包含自脫落基團(tuán)的化合物的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及包含自脫落基團(tuán)（self-immolativegroup)的化合物，且本發(fā)明的包 含自脫落基團(tuán)的化合物可以包括對靶標(biāo)具有底物特異性的蛋白（例如，寡肽、多肽、抗體 等）和具有特定功能或活性的活性劑（例如，藥物、毒素、配體、檢測探針等）。
【背景技術(shù)】
[0002] 抗體-藥物偶聯(lián)（ADC)技術(shù)是引起癌細(xì)胞凋亡同時(shí)在毒素與結(jié)合至抗原的抗體結(jié) 合之后在細(xì)胞中釋放毒性物質(zhì)的新的靶向技術(shù)。因?yàn)锳DC技術(shù)可使藥物被精確地遞送到靶 癌細(xì)胞并僅在特定條件下釋放，同時(shí)使對健康細(xì)胞的影響最小化，其可以比治療抗體本身 具有更優(yōu)異的功效，并且相比現(xiàn)有抗癌藥物，其顯著降低了發(fā)生不良反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)。
[0003] 以上所描述的抗體-藥物偶聯(lián)物的基本結(jié)構(gòu)是由"抗體-連接體-低分子藥物 (毒素）"組成。這里，除了起到簡單地連接抗體與藥物的功能性作用外，連接體應(yīng)允許藥物 顯示出對靶癌細(xì)胞的藥物作用，同時(shí)藥物在循環(huán)時(shí)穩(wěn)定地到達(dá)靶細(xì)胞且被引入到細(xì)胞中之 后，通過抗體-藥物解離現(xiàn)象容易地被分離（例如，酶水解導(dǎo)致的結(jié)果）。也就是說，由于抗 體-藥物偶聯(lián)物的功效、全身性毒性等取決于連接體的穩(wěn)定性，連接體在安全性方面起著 重要作用（DiscoveryMedicine2010, 10 (53) :329-39)〇
[0004] 發(fā)展到現(xiàn)在的抗體-藥物偶聯(lián)物的連接體大致分為不可裂解型和可裂解型。
[0005] 作為不可裂解的連接體，主要使用硫醚，由于連接體在細(xì)胞中的分離導(dǎo)致藥物不 會解離，但藥物以這樣的形式解離，即其中藥物包括連接體和衍生自抗體的單個(gè)氨基酸。在 主要使用硫醇-馬來酰亞胺接合方法的情況下，在pH為約6-7時(shí)反應(yīng)容易進(jìn)行，但逆反應(yīng) 也可以通過化學(xué)方式容易地進(jìn)行，從而存在穩(wěn)定性問題。
[0006] 作為可裂解的連接體，主要使用通過化學(xué)方法分離的連接體或通過酶反應(yīng)水解的 連接體。作為具有化學(xué)分離機(jī)理的連接體，含二硫鍵的連接體是代表性的。此外，也使用腙 或月虧連接體。
[0007] 使用利用硫醇交換反應(yīng)解離藥物的現(xiàn)象的二硫連接體，利用了這樣的事實(shí)，即細(xì) 胞中硫醇的濃度（特別是，谷胱甘肽）比血液中的高。然而，由于各種類型的硫醇（例如， 白蛋白和谷胱甘肽）存在于血液中，藥物可以在循環(huán)過程中分離。在腙連接體的情況下，已 知腙連接體在血液中相對穩(wěn)定，但在其中酸度高的細(xì)胞、核內(nèi)體或溶酶體中不穩(wěn)定，使得腙 連接體迅速水解（BioconjugateChem2008，19,759_765;BioconjugateChem·，2010, 21， 5-13)〇
[0008] 為了解決上述問題，研發(fā)了通過酶反應(yīng)在細(xì)胞中水解的連接體，并且肽連接體 (例如，纈氨酸-瓜氨酸）和β-葡糖苷酸連接體屬于其中。纈氨酸-瓜氨酸和β-葡糖苷 酸不直接連接到藥物，但結(jié)合至自脫落基團(tuán)，使得通過酶反應(yīng)水解后，藥物通過如1，6-消 除或環(huán)化機(jī)制而解離，從而表現(xiàn)出功效（ClinicalCancerRes. ,2005,11,843-852)。
[0009] 據(jù)報(bào)道，纈氨酸-瓜氨酸肽連接體被溶酶體蛋白酶如組織蛋白酶B選擇性地分 解，并且其相比于化學(xué)分解的腙連接體，增加了在血液中的穩(wěn)定性，從而增強(qiáng)了抗癌效果 (BioconjugateChem.，2008, 19, 1960-1963 ;J.Org.Chem.，2002, 67, 1866-1872)。然而，妝 接頭具有疏水性，使得存在諸如制備的抗體-藥物偶聯(lián)物聚集等這樣的缺點(diǎn)。
[0010] 不同于肽連接體，公認(rèn)通過β-葡糖苷酸酶水解的β-葡糖苷酸連接體，具有高親 水性，使得在β-葡糖苷酸連接體結(jié)合至具有高疏水性藥物時(shí)，可以增加抗體-藥物偶聯(lián)物 的溶解性。已報(bào)道了使用β-葡糖苷酸連接體制備抗體-藥物偶聯(lián)物的抗體與各種藥物結(jié) 合的實(shí)例（例如，單甲基阿里他?。╩onomethylauristatin)F，單甲基阿里他汀Ε，阿霉素丙 基嚼唑靈（doxorubicinpropyloxazoline) (DP0))(ConjugationChem.，2006, 17,831-840 ; US2012/0107332)。根據(jù)該報(bào)道，使用葡苷酸連接體制備的抗體-藥物偶聯(lián)物在大鼠血漿中 顯著穩(wěn)定，但其在小鼠血漿中的穩(wěn)定性沒有報(bào)道。
[0011] 因此，本發(fā)明的目的是開發(fā)一種包含自脫落基團(tuán)的有效連接體，其能夠在血漿中 更穩(wěn)定，在循環(huán)中更穩(wěn)定，以及使藥物在癌細(xì)胞中容易地釋放從而發(fā)揮出藥物作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0012] 技術(shù)問題
[0013] 本發(fā)明的目的是提供包含自脫落基團(tuán)的化合物。
[0014] 技術(shù)方案
[0015] 在一個(gè)總的方面，包含自脫落基團(tuán)的化合物用下述化學(xué)式I表示：
[0016] [化學(xué)式I]
[0017]
[0018] G是葡糖苷酸基團(tuán)或其衍生物；
[0019] A是（CrC2。）烴基、生物材料或改性生物材料；
[0020] B是（CfQ。。）烴基；
[0021] W是吸電子基團(tuán)；
[0022] Z是氫、（C「CS)烷基、鹵素、氰基或硝基；
[0023] η是1-3的整數(shù)，且當(dāng)η是2或以上的整數(shù)時(shí)，各個(gè)Z彼此相同或不同；
[0024] L是通過共價(jià)鍵連接自脫落基團(tuán)的Α和W的連接體；以及
[0025] 札和R2各自獨(dú)立地為氫、（C「Cs)烷基或（C3_CS)環(huán)烷基。
[0026] G可以渴
民可以是氫或羧基保護(hù)基，且R4各自獨(dú)立地為氫或 羥基保護(hù)基。
[0027] W可以是-C(0)-、-C(0)NR'-、-C(0) 0-、-S02NR'-、-P(0)R"NR' -、-S0NR' -或-P02 NR' -，且R'和R"各自獨(dú)立地為氫、（C「CS)烷基、（C3-Cs)環(huán)烷基、（C「CS)烷氧基、（CfCs) 烷硫基、單-或雙-((；-(；)烷基氨基、（C3-C2。）雜芳基或（C6-C2。）芳基。
[0028] 連接體L可以是具有1-50個(gè)碳原子的亞烷基并滿足下述（i)至（iv)中的至少一 個(gè)：
[0029] (i)該亞烷基包括至少一個(gè)不飽和鍵，
[0030] (ii)該亞烷基包括至少一個(gè)雜亞芳基，
[0031] (iii)該亞烷基的碳原子被選自氮（N)、氧（0)和硫（S)中的一個(gè)或多個(gè)雜原子取 代，以及
[0032] (iv)該亞烷基進(jìn)一步被具有1-20個(gè)碳原子的一個(gè)或多個(gè)烷基取代。
[0033] 連接體L可以包括由下述化學(xué)式A表示的至少一個(gè)異戊二烯基（isoprenyl)衍生 單元，其被類異戊二烯轉(zhuǎn)移酶識別。
[0034] 化學(xué)式A
[0035]
[0036] 連接體L可以進(jìn)一步包括通過1，3-偶極環(huán)加成反應(yīng)、異狄爾斯反應(yīng)、親核取代反 應(yīng)、非輕醛型羰基反應(yīng)、碳-碳多重鍵加成、氧化反應(yīng)或鏈接反應(yīng)（clickreaction)形成的 結(jié)合單元。
[0037] 結(jié)合單元可通過乙炔和疊氮化物之間的反應(yīng)或者醛或酮基團(tuán)和肼或羥胺之間的 反應(yīng)形成。
[0038] 結(jié)合單元可以由以下化學(xué)式B、C、D或E表示：
[0039] 化學(xué)式B
[0047]Q是單鍵或具有1-30個(gè)碳原子的亞烷基；
[0048] Rn是氫或具有1-10個(gè)碳原子的烷基；以及
[0049] L2是具有1-30個(gè)碳原子的亞烷基。
[0050] 連接體L還可以包括由以下化學(xué)式F或G表示的連接單元：
[0051] 化學(xué)式F
[0052] -(CH2)r(V(CH2)p)q_，
[0053] 化學(xué)式G
[0054] -(CH2CH2X)w_，
[0055] V是單鍵、-〇-、-s-、-nr21-、-c(〇)nr22-、-nr23c(〇) -、-nr24so2-或-so2nr25-;
[0056] X是 _〇_、（C「C8)亞烷基或-NR2「；
[0057] R21至R25各自獨(dú)立地為氫、（C「C6)烷基、（C「C6)烷基（C6-C2。）芳基或（C「C6)烷 基（C3_C2。）雜芳基；
[0058] r是1-10的整數(shù)；
[0059]p是0-10的整數(shù)；
[0060]q是1-10的整數(shù)；以及
[0061]w是1-10的整數(shù)。
[0062] 當(dāng)A是具有1-20個(gè)碳原子的烴基時(shí)，L可以是
. m
*V可以是單鍵、_〇_、_S-、-NR21-、-C(0)NR22-、-NR23C(0)-、_ ，. nr24so2-或-so2nr25-，r21至R25可以各自獨(dú)立地為氫、（CfC6)烷基、（CfC6)烷基（c6-c2。）芳 基或（Q-Cg)烷基（C3_C2。）雜芳基，r可以是1_10的整數(shù)，p可以是0_10的整數(shù)，q可以是 1-10的整數(shù)，且Q可以是單鍵。
[0063] 生物材料可以是蛋白質(zhì)。
[0064] 蛋白質(zhì)可以是寡肽、多肽、抗體、抗原性多肽的片段，或重復(fù)體（repebody)。
[0065] 蛋白質(zhì)可具有能夠被類異戊二烯轉(zhuǎn)移酶識別的氨基酸基序。
[0066] 蛋白質(zhì)可進(jìn)一步包括由蛋白質(zhì)和氨基酸基序之間的氨基酸、寡肽或多肽組成的間 隔單元。
[0067] 蛋白質(zhì)可通過氨基酸基序共價(jià)鍵合至連接體L。
[0068] 氨基酸基序可共價(jià)鍵合到蛋白質(zhì)C-端，或共價(jià)鍵合至與蛋白質(zhì)C-末端共價(jià)鍵合 的至少一個(gè)間隔單元。
[0069] 蛋白質(zhì)的C-端可以是抗體輕鏈或重鏈的C-端。
[0070] 類異戊二烯轉(zhuǎn)移酶可以是法尼基蛋白轉(zhuǎn)移酶（FTase)或香葉烯基轉(zhuǎn)移酶 (GGTase)〇
[0071] 抗體可以選自完整多克隆抗體、完整單克隆抗體、抗體片段、單鏈Fv(SCFv)突變 體、多特異性抗體、雙特異性抗體、嵌合抗體、人源化抗體、人抗體、包括抗體的抗原決定部 分的融合蛋白和包括抗原識別位點(diǎn)的其它修飾的免疫球蛋白分子。
[0072] 抗體可以選自下組：莫羅單抗CD3、阿昔單抗、利妥昔單抗、達(dá)珠單抗、帕利珠 單抗、英夫利昔單抗、曲妥珠單抗（稱為"赫賽汀'）、依那西普、巴利昔單抗、吉妥珠單 抗、奧唑米星、阿侖單抗、替伊莫單抗、阿達(dá)木單抗、阿來塞普、奧馬珠單抗、依法珠單抗、 托西莫單抗-I131、西妥昔單抗、貝伐單抗、那他珠單抗、蘭尼單抗、帕尼單抗、依庫珠單 抗、利那西普（rilonacept)、賽妥珠單抗（certolizumab口68〇1)、略咪泊略、AMG-531、 CNTO-148、CNTO-1275、ABT-874、LEA-29Y、貝利單抗、TACI-Ig,第二代抗CD20、ACZ-885、 托珠單抗、atlizumab、美泊利單抗、帕妥珠單抗、HuMaxCD20、tremelimumab(CP-675206)、 ticilimumab、MDX-010、IDEC-114、inotuzumabozogamycin、HuMaxEGFR、阿柏西普、 艾力亞（VEGFTrap-Eye)、HuMax-〇)4、丙氨酸-丙氨酸、ChAglyO)3、TRX4、卡妥索單 抗、IGN101、MT-201、pregovomab、CH-14. 18、WX-G250、AMG-162、AAB-001、莫維珠單抗、 MEDI-524、efumgumab、Aurograb?:、瑞西巴庫、第三代抗CD20、LY2469298 和維妥珠單抗 (veltuzumab)〇
[0073] 蛋白質(zhì)可以是單克隆抗體。
[0074] 氨基酸基序可以是CYYX、XXCC、XCXC或CXX，其中C表示半胱氨酸，Y表示脂族氨 基酸，以及X表示決定類異戊二烯轉(zhuǎn)移酶的底物特異性的氨基酸。
[0075] B可以是活性劑。
[0076] 該活性劑可以是藥物、毒素、親和配體、檢測探針或其組合。
[0077] 該活性劑可以是免疫調(diào)節(jié)性化合物、抗癌劑、抗病毒劑、抗菌劑、抗真菌劑、抗寄生 蟲劑或其組合。
[0078] 具有氨基酸基序的蛋白質(zhì)可以選自A-HC-(G)ζ〇αΜ、A-HC-(G)ZCVLL、A-LC-(G) ζααΜ和A-LC- (G)ZCVLL，其中A表示抗體，HC表示重鏈，LC表示輕鏈，G表示甘氨酸單元，且 z是0-20的整數(shù)。
[0079] 化合物可以選自具有以下結(jié)構(gòu)的化合物：
[0080]
[0081]這里，
[0082]Z是氫、（C「CS)烷基、鹵素、氰基或硝基；
[0083]X是 _〇_、（C「C8)亞烷基或-NR2「；
[0084] R21是氫、（CrC6)烷基、（Ci-Q烷基（c6-c2。）芳基或（crc6)烷基（c3-c2。）雜芳基；
[0085] n是1-3的整數(shù)，且當(dāng)n是2或以上的整數(shù)時(shí)，各個(gè)Z彼此相同或不同；
[0086] r是1-10的整數(shù)；
[0087] q是1-10的整數(shù)；
[0088] w是1-10的整數(shù)。
[0089] X是0-10的整數(shù)；
[0090] g是1-10的整數(shù)；
[0091] -S-mAb是A-HC- (G)z〇aM-、A-HC- (G)ZCVLL-、A-LC- (G)ζ〇αΜ-或A-LC- (G)ZCVLL-， 其中A表示抗體，HC表示重鏈，LC表示輕鏈，G表示甘氨酸單元，且z是0-20的整數(shù)；
[0092] B是具有選自以下結(jié)構(gòu)的藥物：
[0093]
[OOL.」
[0095] y是1-10的整數(shù)。
[0096] 有益效果
[0097] 本發(fā)明的包含自脫落基團(tuán)的化合物可包括對靶標(biāo)具有底物特異性的蛋白（例如， 寡肽、多肽、抗體等）和具有特定的功能或活性的活性劑（例如，藥物、毒素、配體、檢測探針 等）。自脫落基團(tuán)相比現(xiàn)有的連接體可以在血液、血衆(zhòng)等中更穩(wěn)定，同時(shí)特異性結(jié)合在引起 疾病的細(xì)胞中超表達(dá)的蛋白，但也可以在靶癌細(xì)胞中分離，使得活性劑可以特異性地作用 于引起疾病的細(xì)胞，從而使得可使用該化合物治療疾病成為可能。
【附圖說明】
[0098] 圖1示出從β-葡糖苷酸基連接體的活性藥物釋放機(jī)制。
[0099] 圖2示出通過測量實(shí)驗(yàn)例1中β-葡糖醛酸酶的水解速率而獲得的結(jié)果。
[0100] 圖3示出通過測量實(shí)驗(yàn)例2中的血漿穩(wěn)定性而獲得的結(jié)果。
[0101] 圖4示出通過測量實(shí)施例5中制備的LCB14-0648的血漿穩(wěn)定性而獲得的結(jié)果。
[0102] 圖5示出通過測量實(shí)施例6中制備的LCB14-0663的血漿穩(wěn)定性而獲得的結(jié)果。
[0103] 圖6示出通過測量實(shí)施例7中制備的LCB14-0664的血漿穩(wěn)定性而獲得的結(jié)果。
[0104] 圖7是顯示實(shí)施例9中反應(yīng)的示意圖。
[0105] 圖8示出通過測量實(shí)施例8中制備的ADC(LCB14-0109)的小鼠血漿穩(wěn)定性而獲得 的結(jié)果。
[0106] 圖9示出通過多方面測量實(shí)施例9中制備的ADC(LCB14-0110)的血漿穩(wěn)定性而獲 得的結(jié)果。
[0107]圖10是示出通過觀察實(shí)驗(yàn)例6中依賴于QW劑量（載體，赫賽?。?mg/kg)，以及 ADC109(0.l、1.5mg/kg))的腫瘤體積而獲得的結(jié)果的曲線圖。
[0108]圖11是示出通過觀察實(shí)驗(yàn)例6中依賴于重復(fù)給藥（載體，赫賽?。?mg/kg)， ADC109(5mg/kg)，以及ADC110(5mg/kg))的藥物效果而獲得的結(jié)果的曲線圖。
[0109]圖12是示出通過觀察實(shí)驗(yàn)例6中依賴于單劑量給藥（載體，赫賽?。?mg/kg)， ADC109(5mg/kg)，與ADC110(5mg/kg))的藥物效果而獲得的結(jié)果的曲線圖。
[0110] 圖13示出通過評價(jià)實(shí)驗(yàn)例7中ADC110 (實(shí)施例10)的體外血漿穩(wěn)定性而獲得的 結(jié)果。
[0111] 圖14示出通過評價(jià)實(shí)驗(yàn)例7中ADC113 (實(shí)施例11)的體外血漿穩(wěn)定性而獲得的 結(jié)果。
[0112] 圖15示出通過評價(jià)實(shí)驗(yàn)例7中Kadcyla的體外血衆(zhòng)穩(wěn)定性而獲得的結(jié)果。
[0113] 圖16是示出通過觀察實(shí)驗(yàn)例8中小鼠體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)特性（PKprofile)而獲得 的結(jié)果的曲線圖。
[0114] 圖17是示出通過觀察實(shí)驗(yàn)例8中大鼠體內(nèi)ADC110 (實(shí)施例10)的PK特性而獲 得的結(jié)果的曲線圖。
[0115] 圖18是示出通過觀察實(shí)驗(yàn)例8中大鼠體內(nèi)ADC110 (實(shí)施例10)的藥物-抗體比 例（DAR)而獲得的結(jié)果的曲線圖。
[0116] 圖19是示出通過觀察實(shí)驗(yàn)例8中大鼠體內(nèi)ADC110 (實(shí)施例10)的自由有效載荷 濃度而獲得的結(jié)果的曲線圖。
[0117] 圖20是示出通過觀察實(shí)驗(yàn)例8中猴子體內(nèi)ADC110 (實(shí)施例10)的PK特性而獲 得的結(jié)果的曲線圖。
[0118] 圖21是示出通過觀察實(shí)驗(yàn)例8中猴子體內(nèi)ADC110 (實(shí)施例10)的藥物-抗體比 例（DAR)而獲得的結(jié)果的曲線圖。
[0119] 圖22是示出通過觀察實(shí)驗(yàn)例8中猴子體內(nèi)ADC110 (實(shí)施例10)的自由有效載荷 濃度而獲得的結(jié)果的曲線圖。
[0120] 最佳實(shí)施方式
[0121] 本發(fā)明涉及包含自脫落基團(tuán)的化合物。詳細(xì)而言，本發(fā)明的包含自脫落基團(tuán)的化 合物可由下述化學(xué)式1表示，并包括對靶標(biāo)具有底物特異性的蛋白質(zhì)（例如，寡肽、多肽、抗 體等）和具有特定功能或活性的活性劑（例如，藥物、毒素、配體、檢測探針等）。
[0122] 化學(xué)式I
[0123]
[0124]G是葡糖苷酸基團(tuán)或其衍生物；
[0125] A是（Q-CJ烴基、生物材料或改性生物材料；
[0126] B是（CfC·)烴基；
[0127]W是吸電子基團(tuán)；
[0128]Z是氫、（C「CS)烷基、鹵素、氰基或硝基；
[0129]η是1-3的整數(shù)，且當(dāng)η是2或以上的整數(shù)時(shí)，各個(gè)Z彼此相同或不同；
[0130]L是通過共價(jià)鍵連接自脫落基團(tuán)的Α和W的連接體；以及
[0131]札和R2各自獨(dú)立地為氫、（C「Cs)烷基或（C3_CS)環(huán)烷基。
[0132] 在本發(fā)明的包含自脫落基團(tuán)的化合物中，自脫落基團(tuán)可以結(jié)合至能夠通過葡 糖醛酸酶分離的葡糖苷酸，G是能夠通過β-葡糖醛酸酶分離的葡糖苷酸基或其衍生物，可 以由以下結(jié)構(gòu)表示
[0133]
[0134] (R3是氫或羧基保護(hù)基，1?4各自獨(dú)立為氫或羥基保護(hù)基。）
[0135] 羧基保護(hù)基是能夠用于有機(jī)合成的一般保護(hù)基，其可以優(yōu)選為：甲基、甲氧基甲 基、甲硫基甲基、四氫吡喃基、芐氧基甲基、苯甲酰甲基、N-苯二甲酰亞氨甲基、2, 2, 2-三氯 乙基、2-鹵代乙基、2-(對甲苯磺酰基）乙基、叔丁基、肉桂基、芐基、三苯甲基、雙（鄰-硝 基苯基）甲基、9-蒽基甲基、2-(9,10-二氧代）蒽基甲基、胡椒基、三甲基甲硅烷、叔丁基 二甲基甲硅烷或S-叔丁基、2-烷基-1，3-惡唑啉基，但不限于此。另外，羥基保護(hù)基是能 夠用于有機(jī)合成的一般保護(hù)基，其可以優(yōu)選為：乙?；⒓谆?、乙氧基乙基、苯甲?；⑵S基、 4_甲氧基芐基、3, 4-二甲氧基芐基、四氫吡喃基（THP)、四氫呋喃（THF)、叔丁基二甲基甲硅 烷（TBDMS)、三甲基甲硅烷（TMS)、三乙基甲硅烷（TES)、三異丙基甲硅烷（TIP)、叔丁基二苯 基甲硅烷（TBDPS)、三-異-丙基甲娃烷氧基甲基propylsilyloxymethyl(TOM)、β-甲氧 基乙氧基甲基（MEM)、甲氧基甲基（MOM)、烯丙基或三苯甲基，但不限于此。
[0136] 在本發(fā)明的包含自脫落基團(tuán)的化合物中，W是吸電子基團(tuán)，可以優(yōu)選 為：-C(0)-、-C(0)NR'-、-C(0) 0-、-S02NR'-、P(0)R"NR' -、-S0NR' -或-P02NR' -，但并不限 于此，且R'和R"可各自獨(dú)立地為：氫、（C1-C8)烷基、（C3-C8)環(huán)烷基、（C1-C8)烷氧基、 (C1-C8)烷硫基、單或二（C1-C8)烷基、（C3-C20)雜芳基或（C6-C20)芳基。
[0137] 在本發(fā)明的包含自脫落基團(tuán)的化合物中，連接體L可以是具有1-50個(gè)碳原子的亞 烷基，并滿足下述（i)至（iv)中的至少一個(gè)、優(yōu)選至少兩個(gè)：
[0138] (i)該亞烷基包括至少一個(gè)不飽和鍵，
[0139] (ii)該亞烷基包括至少一個(gè)雜亞芳基，
[0140] (iii)該亞烷基的碳原子被選自氮（N)、氧（0)和硫（S)的一個(gè)或多個(gè)雜原子取 代，以及
[0141] (iv)該亞烷基進(jìn)一步被具有1-20個(gè)碳原子的一個(gè)或多個(gè)烷基取代。
[0142] 在本發(fā)明的包含自脫落基團(tuán)的化合物中，連接體L可以包括由下述化學(xué)式A表示 的由類異戊二烯轉(zhuǎn)移酶識別的至少一個(gè)異戊二烯基衍生單元。
[0143]化學(xué)式A
[0144]
[0145] 連接體L可以進(jìn)一步包括通過1，3-偶極環(huán)加成反應(yīng)、異狄爾斯反應(yīng)、親核取代反 應(yīng)、非羥醛型羰基反應(yīng)、碳-碳多重鍵加成、氧化反應(yīng)或鏈接反應(yīng)形成的結(jié)合單元。結(jié)合單 元可通過乙炔和疊氮化物之間的反應(yīng)或者醛或酮基團(tuán)和肼或羥胺之間的反應(yīng)形成，其可以 由以下化學(xué)式B、C、D或E表示：
[0146] 化學(xué)式B
[0147]
[0148]
[0149]
[0150]
[0151]
[0152]
[0153]
[0154] Q是單鍵或具有1-30個(gè)碳原子的亞烷基；
[0155] Rn是氫或具有1-10個(gè)碳原子的烷基；以及
[0156] L2是具有1-30個(gè)碳原子的亞烷基。
[0157] 鏈接化學(xué)反應(yīng)在溫和的條件下進(jìn)行，從而使得可以容易地處理蛋白質(zhì)。鏈接化學(xué) 反應(yīng)顯示出顯著高的反應(yīng)特異性。因此，即使蛋白質(zhì)具有其它官能團(tuán)（例如，側(cè)鏈殘基，或 在C-或N-端），這些官能團(tuán)不會受到鏈接化學(xué)反應(yīng)的影響。例如，雖然蛋白質(zhì)的其它官 能團(tuán)不受鏈接化學(xué)反應(yīng)的影響，但可能會出現(xiàn)蛋白質(zhì)的疊氮基團(tuán)和乙炔基之間的鏈接化 學(xué)反應(yīng)。此外，鏈接化學(xué)反應(yīng)可能會特別出現(xiàn)，而無論參與的配體是何種類型。在一些情 況下，可以選擇配體以便提高整體反應(yīng)效率。例如，疊氮化物-乙炔鏈接化學(xué)反應(yīng)可能產(chǎn) 生具有高收率的三唑（參考：RhiannonK.Hiaetal，2009年修訂版，109,5620;Morten Meldal和ChristianWenzelTornoe，Chem, 2008年修訂版，108, 2952;HartmuthC.Kolbet al,Angew.ChemieInt.Ed.Engl.，2001，40, 2004,其全部通過引用并入本文）。