一種控制肝素鈉原料中硫酸皮膚素和硫酸軟骨素總含量的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種控制肝素鈉原料中硫酸皮膚素和硫酸軟骨素總含量的方法，其為：肝素鈉粗品經(jīng)純化水溶解后采用2次氯化鈉鹽解﹑過氧化叔丁醇氧化﹑異丙醇沉淀可以有效的去除肝素鈉原料中的硫酸皮膚素和硫酸軟骨素。本發(fā)明通過明確過氧化叔丁醇氧化劑的加入量、氧化溫度和時(shí)間，同時(shí)明確肝素鈉粗品﹑純化水和異丙醇之間的投料比去除肝素鈉粗品中的硫酸皮膚素和硫酸軟骨素。在本公司內(nèi)部成功實(shí)現(xiàn)肝素鈉原料中硫酸皮膚素和硫酸軟骨素總含量控制在0.1%以下的目標(biāo)，在硫酸皮膚素和硫酸軟骨素總含量控制上實(shí)現(xiàn)了質(zhì)的突破，該方法具有工藝路線短﹑反應(yīng)條件溫和、操作簡(jiǎn)便、成本低、效果好的優(yōu)點(diǎn)，適于肝素鈉原料工業(yè)化生產(chǎn)的方法。
【專利說明】一種控制肝素鈉原料中硫酸皮膚素和硫酸軟骨素總含量的 方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及是一種在肝素鈉原料生產(chǎn)過程中降低硫酸皮膚素 和硫酸軟骨素的方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 肝素鈉 （ifeparin Sodium)又可稱為肝素，是含有硫酸基的粘多糖類天然抗凝血物 質(zhì)，屬于不均一的多糖分子，分子量平均在1. 5萬左右，肝素鈉可加強(qiáng)抗凝血酶III (AT- III) 滅活絲氨酸蛋白酶，從而具有阻止凝血酶形成，對(duì)抗凝血酶和阻止血小板聚集等多種作用。 每毫升血液抗凝需要肝素鈉12. 5-17. 5IU。我國(guó)是全球肝素鈉粗品和肝素鈉原料藥的主要 生產(chǎn)國(guó)，也是全球最大的肝素鈉原料藥出口國(guó)，擁有美國(guó)FDA認(rèn)證或歐盟CEP認(rèn)證標(biāo)準(zhǔn)的肝 素原料藥已呈現(xiàn)供不應(yīng)求的局面。
[0003] 肝素鈉原料來源于肝素鈉粗品，含有大量雜質(zhì)蛋白、雜質(zhì)核酸、微生物等雜質(zhì)，需 經(jīng)過物理和化學(xué)提取分離過程，定向獲取天然結(jié)構(gòu)基團(tuán)完整的肝素鈉，從而制成肝素鈉原 料藥。隨著用藥安全標(biāo)準(zhǔn)的不斷提高，客戶對(duì)肝素鈉原料中硫酸皮膚素和硫酸軟骨素的雜 質(zhì)含量要求也越來越高。肝素鈉粗品經(jīng)過檢測(cè)普遍都含有較高含量的硫酸皮膚素和硫酸 軟骨素，中國(guó)藥典2010規(guī)定硫酸皮膚素的含量< 5. 0%，歐洲藥典8. 0規(guī)定硫酸皮膚素和 硫酸軟骨素總含量< 2. 0%，美國(guó)藥典最新版藥典USP35-NF30規(guī)定這2個(gè)雜質(zhì)的總含量為 < 1.0%,目前國(guó)內(nèi)的肝素鈉生產(chǎn)企業(yè)肝素鈉原料中硫酸皮膚素和硫酸軟骨素這2個(gè)雜質(zhì)的 含量基本管控在2. 0%左右。
[0004] 目前有2篇已公開的關(guān)于降低肝素鈉中硫酸皮膚素的含量的專利，分別為專利 CN103044577和CN103694373,2013年公開的專利CN103044577提到用純化水將肝素鈉粗 品溶解，然后經(jīng)過三次30%的過氧化氫氧化，三次乙醇沉淀得到低含量硫酸皮膚素的肝素 鈉。2014年公開的專利CN103694373是在專利CN103044577基礎(chǔ)上進(jìn)行升級(jí)的，此專利先 對(duì)純化水溶解后的肝素鈉粗品進(jìn)行鹽解-酶解，在這一步去掉肝素鈉粗品中90%的硫酸皮 膚素，然后同樣經(jīng)過三次乙醇沉淀，三次30%的過氧化氫氧化，然后再加入低溫丙酮進(jìn)行沉 淀，控制有機(jī)溶劑的沉淀溫度和沉淀時(shí)間，從而去除肝素鈉原料中的硫酸皮膚素的含量，專 利CN103694373報(bào)道的工藝路線過長(zhǎng)，多達(dá)十四五步，操作較繁瑣，需要反復(fù)的升溫降溫， 且去除硫酸皮膚素的效果一般，只能達(dá)到< 2. 0%，且這2篇專利只提到去除肝素鈉中的硫 酸皮膚素，而沒有涉及到怎樣去除其中的硫酸軟骨素。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是為了降低肝素鈉原料中硫酸皮膚素和硫酸軟骨素總含量的問題， 提供更優(yōu)質(zhì)的肝素鈉原料，在將肝素鈉粗品制備成肝素鈉原料的工藝過程中，采用2次氯 化鈉鹽解、過氧化叔丁醇反應(yīng)、異丙醇沉淀可以有效的去除肝素鈉原料中的硫酸皮膚素 和硫酸軟骨素。本發(fā)明通過在制備肝素鈉原料過程中明確過氧化叔丁醇氧的加入量、反應(yīng) 溫度和時(shí)間，同時(shí)明確肝素鈉粗品、純化水和異丙醇之間的投料比去除肝素鈉粗品中的硫 酸皮膚素和硫酸軟骨素，達(dá)到控制硫酸皮膚素和硫酸軟骨素總含量的目的。該方法具有工 藝路線短、反應(yīng)條件溫和、操作簡(jiǎn)便、成本低、效果好的優(yōu)點(diǎn)，適于肝素鈉原料工業(yè)化生產(chǎn)。
[0006] 本發(fā)明的目的可以通過以下措施達(dá)到： 一種控制肝素鈉原料中硫酸皮膚素和硫酸軟骨素總含量的方法，其包括如下步驟： (1) 取含有雜質(zhì)硫酸皮膚素和硫酸軟骨素的肝素鈉粗品用純化水溶解成水溶液，升溫 至55-65°C，加入氯化鈉和異丙醇，在此溫度下攪拌后降溫至15-20°C靜置或離心除去上清 液，得到第一次鹽解后的肝素鈉粗品； (2) 向第一次鹽解后的肝素鈉粗品中再次加入純化水，升溫至55-65°C，加入氯化鈉和 異丙醇，在此溫度下攪拌后降溫至15-20°C靜置或離心除去上清液，得到第二次鹽解后的肝 素鈉粗品； (3) 用純化水溶解第二次鹽解后的肝素鈉粗品，并將其升溫至75-80°C，加入過氧化叔 丁醇?xì)溲趸c水溶液，調(diào)節(jié)反應(yīng)液pH值至9. 0-11. 5,維持此溫度進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后降 溫至20-25 °C,反應(yīng)液用娃藻土過濾； (4) 收集濾液升溫至55-65°C，加入異丙醇，在此溫度攪拌后，再用超聲儀中進(jìn)行超聲， 后降溫至5-KTC，在此溫度下靜置或離心除去上清液，得到除去了硫酸皮膚素和硫酸軟骨 素的肝素鈉。
[0007] 本發(fā)明中，對(duì)肝素鈉中硫酸皮膚素和硫酸軟骨素總含量的測(cè)定方法是按照歐洲藥 典8.0中肝素鈉有關(guān)物質(zhì)法檢測(cè)。本發(fā)明中的肝素鈉粗品的抗II a效價(jià)彡90USP U/mg，其 中雜質(zhì)硫酸皮膚素和硫酸軟骨素總質(zhì)量含量在20. 0-30. 0%之間。
[0008] 在步驟（1)中，肝素鈉粗品和純化水的投料比（W/W)為1. 0 :4. 5-5. 5,優(yōu)選1. 0 : 4. 8-5. 2 〇
[0009] 在步驟（1)中，肝素鈉粗品水溶液升溫至55-65°C，優(yōu)選55-60°C，并向其中加入氯 化鈉和異丙醇，在此溫度下攪拌1-1. 5h，后降溫至15-20°c靜置或離心除去上清液，得到第 一次鹽解后的肝素鈉粗品。其中肝素鈉粗品和氯化鈉的投料比（W/W)為100 :9. 0-11. 0,加 入的異丙醇和步驟（1)中純化水的投料比（V/V)為1. 8-2. 5 :1. 0,優(yōu)選為2. 0-2. 3 :1. 0。
[0010] 在步驟（2)中，加入純化水和步驟（1)中肝素鈉粗品的投料比（W/W)為3. 0-4. 0 : 1. 0,優(yōu)選1. 0 :3. 5-3. 8 ;肝素鈉粗品水溶液同樣升溫至55-65°C，優(yōu)選55-60°C，并向其中加 入氯化鈉和異丙醇，肝素鈉粗品和氯化鈉的投料比（W/W)為100 :9. 0-11. 0,加入的異丙醇 和步驟（1)中純化水的投料比（V/V)為1. 8-2. 5 :1. 0,優(yōu)選2. 0-2. 3 :1. 0。在55-65°C下攪 拌1-1. 5h，后降溫至15-20°C靜置或離心除去上清液，得到第二次鹽解后的肝素鈉粗品。
[0011] 步驟（3)中，用來溶解第二次鹽解后的肝素鈉粗品的純化水和步驟（1)中肝素鈉 粗品的投料比（W/W)為1. 0 :3. 0-4. 0,優(yōu)選1. 0 :3. 5-3. 8,用來反應(yīng)的過氧化叔丁醇和步驟 (1)中肝素鈉粗品的投料比（W/W)為3. 0-5. 0 :100,優(yōu)選3. 0-4. 0 :100。過氧化叔丁醇?xì)溲?化鈉水溶液中過氧化叔丁醇的濃度為0. 2-0. 6kg/L,優(yōu)選0. 3-0. 52 kg/L。過氧化叔丁醇不 溶于水中，但易溶于氫氧化鈉水溶液中，故本法將過氧化叔丁醇溶在氫氧化鈉得到配制好 的過氧化叔丁醇?xì)溲趸c水溶液再加到反應(yīng)液中，用來溶解過氧化叔丁醇的氫氧化鈉水溶 液濃度為〇· 5_2mol/L，優(yōu)選lmol/L。
[0012] 步驟（3)中，本發(fā)明采用過氧化叔丁醇來進(jìn)行反應(yīng)，同時(shí)該氧化劑反應(yīng)后生成的副 產(chǎn)物在水溶液中去除簡(jiǎn)潔、有效且不產(chǎn)生額外的操作步驟。本法所得副產(chǎn)物不溶于肝素鈉 且溶于水，并且沸點(diǎn)低，在最后樣品烘干時(shí)更容易去除且不會(huì)在肝素鈉中產(chǎn)生較大的殘留。 過氧化叔丁醇不易溶于水但易溶于堿液，本法采用其在堿性水溶液中進(jìn)行反應(yīng)，不會(huì)對(duì)反 應(yīng)帶來不利的影響。
[0013] 步驟（3)中，反應(yīng)液的pH值被調(diào)節(jié)至9. 0-11. 5,優(yōu)選10. 0-11.0,用濃度為lmol/ L氫氧化鈉或lmol/L鹽酸來調(diào)節(jié)此pH值。反應(yīng)結(jié)束后反應(yīng)液被降溫至20-25°C，降溫時(shí)間 > 40min,過濾前板框安裝上濾布，用娃藻土和純化水混合涂在過濾布上，用來過濾降溫后 的反應(yīng)液。
[0014] 在步驟（4)中，本發(fā)明采用異丙醇而非乙醇進(jìn)行沉。由于過氧化叔丁醇反應(yīng)后生 成叔丁醇，叔丁醇的極性為4. 0左右，本發(fā)明需要用來去除生成的叔丁醇且易通過沉淀去 除肝素鈉中硫酸皮膚素和硫酸軟骨素的2個(gè)雜質(zhì)的溶液的極性在4. 0-4. 3間，同樣要求此 溶劑沸點(diǎn)要低，在最終肝素鈉產(chǎn)品烘干時(shí)易去除，基于上述理由我們選定了異丙醇，其極性 大于丙酮極性，理論上沉淀肝素鈉效果比丙酮好，且沸點(diǎn)為82. 45°C (正常1個(gè)大氣壓下)， 雖然其沸點(diǎn)高于乙醇，但是其和叔丁醇溶解性大于乙醇和叔丁醇溶解性，這樣更容易出除 生成的叔丁醇，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)采用本發(fā)明中的異丙醇具有更優(yōu)的效果。
[0015] 在步驟（4)中，收集硅藻土過濾后的濾液并升溫至55-65°C，緩慢向其中加入異丙 醇進(jìn)行沉淀，異丙醇和步驟（1)中所加入的純化水的投料比為（V/V)為1. 8-2. 5 :1. 0,優(yōu)選 為2. 0-2. 3 :1. 0 ;在55-65°C攪拌0. 5-1. 5h，后將此溶液放入超聲儀中超聲20-30min，然后 緩慢降溫至5-KTC，降溫時(shí)間彡lh，在5-KTC靜置或離心除去上清液，得到除去硫酸皮膚 素和硫酸軟骨素的肝素鈉，取樣測(cè)試此經(jīng)過處理后的硫酸皮膚素和硫酸軟骨素總含量。
[0016] 目前特定的肝素鈉產(chǎn)品在硫酸皮膚素和硫酸軟骨素方面具有其總含量< 0. 5%的 要求，發(fā)明人對(duì)此進(jìn)行專門的工藝研究，成功解決了這一難題，使其可達(dá)到< 〇. 1%，在硫酸 皮膚素和硫酸軟骨素總含量控制上實(shí)現(xiàn)了質(zhì)的突破。本發(fā)明是在現(xiàn)有的技術(shù)上針對(duì)肝素鈉 粗品中硫酸皮膚素和硫酸軟骨素總含量過高的問題，采取不同于現(xiàn)有的技術(shù)，另辟蹊徑采 用氯化鈉鹽解，通過2次氯化鈉鹽解得到去除肝素鈉粗品中30%左右硫酸皮膚素和硫酸軟 骨素，后用有機(jī)氧化劑進(jìn)行氧化，和異丙醇進(jìn)行沉淀，在此過程中除去大部分的硫酸皮膚素 和硫酸軟骨素，克服現(xiàn)有的肝素鈉原料中的硫酸皮膚素和硫酸軟骨素總含量超標(biāo)的問題， 實(shí)驗(yàn)證明在保證肝素鈉原料其它質(zhì)量的前提下，可以有效的去除掉肝素鈉中的硫酸皮膚素 和硫酸軟骨素，在本公司內(nèi)部成功實(shí)現(xiàn)肝素鈉原料中硫酸皮膚素和硫酸軟骨素總含量控制 在0. 1%以下的目標(biāo)，在硫酸皮膚素和硫酸軟骨素總含量控制上實(shí)現(xiàn)了質(zhì)的突破。本工藝具 有路線短、反應(yīng)條件溫和、操作簡(jiǎn)便、成本低、效果好的優(yōu)點(diǎn)，是適于肝素鈉原料工業(yè)化生 產(chǎn)的方法。

【具體實(shí)施方式】
[0017] 實(shí)施例1 : 取批號(hào)：50121128批肝素鈉粗品測(cè)試此批樣品抗II a效價(jià)為96USP U/mg，硫酸皮膚素 和硫酸軟骨素總含量為25. 6%，同時(shí)稱取此批肝素鈉粗品5kg加入到22. 5L純化水中，攪拌 使固體全部溶解，然后轉(zhuǎn)移至搪瓷玻璃罐內(nèi)并升溫至55-65°C，加入0. 45kg氯化鈉和40. 5L 異丙醇，在此溫度下攪拌1-1. 5h，后降溫至15-20°C靜置或離心除去上清液，得到第一次 鹽解后的肝素鈉粗品。再向其中加入15L純化水，再將液體升溫至55-65°C，加入0. 45kg 氯化鈉和40. 5L異丙醇，在此溫度下攪拌1-1. 5h，后降溫至15-20°C靜置或離心除去上清 液，得到第二次鹽解后的肝素鈉粗品。再加入15L純化水，再將液體升溫至75-80°C，稱取 0. 15kg過氧化叔丁醇溶在0. 75L 0. 5mol/L氫氧化鈉水溶液中，攪拌溶解后加入搪瓷玻璃 罐內(nèi)，測(cè)試此時(shí)反應(yīng)液的pH值為10. 6,在此溫度下攪拌反應(yīng)35-50min，然后通入冷凝水降 溫至20-25°C，反應(yīng)液采用硅藻土過濾，收集過濾后的濾液并升溫至55-65°C，緩慢向其中 加入40. 5L異丙醇，在此溫度攪拌lh，后并放入超聲儀中超聲20-30min，然后緩慢降溫至 5-KTC，降溫時(shí)間> lh，在5-KTC靜置或離心除去上清液，然后過濾得到除去硫酸皮膚素 和硫酸軟骨素的肝素鈉3. 54kg，取樣測(cè)試其抗II a效價(jià)為118USP U/mg，硫酸皮膚素和硫 酸軟骨素總含量為〇. 072%。
[0018] 實(shí)施例二： 取批號(hào)：50121129批肝素鈉粗品測(cè)試此批樣品抗II a效價(jià)為105USP U/mg，硫酸皮膚 素和硫酸軟骨素總含量為28. 9%，同時(shí)稱取此批肝素鈉粗品5. 2kg加入到28. 6L純化水中， 攪拌使固體全部溶解，然后轉(zhuǎn)移至搪瓷玻璃罐內(nèi)并升溫至55-65°C，加入0. 572kg氯化鈉 和71. 5L異丙醇，在此溫度下攪拌1-1. 5h，后降溫至15-20°C靜置或離心除去上清液，得到 第一次鹽解后的肝素鈉粗品。再向其中加入20. 8L純化水，再將液體升溫至55-65°C，力口 入0. 572kg氯化鈉和71. 5L異丙醇，在此溫度下攪拌1-1. 5h，后降溫至15-20°C靜置或離 心除去上清液，得到第二次鹽解后的肝素鈉粗品。再加入20. 8L純化水，再將液體升溫至 75-80°C，稱取0. 26kg過氧化叔丁醇溶在0. 5L lmol/L氫氧化鈉水溶液中，攪拌溶解后加入 搪瓷玻璃罐內(nèi)，測(cè)試此時(shí)反應(yīng)液的pH值為10. 8,在此溫度下攪拌反應(yīng)35-50min，然后通入 冷凝水降溫至20-25°C，反應(yīng)液采用硅藻土過濾，收集過濾后的濾液并升溫至55-65°C，緩 慢向其中加入71. 5L異丙醇，在此溫度攪拌lh，后放入超聲儀中超聲20-30min，然后緩慢降 溫至5-KTC，降溫時(shí)間> lh，在5-10°C靜置或離心除去上清液，然后過濾得到除去硫酸皮 膚素和硫酸軟骨素的肝素鈉3. 385kg，取樣測(cè)試其抗II a效價(jià)為134USP U/mg，硫酸皮膚素 和硫酸軟骨素總含量為〇. 082%。
[0019] 實(shí)施例三： 取批號(hào)：50121130批肝素鈉粗品測(cè)試此批樣品抗II a效價(jià)為98USP U/mg，硫酸皮膚 素和硫酸軟骨素總含量為22. 8%，同時(shí)稱取此批肝素鈉粗品4. 7kg加入到23. 5L純化水中， 攪拌使固體全部溶解，然后轉(zhuǎn)移至搪瓷玻璃罐內(nèi)并升溫至55-65°C，加入0. 47kg氯化鈉 和47L異丙醇，在此溫度下攪拌1-1. 5h，后降溫至15-20°C靜置或離心除去上清液，得到第 一次鹽解后的肝素鈉粗品。再向其中加入15. 45L純化水，再將液體升溫至55-65°C，加入 0. 47kg氯化鈉和47L異丙醇，在此溫度下攪拌1-1. 5h，后降溫至15-20°C靜置或離心除去上 清液，得到第二次鹽解后的肝素鈉粗品。再加入15. 45L純化水，再將液體升溫至75-80°C， 稱取0. 188kg過氧化叔丁醇溶在0. 313L 2mol/L氫氧化鈉水溶液中，攪拌溶解后加入搪瓷 玻璃罐內(nèi)，測(cè)試此時(shí)反應(yīng)液的pH值為10. 2,在此溫度下攪拌反應(yīng)35-50min，然后通入冷凝 水降溫至20-25°C，反應(yīng)液采用硅藻土過濾，收集過濾后的濾液并升溫至55-65°C，緩慢向 其中加入47L異丙醇，在此溫度攪拌lh，后放入超聲儀中超聲20-30min，然后緩慢降溫至 5-KTC，降溫時(shí)間> lh，在5-KTC靜置或離心除去上清液，然后過濾得到除去硫酸皮膚素 和硫酸軟骨素的肝素鈉3. 40kg，取樣測(cè)試其抗II a效價(jià)為116USP U/mg，硫酸皮膚素和硫 酸軟骨素總含量為0. 085%。
【權(quán)利要求】
1. 一種控制肝素鈉原料中硫酸皮膚素和硫酸軟骨素總含量的方法，其特征在于包括如 下步驟： (1) 取含有雜質(zhì)硫酸皮膚素和硫酸軟骨素的肝素鈉粗品用純化水溶解成水溶液，升溫 至55-65°C，加入氯化鈉和異丙醇，在此溫度下攪拌后降溫至15-20°c靜置或離心除去上清 液，得到第一次鹽解后的肝素鈉粗品； (2) 向第一次鹽解后的肝素鈉粗品中再次加入純化水，升溫至55-65°C，加入氯化鈉和 異丙醇，在此溫度下攪拌后降溫至15-20°C靜置或離心除去上清液，得到第二次鹽解后的肝 素鈉粗品； (3) 用純化水溶解第二次鹽解后的肝素鈉粗品，并將其升溫至75-80°C，加入過氧化叔 丁醇?xì)溲趸c水溶液，調(diào)節(jié)反應(yīng)液pH值至9. 0-11. 5,維持此溫度進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后降 溫至20-25°C,反應(yīng)液用娃藻土過濾； (4) 收集濾液升溫至55-65°C，加入異丙醇，在此溫度攪拌后，再用超聲儀進(jìn)行超聲，后 降溫至5-KTC，在此溫度下靜置或離心除去上清液，得到除去了硫酸皮膚素和硫酸軟骨素 的肝素鈉。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的控制肝素鈉原料中硫酸皮膚素和硫酸軟骨素總含量的方法， 其特征在于步驟（1)中，所述肝素鈉粗品的抗II a效價(jià)彡90USP U/mg，其中雜質(zhì)硫酸皮膚 素和硫酸軟骨素總質(zhì)量含量在20. 0-30. 0%之間。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的控制肝素鈉原料中硫酸皮膚素和硫酸軟骨素總含量的方 法，其特征在于在步驟（1)中，肝素鈉粗品和純化水的質(zhì)量投料比為1. 0 :4. 5-5. 5 ;該步驟 中肝素鈉粗品和氯化鈉的質(zhì)量投料比為100 :9. 0-11.0,異丙醇與純化水的體積投料比為 1. 8-2. 5 ： 1. 0 〇
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的控制肝素鈉原料中硫酸皮膚素和硫酸軟骨素總含量的方法， 其特征在于步驟（2)中，向第一次鹽解后的肝素鈉粗品中再次加入純化水，加入純化水和步 驟（1)中肝素鈉粗品的質(zhì)量投料比為1. 〇 :3. 0-4. 0 ;該步驟中肝素鈉粗品和氯化鈉的質(zhì)量 投料比為100 :9. 0-11. 0,加入的異丙醇和步驟（1)中純化水的體積投料比為1. 8-2. 5 :1. 0。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的控制肝素鈉原料中硫酸皮膚素和硫酸軟骨素總含量的方法， 其特征在于步驟（3)中，用來溶解第二次鹽解后的肝素鈉粗品的純化水和步驟（1)中肝素 鈉粗品的質(zhì)量投料比為1. 〇 :3. 0-4. 0 ;所述過氧化叔丁醇?xì)溲趸c水溶液中，過氧化叔丁 醇的濃度為〇. 2-0. 6kg/L ;氫氧化鈉的濃度為0. 5-2mol/L。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的控制肝素鈉原料中硫酸皮膚素和硫酸軟骨素總含量的方法， 其特征在于步驟（3)中，所述過氧化叔丁醇?xì)溲趸c水溶液中過氧化叔丁醇與步驟（1)中 肝素鈉粗品的質(zhì)量投料比為3. 0-5. 0 :100,氫氧化鈉的濃度為lmol/L。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的控制肝素鈉原料中硫酸皮膚素和硫酸軟骨素總含量的方法， 其特征在于步驟（3)中，被用來調(diào)節(jié)反應(yīng)液pH值的為lmol/L鹽酸或lmol/L氫氧化鈉；調(diào) 節(jié)反應(yīng)液pH值后的反應(yīng)時(shí)間為35-50min。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的控制肝素鈉原料中硫酸皮膚素和硫酸軟骨素總含量的方法， 其特征在于步驟（4)中，異丙醇和步驟（1)中所加入的純化水的體積投料比為1.8-2. 5 : 1. 0 ;該步驟中加入異丙醇后攪拌0. 5-1. 5h再超聲20-30min，然后緩慢降溫至5-10°C，降溫 時(shí)間> lh。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的控制肝素鈉原料中硫酸皮膚素和硫酸軟骨素總含量的方法， 其特征在于步驟（4)中，得到的肝素鈉中硫酸皮膚素和硫酸軟骨素的總質(zhì)量含量< 0. 1%。
【文檔編號(hào)】C08B37/10GK104193847SQ201410396942
【公開日】2014年12月10日 申請(qǐng)日期:2014年8月13日 優(yōu)先權(quán)日:2014年8月13日
【發(fā)明者】唐詠群, 黃錫偉, 段艷冰, 婁媛媛, 劉玉輝 申請(qǐng)人:南京健友生化制藥股份有限公司