本發(fā)明屬于分子印跡材料技術(shù)領(lǐng)域，涉及表面分子印跡聚合物的制備方法，尤其涉及地塞米松磁性分子印跡聚合物的制備方法。

背景技術(shù)：

地塞米松是一種人工合成的長(zhǎng)效糖皮質(zhì)激素，具有調(diào)節(jié)糖、脂肪和蛋白質(zhì)生物合成及代謝的作用。臨床上常用作抗炎、抗毒、抗過(guò)敏、抗風(fēng)濕，可抑制纖維細(xì)胞增生，減少5-羥色胺形成。鑒于此，地塞米松常被添加于中藥制劑和保健品中，以提高短期療效，或是添加于化妝品中，達(dá)到祛斑美白作用。然而長(zhǎng)期攝入或接觸含有地塞米松的中藥制劑或化妝品，會(huì)引起向心性肥胖、高血壓、腎臟感染性疾病、激素性糖尿病，以及激素依賴性皮炎，嚴(yán)重者可以危及生命。因此，建立快速完善的檢測(cè)方法，對(duì)中藥制劑、保健品以及化妝品中的地塞米松進(jìn)行監(jiān)測(cè)具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

目前，地塞米松的分析方法主要有高效液相色譜法，高效液相色譜-質(zhì)譜法。樣品在進(jìn)樣前需進(jìn)行必要前處理，前處理方法有液液萃取法和固相萃取法等。但是由于中藥制劑、保健品以及化妝品的成分種類多，基體復(fù)雜，這些方法普遍存在操作復(fù)雜，有機(jī)溶液消耗量大，特異性差和基質(zhì)干擾大等缺點(diǎn)。

分子印跡技術(shù)是一種具有特異識(shí)別能力的分離技術(shù)，合成的分子印跡聚合物對(duì)特定目標(biāo)分子具有專一識(shí)別性能力，而且制備成本低，穩(wěn)定性強(qiáng)，可以重復(fù)使用。目前分子印跡聚合物已經(jīng)被廣泛用于分析化學(xué)和分離科學(xué)的領(lǐng)域，特別適用于從生物樣品、環(huán)境樣品以及植物等復(fù)雜體系中分離富集特定目標(biāo)分子，最大程度地減少基質(zhì)干擾，提高分離效率。

傳統(tǒng)的分子印跡聚合物的制備方法有本體聚合、原位聚合、沉淀聚合、懸浮聚合等，而這些方法合成得到的分子印跡聚合物在使用中都存在模板分子難洗脫、吸附時(shí)間長(zhǎng)、分離過(guò)程繁瑣等問(wèn)題。磁性表面分子印跡聚合物作為一類新型分子印跡聚合物，是通過(guò)化學(xué)或物理作用，將印跡聚合物包覆在磁性基底表面，采用磁分離技術(shù)以達(dá)到高效、快速、經(jīng)濟(jì)和環(huán)保的分離富集目的，引起研究人員的廣泛關(guān)注。

但現(xiàn)有制備磁性分子印跡聚合物主要為傳統(tǒng)自由基聚合，這種方法得到的表面印跡聚合物存在包覆不均勻、聚合層分子量分布廣、可控性差等缺點(diǎn)，并且，目前尚未見(jiàn)到通過(guò)磁性表面印跡法制備地塞米松分子印跡聚合物，以實(shí)現(xiàn)對(duì)中藥制劑、保健品以及化妝品中地塞米松的特異識(shí)別。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中的缺點(diǎn)和不足，提供一種地塞米松磁性分子印跡聚合物的制備方法，采用可逆加成-斷裂鏈轉(zhuǎn)移(RAFT)聚合技術(shù)，制備包覆均勻、印跡物分子量分布窄、性能穩(wěn)定的分子印跡聚合物，并實(shí)現(xiàn)地塞米松選擇性吸附。

為達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用了以下技術(shù)方案：

1)制備Fe₃O₄磁性納米微球；

2)在Fe₃O₄磁性納米微球表面包覆二氧化硅層，得到Fe₃O₄@SiO₂磁性納米微球；

3)對(duì)Fe₃O₄@SiO₂磁性納米微球表面進(jìn)行硅烷化改性，通過(guò)硅烷化改性在Fe₃O₄@SiO₂磁性納米微球表面修飾Cl原子基團(tuán)，得到Fe₃O₄@SiO₂-Cl磁性納米微球；

4)利用可逆加成-斷裂鏈轉(zhuǎn)移試劑對(duì)Fe₃O₄@SiO₂-Cl磁性納米微球進(jìn)行表面功能化處理，得到RAFT功能化磁性納米微球；

5)將模板分子和功能單體在溶劑中進(jìn)行預(yù)組裝，向預(yù)組裝體系中加入RAFT功能化磁性納米微球、交聯(lián)劑和引發(fā)劑后進(jìn)行聚合反應(yīng)，通過(guò)聚合反應(yīng)在所述RAFT功能化磁性納米微球表面包覆結(jié)合有模板分子的分子印跡聚合物，得到磁性分子印跡聚合物微球，所述模板分子為地塞米松；

6)洗滌步驟5)中得到的磁性分子印跡聚合物微球，通過(guò)洗滌除去結(jié)合于分子印跡聚合物上的模板分子后進(jìn)行干燥，得到地塞米松磁性分子印跡聚合物。

進(jìn)一步的，所述Fe₃O₄磁性納米微球采用溶劑熱法制備，具體步驟包括：稱取2.0-6.0g的FeCl₃·6H₂O加入到40-200mL乙二醇中，連續(xù)攪拌至FeCl₃·6H₂O完全溶解，然后依次加入1.0-5.0g PEG2000和1.0-5.0g醋酸鈉，持續(xù)攪拌至兩種物質(zhì)完全溶解。將得到的溶液轉(zhuǎn)移到水熱反應(yīng)釜中，將水熱反應(yīng)釜置于真空干燥箱中后于150-250℃(進(jìn)一步優(yōu)選200℃)反應(yīng)8-12h。待反應(yīng)體系冷卻至室溫后，用磁鐵分離，無(wú)水乙醇洗滌(通常3-8次)，真空干燥(40-80℃下4-8h)，得到Fe₃O₄磁性納米微球。

進(jìn)一步的，所述Fe₃O₄@SiO₂磁性納米微球采用溶膠凝膠法制備，具體步驟包括：稱取0.1-0.5g Fe₃O₄磁性納米微球分散于含有1-10mL氨水(氨水濃度25％)的乙醇:三蒸水＝6:1-3:1(進(jìn)一步優(yōu)選4:1，v/v)的200-600mL混合溶液中，超聲分散5-20min，加入0.2-1.0mL正硅酸乙酯，40-60℃攪拌反應(yīng)5-12h，然后用磁鐵分離，并依次用無(wú)水乙醇、三蒸水洗滌3-8次，40-80℃真空干燥12-48h。

進(jìn)一步的，所述步驟3)中以4-氯甲基苯基三氯硅烷為改性試劑。所述步驟3)具體包括以下步驟：稱取0.1-0.5g Fe₃O₄@SiO₂磁性納米微球分散于2-10mL甲苯中，加入0.1-1.0mL 4-氯甲基苯基三氯硅烷，通氮?dú)獬鹾缶徛尤?.1-0.6mL三乙胺，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下于40-80℃攪拌反應(yīng)10-48h(進(jìn)一步優(yōu)選為60℃攪拌反應(yīng)24h)；磁鐵分離，并依次用甲苯、丙酮、無(wú)水乙醇洗滌3-8次，然后40-80℃下真空干燥12-48h，得到-Cl修飾的Fe₃O₄@SiO₂磁性納米微球(即Fe₃O₄@SiO₂-Cl)。

進(jìn)一步的，所述步驟4)具體包括以下步驟：將10-30mL苯基溴化鎂超聲分散于80-260mL超干四氫呋喃中，預(yù)熱至30-60℃(進(jìn)一步優(yōu)選為45℃)。向混合液中，緩慢逐滴加入1-6mL干燥二硫化碳，維持30-60℃下反應(yīng)0.5-4h(進(jìn)一步優(yōu)選為45℃下反應(yīng)2h)，得反應(yīng)溶液；將0.2-0.8g Fe₃O₄@SiO₂-Cl磁性納米微球超聲分散于反應(yīng)溶液，通氮?dú)?0-20min。反應(yīng)體系在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，40-70℃下反應(yīng)40-60h(進(jìn)一步優(yōu)選為65℃下反應(yīng)60h)，用冰鹽酸終止反應(yīng)。用磁鐵分離產(chǎn)物，產(chǎn)物依次用四氫呋喃、無(wú)水乙醚、乙醇各洗滌1-5次，得到RAFT功能化磁性納米微球。

進(jìn)一步的，所述功能單體為非共價(jià)鍵單體，如甲基丙烯酸或4-乙烯基吡啶三氟甲基丙烯酸，交聯(lián)劑為乙二醇二甲基丙烯酸酯或丙烯酸三甲氧基丙烷三甲基酯。

進(jìn)一步的，所述模板分子與功能單體的物質(zhì)的量比為1:2-1:6；所述功能單體與交聯(lián)劑的物質(zhì)的量比為1:1-1:6。

進(jìn)一步的，所述引發(fā)劑為偶氮二異丁腈，所述引發(fā)劑的用量為功能單體與交聯(lián)劑物質(zhì)的量之和的1％-8％。

進(jìn)一步的，所述步驟5)中，預(yù)組裝的條件為：10-30℃攪拌12-48h(進(jìn)一步優(yōu)選為25℃攪拌12h)；聚合反應(yīng)的條件為：氮?dú)獗Ｗo(hù)下30-65℃攪拌6-48h。所述步驟5)具體包括以下步驟：取模板分子0.01-0.05g加入15-35mL甲醇中，超聲溶解后，加入0.1-0.6mmol功能單體充分混合，預(yù)組裝；然后加入0.01-0.08g RAFT功能化磁性納米微球，攪拌10min，加入0.1-1.3mmol交聯(lián)劑和0.001-0.010g引發(fā)劑，超聲5-10min，攪拌5-30min(進(jìn)一步優(yōu)選為30min)，通氮?dú)獬?，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下30-65℃反應(yīng)6-48h(進(jìn)一步優(yōu)選為50℃反應(yīng)24h)；磁鐵分離反應(yīng)產(chǎn)物，依次用10-40mL甲醇、5-30mL丙酮和10-50mL三蒸水洗滌，以除去未反應(yīng)的功能單體和交聯(lián)劑，得到結(jié)合有模板分子的磁性分子印跡聚合物微球，乙酸和甲醇混合溶劑索氏提取12-36h(進(jìn)一步優(yōu)選為24h)，以除去模板分子；然后依次用20-40mL甲醇及10-20mL三蒸水洗至中性，40-70℃下真空干燥10-48h得到地塞米松磁性分子印跡聚合物。

進(jìn)一步的，所述混合溶劑中乙酸:甲醇的體積比＝1:1-1:9(進(jìn)一步優(yōu)選為1:9)。

采用搖床實(shí)驗(yàn)對(duì)所制備的地塞米松磁性分子印跡聚合物進(jìn)行吸附考察：分別稱取10mg的Fe₃O₄@SiO₂-MIP(地塞米松磁性分子印跡聚合物)和Fe₃O₄@SiO₂-NIP(以同樣的方法不添加模板分子制備地塞米松非印跡聚合物)，置于錐形瓶中，分別加入1mL濃度為300μg/mL的地塞米松乙腈水溶液，于25℃恒溫振蕩器上振蕩一定時(shí)間。振蕩過(guò)程中分別在不同時(shí)間間隔內(nèi)磁性分離樣品，采用HPLC法測(cè)定不同吸附時(shí)間地塞米松乙腈水溶液的濃度，計(jì)算吸附量，分別繪制Fe₃O₄@SiO₂-MIP、Fe₃O₄@SiO₂-NIP的吸附量-時(shí)間曲線。所述搖床實(shí)驗(yàn)所用乙腈水溶液為乙腈:水＝1:6(v/v)。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果：

本發(fā)明結(jié)合可逆加成-斷裂鏈轉(zhuǎn)移反應(yīng)和表面分子印跡技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)，一方面加入RAFT試劑，通過(guò)表面可逆加成-斷裂鏈轉(zhuǎn)移活性自由基聚合反應(yīng)，生成休眠種，通過(guò)休眠種不斷激活與休眠，實(shí)現(xiàn)聚合鏈的不斷均勻增長(zhǎng)；另一方面，以地塞米松為模板分子，通過(guò)控制RAFT試劑和引發(fā)劑的用量，在磁性納米微球表面成功聚合分子印跡聚合物，分子印跡層均勻，印跡物分子量分布窄，對(duì)地塞米松具有較高的選擇性；該聚合物具有超順磁性，可以實(shí)現(xiàn)快速磁性分離；采用搖床實(shí)驗(yàn)對(duì)所制備的地塞米松磁性分子印跡聚合物進(jìn)行吸附考察，結(jié)果表明該聚合物對(duì)地塞米松的吸附量大，吸附平衡時(shí)間短，解吸方便，吸附性能穩(wěn)定，可應(yīng)用于中藥制劑、保健品和化妝品中地塞米松的前處理。

附圖說(shuō)明

圖1是地塞米松磁性分子印跡聚合物的制備過(guò)程示意圖。

圖2是地塞米松磁性分子印跡聚合物透射電鏡圖。

圖3是Fe₃O₄納米微球(a)、Fe₃O₄@SiO₂(b)、Fe₃O₄@SiO₂-MIP(c)的X衍射圖。

圖4是Fe₃O₄納米微球、Fe₃O₄@SiO₂、Fe₃O₄@SiO₂-MIP的磁滯回線圖。

圖5是Fe₃O₄@SiO₂-MIP及Fe₃O₄@SiO₂-NIP的吸附量-時(shí)間圖。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)描述。

實(shí)施例1

1)磁性納米微球的制備

稱取2.0g的FeCl₃·6H₂O加入到40mL乙二醇中，連續(xù)攪拌至FeCl₃·6H₂O完全溶解，然后依次加入1.0g PEG2000和1g醋酸鈉，持續(xù)攪拌至兩種物質(zhì)完全溶解。將得到的溶液轉(zhuǎn)移到100mL水熱反應(yīng)釜中，真空干燥箱中200℃反應(yīng)8h。待反應(yīng)體系冷卻至室溫后，用磁鐵分離，無(wú)水乙醇洗滌3次，60℃真空干燥6h，得到Fe₃O₄納米微球。

2)Fe₃O₄@SiO₂(即Fe₃O₄@SiO₂-OH)納米微球的制備

稱取0.1g Fe₃O₄納米微球分散于含有1mL 25％氨水的乙醇:三蒸水＝4:1(v/v)的300mL混合溶液中，超聲分散5min，加入0.2mL正硅酸乙酯，40℃攪拌反應(yīng)5h。然后采用磁鐵分離，并依次用無(wú)水乙醇、三蒸水洗滌3次，于60℃真空干燥，得到Fe₃O₄@SiO₂-OH納米微球。

3)Fe₃O₄@SiO₂納米微球表面的改性

稱取0.1g Fe₃O₄@SiO₂分散于2mL甲苯中，加入0.1mL 4-氯甲基苯基三氯硅烷(4-(Chloromethyl)phenyltrichlorosilane)，通氮?dú)獬鹾缶徛尤?.1mL三乙胺，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下60℃攪拌反應(yīng)24h；然后采用磁鐵分離、并依次用10mL甲苯、丙酮、乙醇洗滌3次，于60℃真空干燥，得到-Cl修飾的Fe₃O₄@SiO₂磁性納米微球。

4)Fe₃O₄@SiO₂-Cl磁性納米微球的表面功能化

10mL苯基溴化鎂超聲分散于80mL超干四氫呋喃中，預(yù)熱至45℃。向混合液中，緩慢逐滴加入1mL干燥二硫化碳，維持45℃下反應(yīng)2h；將0.2g Fe₃O₄@SiO₂-Cl磁性納米微球超聲分散于上述反應(yīng)溶液，通氮?dú)?0min。反應(yīng)體系在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，65℃下反應(yīng)60h，用1mol/L的冰鹽酸終止反應(yīng)。用磁鐵分離產(chǎn)物，產(chǎn)物依次用四氫呋喃、無(wú)水乙醚、乙醇各洗滌3次，得到RAFT功能化磁性納米微球(Fe₃O₄@SiO₂-RAFT)。

5)地塞米松磁性分子印跡聚合物制備

參考圖1，取地塞米松(Dexamethasone)0.025mmol(0.01g)加入15mL甲醇中，超聲溶解后，加入0.1mmol甲基丙烯酸(MAA)充分混合，25℃水浴條件下，通過(guò)機(jī)械攪拌預(yù)組裝12h；然后加入0.01g RAFT功能化磁性納米微球，攪拌10min，加入0.3mmol乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)和0.024mmol(0.004g)偶氮二異丁腈(AIBN)，超聲10min，攪拌30min，通氮除氧，在氮?dú)獗Ｗo(hù)、機(jī)械攪拌下50℃反應(yīng)24h；磁鐵分離反應(yīng)產(chǎn)物，依次用30mL甲醇、10mL丙酮和30mL三蒸水洗滌，乙酸:甲醇＝1:9(v/v)混合溶劑索氏提取24h，以除去模板分子；然后依次用20mL甲醇及10mL三蒸水洗至中性，65℃下真空干燥24h得到地塞米松磁性分子印跡聚合物(Fe₃O₄@SiO₂-MIP或MIPs)。為了對(duì)比說(shuō)明，以同樣的方法不添加模板分子制備地塞米松非印跡聚合物(Fe₃O₄@SiO₂-NIP)。

參見(jiàn)圖2，從圖2中可知，經(jīng)過(guò)表面改性聚合后，所制備的Fe₃O₄@SiO₂-MIP仍保持球形，直徑約為500nm左右。并且通過(guò)圖2可以看出Fe₃O₄@SiO₂-MIP表面形成約20nm左右均勻的聚合層，表明分子印跡聚合物成功包覆，并且厚度有利于傳質(zhì)和結(jié)合動(dòng)力學(xué)。且表面呈多孔結(jié)構(gòu)，作用位點(diǎn)形成于表面，有利于于模板分子和結(jié)合位點(diǎn)的快速互補(bǔ)識(shí)別。

參見(jiàn)圖3，由Fe₃O₄納米微球(a)的XRD圖可知，在2θ＝30.35°、35.62°、43.31、53.53°、57.28°及62.74°處出現(xiàn)了Fe₃O₄晶體結(jié)構(gòu)的特征衍射峰，這些衍射峰一一對(duì)應(yīng)于Fe₃O₄的立體晶面：(220)、(311)、(400)、(422)、(511)及(440)。由此證明了所制備的磁性MIP微球的內(nèi)核為Fe₃O₄。Fe₃O₄@SiO₂(b)、Fe₃O₄@SiO₂-MIP(c)的XRD圖與Fe₃O₄(a)的XRD圖進(jìn)行對(duì)比，可以看到在Fe₃O₄納米微球表面逐層包裹SiO₂及MIP后的XRD譜圖中，依然含有Fe₃O₄晶體結(jié)構(gòu)中(220)、(311)、(400)、(422)、(511)及(440)立體晶面的特征衍射峰。由此說(shuō)明Fe₃O₄微球的晶體結(jié)構(gòu)在逐層包裹SiO₂和MIP功能外殼前后沒(méi)有發(fā)生改變，只是隨著包裹層厚度的不斷增加，衍射峰的強(qiáng)度相對(duì)減弱，峰寬也隨之稍微變寬。

參見(jiàn)圖4，從Fe₃O₄納米微球，F(xiàn)e₃O₄@SiO₂納米微球及Fe₃O₄@SiO₂-MIP的磁滯回線中可以看到，三種微球均具有超順磁性和強(qiáng)磁場(chǎng)感應(yīng)性，說(shuō)明Fe₃O₄納米微球表面包裹的SiO₂層及聚合層并沒(méi)有影響微球的超順磁性，只是Fe₃O₄納米微球包裹SiO₂后，磁性粒子之間的間距增加、相互作用力減小。盡管如此，仍能夠使Fe₃O₄@SiO₂-MIP定向富集，有利于磁分離和重復(fù)利用性。

采用搖床實(shí)驗(yàn)對(duì)所制備的地塞米松磁性分子印跡聚合物進(jìn)行吸附考察，結(jié)果參見(jiàn)圖5所示地塞米松磁性分子印跡聚合物Fe₃O₄@SiO₂-MIP與空白對(duì)照Fe₃O₄@SiO₂-NIP的吸附動(dòng)力學(xué)曲線。本實(shí)施例制備的地塞米松磁性分子印跡聚合物吸附30min達(dá)到吸附平衡，該條件下飽和吸附量為14.70μg/mL，印跡因子可達(dá)到2.0。表明所制備的磁性分子印跡聚合物對(duì)模板分子地塞米松具有良好的識(shí)別能力和較快的吸附速率。

采用搖床實(shí)驗(yàn)對(duì)所制備的地塞米松磁性分子印跡聚合物進(jìn)行特異性吸附考察。分別制備相同濃度的地塞米松溶液、雌酮溶液、雌二醇溶液、己烯雌酚溶液和醋酸潑尼松溶液，并分別在各溶液中加入相同質(zhì)量的地塞米松磁性分子印跡聚合物，搖床相同時(shí)間后，測(cè)定地塞米松磁性分子印跡聚合物對(duì)各個(gè)組分的吸附量，并計(jì)算印跡因子。結(jié)果表明，地塞米松磁性分子印跡聚合物對(duì)模板分子地塞米松的吸附量最大，印跡因子達(dá)到14.2，對(duì)雌酮、雌二醇、己烯雌酚和醋酸潑尼松的印跡因子分別為9.6、3.7、7.2和11.1。說(shuō)明所制備的地塞米松磁性分子印跡聚合物對(duì)模板分子地塞米松具有特異識(shí)別能力和高度的結(jié)合親和性。所制備的地塞米松磁性分子印跡聚合物經(jīng)過(guò)吸附實(shí)驗(yàn)后，可以通過(guò)加入甲醇-冰醋酸(1:4，v/v)進(jìn)行解吸附，實(shí)驗(yàn)表明所制備的地塞米松磁性分子印跡聚合物可以重復(fù)使用至少5次，并滿足回收率80％以上。

實(shí)施例2

1)磁性納米微球的制備

稱取4.0g的FeCl₃·6H₂O加入到100mL乙二醇中，連續(xù)攪拌至FeCl₃·6H₂O完全溶解，然后依次加入3g PEG2000和3g醋酸鈉，持續(xù)攪拌至兩種物質(zhì)完全溶解。將得到的溶液轉(zhuǎn)移到100mL水熱反應(yīng)釜中，真空干燥箱中200℃反應(yīng)10h。待反應(yīng)體系冷卻至室溫后，用磁鐵分離，無(wú)水乙醇洗滌3次，60℃真空干燥6h，得到Fe₃O₄納米微球。

2)Fe₃O₄@SiO₂納米微球的制備

稱取0.3g Fe₃O₄納米微球分散于含有3mL 25％氨水的乙醇:三蒸水＝4:1(v/v)的300mL混合溶液中，超聲分散15min，加入0.6mL正硅酸乙酯，40℃攪拌反應(yīng)5h。然后采用磁鐵分離，并依次用無(wú)水乙醇、三蒸水洗滌3次，于60℃真空干燥，得到Fe₃O₄@SiO₂-OH納米微球。

3)Fe₃O₄@SiO₂納米微球表面的改性

稱取0.2g Fe₃O₄@SiO₂分散于5.5mL甲苯中，加入0.2mL 4-氯甲基苯基三氯硅烷，通氮?dú)獬鹾缶徛尤?.2mL三乙胺，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下60℃攪拌反應(yīng)24h；然后采用磁性分離、并依次用10mL甲苯、丙酮、乙醇洗滌3次，于60℃真空干燥，得到-Cl修飾的Fe₃O₄@SiO₂磁性納米微球。

4)Fe₃O₄@SiO₂-Cl磁性納米微球的表面功能化

15mL苯基溴化鎂超聲分散于130mL超干四氫呋喃中，預(yù)熱至45℃。向混合液中，緩慢逐滴加入2mL干燥二硫化碳，維持45℃下反應(yīng)2h；將0.6g Fe₃O₄@SiO₂-Cl磁性納米微球超聲分散于上述反應(yīng)溶液，通氮?dú)?0min。反應(yīng)體系在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，65℃下反應(yīng)60h，用1mol/L的冰鹽酸終止反應(yīng)。用磁鐵分離產(chǎn)物，產(chǎn)物依次用四氫呋喃、無(wú)水乙醚、乙醇各洗滌3次，得到RAFT功能化磁性納米微球。

5)地塞米松磁性分子印跡聚合物制備

取地塞米松0.05mmol(0.02g)加入20mL甲醇中，超聲溶解后，加入0.2mmol甲基丙烯酸充分混合，25℃水浴條件下，通過(guò)機(jī)械攪拌預(yù)組裝12h；然后加入0.04g RAFT功能化磁性納米微球，攪拌10min，加入0.5mmol乙二醇二甲基丙烯酸酯和0.036mmol(0.006g)偶氮二異丁腈，超聲10min，攪拌30min，通氮除氧，在氮?dú)獗Ｗo(hù)、機(jī)械攪拌下50℃反應(yīng)24h；磁鐵分離反應(yīng)產(chǎn)物，依次用30mL甲醇、10mL丙酮和30mL三蒸水洗滌，乙酸:甲醇＝1:9(v/v)混合溶劑索氏提取24h，以除去模板分子；然后依次用20mL甲醇及10mL三蒸水洗至中性，65℃下真空干燥24h得到地塞米松磁性分子印跡聚合物(Fe₃O₄@SiO₂-MIP)。

實(shí)施例3

1)磁性納米微球的制備

稱取6.0g的FeCl₃·6H₂O加入到200mL乙二醇中，連續(xù)攪拌至FeCl₃·6H₂O完全溶解，然后依次加入5g PEG2000和5g醋酸鈉，持續(xù)攪拌至兩種物質(zhì)完全溶解。將得到的溶液轉(zhuǎn)移到100mL水熱反應(yīng)釜中，真空干燥箱中200℃反應(yīng)12h。待反應(yīng)體系冷卻至室溫后，用磁鐵分離，無(wú)水乙醇洗滌8次，60℃真空干燥6h，得到Fe₃O₄納米微球。

2)Fe₃O₄@SiO₂納米微球的制備

稱取0.5g Fe₃O₄納米微球分散于含有10mL 25％氨水的乙醇:三蒸水＝4:1(v/v)的300mL混合溶液中，超聲分散20min，加入1.0mL正硅酸乙酯，40℃攪拌反應(yīng)5h。然后采用磁鐵分離，并依次用無(wú)水乙醇、三蒸水洗滌3次，于60℃真空干燥，得到Fe₃O₄@SiO₂-OH納米微球。

3)Fe₃O₄@SiO₂納米微球表面的改性

稱取0.5g Fe₃O₄@SiO₂分散于10mL甲苯中，加入1.0mL 4-氯甲基苯基三氯硅烷，通氮?dú)獬鹾缶徛尤?.5mL三乙胺，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下60℃攪拌反應(yīng)24h；然后采用磁鐵分離、并依次用10mL甲苯、丙酮、乙醇洗滌3次，于60℃真空干燥，得到-Cl修飾的Fe₃O₄@SiO₂磁性納米微球。

4)Fe₃O₄@SiO₂-Cl磁性納米微球的表面功能化

30mL苯基溴化鎂超聲分散于260mL超干四氫呋喃中，預(yù)熱至45℃。向混合液中，緩慢逐滴加入6mL干燥二硫化碳，維持45℃下反應(yīng)2h；將0.8g Fe₃O₄@SiO₂-Cl磁性納米微球超聲分散于上述反應(yīng)溶液，通氮?dú)?0min。反應(yīng)體系在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，65℃下反應(yīng)60h，用1mol/L的冰鹽酸終止反應(yīng)。用磁鐵分離產(chǎn)物，產(chǎn)物依次用四氫呋喃、無(wú)水乙醚、乙醇各洗滌3次，得到RAFT功能化磁性納米微球。

5)地塞米松磁性分子印跡聚合物制備

取地塞米松0.127mmol(0.05g)溶解于15mL甲醇中，超聲溶解后，加入0.45mmol甲基丙烯酸充分混合，25℃水浴條件下，通過(guò)機(jī)械攪拌預(yù)組裝12h；然后加入0.08g RAFT功能化磁性納米微球，攪拌10min，加入1.30mmol乙二醇二甲基丙烯酸酯和0.06mmol(0.01g)偶氮二異丁腈，超聲10min，攪拌30min，通氮除氧，在氮?dú)獗Ｗo(hù)、機(jī)械攪拌下50℃反應(yīng)24h；磁鐵分離反應(yīng)產(chǎn)物，依次用30mL甲醇、10mL丙酮和30mL三蒸水洗滌，乙酸:甲醇＝1:9(v/v)混合溶劑索氏提取24h，以除去模板分子；然后依次用40mL甲醇及20mL三蒸水洗至中性，65℃下真空干燥24h得到地塞米松磁性分子印跡聚合物(Fe₃O₄@SiO₂-MIP)。