本發(fā)明屬于生物工程技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種TSA培養(yǎng)基的改良配方，具體涉及一種能滿足普通細(xì)菌與大部分厭氧菌全面需要的TSA培養(yǎng)基的改良配方。
背景技術(shù)：
現(xiàn)有的TSA培養(yǎng)基基本上是由胰酪蛋白胨、大豆胨、氯化鈉、瓊脂組成，雖然營養(yǎng)較為豐富，但由于氧化還原電位較高，所以只能進(jìn)行需氧微生物的培養(yǎng)，厭氧微生物不能很好的生長。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
為了拓寬TSA的培養(yǎng)范圍，滿足大部分需氧微生物和厭氧微生物的生長條件，本發(fā)明修改了部分TSA配方，提供了一種TSA培養(yǎng)基的改良配方。
本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的：
一種TSA培養(yǎng)基的改良配方，由胰酪蛋白胨、大豆胨、肝臟消化物、酵母提取物、氯化鈉、硫乙醇酸鈉、葡萄糖、磷酸氫二鉀、瓊脂組成，其中：每1000ml培養(yǎng)基中，含有胰酪蛋白胨15～20g、大豆胨1～5g、肝臟消化物1～5g、酵母提取物1～5g、氯化鈉2～6g、硫乙醇酸鈉0.5～2g、葡萄糖1～4g、磷酸氫二鉀1～3g、瓊脂10～20g，pH＝7.3±0.2。
本發(fā)明中，所述胰酪蛋白胨為進(jìn)口，采用酪蛋白為原料，經(jīng)過消化、脫色、過濾、濃縮、噴霧干燥而得到的一種淺黃色至類白色的干燥粉末。胰酪蛋白胨是一種營養(yǎng)價值很高的磷蛋白，氨基酸比較齊全，特別是色氨酸的含量比較高，適宜于厭氧菌、真菌、肺炎球菌、乳酸桿菌、棒狀桿菌、梭狀桿菌的生長。
本發(fā)明中，所述大豆胨為進(jìn)口，以大豆粉為原材料，經(jīng)過酶解得到，含有的肽類物質(zhì)十分廣泛，包括低分子量的二肽、三肽及氨基酸。微生物生長效果極佳，有利于苛養(yǎng)菌的充分生長。
本發(fā)明中，所述肝臟消化物為進(jìn)口，肝臟酶解產(chǎn)物，能夠提供豐富的肝糖原、維生素和氨基酸，對各種細(xì)菌有明顯的促生長作用，特別是對布魯氏菌與阿米巴原蟲效果極好，另外能夠更好地對厭氧菌進(jìn)行培養(yǎng)。
本發(fā)明中，所述酵母浸粉為進(jìn)口，以新鮮酵母為原料，能夠提供B族維生素和各種氨基酸以及糖類(主要為糖原和海藻糖)。
本發(fā)明中，所述硫乙醇酸鈉為國產(chǎn)。硫乙醇酸鈉(HSCH2COONa)是一種還原劑，加入培養(yǎng)基中，能除去其中的氧或還原性物質(zhì)，促使厭氧菌生長，同時提供部分鈉離子維持滲透壓。
本發(fā)明中，所述氯化鈉為國產(chǎn)，能夠維持滲透壓。
本發(fā)明中，所述葡萄糖為國產(chǎn)。葡萄糖能提供部分能量與維持滲透壓，同時也是一種還原劑，加入培養(yǎng)基中，能除去其中的氧或還原性物質(zhì)，促使厭氧菌生長。
本發(fā)明中，所述磷酸氫二鉀為國產(chǎn)，能夠解離出鉀離子，提供適合的代謝中酶反應(yīng)的離子環(huán)境。
本發(fā)明的TSA培養(yǎng)基改良配方能夠提供全面營養(yǎng)，維持細(xì)菌滲透壓，修復(fù)受損細(xì)菌，在不影響現(xiàn)有性能即能夠培養(yǎng)需氧微生物的基礎(chǔ)上同時適用于大部分厭氧微生物的培養(yǎng)。
具體實施方式
下面結(jié)合實施例對本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步的說明，但并不局限于此，凡是對本發(fā)明技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的精神和范圍，均應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍中。
實施例1：
本實施例提供的TSA培養(yǎng)基的改良配方由胰酪蛋白胨、大豆胨、肝臟消化物、酵母提取物、氯化鈉、硫乙醇酸鈉、葡萄糖、磷酸氫二鉀、瓊脂組成，其中：每1000ml培養(yǎng)基中，含有胰酪蛋白胨17g、大豆胨3g、肝臟消化物2g、酵母提取物2g、氯化鈉4g、硫乙醇酸鈉1g、葡萄糖2.5g、磷酸氫二鉀2g、瓊脂15g，pH＝7.3±0.2。
上述培養(yǎng)基的制備步驟如下：將胰酪蛋白胨、大豆胨、肝臟消化物、酵母提取物、氯化鈉、硫乙醇酸鈉、葡萄糖、磷酸氫二鉀、瓊脂按照比例混合，加入純化水定容加熱溶解并調(diào)節(jié)pH值至7.2±0.2，經(jīng)121℃滅菌15分鐘，降溫至50℃，灌注平板，冷凝后得到培養(yǎng)基成品，備用。
利用上述成分制成的新型TSA培養(yǎng)基與經(jīng)典TSA培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)實驗對比，結(jié)果如表1所示。
所用菌株：枯草芽孢桿菌(CMCC 63501)、白色念珠菌(CMCC98001)、肺炎鏈球菌(ATCC 6305)、生孢梭菌(CMCC 64941)。
每種菌都用同一濃度菌液進(jìn)行涂布培養(yǎng)，并做3組平行實驗。
由表1可知，本實施例的培養(yǎng)基配方從實驗結(jié)果上看，菌檢出數(shù)與狀態(tài)均好于經(jīng)典配方，而且厭氧菌可以生長。
表1
實施例2：
本實施例與實施例1不同的是：每1000ml培養(yǎng)基中，胰酪蛋白胨16g、大豆胨4g、肝臟消化物3g、酵母提取物4g、氯化鈉3g、硫乙醇酸鈉0.5g、葡萄糖1.5g、磷酸氫二鉀2.5g、瓊脂18g，pH＝7.3±0.2。
實施例3：
本實施例與實施例1不同的是：每1000ml培養(yǎng)基中，含有胰酪蛋白胨18g、大豆胨2g、肝臟消化物4g、酵母提取物3g、氯化鈉5g、硫乙醇酸鈉1.5g、葡萄糖3.5g、磷酸氫二鉀1.5g、瓊脂12g，pH＝7.3±0.2。