本發(fā)明涉及分析和檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，更具體地說(shuō)，涉及化合物I和化合物II及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

隨著國(guó)家經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展和人民生活水平的不斷提高，個(gè)人身體健康的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)、疾病的預(yù)防和治療逐漸成為人們更加關(guān)注的民生問(wèn)題。相對(duì)于傳統(tǒng)的體外化學(xué)檢驗(yàn)的延遲性和放射線(xiàn)在線(xiàn)檢測(cè)的危害性，熒光在線(xiàn)顯像技術(shù)以其高效、綠色、實(shí)時(shí)性強(qiáng)的優(yōu)勢(shì)漸漸走入人們的視野，被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞免疫學(xué)、微生物學(xué)、分子生物學(xué)、遺傳學(xué)、神經(jīng)生物學(xué)、病理學(xué)、腫瘤學(xué)、臨床檢驗(yàn)學(xué)、醫(yī)學(xué)、植物學(xué)等方面的科研和民生等領(lǐng)域。

熒光顯像技術(shù)的關(guān)鍵技術(shù)就是熒光物質(zhì)作為標(biāo)記探針(或染色劑)的選擇。理想的探針?lè)肿油ㄟ^(guò)物理或化學(xué)作用，特異性吸附在特定的細(xì)胞和組織上，在低能量光學(xué)輻照下實(shí)現(xiàn)二維或三維的成像，通過(guò)與熒光顏色、強(qiáng)度和分布情況來(lái)判斷細(xì)胞或組織的健康情況。與普通的化學(xué)染色相比，熒光染色的靈敏度要高出100-1000倍，而且通過(guò)適當(dāng)?shù)墓δ苄揎椉纯蓪?shí)現(xiàn)對(duì)活體的在線(xiàn)分析。

通常，熒光探針結(jié)構(gòu)有2-3部分組成，即發(fā)光基元、鏈接基元(可選)和識(shí)別基元。其中，發(fā)光基元主要負(fù)責(zé)在外界環(huán)境刺激(光、電或磁作用)實(shí)現(xiàn)高效率的發(fā)光，進(jìn)而被外界信號(hào)檢測(cè)設(shè)備檢出變成可 視化信息；識(shí)別基元主要是對(duì)細(xì)胞或體內(nèi)的靶向目標(biāo)起到識(shí)別作用，以提高探針的定位能力；鏈接基元主要是將二者鏈接起來(lái)，使發(fā)光位置與被探測(cè)結(jié)構(gòu)具有穩(wěn)定的對(duì)應(yīng)關(guān)系，保證檢測(cè)過(guò)程的準(zhǔn)確性。在實(shí)際應(yīng)用中，為了簡(jiǎn)化熒光探針結(jié)構(gòu)制備過(guò)程和降低成本，熒光探針的識(shí)別基元和發(fā)光核心也可由探針?lè)肿又械耐换瘜W(xué)結(jié)構(gòu)擔(dān)任，但是這與化合物的發(fā)光機(jī)理和識(shí)別作用有很大關(guān)系，既不能相互干擾，又要實(shí)現(xiàn)快速響應(yīng)和高度分辨，這將是熒光探針未來(lái)發(fā)展的主流方向。

菲并咪唑作為一類(lèi)新型發(fā)光材料，具有較高的發(fā)光效率、優(yōu)異的光熱穩(wěn)定性、相對(duì)平衡的載流子注入\傳輸能力，在發(fā)光材料領(lǐng)域展現(xiàn)了較大的應(yīng)用潛力；同時(shí)，菲并咪唑也是一類(lèi)抗癌型藥物的母體結(jié)構(gòu)，說(shuō)明其具有一定的分子識(shí)別和定位能力。雖然上述兩種優(yōu)勢(shì)的結(jié)合使菲并咪唑滿(mǎn)足了一類(lèi)理想的熒光探針構(gòu)筑基元的要求，但是菲并咪唑這類(lèi)高芳香性稠環(huán)的生物相容性較差，且識(shí)別定位能力較差，還無(wú)法作為熒光探針進(jìn)行應(yīng)用，需要引入其它基團(tuán)對(duì)其性能進(jìn)行調(diào)節(jié)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供結(jié)構(gòu)通式為式I和式II的化合物及其制備方法和應(yīng)用，即化合物I和化合物II及其制備方法和應(yīng)用，具體是提供一類(lèi)基于菲并咪唑N1取代的羧酸及羧酸衍生物，解決了現(xiàn)有技術(shù)中的菲并咪唑類(lèi)化合物尚無(wú)法實(shí)現(xiàn)作為熒光探針應(yīng)用的問(wèn)題。

本發(fā)明解決技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案是：一種式I的化合物，具有如下結(jié)構(gòu)通式：

其中，Ar表示芳香基團(tuán)或其衍生結(jié)構(gòu)，Ar選自苯基、甲苯基、萘基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、喹啉基、吲哚基、咔唑基、苯胺基、三苯基乙烯、四苯基乙烯及其相應(yīng)的衍生結(jié)構(gòu)中的一種；R選自羥基、鹵素、烷氧基、芳香酚基團(tuán)、胺基及芳香胺基及其相應(yīng)的衍生物中的一種；G1和G2分別表示菲環(huán)上任意位置的任意取代基團(tuán)。

在本發(fā)明式I的化合物中，G1和G2分別表示氫。

本發(fā)明還提供了上述式I的化合物的制備方法，包括如下步驟：

S1、將芳香醛衍生物菲醌衍生物乙酸銨和氨基苯甲酸在有機(jī)溶劑中加熱至80℃-180℃，反應(yīng)1-24小時(shí)后冷卻至室溫，過(guò)濾，得到

其中，Ar選自苯基、甲苯基、萘基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、喹啉基、吲哚基、咔唑基、苯胺基、三苯基乙烯、 四苯基乙烯及其相應(yīng)的衍生結(jié)構(gòu)中的一種；G1和G2各自分別表示菲環(huán)上任意位置的任意取代基團(tuán)。

在步驟S1后還包括步驟S2：

S2、將S1步驟中制備得到的中的羥基分別進(jìn)行相對(duì)應(yīng)的取代反應(yīng)得到由R取代的式I的化合物，其中R選自鹵素、烷氧基、芳香酚基團(tuán)、胺基及芳香胺基及其相應(yīng)的衍生物中的一種。

在本發(fā)明式I的化合物的制備方法中，在步驟S1中，優(yōu)選加熱至100℃-120℃；優(yōu)選反應(yīng)2-4小時(shí)后冷卻至室溫；所述有機(jī)溶劑優(yōu)選選自乙酸、四氫呋喃、甲苯、苯、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺和N-甲基吡咯烷酮中的任意一種或多種，最優(yōu)選乙酸以及乙酸與其它溶劑的混合體系，即乙酸與四氫呋喃、甲苯、苯、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺和N-甲基吡咯烷酮中的任意一種或多種的混合體系。

進(jìn)一步地，在步驟S1與步驟S2之間還可包括步驟S3：對(duì)S1步驟得到的進(jìn)一步提純，可采用重結(jié)晶和柱層析法，其中重結(jié)晶溶劑優(yōu)選四氫呋喃、乙醇、甲苯或N,N-二甲基甲酰胺，更優(yōu)選N,N-二甲基甲酰胺。

本發(fā)明還提供另外一種式II的化合物，具有如下結(jié)構(gòu)通式：

其中，Ar表示芳香基團(tuán)或其衍生結(jié)構(gòu)，Ar選自苯基、甲苯基、萘基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、喹啉基、吲哚基、咔唑基、苯胺基、三苯基乙烯、四苯基乙烯及其相應(yīng)的衍生結(jié)構(gòu)中的一種；R和R₁各自分別選自羥基、鹵素、烷氧基、芳香酚基團(tuán)、胺基及芳香胺基及其相應(yīng)的衍生物中的一種；G1和G2各自分別表示菲環(huán)上任意位置的任意取代基團(tuán)。

在本發(fā)明的式II的化合物中，G1和G2分別表示氫。

本發(fā)明還提供了上述式II的化合物的制備方法，包括如下步驟：Sa、將芳香醛衍生物菲醌衍生物乙酸銨和氨基苯二甲酸在有機(jī)溶劑中加熱至80℃-180℃，反應(yīng)1-24小時(shí)后冷卻至室溫，過(guò)濾，得到

其中，Ar選自苯基、甲苯基、萘基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡 啶基、吡喃基、喹啉基、吲哚基、咔唑基、苯胺基、三苯基乙烯、四苯基乙烯及其相應(yīng)的衍生結(jié)構(gòu)中的一種；G1和G2各自分別表示菲環(huán)上任意位置的任意取代基團(tuán)。

在式II的化合物的制備方法中，在步驟Sa后還包括步驟Sb：

Sb、將Sa步驟中制備得到的中的兩個(gè)羥基各自分別進(jìn)行相對(duì)應(yīng)的取代反應(yīng)得到分別由R和R₁取代的式II的化合物，其中R和R₁各自分別選自鹵素、烷氧基、芳香酚基團(tuán)、胺基及芳香胺基及其相應(yīng)的衍生物中的一種。

在本發(fā)明式II的化合物的制備方法中，在步驟Sa中，優(yōu)選加熱至100℃-120℃；優(yōu)選反應(yīng)2-4小時(shí)后冷卻至室溫；所述有機(jī)溶劑優(yōu)選選自乙酸、四氫呋喃、甲苯、苯、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺和N-甲基吡咯烷酮中的任意一種或多種，最優(yōu)選乙酸以及乙酸與其它溶劑的混合體系，即乙酸與四氫呋喃、甲苯、苯、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺和N-甲基吡咯烷酮中的任意一種或多種的混合體系。

進(jìn)一步地，在步驟Sa與步驟Sb之間還可包括步驟Sc：對(duì)Sa步驟得到的進(jìn)一步提純，可采用重結(jié)晶和柱層析法，其中重結(jié)晶溶劑優(yōu)選四氫呋喃、乙醇、甲苯或N,N-二甲基甲酰胺，更優(yōu)選N,N-二甲基甲酰胺。

上述式I和式II的化合物均分別用于制備熒光探針的用途，特別是用于制備生物熒光探針的用途。

實(shí)施本發(fā)明的式I和式II的化合物及其制備方法和應(yīng)用，具有以下有益效果：本發(fā)明的式I和式II的化合物通過(guò)在A(yíng)r處(C2取代基位置)引入不同的取代基結(jié)構(gòu)，實(shí)現(xiàn)對(duì)上述化合物的發(fā)光顏色、效率的調(diào)節(jié)；重點(diǎn)通過(guò)引入三苯基乙烯或四苯基乙烯基元及其衍生物結(jié)構(gòu)，有效的遏制化合物在固態(tài)下效率的損失，實(shí)現(xiàn)其水系條件下高的熒光量子產(chǎn)率；通過(guò)選擇不同的氨基羧酸結(jié)構(gòu)作為反應(yīng)物，在N1苯環(huán)處引入不同的羧酸結(jié)構(gòu)，并通過(guò)適當(dāng)?shù)姆椒ㄖ苽涓鞣N羧酸衍生結(jié)構(gòu)，如酰鹵、芳酸烷基酯、芳酸芳基酯、芳酸烷基酰胺或芳酸芳基酰胺等，以提高上述化合物結(jié)構(gòu)的分子相容性、識(shí)別能力等；重點(diǎn)強(qiáng)調(diào)通過(guò)簡(jiǎn)單的鹵化反應(yīng)得到了一類(lèi)水系穩(wěn)定的酰氯結(jié)構(gòu)，并通過(guò)晶體結(jié)構(gòu)證明分子內(nèi)電荷分離可能是穩(wěn)定此類(lèi)結(jié)構(gòu)的關(guān)鍵因素；式I和式II化合物作為一類(lèi)新型的探針結(jié)構(gòu)，菲并咪唑羧酸和羧酸衍生物能夠自由的進(jìn)出細(xì)胞，并對(duì)特定結(jié)構(gòu)進(jìn)行選擇性識(shí)別與成像，使其在生物、 醫(yī)療、健康和監(jiān)測(cè)領(lǐng)域，具有極其廣闊的應(yīng)用前景。

附圖說(shuō)明

圖1A為T(mén)PE-PA在四氫呋喃與水的不同比例下的熒光光譜相對(duì)熒光強(qiáng)度變化曲線(xiàn)圖；

圖1B為T(mén)PE-PAC在四氫呋喃與水的不同比例下的熒光光譜相對(duì)熒光強(qiáng)度變化曲線(xiàn)圖；

圖2為T(mén)PE-PAC在水中pH值隨時(shí)間變化的曲線(xiàn)圖；

圖3A為T(mén)PE-PAC染色的Hela細(xì)胞在熒光顯微鏡下的明場(chǎng)照片；

圖3B為T(mén)PE-PAC染色的Hela細(xì)胞在熒光顯微鏡下的熒光照片；

圖4為T(mén)PE-P2A在四氫呋喃與水的不同比例下的熒光光譜變化曲線(xiàn)圖；

圖5A為T(mén)PE-P2A染色的Hela細(xì)胞在熒光顯微鏡下的明場(chǎng)照片；

圖5B為T(mén)PE-P2A染色的Hela細(xì)胞在熒光顯微鏡下的熒光照片。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合附圖和實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明的化合物I和化合物II及其制備方法和應(yīng)用作進(jìn)一步說(shuō)明：

本發(fā)明提供的一類(lèi)可以作為新型熒光探針材料的式I和式II的化合物，即化合物I和化合物II，該材料為菲并咪唑羧酸及羧酸衍生物結(jié)構(gòu)，其結(jié)構(gòu)具有以下結(jié)構(gòu)通式：

上述結(jié)構(gòu)以9,10-菲并咪唑?yàn)楹诵慕Y(jié)構(gòu)，Ar表示芳香基團(tuán)或其衍生結(jié)構(gòu)，分別選自苯基、甲苯基、萘基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、喹啉基、吲哚基、咔唑基、苯胺基、三苯基乙烯、四苯基乙烯等及相應(yīng)的衍生結(jié)構(gòu)中的一種。R和R₁分別表示在咪唑中N1取代苯環(huán)上的任意取代位置的羰基鏈接取代基結(jié)構(gòu)，分別選自羥基、鹵素、烷氧基或芳香酚基團(tuán)、胺基及芳香胺基等構(gòu)筑的羧酸基團(tuán)衍生結(jié)構(gòu)。G1和G2表示菲環(huán)上任意位置的任意取代基團(tuán)。

具體合成過(guò)程：

(1)

通過(guò)各種耦聯(lián)、取代和縮合等反應(yīng)得到芳香醛和菲醌的衍生物結(jié)構(gòu)。芳香醛和菲醌的衍生物均為現(xiàn)有化合物，其合成過(guò)程為現(xiàn)有技術(shù)，這里不再贅述具體制備過(guò)程。

(2)

將上述芳香醛衍生物、菲醌衍生物、乙酸銨和氨基苯甲酸(或氨基苯二甲酸)采用“一鍋法”在適當(dāng)?shù)娜軇┖蜏囟戎苽渲匾聂人峤Y(jié)構(gòu)。

具體操作：將芳香醛衍生物、菲醌衍生物、乙酸銨和氨基苯甲酸(或氨基苯二甲酸)在有機(jī)溶劑中加熱至適當(dāng)溫度，反應(yīng)一段時(shí)間后冷卻至室溫，過(guò)濾得到羧酸結(jié)構(gòu)(進(jìn)一步提純采用重結(jié)晶和柱層析法)。其中，有機(jī)溶劑優(yōu)選乙酸、四氫呋喃、甲苯、苯、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)，N,N-二甲基乙酰胺(DMAC)和N-甲基吡咯烷酮(NMP)等或二者、三者的混合體系，最優(yōu)選乙酸及其與其他溶劑的混合體系；溫度優(yōu)選80℃至180℃，其中最優(yōu)選為100℃至120℃；反應(yīng)時(shí)間優(yōu)選1小時(shí)至24小時(shí)，其中最優(yōu)選2小時(shí)至4小時(shí)；重結(jié)晶溶劑，優(yōu)選四氫呋喃、乙醇、甲苯、DMF等，最優(yōu)選DMF。

(3)

將上述羧酸結(jié)構(gòu)采用對(duì)應(yīng)方法，分別得到菲并咪唑N1苯環(huán)的取代的酰鹵、芳酸烷基酯、芳酸芳基酯、芳酸烷基酰胺或芳酸芳基酰胺等。需要說(shuō)明的是，其具體的取代反應(yīng)過(guò)程均為現(xiàn)有技術(shù)，這里不再進(jìn)行詳細(xì)贅述。

進(jìn)一步地，G1和G2分別表示氫。

進(jìn)一步地，Ar為任意芳基結(jié)構(gòu)，取代基R和R₁為羥基、鹵素、烷氧基或芳香酚基團(tuán)、胺基及芳香胺基及其衍生物時(shí)，其優(yōu)選化合物結(jié)構(gòu)為：

其中，X為F、Cl、Br和I中的一種，R₂-R₅各自分別為氫、烷基、羥基、烷氧基、硝基、氰基、氨基、巰基、鹵素原子等(進(jìn)一步地，其中烷基或烷氧基的碳原子數(shù)為1～12)，Ar’和Ar”各自分別選自苯基、甲苯基、萘基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、喹啉基、吲哚基、咔唑基、苯胺基、三苯基乙烯、四苯基乙烯等及相應(yīng)的衍生結(jié)構(gòu)中的一種。

進(jìn)一步地，Ar被限制為苯環(huán)或苯環(huán)衍生物、萘環(huán)或萘環(huán)衍生物、蒽環(huán)或蒽環(huán)衍生物取代基，其化合物通式及優(yōu)選化合物結(jié)構(gòu)如下，且用表示N1苯環(huán)上由羥基、鹵素、烷氧基或芳香酚基團(tuán)、胺基及芳香胺基等所構(gòu)筑的羧酸基團(tuán)衍生結(jié)構(gòu)：

其中，A₁-A₉各自分別為氫、烷基、羥基、烷氧基、硝基、氰基、氨基、巰基、鹵素原子、苯基、甲苯基、萘基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、喹啉基、吲哚基、羧酸或羧酸衍生物、咔唑基或苯胺基及相應(yīng)的衍生結(jié)構(gòu)中的一種(進(jìn)一步地，其中烷基或烷氧基的碳原子數(shù)為1～12)。

進(jìn)一步地，Ar被限制為三苯基乙烯及三苯基乙烯衍生物，其化合物通式及優(yōu)選化合物結(jié)構(gòu)如下，且用表示N1苯環(huán)上由羥基、鹵素、烷氧基或芳香酚基團(tuán)、胺基及芳香胺基等所構(gòu)筑的羧酸基團(tuán)衍生結(jié)構(gòu)：

其中，Ar”’選自苯基、甲苯基、萘基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、喹啉基、吲哚基、咔唑基、苯胺基、苯并噻二唑及相應(yīng)的衍生結(jié)構(gòu)或者是任意二者組成的新的芳香基團(tuán)的一種；B₁-B₁₅各自分別為氫、烷基、羥基、烷氧基、硝基、氰基、氨基、巰基、鹵素原子、苯基、甲苯基、萘基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、喹啉基、吲哚基、羧酸或羧酸衍生物、咔唑基或苯胺基中的一種或相應(yīng)衍生物等中的一種(進(jìn)一步地，其中烷基或烷氧基的碳原子數(shù)為1～12)。

進(jìn)一步地，Ar被限制為四苯基乙烯及四苯基乙烯衍生物，其化合物通式及優(yōu)選化合物結(jié)構(gòu)如下，且用表示N1苯環(huán)上由羥基、鹵素、烷氧基或芳香酚基團(tuán)、胺基及芳香胺基等所構(gòu)筑的羧酸基團(tuán)衍生結(jié)構(gòu)：

其中，Ar”’選自苯基、甲苯基、萘基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、喹啉基、吲哚基、咔唑基、苯胺基、苯并噻二唑及相應(yīng)的衍生結(jié)構(gòu)或者是任意二者組成的新的芳香基團(tuán)的一種；B₁-B₁₅各自分別為氫、烷基、羥基、烷氧基、硝基、氰基、氨基、巰基、鹵素原子、苯基、甲苯基、萘基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡啶基、吡喃基、喹啉基、吲哚基、羧酸或羧酸衍生物、咔唑基或苯胺基中的一種或相應(yīng)衍生物等中的一種(進(jìn)一步地，其中烷基或烷氧基的碳原子數(shù)為1～12)。

進(jìn)一步地，Ar為呋喃、噻吩、吡咯、吡啶、吡喃、喹啉(含異喹啉)、吲哚、咔唑、苯胺基、苯并噻二唑及其相應(yīng)的衍生結(jié)構(gòu)，或者是任意二者組成的新的芳香基團(tuán)的一種，其化合物通式及優(yōu)選化合物結(jié)構(gòu)如下，且用表示N1苯環(huán)上由羥基、鹵素、烷氧基或芳香酚基團(tuán)、胺基及芳香胺基等所構(gòu)筑的羧酸基團(tuán)衍生結(jié)構(gòu)：

上述所有結(jié)構(gòu)式中，其中芳基和烷基優(yōu)選結(jié)構(gòu)可以選自下式中所示29種中的一種或氫原子：

實(shí)施例1：苯基-菲并咪唑-N1-羧酸及衍生物的合成

將適量苯甲醛、菲醌、對(duì)氨基苯甲酸和過(guò)量的乙酸銨在冰醋酸中120℃反應(yīng)3小時(shí)后冷卻至室溫，過(guò)濾得到羧酸衍生物。將其溶解于N，N-二甲基甲酰胺和二氯亞砜的混合溶劑中，80℃反應(yīng)4小時(shí)后旋走未反應(yīng)的二氯亞砜。加入過(guò)量的苯胺回流4小時(shí)，色譜柱分離得到目標(biāo)化合物結(jié)構(gòu)。¹H NMR(DMSO,500MHz):δ:10.6(s,1H),8.96(d,1H),8.90(d,1H),8.70(d,1H),8.21(d,2H),7.85(d,2H),7.79(t,1H),7.71(t,1H),7.60-7.56(m,5H),7.40-7.37(m,7H),7.11(d,1H).MALDI-TOF(m/z):[M+]calcd.C₃₄H₂₃N₃O,489.5659；found,490.59.

實(shí)施例2：1-萘基-菲并咪唑-N1-羧酸及衍生物的合成

將適量1-萘甲醛、菲醌、對(duì)氨基苯甲酸和過(guò)量的乙酸銨在冰醋酸中120℃反應(yīng)3小時(shí)后冷卻至室溫，過(guò)濾得到羧酸衍生物。將其溶解于N，N-二甲基甲酰胺和二氯亞砜的混合溶劑中，80℃反應(yīng)4小時(shí)后旋走未反應(yīng)的二氯亞砜。加入過(guò)量的苯胺回流4小時(shí)，色譜柱分離得到目標(biāo)化合物結(jié)構(gòu)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ13.27(s,1H),9.02-8.97(m,1H),8.94(d,J＝8.3Hz,1H),8.67(dd,J＝7.9,1.4Hz,1H), 8.02-7.93(m,4H),7.91(dd,J＝8.2,1.4Hz,1H),7.83-7.65(m,5H),7.61(ddd,J＝8.4,7.0,1.4Hz,1H),7.60-7.45(m,3H),7.41(ddd,J＝8.1,6.9,1.1Hz,1H),7.14(dd,J＝8.3,1.2Hz,1H).MALDI-TOF(m/z):[M+]calcd.C₃₈H₂₅N₃O,539.6246；found,540.77.

實(shí)施例3：2-萘基-菲并咪唑-N1-羧酸及衍生物的合成

將適量2-萘甲醛、菲醌、對(duì)氨基苯甲酸和過(guò)量的乙酸銨在冰醋酸中120℃反應(yīng)3小時(shí)后冷卻至室溫，過(guò)濾得到羧酸衍生物。將其溶解于N，N-二甲基甲酰胺和二氯亞砜的混合溶劑中，80℃反應(yīng)4小時(shí)后旋走未反應(yīng)的二氯亞砜。加入過(guò)量的苯胺回流4小時(shí)，色譜柱分離得到目標(biāo)化合物結(jié)構(gòu)。¹HNMR(500MHz,DMSO-d₆)δ10.36(s,1H),8.98(dd,J＝28.1,8.4Hz,2H),8.67(dd,J＝8.0,1.4Hz,1H),8.04-7.90(m,5H),7.83-7.69(m,7H),7.66-7.49(m,4H),7.43(ddd,J＝8.2,7.0,1.1Hz,1H),7.35(t,J＝7.9Hz,2H),7.18(dd,J＝8.4,1.2Hz,1H),7.11(dd,J＝8.0,6.7Hz,1H).MALDI-TOF(m/z):[M+]calcd.C₃₈H₂₅N₃O,539.6246；found,540.45.

實(shí)施例4：四苯基乙烯-菲并咪唑-N1-羧酸及衍生物的合成

將適量四苯乙烯基甲醛、菲醌、對(duì)氨基苯甲酸和過(guò)量的乙酸銨在冰醋酸中120℃反應(yīng)3小時(shí)后冷卻至室溫，過(guò)濾，柱層析得到羧酸衍生物TPE-PA。MALDI-TOF(m/z):[M+]calcd.C₄₈H₃₂N₂O₂,668.7799；found,668.8732.Anal Calc.for C₄₈H₃₂N₂O₂:C,86.20；H,4.82；N,4.19；O,4.78.Found:C,86.12；H,4.77；N,4.20；O,4.74.

將TPE-PA溶解于N，N-二甲基甲酰胺(少量)和二氯亞砜的混合溶劑中，80℃反應(yīng)4小時(shí)后旋走未反應(yīng)的二氯亞砜，用水和二氯甲烷萃取后干燥，色譜柱分離得到酰氯化合物結(jié)構(gòu)TPE-PAC。MALDI-TOF(m/z):[M+]calcd.C₄₈H₃₁ClN₂O,687.2255；found,687.2345.Anal Calc.for C₄₈H₃₁ClN₂O:C,83.89；H,4.55；Cl,5.16；N,4.08；O,2.33Found:C,83.87；H,4.53；N,4.09；O,2.32。

實(shí)施例5：TPE-PA和TPE-PAC的聚集誘導(dǎo)發(fā)光(AIE)性質(zhì)研究

如圖1A和1B所示，分別為T(mén)PE-PA和TPE-PAC在四氫呋喃與水的不同比例下的熒光光譜相對(duì)熒光強(qiáng)度變化曲線(xiàn)，隨著水含量的增加，二者的熒光強(qiáng)度明顯增加，具有明顯的聚集誘導(dǎo)發(fā)光現(xiàn)象，是一類(lèi)潛在的熒光分子探針。

實(shí)施例6：TPE-PAC水系穩(wěn)定性研究

如圖2所示，為T(mén)PE-PAC在水中pH值隨時(shí)間變化曲線(xiàn)。通常條件下，酰氯在水中會(huì)快速水解為對(duì)應(yīng)的羧酸和氯化氫，進(jìn)而失去高 的反應(yīng)活性，但是TPE-PAC由于咪唑的特殊性在水系條件可以表現(xiàn)出顯著的穩(wěn)定性。在攪拌條件下，1500分鐘內(nèi)通過(guò)pH值變化估計(jì)其分解率僅為25％，是一類(lèi)水系下穩(wěn)定的酰氯結(jié)構(gòu)。而且，該酰氯結(jié)構(gòu)可以正常的進(jìn)行萃取和柱層析，表明其可以作為水系條件下的熒光分子探針基元。

實(shí)施例7：TPE-PAC細(xì)胞染色實(shí)驗(yàn)

將TPE-PAC配成一定濃度的DMSO溶液后，滴入細(xì)胞培養(yǎng)液中，選擇Hela細(xì)胞作為研究對(duì)象，培養(yǎng)一段時(shí)間后采用熒光顯微鏡對(duì)其極性觀(guān)察，如圖3A和3B所示，發(fā)現(xiàn)TPE-PAC可以順利的透過(guò)細(xì)胞壁，并定向的在細(xì)胞質(zhì)處富集，從而顯示出藍(lán)色熒光，說(shuō)明該類(lèi)酰氯結(jié)構(gòu)在水系條件下可以作為熒光探針使用。

實(shí)施例8：四苯基乙烯-菲并咪唑-N1-羧酸衍生物TPE-P2A的合成

將適量四苯乙烯基甲醛、菲醌、對(duì)氨基苯二酸和過(guò)量的乙酸銨在冰醋酸中120℃反應(yīng)3小時(shí)后冷卻至室溫，過(guò)濾，柱層析得到羧酸衍生物TPE-P2A。MALDI-TOF(m/z):[M+]calcd.C₄₉H₃₂N₂O₄,712.7894；found,712.7902.Anal Calc.for C₄₉H₃₂N₂O₄:C,82.57；H,4.53；N,3.93；O,8.98.Found:C,82.48；H,4.45；N,3.9387；O,8.68.

實(shí)施例9：TPE-P2A的聚集誘導(dǎo)發(fā)光(AIE)性質(zhì)研究

如圖4所示，為T(mén)PE-P2A在四氫呋喃與水的不同比例下的熒光光譜變化曲線(xiàn)，隨著水含量的增加，二者的熒光強(qiáng)度明顯增加，具有明顯的聚集誘導(dǎo)發(fā)光現(xiàn)象，可以作為一類(lèi)熒光分子探針。

實(shí)施例10：TPE-P2A細(xì)胞染色實(shí)驗(yàn)

將TPE-P2A配成一定濃度溶液DMSO溶液后，滴入細(xì)胞培養(yǎng)液中，選擇Hela細(xì)胞作為研究對(duì)象，培養(yǎng)一段時(shí)間后采用熒光顯微鏡對(duì)其極性觀(guān)察，如圖5A和5B所示，發(fā)現(xiàn)TPE-P2A可以順利的透過(guò)細(xì)胞壁，并定向的在細(xì)胞質(zhì)處富集，從而顯示出藍(lán)色熒光，說(shuō)明該類(lèi)二羧酸結(jié)構(gòu)具有自活化性能，可以作為熒光探針使用。

應(yīng)當(dāng)理解的是，對(duì)本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，可以根據(jù)上述說(shuō)明加以改進(jìn)或變換，所有這些改進(jìn)或變換都應(yīng)屬于本發(fā)明所附權(quán)利要求的保護(hù)范圍之內(nèi)。