬，鹽酸芐達(dá)明，菠蘿蛋白酶，溴四拉莫，布地縮松，卡洛芬，環(huán)洛芬，西諾戊宗，氯噻托酸，丙酸氯倍他索，丁酸氯倍氟松，氯苯吡乙酸，丙酸氯替卡松，醋酸可美薩松，去氧可的松，環(huán)加氧酶-2(cox-2)抑制劑，去氟可特，待索利德，去氧米松，二丙酸地塞米松，雙氯芬酸鉀，雙氯芬酸鈉，雙醋二氟松，二氟米酮鈉，雙氟尼酸，雙氟潑龍酯，雙酞嗪酮，二甲基亞砜，丙縮氫炎松，因甲羥松，恩莫單抗，艾洛利康鈉，甲氧嘧唑，依托度酸，依托芬那酯，非必拉克，非那莫，芬布芬，二氯苯氧苯乙酸，氯環(huán)苯乙酸，芬度柳，苯吡噁二酮，芬噻唑酸，氟苯哌酮，氟扎可松，氟芬那酸，氟咪唑，醋酸氟尼縮松，氟尼克辛，氟芐煙酸，氟可丁酯，氟氫縮松醋酸酯，苯氟喹酮，氟比洛芬，氟瑞托芬，丙酸氟地松，呋拉布洛芬，丁酸酰氧芴，哈西奈德，丙酸鹵倍他索，醋酸鹵潑尼松，布芬酸，布洛芬，布洛芬鋁，皮考布洛芬，伊洛達(dá)普，吲哚美辛，吲哚美辛鈉，吲哚布洛芬，吲哚克索，吲四唑，醋酸異氟潑尼松，伊索克酸，伊索昔康，酮基布洛芬，鹽酸羅非咪唑，氯諾昔康，依碳氯替潑諾，甲氯芬那酸鈉，甲氯芬那酸，甲氯松二丁酯，甲芬那酸，美沙拉秦，甲塞克那唑，磺庚甲潑尼松龍，莫尼氟酯，萘丁美酮，萘普生，萘普生鈉，萘普醇，尼馬宗，奧沙拉秦鈉，奧古蛋白，歐哌洛星，奧沙普秦，氧苯丁唑，鹽酸雷尼托林，戊聚糖多硫酸鈉，保泰松甘油酸鈉，哌非尼酮，吡羅昔康，肉桂酸吡羅昔康，吡羅昔康乙醇胺，吡氯布洛芬，潑那扎特，叔丁非隆，丙哚酸，丙喹酮，普咯沙唑，枸櫞酸普咯沙唑，利美索龍，諾馬及特，柳膽立司，沙那西定，水楊酰水楊酸，血根氯銨，氯唑噁酮，絲炎痛，噻氧噻嗪，舒林酸，舒洛芬，他美達(dá)辛，他尼氟酯，塔羅賽特，泰布芬隆，替尼達(dá)普，替尼達(dá)普鈉，替諾昔康，替昔康，芐叉異喹酮，四氫達(dá)明，噻匹萊克，特戊酸硫氫可的松，托美汀，托美汀鈉，三氯氟松，三氟米酯，疊氮吲酸或佐美酸鈉。

29.實(shí)施方案23的方法，其還包括施用用于治療類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的第二藥劑。

30.實(shí)施方案29的方法，其中所述用于治療類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的第二藥劑是羥基氯喹(plaquenil)、氯喹(aralen)、氨甲蝶呤、柳氮磺胺吡啶(azulfidine)、來(lái)氟米特(arava)、硫唑嘌呤(依木蘭)、青霉胺(cuprimine或depen)、金鹽(ridaura或aurolate)、米諾環(huán)素(dynacin或米諾星)、環(huán)孢菌素(neoral或sandimmune)、環(huán)磷酰胺(cytoxan或neosar)、依那西普(enbrel)、英夫利昔單抗(remicade)、阿那白滯素(kineret)或阿達(dá)木單抗(humira)。

31.治療對(duì)象以降低炎性疾病之風(fēng)險(xiǎn)的方法，其包括

基于已知對(duì)象具有低于正常水平的凝溶膠蛋白來(lái)選擇對(duì)象，和

向所述對(duì)象施用有效量的凝溶膠蛋白和/或第二藥劑以降低該對(duì)象發(fā)生炎性疾病的風(fēng)險(xiǎn)。

32.治療對(duì)象以降低炎性疾病之風(fēng)險(xiǎn)的方法，其包括

基于已知對(duì)象具有低于正常水平的凝溶膠蛋白來(lái)選擇對(duì)象，和

向所述對(duì)象施用有效量的凝溶膠蛋白和/或第二藥劑以將該對(duì)象中的凝溶膠蛋白水平提高到預(yù)定值之上。

33.實(shí)施方案31或32的方法，其中所述對(duì)象在其它方面沒(méi)有需要用凝溶膠蛋白治療的適應(yīng)癥。

34.實(shí)施方案31或32的方法，其中所述炎性疾病是關(guān)節(jié)炎、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、哮喘、炎性腸病(克羅恩氏病或潰瘍性結(jié)腸炎)、慢性阻塞性肺病(copd)、過(guò)敏性鼻炎、血管炎(結(jié)節(jié)性多動(dòng)脈炎、顳動(dòng)脈炎、韋格納氏肉芽腫、高安氏動(dòng)脈炎或白塞氏綜合征)、炎性神經(jīng)病、牛皮癬、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(sle)、慢性甲狀腺炎、橋本氏甲狀腺炎、阿狄森氏病、風(fēng)濕性多肌痛、干燥綜合征或churg-strauss綜合征。

35.實(shí)施方案34的方法，其中所述炎性疾病是類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。

36.實(shí)施方案31或32的方法，其中所述凝溶膠蛋白是血漿凝溶膠蛋白(pgsn)、胞漿凝溶膠蛋白(cgsn)、絨毛蛋白樣蛋白、絨毛蛋白、capg、非飛行蛋白質(zhì)、截?cái)嗟鞍?、肌割蛋白、微絲肌割蛋白、原絨毛蛋白或超絨毛蛋白。

37.實(shí)施方案31或32的方法，其中所述對(duì)象是表面上健康的。

38.實(shí)施方案31、32或35的方法，其還包括施用用于治療所述炎性疾病的第二藥劑。

39.實(shí)施方案38的方法，其中所述用于治療所述炎性疾病的第二藥劑是阿氯芬酸，二丙酸阿氯米松，醋苯阿爾孕酮，阿爾法淀粉酶，阿西納發(fā)，安西非特，氨芬酸鈉，鹽酸氨普立糖，阿那白滯素，艾利洛克，阿尼扎芬，阿扎丙酮，巴柳氮二鈉，芐達(dá)酸，苯噁洛芬，鹽酸芐達(dá)明，菠蘿蛋白酶，溴四拉莫，布地縮松，卡洛芬，環(huán)洛芬，西諾戊宗，氯噻托酸，丙酸氯倍他索，丁酸氯倍氟松，氯苯吡乙酸，丙酸氯替卡松，醋酸可美薩松，去氧可的松，環(huán)加氧酶-2(cox-2)抑制劑，去氟可特，待索利德，去氧米松，二丙酸地塞米松，雙氯芬酸鉀，雙氯芬酸鈉，雙醋二氟松，二氟米酮鈉，雙氟尼酸，雙氟潑龍酯，雙酞嗪酮，二甲基亞砜，丙縮氫炎松，因甲羥松，恩莫單抗，艾洛利康鈉，甲氧嘧唑，依托度酸，依托芬那酯，非必拉克，非那莫，芬布芬，二氯苯氧苯乙酸，氯環(huán)苯乙酸，芬度柳，苯吡噁二酮，芬噻唑酸，氟苯哌酮，氟扎可松，氟芬那酸，氟咪唑，醋酸氟尼縮松，氟尼克辛，氟芐煙酸，氟可丁酯，氟氫縮松醋酸酯，苯氟喹酮，氟比洛芬，氟瑞托芬，丙酸氟地松，呋拉布洛芬，丁酸酰氧芴，哈西奈德，丙酸鹵倍他索，醋酸鹵潑尼松，布芬酸，布洛芬，布洛芬鋁，皮考布洛芬，伊洛達(dá)普，吲哚美辛，吲哚美辛鈉，吲哚布洛芬，吲哚克索，吲四唑，醋酸異氟潑尼松，伊索克酸，伊索昔康，酮基布洛芬，鹽酸羅非咪唑，氯諾昔康，依碳氯替潑諾，甲氯芬那酸鈉，甲氯芬那酸，甲氯松二丁酯，甲芬那酸，美沙拉秦，甲塞克那唑，磺庚甲潑尼松龍，莫尼氟酯，萘丁美酮，萘普生，萘普生鈉，萘普醇，尼馬宗，奧沙拉秦鈉，奧古蛋白，歐哌洛星，奧沙普秦，氧苯丁唑，鹽酸雷尼托林，戊聚糖多硫酸鈉，保泰松甘油酸鈉，哌非尼酮，吡羅昔康，肉桂酸吡羅昔康，吡羅昔康乙醇胺，吡氯布洛芬，潑那扎特，叔丁非隆，丙哚酸，丙喹酮，普咯沙唑，枸櫞酸普咯沙唑，利美索龍，諾馬及特，柳膽立司，沙那西定，水楊酰水楊酸，血根氯銨，氯唑噁酮，絲炎痛，噻氧噻嗪，舒林酸，舒洛芬，他美達(dá)辛，他尼氟酯，塔羅賽特，泰布芬隆，替尼達(dá)普，替尼達(dá)普鈉，替諾昔康，替昔康，芐叉異喹酮，四氫達(dá)明，噻匹萊克，特戊酸硫氫可的松，托美汀，托美汀鈉，三氯氟松，三氟米酯，疊氮吲酸或佐美酸鈉。

40.實(shí)施方案35的方法，其還包括施用用于治療類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的第二藥劑。

41.實(shí)施方案40的方法，其中所述用于治療類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的第二藥劑是羥基氯喹(plaquenil)、氯喹(aralen)、氨甲蝶呤、柳氮磺胺吡啶(azulfidine)、來(lái)氟米特(arava)、硫唑嘌呤(依木蘭)、青霉胺(cuprimine或depen)、金鹽(ridaura或aurolate)、米諾環(huán)素(dynacin或米諾星)、環(huán)孢菌素(neoral或sandimmune)、環(huán)磷酰胺(cytoxan或neosar)、依那西普(enbrel)、英夫利昔單抗(remicade)、阿那白滯素(kineret)或阿達(dá)木單抗(humira)。

42.治療具有低于正常水平之凝溶膠蛋白的對(duì)象的方法，其包括：

(i)使用用于治療炎性疾病或降低其風(fēng)險(xiǎn)的第一治療來(lái)治療所述對(duì)象，

(ii)獲得所述對(duì)象中的凝溶膠蛋白水平，

(iii)將在(ii)中所得凝溶膠蛋白水平與預(yù)定值進(jìn)行比較，該預(yù)定值對(duì)應(yīng)于預(yù)定的凝溶膠蛋白水平，并且如果未達(dá)到該預(yù)定的凝溶膠蛋白水平，則

(iv)使用用于治療所述炎性疾病或降低其風(fēng)險(xiǎn)的第二藥劑來(lái)治療所述對(duì)象，并重復(fù)(ii)和(iii)直至達(dá)到該預(yù)定的凝溶膠蛋白水平。

43.實(shí)施方案42的方法，其中所述預(yù)定的凝溶膠蛋白水平是表面上健康的對(duì)照群體中的凝溶膠蛋白水平。

44.實(shí)施方案42的方法，其中所述預(yù)定的凝溶膠蛋白水平是約250mg/l血漿或更高。

45.實(shí)施方案42的方法，其中所述炎性疾病是關(guān)節(jié)炎、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、哮喘、炎性腸病(克羅恩氏病或潰瘍性結(jié)腸炎)、慢性阻塞性肺病(copd)、過(guò)敏性鼻炎、血管炎(結(jié)節(jié)性多動(dòng)脈炎、顳動(dòng)脈炎、韋格納氏肉芽腫、高安氏動(dòng)脈炎或白塞氏綜合征)、炎性神經(jīng)病、牛皮癬、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(sle)、慢性甲狀腺炎、橋本氏甲狀腺炎、阿狄森氏病、風(fēng)濕性多肌痛、干燥綜合征或churg-strauss綜合征。

46.實(shí)施方案45的方法，其中所述炎性疾病是類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。

47.實(shí)施方案42的方法，其中所述用于治療所述炎性疾病或降低其風(fēng)險(xiǎn)的第二藥劑是阿氯芬酸，二丙酸阿氯米松，醋苯阿爾孕酮，阿爾法淀粉酶，阿西納發(fā)，安西非特，氨芬酸鈉，鹽酸氨普立糖，阿那白滯素，艾利洛克，阿尼扎芬，阿扎丙酮，巴柳氮二鈉，芐達(dá)酸，苯噁洛芬，鹽酸芐達(dá)明，菠蘿蛋白酶，溴四拉莫，布地縮松，卡洛芬，環(huán)洛芬，西諾戊宗，氯噻托酸，丙酸氯倍他索，丁酸氯倍氟松，氯苯吡乙酸，丙酸氯替卡松，醋酸可美薩松，去氧可的松，環(huán)加氧酶-2(cox-2)抑制劑，去氟可特，待索利德，去氧米松，二丙酸地塞米松，雙氯芬酸鉀，雙氯芬酸鈉，雙醋二氟松，二氟米酮鈉，雙氟尼酸，雙氟潑龍酯，雙酞嗪酮，二甲基亞砜，丙縮氫炎松，因甲羥松，恩莫單抗，艾洛利康鈉，甲氧嘧唑，依托度酸，依托芬那酯，非必拉克，非那莫，芬布芬，二氯苯氧苯乙酸，氯環(huán)苯乙酸，芬度柳，苯吡噁二酮，芬噻唑酸，氟苯哌酮，氟扎可松，氟芬那酸，氟咪唑，醋酸氟尼縮松，氟尼克辛，氟芐煙酸，氟可丁酯，氟氫縮松醋酸酯，苯氟喹酮，氟比洛芬，氟瑞托芬，丙酸氟地松，呋拉布洛芬，丁酸酰氧芴，哈西奈德，丙酸鹵倍他索，醋酸鹵潑尼松，布芬酸，布洛芬，布洛芬鋁，皮考布洛芬，伊洛達(dá)普，吲哚美辛，吲哚美辛鈉，吲哚布洛芬，吲哚克索，吲四唑，醋酸異氟潑尼松，伊索克酸，伊索昔康，酮基布洛芬，鹽酸羅非咪唑，氯諾昔康，依碳氯替潑諾，甲氯芬那酸鈉，甲氯芬那酸，甲氯松二丁酯，甲芬那酸，美沙拉秦，甲塞克那唑，磺庚甲潑尼松龍，莫尼氟酯，萘丁美酮，萘普生，萘普生鈉，萘普醇，尼馬宗，奧沙拉秦鈉，奧古蛋白，歐哌洛星，奧沙普秦，氧苯丁唑，鹽酸雷尼托林，戊聚糖多硫酸鈉，保泰松甘油酸鈉，哌非尼酮，吡羅昔康，肉桂酸吡羅昔康，吡羅昔康乙醇胺，吡氯布洛芬，潑那扎特，叔丁非隆，丙哚酸，丙喹酮，普咯沙唑，枸櫞酸普咯沙唑，利美索龍，諾馬及特，柳膽立司，沙那西定，水楊酰水楊酸，血根氯銨，氯唑噁酮，絲炎痛，噻氧噻嗪，舒林酸，舒洛芬，他美達(dá)辛，他尼氟酯，塔羅賽特，泰布芬隆，替尼達(dá)普，替尼達(dá)普鈉，替諾昔康，替昔康，芐叉異喹酮，四氫達(dá)明，噻匹萊克，特戊酸硫氫可的松，托美汀，托美汀鈉，三氯氟松，三氟米酯，疊氮吲酸或佐美酸鈉。

48.實(shí)施方案46的方法，其還包括施用用于治療類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的第二藥劑。

49.實(shí)施方案48的方法，其中所述用于治療類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的第二藥劑是羥基氯喹(plaquenil)、氯喹(aralen)、氨甲蝶呤、柳氮磺胺吡啶(azulfidine)、來(lái)氟米特(arava)、硫唑嘌呤(依木蘭)、青霉胺(cuprimine或depen)、金鹽(ridaura或aurolate)、米諾環(huán)素(dynacin或米諾星)、環(huán)孢菌素(neoral或sandimmune)、環(huán)磷酰胺(cytoxan或neosar)、依那西普(enbrel)、英夫利昔單抗(remicade)、阿那白滯素(kineret)或阿達(dá)木單抗(humira)。

50.評(píng)價(jià)用于治療對(duì)象中炎性疾病或降低其風(fēng)險(xiǎn)的治療之功效的方法，其包括：

(i)獲得對(duì)象中的凝溶膠蛋白水平，其中所述對(duì)象接受用于治療炎性疾病或降低其風(fēng)險(xiǎn)的藥劑的治療，

(ii)將在(i)中所得的凝溶膠蛋白水平與預(yù)定值進(jìn)行比較，該預(yù)定值對(duì)應(yīng)于表面上健康的對(duì)照群體中的凝溶膠蛋白水平，和

(iii)確定(i)中的凝溶膠蛋白水平是否處于或高于所述預(yù)定水平，所述確定用于指示所述治療是否有效。

51.實(shí)施方案50的方法，其中重復(fù)步驟(i)和步驟(ii)和/或步驟(iii)，以在一段時(shí)間中監(jiān)測(cè)所述對(duì)象的凝溶膠蛋白水平。

52.實(shí)施方案50的方法，其中所述預(yù)定值是約250mg/l血漿或更低。

53.實(shí)施方案50的方法，其中所述藥劑是凝溶膠蛋白，阿氯芬酸，二丙酸阿氯米松，醋苯阿爾孕酮，阿爾法淀粉酶，阿西納發(fā)，安西非特，氨芬酸鈉，鹽酸氨普立糖，阿那白滯素，艾利洛克，阿尼扎芬，阿扎丙酮，巴柳氮二鈉，芐達(dá)酸，苯噁洛芬，鹽酸芐達(dá)明，菠蘿蛋白酶，溴四拉莫，布地縮松，卡洛芬，環(huán)洛芬，西諾戊宗，氯噻托酸，丙酸氯倍他索，丁酸氯倍氟松，氯苯吡乙酸，丙酸氯替卡松，醋酸可美薩松，去氧可的松，環(huán)加氧酶-2(cox-2)抑制劑，去氟可特，待索利德，去氧米松，二丙酸地塞米松，雙氯芬酸鉀，雙氯芬酸鈉，雙醋二氟松，二氟米酮鈉，雙氟尼酸，雙氟潑龍酯，雙酞嗪酮，二甲基亞砜，丙縮氫炎松，因甲羥松，恩莫單抗，艾洛利康鈉，甲氧嘧唑，依托度酸，依托芬那酯，非必拉克，非那莫，芬布芬，二氯苯氧苯乙酸，氯環(huán)苯乙酸，芬度柳，苯吡噁二酮，芬噻唑酸，氟苯哌酮，氟扎可松，氟芬那酸，氟咪唑，醋酸氟尼縮松，氟尼克辛，氟芐煙酸，氟可丁酯，氟氫縮松醋酸酯，苯氟喹酮，氟比洛芬，氟瑞托芬，丙酸氟地松，呋拉布洛芬，丁酸酰氧芴，哈西奈德，丙酸鹵倍他索，醋酸鹵潑尼松，布芬酸，布洛芬，布洛芬鋁，皮考布洛芬，伊洛達(dá)普，吲哚美辛，吲哚美辛鈉，吲哚布洛芬，吲哚克索，吲四唑，醋酸異氟潑尼松，伊索克酸，伊索昔康，酮基布洛芬，鹽酸羅非咪唑，氯諾昔康，依碳氯替潑諾，甲氯芬那酸鈉，甲氯芬那酸，甲氯松二丁酯，甲芬那酸，美沙拉秦，甲塞克那唑，磺庚甲潑尼松龍，莫尼氟酯，萘丁美酮，萘普生，萘普生鈉，萘普醇，尼馬宗，奧沙拉秦鈉，奧古蛋白，歐哌洛星，奧沙普秦，氧苯丁唑，鹽酸雷尼托林，戊聚糖多硫酸鈉，保泰松甘油酸鈉，哌非尼酮，吡羅昔康，肉桂酸吡羅昔康，吡羅昔康乙醇胺，吡氯布洛芬，潑那扎特，叔丁非隆，丙哚酸，丙喹酮，普咯沙唑，枸櫞酸普咯沙唑，利美索龍，諾馬及特，柳膽立司，沙那西定，水楊酰水楊酸，血根氯銨，氯唑噁酮，絲炎痛，噻氧噻嗪，舒林酸，舒洛芬，他美達(dá)辛，他尼氟酯，塔羅賽特，泰布芬隆，替尼達(dá)普，替尼達(dá)普鈉，替諾昔康，替昔康，芐叉異喹酮，四氫達(dá)明，噻匹萊克，特戊酸硫氫可的松，托美汀，托美汀鈉，三氯氟松，三氟米酯，疊氮吲酸，佐美酸鈉，羥基氯喹(plaquenil)，氯喹(aralen)，氨甲蝶呤，柳氮磺胺吡啶(azulfidine)，來(lái)氟米特(arava)，硫唑嘌呤(依木蘭)，青霉胺(cuprimine或depen)，金鹽(ridaura或aurolate)，米諾環(huán)素(dynacin或米諾星)，環(huán)孢菌素(neoral或sandimmune)，環(huán)磷酰胺(cytoxan或neosar)，依那西普(enbrel)，英夫利昔單抗(remicade)，阿那白滯素(kineret)或阿達(dá)木單抗(humira)。

54.決定對(duì)象中治療過(guò)程的方法，其包括：

(i)獲得對(duì)象中的凝溶膠蛋白水平，其中所述對(duì)象接受治療炎性疾病或降低其風(fēng)險(xiǎn)的治療，

(ii)將(i)中所得凝溶膠蛋白水平與預(yù)定值進(jìn)行比較，該預(yù)定值對(duì)應(yīng)于凝溶膠蛋白的某一水平，

(iii)確定(i)中所得的凝溶膠蛋白水平是否處于或低于所述預(yù)定水平，和

(iv)基于這種確定來(lái)決定治療過(guò)程。

55.實(shí)施方案54的方法，其中所述預(yù)定的凝溶膠蛋白水平是表面上健康的對(duì)照群體中的凝溶膠蛋白水平。

56.實(shí)施方案54的方法，其中重復(fù)步驟(i)和步驟(ii)和/或步驟(iii)，以在一段時(shí)間中監(jiān)測(cè)所述對(duì)象的凝溶膠蛋白水平。

57.實(shí)施方案54的方法，其中所述預(yù)定值是約250mg/l血漿或更低。