本發(fā)明屬于生物防控微生物、生物菌肥，特別涉及一種拮抗草果萎蔫病原菌的復合微生物發(fā)酵菌肥及應用。

背景技術：

1、草果在植物分類學中為姜科豆蔻屬多年生草本植物，可作為藥材起到燥濕化痰、溫中健胃、消食順氣等功效，是上好的藥食兩用的辛香佐料。福貢縣以發(fā)展草果產業(yè)成功入選云南省“一縣一業(yè)”特色縣，草果產業(yè)成為當?shù)貛恿ψ顝姟⑤椛涿孀顝V、貢獻率最大的支柱產業(yè)。隨著種植面積的擴大和配套管理不完善，其病害呈現(xiàn)局部蔓延趨勢，尤以萎焉病嚴重，是由芒果畸形病鐮刀菌為主的真菌引起的一類土傳病害，草果在處于幼期階段，遭受萎蔫性病害的可能性相對較高，主要表現(xiàn)在幼苗到開花結果偶爾會出現(xiàn)單株萎蔫的情況。目前草果萎焉病的主要防控方式為化學藥劑，但是化學藥劑的使用會造成環(huán)境污染，且容易產生抗藥性。因此，開發(fā)安全、環(huán)保、高效的生物防治方法迫在眉睫。

2、微生物肥料可使土壤中無效營養(yǎng)有效化，預防和控制農作物病害，減少農藥和化肥的使用，是解決土壤、水源和食品污染的根本途徑，被普遍認為是一種環(huán)境友好、經(jīng)濟有效的提高作物產量的方法，在農業(yè)生產中得到廣泛應用。然而，目前市場上缺少草果病害專用復合型微生物發(fā)酵菌肥，且普通微生物發(fā)酵肥對草果病害防治效果不佳，難以滿足草果種植的實際需求。

技術實現(xiàn)思路

1、鑒于現(xiàn)有技術的不足，本發(fā)明提出了一種拮抗草果萎蔫病原菌的復合微生物發(fā)酵菌肥及應用，該菌肥兼具病害防治、改善土壤環(huán)境的作用。

2、本發(fā)明的技術方案如下：

3、一種拮抗草果萎蔫病原菌的復合微生物發(fā)酵菌肥，所述復合微生物發(fā)酵菌肥含有以下(1)～(3)中的成分：

4、(1)多粘芽孢桿菌和/或多粘芽孢桿菌發(fā)酵液；

5、(2)中華根瘤菌和/或中華根瘤菌發(fā)酵液；

6、(3)睪丸酮叢毛單胞菌和/或睪丸酮叢毛單胞菌發(fā)酵液。

7、進一步的，所述多粘芽孢桿菌的拉丁名為paenibacillus?polymyxa，其保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏編號gdmcc?no:64948，保藏時間2024年04月19日，保藏地址：廣州市先烈中路100號大院59號樓5樓。

8、進一步的，所述中華根瘤菌的拉丁名為sinorhizobium，其保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏編號gdmcc?no:64949，保藏時間2024年04月19日，保藏地址：廣州市先烈中路100號大院59號樓5樓。

9、進一步的，所述睪丸酮叢毛單胞菌的拉丁名為comamonas?testosteroni，其保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏時間2024年04月19日，保藏編號gdmcc?no:64950，保藏地址：廣州市先烈中路100號大院59號樓5樓。

10、進一步的，所述發(fā)酵液為將菌株接種于發(fā)酵培養(yǎng)基中培養(yǎng)而得，所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為配方一或配方二：

11、配方一：紅糖23.0g/l，豆粕24.0g/l，kh2po4?1.0g/l，caco3?10.0g/l，超純水1.0l，1wt％氨基酸粉；

12、配方二：玉米粉20.0g/l，豆粕20.0g/l，k2hpo4?5.0g/l，cacl2?5g/l，mgso4·7h2o0.5g/l，超純水1.0l，1wt％氨基酸粉。

13、進一步的，所述發(fā)酵液的制備方法包括以下步驟：

14、制備多粘芽孢桿菌、中華根瘤菌、睪丸酮叢毛單胞菌菌株的種子液；將多粘芽孢桿菌種子液接種于發(fā)酵培養(yǎng)基中，搖瓶培養(yǎng)，再接種中華根瘤菌種子液和睪丸酮叢毛單胞菌種子液，繼續(xù)搖瓶培養(yǎng)，獲得發(fā)酵液。

15、進一步的，所述發(fā)酵液的制備方法包括以下步驟：

16、制備多粘芽孢桿菌、中華根瘤菌、睪丸酮叢毛單胞菌菌株的種子液；將多粘芽孢桿菌種子液接種于發(fā)酵培養(yǎng)基中，搖瓶培養(yǎng)至少2天，再接種中華根瘤菌種子液和睪丸酮叢毛單胞菌種子液，繼續(xù)搖瓶培養(yǎng)至少7天，獲得發(fā)酵液。

17、本發(fā)明的目的之二是提供所述的復合微生物發(fā)酵菌肥在草果種植中的應用。

18、本發(fā)明的目的之三是提供所述的復合微生物發(fā)酵菌肥在抑制植物病原菌中的應用。

19、進一步的，所述植物病原菌為芒果畸形病鐮刀菌(fusarium?mangiferae)。

20、本發(fā)明的有益效果：

21、該復合微生物里的菌株均分離自中國云南省怒江州貢山縣獨龍江鄉(xiāng)龍元村的草果根際土壤，保證了該菌肥回施到草果地后菌株可以有效定植和存活，為未來開發(fā)菌肥的實用性奠定基礎。

22、本發(fā)明的復合微生物菌肥中的菌株包括多粘芽孢桿菌、中華根瘤菌和睪丸酮叢毛單胞菌，三者對草果萎焉病相關鐮刀屬病原真菌具有協(xié)同抑制作用，且中華根瘤菌和睪丸酮叢毛單胞菌為已知的具有固氮和解磷作用功能菌，因此三種菌株的組合使用不僅能達到防治病害的效果而且能改善土壤環(huán)境。

23、該復合微生物菌肥的發(fā)酵培養(yǎng)基可以不用滅菌直接使用，配方中材料常見，所以該復合菌肥具有易操作、節(jié)省成本、適宜大批量生產菌肥等特點。

技術特征：

1.一種拮抗草果萎蔫病原菌的復合微生物發(fā)酵菌肥，其特征在于，所述復合微生物發(fā)酵菌肥含有以下(1)～(3)中的成分：

2.根據(jù)權利要求1所述的復合微生物發(fā)酵菌肥，其特征在于，所述多粘芽孢桿菌的拉丁名為paenibacillus?polymyxa，其保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏編號gdmccno:64948。

3.根據(jù)權利要求1所述的復合微生物發(fā)酵菌肥，其特征在于，所述中華根瘤菌的拉丁名為sinorhizobium，其保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏編號gdmcc?no:64949。

4.根據(jù)權利要求1所述的復合微生物發(fā)酵菌肥，其特征在于，所述睪丸酮叢毛單胞菌的拉丁名為comamonas?testosteroni，其保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏編號gdmccno:64950。

5.根據(jù)權利要求1所述的復合微生物發(fā)酵菌肥，其特征在于，所述發(fā)酵液為將菌株接種于發(fā)酵培養(yǎng)基中培養(yǎng)而得，所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為配方一或配方二：

6.根據(jù)權利要求1所述的復合微生物發(fā)酵菌肥，其特征在于，所述發(fā)酵液的制備方法包括以下步驟：

7.根據(jù)權利要求6所述的復合微生物發(fā)酵菌肥，其特征在于，所述發(fā)酵液的制備方法包括以下步驟：

8.權利要求1～7任一項所述的復合微生物發(fā)酵菌肥在草果種植中的應用。

9.權利要求1～7任一項所述的復合微生物發(fā)酵菌肥在抑制植物病原菌中的應用。

10.根據(jù)權利要求9所述的應用，其特征在于，所述植物病原菌為芒果畸形病鐮刀菌(fusarium?mangiferae)。

技術總結
本發(fā)明公開了一種拮抗草果萎蔫病原菌的復合微生物發(fā)酵菌肥及應用。所述復合微生物發(fā)酵菌肥含有多粘芽孢桿菌和/或多粘芽孢桿菌發(fā)酵液；中華根瘤菌和/或中華根瘤菌發(fā)酵液；睪丸酮叢毛單胞菌和/或睪丸酮叢毛單胞菌發(fā)酵液。本發(fā)明的復合微生物菌肥中的菌株包括多粘芽孢桿菌、中華根瘤菌和睪丸酮叢毛單胞菌，三者對草果萎焉病相關鐮刀屬病原真菌具有協(xié)同抑制作用，且中華根瘤菌和睪丸酮叢毛單胞菌為已知的具有固氮和解磷作用功能菌，因此三種菌株的組合使用不僅能達到防治病害的效果而且能改善土壤環(huán)境。此外，該復合微生物菌肥的制備方法易操作，成本低，適于大批量的產業(yè)化生產。

技術研發(fā)人員：元超,郭玉華,楊曉宇,吳蓮張,楊毅,于福來,陳曉鷺,江芊,楊昌彥
受保護的技術使用者：中國熱帶農業(yè)科學院熱帶作物品種資源研究所
技術研發(fā)日：
技術公布日：2025/1/6