紫杉醇注射液中紫杉醇的測定方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及定量分析領(lǐng)域，特別涉及紫杉醇注射液中紫杉醇的測定方法，包括下列步驟：采用超高效合相色譜儀檢測待測樣品，得到待測樣品中紫杉醇的質(zhì)量濃度C；超高效合相色譜儀的檢測條件為：色譜柱的直徑為3.0mm、柱長為100mm、填料粒徑為1.7μm，填料為亞乙基橋雜化顆粒；流動相為超臨界二氧化碳和甲醇的混合液，且采用梯度洗脫的方式進(jìn)行洗脫；檢測波長為227nm。在檢測紫杉醇時，不僅可以將紫杉醇與三尖杉寧堿有效地分離，而且可以將紫杉醇與7-表-10-去乙酰基紫杉醇有效地分離。并且經(jīng)試驗證明，本發(fā)明對紫杉醇與以上兩個伴生物的分離度均可達(dá)到4.7以上，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于中國藥典上分離度應(yīng)大于1.0的要求。
【專利說明】紫杉醇注射液中紫杉醇的測定方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及定量分析領(lǐng)域，具體而言，涉及紫杉醇注射液中紫杉醇的測定方法。
【背景技術(shù)】
[0002]紫杉醇是從紫衫或紅豆杉中提取的一種天然抗癌藥，是三環(huán)二萜類化合物，是紅 豆杉屬植物中一種復(fù)雜的次生代謝產(chǎn)物。臨床中常用的紫杉醇制劑是紫杉醇注射液。紫杉 醇注射液是紫杉醇添加適量助溶劑和穩(wěn)定劑制成的滅菌溶液。為了研究紫杉醇注射液中紫 杉醇的含量，以及研究紫杉醇在體內(nèi)的分布、代謝規(guī)律，已建立了許多定性定量測定方法。 其中，應(yīng)用最廣泛的是高效液相色譜法(HPLC )。
[0003]由于紫杉醇與其伴生的紫杉烷類化合物(三尖杉寧堿、7-表-10-去乙酰基紫杉醇 等)在化學(xué)結(jié)構(gòu)和極性方面極為相似，這些伴生物會對紫杉醇的測定產(chǎn)生嚴(yán)重干擾，因此， 為了使測定結(jié)果具有良好的準(zhǔn)確度，通常要求測定方法對紫杉醇與其伴生的紫杉烷類化合 物具有一定的分離度。例如，在《中國藥典》中要求，利用HPLC測定紫杉醇注射液中紫杉醇 的含量時，要求系統(tǒng)適用性試驗至少滿足:紫杉醇與三尖杉寧堿及7-表-10-去乙?；仙?醇的分離度不低于1.0。
[0004]相關(guān)技術(shù)中的HPLC方法測定紫杉醇注射液時，無論是采用十八烷基-硅烷柱，還 是采用氰基柱或苯基柱，對紫杉醇與7-表-10-去乙?；仙即嫉姆蛛x度僅能達(dá)到1.0左 右，即僅能滿足《中國藥典》的要求，而無法達(dá)到更高的分離度，因此，使得HPLC測定紫杉醇 注射液的準(zhǔn)確度受限。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于提供紫杉醇注射液中紫杉醇的測定方法，以解決上述的問題。
[0006]在本發(fā)明的實施例中提供了紫杉醇注射液中紫杉醇的測定方法，包括下列步驟:
[0007]采用超高效合相色譜儀檢測待測樣品，得到待測樣品中紫杉醇的質(zhì)量濃度C ；
[0008]超高效合相色譜儀的檢測條件為:色譜柱的直徑為3.0mm、柱長為100mm、填料粒 徑為1.7pm，填料為亞乙基橋雜化顆粒；流動相為超臨界二氧化碳和甲醇的混合液，采用 梯度洗脫的方式進(jìn)行洗脫，其中，超臨界二氧化碳在不同時間段的體積百分比為:0-0.2min 為90%-94%之間的某一點(diǎn)值，2.5-4.0min為80%_84%之間的某一點(diǎn)值，0.2-2.5min為 0-0.2min所用的點(diǎn)值與2.5-4.0min所用的點(diǎn)值形成的梯度；檢測波長為227nm。
[0009]本發(fā)明上述實施例的紫杉醇注射液中紫杉醇的測定方法，在檢測紫杉醇時，不僅 可以將紫杉醇與三尖杉寧堿有效地分離，而且可以將紫杉醇與7-表-10-去乙?；仙即?有效地分離。并且經(jīng)試驗證明，本發(fā)明對紫杉醇與以上兩個伴生物的分離度均可達(dá)到4.7 以上，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于中國藥典上分離度應(yīng)大于1.0的要求。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0010]圖1示出了本發(fā)明的試驗例中系統(tǒng)適用性的色譜圖；[0011]圖2示出了本發(fā)明的試驗例中紫杉醇注射液的色譜圖；
[0012]圖3示出了本發(fā)明的試驗例中紫杉醇標(biāo)樣濃度與峰面積線性關(guān)系。
【具體實施方式】
[0013]下面通過具體的實施例子并結(jié)合附圖對本發(fā)明做進(jìn)一步的詳細(xì)描述。
[0014]本發(fā)明的一個實施例提供了一種紫杉醇注射液中紫杉醇的測定方法，包括下列步驟:
[0015]采用超高效合相色譜儀檢測待測樣品，得到待測樣品中紫杉醇的質(zhì)量濃度C。
[0016]超高效合相色譜儀的檢測條件為:色譜柱的直徑為3.0mm、柱長為100mm、填料粒徑為1.7 y m，填料為亞乙基橋雜化顆粒；流動相為超臨界二氧化碳和甲醇的混合液，采用梯度洗脫的方式進(jìn)行洗脫，其中，超臨界二氧化碳在不同時間段的體積百分比為:0-0.2min 為90%-94%之間的某一點(diǎn)值，2.5-4.0min為80%_84%之間的某一點(diǎn)值，0.2-2.5min為 0-0.2min所用的點(diǎn)值與2.5-4.0min所用的點(diǎn)值形成的梯度；檢測波長為227nm。
[0017]其中，紫杉醇的分子結(jié)構(gòu)式為:
[0018]
【權(quán)利要求】
1.紫杉醇注射液中紫杉醇的測定方法，其特征在于，包括下列步驟:采用超高效合相色譜儀檢測待測樣品，得到所述待測樣品中紫杉醇的質(zhì)量濃度C ；所述超高效合相色譜儀的檢測條件為:色譜柱的直徑為3.0mm、柱長為100mm、填料粒徑為1.7 y m，填料為亞乙基橋雜化 顆粒；流動相為超臨界二氧化碳和甲醇的混合液，且采用梯度洗脫的方式進(jìn)行洗脫，其 中，超臨界二氧化碳在不同時間段的體積百分比為:0-0.2min為90%_94%之間的某一 點(diǎn)值，2.5-4.0min為80%_84%之間的某一點(diǎn)值，0.2-2.5min為0-0.2min所用的點(diǎn)值與2.5-4.0min所用的點(diǎn)值形成的梯度；檢測波長為227nm。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紫杉醇注射液中紫杉醇的測定方法，其特征在于，所述超高 效合相色譜儀檢測時:補(bǔ)償范圍為300-400nm。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紫杉醇注射液中紫杉醇的測定方法，其特征在于，所述超高 效合相色譜儀檢測時:備壓為 1500-3000psi。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紫杉醇注射液中紫杉醇的測定方法，其特征在于，所述超高 效合相色譜儀檢測時:流速為 1.8-2.5mL/min。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紫杉醇注射液中紫杉醇的測定方法，其特征在于，所述超高 效合相色譜儀檢測時:柱溫為50°C。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紫杉醇注射液中紫杉醇的測定方法，其特征在于，所述超高 效合相色譜儀檢測時:進(jìn)樣體積為0.5-10 u L0
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紫杉醇注射液中紫杉醇的測定方法，其特征在于，所述流 動相中，超臨界二氧化碳在不同時間段的體積百分比為:0-0.2min為92% ；0.2-2.5min為 92-82% 的梯度；2.5-4.0min 為 82%。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的紫杉醇注射液中紫杉醇的測定方法，其特征在于，所述進(jìn)樣 體積為2.0 u L。
9.根據(jù)權(quán)利要求3所述的紫杉醇注射液中紫杉醇的測定方法，其特征在于，所述備壓 為 2200psi。
10.根據(jù)權(quán)利要求4所述的紫杉醇注射液中紫杉醇的測定方法，其特征在于，所述流速 為 2.2mL/min。
【文檔編號】G01N30/02GK103558314SQ201310591217
【公開日】2014年2月5日 申請日期:2013年11月20日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月20日
【發(fā)明者】齊寧利, 李普旺, 龔霄, 孔令學(xué), 楊子明 申請人:中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所