專利名稱：一種丹參注射液的基于組分結構的質量控制檢測方法
技術領域：
本發(fā)明涉及中藥復方制劑的質量控制標準，尤其是一種用于丹參注射液的基于組分結構的質量控制檢測方法領域。
背景技術：
中藥制劑的藥效物質基礎是由多個組分按照一定的構成比組成的具有整體特征的成分群?，F(xiàn)代藥理學和植物化學研究結果表明，中藥制劑發(fā)揮藥效的物質基礎非某單一成分起作用，而是通過多靶點、多成分實現(xiàn)協(xié)同作用。目前，研究人員逐漸意識到中藥制劑物質基礎研究及質量控制不能走傳統(tǒng)的尋求單體的植化途徑，以某活性成分或毒性成分的含量制定質量標準，而是要基于中藥的整體觀，以“組分”為切入點，闡明中藥的物質基礎并最終達到符合整體特點的中藥質量控制的目的。中藥物質基礎“組分結構理論”認為中藥制劑物質基礎是一個有序的整體，具有“三個層次多維結構”，是由多種組分組成，而每一組分內也由多個的成分一定配比構成，組分間與組分內都存在一定的結構特征，這與目前以某指標含量高低來控制中藥制劑質量的方法相比，既實現(xiàn)了可控性，又體現(xiàn)了中藥的整體性。丹參注射液為臨床常用的中藥制劑，具有活血化瘀、理氣開竅、擴張血管和增進冠狀動脈血流量的作用，用于心絞痛、心肌梗死等疾病的預防和治療。丹參注射液主要含有水溶性丹參酚酸類化合物和糖類，如丹參素、原兒茶醛、咖啡酸、去丹參素丹酚酸E1、去丹參素丹酚酸E2、丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸C、丹酚酸D、迷迭香酸等。研究顯示，這些化合物都具有一定的心腦血管保護作用。

發(fā)明內容

發(fā)明目的:本發(fā)明是要依據(jù)中醫(yī)藥整體性和系統(tǒng)性的特點，解決丹參注射液的質量控制的現(xiàn)有不足，提供一種代表組分特征的多維結構質量控制方法。技術方案:—種丹參注射液的基于組分的質量控制檢測方法，該方法的特征為對丹參注射液中酚酸和糖類組分的組分間組成結構和組分內結構進行控制，采用HPLC指紋圖譜、柱前衍生化HPLC及NMR技術測定代表整體性的有限成分，從而整體并系統(tǒng)性地控制丹參注射液組分及成分內成分之間的含量比例。衡量丹參注射液質量的最佳標準為:酚酸組分:糖類組分的含量控制范圍為(1%_95%): (90%-1%);并且丹參酚酸內丹參素、原兒茶醛、咖啡酸、去丹參素丹酚酸E1、去丹參素丹酚酸E2、丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸C、丹酚酸D、迷迭香酸各成分的構成比分別為(1%-95%): (5%-95%): (1%-20%): (1%_20%):(5%-20%): (1%-50%): (5%-20%): (1%-10%): (1%-20%): (1%-20%);酚酸組分和糖類組分的含量總和大于總固形物的35-90% ;酚酸組分的含量不低于總固形物的40-80%。有益效果:中藥制劑產品是由眾多化學成分通過協(xié)同作用發(fā)揮效應。中藥制劑產品的藥效物質基礎是由多組分或多成分構成的某一組分組成，各組分之間的生物活性存在顯著差異，作用靶點及機制也不盡相同；組分內各化合物結構也存在著差異，生物活性也存在著差異，因此，這些組分及成分發(fā)揮最佳藥效的物質基礎構成存在著一定的獨特性，即組分之間或組分內化合物之間存在著獨特的組成結構特征。丹參注射液主要包括酚酸和糖類組分，這些組分具有一定的保護心血管作用，研究顯示丹參酚酸具有神經和腦缺血保護、保護心肌損傷、抗血栓和抑制血小板活化、改善糖尿病血管并發(fā)癥、抑制血管細胞的增殖等作用。糖類也是其功效的物質基礎構成組分之一，丹參糖類具有抗氧化活性和提高小鼠耐缺氧能力，還可通過上調prohibitin蛋白表達發(fā)揮保護H2O2致心肌細胞損傷的作用。因此，對丹參注射液的質量控制，不能僅以丹參素或原兒茶醛來代替整體活性成分。重要的是，構成藥效物質基礎的組成結構特征被忽略。因此，基于組分結構理論，闡明丹參注射液的酚酸和糖類組分間及組分內的結構特征，將實現(xiàn)對丹參注射液質量的真正控制，保證其療效和安全性。本發(fā)明克服了現(xiàn)有的對丹參注射液產品質量控制檢測方法的不足，可能成為一種丹參注射液的質量控制檢測新方法。


圖1丹參注射液多維結構質量控制示意2丹參注射液中酚酸類成分指紋圖譜，(其中1.5-羥甲基糠醛；2.丹參素鈉；3.原兒茶醛；4.咖啡酸；5.去丹參素丹酚酸El; 6.去丹參素丹酚酸E2; 7.丹酚酸D; 8.迷迭香酸；9.丹酚酸B; 10.丹酚酸A;ll，丹酚酸C)圖3250ml: 16g規(guī)格丹參注射液酚酸成分HPLC指紋圖譜圖4250ml: 12g規(guī)格丹參注射液酚酸成分HPLC指紋圖譜圖5丹參注射液糖類水解HPLC圖(1.甘露糖2.葡萄糖3.半乳糖)圖6丹 參糖類組分核磁脈沖序列7丹參糖類組分化學位移8丹參糖類組分面積積分圖
具體實施例方式下面結合實施例對本發(fā)明的用于丹參注射液的基于組分結構的質量控制檢測方法進行詳細說明:實施例 質量控制檢測方法步驟一:測定丹參注射液中的丹參總酚酸含量，對各酚酸成分進行定性定量表征1.儀器:高效液相色譜系統(tǒng)=AgilentllOO美國安捷倫科技公司(配置真空脫氣機，自動進樣器，四元泵，VWD G1314A, DAD G1315B ；Agilent ChemStation A10.02 色譜工作站)；2.色譜條件色譜柱:ShiseidoCapcell pak MG C18 (4.6 X 250mm, 5 μ m)色譜柱及 ShiseidoMG C18保護柱(4.6X12.5mm，5 μ m);流動相為乙腈(A)-0.075%磷酸水，洗脫程序為:乙腈(A)0-17min，5%A-12%A;17_42min，12%A-18%A ;42_46min，18%A_18%A ;46_58min，18%A-27%A ；58-65min,27%A-27%A ;65_75min，27%A_50%A ;75_85min，50%A_80%A。流速為
1.0mL/min ;檢測波長為270nm ;柱溫為30oC ;進樣體積為IO μ L。3.對照品溶液的配制:精密稱取丹參素、原兒茶醛、咖啡酸、去丹參素丹酚酸E1、去丹參素丹酚酸E2、丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸C、丹酚酸D、迷迭香酸共10個酚酸類成分對照品:
權利要求
1.一種丹參注射液的基于組分的質量控制檢測方法，具體方法為對丹參注射液中總酚酸組分和糖類組分的組分間結構和各組分內結構兩個層面進行檢測控制，其特征為采用如下具體步驟: 測定丹參注射液中丹參總酚酸內各酚酸具體的組成、比例和總酚酸含量； 測定丹參注射液中糖類組成和含量； 測定丹參注射液固體物中糖類組分和含量。
2.根據(jù)權利要求1所述的丹參注射液的基于組分的質量控制檢測方法，其特征在于用丹參素、原兒茶醛、咖啡酸、去丹參素丹酚酸E1、去丹參素丹酚酸E2、丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸C、丹酚酸D、迷迭香酸為對照品，用HPLC色譜法來測定總酚酸內各酚酸具體的組成、t匕例和總酚酸含量。
3.根據(jù)權利要求1所述的丹參注射液的基于組分的質量控制檢測方法，其特征在于采用甘露糖，葡萄糖，半乳糖為對照品，用HPLC色譜法來測定糖類組成和含量。
4.根據(jù)權利要求1所述丹參注射液的基于組分的質量控制檢測方法，其特征在于采用磁共振NMR技術來測定 注射液中固體物內糖類的組成和含量。
5.根據(jù)權利要求1所述丹參注射液的基于組分的質量控制檢測方法，其特征為，在該注射液內的酹酸組分:糖類組分的含量控制范圍為(1%_95%): (90%-1%);并且丹參酹酸內丹參素、原兒茶醛、咖啡酸、去丹參素丹酚酸E1、去丹參素丹酚酸E2、丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸C、丹酚酸D、迷迭香酸各成分的構成比分別為(1%-95%): (5%-95%): (1%-20%): (1%_20%): (5%-20%): (1%-50%): (5%-20%): (1%-10%): (1%-20%): (1%-20%);酚酸組分和糖類組分的含量總和大于總固形物的35-90% ;酚酸組分的含量不低于總固形物的40-80%該注射液的質量最佳。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種丹參注射液的基于組分結構的質量控制檢測新方法。本發(fā)明通過丹參注射液內表征整體性質的酚酸組分和糖類組分來判定質量的優(yōu)劣，最佳的標準為酚酸組分糖類組分含量為(1%-95%):(90%-1%)；并且丹參酚酸內丹參素、原兒茶醛、咖啡酸、去丹參素丹酚酸E1、去丹參素丹酚酸E2、丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸C、丹酚酸D、迷迭香酸各成分的構成比分別為(1%-95%):(5%-95%):(1%-20%):(1%-20%):(5%-20%):(1%-50%):(5%-20%):(1%-10%):(1%-20%):(1%-20%)；酚酸組分和糖類組分的含量總和大于總固形物的35-90%；酚酸組分的含量不低于總固形物的40-80%。
文檔編號G01N24/08GK103245687SQ201310164760
公開日2013年8月14日 申請日期2013年5月7日 優(yōu)先權日2013年5月7日
發(fā)明者賈曉斌, 封亮, 王桂有 申請人:江蘇省中醫(yī)藥研究院