500r/min攪拌20min，然后5000r/min離心1min ;重復上述醇洗過程2遍，得到的離心沉淀即為粗果膠。
[0040]7、復溶透析
[0041]用粗果膠10倍質量的去離子水將步驟6)獲得的粗果膠復溶，再用50kDa的透析袋4°C透析48h，得到透析后的樣品即為果膠溶液。
[0042]8、冷凍干燥
[0043]將步驟7)得到的果膠溶液于_40°C真空冷凍干燥24h，得到高甲氧基果膠。
[0044]實施例2
[0045]1、果渣預處理
[0046]將榨汁后的蘋果果渣，100?110°C高溫高壓蒸汽滅酶lOmim。
[0047]2、糖洗、干燥粉碎
[0048]按1:10 (w/v)的比例用去離子水清洗步驟I)處理后獲得的果渣，以除去小分子糖和水溶性色素，500r/min攪拌20min，5000r/min離心1min ;重復上述果渣清洗步驟，直至洗滌后過濾的上清液中固形物含量小于0.2Brix ;40°C熱風干燥洗滌后的果渣，粉碎后，過60目篩得到果渣粉。
[0049]3、脫色
[0050]按l:10(w/v)比例用無水乙醇清洗步驟2)獲得的果渣粉以除去醇溶性色素，500r/min攪拌20min，5000r/min離心lOmin，重復上述果渣粉清洗步驟2次，得到脫色后的果渣粉。
[0051]4、熱酸浸提
[0052]按1:20 (w/v)比例混合步驟3)得到的脫色后的果渣粉和去離子水，用檸檬酸調pH為2.5，90°C水浴500r/min攪拌浸提120min后，5000r/min離心lOmin，取上清液；上清液再次重離心，取上清液并保存；沉淀用5倍沉淀質量的去離子水1000r/min攪拌20min，然后5000r/min離心lOmin，取上清液；合并兩次上清液。
[0053]5、醇沉
[0054]步驟4)獲得的上清液冷卻至室溫加入清液兩倍體積的無水乙醇，攪拌15min，4°C過夜醇沉8-12h，醇沉物5000r/min離心lOmin，再擠干醇沉物中殘留的乙醇。
[0055]6、醇洗除雜
[0056]加步驟5)擠干乙醇后的醇沉物10倍質量的濃度為95%乙醇洗滌步驟5)獲得的醇沉物，500r/min攪拌20min，然后5000r/min離心1min ;重復上述醇洗過程2遍，得到的離心沉淀即為粗果膠。
[0057]7、復溶
[0058]用粗果膠10倍質量的去離子水將步驟6)獲得的粗果膠復溶，得到果膠溶液。
[0059]8、冷凍干燥
[0060]將步驟7)得到的果膠溶液于_40°C真空冷凍干燥24h，得到高甲氧基果膠。
[0061]實施例3
[0062]1、果渣預處理
[0063]將榨汁后的蘋果果渣，100?110°C高溫高壓蒸汽滅酶lOmim。
[0064]2、糖洗、干燥粉碎
[0065]按1:10 (w/v)的比例用去離子水清洗步驟I)處理后獲得的果渣，以除去小分子糖和水溶性色素，500r/min攪拌20min，5000r/min離心1min ;重復上述果渣清洗步驟，直至洗滌后過濾的上清液中固形物含量小于0.2Brix ;40°C熱風干燥洗滌后的果渣，粉碎后，過60目篩得到果渣粉。
[0066]3、脫色
[0067]按l:10(w/v)比例用無水乙醇清洗步驟2)獲得的果渣粉以除去醇溶性色素，500r/min攪拌20min，5000r/min離心lOmin，重復上述果渣粉清洗步驟2次，得到脫色后的果渣粉。
[0068]4、熱酸浸提
[0069]按1:20 (w/v)比例混合步驟3)得到的脫色后的果渣粉和去離子水，用檸檬酸調pH為2.5，90°C水浴500r/min攪拌浸提120min后，5000r/min離心lOmin，取上清液；上清液再次重離心，取上清液并保存；沉淀用5倍沉淀質量的去離子水1000r/min攪拌20min，然后5000r/min離心lOmin，取上清液；合并兩次上清液。
[0070]5、醇沉
[0071]步驟4)獲得的上清液冷卻至室溫加入清液兩倍體積的無水乙醇，攪拌15min，4°C過夜醇沉8-12h，醇沉物5000r/min離心lOmin，再擠干醇沉物中殘留的乙醇。
[0072]6、復溶透析
[0073]用醇沉物10倍質量的去離子水將步驟5)獲得的醇沉物復溶，再用50kDa的透析袋4°C透析48h，得到透析后的樣品即為果膠溶液。
[0074]7、冷凍干燥
[0075]將步驟6)得到的果膠溶液于_40°C真空冷凍干燥24h，得到高甲氧基果膠。
【主權項】
1.一種蘋果果渣中高甲氧基果膠的制備方法，其特征在于包括如下步驟: .1)果渣預處理 將榨汁后的蘋果果渣，100?110°C高溫高壓蒸汽滅酶1mim ; .2)糖洗、干燥粉碎 按w/v 1:10的比例用去離子水清洗步驟I)處理后獲得的果渣，以除去小分子糖和水溶性色素，500r/min攪拌20min，5000r/min離心1min ;重復上述果渣清洗步驟，直至洗滌后過濾的上清液中固形物含量小于0.2Brix ;40°C熱風干燥洗滌后的果渣，粉碎后，過60目篩得到果渣粉； .3)脫色 按w/v 1:10比例用無水乙醇清洗步驟2)獲得的果渣粉以除去醇溶性色素，500r/min攪拌20min，5000r/min離心lOmin，重復上述果渣粉清洗步驟2次，得到脫色后的果渣粉； .4)熱酸浸提 按w/v 1:20比例混合步驟3)得到的脫色后的果渣粉和去離子水，用檸檬酸調pH為2.5，90°C水浴500r/min攪拌浸提120min后，5000r/min離心lOmin，取上清液；上清液再次重離心，取上清液并保存；沉淀用5倍沉淀質量的去離子水1000r/min攪拌20min，然后5000r/min離心lOmin，取上清液；合并兩次上清液，冷卻至室溫； .5)醇沉 步驟4)合并后的上清液加入上清液兩倍體積的無水乙醇，攪拌15min，4°C過夜醇沉8-12h后5000r/min離心lOmin，再擠干醇沉物中殘留的乙醇，得到醇沉物。 .6)醇洗除雜 將步驟5)得到的醇沉物用其10倍質量的濃度為95%的乙醇洗滌，500r/min攪拌20min，然后5000r/min離心1min ;重復上述醇洗過程2遍，得到的離心沉淀即為粗果膠； .7)復溶透析 用步驟6)獲得的粗果膠10倍質量的去離子水將粗果膠復溶，再用50kDa的透析袋4°C透析48h，得到透析后的樣品即為果膠溶液； .8)冷凍干燥 將步驟7)得到的果膠溶液于-40°C真空冷凍干燥24h，得到高甲氧基果膠。
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種蘋果果渣中高甲氧基果膠的制備方法，是首先采用高溫高壓蒸汽滅酶技術對原料預處理，然后經糖洗、干燥、粉碎，脫色，熱酸浸提，醇沉，醇洗除雜，復溶透析，冷凍干燥得酯化度大于80％高甲氧基果膠產品。本發(fā)明在蘋果果膠提取工藝中采用高分子量低溫透析工藝，進一步提高了果膠純度，使果膠產品適應范圍更廣，改變了原來果膠行業(yè)產品產量大、質量低的狀況，為從蘋果渣中提取高酯化度、高純度果膠產品提供了技術支持。
【IPC分類】C08B37/06
【公開號】CN105061635
【申請?zhí)枴緾N201510607389
【發(fā)明人】杜金華, 江楊
【申請人】山東農業(yè)大學
【公開日】2015年11月18日
【申請日】2015年9月22日