一種檢測前列腺癌易感性的方法及試劑盒的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及前列腺癌早期診斷領(lǐng)域，尤其涉及一種檢測前列腺癌易感性的方法及試劑盒。
【背景技術(shù)】
[0002]前列腺癌是男性最常見的惡性腫瘤，占男性癌癥死因的第二位，約占所有男性癌癥患者的40%。近年隨著人口老齡化及生活條件的改善，發(fā)病率有明顯增加的趨勢。前列腺癌通常生長緩慢，患者常常在發(fā)病數(shù)年之后才出現(xiàn)明顯的癥狀或體征，因此及時發(fā)現(xiàn)并早期治療是前列腺癌診治的關(guān)鍵，然而前列腺癌的發(fā)病原因目前尚不清楚。針對國內(nèi)外大量關(guān)聯(lián)研宄及流行病學研宄表明，前列腺癌與遺傳因素關(guān)系密切，現(xiàn)有技術(shù)中，通過基因檢測能夠提早診斷前列腺癌，但是這一基因檢測方法主要是針對歐洲人群的檢測，對于中國人，如果同樣使用這一基因檢測方法，則會產(chǎn)生較大誤差。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明提供一種檢測前列腺癌易感性的方法及試劑盒，解決缺乏針對中國人群的前列腺癌基因檢測方法的技術(shù)問題。
[0004]本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的:
[0005]一種檢測前列腺癌易感性的方法，包括:
[0006]提取被測者外周血的DNA ；
[0007]對所述被測者外周血的DNA的8q24染色體上的rsl456315，rsl6901979，rs6983267和rs7843031號SNP位點進行熒光定量PCR檢測，確定該位點的基因型；
[0008]對基因型進行分析；
[0009]根據(jù)基因型的分析結(jié)果，計算被檢測者前列腺癌易感程度的高低以及患病概率大小。
[0010]一種檢測前列腺癌易感性的試劑盒，包括檢測8q24染色體上的rs 1456315，rsl6901979，rs6983267和rs7843031號單核苷酸多態(tài)性位點的特異性引物對及特異性熒光探針對、熒光定量PCR的常規(guī)組件。
[0011]本發(fā)明提供一種檢測前列腺癌易感性的方法及試劑盒，通過提取被測者外周血的DNA ;對所述被測者的外周血DNA的8q24染色體上的rsl456315，rsl6901979，rs6983267和rs7843031號SNP位點進行熒光定量PCR檢測，確定該位點的基因型；對基因型進行分析；根據(jù)基因型的分析結(jié)果，計算被檢測者前列腺癌易感程度的高低以及患病概率大小。掌握了中國人群患前列腺癌的風險，提高了中國人群前列腺癌易感性的準確檢測。
【附圖說明】
[0012]為了更清楚地說明本發(fā)明實施例或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案，下面將對實施例中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本發(fā)明的一些實施例，對于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動性的前提下，還可根據(jù)這些附圖獲得其他的附圖。
[0013]圖1為本發(fā)明實施例提供的一種檢測前列腺癌易感性的方法的流程圖。
【具體實施方式】
[0014]為使本發(fā)明的上述目的、特征和優(yōu)點能夠更加明顯易懂，下面結(jié)合附圖和【具體實施方式】對本發(fā)明作進一步詳細的說明。
[0015]本發(fā)明實施例的應(yīng)用基礎(chǔ)主要為:運用特定的Illumina單核苷酸多態(tài)性(SNP)微陣列(iCOGS)分析，從495個前列腺癌病例以及640個對照的患者的外周血DNA中基因分型出211155個SNPs。利用meta分析的方法發(fā)現(xiàn)，主要存在4個8q24位點(rsl456315，rsl6901979，rs6983267和rs7843031)與中國人群前列腺癌患病風險獨立密切相關(guān)，而其他染色體區(qū)域似乎作用有限，并且在中國人群當中，在這4個位點上的風險等位基因出現(xiàn)的頻率要顯著高于歐洲人群。由于遺傳異質(zhì)性的存在，同一變異對不同群體的影響往往差異顯著，本發(fā)明實施例中所選取的4個風險變異位點相比歐洲人群來說，證明更適合中國人群?；谝陨系难绣郴A(chǔ)，詳細介紹本發(fā)明實施例中的一種檢測前列腺癌易感性的方法，如圖1所示，包括:
[0016]步驟101、提取被測者外周血的DNA ；
[0017]步驟102、對所述被測者的外周血DNA的8q24染色體上的rsl456315，rsl6901979，rs6983267和rs7843031號SNP位點進行熒光定量PCR檢測，確定該位點的基因型；
[0018]步驟103、對基因型進行分析；
[0019]步驟104、根據(jù)基因型的分析結(jié)果，計算被檢測者前列腺癌易感程度的高低以及患病概率大小。
[0020]其中，步驟103具體可以包括:
[0021]步驟103-1、采用Tap-Man-SNP基因分型技術(shù)對基因型進行快速鑒定；
[0022]步驟103-2、根據(jù)染色體8q24上4個位點上風險等位基因的數(shù)目分析被檢測者前列腺癌易感程度。
[0023]其中，本發(fā)明實施例涉及8個單核苷酸多態(tài)性SNP，4個位點中每個位點包含2個SNP,攜帶6個或者更多的風險等位基因的檢測者是只攜帶1-2個等位基因檢測者前列腺癌易感程度的3倍多。
[0024]本發(fā)明提供一種檢測前列腺癌易感性的方法，通過提取被測者外周血的DNA;對所述被測者外周血的DNA的8q24染色體上的rsl456315，rsl6901979，rs6983267和rs7843031號SNP位點進行熒光定量PCR檢測，確定該位點的基因型；對基因型進行分析；根據(jù)基因型的分析結(jié)果，計算被檢測者前列腺癌易感程度的高低以及患病概率大小。掌握了中國人群患前列腺癌的風險，提高了中國人群前列腺癌易感性的準確檢測。
[0025]本發(fā)明實施例還提供了一種檢測前列腺癌易感性的試劑盒，包括檢測8q24染色體上的rsl456315，rsl6901979，rs6983267和rs7843031號單核苷酸多態(tài)性位點的特異性引物對及特異性熒光探針對、熒光定量PCR的常規(guī)組件。
[0026]其中，所述熒光定量PCR的常規(guī)組件包括:Taq DNA聚合酶、dNTP混合液、MgC12溶液、熒光定量PCR反應(yīng)緩沖液和去離子水。
[0027]其中，該試劑盒實際應(yīng)用中，包括包裝盒體、襯墊、裝有檢測四個SNP位點的熒光定量PCR反應(yīng)液的四個試管、裝有陽性對照品的一個試管、裝有陰性對照品的一個試管組成，襯墊上設(shè)有容器孔，分別放置四管熒光定量PCR反應(yīng)液、陽性對照品和陰性對照品。
[0028]本發(fā)明實施例依據(jù)染色體8q24區(qū)域上的這4個位點，開發(fā)出一種檢測前列腺癌易感性的試劑盒，該試劑盒涉及8個SNP (每個位點包含2個SNP)，采用Tap-Man-SNP基因分型技術(shù)對其快速鑒定，根據(jù)患者攜帶染色體8q24區(qū)域中4個位點上風險等位基因的數(shù)目篩查前列腺癌遺傳易感人群，以便盡早對其進行癌癥預(yù)防措施，延緩甚至避免中國高危人群罹患前列腺癌。
[0029]以上對本發(fā)明進行了詳細介紹，本文中應(yīng)用了具體個例對本發(fā)明的原理及實施方式進行了闡述，以上實施例的說明只是用于幫助理解本發(fā)明的方法及其核心思想；同時，對于本領(lǐng)域的一般技術(shù)人員，依據(jù)本發(fā)明的思想，在【具體實施方式】及應(yīng)用范圍上均會有改變之處，綜上所述，本說明書內(nèi)容不應(yīng)理解為對本發(fā)明的限制。
【主權(quán)項】
1.一種檢測前列腺癌易感性的方法，其特征在于，包括: 提取被測者外周血的DNA ； 對所述被測者的外周血DNA的8q24染色體上的rsl456315，rsl6901979，rs6983267和rs7843031號SNP位點進行熒光定量PCR檢測，確定該位點的基因型； 對基因型進行分析； 根據(jù)基因型的分析結(jié)果，計算被檢測者前列腺癌易感程度的高低以及患病概率大小。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測前列腺癌易感性的方法，其特征在于，所述對基因型進行分析，包括: 采用Tap-Man-SNP基因分型技術(shù)對基因型進行快速鑒定； 根據(jù)染色體8q24上4個位點上風險等位基因的數(shù)目分析被檢測者前列腺癌易感程度。3.—種檢測前列腺癌易感性的試劑盒，其特征在于，包括檢測8q24染色體上的rsl456315, rsl6901979，rs6983267和rs7843031號單核苷酸多態(tài)性位點的特異性引物對及特異性熒光探針對、熒光定量PCR的常規(guī)組件。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的檢測前列腺癌易感性的試劑盒，其特征在于，所述熒光定量PCR的常規(guī)組件包括:Taq DNA聚合酶、dNTP混合液、MgC12溶液、熒光定量PCR反應(yīng)緩沖液和去離子水。
【專利摘要】本發(fā)明涉及前列腺癌早期診斷領(lǐng)域，公開了一種檢測前列腺癌易感性的方法及試劑盒，通過提取被測者外周血的DNA；對所述被測者外周血的DNA的8q24染色體上的rs1456315，rs16901979，rs6983267和rs7843031號SNP位點進行熒光定量PCR檢測，確定該位點的基因型；對基因型進行分析；根據(jù)基因型的分析結(jié)果，計算被檢測者前列腺癌易感程度的高低以及患病概率大小。掌握了中國人群患前列腺癌的風險，提高了中國人群前列腺癌易感性的準確檢測。
【IPC分類】C12Q1/68
【公開號】CN104946786
【申請?zhí)枴緾N201510430981
【發(fā)明人】呂永杰, 馮寧翰, 毛雪瑩, 魯曉杰, 邵寧, 汪洋, 溫麗婷, 徐新宇, 王純才, 包文平
【申請人】馮寧翰
【公開日】2015年9月30日
【申請日】2015年7月21日