專利名稱：髓過氧化物酶測定試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及ー種測定試劑盒，特別是涉及ー種髓過氧化物酶測定試劑盒。
背景技術(shù)：
髓過氧化物酶(myeloperoxidase，MP0)又稱過氧化物酶，是過氧化物酶家族中的 重要成員，是ー種由活化的中性粒細胞、單核細胞、巨噬細胞分泌的白細胞酶，是ー種重要 的含鐵溶酶體，存在于髓系特異性標志，MPO水平與中性粒細胞激活程度之間存在極顯著的 相關(guān)性，是中性粒細胞的活化標志物?，F(xiàn)在，國內(nèi)外生產(chǎn)的髓過氧化物酶試劑盒大量采用了 ELISA方法和選擇抑制法。其中ELISA法是利用基本的抗原-抗體特異性反應(yīng)的原理進行檢 查，但操作過程復(fù)雜而且會直接影響檢測結(jié)果，比如洗板的干凈程度將直接影響測定結(jié)果， 并且該方法無法實現(xiàn)精確定量的目的，測定一個標本需要30分鐘 數(shù)小吋。選擇抑制法， 因這種試劑盒采用三試劑三步測定的基本原理和計算模式，只能在支持(具有)添加三種或 以上試劑同時檢測15分鐘反應(yīng)的全自動生化分析儀測定，使用極為復(fù)雜和不便，而且試劑 中的抑制劑無法保證其對酶活性抑制的特異性和專ー性，測定的唯一性有待考究，在實踐 的過程中發(fā)現(xiàn)其精密度較差。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服上述缺點，提供一種基于抗原-抗體特異性反應(yīng)原理，測 定時間短，特異性好，精密度高，準確度好，且節(jié)約試劑位，可普遍用于各類全自動化分析儀 的髓過氧化物酶測定試劑盒。本發(fā)明髓過氧化物酶測定試劑盒包括兩種試劑，其配合比例按重量百分數(shù)計是， 試劑1:試劑2= 50 90:10 50，其中，
試劑1組分按重量百分數(shù)計是 氯化鈉1 .00 10. 00，
三羥甲基氨基甲烷緩沖液0. 40^10. 00，
表面活性劑0. 05 2. 00，
疊氮鈉0. 02 0. 20，
超純水77. 80 98. 53 ；
試劑2組分按重量百分數(shù)計是 抗體-納米微球復(fù)合物0. 0廣5. 00，
三羥甲基氨基甲烷緩沖液0. 40^10. 00，
表面活性劑0. 05 2. 00，
疊氮鈉0. 02 0. 20，
超純水82. 8 99. 52。其中，抗體-納米微球復(fù)合物是兔抗人MPO-納米復(fù)合物，雞抗人MPO-納米復(fù)合 物，鴨抗人MPO-納米復(fù)合物，鵝抗人MPO-納米復(fù)合物，羊抗人MPO-納米復(fù)合物，鼠抗人MPO-納米復(fù)合物，馬抗人MPO-納米復(fù)合物中的一種。其中，納米材料的直徑中50 5000nm 的微球；表面活性劑是吐溫-20，曲拉通，EMULGEW20中的一種。使用時，按試劑1:試劑2= 50 90:10 50的比例范圍，分別取出試劑1和試劑2，混合后用于測定一份血清標本。
本發(fā)明髓過氧化物酶測定試劑盒的優(yōu)點在于測定時間短，只需要8-10分鐘，特異性好，精密度高，準確度好，且節(jié)約試劑位，可普遍用于各類全自動化分析儀，測定髓過氧化物酶。使用時將含有髓過氧化物酶或者懷疑含有髓過氧化物酶的血清樣品與抗體-納米微球復(fù)合物結(jié)合，產(chǎn)生不溶性的抗原-抗體復(fù)合物，產(chǎn)生一定濁度。濁度高低反映樣品中髓過氧化物酶的含量，通過與同樣處理的髓過氧化物酶配套校準品比較，即可計算出樣品中髓過氧化物酶的含量。
具體實施例方式實施例1
試劑盒按重量百分數(shù)計是試劑1:試劑2=50:50t其中，試劑1組分按重量百分數(shù)計是 氯化鈉1.00 三羥甲基氨基甲烷緩沖液 0. 40 吐溫-20 0. 05 疊氮鈉 0.02 超純水 98. 53 將上述成分混合后即得試劑1。試劑2組分按重量百分數(shù)計是 兔抗人MPO-納米復(fù)合物0.01 三羥甲基氨基甲烷緩沖液 0. 40 吐溫-20 0. 05 疊氮鈉 0.02 超純水 99. 52 將上述成分混合后即得試劑2。實施例2
試劑盒按重量百分數(shù)計是試劑1:試劑2=55:45t其中，
試劑1組分按重量百分數(shù)計是 氯化鈉2. 00
三羥甲基氨基甲烷緩沖液1. 00
曲拉通0. 10
疊氮鈉0.06
超純水96.84
將上述成分混合后即得試劑1。試劑2組分按重量百分數(shù)計是
雞抗人MPO-納米復(fù)合物
1. 00三羥甲基氨基甲烷緩沖液1. 00
曲拉通0. 10
疊氮鈉0.06
超純水97.84 將上述成分混合后即得試劑2。實施例3
試劑盒按重量百分數(shù)計是試劑1:試劑2=60:40t其中，
試劑1組分按重量百分數(shù)計是
氯化鈉3.00
三羥甲基氨基甲烷緩沖液2. 00 EMULGEN120 0. 50
疊氮鈉0. 10
超純水94.40 將上述成分混合后即得試劑1。試劑2組分按重量百分數(shù)計是 鴨抗人MPO-納米復(fù)合物1. 80 三羥甲基氨基甲烷緩沖液2. 00 EMULGEN120 0. 50 疊氮鈉0. 10 超純水95.60 將上述成分混合后即得試劑2。實施例4
試劑盒按重量百分數(shù)計是試劑1:試劑2=65:35t其中，
試劑1組分按重量百分數(shù)計是
氯化鈉5.00
三羥甲基氨基甲烷緩沖液3. 00
吐溫-200. 80
疊氮鈉0. 14 超純水 91.06 將上述成分混合后即得試劑1。試劑2組分按重量百分數(shù)計是 鵝抗人MPO-納米復(fù)合物3. 00 三羥甲基氨基甲烷緩沖液3. 00 吐溫-200. 80 疊氮鈉0. 14 超純水93.06 將上述成分混合后即得試劑2。
實施例5
試劑盒按重量百分數(shù)計是試劑1:試劑2=70:30。其中，
試劑1組分按重量百分數(shù)計是
氯化鈉7.00
三羥甲基氨基甲烷緩沖液4. 00
曲拉通1. 20
疊氮鈉0. 16
超純水87.64 將上述成分混合后即得試劑1。
試劑2組分按重量百分數(shù)數(shù)計是
羊抗人MPO-納米復(fù)合物4. 00
三羥甲基氨基甲烷緩沖液4. 00
曲拉通1. 20
疊氮鈉0. 16
超純水90.64
將上述成分混合后即得試劑2。
實施例6
試劑盒按重量百分數(shù)計是試劑1:試劑2=80:20。其中，
試劑1組分按重量百分數(shù)計是 氯化鈉8.00
三羥甲基氨基甲烷緩沖液8. 00
EMULGEN1201.60
疊氮鈉0. 18
超純水82. 22
將上述成分混合后即得試劑1。試劑2組分按重量百分數(shù)計是 鼠抗人MPO-納米復(fù)合物4. 50 三羥甲基氨基甲烷緩沖液 8. 00 EMULGEN120 1.60 疊氮鈉 0. 18 超純水 85. 72 將上述成分混合后即得試劑2。實施例7
試劑盒按重量百分數(shù)計是試劑1:試劑2=90:10。
其中，
試劑1組分按重量百分數(shù)計是 氯化鈉10.00
6三羥甲基氨基甲烷緩沖液10. 00
EMULGEN1202.00
疊氮鈉0. 20
超純水77.80 將上述成分混合后即得試劑1。
試劑2組分按重量百分數(shù)計是
馬抗人MPO-納米復(fù)合物5. 00
三羥甲基氨基甲烷緩沖液10. 00
EMULGEN1202.00
疊氮鈉0. 20
超純水82.8 將上述成分混合后即得試劑2。
權(quán)利要求
1. 一種髓過氧化物酶測定試劑盒，其特征在于包括兩種試劑，其配合比例按重量百分數(shù)計是試劑1:試劑2= 50 90:10 50，其中，試劑1組分按重量百分數(shù)計是 氯化鈉三羥甲基氨基甲烷緩沖液表面活性劑疊氮鈉超純水試劑2組分按重量百分數(shù)計是 抗體-納米微球復(fù)合物1.00 10.00，0. 40 10· 00， 0. 05 2. 00， 0. 02^0.20， 77. 80^98. 53 ；0. 01-5. 00，三羥甲基氨基甲烷緩沖液表面活性劑疊氮鈉超純水0. 40 10.00， 0. 05 2. 00， 0. 02^0. 20， 82. 80^99. 52。
2.如權(quán)利要求1所述的髓過氧化物酶測定試劑盒，其特征在于抗體-納米微球復(fù)合物是兔抗人MPO-納米復(fù)合物，雞抗人MPO-納米復(fù)合物，鴨抗人MPO-納米復(fù)合物，鵝抗人 MPO-納米復(fù)合物，羊抗人MPO-納米復(fù)合物，鼠抗人MPO-納米復(fù)合物、馬抗人MPO-納米復(fù)合物中的一種，其中納米材料的直徑是50 5000nm的微球。
3.如權(quán)利要求1所述的髓過氧化物酶測定試劑盒，其特征在于表面活性劑是吐溫-20， 曲拉通，EMULGEN120中的一種。
全文摘要
本發(fā)明提供一種髓過氧化物酶測定試劑盒。其特征在于包括兩種試劑，其配合比例按重量百分數(shù)計是試劑1∶試劑2=50～90∶10～50，其中，按重量百分數(shù)計是，試劑1組分為氯化鈉1~10、三羥甲基氨基甲烷緩沖液0.4~10、表面活性劑0.05~2、疊氮鈉0.02~0.2、超純水77.8~98.53；試劑2組分為抗體-納米微球復(fù)合物0.01-5、三羥甲基氨基甲烷緩沖液0.4~10、表面活性劑 0.05~2、疊氮鈉0.02~0.2、超純水82.8~99.52。該測定試劑盒測定時間短，特異性好，精密度高，準確度好，且節(jié)約試劑位，可普遍用于各類全自動化分析儀。用于測定髓過氧化物酶。
文檔編號G01N33/536GK102426235SQ201010607498
公開日2012年4月25日 申請日期2010年12月28日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月28日
發(fā)明者周帥, 周方銀, 譚韜, 陳衛(wèi) 申請人:四川省新成生物科技有限責(zé)任公司