一種高純度水飛薊賓分離純化方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種高純度水飛薊賓分離純化方法，通過獨(dú)創(chuàng)性地采用水飛薊素雙相萃取技術(shù)分離水飛薊賓粗品I，采用膜分離技術(shù)分離水飛薊賓粗品I得到水飛薊賓粗品II，通過重結(jié)晶技術(shù)結(jié)晶水飛薊賓粗品II得到水飛薊賓精品I，最后采用等離子重結(jié)晶法結(jié)晶水飛薊賓精品I得到高純度水飛薊賓，通過工藝的改良，最終實(shí)現(xiàn)項(xiàng)目研究的產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)工藝。本發(fā)明大幅度的降低了提取過程中有機(jī)溶劑的使用，避免了有機(jī)溶劑的大量使用對(duì)環(huán)境造成的污染，在減低生產(chǎn)成本的同時(shí)，減少有機(jī)溶劑的使用給人類健康帶來的不可估量的毒副影響。
【專利說明】
一種高純度水飛薊賓分離純化方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明屬于中藥制備領(lǐng)域，具體涉及一種高純度水飛薊賓分離純化方法。
【背景技術(shù)】
[0002]水飛薊素(Silymarin)是從水飛薊的種子中提取出來的一種黃酮木質(zhì)素類混合物，它包括水飛薊賓(Si I ibinin，或Sy Iibin)、異水飛薊賓(isosylibinin)、水飛薊亭(silicristin)、水飛薊寧(siIidianin)等成分。水飛薊賓(FigureI)本身也是由等比例水飛薊賓A和水飛薊賓B構(gòu)成的兩個(gè)非對(duì)映體混合物。體外和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明水飛薊賓有很好的保護(hù)肝細(xì)胞免受毒素?fù)p傷的作用。水飛薊賓有四個(gè)手性中心，水飛薊賓A(2R，3R，10尺，1110和水飛薊賓8(21?，31?，103，113)，約占水飛薊素總量的60%-70%，是主要活性成分。目前，水飛薊賓作為保肝藥物被廣泛應(yīng)用于治療肝炎、肝硬化及代謝中毒性肝損傷等疾病，其機(jī)制是抗氧化、抗脂質(zhì)過氧化、抗纖維化、細(xì)胞膜穩(wěn)定和免疫調(diào)節(jié)作用，并能增強(qiáng)肝再生能力等，被稱為“天然的保肝藥”；同時(shí)，大量的研究表明水飛薊賓還具有降血脂、保護(hù)心肌及抗糖尿病的作用。在動(dòng)物研究實(shí)驗(yàn)中表明其沒有明顯的慢性毒副作用。近些年來的研究發(fā)現(xiàn)，水飛薊賓還具有較強(qiáng)的抗腫瘤活性，使其越來越受到國內(nèi)外研究者的關(guān)注。
[0003]目前，水飛薊賓有多種提取分離方法，但主要方法包括:(I)先將水飛薊種子去油，再以乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯等有機(jī)溶劑加熱回流，經(jīng)過多次萃取、洗脫，提取分離得到水飛薊賓產(chǎn)品，該方法利用甲醇、丙酮、乙酸乙酯等對(duì)人體有害溶劑提取的產(chǎn)品存在著有害溶劑殘留，殘留量超標(biāo)等問題，而且該方法操作時(shí)間長，能耗大，污染環(huán)境；(2)使用超臨界二氧化碳萃取法提取分離水飛薊賓，該方法雖然改善了有機(jī)溶劑殘留問題，但是操作時(shí)間較長，對(duì)操作溫度、壓力有一定要求；(3)國外也有研究用高溫高壓熱水代替有機(jī)溶劑提取水飛薊賓，但是高溫高壓生產(chǎn)難度大，危險(xiǎn)性高，不利于工業(yè)生產(chǎn)。目前在生產(chǎn)中采用的較多的提取和純化方法，依然為有機(jī)溶劑提取法，采用這種方法不僅會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生毒害作用，而且還會(huì)造成很大開銷。因此，在保證水飛薊賓純度的前提下，研究如何降低水飛薊賓提取過程中有機(jī)溶劑的使用，對(duì)于環(huán)境保護(hù)和提高生產(chǎn)效率方面都非常有意義，同時(shí)也是本項(xiàng)目的研究目的和意義。
[0004]隨著水飛薊的廣泛應(yīng)用，對(duì)其有效成分水飛薊賓的提取和純化方法的研究也越來越多，但是大多數(shù)都局限于傳統(tǒng)方法，本申請(qǐng)獨(dú)創(chuàng)性地采用水飛薊素雙向萃取技術(shù)分離水飛薊賓粗品I，采用膜分離技術(shù)分離水飛薊賓粗品I得到水飛薊賓粗品II，通過重結(jié)晶技術(shù)結(jié)晶水飛薊賓粗品II得到水飛薊賓精品I，最后采用等離子重結(jié)晶法結(jié)晶水飛薊賓精品I得到高純度水飛薊賓，通過工藝的改良，最終實(shí)現(xiàn)項(xiàng)目研究的產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)工藝。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]發(fā)明目的:為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提出一種高純度水飛薊賓分離純化方法。
[0006]技術(shù)方案:為實(shí)現(xiàn)上述技術(shù)目的，本發(fā)明提出一種高純度水飛薊賓分離純化方法，包括如下步驟:
[0007](I)雙相萃取水飛薊素:首先用甲醇加熱溶解水飛薊素，濾去不溶物，抽濾，將得到的固體用石油醚洗三次，將烘干得到的固體以25%PEG2000,12% (NH4)2SO4和3%NaCl雙水相體系劑型萃取，得到水飛薊賓粗品I，經(jīng)HPLC檢測，含量指標(biāo)在80%以上；
[0008](2)將得到的水飛薊賓粗品I通過膜分離得到水飛薊賓粗品II，經(jīng)HPLC檢測，含量指標(biāo)在90%以上；
[0009](3)將得到的水飛薊賓粗品II解析重結(jié)晶得到水飛薊賓精品I，經(jīng)HPLC檢測，含量指標(biāo)在96%以上；
[0010](4)將得到的水飛薊賓精品I中加入等摩爾量的水進(jìn)行重結(jié)晶，水中的H離子與水飛薊賓中的陰離子結(jié)合，有效地促進(jìn)了水飛薊賓的重結(jié)晶，形成得到高純度水飛薊賓經(jīng)HPLC檢測，含量指標(biāo)在99 %以上。
[0011]具體地，步驟(2)中，膜分離首先以膜孔徑0.30?0.5μπι的濾膜進(jìn)行一級(jí)膜分離，然后再用應(yīng)用0.15?0.3μπι的濾膜進(jìn)行二級(jí)膜分離，最后進(jìn)行噴霧干燥成水飛薊賓粗品11。
[0012]步驟(3)中，用無水乙醇溶解水飛薊賓粗品II，溶解后微孔過濾，將濾液濃縮至水飛薊賓粗品II與加入的無水乙醇的總體積的20%?30%，析晶、過濾、干燥得到水飛薊賓精品I O
[0013]有益效果:本項(xiàng)目通過采用雙相萃取技術(shù)、膜分離技術(shù)以及重結(jié)晶技術(shù)相結(jié)合的方式提純水飛薊賓，大幅度的降低了提取過程中有機(jī)溶劑的使用，避免了有機(jī)溶劑的大量使用對(duì)環(huán)境造成的污染，在減低生產(chǎn)成本的同時(shí)，減少有機(jī)溶劑的使用給人類健康帶來的不可估量的毒副影響。
【具體實(shí)施方式】
[0014]提出一種高純度水飛薊賓分離純化方法，包括如下步驟:
[0015](I)雙相萃取水飛薊素:首先用甲醇加熱溶解水飛薊素，濾去不溶物，抽濾，將得到的固體用石油醚洗三次，將烘干得到的固體以25%PEG2000,12% (NH4)2SO4和3%NaCl雙水相體系劑型萃取，得到水飛薊賓粗品I，經(jīng)HPLC檢測，含量指標(biāo)在80%以上；
[0016](2)將得到的水飛薊賓粗品I通過膜分離得到水飛薊賓粗品I1:首先以膜孔徑0.30的濾膜進(jìn)行一級(jí)膜分離，然后再用應(yīng)用0.15的濾膜進(jìn)行二級(jí)膜分離，最后進(jìn)行噴霧干燥成水飛薊賓粗品11，經(jīng)HPLC檢測，含量指標(biāo)在90 %以上；
[0017](3)將得到的水飛薊賓粗品II解析重結(jié)晶得到水飛薊賓精品I，具體地用無水乙醇溶解水飛薊賓粗品II，溶解后微孔過濾，將濾液濃縮至水飛薊賓粗品II與加入的無水乙醇的總體積的20%?30%，析晶、過濾、干燥得到水飛薊賓精品I，經(jīng)HPLC檢測，含量指標(biāo)在96%以上；
[0018](4)將得到的水飛薊賓精品I加入等摩爾量的水進(jìn)行重結(jié)晶，水中的H離子與水飛薊賓中的陰離子結(jié)合，有效地促進(jìn)了水飛薊賓的重結(jié)晶，形成得到高純度水飛薊賓經(jīng)HPLC檢測，含量指標(biāo)在99 %以上。
[0019]本發(fā)明的方法通過獨(dú)創(chuàng)性地采用水飛薊素雙向萃取技術(shù)分離水飛薊賓粗品I，采用膜分離技術(shù)分離水飛薊賓粗品I得到水飛薊賓粗品II，通過重結(jié)晶技術(shù)結(jié)晶水飛薊賓粗品II得到水飛薊賓精品I，最后采用等離子濃度的水進(jìn)行重結(jié)晶法結(jié)晶水飛薊賓精品I得到高純度水飛薊賓，通過工藝的改良，最終實(shí)現(xiàn)項(xiàng)目研究的產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)工藝。本項(xiàng)目的實(shí)施大幅度的降低了提取過程中有機(jī)溶劑的使用，避免了有機(jī)溶劑的大量使用對(duì)環(huán)境造成的污染，在減低生產(chǎn)成本的同時(shí)，減少有機(jī)溶劑的使用給人類健康帶來的不可估量的毒副影響。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種高純度水飛薊賓分離純化方法，其特征在于，包括如下步驟: (1)雙相萃取水飛薊素:首先用甲醇加熱溶解水飛薊素，濾去不溶物，抽濾，將得到的固體用石油醚洗三次，將烘干得到的固體以25%PEG2000,12% (NH4)2SO4和3%NaCl雙水相體系劑型萃取，得到水飛薊賓粗品I; (2)將得到的水飛薊賓粗品I通過膜分離得到水飛薊賓粗品II; (3)將得到的水飛薊賓粗品II解析重結(jié)晶得到水飛薊賓精品I; (4)將得到的水飛薊賓精品I中加入等摩爾量的水進(jìn)行重結(jié)晶，得到高純度水飛薊賓。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高純度水飛薊賓分離純化方法，其特征在于，步驟(2)中，膜分離首先以膜孔徑0.30?0.5μπι的濾膜進(jìn)行一級(jí)膜分離，然后再用應(yīng)用0.15?0.3μπι的濾膜進(jìn)行二級(jí)膜分離，最后進(jìn)行噴霧干燥成水飛薊賓粗品11。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高純度水飛薊賓分離純化方法，其特征在于，步驟(3)中，用無水乙醇溶解水飛薊賓粗品II，溶解后微孔過濾，將濾液濃縮至水飛薊賓粗品II與加入的無水乙醇的總體積的20%?30%，析晶、過濾、干燥得到水飛薊賓精品I。
【文檔編號(hào)】C07D407/04GK106083834SQ201610453396
【公開日】2016年11月9日
【申請(qǐng)日】2016年6月21日
【發(fā)明人】武俊明, 吳春芳, 付廷明
【申請(qǐng)人】江蘇中興藥業(yè)有限公司