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一種產(chǎn)纖維素木醋桿菌菌體濃度的在線評(píng)價(jià)方法與流程

文檔序號(hào):11061821閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種產(chǎn)纖維素木醋桿菌菌體濃度的在線評(píng)價(jià)方法,其特征在于包括如下步驟:

(1)菌株活化:取凍干保存的木醋桿菌涂布到平板固體培養(yǎng)基上,28-32℃培養(yǎng)4-8天生成單菌落,挑選上述培養(yǎng)好的單菌落,用接種環(huán)均勻涂在斜面固體培養(yǎng)基上,于28-32℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2-4天;

(2)搖瓶培養(yǎng):用無(wú)菌小鏟取一小塊上述培養(yǎng)好的斜面薄膜,接入搖瓶液體培養(yǎng)基中,28-32℃培養(yǎng)4-6h;

(3)種子罐培養(yǎng):將氣體分布器置于種子罐中,并將在線電容檢測(cè)裝置的兩根工作電極從種子罐側(cè)向插入,然后裝入液體培養(yǎng)基,經(jīng)高溫蒸汽滅菌后,將步驟(2)培養(yǎng)好的搖瓶種子液全部接入種子罐開(kāi)始培養(yǎng),培養(yǎng)溫度28-32℃,培養(yǎng)壓力為20-50Kpa,空氣流量為3-10L/min;

(4)檢測(cè):在步驟(3)種子罐中進(jìn)行培養(yǎng)的同時(shí),開(kāi)啟在線電容檢測(cè)裝置,并將檢測(cè)頻率設(shè)置為300~2000Hz,實(shí)時(shí)在線監(jiān)測(cè)的電容率的變化;

(5)終點(diǎn):根據(jù)電容率變化與菌體濃度相關(guān)聯(lián)的關(guān)系模型,繪制菌體濃度趨勢(shì)圖確定發(fā)酵培養(yǎng)的終點(diǎn)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,步驟(1)所述的固體培養(yǎng)基組成為:葡萄糖2%-3%,多聚蛋白胨0.5%-1%,檸檬酸0.1%-0.2%,七水硫酸鎂0.03%-0.05%,硫酸銨0.5%-1%,磷酸二氫鉀0.3%-0.5%,乙酸鈉0.1%-0.2%,瓊脂粉2%-2.5%。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,步驟(2)和步驟(3)所述的液體培養(yǎng)基組成為:果糖1%-4%,玉米漿0.5%-2%,檸檬酸0.2%-0.5%,十二水磷酸氫二納0.2%-0.5%,七水硫酸鎂0.03%-0.05%,磷酸氫二銨0.4%-1%。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,步驟(2)和步驟(3)所述的液體培養(yǎng)基組成為:葡萄糖2%-3%,酵母粉0.5%-1%,檸檬酸0.115%-0.2%,十二水磷酸氫二納0.34%-0.5%,大豆蛋白胨0.5%-1%,磷酸氫二銨0.1%-0.2%。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,步驟(2)和步驟(3)所述的液體培養(yǎng)基組成為:葡萄糖2-3%,玉米漿干粉0.5%-1.5,檸檬酸0.1%-0.3%,十二水磷酸氫二納0.1%-0.3%,七水硫酸鎂0.02%-0.04%,磷酸氫二銨0.2%-0.6%。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,步驟(3)所述的氣體分布器為環(huán)管式多孔氣體分布器。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,步驟(3)所述的種子罐的體積為15L-100L。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,步驟(3)所述的裝入液體培養(yǎng)基的體積為種子罐體積的60%-70%。

9.根據(jù)權(quán)利要求1至8任意一項(xiàng)所述的方法,其特征在于,步驟(3)和步驟(4)所述在線電容檢測(cè)裝置包含工作電極、傳感器、轉(zhuǎn)換器、頻率控制元件及顯示器。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法,其特征在于,所述的工作電極為鉑電極探頭。

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