一種新型吩噻嗪衍生物及其制備方法與應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種新型吩噻嗪衍生物及其制備方法與應(yīng)用，生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明具體公開了結(jié)構(gòu)通式I化合物及其藥學(xué)上適用的鹽，可用作近紅外熒光分子探針，還提供了該分子探針的制備方法以及它們的應(yīng)用。本發(fā)明熒光分子結(jié)構(gòu)新穎、靈敏度、選擇性好、光穩(wěn)定性好。該分子與Aβ(1?42)聚集體有很好的親合力，同時能夠很好地抑制β?淀粉樣蛋白的自聚合。因此，它們不僅能應(yīng)用于Aβ蛋白斑塊的成像，而且也能用于治療阿茨海默癥。
【專利說明】
一種新型吩噻嗪衍生物及其制備方法與應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種新型吩噻嗪衍生物及其制備方法與 應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 阿爾茨海默氏病(Alzheimer's disease，AD)是一種惡性神經(jīng)退行性疾病，病因迄 今未明，目前尚無治愈的特效藥物或方法。AD的特征在于認知功能例如記憶、思考、理解、計 算、語言、學(xué)習(xí)能力以及判斷能力的逐漸降低，當(dāng)降低到足以影響個人日常生活行為時確診 為癡呆。據(jù)統(tǒng)計目前中國患者超過560萬，并隨著人口老齡化進程呈快速增長的態(tài)勢。AD不 僅嚴重危害老年人的健康，而且還給患者家屬帶來沉重的精神負擔(dān)，為社會帶來巨大的健 康危機，更對經(jīng)濟造成巨大的影響，因而引起人們的普遍關(guān)注。
[0003] 越來越多的研究表明，早在AD癥狀出現(xiàn)前10~20年，大腦中的病理改變已經(jīng)發(fā)生。 針對A D的病理機制目前主要有3種假說：淀粉樣蛋白沉積、神經(jīng)元纖維纏結(jié) (neurofibrillary tangles)以及膽堿能神經(jīng)元退行性病變。其中"淀粉樣級聯(lián)假說"被人 們廣泛認可。該假說認為:在AD發(fā)生的早期，β-淀粉樣蛋白（Αβ，主要是ΑΜ0和AM2)逐漸聚 合沉積形成淀粉樣斑塊，引發(fā)tau蛋白磷酸化和神經(jīng)纖維纏結(jié)，最終導(dǎo)致神經(jīng)元丟失、退化 和癡呆。由于AD發(fā)病隱蔽性強，病程緩慢，逐漸發(fā)展且不可逆，等根據(jù)臨床癥狀可以做出診 斷時，往往患者基本己處于中晚期，發(fā)病后15-25年由于多種并發(fā)癥而導(dǎo)致死亡?，F(xiàn)有的治 療方案只能起到緩解癥狀，對于疾病均不能取得明顯的治療療效和改善作用。如果能盡早 發(fā)現(xiàn)病癥，及時治療，能起到事半功倍的作用。因此研究和開發(fā)針對Αβ斑塊的診斷試劑，對 于在分子水平研究AD的病理生理過程，以及為疾病的早期診斷和治療提供依據(jù)顯得尤為迫 切。
[0004] 分子成像技術(shù)對患者創(chuàng)傷小，在分子水平上具有高敏感性，很有希望為AD早期診 斷和治療提供有效依據(jù)。磁共振成像(MRI)、正電子發(fā)射斷層成像(ΡΕΤ)、單光子發(fā)射計算機 斷層顯像(SPECT)和近紅外熒光(NIRF)成像均能夠提供AD腦部變化的信息，具有進行人和 動物模型的AD診斷潛力。MRI只有在AD患者腦萎縮發(fā)生后才能檢測的到，而此時腦組織早已 發(fā)生了病理學(xué)改變。目前，應(yīng)用于AD患者早期診斷的主要是PET和SPECT成像的Αβ探針。但 PET/SPECT成像成本高、有放射性危險、采集數(shù)據(jù)耗時長、核發(fā)射正電子半衰期短且同位素 可用性狹窄。然而，近紅外熒光(NIRF)成像方法具有許多優(yōu)點：（1)靈敏度高，可實現(xiàn)微弱信 號的檢測；（2)檢測安全，不接觸放射性元素；（3)無需耗時，數(shù)據(jù)采集過程中實時成像；（4) 成本適中，無需昂貴的設(shè)備和技術(shù)高超的人員；（6)NIRF探針具有較深的組織穿透距離且能 大大減少活體組織及自發(fā)發(fā)光對成像的干擾。近年來近紅外熒光(NIRF)成像技術(shù)的發(fā)展相 當(dāng)迅速，大大加快了對AD研究的步伐。迄今為止，已有一些關(guān)于檢測Αβ斑塊的近紅外熒光探 針的報道，如噁嗪類衍生物(Α0Ι987)，噻吩類衍生物(NIAD)，姜黃素類衍生物(CRANAD)，硼 二吡咯亞甲基類衍生物(B0DIPY)，氨基萘-2-氰基丙烯酸酯類衍生物(ANCA)，共輒π電子鏈 類(DANIRs)。但目前，用于阿爾茨海默氏病淀粉樣蛋白β斑塊近紅外熒光(NIRF)成像探針仍 處于臨床前研究階段。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 為克服上述現(xiàn)有技術(shù)中存在的缺點與不足，本發(fā)明的首要目的在于提供一種吩噻 嗪衍生物。所述的吩噻嗪衍生物可用于阿爾茨海默氏病淀粉樣蛋白β斑塊成像的新型近紅 外熒光分子探針，同時能對樣淀粉蛋白聚合具有抑制作用，而用于治療阿茨海默癥。
[0006] 本發(fā)明的另一目的在于提供上述吩噻嗪衍生物的制備方法。
[0007] 本發(fā)明的再一目的在于提供上述吩噻嗪衍生物的應(yīng)用。本發(fā)明的吩噻嗪衍生物不 僅可作為近紅外熒光分子探針用于阿爾茨海默氏病淀粉樣蛋白β斑塊成像，還可應(yīng)用于該 病的治療。
[0008] 本發(fā)明的目的通過下述技術(shù)方案實現(xiàn):一種吩噻嗪衍生物，具有如式I所示通式：
[0010] 其中：RdH、Cl 或N(CH3)2 中的一種；
[0011] R2 為H、N(CH3)2、Et 或 tBu 中的一種；
[0012] R3 為 CH3;
[0013] m為整數(shù)1或2;
[0014] η為整數(shù)1，2或3。
[0015] 所述的吩噻嗪衍生物，包括由上述式I的吩噻嗪衍生物在醇溶液中與鹽酸、醋酸、 三氟乙酸制備相應(yīng)的鹽酸鹽、醋酸鹽、三氟乙酸鹽。
[0016] 上述的吩噻嗪衍生物的制備方法，包括如下步驟：
[0017] (1)中間體醛化合物2，3，4的制備：吩噻嗪或2-氯吩噻嗪甲基化之后，經(jīng)維爾斯邁 爾一哈克反應(yīng)引入醛基，得到化合物2,再經(jīng)磷葉立德反應(yīng)引入一個烯烴鍵，得到化合物3， 重復(fù)同樣的反應(yīng)再引入一個烯烴鍵，最后得到化合物4;
[0018] (2)中間體5的制備：甘氨酸乙酯，叔丁酯鹽酸鹽或3-氨基丙酸乙酯，叔丁酯與2， 2 ' -(硫代羰基(硫)）二乙酸進行縮合反應(yīng)，得到中間體5;
[0019] ⑶化合物6，7，8，9，10的制備：10-甲基-10Η-吩噻嗪-3-甲醛的8位取代的化合物2 與中間體5進行Knoevenagel縮合反應(yīng)，得到化合物6和9;在酸性條件下脫酯反應(yīng)，化合物6 和9轉(zhuǎn)化成酸7和10;在卡特縮合劑存在條件下，化合物7與二甲胺反應(yīng)形成酰胺8，其中h， 尺2，1?3，111，11與權(quán)利要求1中相同；
[0020] (4)化合物11，12,13,14的制備：參照步驟（3)中有關(guān)的反應(yīng)，（E)-3-( 10-甲基-10H-吩噻嗪-3-基)丙稀醛的8位取代的化合物3與中間體5進行Knoevenagel縮合反應(yīng)，得到 化合物11和13;在酸性條件下脫酯反應(yīng)，化合物11和13轉(zhuǎn)化成酸12和14，其中h，R 2，R3，m，η 與權(quán)利要求1中相同；
[0021] (5)化合物15，16，17，18的制備：同樣參照（3)中有關(guān)的反應(yīng)，（2E，4E)-5-(10-甲 基-10Η-吩噻嗪-3-基)戊-2,4-二稀醛的化合物4與中間體5進行Knoevenagel縮合反應(yīng)，得 到化合物15和17;在酸性條件下脫酯反應(yīng)，化合物15和17轉(zhuǎn)化成酸16和18，其中Ri，R2，R3，m， n與權(quán)利要求1中相同；
[0022]上述產(chǎn)物的化合物6-18任意一項皆為目標(biāo)產(chǎn)物吩噻嗪衍生物。
[0023]所述步驟(1)的中間體醛化合物2，3，4的制備，具體步驟如下:從商品化的吩噻嗪， 2-氯吩噻嗪出發(fā)，與碘甲烷在氫化鈉堿性條件作用下生成10-甲基吩噻嗪（la)、2_氯-10-甲 基吩噻嗪（lb)，反應(yīng)溶劑采用N，N-二甲基甲酰胺，在室溫反應(yīng)2小時，生成白色固體產(chǎn)物;化 合物lb與二甲胺在三(二亞芐基丙酮)二鈀的催化下，通常用2-二環(huán)己基磷_2,4,6_三異丙 基聯(lián)苯做配體，碳酸銫作為堿，二氧六環(huán)作為溶劑，在氬氣保護下120攝氏度反應(yīng)7h后提純 可得到化合物1 c;在氬氣保護下，化合物1 (la，lb，1 c)與三氯氧磷和干燥的N，N-二甲基甲酰 胺反應(yīng)回流10個小時，即得接上一個醛基的黃色產(chǎn)物2(2a，2b和2c);反應(yīng)溶劑選用N，N-二 甲基甲酰胺，二氯甲烷或氯仿，所得產(chǎn)物可經(jīng)柱層析或重結(jié)晶提純；以三(3,6_二氧雜庚基） 胺為相轉(zhuǎn)移催化劑，碳酸氫鈉/碳酸鈉飽和溶液體系為堿性介質(zhì)，以二氯甲烷為反應(yīng)溶劑， 化合物2a和2b與（1，3-二氧戊環(huán)-2-基）甲基三苯基溴化瞵回流反應(yīng)20h，經(jīng)柱層析或重結(jié)晶 提純后，得到橘黃色產(chǎn)物3a和3b;之后用上述同樣的反應(yīng)方法化合物3a可以轉(zhuǎn)化成橘黃色 產(chǎn)物4a，反應(yīng)化學(xué)方程式如式Π 所示：
[0025] 所述步驟(2)的中間體5的制備，具體步驟如下：2-(4-氧代-2-硫代噻唑烷-3-基） 乙酸或丙酸酯中間體5的制備:從商品化甘氨酸乙酯，叔丁酯鹽酸鹽或3-氨基丙酸乙酯，叔 丁酯鹽酸鹽出發(fā)，以三乙胺作為堿，與2,2'_(硫代羰基(硫））二乙酸鹽酸鹽發(fā)生縮合反應(yīng)， 之后通過柱層析法提純，即可得到白色固體化合物5,該縮合反應(yīng)選用異丙醇作為反應(yīng)試 劑，在82 °C下回流lh，反應(yīng)化學(xué)方程式如式m所示：
[0027]所述步驟(3)的化合物6，7，8，9，10的制備，具體步驟如下：從化合物3a，3b和3c出 發(fā)，以二氯甲烷為溶劑，與中間體5 (5al，5a2，5bl，5b2)進行Knoevenage 1縮合反應(yīng);在常溫 下反應(yīng)2-5h，通過柱層析法提純，得到化合物6(6al，6a2，6bl，6b2，6c2)之后，在三氟乙酸酸 性條件下，化合物6(6a2,6b2和6c2)進行脫脂反應(yīng)，形成酸7(7 &，713,7(：)，重結(jié)晶后呈紅色固 體;采用上述同樣的二步反應(yīng)方法，化合物3a和3b可以轉(zhuǎn)化成化合物9(9al，9a2)和10;在卡 特縮合劑(Β0Ρ)存在下，化合物7a與二甲胺進行縮合反應(yīng)，經(jīng)適當(dāng)方法如柱層析、重結(jié)晶提 純，可得到化合物8a，反應(yīng)化學(xué)方程式如式IV所示：
[0029]所述步驟(4)的化合物11，12，13，14的制備，具體步驟如下：從化合物3a和3b出發(fā)， 參照步驟(3)中的二步反應(yīng)方法，與化合物5(5al，5a2，5bl，5b2)的縮合反應(yīng)和脫脂反應(yīng)，可 得到紅色固體的目的化合物11，12，13，14，反應(yīng)化學(xué)方程式如式乂所示 ：
[0030]
[0031] 所述步驟(5)的化合物15，16，17，18的制備，具體步驟如下：從化合物4a出發(fā)，參照 步驟(3)二步反應(yīng)方法，與化合物5(5al，5a2，5bl，5b2)的縮合反應(yīng)和脫脂反應(yīng)，可得到紅色 固體的目的化合物15，16，17，18，反應(yīng)化學(xué)方程式如式乂所示 ：
[0033] 上述的吩噻嗪衍生物的應(yīng)用，主要體現(xiàn)在，應(yīng)用于阿爾茨海默氏病淀粉樣蛋白β斑 塊成像的近紅外焚光分子探針。
[0034] 上述的吩噻嗪衍生物的應(yīng)用，主要體現(xiàn)在，應(yīng)用制備治療阿茨海默癥的藥物。
[0035] 本發(fā)明相對于現(xiàn)有技術(shù)具有如下的優(yōu)點及效果：
[0036] 1.本發(fā)明獲得的吩噻嗪衍生物最大吸收和熒光發(fā)射光譜值分別在470~510nm和 640~700nm之間。大部分的化合物的發(fā)射光譜值>650nm;適合用于阿爾茨海默氏病淀粉樣 蛋白β斑塊成像的近紅外熒光分子探針的特性。
[0037] 2.從本發(fā)明獲得的吩噻嗪衍生物與Αβ(1_42)自聚體的結(jié)合能力測試結(jié)果來看，這 類化合物具有很強的于Αβ自聚體結(jié)合能力；另外，在體外化合物與β-淀粉樣蛋白的自聚集 抑制活性測試中顯示，這類化合物對她-42的自聚集具有較好的抑制作用，它們的抑制作用 都比對照物姜黃素要強，最高達到了 84.9%抑制強度，而同等條件下，姜黃素的抑制強度僅 為41%。因此，這類化合物也具有治療抗阿茨海默癥的潛力。
【具體實施方式】
[0038] 下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步詳細的描述，但本發(fā)明的實施方式不限于此。
[0039] 實施例1:合成10-甲基-10Η-吩噻嗪-3-甲醛2a
[0040] 稱取NaH(60 %純度，1.0g，25. lmmol)在冰水浴中緩慢加入有DMF( 10mL)的50mL圓 底瓶中，隨后加入碘甲燒（1.3g，11.04mmol)和化合物吩噻嗪(2g，10.0 mmol)，轉(zhuǎn)移至室溫攪 拌2h，TLC監(jiān)測反應(yīng)結(jié)束后，加水，用DCM萃取(50mL X 3)，硫酸鎂干燥后再濃縮干，經(jīng)硅膠柱 分離得到產(chǎn)物1 a(2.1 g)，白色固體，熔點:96 °C，收率97 %。
[0041] 4 Mffi(400MHz，（CD3)2C0)S7.21(td，J = 8.0，1.5Hz，2H)，7.21(d，J = 2.0Hz，lH)， 7.14(d ,J = 1.5Hz,lH),6.96-6.93(m,4H),3.39(s,3H).
[0042] 在0°C的冰水浴中，將三氯氧磷（1.98g，l. 18mL，12.9mmol)緩慢滴加在有干燥DMF (904L，11 · 73mmol)的25mL圓底瓶中，攪拌0 · 5h后，加入溶在5mL DCM的化合物la(500mg， 2.34mmol)，將反應(yīng)體系升溫至回流71UTLC監(jiān)測反應(yīng)結(jié)束后，加水，用DCM萃取(50mL X 3)， 硫酸鎂干燥后再濃縮干，經(jīng)硅膠柱分離得到產(chǎn)物2a(320mg)，黃色固體，熔點：106°C，收率 58% 〇
[0043] 4^^(40010^,0)(:13)39.78(8,111),7.64((1(1,1 = 8.7,2.0^,111),7.59((1,1 = 2.0Hz，lH)，7.17(td，J = 7.8，1.6Hz，lH)，7.11(dd，J = 7.8，1.6Hz，lH)，6.97(t，J = 7.5Hz， lH),6.85(d ,J = 7.5Hz,lH),6.82(d ,J = 7.5Hz,lH),3.41(s,3H).
[0044] 實施例2:合成8-氯-10-甲基-10H-吩噻嗪-3-甲醛2b
[0045] 參照實施例1第一步操作過程，分離得產(chǎn)物lb，白色固體，熔點:75°C，收率97% ;
[0046] 4 匪R(400MHz，CDC13)S7.16(td，J = 7.8，1.3Hz，lH)，7· 12(dd，J = 7.8，1.3Hz， lH),6.99(d ,J = 8.5Hz,lH),6.94(t ,J = 7.5Hz,lH),6.88(dd ,J = 8.5,2.0Hz,lH),6.78(d ,J = 8.5Hz,lH),6.73(d ,J = 2.0Hz,lH),3.29(s,3H).
[0047] 參照實施例1第二步操作過程，分離得產(chǎn)物2b，黃色固體，熔點：160°C，收率38%。
[0048] = = lH),7.01(d ,J = 8.2Hz,lH),6.93(td ,J = 7.6,1.4Hz,lH),6.88(dd ,J = 8.2,2.0Hz,lH),6.8 (d ,J = 8.2Hz,lH),6.75(d ,J = 2.0Hz,lH),3.35(s,3H).
[0049] 實施例3:合成8-(二甲基氨基)-10-甲基-10H-吩噻嗪-3-甲醛2c
[0050] 將二甲胺（1 · 6mL，3 · lmmo 1，1 · 5eq)加入溶有化合物lb(500mg，2 · 02mmo 1，1 eq)的二 氧六環(huán)（4mL)中，隨后加入催化劑三(二亞芐基丙酮）二鈀（75mg，0.08mmol，0.04eq)和配體 2-二環(huán)己基磷-2,4,6-三異丙基聯(lián)苯(7811^，0.1669,0.0869)以及碳酸銫（1.48,269)，在氬 氣保護下120攝氏度反應(yīng)71UTLC監(jiān)測反應(yīng)結(jié)束后，待冷卻至室溫后先進行抽濾，得到的濾液 濃縮干后，采用柱層析法分離得到產(chǎn)物lc(260mg)，白色液體，收率50%。
[0051] 咕 NMR(400MHz，CDCl3)S7.16-7.10(m，2H)，6.97(d，J = 8.5，lH)，6.89(td，J = 8.0， 1.0Hz,lH),6.8(dd ,J = 8.0,1.0Hz, 1H), 6.33(dd,J = 8.0,2.5Hz, 1H), 6.21 (d,J = 2.5,1H), 3.36(s,3H),2.92(s,6H).
[0052] 化合物1〇(22711^，0.89111111〇1)，參照實施例1第二步操作過程，分離得產(chǎn)物2(3，黃色 固體，熔點：121°C，收率42%。
[0053] 4 NMR(400MHz，CDC13)S9.97(s，1H)，7.49(s，lH)，7.15(td，J = 8.0，1.5Hz，lH)， 7.12(dd ,J = 8.0,1.5Hz,lH),6.95(td ,J = 7.5,1.0Hz,lH),6.82(d ,J = 7.5Hz,lH),6.32(s, lH),3.42(s,3H),2.91(s,6H).
[0054] 實施例4:合成(E)-3_( 10-甲基-10H-吩噻嗪-3-基)丙烯醛3a
[0055] 將飽和的碳酸鉀溶液（15mL)加入到溶有三(3,6-二氧雜庚基)胺〇04-1)(73811^， 2·28mmol，1 · leq)的DCM(lOmL)中，然后按順序加入（1，3-二氧戊環(huán)-2-基）甲基三苯基溴化 膦（1.438,3.32臟〇1，1.669)和化合物23(50011^，2.071]11]1〇1，169)。反應(yīng)體系升溫至回流狀態(tài) 攪拌約20h，TLC監(jiān)測反應(yīng)結(jié)束后，先用(DCM 2x 25mL)萃取，先再用食鹽水清洗，有機相用硫 酸鎂干燥后濃縮干，在〇攝氏度下加入20mL的THF和10%的HCl(20mL)，室溫攪拌lh。將反應(yīng) 體系在〇攝氏度冰水浴中用1 〇 %的NaOH調(diào)節(jié)pH至7，再用DCM(2x 25mL)和水萃取，最后用飽 和食鹽水和硫酸鎂干燥后濃縮干，經(jīng)硅膠柱分離得到產(chǎn)物3a(490mg)，橘黃色固體，熔點： 129°C，收率是 88.6%。
[0056] 4 ΜΚ(400ΜΗζ，αχη3)δ9·61 (d，J = 8.0Hz，lH) ,7.65-7 ·29(ι?，3H)，7.17(td，J = 7·5，1·0Ηζ，1Η)，7· 12(dd，J = 7.5,1 ·0Ηζ，1Η) ,6.95(td，J = 7.5, ΙΗζ,ΙΗ)，6.82(d，J = 8.5Hz，lH)，6.72(d，J = 8.5Hz，lH)，6.56(q，J = 7.8Hz，lH)，3.38(s，3H).
[0057] 實施例5:合成(E)-3-(8-氯-10-甲基-10H-吩噻嗪-3-基)丙烯醛3b
[0058] 化合物2b(500mg，1.81mmol)，參照實施例4操作過程，分離得產(chǎn)物3b(502mg)，橘黃 色固體，熔點：145°(：，收率91%。
[0059] 4 匪R(400MHz，CDCl3)S9.62(d，J = 7.5Hz，1H) ,7.36-7 ·29(ι?，3H)，7.01((1, J = 8.0Hz,lH) ,6.93(dd,J = 8.0,2.0Hz,lH) ,6.8(d,J = 8.5Hz,lH) ,6.78(d,J = 2.0Hz,lH), 6.57(q ,J = 7.8Hz,lH),3.39(s,3H).
[0060] 實施例6:合成（2E，4E)-5-( 10-甲基-10H-吩噻嗪-3-基)戊-2，4-二烯醛4a
[0061 ] 化合物313(77〇11^，2.89111111〇1)，參照實施例4操作過程，分離得產(chǎn)物4 &(34611^)，橘黃 色固體，熔點：138°C，收率62%。
[0062] 4 MMR(400MHz，CDCl3)S9.57(d，J = 8.0Hz，lH) ,7.28-7.25(m，2H)，7.17(td，J = 8.0,1.5Ηζ,1Η) ,7.12(dd,J = 8.0,1.5Hz, 1H),6.94(td,J = 8.0,1.5Hz, 1H),6.89-6.85(m, 2H),6.81(d ,J = 8.0Hz,lH),6.76(d ,J = 8.0Hz,lH),6.21(q ,J = 7.5Hz,lH),3.37(s,3H).
[0063] 實施例7:合成2- (4-氧代-2-硫代噻唑烷-3-基）乙酸乙酯5a 1
[0064] 將甘氨酸乙酯鹽酸鹽（5001^，3.6臟〇1，1叫)加入到溶有2,2'-(硫代羰基(硫））二 乙酸(976mg，4.32mmol，1.2eq)的異丙醇(4mL)中，然后再往體系中滴入Et3N( lmL，7.2mmol， 2eq)。將反應(yīng)體系加熱至82°攝氏度，攪拌1KTLC監(jiān)測反應(yīng)結(jié)束后，濃縮干后，經(jīng)硅膠柱分離 得到產(chǎn)物5al (638mg，2.9lmmo 1)，白色固體，熔點：55°C，收率81 %。
[0065] 4 NMR(400MHz，CDCl3)S4.69(s，2H)，4.20(q，J = 7.5Hz，2H)，4.05(s，2H)，1.26(t， J = 7.5Hz,3H).
[0066] 實施例8:合成2-( 4-氧代-2-硫代噻唑烷-3-基）乙酸叔丁酯5a2
[0067] 甘氨酸叔丁酯鹽酸鹽(500mg，3mmo 1，leq)和2，2 ' -(硫代羰基(硫））二乙酸(813mg， 3.6mmol，，1 · 2eq)，參照實施例7操作過程，分離得產(chǎn)物5a2(504mg)，白色固體，熔點：57°C， 收率68 %。
[0068] 4 NMR(400MHz，CDCl3)δ4.59(s，2H)，4.04(s，2H)，1.44(s，9H)·
[0069] 實施例9:合成2-(4-氧代-2-硫代噻唑烷-3-基)丙酸乙酯5bl
[0070] 3-氨基丙酸乙酯鹽酸鹽（50〇11^，3.27111111〇1，1叫）和2,2'-(硫代羰基（硫））二乙酸 (886mg，3.92mmol，1.2eq)，參照實施例7操作過程，分離得產(chǎn)物5bl (708mg)，白色固體，熔 點:83°(：，收率93%。
[0071] 4 NMR(400MHz，CDCl3)S4.26(t，J = 7.5Hz，2H)，4.11(q，J = 7.2Hz，2H)，3.97(s， 2H)，2.65(t，J = 7.5Hz，2H)，1.24(t，J = 7.5Hz，3H).
[0072] 實施例10:合成2-(4-氧代-2-硫代噻唑烷-3-基)丙酸叔丁酯5b2
[0073] 3-氨基丙酸叔丁酯鹽酸鹽(50011^，2.76111111 〇1，1叫)和2,2'-(硫代羰基(硫））二乙酸 (749mg，3.15mmol，1.2eq)，參照實施例7操作過程，分離得產(chǎn)物5b2(467mg)，白色固體，熔 點：52°(：，收率62%。
[0074] 4 NMR(400MHz，CDCl3)S4.22(t，J = 7.5Hz，2H)，3.95(s，2H)，2.58(t，J = 7.5Hz， 2H),1.22(s,9H).
[0075] 實施例11:合成(E)-2-(5-((10-甲基-10H-吩噻嗪-3-基)亞甲基)-4-氧代-2-硫代 四氫噻吩-3-基）乙酸乙酯6al
[0076] 稱取化合物2a(80mg，0 · 33mmol，leq)和5al(80mg，0 · 36mmol，1 · leq)分別溶于DCM (1.5mL)中混合均勻。在反應(yīng)體系中滴加哌啶(98L，3eq)，室溫下攪拌3h，TLC監(jiān)測反應(yīng)結(jié)束 后，用10%的HC1調(diào)節(jié)pH至7。有機相用飽和食鹽水清洗，硫酸鎂干燥后再濃縮干，經(jīng)硅膠柱 分離得到產(chǎn)物6a 1 (1 OOmg)，紅色固體，熔點：162 °C，收率68.4 %。
[0077] 咕 Mffi(400MHz，CDC13)S7.62(s，lH)，7.3(dd，J = 8 ·5,2 ·0Ηζ，1Η)，7.22((1, J = 2·0Ηζ，1Η)，7.17(td，J = 7.6，1.4Hz，lH)，7.12(dd，J = 7.6，1.2Hz，lH)，6.97(t，J = 7.6Hz， 1H) ,6.83(d ,J = 8.4Hz,lH) ,6.82(d, J = 8.2Hz , 1H), 4.8( s , 2H) ,4.22(q, J = 7.0Hz , 2H), 3.40(s,3H),1.27(t,J = 7.2Hz,3H)；ESI-MS m/z:443.1 [M+H] + 〇
[0078] 實施例12:合成(E)-2-(5-((10-甲基-10H-吩噻嗪-3-基)亞甲基)-4-氧代-2-硫代 四氫噻吩-3-基）乙酸叔丁酯6a2
[0079] 化合物2a(229mg，0.95mmol)，參照實施例11操作過程，分離得產(chǎn)物6a2(350mg)，紅 色固體，熔點：132°(：，收率78.3%。
[0080] 咕 M1R(400MHz，CDC13)S7.61 (s，lH)，7.3(dd，J = 8 ·0,2 ·0Ηζ，1Η)，7.21((1, J = 2·0Ηζ，1Η)，7.17(td，J = 7.5，1.5Hz，lH)，7.12(dd，J = 8.0，1.5Hz，lH)，6.96(t，J = 7.5Hz， lH),6.83(d ,J = 8.0Hz,lH),6.82(d ,J = 8.0Hz,lH),4.73(s,2H),3.40(s,3H),1.44(s,9H)； 471.2[M+H] + 〇
[0081 ] 實施例13:合成(E)-2-(5-((8-氯-10-甲基-10H-吩噻嗪-3-基)亞甲基)-4-氧代-2_硫代四氫噻吩-3-基）乙酸乙酯6b 1
[0082] 化合物2b(200mg，0 · 73mmol)，參照實施例11操作過程，分離得產(chǎn)物6bl (270mg)，暗 紅色固體，熔點：173°C，收率78 %。
[0083] 咕 M1R(400MHz，CDC13)S7.61(s，1H)，7.31(dd，J = 8.5,2.0Hz，lH)，7.2(d，J = 2.0Hz,lH) ,7.01(d ,J = 8.5Hz,lH) ,6.94(dd ,J = 8.0,2.0Hz , 1H) ,6.84(d ,J = 8.0Hz , 1H), 6.89(d,J = 2.0Hz, 1H) ,4.83( s,2H) ,4.22 (q,J = 7.0Hz, 2H) ,3.38( s,3H) ,1.27( t,J = 7.0Hz,3H)；ESI-MS m/z:477.1[M+H]+〇
[0084] 實施例14:合成(E)-2-(5-((8-氯-10-甲基-10H-吩噻嗪-3-基)亞甲基)-4-氧代-2_硫代四氫噻吩-3-基）乙酸叔丁酯6b2
[0085] 化合物2b(180mg，0.65mmol)，參照實施例11操作過程，分離得產(chǎn)物6b2(270mg)，暗 紅色固體，熔點：208°C，收率83 %。
[0086] ΧΗ NMR(400MHz,CDC13)57.60(s,1H) ,7.3(dd,J = 8.5,2.0Hz,lH) ,7.2(d,J = 2.0Hz,lH) ,7.02(d ,J = 8.0Hz,lH) ,6.94(dd ,J = 8.5,2.0Hz , 1H) ,6.84(d ,J = 8.0Hz , 1H), 6.79(d,J=2.0Hz,lH),4.73(s,2H),3.38(s,3H),1.23(s,9H)；ESI-MS m/z:505.1[M+H]+〇
[0087] 實施例15:合成(E)-2-(5-((8-(二甲基氨基）-10-甲基-10H-吩噻嗪-3-基）亞甲 基)-4_氧代-2-硫代四氫噻吩-3-基)乙酸叔丁酯6c2
[0088] 化合物2c(200mg，0.70mmol)，參照實施例11操作過程，分離得產(chǎn)物6b2(249mg)，紅 色固體，熔點：155°C，收率69%。
[0089] 4 NMR(400MHz，CDC13)S7.77(s，1H)，7.15(t，J = 8.0Hz，lH)，7.13-7.09(m，2H)， 6.94(t，J = 7.5Hz，lH)，6.82(d，J = 8.0Hz，lH)，6.45(s，lH)，4.72(s，2H)，3.40(s，3H) ,2.71 (s，6H)，1.44(s，9H);ESI-MS m/z:514.2[M+H]+。
[0090] 實施例16:合成(E)-2-(5-((10-甲基-10H-吩噻嗪-3-基)亞甲基)-4-氧代-2-硫代 四氫噻吩-3-基）乙酸7a
[0091] 稱取化合物6a2(200mg，0.43mmol)溶于3mL DCM中，滴加600L三氟乙酸，在室溫下 攪拌2h，反應(yīng)體系中有紅色固體析出。TLC監(jiān)測反應(yīng)結(jié)束后，濃縮干燥后采用重結(jié)晶的方法 得到純凈的化合物7a(16lmg)，紅色固體，熔點：253°C，收率是92 %。
[0092] 咕 Mffi(400MHz，（CD3)2C0)S7.71(s，1H)，7.52(dd，J = 8.5,2Hz，lH)，7.4(d，J = 2Hz,lH),7.25(td ,J = 7.5,1.0Hz, 1H), 7.17(dd,J = 7.5,1.0Hz, 1H) ,7.13(d,J = 8.5Hz, lH),7.05-7.00(m,2H),4.87(s,2H),3.48(s,3H)；ESI-MS m/z:415.1[M+H]+〇
[0093] 實施例17:合成(E)-2-(5-((8-氯-10-甲基-10H-吩噻嗪-3-基)亞甲基)-4-氧代-2_硫代四氫噻吩-3-基）乙酸7b
[0094] 化合物6&2(15〇11^，0.31111111〇1，169)，參照實施例16操作過程，分離得產(chǎn)物7匕 (132mg)，紅色固體，熔點：242°C，收率是94%。
[0095] = = 2.0Hz，lH)，7.37(d，J = 8.0Hz，lH)，7.32(d，J = 8.0Hz，lH)，7.26-7.24(m，2H)，4.89(s，2H)， 3·56(s，3H);ESI-MS m/z:449.1[M+H]+。
[0096] 實施例18:合成(E)-2-(5-((8-(二甲基氨基）-10-甲基-10H-吩噻嗪-3-基）亞甲 基)-4-氧代-2-硫代四氫噻吩-3-基）乙酸7c
[0097] 化合物6〇(19511^，0.38111111〇1)，參照實施例16操作過程，分離得產(chǎn)物7〇(15911^)，紅 色固體，熔點：289°C，收率是92 %。
[0098] 4 MMR(400MHz，DMS0)S7.76(s，lH)，7.31(s，lH)，7.24(td，J = 8.0，1.5Hz，lH)， 7.17(dd J = 8.0,1.0Hz,lH),7.02-7.0(m,2H),6.67(s,lH),4.70(s,2H),3.41(s,3H),2.70 (s,6H)；ESI-MS m/z:458.1[M+H]+〇
[0099] 實施例19:合成(E)-N，N-二甲基-2-(5-( (10-甲基-10H-吩噻嗪-3-基)亞甲基)-4-氧代-2-硫代四氫噻吩-3-基）乙酰胺8a
[0100] 將化合物7a(500mg，1 · 2mmol，leq)，二甲胺（2mol/L, 120L，2eq)，B0P(lg， 2.26謹〇1，1.969)和1^二異丙基乙胺（38711^，3111111〇1，2.569)加入到有二氯甲烷（311^)的 25mL的圓底燒瓶中，反應(yīng)3h。TLC監(jiān)測反應(yīng)結(jié)束后，加入DCM(10mL)和水，有機相干燥濃縮干 后，經(jīng)硅膠柱分離提純得到化合物8a(480mg)，暗紅色固體，熔點：217°C，收率90.5 %。
[0101] 咕 M1R(400MHz，CDC13)S7.61 (s，lH)，7.3(dd，J = 8.5,2· 0Hz,ΙΗ)，7.21((1, J = 2.0Hz,lH),7.17(td ,J = 7.5,1.5Hz,lH),7.12(dd ,J = 7.5,1.5Hz,lH),6.96(td ,J = 7.5, 1.0Hz lH),6.85-6.80(m,2H),4.91(s,2H),3.40(s,3H),3.11(s,3H),2.97(s,3H)；ESI-MS m/z:442.1[M+H] +〇
[0102] 實施例20:合成(E)-2-(5-((10-甲基-10H-吩噻嗪-3-基)亞甲基)-4-氧代-2-硫代 四氫噻吩-3-基)丙酸乙酯9al
[0103] 化合物2a(150mg，0.62mmol，leq)和2-(4-氧代-2-硫代噻唑烷-3-基）丙酸乙酯 (160mg，0 · 68mmol，1 · leq)，參照實施例11操作過程，分離得產(chǎn)物9al (246mg)，紅色固體，熔 點：177°(：，收率87%。
[0104] 咕 Mffi(400MHz，CDC13)S7.58(s，lH)，7.28(dd，J = 8 ·5,2 ·0Ηζ，1Η)，7.2(d，J = 2·0Ηζ，1Η)，7.17(td，J = 7.5，1.5Hz，lH)，7.12(dd，J = 7.5，1.5Hz，lH)，6.96(t，J = 7.5Hz， 1H) ,6.84-6.80(m,2H) ,4.4(t ,J = 7Hz , 2H) ,4.13(q ,J = 7.0Hz , 1H), 3.40(s, 3H), 2.73(t ,J = 7.5Hz,2H),1.24(t,J = 7.5Hz,3H)；ESI-MS m/z:457.1 [M+H] + 〇
[0105] 實施例21:合成(E)-2-(5-((10-甲基-10H-吩噻嗪-3-基)亞甲基)-4-氧代-2-硫代 四氫噻吩-3-基)丙酸叔丁酯9a2
[0106] 化合物2&(10011^，0.42111111〇1，169)和2-(4-氧代-2-硫代噻唑烷-3-基）丙酸叔丁酯 (119mg，0 · 46mmo 1，1 · 1 eq)，參照實施例11操作過程，分離得產(chǎn)物9a2(160mg)，紅色固體，熔 點：182 °C，收率 80 %。
[0107] 咕 M1R(400MHz，CDC13)S7.57(s，1H)，7.29(dd，J = 8.5,2.0Hz，lH)，7.2(d，J = 2·0Ηζ，1Η)，7.17(td，J = 7.5，1.5Hz，lH)，7.12(dd，J = 7.5，1.5Hz，lH)，6.97(t，J = 7.5Hz， 1H) ,6.84-6.80(m，2H)，4.36(t，J = 7Hz，2H)，3.39(s，3H)，2.65(t，J = 7.5Hz，2H)，1.42(s， 9H);ESI-MS m/z:485.1[M+H]+。
[0108] 實施例22:合成(E)-2-(5-( (10-甲基-10H-吩噻嗪-3-基)亞甲基)-4-氧代-2-硫代 四氫噻吩-3-基)丙酸10a
[0109] 化合物9&2(20011^，0.43111111〇1)，參照實施例16操作過程，分離得產(chǎn)物10 &(16111^)， 紅色固體，熔點：250°C，收率是92 %。
[0110] ΧΗ NMR(400MHz,DMS0)5l2.51(bs,lH),7.72(s,lH),7.48(dd,J = 8.5,2.0Hz,lH), 7.42(d ,J = 2.0Hz,lH),7.25(td ,J = 7.5,1.5Hz,lH),7.19(dd ,J = 7.5,1.5Hz,lH),7.11(d, J = 8.5Hz,lH) ,7.05-6.99(m,2H),4.22(t,J = 7.0Hz,2H) ,3.38(s,3H) ,2.62(t,J = 7.5Hz, 2H);ESI-MS m/z:429.1[M+H]+。
[0111] 實施例23:合成2-(5-(10-甲基-10H-吩噻嗪-3-基）亞烯丙基)-4-氧代-2-硫代四 氫噻吩-3-基）乙酸乙酯llal
[0112] 化合物3a(210mg，0.78mmol，leq)和2-(4-氧代-2-硫代噻唑烷-3-基）乙酸乙酯 (18811^，0.86臟〇1，1.169)，參照實施例11操作過程，分離得產(chǎn)物11 &1(23〇1^)，紅色固體，熔 點：100 °C，收率 64 %。
[0113] 4 NMR(400MHz，CDC13)S7.44((1, J= 11 ·0Ηζ，1Η) ,7.30-7 ·27(ι?，2H)，7.17(td，J = 7.5，1.5Hz，lH)，7.12(dd，J = 7.5，1.5Hz，lH)，6.98-6.92(m，2H)，6.82(d，J = 8.0Hz，lH)， 6.77(d ,J = 8.0Hz,lH) ,6.59(dd ,J= 11.0,11.0Hz , 1H), 4.80( s , 2H) ,4.21 (q, J = 7.0Hz , 2H),3.39(s,3H),1.26(t,J = 7.1Hz,3H)；ESI-MS m/z:469.1 [M+H] + 〇
[0114] 實施例24:合成2-(5-(10-甲基-10H-吩噻嗪-3-基）亞烯丙基)-4-氧代-2-硫代四 氫噻吩-3-基）乙酸叔丁酯lla2
[0115] 化合物3a(300mg，1.12mm〇l，leq)和2-(4-氧代-2-硫代噻唑烷-3-基）乙酸叔丁酯 (304mg，1.23mmol，l.leq)，參照實施例11操作過程，分離得產(chǎn)物lla2(357mg)，紅色固體，熔 點：202 °C，收率 68 %。
[0116] 4 NMR(400MHz，CDC13)S7.43((1, J= 12·0Ηζ，1H) ,7.32-7 ·26(ι?，2H)，7.17(td，J = 7.5，1.5Hz，lH)，7.12(dd，J = 7.5，1.5Hz，lH)，6.99-6.91(m，2H)，6.82(d，J = 8.0Hz，lH)， 6.76(d ,J = 8.0Hz,lH), 6.58(dd,J= 11.0,11.0Hz, 1H) ,4.70(s, 2H) ,4.38(s , 3H), 1.44(s, 9H);ESI-MS m/z:497.2[M+H]+。
[0117] 實施例25:合成2-(5-(8-氯-10-甲基-10H-吩噻嗪-3-基)亞烯丙基)-4-氧代-2-硫 代四氫噻吩-3-基）乙酸叔丁酯llb2
[0118] 化合物3b(270mg，0.9mm〇l，leq)和2-(4-氧代-2-硫代噻唑烷-3-基）乙酸叔丁酯 (25011^，0.99臟〇1，1.169)，參照實施例11操作過程，分離得產(chǎn)物^2(2501^)，紅色固體，熔 點：202°C，收率52.6%。
[0119] = 7.26(d ,J=1.5Hz,lH) ,7.01 (d ,J= 12.0Hz , 1H) ,6.92(dd ,J = 7.5,1.5Hz , 1H) ,6.77(d ,J = 2.0Hz,lH),6.61(m,2H),6.57(dd,J=11.0,11.0Hz,lH),4.74(s,2H),3.36(s,3H),1.44(s, 9H);ESI-MS m/z:531.1[M+H]+。
[0120] 實施例26:合成2-(5-(10-甲基-10H-吩噻嗪-3-基）亞烯丙基)-4-氧代-2-硫代四 氫噻吩-3-基）乙酸12a
[0121] 化合物1 la2(198mg，0.4mmol)，參照實施例16操作過程，分離得產(chǎn)物12a(168mg)， 紅色固體，熔點：246°C，收率是95 %。
[0122] 4 MMR(400MHz，DMS0)S7.62((1, J = 3.5Hz，lH)，7.56((1, J = 8.0Hz，lH)，7.51(dd，J = 8.0,3.5Hz,lH) ,7.32(d,J = 15.0Hz,lH) ,7.23(t,J = 7.0Hz, 1H) ,7.18(dd,J = 8.0, 3.5Hz,lH),7.07(dd,J=15.0,15.0Hz,lH),7.05-6.95(m,3H),4.69(s,2H),3.35(s,3H)； ESI-MS m/z:441.1[M+H]+。
[0123] 實施例27:合成2-(5-(8-氯-10-甲基-10H-吩噻嗪-3-基)亞烯丙基)-4-氧代-2-硫 代四氫噻吩-3-基）乙酸12b
[0124] 化合物11&2(15〇11^，0.28臟〇1)，參照實施例16操作過程，分離得產(chǎn)物12&(1211^)， 紅色固體，熔點：246°C，收率是90 %。
[0125] 4 MMR(400MHz，（CD3)2C0)S7.58-7·51(ι?，3H)，7.30(d，J= 15.0,1H)，7.26((1, J = 8.0Hz,lH),7.15(d,J=8.0Hz,lH),7.08-6.98(m,4H),4.84(s,2H),3.86(s,3H)；ESI-MS m/ z:475.1[M+H]+〇
[0126] 實施例28:合成2-(5-(10-甲基-10H-吩噻嗪-3-基)亞烯丙基)-4-氧代-2-硫代四 氫噻吩-3-基)丙酸叔丁酯13a2
[0127] 化合物3a(100mg，0.37mmol，leq)和2-(4-氧代-2-硫代噻唑烷-3-基）丙酸叔丁酯 (10811^，0.41111111〇1，1.169)參照實施例11操作過程，分離得產(chǎn)物13 &2(11811^)，紅色固體，熔 點：202 °C，收率是62 %。
[0128] 4 NMR(400MHz，CDC13)S7.42((1, J= 12·0Ηζ，1H) ,7.32-7 ·28(ι?，2H)，7.19(td，J = 7.5，1.5Hz，lH)，7.14(dd，J = 7.5，1.5Hz，lH)，7.00-6.92(m，2H)，6.84(d，J = 8.0Hz，lH)， 6.78(d ,J = 8.0Hz,lH) ,6.59(dd ,J= 13.0,13.0Hz , 1H), 4.35( t ,J = 7.5Hz , 1H), 3.40(s , 2H),2.66(t,J = 7.5Hz,lH),1.44(s,9H)；ESI-MS m/z:511.2[M+H] + 〇
[0129] 實施例29:合成2-(5-(10-甲基-10H-吩噻嗪-3-基)亞烯丙基)-4-氧代-2-硫代四 氫噻吩-3-基））丙酸14a
[0130] 化合物13a2(100mg，0 · 2mmo 1)參照實施例16操作過程，分離得產(chǎn)物14a(77 · 5mg)， 紅色固體，熔點：267°C，收率是87 %。
[0131] ΧΗ NMR(400MHz,DMS0)513.4(s,1H) ,7.62(d,J = 3.5Hz,lH) ,7.52-7.46(m,2H), 7.29(d ,J = 15.0Hz, 1H) ,7.23( t,J = 8.0Hz,lH), 7.18(dd,J = 8.0,3.5Hz,lH), 7.06-6.95 (m,4H),4.19(t,J = 8.0Hz,2H) ,3.23(s,3H)2.60(t,J = 8.0Hz,2H).ESI-MS m/z:455.1[M+ H] +。
[0132] 實施例30:合成2-(5-( 10-甲基-10H-吩噻嗪-3-基)戊-2,4-二烯-1-亞基）-4-氧 代-2-硫代四氫噻吩-3-基）乙酸乙酯15al
[0133] 化合物4a(210mg，0.72mmol，leq)和2-(4-氧代-2-硫代噻唑烷-3-基）乙酸乙酯 (172mg，0 · 79mmo 1，1 · 1 eq)，參照實施例11操作過程，分離得產(chǎn)物15al (226mg)，紅色固體，熔 點：282 °C，收率 64 %。
[0134] 4 NMR(400MHz，CDC13)S7.38((1, J= 12.0Hz，lH)，7.22(m，2H)，7.16(td，J = 7.5， 1.5Hz,lH),7.12(dd ,J = 7.5,1.5Hz,lH),6.94(td ,J = 7.5,1.5Hz,lH),6.90(d ,J = 12.0Hz, 1H) ,6.86-6.71(m,4H) ,6.27(t ,J= 12.0Hz , 1H) ,4.79(s , 2H) ,4.21 (q ,J = 7.0Hz , 2H), 3.38 (s,3H),1.26(t,J = 7.1Hz,3H)；ESI-MS m/z:495.1 [M+H] + 〇
[0135] 實施例31:合成2-(5-( 10-甲基-10H-吩噻嗪-3-基)戊-2,4-二烯-1-亞基）-4-氧 代-2-硫代四氫噻吩-3-基）乙酸叔丁酯15a2
[0136] 化合物4a(210mg，0.72mmol，leq)和2-(4-氧代-2-硫代噻唑烷-3-基）乙酸乙酯 (172mg，0 · 79mmo 1，1 · 1 eq)，參照實施例11操作過程，分離得產(chǎn)物15a2(226mg)，紅色固體，熔 點：282 °C，收率 64 %。
[0137] 4 NMR(400MHz，CDC13)S7.39((1, J= 12·0Ηζ，1H) ,7.26-7 ·23(ι?，2H)，7.18(td，J = 7·5，1·5Ηζ，1Η)，7.14(dd，J = 7.5，1.5Hz，lH)，6.95(td，J = 7.5，1.5Hz，1H) ,6.92-6.71 (m, 5H),6.28(t,J=12.0Hz,1H),4.71(s,2H),3.39(s,3H),1.46(s,9H)；ESI-MS m/z:523.2[M+ H] +。
[0138] 實施例32:合成2-(5-( 10-甲基-10H-吩噻嗪-3-基)戊-2,4-二烯-1-亞基）-4-氧 代-2-硫代四氫噻吩-3-基）乙酸16
[0139] 化合物15a2(100mg，0 · 19mmo 1)參照實施例16操作過程，分離得產(chǎn)物16(75mg)，紅 色固體，熔點：190°C，收率84%。
[0140] 咕匪1?(4001取，0150)37.55((1，了=12.0泡，1!1)，7.43((1(1，了 = 8.0，1.5取，1!1)， 7.40(d,J=1.5Hz,1H),7.26-7.16(m,3H),7.12(d,J=12.0Hz,1H),7.00-6.95(m,3H),6.91 (d ,J= 12.0Hz, 1H),6.51 (t,J = 12Hz,lH) ,4.63(s,2H) ,3.33(s,3H) .ESI-MS m/z:467.1[M+ H] +。
[0141] 實施例33:合成3- (5-( 10-甲基-10H-吩噻嗪-3-基)戊-2，4-二烯-1-亞基)-2，4-硫 代噻唑烷-3-基)丙酸叔丁酯17a2
[0142] 化合物4a(210mg，0.72mmol，leq)和2-(4-氧代-2-硫代噻唑烷-3-基）丙酸叔丁酯 (208mg，0.79mmol，1. leq)，參照實施例11操作過程，分離得產(chǎn)物17a2(234mg)，紅色固體，熔 點：174°(：，收率61%。
[0143] 4 NMR(400MHz，CDC13)S7.34((1, J= 12·0Ηζ，1H) ,7.25-7 ·21(ι?，2H)，7.18(td，J = 7.5,1.5Hz,lH) ,7.13(dd,J = 7.5,1.5Hz,lH),6.95(td,J = 7.5,1.5Hz,lH),6.90-6.70(m, 5H) ,6.24( t,J= 12.0Hz, 1H) ,4.33( t, J= 12.0Hz , 2H), 3.37(s , 3H), 2.65( t ,J= 12.0Hz , 2H)，1·44(s，9H);ESI-MS m/z:537·2[M+H] +。
[0144] 實施例34:合成3- (5-( 10-甲基-10H-吩噻嗪-3-基)戊-2，4-二烯-1-亞基)-2，4-硫 代噻唑烷-3-基)丙酸18
[0145] 化合物17&2(10011^，0.19111111〇1)參照實施例16操作過程，分離得產(chǎn)物18(7511^)，紅 色固體，熔點：247°C，收率84%。
[0146] 咕匪R(400MHz，DMS0)Sl2.5(s，lH)，7.49(d，J= 12.0Hz，1H)，7.42(dd，J = 8.0， 1.5Hz,lH) ,7.39(d ,J=1.5Hz,lH) ,7.23(td ,J = 8.0,1.5Hz , 1H), 7.19(dd ,J = 8.0,1.5Hz , 1H) ,7.16(d,J=1.5Hz,lH) ,7. ll(d,J=12.0Hz,lH) ,7.00-6.94(m,3H) ,6.89(d,J = 12.0Hz,lH),6.48(t ,J=12Hz,lH),4.18(t ,J = 8.0Hz,2H),3.32(s,3H),2.59(t ,J = 8.0Hz, 2H).ESI-MS m/z:481.1[M+H]+。
[0147]下面是吩噻嗪衍生物的實驗測試結(jié)果。
[0148] 1)吩噻嗪衍生物的吸收和發(fā)射(見表1):
[0149] 吸收光譜和發(fā)射波長是用多模式分光光度計（多功能酶標(biāo)儀 spectramaxParadigm，舊金山，加利福尼亞，美國）測試。
[0150] 2)結(jié)合試驗(見表2):
[0151]采用Αβ(1_42)聚集體固定濃度為ΙμΜ和不同濃度的熒光化合物結(jié)合。熒光信號檢 測是根據(jù)各自化合物的激發(fā)/發(fā)射光譜。Kd值采用Grafpad Prism軟件計算確定。
[0152] 3)β_淀粉樣蛋白的自聚集抑制活性測試方法(見表2):
[0153] β-淀粉樣蛋白（Afo-42)凍干粉溶解于六氟異丙醇，室溫靜置16個小時進行解聚，再 在室溫下用氮氣流吹除六氟異丙醇，得解聚的Αβι-42用DMS0溶解配制成濃度為200μΜ溶液， 用熒光法測定化合物的Αβ自聚集抑制活性。反應(yīng)總?cè)萘繛?0yL，內(nèi)含樣品的DMSO溶液5yL (濃度為200μΜ)，解聚的溶液5yL(濃度為200μΜ)，在37°C保溫72h后加入硫黃素 T 的磷酸二氫鉀緩沖液(PH=7.4)溶液40yL(濃度為200μΜ)，在paradigm微孔板檢測儀上讀取 熒光值，激發(fā)波長為485nm，發(fā)射波長下為435nm。所有樣品均平行測三次，以未加化合物的 測定組吸光度作為100%，測定的化合物組熒光值與未加化合物組相比較，降低的百分率即 為在20μΜ濃度下Αβ自聚集抑制率。
[0154]具體得到的測試結(jié)果如下：
[0155] 如表1所不，所有化合物最大吸收和焚光發(fā)射光譜值分別在470~510nm和640~ 700nm之間。大部分的化合物的發(fā)射光譜值>650nm。
[0156]表1:吩噻嗪衍生物吸收和熒光發(fā)射波長
[0159]
[0160] 如表2所示的化合物于Αβ(1-42)自聚體的結(jié)合能力測試結(jié)果來看，除了化合物7b 之外，這類化合物具有很強的于Αβ自聚體結(jié)合能力，特別是化合物6al，其Kd值僅為7.5。另 外，在體外化合物與淀粉樣蛋白的自聚集抑制活性測試中顯示，除化合物12b之外，剩下 的所有化合物對她-42的自聚集具有較好的抑制作用，它們的抑制作用都比對照物姜黃素 要強，特別是化合物12a，達到了84.9%抑制強度，而同等條件下，姜黃素的抑制強度僅為 41%。因此，這類化合物也具有治療抗阿茨海默癥的潛力。
[0161 ]表2:吩噻嗪衍生與Αβ自聚集體的結(jié)合常數(shù)和抑制率

[0165]上述實施例為本發(fā)明較佳的實施方式，但本發(fā)明的實施方式并不受上述實施例的 限制，其他的任何未背離本發(fā)明的精神實質(zhì)與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡化， 均應(yīng)為等效的置換方式，都包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項】
1. 一種吩噻嗪衍生物，其特征在于:具有如式I所示通式：其中:Ri為H、C1或N(CH3)2中的一種； R2 為H、N(CH3)2、Et 或 tBu 中的一種； R3 為 CH3; m為整數(shù)1或2; n為整數(shù)1，2或3。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的吩噻嗪衍生物，其特征在于:包括由權(quán)利要求1中的吩噻嗪衍 生物在醇溶液中與鹽酸、醋酸、三氟乙酸制備相應(yīng)的鹽酸鹽、醋酸鹽、三氟乙酸鹽。3. 權(quán)利要求1所述的吩噻嗪衍生物的制備方法，其特征在于:包括如下步驟： (1) 中間體醛化合物2，3，4的制備：吩噻嗪或2-氯吩噻嗪甲基化之后，經(jīng)維爾斯邁爾一 哈克反應(yīng)引入醛基，得到化合物2,再經(jīng)磷葉立德反應(yīng)引入一個烯烴鍵，得到化合物3,重復(fù) 同樣的反應(yīng)再引入一個烯烴鍵，最后得到化合物4; (2) 中間體5的制備:甘氨酸乙酯，叔丁酯鹽酸鹽或3-氨基丙酸乙酯，叔丁酯與2,2'_(硫 代羰基(硫)）二乙酸進行縮合反應(yīng)，得到中間體5; (3) 化合物6，7，8，9，10的制備：10-甲基-10H-吩噻嗪-3-甲醛的8位取代的化合物2與中 間體5進行Knoevenagel縮合反應(yīng)，得到化合物6和9;在酸性條件下脫酯反應(yīng)，化合物6和9轉(zhuǎn) 化成酸7和10;在卡特縮合劑存在條件下，化合物7與二甲胺反應(yīng)形成酰胺8，其中h，R 2，R3， m，n與權(quán)利要求1中相同； ⑷化合物11，12，13，14的制備:參照步驟(3)中有關(guān)的反應(yīng)，如-3-(10-甲基-1011-吩 噻嗪-3-基)丙稀醛的8位取代的化合物3與中間體5進行Knoevenagel縮合反應(yīng)，得到化合物 11和13;在酸性條件下脫酯反應(yīng)，化合物11和13轉(zhuǎn)化成酸12和14，其中h，R 2，R3，m，n與權(quán)利 要求1中相同； (5)化合物15，16，17，18的制備：同樣參照（3)中有關(guān)的反應(yīng)，（2E，4E)-5-(10-甲基-l0H-吩噻嗪-3-基)戊-2,4-二稀醛的化合物4與中間體5進行Knoevenagel縮合反應(yīng)，得到化 合物15和17;在酸性條件下脫酯反應(yīng)，化合物15和17轉(zhuǎn)化成酸16和18,其中，m，n與 權(quán)利要求1中相同； 上述產(chǎn)物的化合物6-18任意一項皆為目標(biāo)產(chǎn)物吩噻嗪衍生物。4. 權(quán)利要求1或2中所述的吩噻嗪衍生物的應(yīng)用，其特征在于:應(yīng)用于阿爾茨海默氏病 淀粉樣蛋白0斑塊成像的近紅外熒光分子探針。5. 權(quán)利要求1或2中所述的吩噻嗪衍生物的應(yīng)用，其特征在于:應(yīng)用制備治療阿茨海默 癥的藥物。
【文檔編號】C07D417/06GK106045986SQ201610380172
【公開日】2016年10月26日
【申請日】2016年5月31日
【發(fā)明人】陳惠雄, 帕斯卡·道, 郭啟輝, 葉飛飛
【申請人】廣東工業(yè)大學(xué)