本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥，具體地，涉及一種恩塞芬汀的制備方法。

背景技術(shù)：

1、2024年6月26日，美國fda批準veronapharma公司的ohtuvayre(ensifentrine，中文名：恩塞芬汀)上市，用于成人慢性阻塞性肺病(copd)的維持治療。恩塞芬汀是20多年來首個具有新穎作用機制的吸入性產(chǎn)品，為copd患者提供了新的治療選擇。恩塞芬汀是一款由verona開發(fā)的靶向磷酸二酯酶-3(pde3)和磷酸二酯酶-4(pde4)的雙靶點抑制劑，對pde3的親和度是pde4的3440倍。作為雙重pde3/4抑制劑，恩塞芬汀能夠提供支氣管擴張和抗炎雙重作用，顯著改善患者的呼吸功能和生活質(zhì)量；除此以外，恩塞芬汀作為霧化吸入制劑，有助于避免胃腸道相關(guān)副作用。作為copd領(lǐng)域全新機制的藥物，恩塞芬汀藥物總體安全性良好，安慰劑組因副作用停藥的患者更多，恩塞芬汀比安慰劑組更多的副作用包括高血壓、背痛、鼻咽炎等。

2、恩塞芬汀的化學(xué)結(jié)構(gòu)式如式i所示：

3、

4、然而，目前針對恩塞芬汀的制備方法仍有待改進。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明旨在至少在一定程度上解決相關(guān)技術(shù)中的技術(shù)問題之一。為此，本發(fā)明的一個目的在于提出一種式i所示化合物恩塞芬汀的制備方法。相對于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明所述的制備方法，其將初始原料式1所示化合物和式2所示化合物經(jīng)過sizuki偶聯(lián)反應(yīng)得到式3所示化合物，經(jīng)過分子內(nèi)成環(huán)得到式4所示化合物，利用pocl3將羰基轉(zhuǎn)化為鹵化物(式5所示化合物)，再與式6所示化合物經(jīng)過烷基化反應(yīng)得到式7所示化合物，其中式7所示化合物的?；鶃啺吩倥c式8所示化合物發(fā)生取代反應(yīng)得到產(chǎn)物恩塞芬汀。

2、在本發(fā)明的一個方面，本發(fā)明提供了一種式i所示化合物恩塞芬汀的制備方法。根據(jù)本發(fā)明的實施例，該制備方法包括：

3、(1)使式1所示化合物與式2所示化合物、碳酸鉀、四(三苯基磷)鈀接觸，以便獲得式3所示化合物；

4、(2)使式3所示化合物與三氟乙酸酐(tfaa)接觸，以便獲得式4所示化合物；

5、(3)使式4所示化合物與三氯氧磷接觸，以便獲得式5所示化合物；

6、(4)使式5所示化合物與式6所示化合物接觸，以便獲得式7所示化合物；

7、(5)使式7所示化合物與式8所示化合物、磷酸鉀、碘化物接觸，以便獲得式i所示化合物恩塞芬汀，

8、

9、其中，所述碘化物為選自碘化鈉、或碘化鉀的至少一種。

10、發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，利用本發(fā)明所述的制備方法，以式1所示化合物和式2所示化合物、碳酸鉀、四(三苯基磷)鈀為起始原料，其總共經(jīng)過5步反應(yīng)，可順利地合成制備得到目標產(chǎn)物恩塞芬汀。

11、在本文中所使用的術(shù)語“接觸”應(yīng)做廣義理解，其可以是任何能夠使得至少兩種反應(yīng)物發(fā)生化學(xué)反應(yīng)的方式，例如可以是將兩種反應(yīng)物在適當?shù)臈l件下進行混合。根據(jù)需要，可以在攪拌下，將需要進行接觸的反應(yīng)物進行混合，由此，攪拌的類型并不受特別限制，例如可以為機械攪拌，即在機械力的作用下進行攪拌。

12、在本文中，術(shù)語“第一”、“第二”僅用于描述目的，而不能理解為指示或暗示相對重要性或者隱含指明所指示的技術(shù)特征的數(shù)量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隱含地包括一個或者更多個該特征。在本發(fā)明的描述中，“多個”的含義是兩個或兩個以上，除非另有明確具體的限定。

13、根據(jù)本發(fā)明的實施例，上述制備式3所示化合物、式4所示化合物、式5所示化合物、式7所示化合物、式i所示化合物的方法還可以具有下列附加技術(shù)特征至少之一：

14、根據(jù)本發(fā)明的實施例，本發(fā)明所述的化學(xué)反應(yīng)可以按照本領(lǐng)域已知的任何方法進行。式3所示化合物、式4所示化合物、式5所示化合物、式7所示化合物、式i所示化合物的原料的來源并不受特別限制，其可以是采用任何已知的方法制備的，或者市售獲得的。例如式1所示化合物的cas為:681431-18-5。

15、根據(jù)本發(fā)明的實施例，在步驟(1)中，式1所示化合物與式2所示化合物、碳酸鉀、四(三苯基磷)鈀的接觸方式并不受特別限制。由此，可以提升式1所示化合物與式2所示化合物、碳酸鉀、四(三苯基磷)鈀接觸反應(yīng)的效率，加快反應(yīng)速度，進一步提高利用該方法制備式3所示化合物的效率。

16、根據(jù)本發(fā)明的實施例，在步驟(1)中，包括如下步驟：室溫下，將式1所示化合物、式2所示化合物、碳酸鉀、和四(三苯基磷)鈀加入到無水二氧六環(huán)中，置換氮氣并于95℃～101℃加熱反應(yīng)3小時45分鐘～4小時15分鐘，反應(yīng)液降至室溫后，用硅藻土過濾，加入水洗滌，再加入乙酸乙酯萃取，有機相加入飽和鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，濾液減壓濃縮蒸出溶劑，濃縮物用二氯甲烷/甲醇混合溶劑，經(jīng)硅膠柱層析純化，得式3所示化合物。由此，可以提升式1所示化合物與式2所示化合物、碳酸鉀、四(三苯基磷)鈀接觸反應(yīng)的效率，加快反應(yīng)速度，進一步提高利用該方法制備式3所示化合物的效率。

17、根據(jù)本發(fā)明的實施例，在步驟(1)中，式1所示化合物與式2所示化合物、碳酸鉀、四(三苯基磷)鈀的摩爾比為1:(1.0～1.1):(2.5～4.5):(0.05～0.15)，優(yōu)選式1所示化合物與式2所示化合物、碳酸鉀、四(三苯基磷)鈀的摩爾比為1:1.02:3.0:0.1。由此，可以進一步提高利用該方法制備式3所示化合物的效率。

18、根據(jù)本發(fā)明的實施例，在步驟(1)中，二氯甲烷/甲醇混合溶劑中二氯甲烷/甲醇的體積比為(8～12):1，優(yōu)選二氯甲烷/甲醇混合溶劑的體積比為10：1。

19、根據(jù)本發(fā)明的實施例，在步驟(1)中，優(yōu)選于98℃～101℃加熱4小時。

20、根據(jù)本發(fā)明的一個具體實施例，在步驟(1)中，包括如下步驟：室溫下，將式1所示化合物(22.60g,0.1mol)，式2所示化合物(19.48g,0.102mol)，碳酸鉀(41.46g,0.3mol)和四(三苯基磷)鈀(11.56g,0.01mol)加入到無水二氧六環(huán)(260ml)中，置換氮氣并于98℃～102℃加熱反應(yīng)4小時，反應(yīng)液降至室溫后，用硅藻土過濾，加入200ml水洗滌，再加入200ml乙酸乙酯萃取，有機相加入200ml飽和鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，濾液減壓濃縮蒸出溶劑，濃縮物用體積比為10：1的二氯甲烷/甲醇混合溶劑，經(jīng)硅膠柱層析純化，得到式3所示化合物，得量25.08g，收率85.8％。

21、根據(jù)本發(fā)明的實施例，在步驟(2)中，式3所示化合物與三氟乙酸酐的接觸方式并不受特別限制。由此，可以提升式3所示化合物與三氟乙酸酐接觸反應(yīng)的效率，加快反應(yīng)速度，進一步提高利用該方法制備式4所示化合物的效率。

22、根據(jù)本發(fā)明的實施例，在步驟(2)中，包括如下步驟：0℃下，將三氟乙酸酐(tfaa)加入到含式3所示化合物的二氯甲烷溶液中，在室溫下攪拌反應(yīng)0.5小時，反應(yīng)畢，進行后處理，反應(yīng)液在0℃下加入冰水淬滅，分離有機層后加入飽和碳酸氫鈉溶液洗滌，有機相分離后加入飽和鹽水洗滌，經(jīng)過無水硫酸鈉干燥，濾液減壓濃縮蒸出溶劑，濃縮物用體積比為3：1的石油醚/乙酸乙酯混合溶劑，經(jīng)硅膠柱層析純化，得到式4所示化合物。由此，可以提升式3所示化合物與三氟乙酸酐接觸反應(yīng)的效率，加快反應(yīng)速度，進一步提高利用該方法制備式4所示化合物的效率。

23、根據(jù)本發(fā)明的實施例，在步驟(2)中，式3所示化合物與三氟乙酸酐的摩爾比為1:(1.3～2.0)，優(yōu)選式3所示化合物與三氟乙酸酐的摩爾比為1:1.5。由此，可以進一步提高利用該方法制備式4所示化合物的效率。

24、根據(jù)本發(fā)明的一個具體實施例，在步驟(2)中，包括如下步驟：0℃下，將三氟乙酸酐(25.87g,123.17mmol)加入到含式3所示化合物(24.0g,82.11mmol)的二氯甲烷溶液(240ml)中，在室溫下攪拌反應(yīng)0.5小時，反應(yīng)畢，進行后處理，反應(yīng)液在0℃下加入冰水(50ml)淬滅，分離有機層后加入200ml飽和碳酸氫鈉溶液洗滌，有機相分離后加入100ml飽和鹽水洗滌，經(jīng)過無水硫酸鈉干燥，濾液減壓濃縮蒸出溶劑，濃縮物用體積比為3：1的石油醚/乙酸乙酯混合溶劑，經(jīng)硅膠柱層析純化，得到式4所示化合物，得量20.29g，收率90.1％。

25、根據(jù)本發(fā)明的實施例，在步驟(3)中，式4所示化合物與三氯氧磷的接觸方式并不受特別限制。由此，可以提升式4所示化合物與三氯氧磷接觸反應(yīng)的效率，加快反應(yīng)速度，進一步提高利用該方法制備式5所示化合物的效率。

26、根據(jù)本發(fā)明的實施例，在步驟(3)中，包括如下步驟：室溫下，向三氯氧磷中加入式4所示化合物，攪拌升溫至回流狀態(tài)反應(yīng)3小時，反應(yīng)液降至室溫后，減壓濃縮，剩余少量混合物時，加入適量冰水，快速攪拌，滴加飽和naoh溶液至ph＝10，將固體過濾，濾餅用冰水洗滌，干燥得到式5所示化合物。由此，可以提升式4所示化合物與三氯氧磷接觸反應(yīng)的效率，加快反應(yīng)速度，進一步提高利用該方法制備式5所示化合物的效率。

27、根據(jù)本發(fā)明的實施例，在步驟(3)中，式4所示化合物與三氯氧磷的重量比為1:(5～10)，優(yōu)選式4所示化合物與三氯氧磷的重量比為1:6.3。由此，可以進一步提高利用該方法制備式5所示化合物的效率。

28、根據(jù)本發(fā)明的一個具體實施例，在步驟(3)中，包括如下步驟：室溫下，向三氯氧磷(120ml)中加入式4所示化合物(19.0g，69.27mmol)，攪拌升溫至回流狀態(tài)反應(yīng)3小時，反應(yīng)液降至室溫后，減壓濃縮，剩余少量混合物(約30ml)時，加入適量冰水，快速攪拌，滴加飽和naoh溶液至ph＝10，將固體過濾，濾餅用冰水(50ml)洗滌，干燥得到式5所示化合物，得量13.40g，收率66.1％。

29、根據(jù)本發(fā)明的實施例，在步驟(4)中，式5所示化合物與式6所示化合物的接觸方式并不受特別限制。由此，可以提升式5所示化合物與式6所示化合物接觸反應(yīng)的效率，加快反應(yīng)速度，進一步提高利用該方法制備式7所示化合物的效率。

30、根據(jù)本發(fā)明的實施例，在步驟(4)中，包括如下步驟：室溫下，將式5所示化合物加入短鏈醇a中，加入式6所示化合物，然后升溫至回流狀態(tài)，攪拌反應(yīng)3小時～3小時30分鐘，tlc監(jiān)測反應(yīng)完成，反應(yīng)液降至室溫，過濾，濾餅用冰水洗滌，干燥得到式7所示化合物。由此，可以提升式5所示化合物與式6所示化合物接觸反應(yīng)的效率，加快反應(yīng)速度，進一步提高利用該方法制備式7所示化合物的效率。

31、根據(jù)本發(fā)明的實施例，在步驟(4)中，式5所示化合物與式6所示化合物的摩爾比為1:(2.5～4.0)，優(yōu)選式5所示化合物與式6所示化合物的摩爾比為1:3.0。由此，可以進一步提高利用該方法制備式7所示化合物的效率。

32、根據(jù)本發(fā)明的實施例，在步驟(4)中，短鏈醇a為選自異丙醇、或乙醇的至少一種。

33、根據(jù)本發(fā)明的實施例，在步驟(4)中，優(yōu)選攪拌反應(yīng)3小時15分鐘。

34、根據(jù)本發(fā)明的一個具體實施例，在步驟(4)中，包括如下步驟：室溫下，將式5所示化合物(10.0g，34.16mmol)加入異丙醇(100ml)中，加入式6所示化合物(13.86g，102.48mmol)，然后升溫至回流狀態(tài)，攪拌反應(yīng)3小時15分鐘，tlc監(jiān)測反應(yīng)完成，反應(yīng)液降至室溫，過濾，濾餅用冰水(50ml)洗滌，干燥得到式7所示化合物，得量12.40g，收率92.7％。

35、根據(jù)本發(fā)明的實施例，在步驟(5)中，式7所示化合物與式8所示化合物、磷酸鉀、碘化物的接觸方式并不受特別限制。由此，可以提升式7所示化合物與式8所示化合物、磷酸鉀、碘化物接觸反應(yīng)的效率，加快反應(yīng)速度，進一步提高利用該方法制備式i所示化合物的效率。

36、根據(jù)本發(fā)明的實施例，在步驟(5)中，包括如下步驟：室溫下，將式7所示化合物，式8所示化合物，磷酸鉀和碘化物混溶于干燥的2-丁酮中，反應(yīng)液在氮氣氛圍中，加熱保持回流狀態(tài)，攪拌反應(yīng)17小時～20小時，反應(yīng)結(jié)束后，冷卻至室溫后用硅藻土過濾，濾餅用二氯甲烷洗滌，無水硫酸鈉干燥，濾液減壓濃縮蒸出溶劑，濃縮物用二氯甲烷/甲醇混合溶劑，經(jīng)硅膠柱層析純化，得到式i所示化合物恩塞芬汀。由此，可以提升式7所示化合物與式8所示化合物、磷酸鉀、碘化物接觸反應(yīng)的效率，加快反應(yīng)速度，進一步提高利用該方法制備式i所示化合物恩塞芬汀的效率。

37、根據(jù)本發(fā)明的實施例，在步驟(5)中，式7所示化合物與式8所示化合物、磷酸鉀、碘化物的摩爾比為1:(2.0～4.0):(4.0～6.0):(2.0～4.0)，優(yōu)選式7所示化合物與式8所示化合物、磷酸鉀、碘化物的摩爾比為1：3.0：5.0：3.0。由此，可以進一步提高利用該方法制備式i所示化合物的效率。

38、根據(jù)本發(fā)明的實施例，在步驟(5)中，所述碘化物為選自碘化鈉、或碘化鉀的至少一種，優(yōu)選碘化物為選自碘化鈉。

39、根據(jù)本發(fā)明的實施例，在步驟(5)中，所述二氯甲烷/甲醇混合溶劑中二氯甲烷與甲醇的體積比為(15～25):1，優(yōu)選二氯甲烷與甲醇的體積比為20:1。

40、根據(jù)本發(fā)明的實施例，在步驟(5)中，優(yōu)選攪拌反應(yīng)18小時。

41、根據(jù)本發(fā)明的一個具體實施例，在步驟(5)中，包括如下步驟：室溫下，將式7所示化合物(10.0g,25.55mmol)，式8所示化合物(12.80g,76.64mmol)，磷酸鉀(27.11g,127.73mmol)和碘化鈉(11.49g,76.64mmol)混溶于干燥的2-丁酮(300ml)中，反應(yīng)液在氮氣氛圍中，加熱保持回流狀態(tài)，攪拌反應(yīng)18小時，反應(yīng)結(jié)束后，冷卻至室溫后用硅藻土過濾，濾餅用二氯甲烷(100ml)洗滌，無水硫酸鈉干燥，濾液減壓濃縮蒸出溶劑，濃縮物用體積比為20：1的二氯甲烷/甲醇混合溶劑，經(jīng)硅膠柱層析純化，得到式i所示化合物恩塞芬汀，得量9.44g，收率77.4％，hplc純度99.6％。

42、根據(jù)本發(fā)明的具體實施例，式i所示化合物恩塞芬汀的合成路線可以如下所示：

43、

44、相對于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明所述的恩塞芬汀的制備方法，其至少具有以下有益效果：

45、1、相對于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明所述制備方法的有益效果在于：本方法將初始原料式1所示化合物和式2所示化合物經(jīng)過sizuki偶聯(lián)反應(yīng)得到式3所示化合物，經(jīng)過分子內(nèi)成環(huán)得到式4所示化合物，利用pocl3將羰基轉(zhuǎn)化為鹵化物(式5所示化合物)，再與式6所示化合物經(jīng)過烷基化反應(yīng)得到式7所示化合物，其中式7所示化合物的酰基亞胺再與溴化脲發(fā)生取代反應(yīng)得到產(chǎn)物恩塞芬汀。

46、2、本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)方法相比，其顯著優(yōu)點在于：(1)wo2012037782面對帶有羥基的化合物時，先將羥基保護后再發(fā)生取代反應(yīng)，本發(fā)明選擇硼酸化合物作為起始原料，與化合物發(fā)生sizuki反應(yīng)，無需對羥基進行保護就能獲得較高的反應(yīng)產(chǎn)率，減少了羥基的保護與脫保護共兩步反應(yīng)。(2)wo2023109802文獻中將式7所示化合物和2-(2-溴乙基)異-哚啉-1,3-二酮反應(yīng)得到易脫去化合物，再加入水合肼得到胺基，加入氯酸鉀得到終產(chǎn)物(脲)。本發(fā)明直接將式7所示化合物與鹵代脲反應(yīng)得到終產(chǎn)物，縮短了2步反應(yīng)、簡化了反應(yīng)操作。(3)本發(fā)明選用的原料易得，操作方法簡便，產(chǎn)品產(chǎn)率較高，適合批量化生產(chǎn)。